本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及藥理學(xué)，即涉及用于治療與由病理過(guò)程引起的能量勢(shì)(能量潛能，energypotential)缺乏相關(guān)的各種病癥的藥物組合物。

在上個(gè)世紀(jì)七十年代在v.m.vinogradov教授的領(lǐng)導(dǎo)下，在軍事醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系合成和研究了bemithyl(苯咪希爾)。它是在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中建立的(bobkovyu.g.等人，1981和其他)，然后在臨床研究中被證明(loseva.s.等人，1990；smirnova.v.等人，1990；stroganovv.p.等人，1990；shakhnazarova.s.等人，1990；sytniks.i.，pastushenkovv.a.，1993)，即使在單次使用后，bemithyl顯著改善動(dòng)物的體力勞動(dòng)能力，并且在極限載荷之后加速其恢復(fù)，特別是在復(fù)雜的條件下，諸如高空缺氧、高熱、快速前進(jìn)等)。

在使用過(guò)程中，在3-5天內(nèi)bemithyl的作用上升，然后穩(wěn)定地維持在所達(dá)到的水平上(smirnova.v.，1993；bobkovyu.g.等人，1993)，在速度和達(dá)到的效果上較吡拉西坦(piracetam)和吡硫醇(pyriditolum)的作用優(yōu)越(alexandrovskyyu.a.等人，1988)。

一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)揭示了bemithyl的肝保護(hù)作用(alexandrovaa.i.等人，1988)，在顱腦出血模型中治療急性腦血管障礙方面獲得了積極結(jié)果(plotnikovat.m.等人，1993)，與實(shí)驗(yàn)性腹膜炎情況下的小腸粘膜有關(guān)的修復(fù)作用(starokonp.m.，larinyu.n.，1999)。

此外，還描述了以下的bemithyl的能力：

·提高抗氧化酶，特別是超氧化物歧化酶活性的能力(katkovv.f.等人，1989；shakhnazarova.s.等人，1990)；

·比谷胱甘肽更有效的、在體外使氫過(guò)氧化物失活的能力(dizhea.a.等人，2002)；

·實(shí)驗(yàn)中急性低氧期間阻礙恢復(fù)的谷胱甘肽含量、sh基團(tuán)、肝谷胱甘肽還原酶和肝臟谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性降低的能力以及加強(qiáng)谷胱甘肽系統(tǒng)抗氧化酶的合成的能力(zarubinai.v.，mironovao.p.，2002)；

·誘導(dǎo)混合型p-450細(xì)胞色素活性，同時(shí)增加微粒體總p-450細(xì)胞色素含量和單加氧酶活性的能力(sorokinaye.a.等人，2002)；

·降低患者中的血液乳酸鹽水平(leoskov.a.等，1996)和通過(guò)間接抗自由基方法確定的lpo強(qiáng)度(plotnikovm.b.等人，1988，1990)的能力；

·在實(shí)驗(yàn)中部分肝切除術(shù)后促進(jìn)肝臟再生的能力(gaivoronskayav.v.等人，2002)；

·引起抗誘變作用(antimutageneeffect)的能力(durneva.d.等人，1988)。

提出了一個(gè)假設(shè)，根據(jù)該假設(shè)，bemithyl(2-乙基硫代苯并咪唑氫溴酸鹽(2-ethylthiobenzimidazolehydrobromide))及其類似物——2-硫代苯并咪唑的衍生物的作用機(jī)理是基于各種細(xì)胞中rna合成的活化，引起蛋白質(zhì)合成的強(qiáng)化。這種作用可能受它們與基因組的相互作用調(diào)節(jié)，可能是由于苯并咪唑和嘌呤堿基——腺嘌呤和鳥嘌呤的結(jié)構(gòu)相似性(smirnova.v.，1993；smirnova.v.等人，1994)。這種效應(yīng)不是器官特異性的或組織特異性的，但是在那些其中rna和因此的蛋白質(zhì)的合成過(guò)程是活躍的器官和組織中，其總是更顯著。

