一種緩釋抗菌敷料的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)用敷料領(lǐng)域，公開(kāi)了一種緩釋抗菌敷料的制備方法，將季鏻鹽負(fù)載到細(xì)菌纖維素上，季銨鹽殼聚糖和海藻酸鹽復(fù)合交聯(lián)將負(fù)載季鏻鹽的細(xì)菌纖維素和功能性輔料進(jìn)行包埋，制得的緩釋抗菌敷料具有雙重緩釋抗菌作用，能夠持久殺菌、抑菌，具有保濕、透氣、吸收傷口滲出液、快速止血、促進(jìn)傷口愈合等等多重功效。
【專利說(shuō)明】
-種緩釋抗菌敷料的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明設(shè)及醫(yī)用敷料領(lǐng)域，具體設(shè)及一種緩釋抗菌敷料的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 傳統(tǒng)敷料給藥效率較低，需頻繁更換，且對(duì)皮膚有一定刺激性。近年來(lái)大量關(guān)于藥 物緩釋基礎(chǔ)研究和臨床治療驗(yàn)證了緩釋材料在藥物釋放應(yīng)用方面的優(yōu)越性能。為了提高治 療效果，減少不良反應(yīng)和更換次數(shù)，滿足高效、長(zhǎng)效、毒副作用低等要求，可采用緩釋敷料。 緩釋敷料是將藥物活性分子與高分子載體結(jié)合(或復(fù)合、包囊)后，投施到生物活性體內(nèi)通 過(guò)擴(kuò)散、滲透等控制方式，藥物活性分子再W適當(dāng)?shù)臐舛群统掷m(xù)時(shí)間釋放出來(lái)，從而達(dá)到充 分發(fā)揮藥物療效的目的。緩釋敷料的特點(diǎn)是通過(guò)對(duì)藥物醫(yī)療劑量的有效控制，能夠降低藥 物的毒副作用，減少抗藥性，提高藥物的穩(wěn)定性和有效利用率。還可W實(shí)現(xiàn)藥物的祀向輸 送，減更換次數(shù)，減輕患者的痛苦，并能節(jié)省人力、物力和財(cái)力等。
[0003] 目前常用于藥物輔料領(lǐng)域的天然高分子材料有淀粉、明膠、殼聚糖、纖維素酸等， 它們的作用機(jī)理和使用方法不盡相同，釋放效果也有差別。淀粉廣泛應(yīng)用與片劑藥物中，起 著黏合劑、崩解劑和填充劑的作用，在藥物釋放過(guò)程中結(jié)合水分而增強(qiáng)藥物的穩(wěn)定性，W及 在緩釋制劑中起到控制藥物釋放速率的作用，但由于其吸濕團(tuán)聚，流動(dòng)性差等缺點(diǎn)，使其應(yīng) 用具有局限性。明膠通過(guò)交聯(lián)反應(yīng)形成緩釋層，可W更好地控制藥物的釋放行為從而被廣 泛應(yīng)用，但其作為小分子藥物載體時(shí)緩釋性能較差。殼聚糖是存在于甲殼綱動(dòng)物、真菌和植 物的細(xì)胞壁中的一種天然高分子材料，有良好的生物相容性，但單純由殼聚糖作為藥物輔 料在藥物控釋方面效果并不理想。因此，開(kāi)發(fā)功能多樣，性能優(yōu)越的緩釋敷料是目前醫(yī)用敷 料研究領(lǐng)域的一大熱點(diǎn)。
[0004] 細(xì)菌纖維素與植物纖維素結(jié)構(gòu)相似，都是由葡萄糖we-i，4糖巧鍵連接而成的高 分子化合物，是一種天然有機(jī)高分子。細(xì)菌纖維素具有多孔超精細(xì)的納米Ξ維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，具 有較高的生物相容性和生物可降解性，且吸水性、持水率和抗拉強(qiáng)度高。細(xì)菌纖維素的納米 級(jí)介孔可作為"模板"使用，該模板具有高的生物適應(yīng)性和良好的生物可降解性，W及模板 合成時(shí)性能和結(jié)構(gòu)的可調(diào)控性，將其它高分子、有機(jī)或無(wú)機(jī)分子W該模板為基體進(jìn)行復(fù)合， 可得到具有優(yōu)異性能的新型功能材料。
[0005] 季錠鹽殼聚糖是殼聚糖季錠化的產(chǎn)物，正電性比殼聚糖強(qiáng)，抗菌性能比殼聚糖高。 但面對(duì)較為嚴(yán)重的感染，一般的季錠鹽殼聚糖療效欠理想，同時(shí)季錠鹽類抗菌劑正面臨著 越來(lái)越多的細(xì)菌耐藥性問(wèn)題。因此，有必要添加其他類型抗菌劑增強(qiáng)季錠鹽殼聚糖整體抗 菌效果W應(yīng)對(duì)較為嚴(yán)重的感染。
[0006] 季鱗鹽是一類與季錠鹽結(jié)構(gòu)相似，而抗菌效果更佳的抗菌劑。季鱗鹽具有高效、廣 譜、殺菌作用，但季鱗鹽作為一種有機(jī)小分子抗菌劑，應(yīng)用過(guò)程中最大的不足是抗菌持續(xù)時(shí) 間短。本發(fā)明采用細(xì)菌纖維素作為緩釋敷料的基體材料，首先利用化學(xué)負(fù)載的方式將季鱗 鹽小分子抗菌劑負(fù)載到細(xì)菌纖維素上，利用細(xì)菌纖維素的Ξ維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，對(duì)季鱗鹽的 釋放起到緩釋作用；同時(shí)，結(jié)合季錠鹽殼聚糖與海藻酸鹽交聯(lián)，將負(fù)載季鱗鹽的細(xì)菌纖維素 進(jìn)行包埋，為季鱗鹽的緩釋提供雙重緩釋載體，制備得到的緩釋抗菌敷料具有雙重緩釋抗 菌作用，克服了純季鱗鹽抗菌時(shí)效短的缺陷。制備的緩釋抗菌敷料不僅具有緩慢釋放抗菌 劑、殺菌、保濕、透氣、吸收傷口滲出液等多重功效，還具有快速止血，促進(jìn)傷口愈合等效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供一種緩釋抗菌敷料的制備方法。 本發(fā)明制備過(guò)程簡(jiǎn)單易行、操作方便，利用化學(xué)負(fù)載的方式將季鱗鹽小分子抗菌劑負(fù)載到 細(xì)菌纖維素上，利用細(xì)菌纖維素的Ξ維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，對(duì)季鱗鹽的釋放起到緩釋作用；同 時(shí)，結(jié)合季錠鹽殼聚糖與海藻酸鹽交聯(lián)，將負(fù)載季鱗鹽的細(xì)菌纖維素進(jìn)行包埋，為季鱗鹽的 緩釋提供雙重緩釋載體，制備得到的緩釋抗菌敷料具有雙重緩釋抗菌作用，克服了純季鱗 鹽抗菌時(shí)效短的缺陷。制備的緩釋抗菌敷料同時(shí)具有緩慢釋放抗菌劑，具有持久殺菌、抑菌 性，保濕、透氣、吸收傷口滲出液、快速止血、促進(jìn)傷口愈合等等多重功效。
