本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及銀杏葉提取物(gbe)與支鏈氨基酸(bcaa)的組合在制備治療脂肪肝和/或脂肪變性的藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

銀杏是一種古代植物，又稱作為公孫樹或者白果樹，該植物的樹葉和果實(shí)均有重要的藥物作用價(jià)值，可廣泛應(yīng)用于各種臨床疾病的治療。60年代中期德國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)銀杏葉提取物對(duì)心腦血管病和外周循環(huán)障礙疾病，有較好的治療。近10年來，有關(guān)銀杏葉提取物的化學(xué)成分，藥理作用和藥動(dòng)學(xué)研究取得較大進(jìn)展。

銀杏葉提取物有效藥物作用成分為內(nèi)酯類物質(zhì)，其在靶細(xì)胞膜受體發(fā)揮一定的藥理作用，明顯減輕和緩解正常細(xì)胞內(nèi)的毒性反應(yīng)，并明顯恢復(fù)腦組織的正常生理學(xué)功能作用。近些年相關(guān)藥物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果證實(shí)，銀杏內(nèi)酯能明顯預(yù)防和抑制血小板的異常聚集現(xiàn)象，緩解血栓素增加的現(xiàn)象。此外銀杏葉提取物還能夠顯著性降低冠心病患者血清膽固醇和甘油的表達(dá)水平，進(jìn)而起到降低血液的凝滯程度，阻礙動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展過程和降低冠心病發(fā)病率等多重藥理作用。

脂肪肝系中性脂肪在肝內(nèi)蓄積過多所致，主要為甘油三酯。脂類在肝內(nèi)蓄積超過肝重的5％，或在組織學(xué)上50％以上的肝實(shí)質(zhì)脂肪化時(shí)，均可成為脂肪肝。脂肪肝是肝毒性的早起表現(xiàn)，如能早起診斷、早期治療，可以阻止脂肪肝的進(jìn)一步發(fā)展，甚至可以使其逆轉(zhuǎn)。治療措施包括：(1)去除病因；(2)調(diào)整飲食；(3)應(yīng)用降脂藥物。許多 中藥對(duì)脂肪肝有效，主要有丹參、決明子、何首烏等。中藥的最大優(yōu)點(diǎn)就是副作用小，具有廣泛的開發(fā)前景。但是關(guān)于中藥的有效成分和作用機(jī)理尚不明確。

在組成機(jī)體蛋白的20種氨基酸中，只有三種帶有支鏈的氨基酸，分別是亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸，合稱為支鏈氨基酸(bcaa)。動(dòng)物體不能自身合成的三種必需氨基酸，必須從外界攝取獲得。bcaa在蛋白質(zhì)合成及降解、能量平衡及營(yíng)養(yǎng)信號(hào)等方面具有調(diào)節(jié)作用。臨床上bcaa可通過調(diào)整代謝來治療和預(yù)防重癥肝炎，且可恢復(fù)衰竭肝臟的代謝功能，即表明bcaa的補(bǔ)充療法對(duì)肝損傷的治療作用。另外研究發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病患者體內(nèi)下調(diào)bcaa的分解代謝，且bcaa在脂類代謝方面具有一定的作用。

脂肪肝發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，需要多靶點(diǎn)干預(yù)，中醫(yī)藥由于其多靶點(diǎn)作用在脂肪肝的預(yù)防上占有重要位置。有研究表明，銀杏葉提取物在調(diào)節(jié)高脂飲食大鼠的肝臟和血液的膽固醇水平有一定的作用，且對(duì)高脂飲食大鼠的脂肪沉積具有抑制作用。同時(shí)，已有報(bào)道表明，銀杏葉提取物對(duì)脂肪肝的具有減輕作用。中國申請(qǐng)cn200510127742.1，cn200510038908.2，cn201410612953.3均以不同形式揭示銀杏葉提取物在制備治療脂肪肝和/或脂肪變性的藥物中的應(yīng)用。

