技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于中藥提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種制備促進傷口愈合的藥物組合物的方法。
背景技術(shù)：
皮膚是人體最大的器官，它包裹在人體整個表面，并與消化、呼吸、泌尿、生殖系統(tǒng)外口的粘膜上皮相連接，從而構(gòu)成人體最理想的外衣，保護內(nèi)臟和預(yù)防外界各種因素的侵襲。但由于它處于人體的最外層，所以日常生活會受到撕咬、擠壓、摩擦、摔碰等情況是很難避免的。通常會出現(xiàn)割傷、抓傷、瘀血、砸傷、擠傷、擦傷、裂傷、刺傷、蚊蟲咬傷、燒燙等傷情，在醫(yī)院中還有褥瘡、手術(shù)傷口等外傷，出現(xiàn)這些傷情后，必須及時處理，否則會由于病原細(xì)菌的侵入發(fā)生化膿性感染，也會造成局部出現(xiàn)紅、腫、熱、痛和功能障礙，嚴(yán)重時由于細(xì)菌及毒素進入血液循環(huán)可引起毒血癥、敗血癥及破傷風(fēng)等病癥，會造成十分嚴(yán)重的后果。
現(xiàn)代西醫(yī)外科學(xué)對手術(shù)造成的創(chuàng)傷傷口的處理方法是，對傷口滅菌、消毒，應(yīng)用抗生素防止感染，縫合傷口后用醫(yī)用紗布包扎的方法?？p合具有閉合傷口，促進止血及組織愈合作用，是現(xiàn)代外科最基本的技術(shù)，因此手工縫合是目前應(yīng)用最廣泛的方法。另外，現(xiàn)代外科不在傷口上用藥，傷口的愈合是靠機體自身的組織來修復(fù)的。一般在術(shù)后2-3天，患者更換一次敷料，目的是為觀察和清潔傷口。由此可見，西醫(yī)對于術(shù)后傷口的愈合完全依靠患者本身的組織修復(fù)能力，傷口愈合緩慢，且增加了患者感染的風(fēng)險。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
鑒于現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于通過對中草藥進行研究，從而提供一種制備促進傷口愈合的藥物組合物的方法，該方法制備的藥物組合物經(jīng)口服給藥，可減輕炎癥反應(yīng)，促進新生血管和成纖維細(xì)胞的增生。
為了實現(xiàn)本發(fā)明的第一個目的，發(fā)明人通過大量試驗研究并不懈探索，最終獲得了如下技術(shù)方案：
一種促進傷口愈合的口服藥物組合物，其中，所述的藥物組合物中的活性成分包含鳳尾參的氯仿部位提取物。
優(yōu)選地，如上所述的促進傷口愈合的口服藥物組合物，其中所述的藥物組合物中的活性成分由鳳尾參的氯仿部位提取物作為唯一活性成分組成。
本發(fā)明的第二個目的在于提供一種根據(jù)上述促進傷口愈合的藥物組合物的制備方法，其中該方法包括如下步驟：將鳳尾參原料用濃度為72%-80%（v/v）乙醇回流提取1-3h，過濾，濾液減壓濃縮至干，得粗提取物，用水溶解成混懸液，加氯仿萃取，得到氯仿萃取液，將氯仿萃取液回收溶劑后濃縮成稠膏，干燥，得鳳尾參的氯仿部位提取物，再與藥學(xué)上可用的輔料混勻制備成口服固體制劑。
優(yōu)選地，如上所述促進傷口愈合的藥物組合物的制備方法，其中步驟（1）中所述的乙醇加熱回流提取步驟重復(fù)2-3次，每次乙醇的加入量為鳳尾參原料的6-10倍（v/w）。
優(yōu)選地，如上所述促進傷口愈合的藥物組合物的制備方法，其中所述的口服固體制劑包括片劑、膠囊劑和顆粒劑。
本發(fā)明人通過研究鳳尾參的氯仿部位提取物對小鼠全層皮膚切除傷口模型的干預(yù)試驗研究結(jié)果顯示，氯仿部位組在第7d時的傷口基本愈合，上皮完整，有正常角質(zhì)層形成，血管少，表皮下大量膠原形成，基本與表皮平行生長；未見皮膚附屬器。而空白對照組在第9d時才觀察到肉芽組織基本充滿傷口，表皮開始增生覆蓋傷口表面的絕大部分，但傷口未全面愈合。這說明本發(fā)明制備的鳳尾參的氯仿部位提取物可大幅度加快傷口愈合，7日內(nèi)即可基本愈合。因此，本發(fā)明的第三個目的在于提供一種制藥用途，即上述的鳳尾參的氯仿部位提取物在制備促進傷口愈合的藥物中的用途。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的藥物組合物有較好的減輕炎癥的作用，可明顯促進新生血管和成纖維細(xì)胞的增生，對皮膚傷口愈合有顯著的促進作用。