[0008] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下： 一種緩釋抗菌敷料的制備方法，所述制備方法具體步驟如下： (1) 季鱗鹽/細(xì)菌纖維素的制備:將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，經(jīng)過(guò)處理的 細(xì)菌纖維素溶于異丙醇溶液中，加入季鱗鹽溶液，攬拌，冷卻、洗涂、烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌 纖維素； (2) 混合液A的制備:將季錠鹽殼聚糖溶于蒸饋水中，攬拌均勻，配制成季錠鹽殼聚糖溶 液，再加入氯化巧，然后加入步驟（1)制備的季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖維素 均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (3) 混合液B的制備:將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻， 形成混合液B; (4) 混合液C的制備:將步驟(2 )制備的混合液A加入到步驟(3 )制備的混合液B中，并攬 拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲處理，超聲時(shí)間為2~4h，得到混合液C; 巧)緩釋抗菌敷料的制備:將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，再轉(zhuǎn)入冷凍 干燥機(jī)中，冷凍干燥4她，取出分切、包裝、滅菌，得到緩釋抗菌敷料。
[0009] 進(jìn)一步的，所述的步驟(1)中低溫等離子體處理的具體步驟為:在空氣氣氛中進(jìn)行 等離子體處理，等離子體的電壓為140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為lmin-2min。
[0010] 更進(jìn)一步的，所述的步驟（1)中異丙醇溶液的重量百分比為60wt%~80wt%，季鱗鹽 溶液的重量百分比為5.Owt%~8. Owt%，攬拌溫度為40~50°C，攬拌時(shí)間為8~12h，烘干溫度 為 70°C。
[0011] 優(yōu)選的，所述的步驟(1)中細(xì)菌纖維素與季鱗鹽的質(zhì)量比為4:1。
[001^ 優(yōu)選的，所述的步驟(2)中季錠鹽殼聚糖溶液的重量百分比為2.Owt%~4.Owt%，季 錠鹽殼聚糖與氯化巧的質(zhì)量比為10:1，季錠鹽殼聚糖與季鱗鹽/細(xì)菌纖維素的質(zhì)量比為4:1 ~6:1。
[0013]更進(jìn)一步的，所述步驟(3)制備的混合液B按的重量份數(shù)計(jì)，由如下構(gòu)成： 海藻酸鋼 2~4份， 甘油 1~2份， 生長(zhǎng)因子 0.05~0.1份， 透明質(zhì)酸 0.05~0.1份， 蒸饋水 20~40份。
[0014] 優(yōu)選的，所述的生長(zhǎng)因子由表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、血管細(xì)胞生長(zhǎng)因子、成纖細(xì)胞生長(zhǎng) 因子和血小板源性生長(zhǎng)因子中的至少一種組成。
[0015] 優(yōu)選的，所述步驟(4)中混合液A與混合液B按照體積比為1:1進(jìn)行混合。
[0016] 優(yōu)選的，所述步驟巧）中冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80 Γ。
[0017] 優(yōu)選的，所述的季鱗鹽為十二烷基Ξ苯基氯化鱗、十二烷基Ξ苯基漠化鱗、十四燒 基Ξ苯基氯化鱗、十四烷基Ξ苯基漠化鱗、十六烷基Ξ苯基氯化鱗、十六烷基Ξ苯基漠化鱗 中的一種。
[001引本發(fā)明的有益效果為： (1)本發(fā)明采用低溫等離子體處理細(xì)菌纖維素，活化細(xì)菌纖維素的表面，提高其反應(yīng)活 性。在低溫等離子體電場(chǎng)中，細(xì)菌纖維素表面產(chǎn)生活性基團(tuán)并在空氣中發(fā)生氧化，生成- co-、-o此0-等基團(tuán)，進(jìn)而引發(fā)季鱗鹽與細(xì)菌纖維素進(jìn)行化學(xué)接枝反應(yīng)。低溫等離子體技術(shù) 操作簡(jiǎn)單，不需使用引發(fā)劑，且不影響細(xì)菌纖維素本體的性能。
[0019] (2)本發(fā)明將長(zhǎng)碳鏈的季鱗鹽小分子抗菌劑負(fù)載到細(xì)菌纖維素上，充分利用細(xì)菌 纖維素的Ξ維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，對(duì)負(fù)載到細(xì)菌纖維素上的季鱗鹽起到緩慢釋放的作用；同時(shí)， 結(jié)合季錠鹽殼聚糖與海藻酸鹽交聯(lián)，將負(fù)載季鱗鹽的細(xì)菌纖維素進(jìn)行包埋，為季鱗鹽的緩 釋提供雙重緩釋載體，制備得到的敷料具有雙重緩釋抗菌作用，克服了純季鱗鹽抗菌時(shí)效 短的缺陷，使得季鱗鹽被緩慢釋放，具有持久抗菌、殺菌功效。
[0020] (3)本發(fā)明在制備緩釋抗菌敷料過(guò)程中，季錠鹽殼聚糖與海藻酸鹽發(fā)生交聯(lián)，同時(shí) 包埋了甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸等功能性輔料，運(yùn)些功能性輔料與季鱗鹽抗菌劑協(xié)同作 用，可促進(jìn)傷口愈合，使傷口保持濕潤(rùn)、無(wú)菌環(huán)境，加速傷口粘合，促進(jìn)肉芽形成，縮短傷口 愈合周期，并有效減少瘤痕的產(chǎn)生。
