本發(fā)明涉及一種酶處理制得的染發(fā)劑，特別是涉及一種提取食用菌酶液，將氨基酸底物轉(zhuǎn)化成天然黑色素前體物質(zhì)，并將其制備成非氧化型生物染發(fā)劑的方法。

背景技術：

目前，隨著人們對健康重視程度的不斷提高，化學合成的染發(fā)劑中含有的致癌及強致敏化學染色成分(如苯二胺類、氨基酚等物質(zhì))和一些有害成分(如過氧化氫、氨水等)，已越來越多地受到人們的關注。為此，人們試圖尋求天然無害、更加安全的染發(fā)材料。比如植物色素染發(fā)劑，雖然取得了一定的成績，但仍然存在很多問題，這類產(chǎn)品仍無法避免在染發(fā)劑中添加酚類及過氧化氫等有害物質(zhì)，而且缺乏成熟的色素提煉技術。目前已知有利用植物色素兒茶酚制備天然染發(fā)劑的方法(專利文獻CN101164528A)，但其中使用的兒茶酚是從中藥材兒茶中提取，其缺點是中藥材的種植規(guī)模有限，色素提取成本相對較高；也有報道通過基因工程技術，利用表達霉菌屬絲狀菌細胞中的兒茶酚氧化酶，對多巴及其衍生物進行氧化，將其轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏厍绑w的方法(專利文獻CN101914585A)，但霉菌本身會產(chǎn)生一些有毒有害物質(zhì)，生產(chǎn)過程會造成環(huán)境的污染，同時存在成本高，耗時長，性能不穩(wěn)定、無法大量應用等缺點?，F(xiàn)有技術中也有使用芽孢桿菌發(fā)酵液中所提取酶液催化底物產(chǎn)生黑色素前體物質(zhì)的方法，但仍無法保證其產(chǎn)品的安全無毒副作用，發(fā)酵過程中的污染也會影響產(chǎn)品品質(zhì)。

人體頭發(fā)的顏色是由毛發(fā)皮質(zhì)中的黑色素顆粒的種類和數(shù)量所決定的，隨著年齡的增長及快節(jié)奏的工作生活導致的壓力，黑色素顆粒的產(chǎn)生會逐漸減少，黑發(fā)就會逐漸變白。而黑色素在人體中的合成過程(圖1)，是由黑色素細胞通過酪氨酸酶將酪氨酸氧化成多巴色素，多巴色素脫去羧基生成5,6-二羥基吲哚，或利用互變異構(gòu)酶生成5,6-二羥基吲哚-2-羧酸，之后經(jīng)過聚合形成真黑素，從而使頭發(fā)呈現(xiàn)黑色。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明是為了解決上述技術問題，而根據(jù)人體毛發(fā)中黑色素的合成原理，提供了一種從食用菌里面提取酶液，通過與氨基酸底物反應生成黑色素前體物質(zhì)，然后加入輔料制備得到生物染發(fā)劑，其工序包括：(a)食用菌復合酶液的提取、純化、固定及保存工序；(b)將酪氨酸等底物進行生物轉(zhuǎn)變成黑色素前體的工序；(c)對上述反應液進行處理，提高5,6-二羥基吲哚濃度的工序；(d)將黑色素前體物質(zhì)和輔料混合制備得到染發(fā)劑的工序。

本發(fā)明一種黑色素前體物質(zhì)染發(fā)劑，包括：黑色素前體、染發(fā)劑常用助劑和水；

所述黑色素前體包括多巴色素、5,6-二羥基吲哚和5,6-二羥基吲哚-2-羧酸；

所示黑色素前體占染發(fā)劑的重量百分比為0.01％～5％；

所述染發(fā)劑常用助劑為潤濕滲透劑、增稠劑、表面活性劑、保濕劑、pH值調(diào)節(jié)劑中的一種或多種。

優(yōu)選的，所述潤濕滲透劑為L-半胱氨酸、谷胱甘肽中的一種或兩種；

所述增稠劑為羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素、羧乙基纖維素、淀粉、硅凝膠、明膠、海藻酸鈉、瓜爾膠、瓊脂、大豆蛋白膠、聚乙二醇、聚丙烯酸鈉、聚丙烯酰胺、聚γ-谷氨酸、玻璃質(zhì)酸鈉、聚丙烯酸、低分子聚乙烯蠟、黃原膠中的一種或幾種；