目前為止，現(xiàn)有技術(shù)中沒有關(guān)于銀杏葉提取物與支鏈氨基酸的組合在制備治療脂肪肝和脂肪變性的報(bào)道。針對(duì)銀杏葉提取物在治療脂肪肝的同時(shí)，支鏈氨基酸的保護(hù)肝損傷作用及脂類代謝的調(diào)節(jié)是否能夠提高銀杏葉提取物的治療效果，已有技術(shù)也沒有類似的暗示或嘗試。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的第一目的在于提供銀杏提取物和支鏈氨基酸在制備預(yù)防/治療脂肪肝和/或脂肪變性的藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明所述的銀杏提取物是指以銀杏為原料，經(jīng)提取后得到的混 合物，所述混合物中主要成分包括銀杏黃酮類、銀杏萜內(nèi)酯類化合物。本發(fā)明所述的銀杏提取物尤其優(yōu)選以醇提-酯萃法提取得到。

作為最理想的實(shí)施方式，本發(fā)明所述的銀杏提取物為銀杏提取物gbe(即標(biāo)準(zhǔn)化提取銀杏葉提取物)，可從willmarschwabe博士(德國)獲得。

本發(fā)明所述的支鏈氨基酸為亮氨酸、纈氨酸和異亮氨酸的混合物，可市售購得。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述支鏈氨基酸具體成分為44.0％亮氨酸,25.5％異亮氨酸，30.5％纈氨酸，可購自于美國sigma公司。

本發(fā)明發(fā)現(xiàn)銀杏葉提取物在調(diào)節(jié)高脂飲食大鼠的肝臟和血液的膽固醇水平有一定的作用，且對(duì)高脂飲食大鼠的脂肪沉積具有抑制作用，且對(duì)脂肪肝的重要因素甘油三酯的水平有控制作用。而進(jìn)一步結(jié)合支鏈氨基酸的組合有利于銀杏葉提取物提高對(duì)脂肪肝的治療效果，加強(qiáng)對(duì)肝臟的保護(hù)及預(yù)防脂肪肝的形成。

另外，本發(fā)明進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，當(dāng)銀杏葉提取物與支鏈氨基酸的質(zhì)量比為1：1～4時(shí)，二者的協(xié)同效應(yīng)最為顯著，尤其是銀杏葉提取物和支鏈氨基酸的質(zhì)量比為1:1、1:2和1:4時(shí)，對(duì)脂肪肝和脂肪變性的預(yù)防/治療效果最好。

本發(fā)明所述的脂肪肝是指由于各種原因引起的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積過多的病變，如營(yíng)養(yǎng)過剩、肥胖、糖尿病、高脂血癥和營(yíng)養(yǎng)不良中的任一種或多種因素造成的脂肪肝；具體的臨床表現(xiàn)包括疲勞、惡心、食欲不振、腹脹、肝區(qū)疼痛等，病理表現(xiàn)包括肝臟較大程度重大、表面光滑、質(zhì)地中等應(yīng)變、大泡性肝脂肪變性、肝纖維化和肝硬化等。其中，銀杏葉提取物與支鏈氨基酸聯(lián)用對(duì)于脂肪肝的預(yù)防和治療都具有突出的活性，其中，尤其對(duì)于原發(fā)性脂肪肝和非酒精性脂肪肝的療效更為顯著。

本發(fā)明所述的脂肪變性是指除脂肪細(xì)胞外的實(shí)質(zhì)細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)脂 滴或脂滴明顯增多的現(xiàn)象，多發(fā)生于肝細(xì)胞。肝臟的脂肪變性與肝臟的脂肪代謝有關(guān)。當(dāng)肝臟脂肪代謝過程中的任何一個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)生障礙，均可造成肝細(xì)胞的脂肪變性：①脂蛋白的合成發(fā)生障礙；②中性脂肪合成過多；③脂肪酸氧化障礙。肝臟脂肪變性的病理變化表現(xiàn)為肝增大，色變黃，觸之質(zhì)如泥塊并有油膩感。微血管局部壞死，肝細(xì)胞氣球樣變。光鏡下早期肝脂肪變性，可表現(xiàn)為在肝細(xì)胞核周圍出現(xiàn)小的脂肪空泡。之后隨著脂肪變性的加重，空泡逐漸變大，分布于整個(gè)胞漿中。嚴(yán)重者融合成一個(gè)大泡，將細(xì)胞核擠向一邊，形態(tài)與脂肪細(xì)胞類似。肝淤血時(shí)，小葉中央?yún)^(qū)缺血較重，因此脂肪變性首先在中央?yún)^(qū)發(fā)生。其中，銀杏葉提取物與支鏈氨基酸聯(lián)用對(duì)于脂肪變性的預(yù)防和治療都具有突出的活性，其中，尤其對(duì)于肝臟表面脂肪空泡較多的肝臟脂肪變性的療效更為顯著。