具體實施方式
以下是本發(fā)明所涉及鳳尾參提取物的具體制備例和動物試驗例，對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步作描述，但是本發(fā)明的保護范圍并不限于該實施例。需要說明的是，各實施例中的鳳尾參選用玄參科馬先蒿屬植物江南馬先蒿Pedicularis henryi Maxim.的干燥根。
實施例1 鳳尾參的氯仿部位提取物的制備
清洗干凈并干燥的鳳尾參干品782g，用中藥粉碎機粉碎，置于帶有圓底燒瓶的提取裝置中，用濃度為78%（v/v）乙醇6L回流提取2h，過濾，得到醇提液，重復(fù)2次，合并醇提液，減壓濃縮至干，得粗提取物，用2.5L純水溶解成混懸液，用2.5L氯仿萃取2次，得到氯仿萃取液，回收氯仿后繼續(xù)減壓濃縮成稠膏，冷凍干燥，粉碎成細(xì)粉，過100目篩，得到鳳尾參的氯仿部位提取物。
實施例2 鳳尾參的氯仿部位提取物的制備
清洗干凈并干燥的鳳尾參干品1.5kg，用中藥粉碎機粉碎，置于帶有圓底燒瓶的提取裝置中，用濃度為72%（v/v）乙醇12L回流提取2h，過濾，得到醇提液，重復(fù)2次，合并醇提液，減壓濃縮至干，得粗提取物，用4L純水溶解成混懸液，用4L氯仿萃取2次，得到氯仿萃取液，回收氯仿后繼續(xù)減壓濃縮成稠膏，冷凍干燥，粉碎成細(xì)粉，過100目篩，得到鳳尾參的氯仿部位提取物。
對比例1鳳尾參水提物的制備
清洗干凈并干燥的鳳尾參干品700g，用中藥粉碎機粉碎，置于帶有圓底燒瓶的提取裝置中，用7L純水加熱回流提取2h，過濾，得到水提液，重復(fù)2次，合并水提液，減壓濃縮至干，得水提物，粉碎成細(xì)粉，過100目篩，得到鳳尾參水提物。
實施例3 鳳尾參提取物對小鼠創(chuàng)面愈合的影響試驗
取64只雄性健康昆明小鼠，22-26g，隨機分為3組，每組24只，即空白對照組、水提物組、氯仿部位組。按如下方法建立小鼠全層皮膚切除傷口模型：吸入乙醚氣體麻醉后，背部剪毛，常規(guī)消毒后在背部中央做一皮膚全層切口，創(chuàng)面自然止血，不包扎，不施藥。切創(chuàng)后，每只小鼠分籠飼養(yǎng)，給予消毒飼料及雙蒸水，保持傷口干燥，防止傷口感染。同時，每天對小鼠按給藥體積0.1mL/10g進行灌胃，分別以小鼠的體質(zhì)量為基準(zhǔn)，水提物組給予對比例1制備的鳳尾參水提物干粉0.62g/kg，氯仿部位組給予實施例1制備的鳳尾參的氯仿部位提取物干粉0.62g/kg，空白對照組給予等體積的溶媒。在0、5、9、12d時間點，將傷口邊緣描繪在透明稱量紙上，然后采用清華紫光A900掃描儀掃描并用美國Image-Pro⑧PlusVersion6.0(IPP)圖像分析軟件測量面積，分別觀察皮膚愈合情況，并從每組中隨機取6只處死并取其傷口組織用常規(guī)石蠟包埋，切片，HE染色，光鏡下觀察其組織學(xué)變化。
在創(chuàng)傷第0、4、7、9d時的傷口面積的統(tǒng)計結(jié)果見表1。根據(jù)表1的試驗結(jié)果可以看出，在造模當(dāng)天致創(chuàng)后，各組創(chuàng)面未愈合面積之間沒有顯著差異；在創(chuàng)傷第4、7、9d時，氯仿部位組與空白對照組或水提物組比較具有極顯著性差異（P＜0.01)，這說明本發(fā)明制備的鳳尾參的氯仿部位提取物可大幅度加快傷口愈合，7日內(nèi)即可基本愈合。值得注意的是，在給藥第4d后，水提物組的傷口面積一直大于空白對照組，這預(yù)示著鳳尾參水提物在后期抑制了傷口的愈合。
表1 各組小鼠造模后傷口面積變化比較（mm2）
與空白對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；
與水提物組比較，￥P＜0.05，￥￥P＜0.01。
另外，HE染色切片結(jié)果發(fā)現(xiàn)，氯仿部位組在第7d時的傷口基本愈合，上皮完整，有正常角質(zhì)層形成，血管少，表皮下大量膠原形成，基本與表皮平行生長；未見皮膚附屬器。而空白對照組在第9d時才觀察到肉芽組織基本充滿傷口，表皮開始增生覆蓋傷口表面的絕大部分，但傷口未全面愈合。