所述表面活性劑為單硬脂酸甘油酯、十六烷基三甲基氯化銨、鯨蠟醇、月桂基磺化琥珀酸單酯二鈉、磺基琥珀酸單酯二鈉、愛瑪膏中的一種或幾種；

所述保濕劑為甘油、山梨醇、甘露醇、乙二醇、丙三醇、食用油中的一種或幾種；

所述pH值調(diào)節(jié)劑為賴氨酸、精氨酸、碳酸氫鈉中的一種或幾種。

優(yōu)選的，所述潤濕滲透劑占染發(fā)劑的重量百分比為1％～10％；

所述增稠劑占染發(fā)劑的重量百分比為0.2％～2％；

所述表面活性劑占染發(fā)劑的重量百分比為0.1％～2％；

所述保濕劑占染發(fā)劑的重量百分比為1％～15％；

所述pH值調(diào)節(jié)劑占染發(fā)劑的重量百分比為1％～10％。

優(yōu)選的，所述黑色素前體的制備包括以下步驟：

(1)準備反應底物；

(2)從食用菌中提取合成黑色素前體所需的復合酶；

(3)利用步驟二制得的復合酶對步驟一中的反應底物進行催化，獲得目標產(chǎn)物；

(4)將步驟三中所得目標產(chǎn)物進行轉(zhuǎn)化處理，獲得黑色素前體；

所述反應底物為酪氨酸、多巴、多巴胺中的一種或多種；

所述食用菌為杏鮑菇、雙孢菇、褐菇、草菇、平菇、香菇、黑木耳、茶樹菇中的一種或多種；

優(yōu)選的，所述目標產(chǎn)物轉(zhuǎn)化處理進行以下操作中的一種或多種：沸水加熱、加熱同時減壓蒸發(fā)、電解、添加脫羧酶。

優(yōu)選的，所述底物為L-酪氨酸。

優(yōu)選的，所述底物濃度為1mM～10mM。

優(yōu)選的，所述步驟二中提取的復合酶進行純化和固定化處理；所述純化的方法為超濾和/或離子交換柱層析。

優(yōu)選的，所述對復合酶進行固定化處理時，固定材質(zhì)為分子篩、硅藻土、海藻酸鈉等公知的固定化材質(zhì)。

本發(fā)明一種黑色素前體物質(zhì)染發(fā)劑的使用方法，所述使用方法包括以下步驟：將待染頭發(fā)清洗后，將本發(fā)明的黑色素前體物質(zhì)染發(fā)劑均勻涂于頭發(fā)表面，30～50min后用清水沖洗擦干；每日一次，重復使用4日以上。

本發(fā)明黑色素前體物質(zhì)染發(fā)劑及其使用方法與現(xiàn)有技術不同之處在于：

1.本發(fā)明通過提取天然食用菌中的復合酶液，將氨基酸通過生物轉(zhuǎn)化合成多巴色素、5,6-二羥基吲哚及5,6-二羥基吲哚-2-羧酸等黑色素前體物質(zhì)，以這些前體物質(zhì)為主要染發(fā)成分，添加輔料制備成非氧化型的生物黑色素染發(fā)劑的生物技術。本產(chǎn)品避免使用了p-苯二胺、氫醌、間苯二酚等化學染發(fā)成分，這些物質(zhì)被證明有一定的致癌作用，并且可以引起部分用戶的過敏反應、而且不包含鉛、汞、砷等對人體有毒害作用的重金屬成分；同時避免使用了其他化學染發(fā)劑中常用的強氧化劑過氧化氫、具有強刺激性氣味的氨水等成分，減輕了對頭發(fā)和皮膚的傷害，同時本產(chǎn)品還具有抗紫外線功能,并含有多種氨基酸，有利于頭皮的健康及頭發(fā)的保護。

2.本發(fā)明的染發(fā)劑中小分子的黑色素前體物質(zhì)在潤濕滲透劑的作用下進入到頭發(fā)中，利用空氣中的氧氣將頭發(fā)中的黑色素前體物質(zhì)氧化，聚合成大分子黑色素顆粒，從而存留在頭發(fā)中，使白頭發(fā)呈現(xiàn)自然黑色。本發(fā)明產(chǎn)品對皮膚無刺激無致敏作用，安全性高，對環(huán)境無污染，并且黑色素前體成分也具有抗紫外線功能，對頭皮和頭發(fā)起到保護作用。