本發(fā)明同時(shí)提供了一種用于預(yù)防/治療脂肪肝和/或脂肪變性的組合物，所述組合物的活性成分包括銀杏葉提取物與支鏈氨基酸。

優(yōu)選地，所述組合物中，銀杏葉提取物與支鏈氨基酸的質(zhì)量比為1：1～4。

更優(yōu)選地，所述銀杏葉提取物與支鏈氨基酸的質(zhì)量比為1：1、1：2或1:4。

本發(fā)明所述的組合物，除活性成分外，還可以進(jìn)一步加入藥學(xué)上可接受的載體以進(jìn)一步制備成制劑。

有關(guān)藥學(xué)上可接受的載體的匯編可以在《藥物賦形劑手冊(cè)》等工具書中找到。尤其是，所述的載體包括賦形劑，如淀粉、水等；潤(rùn)滑劑，如硬脂酸鎂等；崩解劑，如微晶纖維素等；填充劑，如乳糖等；粘結(jié)劑，如預(yù)膠化淀粉、糊精等；甜味劑；抗氧化劑；防腐劑、矯味劑、香料等。

其中，所述藥物以片劑、膠囊劑、丸劑、散劑、顆粒劑、糖漿劑、溶液劑、乳劑、注射劑、噴霧劑、氣霧劑、凝膠劑、霜?jiǎng)┗蛸N膏劑形 式存在。在制劑過程中，關(guān)于具體的輔料選擇、處方設(shè)計(jì)及制備工藝等均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所掌握，本發(fā)明對(duì)此不作特別限定。

本發(fā)明對(duì)銀杏葉提取物+支鏈氨基酸的藥理機(jī)制的闡明將有助于其進(jìn)一步開發(fā)，為脂肪肝和脂肪變性提供新的藥物靶點(diǎn)及先導(dǎo)化合物。

本發(fā)明主要針對(duì)gbe與bcaa的組合對(duì)去卵巢雌性大鼠體內(nèi)脂肪肝和脂肪變性的作用及其藥理機(jī)制，通過肝臟組織學(xué)分析和脂類代謝相關(guān)蛋白的表達(dá)分析，證實(shí)了gbe與bcaa對(duì)脂肪肝的預(yù)防/治療效果。經(jīng)試驗(yàn)證明，其對(duì)脂肪肝和脂肪變性均可以獲得較好的效果，同時(shí)在肝損傷及防止脂肪肝的形成上具有保護(hù)作用。另外通過體內(nèi)試驗(yàn)研究了gbe與bcaa的組合方式，為兩者治療和防止脂肪肝提供依據(jù)。bcaa的加入提高了gbe在治療脂肪肝和脂肪變性的作用，在治療脂肪肝時(shí)更為安全。

附圖說明

圖1為肝臟組織學(xué)分析示意圖，左列為蘇木精和伊紅染色的石蠟切片，右列為油紅o染色的冰凍切片，比例＝50μm；

圖2為gbe與bcaa對(duì)大鼠肝臟甘油三酯含量影響的示意圖，數(shù)據(jù)表示方法為均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，n＝10；a-c:同行均值具有不同肩標(biāo)，差異顯著(p<0.05)；

圖3為gbe與bcaa對(duì)大鼠肝臟cpt-1a蛋白表達(dá)影響示意圖，數(shù)據(jù)表示方法為均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，n＝10；a-c:同行均值具有不同肩標(biāo)，差異顯著(p<0.05)；

圖4為gbe與bcaa對(duì)大鼠肝臟cpt-1a酶活性影響的示意圖，數(shù)據(jù)表示方法為均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，n＝10；a-c:同行均值具有不同肩標(biāo)，差異顯著(p<0.05)；

