本發(fā)明屬于生物醫(yī)學技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種祛疤組合物和敷料。
背景技術(shù)：
青春期留下的痘疤，給人留下不可磨滅的“青春印記”。隨著現(xiàn)代社會的進步，愛美不僅代表一種權(quán)利，也表示一種對自我的尊重，如何淡化這種令人不愉快的“青春印記”成了許多愛美人士關(guān)心的話題。
祛疤可通過藥物、激光或者手術(shù)的方式達到目的，手術(shù)激光方式存在一定的危險性，目前市場上的藥物祛疤產(chǎn)品大多采用一些含有苯環(huán)的有機大分子化工產(chǎn)品或者添加一些激素以增強祛疤效果，如公開號為CN105055235A的中國專利，采用了二甲基硅油、羥苯乙酯酸和三乙醇胺等化學物質(zhì)，不可避免的對皮膚具有一定的損傷。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種祛疤組合物和敷料，本發(fā)明中的祛疤組合物的用料對人體安全，且祛疤效果好。
本發(fā)明提供一種祛疤組合物，包括：間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液、表皮細胞生長因子、維生素C和維生素E；
所述表皮細胞生長因子的質(zhì)量濃度為10～50ng/mL，維生素C的質(zhì)量濃度為5～50mg/mL，維生素E的質(zhì)量濃度為5～50mg/mL；
所述間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液為P1～P5代的間充質(zhì)干細胞依次經(jīng)過混合培養(yǎng)基和無酚紅培養(yǎng)基培養(yǎng)后得到；
所述混合培養(yǎng)基包括DMEM/F12培養(yǎng)基和胎牛血清。
優(yōu)選的，所述表皮細胞生長因子的質(zhì)量濃度為20～40ng/mL。
優(yōu)選的，所述維生素C的質(zhì)量濃度為10～40mg/mL。
優(yōu)選的，所述維生素E的質(zhì)量濃度為10～40mg/mL。
優(yōu)選的，所述祛疤組合物的pH值為7.2～7.4。
優(yōu)選的，所述間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液按照以下步驟制得：
將P1～P5代的間充質(zhì)干細胞使用混合培養(yǎng)基培養(yǎng)，待所述間充質(zhì)干細胞處于指數(shù)生長期且匯合度達到70～90％后，去除所述混合培養(yǎng)基的上清物，得到第一培養(yǎng)物；
將得到的第一培養(yǎng)物加入無酚紅培養(yǎng)基中培養(yǎng)48～96小時，收集第二培養(yǎng)物，將第二培養(yǎng)物離心后取上清液，得到間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液。
本發(fā)明提供一種敷料，由敷料溶液依次經(jīng)3D打印和固化得到，
所述敷料溶液包括支架成分和上文所述的祛疤組合物；
所述支架成分包括I型膠原蛋白、殼多糖、糖胺聚糖、海藻糖和戊二醇。
優(yōu)選的，所述I型膠原在敷料溶液中的質(zhì)量分數(shù)為0.8～1.2％；
所述殼多糖在敷料溶液中的質(zhì)量分數(shù)為0.5～3％；
所述糖胺聚糖在敷料溶液中的質(zhì)量分數(shù)為4～6％；
所述海藻糖在敷料溶液中的質(zhì)量分數(shù)為1～5％；
所述戊二醇在敷料溶液中的質(zhì)量分數(shù)為0.1～0.6％。
優(yōu)選的，所述3D打印按照疤痕大小、形狀、薄厚以及皮膚表皮的真皮厚度進行建模打印。
優(yōu)選的，所述固化的時間為30～60min；
所述固化的溫度為0～10℃。