3.本發(fā)明的染發(fā)劑在生產(chǎn)及使用的過程中具有原料易得、工藝簡單、使用效果可靠和安全無毒等優(yōu)點，易于工廠化生產(chǎn)，利用食用菌中提取的酶液，經(jīng)生物轉(zhuǎn)化為黑色素前體物質(zhì)，并配制成染發(fā)劑的方法及生產(chǎn)工藝在國內(nèi)外未見報導。本發(fā)明的染發(fā)劑制備方法因具有上述優(yōu)點而具有良好的開發(fā)前景。

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的黑色素前體物質(zhì)染發(fā)劑及其使用方法作進一步說明。

附圖說明

圖1為真黑素合成反應圖；

圖2為黑色素前體薄層層析成分測定圖；

圖3為5,6-二羥基吲哚標準品的吸收光譜圖；

圖4為本發(fā)明制得黑色素前體物溶液的吸收光譜圖；

圖5為人的白頭發(fā)的肉眼觀察圖；

圖6為人的白頭發(fā)的顯微鏡觀察圖；

圖7為人的自然黑發(fā)的肉眼觀察圖；

圖8為人的自然黑發(fā)的顯微鏡觀察圖；

圖9為市售含對苯二胺染發(fā)劑所染頭發(fā)的肉眼觀察圖；

圖10為市售含對苯二胺染發(fā)劑所染頭發(fā)的顯微鏡觀察圖；

圖11為本發(fā)明染發(fā)劑所染頭發(fā)的肉眼觀察圖；

圖12為本發(fā)明染發(fā)劑所染頭發(fā)的顯微鏡觀察圖；

圖13為本發(fā)明染發(fā)劑用于白牦牛毛染色的效果圖；

圖14為本發(fā)明染發(fā)劑實際染發(fā)效果圖。

具體實施方式

本發(fā)明的理念是模擬人體黑發(fā)中真黑素的生成過程(如圖1所示)，利用生物方法合成黑色素前體物質(zhì)，并通過輔助材料使黑色素前體物質(zhì)進入到頭發(fā)中，再聚合成黑色素而留在頭發(fā)中，形成永久型染發(fā)劑。

本發(fā)明是以酪氨酸或其衍生物為底物，利用提取的復合酶液進行酶促反應中得到的黑色素前體物質(zhì)，包括多巴色素、5，6-二羥基吲哚、5,6-二羥基吲哚-2-羧酸等，吲哚-5,6醌、吲哚-5,6醌-2-羧酸等，其中優(yōu)選5,6-二羥基吲哚。此外，本發(fā)明中的黑色素前體不局限于單體，也可以包括二倍體以上的低聚體。

發(fā)明是以酪氨酸或其衍生物為底物，利用提取的復合酶液進行酶促反應中得到的黑色素前體物質(zhì)，包括多巴色素、5，6-二羥基吲哚、5,6-二羥基吲哚-2-羧酸等，吲哚-5,6醌、吲哚-5,6醌-2-羧酸等，其中優(yōu)選5,6-二羥基吲哚。此外，本發(fā)明中的黑色素前體不局限于單體，也可以包括二倍體以上的低聚體。黑色素前體的制備方法如下。

生產(chǎn)工序

原料：作為底物，可以使用試劑級或食品級酪氨酸及其衍生物，例如D或L型酪氨酸、D或L型多巴、多巴胺等，可以是其中的一種或幾種組合，也可以是上述物質(zhì)的異構(gòu)體。

酶液：利用粉碎方法從食用菌中提取復合酶液，在提取的過程當中可加入磷酸、檸檬酸、Tris-HCl緩沖液，pH值控制在6.0～8.0。提取之后通過離心等方式得到粗酶液。

上述提到的粗酶液可以直接用于產(chǎn)物的合成反應，也可進一步通過超濾和離子交換柱層析，硫酸銨沉淀和/或丹寧酸沉淀等處理得到純化的酶，凍干脫水后低溫保存，可長期保持酶活性。

酶在使用前，可以通過2價銅離子配位處理或酸性溶液處理等使酶的活性提高。

上述提到的酶液可以直接加入到反應液中進行酶促反應，此外，從提高酶的穩(wěn)定性及重復使用效率、使用后的容易分解程度、避免其它蛋白質(zhì)混入反應體系等方面出發(fā)，也可采用固定化的酶。酶的固定化方法沒有特別限定，可以通過分子篩、硅藻土、海藻酸鈉等公知的固定化方法，也可采用食用菌粉末和毛發(fā)粉末等親和吸附的方法進行固定。針對固定方法的不同對粗酶和純化酶的要求不同。