[0021 ] (4)本發(fā)明制備的緩釋抗菌敷料還含有止血物氯化巧，可凝結(jié)傷口血液，達(dá)到快速 止血的效果。同時(shí)，在制備方法中氯化巧利用混合時(shí)形成的乳化環(huán)境，增強(qiáng)季錠鹽殼聚糖與 海藻酸鹽交聯(lián)反應(yīng)的效果，促使發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，達(dá)到同時(shí)包埋季鱗鹽/細(xì)菌纖維素和其他功 能性輔料的效果。
【附圖說(shuō)明】
[0022] 圖1為實(shí)施例8中實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組^5在不同接觸時(shí)間對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌率 檢測(cè)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的說(shuō)明。
[0024] 實(shí)施例1 一種緩釋抗菌敷料的制備方法，所述制備方法具體步驟如下： (1)將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，在空氣氣氛中進(jìn)行等離子體處理，等離子 體的電壓為140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為Imin;稱取2g經(jīng)低溫等離子體處理的 細(xì)菌纖維素溶于lOOmL重量百分比為60wt%的異丙醇溶液中，加入lOg重量百分比為5.0wt% 的十二烷基Ξ苯基氯化鱗溶液，40°C攬拌12h，然后冷卻，先用丙酬洗涂，最后用蒸饋水反復(fù) 洗涂，7(TC條件下烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌纖維素； (2) 稱取2g季錠鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽殼聚糖溶液，再加入0.2g 氯化巧，攬拌均勻，然后加入步驟（1)制備的〇.5g季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖 維素均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (3) 將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配 制的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼2份，甘油1份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，透明質(zhì)酸 0.05份，蒸饋水20份構(gòu)成； (4) 將步驟(2)制備的混合液A加入到步驟(3)制備的混合液B中，按照混合液A與混合液 B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲時(shí)間為化，得到混合液C; 巧)將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入 冷凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、包裝、滅菌，得到緩釋 抗菌敷料。
[0025]實(shí)施例2 一種緩釋抗菌敷料的制備方法，所述制備方法具體步驟如下： (1) 將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，在空氣氣氛中進(jìn)行等離子體處理，等離子 體的電壓為140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為Imin;稱取2g經(jīng)低溫等離子體處理的 細(xì)菌纖維素溶于lOOmL重量百分比為60wt%的異丙醇溶液中，加入lOg重量百分比為5.0wt% 的十二烷基Ξ苯基氯化鱗溶液，40°C攬拌12h，然后冷卻，先用丙酬洗涂，最后用蒸饋水反復(fù) 洗涂，7(TC條件下烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌纖維素； (2) 稱取2g季錠鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽殼聚糖溶液，再加入0.2g 氯化巧，攬拌均勻，然后加入步驟（1)制備的〇.5g季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖 維素均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (3) 將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配 制的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼2份，甘油1份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，成纖細(xì)胞 生長(zhǎng)因子0.05份，透明質(zhì)酸0.05份，蒸饋水20份構(gòu)成； (4) 將步驟(2)制備的混合液A加入到步驟(3)制備的混合液B中，按照混合液A與混合液 B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲時(shí)間為化，得到混合液C; 巧)將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入 冷凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、包裝、滅菌，得到緩釋 抗菌敷料。