有趣的是，作為苯并咪唑衍生物的藥物制劑包括相當(dāng)不同的用途多種方法并具有不同治療方向，例如，抗精神病藥(匹莫齊特)、活性保護(hù)劑(actiprotective)(bemithyl、etomerzole(依托美唑))、抗心律失常藥(mibefradil(米貝拉地爾)、rhythidazole(瑞莫硝唑))、抗?jié)兯?奧美拉唑、gastrozol(蓋斯落唑)、泮托拉唑)、抗過(guò)敏藥(阿司咪唑)、尿酸促排藥(伊替馬唑)、抗寄生蟲藥(甲苯達(dá)唑、噻苯咪唑)。還存在一組苯并咪唑衍生物(芬苯達(dá)唑、奧芬達(dá)唑、帕苯達(dá)唑、三氯苯達(dá)唑)，其在獸醫(yī)中用作抗寄生蟲藥。這是否意味著它們都合成蛋白質(zhì)？

有趣的是，咪唑本身，如心肌缺血模型的實(shí)驗(yàn)所顯示的(smithe.f.等人，1980)，由于特異性抑制凝血惡烷-a2-合成酶，表現(xiàn)出心臟保護(hù)作用。凝血惡烷-a2-合成酶是冠狀動(dòng)脈收縮劑(coronaro-constrictor)并在局部缺血時(shí)增加其活性，可能會(huì)根據(jù)“惡性循環(huán)(viciouscircle)”原則導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈血流進(jìn)一步惡化。

a.v.smirnov和v.yu.gancho(1990)表示，蛋白質(zhì)合成主要在腦中增加，并且正如他們所解釋的那樣，這在使用bemithyl時(shí)提高記憶力。

但是，無(wú)論如何，確立了，為了保持高水平的交換以及體力勞動(dòng)能力，在產(chǎn)量高時(shí)(例如在增強(qiáng)的肌肉活動(dòng)時(shí))確保在各種條件下乳酸的利用和葡萄糖再合成的糖異生在肝和腎中積極進(jìn)行是必須的。糖異生酶涉及相當(dāng)短的活性蛋白質(zhì)，并且它們不斷更新。

正是這些酶的增加的合成是對(duì)于提高體力勞動(dòng)能力最重要的bemithyl作用機(jī)制的組成部分。此外，bemithyl及其類似物激活蛋白質(zhì)的合成，確保這些制劑典型的節(jié)約效應(yīng)，減少生物體中的氧消耗和熱量形成，減少支出能源，包括每單位已完成工作的能源。

yu.g.bobkov等人(1993)提出了bemithyl作用機(jī)制的另一個(gè)假設(shè)并強(qiáng)調(diào)，在實(shí)驗(yàn)中，該制劑能夠“加速超氧自由基和其他游離自由基轉(zhuǎn)化成分子氧，其隨后由于抗氧化酶即sod、過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活化而在代謝循環(huán)中直接使用”。讓我們把這個(gè)機(jī)制留給作者的良知。

雖然bemithyl是一種有效的修復(fù)和復(fù)原作用的手段，并在各種條件下抑制衰弱和增加勞動(dòng)能力，也可以在急性低氧時(shí)使用bemithyl。

有趣的是間歇性低氧療法的現(xiàn)代訓(xùn)練方法(根據(jù)該方法，出于預(yù)防性(預(yù)調(diào)節(jié))和治療性目的在患者中產(chǎn)生人造低氧性低氧)規(guī)定了使用稱為“方法校正劑”。在具有這種原始“治療性”低氧的模型實(shí)驗(yàn)中，bemithyl證實(shí)其本身為“刺激腦、心臟、肝臟、腎臟和骨骼肌中的適應(yīng)性代謝變化的發(fā)展”的可靠的保護(hù)劑(zarubinai.v.，2001)。