本發(fā)明提供一種祛疤組合物，包括間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液、表皮細胞生長因子、維生素C和維生素E；所述表皮細胞生長因子的質(zhì)量濃度為10～50ng/mL，維生素C的質(zhì)量濃度為5～50mg/mL，維生素E的質(zhì)量濃度為5～50mg/mL；所述間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液為P1～P5代的間充質(zhì)干細胞依次經(jīng)過混合培養(yǎng)基和無酚紅培養(yǎng)基培養(yǎng)后得到；所述混合培養(yǎng)基包括培養(yǎng)基DMEM/F12和胎牛血清。本發(fā)明采用間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液，獲取簡單，且免疫原性低，對人體無害，并且間充質(zhì)干細胞在培養(yǎng)過程中會分泌活性物質(zhì)到培養(yǎng)液中，配合維生素C、維生素E和表皮細胞生長因子，能夠有效抑制疤痕處色素的沉積，滋養(yǎng)肌膚，促進細胞的新陳代謝，從而達到淡化疤痕，修復皮膚創(chuàng)面的功效。
具體實施方式
本發(fā)明提供了一種祛疤組合物，包括：間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液、表皮細胞生長因子、維生素C和維生素E；
所述表皮細胞生長因子的質(zhì)量濃度為10～50ng/mL，維生素C的質(zhì)量濃度為5～50mg/mL，維生素E的質(zhì)量濃度為5～50mg/mL；
所述間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液為P1～P5代的間充質(zhì)干細胞依次經(jīng)過混合培養(yǎng)基和無酚紅培養(yǎng)基培養(yǎng)后得到；
所述混合培養(yǎng)基包括DMEMF12培養(yǎng)基和胎牛血清。
在本發(fā)明中，所述間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液為將間充質(zhì)干細胞在培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的到的培養(yǎng)液，在本發(fā)明中，所述間充質(zhì)干細胞可以來自脂肪、臍帶、臍血、牙髓或羊膜等，在間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)過程中，間充質(zhì)干細胞會分泌活性物質(zhì)到培養(yǎng)液中，如血管內(nèi)皮生長因子(vEGF)、胎盤生長因子(PGF)、成纖維細胞生長因子(FGFs)、血小板源生長因子(PDGF)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)、肝細胞生長因子(HGF)等在內(nèi)的各種生長因子，這些活性物質(zhì)對淡化疤痕，皮膚的創(chuàng)面修復有著很好的功效。
在本發(fā)明中，所述間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液優(yōu)選按照以下步驟制備得到：
將P1～P5代的間充質(zhì)干細胞使用混合培養(yǎng)基培養(yǎng)，待所述間充質(zhì)干細胞處于指數(shù)生長期且匯合度達到70～90％后，去除所述混合培養(yǎng)基的上清，得到第一培養(yǎng)物；
將得到的第一培養(yǎng)物加入無酚紅培養(yǎng)基中培養(yǎng)48～96小時，收集第二培養(yǎng)物，將第二培養(yǎng)物離心后取上清，得到間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液。
本發(fā)明優(yōu)選采用P1～P5代的間充質(zhì)干細胞，具體的，P1、P2、P3、P4和P5代的間充質(zhì)干細胞均可；所述混合培養(yǎng)基優(yōu)選包括DMEMF12培養(yǎng)基和胎牛血清(FBS)，更優(yōu)選為DMEM/F12培養(yǎng)基和10％FBS的混合物；本發(fā)明對所述混合培養(yǎng)基的用量沒有特殊的限制。