[00%] 實(shí)施例3 一種緩釋抗菌敷料的制備方法，所述制備方法具體步驟如下： (1)將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，在空氣氣氛中進(jìn)行等離子體處理，等離子 體的電壓為140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為Imin;稱取2g經(jīng)低溫等離子體處理的 細(xì)菌纖維素溶于lOOM^重量百分比為65wt%的異丙醇溶液中，加入8.3g重量百分比為6.0wt% 的十四烷基Ξ苯基氯化鱗溶液，40°C攬拌12h，然后冷卻，先用丙酬洗涂，最后用蒸饋水反復(fù) 洗涂，7(TC條件下烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌纖維素； (2) 稱取2g季錠鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽殼聚糖溶液，再加入0.2g 氯化巧，攬拌均勻，然后加入步驟（1)制備的〇.5g季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖 維素均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (3) 將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配 制的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼3份，甘油1.5份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，血管細(xì) 胞生長(zhǎng)因子0.05份，透明質(zhì)酸0.05份，蒸饋水20份構(gòu)成； (4) 將步驟(2)制備的混合液A加入到步驟(3)制備的混合液B中，按照混合液A與混合液 B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲時(shí)間為化，得到混合液C; 巧)將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入 冷凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、包裝、滅菌，得到緩釋 抗菌敷料。
[0027] 實(shí)施例4 一種緩釋抗菌敷料的制備方法，所述制備方法具體步驟如下： (1) 將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，在空氣氣氛中進(jìn)行等離子體處理，等離子 體的電壓為140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為1.5min;稱取2g經(jīng)低溫等離子體處理 的細(xì)菌纖維素溶于lOOmL重量百分比為70wt%的異丙醇溶液中，加入7.1g重量百分比為 7. Owt%的十六烷基Ξ苯基氯化鱗溶液，45 °C攬拌1化，然后冷卻，先用丙酬洗涂，最后用蒸饋 水反復(fù)洗涂，7(TC條件下烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌纖維素； (2) 稱取3g季錠鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽殼聚糖溶液，再加入0.3g 氯化巧，攬拌均勻，然后加入步驟（1)制備的〇.6g季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖 維素均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (3) 將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配 制的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼3份，甘油1份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，血小板源 性生長(zhǎng)因子0.05份，透明質(zhì)酸0.05份，蒸饋水30份構(gòu)成； (4) 將步驟(2)制備的混合液A加入到步驟(3)制備的混合液B中，按照混合液A與混合液 B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲時(shí)間為化，得到混合液C; 巧)將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入 冷凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、包裝、滅菌，得到緩釋 抗菌敷料。
[0028] 實(shí)施例5 一種緩釋抗菌敷料的制備方法，所述制備方法具體步驟如下： (1) 將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，在空氣氣氛中進(jìn)行等離子體處理，等離子 體的電壓為140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為1.5min;稱取2g經(jīng)低溫等離子體處理 的細(xì)菌纖維素溶于lOOmL重量百分比為75wt%的異丙醇溶液中，加入7.1g重量百分比為 7. Owt%的十二烷基Ξ苯基漠化鱗溶液，45 °C攬拌1 Oh，然后冷卻，先用丙酬洗涂，最后用蒸饋 水反復(fù)洗涂，7(TC條件下烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌纖維素； (2) 稱取3g季錠鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽殼聚糖溶液，再加入0.3g 氯化巧，攬拌均勻，然后加入步驟（1)制備的〇.5g季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖 維素均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (3) 將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配 制的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼2份，甘油1.5份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，血小板 源性生長(zhǎng)因子0.05份，透明質(zhì)酸0.1份，蒸饋水30份構(gòu)成； (4) 將步驟(2)制備的混合液A加入到步驟(3)制備的混合液B中，按照混合液A與混合液 B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲時(shí)間為化，得到混合液C; 巧)將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入 冷凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、包裝、滅菌，得到緩釋 抗菌敷料。