反應步驟：

(1)酪氨酸底物溶液的預處理

以L-酪氨酸為底物時，底物濃度選擇范圍在1mM～10mM，酪氨酸底物溶解度較小，可采取調(diào)節(jié)pH等手段增加其溶解度。

(2)酪氨酸酶的生物轉(zhuǎn)化反應

在生物反應器中，預先加入1mM～10mM的L-酪氨酸底物溶液，利用按照體積比為1/5～1/30的比例，加入上一步提取的復合酶液，然后通入空氣，保持空氣壓力在0.05Mpa～0.2Mpa，空氣流量為5LPM～20LPM，進行生物轉(zhuǎn)化反應，并且定時取樣檢測。

(3)檢測

取出樣品離心，取上清液稀釋10倍，在紫外分光光度計中測定300nm(5,6-二羥基吲哚的吸收峰)以及475nm(多巴色素的吸收峰)的吸光度。當300nm的吸光度大于2.0,并且475nm的吸光度大于0.5時，終止生物轉(zhuǎn)化反應，進行下一步處理。

后處理工序：

(1)黑色素前體物質(zhì)的收集

在上述轉(zhuǎn)化反應液中，除含有生成的黑色素前體物質(zhì)外，還含有一些包括剩余的游離酶或固定酶，及黑色素前體聚合后的黑色素。為了收集該反應液中的黑色素前體物作為染發(fā)的染料，故需要將剩余的酶及聚合后的黑色素除去。對于酶可以通過離心、超濾等方法除去，聚合后的黑色素可以通過吸附、過濾等方法除去。去除的酶可以返回到反應工序再利用，去除的黑色素可以應用到其他產(chǎn)品。最終收集得到的溶液主要為含有黑色素前體物質(zhì)溶液，包括多巴色素、5,6-二羥基吲哚、5,6-二羥基吲哚滿、5,6-二羥基吲哚-2-羧酸等，其中多巴色素占比例較大。

(2)黑色素前體物組成的調(diào)整

在黑色素前體物溶液中，能夠使白發(fā)染黑的最主要的染發(fā)有效成分為5,6-二羥基吲哚，其通過潤濕滲透進入到頭發(fā)內(nèi)部，并利用空氣中的氧氣在頭發(fā)里聚合成黑色素顆粒，留到頭發(fā)皮質(zhì)中，使頭發(fā)呈現(xiàn)黑色。根據(jù)這一最終目的，需要對黑色素前體物質(zhì)溶液的組成進行轉(zhuǎn)化調(diào)整。可以通過(Ⅰ)沸水加熱、(Ⅱ)加熱同時減壓、(Ⅲ)電解、(Ⅳ)利用脫羧酶中的一種或一種以上處理來調(diào)整組合比例，從而使得多巴色素為主的黑色素前體物向5,6-二羥基吲哚轉(zhuǎn)化。得到的黑色素前體物溶液用于配制染發(fā)劑。

(3)黑色素前體物成分的測定

通過上述方法得到的黑色素前體物溶液，可以選用薄層層析來進行主要成分測定(圖2)，同時用紫外分光光度法在波長300nm進行檢測5,6-二羥基吲哚的含量(圖3，圖4)。

(4)染發(fā)劑的配制方法

本發(fā)明的染發(fā)劑中的成分主要包括黑色素前體物質(zhì)、潤濕滲透劑、增稠劑、表面活性劑、pH值調(diào)節(jié)劑、助染劑、保濕劑，也可以加入一些營養(yǎng)成分，例如一些植物提取物、中藥成分等。作為染發(fā)劑的主要成分黑色素前體物質(zhì)，其含量優(yōu)選1％～5％；潤濕滲透劑(L-半胱氨酸、谷胱甘肽中的一種或兩種)；助染劑(Cu2+、Mg2+、Ca2+、Fe2+、Fe3+等金屬鹽中的一種或一種以上)；增稠劑(羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素、羧乙基纖維素、淀粉、硅凝膠、明膠、海藻酸鈉、瓜爾膠、瓊脂、大豆蛋白膠、聚乙二醇、聚丙烯酸鈉、聚丙烯酰胺、聚γ-基谷氨酸，玻璃質(zhì)酸鈉、低分子聚乙烯蠟、黃原膠等中的一種或一種以上)；表面活性劑(單硬脂酸甘油酯，十六烷基三甲基氯化銨，鯨蠟醇，月桂基磺化琥珀酸單酯二鈉，磺基琥珀酸單酯二鈉,愛瑪膏中的一種或幾種)；保濕劑(甘油、山梨醇、甘露醇、乙二醇、丙三醇、食用油中的一種或一種以上)；pH值調(diào)節(jié)劑(賴氨酸、精氨酸、碳酸氫鈉中的至少一種)。