圖5為不同比例gbe與bcaa對(duì)大鼠brl3a肝細(xì)胞cpt-1a蛋白表達(dá)影響示意圖，數(shù)據(jù)表示方法為均值±標(biāo)準(zhǔn)誤；a-c:同行均值具 有不同肩標(biāo)，差異顯著(p<0.05)。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明通過高脂飼料及高脂飼料組添加100mggbe/kg、100mgbcaa/kg、100mggbe/kg+100mgbcaa/kg體重，飼養(yǎng)210克雙側(cè)卵巢切除的雌性大鼠12周。試驗(yàn)結(jié)束后，處死大鼠，采集肝臟組織。通過肝組織學(xué)分析、肝臟甘油三酯含量、cpt-1a活性的測(cè)定以及westernblot測(cè)定cpt-1a蛋白的表達(dá)，來闡述銀杏葉提取物對(duì)脂肪肝和肝臟脂肪變性的影響及作用機(jī)制。通過油酸(oa)和棕櫚酸(pa)誘導(dǎo)大鼠brl3a肝細(xì)胞脂肪肝，通過添加gbe與bcaa的不同比例探究二者之間最佳的治療脂肪肝的組合。

實(shí)驗(yàn)例1：

供試樣品來源：gbe(標(biāo)準(zhǔn)化提取銀杏葉提取物)從willmarschwabe博士(德國)獲得；支鏈氨基酸(44.0％亮氨酸,25.5％異亮氨酸，30.5％纈氨酸)購自于美國sigma公司。

動(dòng)物來源：sd大鼠，雌性，體重210g，購自北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心；

飼料配方：基礎(chǔ)飼料參照美國營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)(ain)-93嚙齒動(dòng)物的日糧，含大豆粉及無苜蓿粉。高脂飼料(hfd)為ain-93改良配方，含有35％的脂肪(60％脂肪能量)。

分組和處理：40只210克雙側(cè)卵巢切除(ovx)的雌性大鼠，經(jīng)適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，隨機(jī)分成4組(n＝10)，即：

高脂飼料組(對(duì)照組，灌胃玉米油)；

高脂飼料添加gbe組(灌胃，玉米油中添加100mggbe/kg體重)；

高脂飼料添加bcaa組(灌胃，玉米油中添加100mgbcaa/kg體重)；

高脂飼料添加gbe+bcaa組(灌胃，玉米油中添加100mggbe/kg和100mgbcaa/kg體重)；

試驗(yàn)方法：每周5天灌胃。飼養(yǎng)12周后，處死大鼠，采集肝臟組織。以上動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的所有操作都是符合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)指南，并經(jīng)中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)道德委員會(huì)批準(zhǔn)。

試驗(yàn)結(jié)果：

(1)福爾馬林固定和石蠟包埋的肝組織經(jīng)過常規(guī)的蘇木精和伊紅染色。用油紅o染色冰凍切片測(cè)定脂肪沉積。肝臟組織學(xué)根據(jù)脂肪變性、炎癥細(xì)胞、肝細(xì)胞氣球樣變、炎癥活動(dòng)度和纖維化程度進(jìn)行檢查和評(píng)分。

根據(jù)肝臟組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，高脂飼料飼喂12周后，大鼠出現(xiàn)了嚴(yán)重的脂肪變性，表現(xiàn)為肝臟微血管局部壞死和炎癥(圖1)。另一方面，添加gbe可以很好的緩解肝臟脂肪變性。通過組織切片發(fā)現(xiàn)在gbe添加組中，門靜脈周圍和靜脈周圍區(qū)域含有較少和較小的壞死點(diǎn)。高脂飼料組添加gbe、bcaa、gbe+bcaa均顯著降低脂肪變性(表1)。此外，通過檢測(cè)大鼠肝臟中炎癥細(xì)胞的滲透物，相比于對(duì)照組，添加gbe、bcaa、gbe+bcaa組的炎癥細(xì)胞的數(shù)量均下降。另外，通過觀察大鼠肝臟炎癥活動(dòng)度和纖維化程度，發(fā)現(xiàn)gbe和bcaa單獨(dú)添加均能降低這兩項(xiàng)的評(píng)分，且gbe與bcaa的組合添加效果更佳顯著，能夠更好的緩解脂肪的變性情況。因此gbe與bcaa的組合能夠通過降低肝臟炎癥活動(dòng)度和纖維化程度來更好的緩解肝臟的脂肪變性。