獲得了令人鼓舞的臨床數(shù)據(jù)支持bemithyl對(duì)于阻止在與人工血液循環(huán)的心臟手術(shù)相關(guān)的急性梗死、在有妊娠中毒的孕婦體內(nèi)胎兒的慢性低氧癥、在慢性呼吸道損害，(respiratorycompromise)和病毒性肝炎中的心肌損傷的抗低氧效果(lobzinyu.v.，smirnova.v.，1993；shevchenkoyu.l.等人，1995；semigolovskyn.yu等人，1995，1996，1998；leoskov.a.等人，1996；ryabining.b.等人，1999)。

bemithyl還在臨床上用于神經(jīng)肌肉疾病(進(jìn)展性肌營(yíng)養(yǎng)不良、萎縮性肌強(qiáng)直和繼發(fā)性肌萎縮)。增加肌肉力量和肌酸指數(shù)，降低lpo產(chǎn)物和酶血(fermentemia)(lobzinv.s.，pustozerovv.g.，1993)。存在一些理由預(yù)期bemithyl的腦脊液保護(hù)特性，這是因?yàn)楦鶕?jù)l.m.gayeva和t.n.scherbakova(1994)獲得的數(shù)據(jù)證明在實(shí)驗(yàn)(頸動(dòng)脈結(jié)扎模型，引力)中的其他苯并咪唑衍生物比在這方面甚至比脫水長(zhǎng)春胺己酯(cavinton)、吡拉西坦(pyracetam)、非尼布特(phenibut)和γ-羥基丁酸活性更大。

bemithyl用于還在極端條件(高負(fù)荷、低氧、高熱等)中增加和恢復(fù)勞動(dòng)能力；用于加快和加強(qiáng)適應(yīng)各種極端因素影響的發(fā)展；用于治療各種起源的衰弱性疾患(在神經(jīng)衰弱、軀體疾病情況下，嚴(yán)重感染和中毒后，外科手術(shù)時(shí)在術(shù)前和術(shù)后的時(shí)間期間等)；用在顱腦損傷、腦膜炎、腦炎、紊亂的腦循環(huán)以及記憶力減退的后果的綜合治療中。

在患急性心肌梗死(ami)的患者中使用bemithyl的觀察結(jié)果與1994-1995年(semigolovskyn.yu.，1995，1996，1998)有關(guān)。出于對(duì)其在夜間過(guò)多的精神刺激作用的擔(dān)心，每天兩次——早上和白天，向患者施用這種制劑。接受bemithyl的患者某種程度上更活躍、“更有活力”。觀察到該制劑的“低溫”作用——第5天或第6天患者的體溫有時(shí)低于36.0℃，這對(duì)應(yīng)于bemithyl特性的表征(smirnova.v.，1993；bobkovyu.g.等人，1993；和其他一些)，并且在整體上對(duì)于硫脲衍生物是典型的(pastushenkovl.v.，1968；uryupovo.yu.，1969)。

該制劑沒(méi)有顯示任何明顯的抗心絞痛或抗心律失常作用。與參考指標(biāo)相比，在其使用時(shí)的動(dòng)力學(xué)與參考動(dòng)力學(xué)沒(méi)有顯著差異，除了與參考指數(shù)相比，在梗死后第3或4天alt的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著降低(p<0.05)。這對(duì)應(yīng)于yu.v.lobzin和a.v.smirnov(1993)關(guān)于bemithyl的肝保護(hù)特性的觀察結(jié)果。

制劑保護(hù)性活性研究揭示其在患有ami的患者中的低凝特性，其被在觀察期間主要組中平均凝血酶原指數(shù)的顯著降低(p<0.01-0.05)和ami第5天或第6天平均纖維蛋白原含量的顯著降低(p<0.05)所證明。此外，注意到在bemithyl影響下應(yīng)激性高血糖的快速降低，其對(duì)應(yīng)于其在其他條件下的作用的表征(m.d.mashkovsky，1993)，并且也許意味著當(dāng)用該抗低氧劑(antihypoxant)治療時(shí)底物支持的必要。

加速降低最初必定升高的ecg平均收縮指標(biāo)(p<0.05)，與l.a.novikov(1994)獲得關(guān)于bemithyl肌力活性(肌力作用，inotropicactivity)的數(shù)據(jù)吻合。