所述無酚紅培養(yǎng)基優(yōu)選采用無酚紅培養(yǎng)基1640，所述無酚紅培養(yǎng)基的用量優(yōu)選為0.1～0.2mL/cm2，更優(yōu)選為0.15～0.18mL/cm2；所述細胞在無酚紅培養(yǎng)基中的培養(yǎng)時間優(yōu)選為48～96小時，更優(yōu)選為55～85小時，最優(yōu)選為60～72小時；所述培養(yǎng)液的離心力優(yōu)選為200～400g，更優(yōu)選為250～350g，最優(yōu)選為300～320g；所述培養(yǎng)液的離心時間優(yōu)選為5～10min，更優(yōu)選為6～9min，最優(yōu)選為7～8min；離心后取得的培養(yǎng)液上清，優(yōu)選過0.22μm的濾膜，得到間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液。具體的，在本發(fā)明的實施例中，可采用GIBCO提供的11835030型號的無酚紅1640；GIBCO提供的11320033型號的DMEM/F12；GIBCO提供的10099141型號的胎牛血清。
在本發(fā)明中，所述表皮細胞生長因子(EGF)在所述祛疤組合物中的質(zhì)量濃度為10～50ng/mL，優(yōu)選為15～45ng/mL，更優(yōu)選為20～40ng/mL，具體的，在本發(fā)明的實施例中，可以是10ng/mL，30ng/mL或50ng/mL。本發(fā)明對所述表皮細胞生長因子的來源沒有特殊的限制，在本發(fā)明的實施例中，可采用成都澤光生物科技有限公司提供的ZG-DGFYL-7-09型號的表皮細胞生長因子。
在本發(fā)明中，所述維生素C在所述祛疤組合物中的質(zhì)量濃度為5～50mg/mL，優(yōu)選為10～45mg/mL，更優(yōu)選為15～40mg/mL，具體的，在本發(fā)明的實施例中，可以是5mg/mL，20mg/mL，或50mg/mL。本發(fā)明對所述維生素C的來源沒有特殊的限制，具體的，在本發(fā)明的實施例中，可采用SIGMA試劑公司提供的A5960型號的維生素C。
在本發(fā)明中，所述維生素E在所述祛疤組合物中的質(zhì)量濃度為5～50mg/mL，優(yōu)選為10～45mg/mL，更優(yōu)選為15～40mg/mL，具體的，在本發(fā)明的實施例中，可以是5mg/mL，20mg/mL，或50mg/mL。本發(fā)明對所述維生素E的來源沒有特殊的限制，具體的，在本發(fā)明的實施例中，可采用SIGMA試劑公司提供的T3634型號的維生素E。
本發(fā)明同時添加維生素C、維生素E和EGF，抑制減少疤痕處色素的沉淀，滋養(yǎng)肌膚，促進細胞增殖代謝。
在本發(fā)明中，所述祛疤組合物的pH值優(yōu)選為7.2～7.4。
本發(fā)明還提供了一種敷料，由敷料溶液依次經(jīng)3D打印和固化得到，
所述敷料溶液包括支架成分和上文所述的祛疤組合物；
所述支架成分包括I型膠原蛋白、殼多糖、糖胺聚糖、海藻糖和戊二醇。
在本發(fā)明中，所述祛疤組合物中各組分在所述敷料溶液中的含量與上文中祛疤組合物中各組分在祛疤組合物中的含量一致，如，EGF在祛疤組合物中的質(zhì)量濃度為10～50ng/mL，EGF在敷料溶液中的質(zhì)量濃度也是10～50ng/mL。
在本發(fā)明中，所述支架成分用于在固化形成敷料時賦予敷料一定的形狀，所述I型膠原蛋白在所述敷料溶液中的質(zhì)量分數(shù)優(yōu)選為0.8～1.2％，具體的，在本發(fā)明的實施例中，可以是0.8％、1％或1.2％；所述殼多糖在敷料溶液中的質(zhì)量分數(shù)為1～3％，更優(yōu)選為1.5～2％，具體的，在本發(fā)明的實施例中，可以是1％或2％；所述碳胺聚糖在所述敷料溶液中的質(zhì)量分數(shù)優(yōu)選為4～6％，更優(yōu)選為5％；所述糖胺聚糖優(yōu)選為6-硫酸軟骨素(10～40wt％)、透明質(zhì)酸(20～80wt％)和肝素復合物(10～40wt％)的混合物；所述海藻糖在所述敷料溶液中的質(zhì)量分數(shù)優(yōu)選為1～5％，更優(yōu)選為2～4％，具體的，在本發(fā)明的實施例中，可以是1％或3％；所述戊二醇在所述敷料溶液中的質(zhì)量分數(shù)優(yōu)選為0.1～0.6％，更優(yōu)選為0.2～0.5％，具體的，可以是0.3％或0.6％。本發(fā)明對所述I型膠原蛋白、殼多糖、糖胺聚糖、海藻糖和戊二醇的來源沒有特殊的限制。具體的，在本發(fā)明的實施例中，可采用河南正興食品添加劑有限公司提供的16032210型號的6-硫酸軟骨素；西安澤邦生物科技有限公司提供的XAZB-003型號的透明質(zhì)酸；SIGMA試劑公司提供的H3149型號的肝素復合物；西安雙德生物技術(shù)有限公司提供的1398641型號的殼多糖；SIGMA試劑公司提供的C9879型號的I型膠原蛋白；日本林源牌的6138234型號的海藻糖；臺灣艾比克(THB)提供的331045型號的戊二醇。