[0029] 實(shí)施例6 一種緩釋抗菌敷料的制備方法，所述制備方法具體步驟如下： (1) 將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，在空氣氣氛中進(jìn)行等離子體處理，等離子 體的電壓為140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為2min;稱取2g經(jīng)低溫等離子體處理的 細(xì)菌纖維素溶于lOOM^重量百分比為80wt%的異丙醇溶液中，加入6.3g重量百分比為S.Owt% 的十四烷基Ξ苯基漠化鱗溶液，5(TC攬拌化，然后冷卻，先用丙酬洗涂，最后用蒸饋水反復(fù) 洗涂，7(TC條件下烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌纖維素； (2) 稱取4g季錠鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽殼聚糖溶液，再加入0.4g 氯化巧，攬拌均勻，然后加入步驟（1)制備的〇.8g季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖 維素均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (3) 將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配 制的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼4份，甘油2份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.025份，血管細(xì)胞 生長(zhǎng)因子0.025份，成纖細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.025份，血小板源性生長(zhǎng)因子0.025份，透明質(zhì)酸 0.08份，蒸饋水40份構(gòu)成； (4) 將步驟(2)制備的混合液A加入到步驟(3)制備的混合液B中，按照混合液A與混合液 B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲時(shí)間為4h，得到混合液C; 巧)將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入 冷凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、包裝、滅菌，得到緩釋 抗菌敷料。
[0030] 實(shí)施例7 一種緩釋抗菌敷料的制備方法，所述制備方法具體步驟如下： (1) 將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，在空氣氣氛中進(jìn)行等離子體處理，等離子 體的電壓為140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為2min;稱取2g經(jīng)低溫等離子體處理的 細(xì)菌纖維素溶于lOOM^重量百分比為80wt%的異丙醇溶液中，加入6.3g重量百分比為S.Owt% 的十六烷基Ξ苯基漠化鱗溶液，5(TC攬拌化，然后冷卻，先用丙酬洗涂，最后用蒸饋水反復(fù) 洗涂，7(TC條件下烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌纖維素； (2) 稱取4g季錠鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽殼聚糖溶液，再加入0.4g 氯化巧，攬拌均勻，然后加入步驟（1)制備的1. Og季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖 維素均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (3) 將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配 制的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼4份，甘油1.8份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.025份，血管細(xì) 胞生長(zhǎng)因子0.025份，成纖細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.025份，血小板源性生長(zhǎng)因子0.025份，透明質(zhì)酸 0.1份，蒸饋水40份構(gòu)成； (4)將步驟(2)制備的混合液A加入到步驟(3)制備的混合液B中，按照混合液A與混合液 B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲時(shí)間為4h，得到混合液C; 巧)將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入 冷凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、包裝、滅菌，得到緩釋 抗菌敷料。
[0031] 對(duì)實(shí)施例1~7得到的緩釋抗菌敷料進(jìn)行抗菌試驗(yàn)和動(dòng)物試驗(yàn)分析，結(jié)果如下表所 示，
從上表可W看出，本發(fā)明制備的緩釋抗菌敷料具有很好的抗菌效果，同時(shí)具有很好的 止血效果，能促進(jìn)創(chuàng)面愈合，縮短愈合時(shí)間。