當(dāng)使用該制劑時(shí)，我們沒(méi)有觀察到任何副作用。一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)顯示bemithyl、依托美唑和yakton(亞卡酮)能夠在部分肝切除術(shù)后加速肝臟再生(加速肝臟重量增加，升高其核酸含量及糖原含量，改善功能狀態(tài)，其表現(xiàn)為降低血液膽紅素水平和減少己烯醛睡眠(hexenalsleep)的持續(xù)時(shí)間)。

這些藥物的修復(fù)活性優(yōu)于包含再生刺激物、嘌呤和吡啶堿基的衍生物、riboxin(睿布新)和乳清酸鉀的組合的修復(fù)活性(gaivoronskayav.v.等人，2002)。

肉堿

該制劑的國(guó)際非專利名稱是左旋肉堿(levocarnitine，左卡尼汀)。氯化肉堿被制成10％的注射溶液(1ml包含100mg的該物質(zhì))。

該物質(zhì)第一次由v.s.gulevich(1905)從碎肉中分離出來(lái)，但僅在1959年，frits建立了肉堿在脂肪酸的p氧化過(guò)程中的主導(dǎo)作用。1969年，鑒定了由l-肉堿代表的肉堿的生理形式。

人體包含20-25g的這種物質(zhì)，其中約98％的這種物質(zhì)在骨骼肌和心肌之中。成年男子的l-肉堿需求量為200-500g/天。其最大量是在羔羊肉(190mg/100g)中和在鱷梨中。l-肉堿的生物合成主要發(fā)生在肝臟中(在還原鐵和維生素c、b6、b3的合成輔因子參與下來(lái)自賴氨酸和蛋氨酸)，且其主要消耗者是心肌和骨骼肌。有趣的是，壞血病在肌肉組織中引起肉堿缺乏，而其在肝臟、腎臟和血漿中的濃度是不變的。

肉堿的抗低氧特性由l.karen等人(1987)和由a.l.karayev等人(1991)證實(shí)。肉堿涉及積極影響代謝過(guò)程的制劑。除了抗低氧作用外，肉堿還發(fā)揮合成代謝、抗甲狀腺和脂質(zhì)交換刺激、再生作用。

該制劑恢復(fù)血液堿儲(chǔ)備，不影響凝血系統(tǒng)，減少酮酸的形成，增加組織對(duì)有毒腐爛產(chǎn)物影響的抗性，激活有氧過(guò)程并抑制厭氧糖酵解，刺激和加速修復(fù)過(guò)程。

它表現(xiàn)出脂肪動(dòng)員作用，即，包括活性不受氧氣限制的脂肪酸代謝分流，并因此肉堿在急性腦低氧、心肌和其他危重病癥上是有效的。

z.a.suslina等人(2003)研究了l-肉堿在治療糖尿病背景下的非循環(huán)性腦病(discirculatoryencephalopathy)中的抗氧化作用。除了基礎(chǔ)治療之外，l-肉堿制劑(每天2g)增加了患者血清中脂蛋白對(duì)過(guò)氧化的抗性，證明了其抗氧化特性。作者注意到l-肉堿的降血糖作用：其使用能夠?qū)⒔堤撬幬锏膭┝拷档?2％。在用l-肉堿治療的背景下，在檢查患者中觀察到抽象和實(shí)踐思維和記憶的改善。獲得的結(jié)果使得作者能夠推薦將l-肉堿引入到復(fù)合物中用于治療腦血管疾病患者。

該制劑具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用；顯示肉堿阻礙凋亡的形成，定界損傷區(qū)域并恢復(fù)神經(jīng)組織結(jié)構(gòu)。還有一些其他關(guān)于該制劑在非循環(huán)性腦病、各種創(chuàng)傷性和中毒性腦損傷、在急性腦卒中(諸如局部缺血性腦卒中和短暫性腦缺血發(fā)作)的效力的資料。該制劑在急性、亞急性和恢復(fù)期施用。