實施例1

本實施例黑色素前體的制備方法按以下步驟進行：

1.酪氨酸酶的提取和測定

取杏鮑菇破碎后的材料500克加入1000ml的蒸餾水提取酪氨酸酶液或利用1000ml中性的磷酸鹽緩沖液提取酪氨酸酶液。

酪氨酸酶活的測定方法如下：取0.1ml蘑菇復合酶液與3.9ml的底物溶液在317nm反應10min，酶活力單位U的定義為每1min引起吸光度0.01個單位的變化為1個酶活力單位。測定的結(jié)果大于1000U時，此酶液可用于以下的黑色素前體累積反應。

2.黑色素前體的積累反應

配制濃度為1mM-10mM的酪氨酸溶液2L，將酪氨酸底物溶液加入容量體積為10L生物反應器中，利用溫度控制系統(tǒng)，將溫度控制在30℃，按照底物體積的1/20的比例，加入上一步提取的復合酶液，然后通入空氣，保持空氣壓力為0.10Mpa，空氣流量為10LPM，進行生物轉(zhuǎn)化反應，并且定時取樣檢測。

取出的液體樣品離心，取上清液稀釋10倍后，在紫外分光光度計中測定300nm以及475nm的吸光度。當300nm的吸光度大于2.0并且475nm的吸光度大于0.5時，終止生物轉(zhuǎn)化反應，進行下一步處理。

3.黑色素前體物的收集

上述得到的黑色素前體物溶液，在8000rpm離心除去酪氨酸酶及雜蛋白；上清液加入5％的活性炭，吸附反應過程中聚合的黑色素顆粒，此時得到的黑色素前體物溶液中以多巴色素為主。

4.黑色素前體組成的調(diào)整

由多巴色素轉(zhuǎn)化成5,6-二羥基吲哚，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀通過操作將黑色素前體溶液調(diào)整收集。

實施例2

本實施例黑色素前體的制備方法按以下步驟進行：

1.酪氨酸酶的提取

利用榨汁機將褐菇破碎，500g子實體碎渣加入1000ml用pH值為6.8的檸檬酸緩沖液提取酶液，利用5％活性炭吸附處理后離心備用。

2.酪氨酸酶的固定

將200目的硅藻土經(jīng)過60℃加熱處理30min，后經(jīng)過磷酸鹽緩沖液浸泡20min，離心除去上清液，將處理后得到的硅藻土加入到上述酶液中固定5h，得到固定化酶備用。

3.黑色素前體的積累反應

配制濃度為5mM的酪氨酸溶液2L，可采取加熱溶解的方法使其完全溶解。

將酪氨酸底物溶液加入容量體積為10L生物反應器中，利用溫度控制系統(tǒng)，將溫度控制在30℃，加入上一步固定化酶100克，然后通入空氣，保持空氣壓力為0.10Mpa，空氣流量為10LPM，進行生物轉(zhuǎn)化反應，并且定時取樣檢測。

取出的液體樣品經(jīng)過離心后，上清稀釋10倍后，在紫外分光光度計中測定300nm以及475nm的吸光度。當300nm的吸光度大于2.0,并且475nm的吸光度大于0.5時，終止生物轉(zhuǎn)化反應，進行下一步處理。

4.黑色素前體的收集

上述得到的黑色素前體溶液，在12000rpm、4℃離心5min除去固定化酶及雜蛋白；此時得到的黑色素前體溶液中以多巴色素為主。

5.黑色素前體組成的調(diào)整

調(diào)整過程同實施例1。

實施例3

本實施例黑色素前體的制備方法按以下步驟進行：

1.酪氨酸酶的提取

利用榨汁機將雙孢菇破碎，500g碎渣加入1000mlpH值為7.0的Tris-鹽酸緩沖液提取酶液，離心提取上清液，利用10％大孔吸附樹脂吸附酶液中的多糖與雜蛋白等，處理后的酶液放置4℃的條件下備用。