[0032] 實(shí)施例8 實(shí)驗(yàn)組:W實(shí)施例2作為實(shí)驗(yàn)組。
[0033] 對(duì)照組1 制備方法具體步驟如下：（1)稱取2g細(xì)菌纖維素溶于lOOmL重量百分比為60wt%的異丙 醇溶液中，加入lOg重量百分比為5.0wt%的十二烷基Ξ苯基氯化鱗溶液，40°C攬拌12h，然后 冷卻，先用丙酬洗涂，最后用蒸饋水反復(fù)洗涂，70°C條件下烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌纖維素； (2)稱取2g季錠鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽殼聚糖溶液，再加入0.2g氯化 巧，攬拌均勻，然后加入步驟（1)制備的0.5g季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖維素 均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (3)將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸 加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配制的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼2份，甘 油1份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，成纖細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，透明質(zhì)酸0.05份，蒸饋水20份 構(gòu)成；（4)將步驟(2)制備的混合液A加入到步驟(3)制備的混合液B中，按照混合液A與混合 液B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲時(shí)間為化，得到混合液C;巧)將 步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，冰箱的冷凍溫度為-15~(TC，再轉(zhuǎn)入冷凍干燥 機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、包裝、滅菌，得到敷料a。
[0034] 對(duì)照組2 制備方法具體步驟如下：（1)稱取2g季錠鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽 殼聚糖溶液，再加入0.2g氯化巧，攬拌均勻，然后加入lOg重量百分比為5. Owt%的十二烷基 Ξ苯基氯化鱗溶液，并將其均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (2)將海藻酸 鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配制的混合液B按重 量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼2份，甘油1份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，成纖細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份， 透明質(zhì)酸0.05份，蒸饋水20份構(gòu)成；（3)將步驟（1)制備的混合液A加入到步驟(2)制備的混 合液B中，按照混合液A與混合液B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲 時(shí)間為化，得到混合液C; (4)將步驟(3)制備的混合液C置于冰箱中冷凍2地，冰箱的冷凍溫 度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、 包裝、滅菌，得到敷料b。
[0035] 對(duì)照組3 制備方法具體步驟如下：（1)稱取2g季錠鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽 殼聚糖溶液，再加入〇.2g氯化巧，攬拌均勻，形成混合液A; (2)將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、 透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配制的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸 鋼2份，甘油1份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，成纖細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，透明質(zhì)酸0.05份，蒸 饋水20份構(gòu)成；（3)將步驟(1)制備的混合液A加入到步驟(2)制備的混合液B中，按照混合液 A與混合液B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲時(shí)間為化，得到混合液 C; (4)將步驟(3)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入冷 凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、包裝、滅菌，得到敷料C。