許多作者揭示了以下各種心臟病時(shí)心肌中肉堿水平的降低：從包括心肌梗塞的局部缺血性疾病到心肌病、原發(fā)性高血壓、瓣膜疾病和充血性心力衰竭(spagnolil.g.等人，1982；bohlesн.等人，1986；regitzv.等人，1990)。

y.masumura等人(1990)表示，心肌中的肉堿缺乏主要與游離肉堿有關(guān)，而由于以醚形式的共軛肉堿(主要是長(zhǎng)鏈肉堿)的增加，總?cè)鈮A的指數(shù)通常保持正常。v.regitz等人(1990)提到肉堿缺乏與左心室射血分?jǐn)?shù)降低的直接關(guān)聯(lián)(雖然不是線性關(guān)聯(lián))，在射血分?jǐn)?shù)低于30％的患者中，肉堿水平特別低。a.patel等人(1990)揭示降低心肌肉堿含量的預(yù)后意義；他們觀察40例患者5年，其中在40例中18例“肉堿缺乏”患者的致死率為33.3％，相比之下具有正常肉堿水平的22例患者的致死率為4.6％。

心肌中肉堿缺乏的原因之一是其在局部缺血時(shí)以及隨后洗脫時(shí)逃逸到血漿中。因此，p.rizzon等人(1989)揭示急性心肌梗死后首個(gè)48小時(shí)內(nèi)血漿中肉堿濃度初步升高；以及g.l.bartels和w.j.remme(1990)專注于在這一過(guò)程中對(duì)一組患有心肌缺血的患者的耳部進(jìn)行電心刺激后血漿中游離肉堿含量的降低，這與沒(méi)有局部缺血或具有無(wú)乳酸的局部缺血的患者相反。

由于細(xì)胞缺血損傷所致的心肌中的肉堿缺乏阻礙了脂肪酸向線粒體中的轉(zhuǎn)移并導(dǎo)致其在細(xì)胞質(zhì)中的積累(poryading.v.，1997；lopaschukg.，2000)。

1979年，l.h.opie提出對(duì)心肌缺血使用肉堿。據(jù)a.i.toleikis等人(1986)，心肌缺血實(shí)驗(yàn)中的肉堿通過(guò)彌補(bǔ)出現(xiàn)的不足提供了保護(hù)作用(a.l.shug，1978)，對(duì)患有心絞痛(stenocardia)和充血性循環(huán)系統(tǒng)不足的病人在臨床上證實(shí)了該事實(shí)(savchukv.i.等人，1991；belozerovyu.m.,1992；kamikawa等人，1984；cherchi等人，1985；fernandezc.等人，1985；orlandog.，rusconic，1986；cacciatorel.等人，1991；borchardu.等人，1994等等)。普通劑量為每日2g，持續(xù)1-6個(gè)月。這些作者注意到患者對(duì)硝酸酯的需求減少，β-腎上腺素阻滯劑和鈣拮抗劑的抗心絞痛作用更強(qiáng)，負(fù)荷耐受性更高。

在患有急性心肌梗死患者中也觀察到肉堿的積極作用，包括其復(fù)雜過(guò)程：心源性休克和心律紊亂(rebuzzia.g.等人，1984；chiariellog.等人，1986；rizzonр.等人，1989；daviniр.等人，1992；corbuccig.g.，lettieriв，1992；corbuccig.g.，lochef.，1993)。該制劑被靜脈內(nèi)引入：在疾病的最初幾小時(shí)內(nèi)高達(dá)21g并口服(每天高達(dá)6g，持續(xù)30天)。觀察到壞死面積和12個(gè)月致死率的減少、血液動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性、該制劑的抗心律失常作用、心肌的增加的收縮力和脂肪酸與尿素的排泄。在心源性休克中使用該制劑促進(jìn)了酸中毒的清除(acidosisliquidation)以及致死率從80％降低到50％(corbuccig.g.，lochef.，1993)。