2.黑色素前體的積累反應

配制濃度為10mM的酪氨酸溶液2L，可采取加熱溶解的方法使其完全溶解。

反應過程同實施例1。

取出的液體樣品經(jīng)過濾紙過濾，濾液稀釋10倍后，在紫外分光光度計中測定300nm以及475nm的吸光度。當300nm的吸光度大于2.0,并且475nm的吸光度大于0.5時，終止生物轉(zhuǎn)化反應，所得溶液含有染發(fā)的主要染料成分—5,6二羥吲哚。

實施例4

本實施例的黑色素前體物質(zhì)染發(fā)劑按以下步驟制備：將實施例1-3中制得的黑色素前體物質(zhì)與染發(fā)劑常用助劑和水，在減壓充氮的條件下制成膏狀或水狀染發(fā)劑，其中具體原料的選擇與配比如表1所示，其中所用原料均為市售。

表1實施例4中各原料的種類和量

其中，黑色素前體物質(zhì)為上述實施例1-3中制得的，上述百分數(shù)均為占染發(fā)劑的重量百分數(shù)，其余量為水。

實施例5

本實施例的黑色素前體物質(zhì)染發(fā)劑的使用方法按以下步驟進行：

將待染頭發(fā)清洗后，將本實施例4中所制得的黑色素前體物質(zhì)染發(fā)劑均勻涂于頭發(fā)表面，30min后用清水沖洗擦干；每日一次，可以明顯觀察到白發(fā)部分逐漸變黑，使用第三天即可見發(fā)色顯著變黑，第六天基本看不到白色頭發(fā)，說明本發(fā)明的產(chǎn)品染發(fā)效果優(yōu)秀，如圖14所示。

實施例6

本實施例的黑色素前體物質(zhì)染發(fā)劑的使用方法與實施例5的不同之處在于：染發(fā)劑在頭發(fā)上的停留時間為50min；可以明顯觀察到白發(fā)部分逐漸變黑，在第三天開始變黑，繼續(xù)使用到滿意的黑發(fā)顏色。

實施例7

本實施例的黑色素前體物質(zhì)染發(fā)劑的使用方法與實施例5的不同之處在于：染發(fā)劑在頭發(fā)上的停留時間為40min；可以明顯觀察到白發(fā)部分逐漸變黑，在第三天開始變黑，繼續(xù)使用到滿意的黑發(fā)顏色。

對比驗證試驗

本發(fā)明染發(fā)劑與市售染發(fā)劑的比較

取等量的白發(fā)，經(jīng)洗發(fā)水清洗后，將市售兩劑型的染發(fā)劑A劑與B劑混合后均勻涂于頭發(fā)上，40min后用清水洗去浮色。

取等量的白發(fā)，經(jīng)洗發(fā)水與清水洗后，將本發(fā)明的染發(fā)劑按照實施例6中的步驟對頭發(fā)進行染色。

然后，在顯微鏡下觀察白發(fā)、人的自然黑發(fā)以及染過的黑發(fā)的效果(見圖5-圖12)。從結(jié)果中可看出，本產(chǎn)品對白發(fā)的染發(fā)效果理想，且對頭發(fā)的損傷較小，染過之后的頭發(fā)更接近于人體自然黑發(fā)。

本發(fā)明染發(fā)劑用于白色牦牛毛的染色

白色牦牛毛的結(jié)構(gòu)和人頭發(fā)類似，經(jīng)常被用來作為染發(fā)效果檢驗的替代品。

1.用梳子將實施例4制得的產(chǎn)品涂至白色牦牛毛上，正反方向反復梳理，使膏體均勻分布在牦牛毛上，停留40min。之后用清水簡單清洗，用毛巾擦至不滴水。

從染發(fā)前后的效果對比圖(圖13)中可以看出，經(jīng)過本染發(fā)劑染發(fā)后的牦牛毛顏色均勻烏黑。

雖然以上描述了本發(fā)明的具體實施方式，但是本領域的技術人員應當理解，這些僅是舉例說明，本發(fā)明的保護范圍是由所附權利要求書限定的。本領域的技術人員在不背離本發(fā)明的原理和實質(zhì)的前提下，可以對這些實施方式作出多種變更或修改，但這些變更和修改均落入本發(fā)明的保護范圍。