本發(fā)明優(yōu)選采用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所述敷料溶液的pH值，將其調(diào)至7.2～7.4，優(yōu)選為7.3，所述氫氧化鈉溶液的摩爾濃度優(yōu)選為0.5～2mol/L，更優(yōu)選為1mol/L。
本發(fā)明優(yōu)選采用3D打印機內(nèi)置的激光器對患者疤痕表面進行掃描，獲得傷口的大小、形狀、薄厚以及患者正常皮膚的表皮真皮厚度等數(shù)據(jù)，然后利用PlyEdit軟件對掃描后的圖像進行消除數(shù)字噪音等處理并對其進行編輯，使之產(chǎn)生一個連續(xù)的表面圖像；利用Studio4.0軟件將圖像轉(zhuǎn)化為立體光刻(.STL)文件并導入至Solid Works軟件，使掃描后的潰瘍表面圖像轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€虛擬立體圖像(或模塊)，用于打印出對應的敷料。
本發(fā)明利用已經(jīng)建好的3D敷料模塊，將上文中的敷料溶液噴涂在基材上，打印的層數(shù)和具體的量根據(jù)不同的患者、患者的不同部位而變化，打印完成后使之在室溫下凝固30～60min，優(yōu)選為40～50min，形成敷料。
在本發(fā)明中，所述3D打印的方法為3D打印技術(shù)的常規(guī)方法，本發(fā)明對所述3D打印機的型號沒有特殊的限制。
待凝固，將所述輔料從基材上剝離下來，即可直接作用于患者的疤痕處。
本發(fā)明采用3D打印和干細胞技術(shù)相結(jié)合的方式，打印3D敷料，所取得的敷料是根據(jù)不同的患者、患者的不同部位以及疤痕大小專門設計，具有個性化優(yōu)點，減少免疫排斥反應，提高組織相容性。
本發(fā)明提供一種祛疤組合物，包括：間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液、表皮細胞生長因子、維生素C和維生素E；所述表皮細胞生長因子的質(zhì)量濃度為10～50ng/mL，維生素C的質(zhì)量濃度為5～50mg/mL，維生素E的質(zhì)量濃度為5～50mg/mL；所述間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)液為P1～P5代的間充質(zhì)干細胞依次經(jīng)過混合培養(yǎng)基和無酚紅培養(yǎng)基培養(yǎng)后得到；所述混合培養(yǎng)基包括培養(yǎng)基DMEMF12和胎牛血清。
相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明中的敷料具有以下優(yōu)點：
(1)本發(fā)明選用間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基，細胞采集簡單，容易獲得、免疫原性低，無倫理問題。
(2)本發(fā)明采用3D打印和干細胞技術(shù)相結(jié)合的方式，打印3D敷料，所取得的敷料是根據(jù)不同的患者、患者的不同部位以及疤痕大小專門設計，具有個性化優(yōu)點，減少免疫排斥反應，提高組織相容性。
(3)本發(fā)明同時添加維生素C、維生素E和EGF，抑制減少疤痕處色素的沉淀，滋養(yǎng)肌膚，促進細胞增殖代謝。
為了進一步說明本發(fā)明，以下結(jié)合實施例對本發(fā)明提供的一種祛疤組合物和輔料進行詳細描述，但不能將其理解為對本發(fā)明保護范圍的限定。
在以下實施例中，所述臍帶間充質(zhì)干細胞來自廣州賽萊拉干細胞科技股份有限公司的人類干細胞庫。
采用GIBCO提供的11835030型號的無酚紅1640；GIBCO提供的11320033型號的DMEM/F12；GIBCO提供的10099141型號的胎牛血清；
SIGMA試劑公司提供的A5960型號的維生素C；SIGMA試劑公司提供的T3634型號的維生素E；