研究了每日口服攝取2g的l-肉堿持續(xù)1.5-2個(gè)月在治療慢性心力衰竭中的效力(ghidiniо.等人，1988；fernandezс.，1991；borchardu.等人，1994)。這些作者注意到患者的主觀改善、心肌收縮力增加、強(qiáng)心苷、利尿劑、血管擴(kuò)張劑、抗心律失常藥和硝酸酯的服用劑量減少。

該制劑的施用也被指出作為用細(xì)胞抑制劑(特別是蒽環(huán)類家族的細(xì)胞抑制劑)治療中的心臟保護(hù)劑。根據(jù)g.a.lazareva等人(2002)，肉堿減少了溶血毒素(苯肼)中毒時(shí)免疫功能變化的強(qiáng)度。

該制劑也用于運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)中的局部缺血性心臟病、各種心肌病、肥胖癥、糖尿病。存在關(guān)于使用鋅--肉堿的現(xiàn)代建議(150mg每天兩次)，目的在于預(yù)防和治療潰瘍病，增加幽門螺旋桿菌根除的有效性(arakawaт.等人，1990；nishiwakiн.等人，1999)。

描述了肉堿缺乏綜合征(griniol.p.，1988；karpatig.等人，1975；warea.l.等人，1978等)，其本身表現(xiàn)為肌肉疼痛、腎功能衰竭和心力衰竭。眾所周知，兒童心肌病涉及具有連續(xù)發(fā)展的進(jìn)程和加重的預(yù)后(伴高死亡率)的嚴(yán)重的心肌病(leontievai.v.，2001)。原發(fā)性肉堿缺乏的系統(tǒng)形式在臨床上表現(xiàn)為reye綜合征型的嚴(yán)重低血糖癥、腎功能衰竭和腦病(belozerovyu.m.，1992)。使用肉堿的替代療法具有一定的效果。

在兒科中使用該制劑的適應(yīng)癥是：出生傷害和窒息的后果；新生兒的發(fā)育障礙(生長(zhǎng)不足，hypotrophy)和低血壓；新生兒呼吸窘迫綜合征；處于完全腸外營(yíng)養(yǎng)的早產(chǎn)新生兒和進(jìn)行血液透析的兒童的管理；類似于reye綜合征的綜合征(syndromecomplex)(低血糖、低酮血癥、昏迷)，其在兒童攝入丙戊酸的背景下發(fā)展；16歲以下兒童和青少年體重不足；丙酸以及其他“有機(jī)”酸血癥、原發(fā)性(遺傳性)肉堿缺乏癥。

該制劑也用于兒童的厭食、營(yíng)養(yǎng)不足(hypotrophy)、生長(zhǎng)抑制。肉堿增加消化液(胃的和腸的)的分泌和酶活性，改善消化。它降低了超重體重并減少了肌肉的脂肪含量。

另一方面，二次獲得的肉堿缺乏以其積極排泄(血液透析、攝入丙戊酸)、以過(guò)度消耗(局部缺血性損傷、損傷、恢復(fù)、懷孕)、以食物接受異常(腸外營(yíng)養(yǎng)、吸收不良、腸道疾病)、以腎臟中異常的再吸收(慢性腎功能衰竭)而發(fā)展。

該制劑提高了抵抗體力負(fù)荷的閾值，導(dǎo)致負(fù)荷后酸中毒的清除，并因此，在長(zhǎng)期消耗性負(fù)荷之后恢復(fù)勞動(dòng)能力。它增加肝臟和肌肉中的糖原儲(chǔ)備，促進(jìn)其更經(jīng)濟(jì)的使用。該制劑單獨(dú)施用或以復(fù)合治療施用。

靜脈內(nèi)引入后已經(jīng)3小時(shí)內(nèi)血液中未檢測(cè)到肉堿。它容易滲入肝臟、心肌，更慢地進(jìn)入肌肉。其主要作為?；ケ荒I臟排出。

肉堿被緩慢地逐滴地靜脈內(nèi)引入(一分鐘不超過(guò)60滴！)。在引入之前，將每100mg的氯化肉堿制劑(1ml的10％-30％溶液)溶解在50ml的nacl的等滲溶液或5％的葡萄糖溶液中。