表1高脂誘導(dǎo)ovx大鼠肝臟組織病理學(xué)病變情況

脂肪變性等級(jí)評(píng)分平均值，等級(jí)為0～4，根據(jù)在h&e染色每個(gè)區(qū)域的肝細(xì)胞脂肪沉積的平均百分，200×的放大倍數(shù)(分級(jí)0＝<5％，1＝5～25％，2＝26～50％，3＝51～75％，4＝75％)；

炎癥是根據(jù)隨機(jī)10個(gè)區(qū)域炎性細(xì)胞的數(shù)目，200×的放大倍數(shù)(表示為平均值±sem，n＝6)。計(jì)算數(shù)值的平均值，表示為炎癥細(xì)胞/mm²；

§肝細(xì)胞氣球樣變的評(píng)分為負(fù)數(shù)(不存在)或正數(shù)(存在)；

ξ炎癥活動(dòng)度計(jì)分分為匯管區(qū)(p)、小葉內(nèi)(l)、碎屑?jí)乃?pn)及橋接壞死(bn)四項(xiàng)，每項(xiàng)依病變輕、中、重程度分別計(jì)以1、3、4分,計(jì)分公式為p+l+2(pn+bn)。因?yàn)閎n、pn的嚴(yán)重度與預(yù)后直接相關(guān)，故其計(jì)分2倍于其它病變，在實(shí)際應(yīng)用中，對(duì)二者依其輕、中、重程度直接計(jì)以2、6、8分，總分為四項(xiàng)計(jì)分之和；

ζ纖維化計(jì)分分中央靜脈周和竇周(l)、匯管區(qū)(p)及纖維隔(s)三項(xiàng)，“中央靜脈周及竇周”纖維化僅限于小葉內(nèi)尚未構(gòu)成纖維間隔者，程度相對(duì)較輕，依輕、重程度分別計(jì)1、2分；“匯管區(qū)”依纖維化范圍是單純擴(kuò)大、有隔相連或已發(fā)生肝硬化給予1、2、3分；“纖維隔”的計(jì)分依間隔的數(shù)量(n)與寬度(w)及間隔內(nèi)膠原沉積密度綜合評(píng)分，如僅見一個(gè)極細(xì)間隔，則寬度計(jì)以0.5分，纖維化占肝穿標(biāo)本2/3，計(jì)4分。總分為p+l+2(n×w)。

*表示p<0.05，**表示p<0.001，與hfd相比。

(2)大鼠肝臟甘油三酯的含量

酶法試劑盒測(cè)定甘油三酯。大鼠肝臟甘油三酯含量如圖2所示，高脂飼料組的肝臟甘油三酯含量均高于其余三個(gè)處理組，gbe和bcaa單獨(dú)添加均顯著降低肝臟甘油三酯的含量，且兩者之間的作用 沒有顯著性差異。另外，gbe與bcaa的組合添加到高脂飼料的大鼠中，發(fā)現(xiàn)顯著降低了肝臟甘油三酯的含量，且組合效果顯著強(qiáng)于gbe與bcaa的單獨(dú)作用，二者具有一定的疊加效應(yīng)(協(xié)同增效作用)。因此，二者的聯(lián)用對(duì)于脂肪肝的治療起到顯著的效果。

(3)大鼠肝臟cpt-1a表達(dá)和cpt-1a的活性

按照商業(yè)cpt-1a活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定大鼠肝臟cpt-1a的活性，westernblot測(cè)定cpt-1a蛋白表達(dá)。蛋白電泳轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯膜(pvdf)，封閉后孵育一抗(0.2mg/ml)(santacruzbiotechnology)，再孵育結(jié)合有辣根過氧化物酶二抗(hrp)。使用增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光(ecl)hrp底物(pierce,rockford,il)進(jìn)行免疫復(fù)合物的測(cè)定。用nihimagej程序進(jìn)行定量。

cpt-1a作為線粒體脂肪酸運(yùn)輸?shù)年P(guān)鍵酶，可調(diào)節(jié)線粒體內(nèi)部脂質(zhì)代謝，減少脂肪沉積。westernblot結(jié)果發(fā)現(xiàn)gbe組顯著提高肝臟cpt-1a的蛋白表達(dá)(圖3)，而bcaa組對(duì)肝臟cpt-1a的蛋白表達(dá)無顯著性作用，但是gbe與bcaa的組合顯著的提高肝臟cpt-1a的表達(dá)，且二者的協(xié)同效果顯著強(qiáng)于單獨(dú)添加gbe組的效果，能夠更有效的防止肝臟的脂肪沉積。同時(shí)，cpt-1a活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定也發(fā)現(xiàn)gbe與bcaa的組合添加能夠更有效的提高肝臟cpt-1a的活性，促進(jìn)脂肪酸的氧化。因此，gbe與bcaa的組合疊加效應(yīng)能夠更好的促進(jìn)脂肪酸的氧化，防止肝臟脂肪的沉積，對(duì)脂肪肝的治療更有效。