采用河南正興食品添加劑有限公司提供的16032210型號的6-硫酸軟骨素；西安澤邦生物科技有限公司提供的XAZB-003型號的透明質(zhì)酸；SIGMA試劑公司提供的H3149型號的肝素復合物；西安雙德生物技術(shù)有限公司提供的1398641型號的殼多糖；SIGMA試劑公司提供的C9879型號的I型膠原蛋白；日本林源牌的6138234型號的海藻糖；臺灣艾比克(THB)提供的331045型號的戊二醇。
實施例1
1.干細胞條件培養(yǎng)基的收集
取P3代的臍帶間充質(zhì)干細胞，使用DMEMF12+10％FBS培養(yǎng)，當細胞處于指數(shù)生長期，匯合度達到80％，去培養(yǎng)上清，用PBS洗兩遍后，加入0.15mL/cm2的無酚紅1640靜置培養(yǎng)72h后，收集條件培養(yǎng)基，收集到的條件培養(yǎng)基300g離心5min，取上清，過0.22μm濾膜，所得即為干細胞條件培養(yǎng)基，備用。
2.3D建模
利用3D打印機內(nèi)置的激光器對患者疤痕表面進行掃描，獲得傷口的大小、形狀、薄厚以及患者正常皮膚的表皮真皮厚度等數(shù)據(jù)，然后利用PlyEdit軟件對掃描后的圖像進行消除數(shù)字噪音等處理并對其進行編輯，使之產(chǎn)生一個連續(xù)的表面圖像；利用Studio4.0軟件將圖像轉(zhuǎn)化為立體光刻(.STL)文件并導入至Solid Works軟件，使掃描后的潰瘍表面圖像轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€虛擬立體圖像(或模塊)，可以用來直接打印出對應的敷料。
3.敷料成分的處理
在冰浴條件下先后加入上述間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基、EGF(30ng/mL)、維生素C(20mg/mL)、維生素E(20mg/mL)、I型膠原1.0％、殼多糖2％、糖胺聚糖5％(6-硫酸軟骨素、透明質(zhì)酸、肝素復合物)、海藻糖3％及戊二醇0.3％，每一步充分攪拌混勻，并用1mol/L氫氧化鈉調(diào)pH值至7.3，形成敷料溶液。
4.3D打印敷料
利用已經(jīng)建好的3D敷料模塊，將敷料溶液噴涂在基材上，進行打印，打印完成后使至凝固50min，形成個性化3D敷料。
5.打印后處理
待凝固后，敷料從基材上剝離下來后直接用于患者疤痕處。
一、體外評價
取實施例1所制作的3D敷料作體外評價
力學性能評價
利用鑷子夾，觀察3D敷料是否破碎，以此來判斷敷料的彈性和韌性；并且觀察剛打印的敷料的形狀、厚度、彈性。
結(jié)果顯示：
3D敷料低溫下呈液態(tài)，流動性良好；打印成3D敷料后靜置60min后成膠，膠狀的3D敷料機械強度良好，可用手術(shù)鉗夾取。
體外降解性評價
稱取2mg實施例1中的支架材料置于盛有1.9mL Tris-CaCl2緩沖液(pH7.6)的試管中，并加入新配置的2mL(100U)膠原酶溶液，置于37℃溫育，定時觀察，每次三個平行實驗，記下樣品完全澄清的時間，取平均值。
結(jié)果顯示：
本支架材料采用戊二醇交聯(lián)，戊二醇的用量不同，其體外降解時間也不同，可控制在比較寬的范圍，可滿足各類人群對支架材料降解速率的不同要求。隨著戊二醇用量的增加，其體外降解時間也隨之延長。結(jié)果見表1。
表1本發(fā)明實施例1中敷料的體外降解時間
二、3D打印敷料淡化疤痕效果測試
招募存在痘疤的志愿者40人，隨機分為兩組：每組20人。對照組使用祛疤常用的蘆薈凝膠(廣州賽萊拉生物科技有限公司的天然原汁蘆薈膠)，根據(jù)其潰瘍表面按照實施例1的配方打印出3D敷料，并貼于其疤痕表面。每天夜間敷藥6小時，連續(xù)1個月，觀察對照組和實驗組疤痕的淡化情況。連續(xù)使用期間，兩組均未發(fā)現(xiàn)痘疤情況加重，感染以及其他的不良事件發(fā)生。效果可分為治愈：痘疤消失；顯效：痘疤位置平整膚色自然；有效：痘疤肉眼可辨減輕；無效：與使用前無明顯區(qū)別；結(jié)果參見表2。
表2本發(fā)明實施例1輔料的祛疤效果
由表中可以看出，實驗組的總有效率和治愈率均顯著高于對照組(P<0.05)，具有統(tǒng)計學意義。
實施例2
1.干細胞條件培養(yǎng)基的收集