[0036] 對(duì)照組4 制備方法具體步驟如下：（1)將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，在空氣氣氛中進(jìn) 行等離子體處理，等離子體的電壓為140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為Imin;稱取2g 經(jīng)低溫等離子體處理的細(xì)菌纖維素溶于lOOmL重量百分比為60wt%的異丙醇溶液中，加入 lOg重量百分比為5.0wt%的十二烷基Ξ苯基氯化鱗溶液，40°C攬拌12h，然后冷卻，先用丙酬 洗涂，最后用蒸饋水反復(fù)洗涂，70°C條件下烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌纖維素；（2)量取lOOmL蒸 饋水，加入〇.2g氯化巧，攬拌均勻，然后加入步驟（1)制備的0.5g季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將 季鱗鹽/細(xì)菌纖維素均勻分散到溶液中，形成混合液A; (3)將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透 明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配制的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼2 份，甘油1份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，成纖細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，透明質(zhì)酸0.05份，蒸饋 水20份構(gòu)成；（4)將步驟(2)制備的混合液A加入到步驟(3)制備的混合液B中，按照混合液A 與混合液B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲，超聲時(shí)間為化，得到混合液 C;巧)將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入冷 凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80°C，取出分切、包裝、滅菌，得到敷料d。
[0037] 對(duì)照組5 制備方法具體步驟如下：（1)將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，在空氣氣氛中進(jìn) 行等離子體處理，等離子體的電壓為140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為Imin;稱取2g 經(jīng)低溫等離子體處理的細(xì)菌纖維素溶于lOOmL重量百分比為60wt%的異丙醇溶液中，加入 lOg重量百分比為5.0wt%的十二烷基Ξ苯基氯化鱗溶液，40°C攬拌12h，然后冷卻，先用丙酬 洗涂，最后用蒸饋水反復(fù)洗涂，70°C條件下烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌纖維素；（2)稱取2g季錠 鹽殼聚糖，溶于lOOmL蒸饋水中，配制成季錠鹽殼聚糖溶液，然后加入步驟(1)制備的0.5g季 鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖維素均勻分散到季錠鹽殼聚糖溶液中，形成混合液 A; (3)將海藻酸鋼、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸饋水中并攬拌均勻，形成混合液B;配制 的混合液B按重量份數(shù)計(jì)由海藻酸鋼2份，甘油1份，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子0.05份，成纖細(xì)胞生 長(zhǎng)因子0.05份，透明質(zhì)酸0.05份，蒸饋水20份構(gòu)成；（4)將步驟(2)制備的混合液A加入到步 驟(3)制備的混合液B中，按照混合液A與混合液B的體積比1:1混合，并攬拌均勻，然后進(jìn)行 冰浴超聲，超聲時(shí)間為化，得到混合液C;巧)將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍2地， 冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，再轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)冷凍干燥4她，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為-80 °C，取出分切、包裝、滅菌，得到敷料e。
[0038] 對(duì)本實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組1~5得到的敷料進(jìn)行緩釋抗菌劑檢測(cè)，不同接觸 時(shí)間對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌率檢測(cè)結(jié)果如下表所示：
' 由上表可見(jiàn)，對(duì)照組1因細(xì)菌纖維素沒(méi)有經(jīng)過(guò)低溫等離子體處理，使其只負(fù)載I了少量的I 季鱗鹽，制得的敷料其抗菌性能大大降低。對(duì)照組2因沒(méi)有將季鱗鹽負(fù)載到細(xì)菌纖維素上， 故季鱗鹽在短時(shí)間內(nèi)被釋放出來(lái)，她內(nèi)對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌率迅速達(dá)到98.4%，而8h后 其抑菌率降低，24h后迅速降低;實(shí)驗(yàn)組因細(xì)菌纖維素對(duì)季鱗鹽有緩慢釋放的作用，其對(duì)金 黃色葡萄球菌的抑菌率逐漸增大，在72h時(shí)抑菌率仍可達(dá)到99.8%，表現(xiàn)出長(zhǎng)效的抗菌性;因 此由于細(xì)菌纖維素的緩釋作用，敷料表現(xiàn)出持久的抗菌活性。對(duì)照組3因敷料內(nèi)沒(méi)有加入季 鱗鹽/細(xì)菌纖維素，主要是由季錠鹽殼聚糖表現(xiàn)出較低的抗菌性能。對(duì)照組4因沒(méi)有加入季 錠鹽殼聚糖，敷料的抑菌率24h時(shí)出現(xiàn)逐漸降低，但降低幅度不大，說(shuō)明沒(méi)有季錠鹽殼聚糖 與海藻酸鹽的交聯(lián)包埋作用，不能協(xié)同細(xì)菌纖維素實(shí)現(xiàn)雙重緩釋作用。對(duì)照組5因沒(méi)有加入 氯化巧，敷料抑菌率在4她時(shí)出現(xiàn)逐漸降低，但降低幅度較小，說(shuō)明氯化巧在混合時(shí)可增強(qiáng) 季錠鹽殼聚糖與海藻酸鹽交聯(lián)的效果。