實(shí)驗(yàn)例2：gbe與bcaa不同比例對(duì)大鼠brl3a肝細(xì)胞cpt-1a表達(dá)的影響

大鼠肝細(xì)胞brl3a細(xì)胞系購自中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫，培養(yǎng)在含10％胎牛血清的dmem/f-12培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基中含有100u/ml的青霉素，50μg/ml的鏈霉素，細(xì)胞培養(yǎng)在37℃，5％co2的培養(yǎng)箱中。培養(yǎng)基兩天更換一次。細(xì)胞用1mm的油酸(oa) 和棕櫚酸(pa)(oa:pa＝2:1)處理24小時(shí)，誘發(fā)脂肪變性，模擬體內(nèi)脂肪肝。同時(shí)用200μg/mlgbe、200μg/mlbcaa、200μg/mlgbe+bcaa(25、50、100、200、400、800、1600μg/ml)等處理細(xì)胞24小時(shí)，然后收集細(xì)胞用于后續(xù)的westernblot分析檢測(cè)肝細(xì)胞cpt-1a蛋白表達(dá)，具體步驟參照實(shí)驗(yàn)例1。

westernblot結(jié)果發(fā)現(xiàn)200μg/mlgbe不能顯著提高大鼠肝細(xì)胞cpt-1a蛋白的表達(dá)，而同濃度的bcaa卻可以顯著的提高oa/pa誘導(dǎo)的大鼠brl3a肝細(xì)胞cpt-1a的蛋白表達(dá)，緩解脂肪酸導(dǎo)致的脂肪肝。當(dāng)gbe與bcaa組合添加到脂肪酸誘導(dǎo)的大鼠brl3a肝細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)gbe與bcaa的添加比例為8:1和4:1時(shí)，其對(duì)cpt-1a的表達(dá)與對(duì)照組無顯著差異，而當(dāng)其二者比例為2:1時(shí)，對(duì)cpt-1a的蛋白表達(dá)有顯著的提高，與對(duì)照組相比，能夠顯著提高細(xì)胞脂肪酸的氧化。當(dāng)bcaa的添加量增多，即gbe與bcaa的添加比例1:1、1:2、1:4時(shí)，三組極顯著的提高細(xì)胞cpt-1a的蛋白表達(dá)，且作用效果顯著強(qiáng)于其他處理組。另外當(dāng)添加比例為1:8時(shí)，細(xì)胞中cpt-1a的蛋白表達(dá)下降，恢復(fù)到與對(duì)照組沒有顯著差異的水平，這可能與高濃度bcaa之間存在的拮抗作用有關(guān)(圖5)。由此可見gbe與bcaa的組合在體內(nèi)試驗(yàn)中也可以顯著的緩解大鼠肝細(xì)胞的脂肪肝，且gbe與bcaa的添加比例為1:1～1:4，尤其1:1、1:2、1:4時(shí)，其作用效果最佳。

實(shí)施例1

本實(shí)施例提供了一種藥物組合物，該藥物組合物中，銀杏葉提取物與支鏈氨基酸的質(zhì)量比為1:1。

實(shí)施例2

本實(shí)施例提供了一種藥物組合物，該藥物組合物中，銀杏葉提取物與支鏈氨基酸的質(zhì)量比為1:2。

實(shí)施例3

本實(shí)施例提供了一種藥物組合物，該藥物組合物中，銀杏葉提取物與支鏈氨基酸的質(zhì)量比為1:4。

雖然，上面以最佳實(shí)施例詳細(xì)說明了本發(fā)明，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)知曉，在不偏離本發(fā)明思想和精神的前提下，對(duì)本發(fā)明做出的任何改進(jìn)和修飾，仍屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍內(nèi)。