取P3代的臍帶間充質(zhì)干細胞，使用DMEMF12+10％FBS培養(yǎng)，當細胞處于指數(shù)生長期，匯合度達到90％，去培養(yǎng)上清，用PBS洗兩遍后，加入0.1mL/cm2的無酚紅1640靜置培養(yǎng)72h后，收集條件培養(yǎng)基,收集到的條件培養(yǎng)基200g離心5min，取上清，過0.22μm濾膜，所得即為干細胞條件培養(yǎng)基，備用。
2.3D建模
利用3D打印機內(nèi)置的激光器對患者疤痕表面進行掃描，獲得傷口的大小、形狀、薄厚以及患者正常皮膚的表皮真皮厚度等數(shù)據(jù)，然后利用PlyEdit軟件對掃描后的圖像進行消除數(shù)字噪音等處理并對其進行編輯，使之產(chǎn)生一個連續(xù)的表面圖像；利用Studio4.0軟件將圖像轉(zhuǎn)化為立體光刻(.STL)文件并導入至Solid Works軟件，使掃描后的潰瘍表面圖像轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€虛擬立體圖像(或模塊)，可以用來直接打印出對應的敷料。
3.敷料成分的處理
在冰浴條件下先后加入間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基、EGF(10ng/mL)、維生素C(50mg/mL)、維生素E(5mg/mL)、I型膠原0.8％、殼多糖1％、糖胺聚糖6％(6-硫酸軟骨素、透明質(zhì)酸、肝素復合物)、海藻糖1％及戊二醇0.6％，每一步充分攪拌混勻，并用1mol/L氫氧化鈉調(diào)pH值至7.2，形成敷料溶液。
4.3D打印敷料
利用已經(jīng)建好的3D敷料磨具，將敷料溶液噴涂在基材上，進行打印，打印完成后使至凝固60min，形成個性化3D敷料。
5.打印后處理
待凝固后，敷料從基材上剝離下來后直接用于患者疤痕處。
按照實施例1中的淡化疤痕效果的測試方法，招募的6個患者連續(xù)使用一月后，4人顯效，使用部位痘印顏色變淡與周圍膚色相近，皮膚平整。1人有效，肉眼可見痘印減輕，1人沒明顯改善，但也沒有痘印加重或感染等不良情況出現(xiàn)。
實施例3
1.干細胞條件培養(yǎng)基的收集
取P3代的臍帶間充質(zhì)干細胞，使用DMEMF12+10％FBS培養(yǎng)，當細胞處于指數(shù)生長期，匯合度達到80％，去培養(yǎng)上清，用PBS洗兩遍后，加入0.2mL/cm2的無酚紅1640靜置培養(yǎng)72h后，收集條件培養(yǎng)基,收集到的條件培養(yǎng)基400g離心5min,取上清，過0.22μm濾膜，所得即為干細胞條件培養(yǎng)基，備用。
2.3D建模
利用3D打印機內(nèi)置的激光器對患者疤痕表面進行掃描，獲得傷口的大小、形狀、薄厚以及患者正常皮膚的表皮真皮厚度等數(shù)據(jù)，然后利用PlyEdit軟件對掃描后的圖像進行消除數(shù)字噪音等處理并對其進行編輯，使之產(chǎn)生一個連續(xù)的表面圖像；利用Studio4.0軟件將圖像轉(zhuǎn)化為立體光刻(.STL)文件并導入至Solid Works軟件，使掃描后的潰瘍表面圖像轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€虛擬立體圖像(或模塊)，可以用來直接打印出對應的敷料。
3.敷料成分的處理
在冰浴條件下先后加入間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基、EGF(50ng/mL)、維生素C(5mg/mL)、維生素E(50mg/mL)、I型膠原1.2％、殼多糖1％、糖胺聚糖6％(6-硫酸軟骨素、透明質(zhì)酸、肝素復合物)、海藻糖1％及戊二醇0.6％，每一步充分攪拌混勻，并用1mol/L氫氧化鈉調(diào)pH值至7.4，形成敷料溶液。
4.3D打印敷料
利用已經(jīng)建好的3D敷料模塊，將敷料溶液噴涂在基材上，進行打印，打印完成后使至凝固50min，形成個性化3D敷料。
5.打印后處理
待凝固后，敷料從基材上剝離下來后直接用于患者疤痕處。
按照實施例1中的淡化疤痕效果的測試方法，招募的6個患者連續(xù)使用一月后，1人痘印完全消失，3人顯效，使用部位痘印顏色變淡與周圍膚色相近，皮膚平整，2人有效，肉眼可見痘印減輕。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。