[0039] 綜上可見(jiàn)，本發(fā)明制備的緩釋抗菌敷料具有雙重緩釋抗菌作用，克服了純季鱗鹽 抗菌時(shí)效短的缺陷。同時(shí)具有緩慢釋放抗菌劑，具有持久殺菌、抑菌性，保濕、透氣、吸收傷 口滲出液、快速止血、促進(jìn)傷口愈合等等多重功效。
[0040] 顯然，本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說(shuō)明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對(duì) 本發(fā)明的實(shí)施方式的限定;對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在上述說(shuō)明的基礎(chǔ)上還可 W做出其它不同形式的變化或變動(dòng)，運(yùn)里無(wú)需也無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予W窮舉;凡在本 發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明權(quán)利要求 的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種緩釋抗菌敷料的制備方法，其特征在于，所述制備方法具體步驟如下： (1) 季鱗鹽/細(xì)菌纖維素的制備:將細(xì)菌纖維素先進(jìn)行低溫等離子體處理，經(jīng)過(guò)處理的 細(xì)菌纖維素溶于異丙醇溶液中，加入季鱗鹽溶液，攪拌，冷卻、洗滌、烘干，得到季鱗鹽/細(xì)菌 纖維素； (2) 混合液A的制備:將季銨鹽殼聚糖溶于蒸餾水中，攪拌均勻，配制成季銨鹽殼聚糖溶 液，再加入氯化鈣，然后加入步驟（1)制備的季鱗鹽/細(xì)菌纖維素，并將季鱗鹽/細(xì)菌纖維素 均勻分散到季銨鹽殼聚糖溶液中，形成混合液A; (3) 混合液B的制備:將海藻酸鈉、甘油、生長(zhǎng)因子、透明質(zhì)酸加入蒸餾水中并攪拌均勻， 形成混合液B; (4 )混合液C的制備:將步驟(2 )制備的混合液A加入到步驟(3 )制備的混合液B中，并攪 拌均勻，然后進(jìn)行冰浴超聲處理，超聲時(shí)間為2~4h，得到混合液C; (5)緩釋抗菌敷料的制備:將步驟(4)制備的混合液C置于冰箱中冷凍24h，再轉(zhuǎn)入冷凍 干燥機(jī)中，冷凍干燥48h，取出分切、包裝、滅菌，得到緩釋抗菌敷料。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種緩釋抗菌敷料的制備方法，其特征在于，所述的步驟（1) 中低溫等離子體處理的具體步驟為:在空氣氣氛中進(jìn)行等離子體處理，等離子體的電壓為 140V，真空度為150Pa，常溫下處理時(shí)間為lmin-2min。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種緩釋抗菌敷料的制備方法，其特征在于，所述的步驟（1) 中異丙醇溶液的重量百分比為6 0 w t %~8 0 w t %，季鱗鹽溶液的重量百分比為5.0 w t %~ 8. Owt%，攪拌溫度為40~50 °C，攪拌時(shí)間為8~12h，烘干溫度為70 °C。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種緩釋抗菌敷料的制備方法，其特征在于，所述的步驟（1) 中細(xì)菌纖維素與季鱗鹽的質(zhì)量比為4:1。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種緩釋抗菌敷料的制備方法，其特征在于，所述的步驟(2) 中季銨鹽殼聚糖溶液的重量百分比為2. Owt%~4. Owt%，季銨鹽殼聚糖與氯化鈣的質(zhì)量比為 10:1，季銨鹽殼聚糖與季鱗鹽/細(xì)菌纖維素的質(zhì)量比為4:1~6:1。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種緩釋抗菌敷料的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)制 備的混合液B按的重量份數(shù)計(jì)，由如下構(gòu)成： 海藻酸鈉 2~4份， 甘油 1~2份， 生長(zhǎng)因子 0.05~0.1份， 透明質(zhì)酸 0.05~0.1份， 蒸餾水 20~40份。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種緩釋抗菌敷料的制備方法，其特征在于，所述的生長(zhǎng)因子 由表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、血管細(xì)胞生長(zhǎng)因子、成纖細(xì)胞生長(zhǎng)因子和血小板源性生長(zhǎng)因子中的 至少一種組成。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種緩釋抗菌敷料的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中 混合液A與混合液B按照體積比為1:1進(jìn)行混合。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種緩釋抗菌敷料的制備方法，其特征在于，所述步驟(5)中 冰箱的冷凍溫度為-15~0°C，冷凍干燥機(jī)的冷凍溫度為_(kāi)80°C。10. 根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的一種緩釋抗菌敷料的制備方法，其特征在于，所述
【文檔編號(hào)】A61L15/44GK105999358SQ201610568961
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年7月20日
【發(fā)明人】盧亢, 莊壯輝, 韋加娜, 唐漢穎
【申請(qǐng)人】廣東泰寶醫(yī)療科技股份有限公司