在急性疾病期間，前三天以每1kg患者體重10-14mg的量引入肉堿，且隨后幾天以每1kg體重7mg的量引入肉堿。總療程為7-10天。如有必要，10-12天內(nèi)重復(fù)該療程，每1kg體重引入7mg，持續(xù)3-5天。

急性心肌梗死時(shí)，使用該制劑以100-200mg/kg的日劑量分4次攝入或連續(xù)靜脈輸注48小時(shí)，隨后劑量降低2倍。慢性血液透析患者在定期檢查結(jié)束后立即接受單次劑量2g。

如果在非循環(huán)性腦病和各種腦部感染的亞急性和恢復(fù)期中施用該制劑，則患者接受0.5-1.0g的氯化肉堿一天一次持續(xù)3-5天。如有必要，12-14天內(nèi)重復(fù)該過(guò)程。

在血液透析期間使用肉堿能夠消除血液脂質(zhì)譜的偏差(降低甘油三酯和膽固醇水平，增加高密度脂蛋白的含量)，降低低血壓的頻率和心律紊亂，促進(jìn)紅細(xì)胞和血紅蛋白的增加，能夠減少紅細(xì)胞生成素的劑量。

就副作用而言，肉堿可能會(huì)引起過(guò)敏反應(yīng)。在快速靜脈引入的情況下，沿著靜脈可能出現(xiàn)疼痛，這可以通過(guò)降低引入速度來(lái)除去?；加刑悄虿〔⒔邮芤葝u素和口服降糖藥物的患者可能發(fā)生低血糖。還描述了上腹部的疼痛感覺(jué)，消化不良、肌無(wú)力的出現(xiàn)。

糖皮質(zhì)激素促進(jìn)組織中的肉堿積累(肝除外)，其他合成代謝物加劇其作用。

除了對(duì)該制劑的個(gè)體敏感性較高之外，沒(méi)有描述禁忌癥。

如已經(jīng)說(shuō)明的那樣，與乙基硫代苯并咪唑有關(guān)的物質(zhì)被詳細(xì)描述，特別是在以下專利中：

ru1251374：使用2-乙基-硫代苯并咪唑溴化物作為顯示出活性保護(hù)作用(actoprotectiveaction)、心理能量作用和抗低氧作用的精神藥物；

ru2061686：使用顯示弱鎮(zhèn)靜活性的2-乙基硫代苯并咪唑氫溴酸鹽和鹽酸鹽的衍生物的藥物組合物；

ru2157684：與發(fā)揮中度精神刺激作用的一組活性保護(hù)劑(actoprotector)相關(guān)的藥物制劑，其中活性成分是用于治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的2-乙基-巰基苯并咪唑氫溴酸鹽。作為具有低氧活性的組合物，當(dāng)刺激心理和身體功能時(shí)，它被用于邊緣性精神障礙(borderlinepsychiatricdisorder)；

ru2188012：使用2-乙基-巰基苯并咪唑溴化物治療患有原發(fā)性膽汁性肝硬化患者作為免疫調(diào)節(jié)劑，該免疫調(diào)節(jié)劑作用于免疫應(yīng)答的細(xì)胞臂并協(xié)助提高用于肝硬化復(fù)合治療的其他定向作用制劑的有效性；

ru2173144：使用包含作為活性成分的2-乙基硫代苯并咪唑氫溴酸一水合物的衍生物的活性保護(hù)劑用于治療dushenne-bekker肌營(yíng)養(yǎng)不良。

這種衍生物由于其與嘌呤堿基的結(jié)構(gòu)相似性而加強(qiáng)線粒體酶的合成，增加肌肉組織的能量勢(shì)并刺激氧化還原過(guò)程。肌肉組織的能量勢(shì)的增加有助于蛋白質(zhì)和酶合成的活化，這導(dǎo)致肌細(xì)胞膜的較低滲透性，促進(jìn)肌肉再生和肌營(yíng)養(yǎng)不良過(guò)程的減緩。

ru2017483：使用包含2-乙基硫代苯并咪唑氫溴酸鹽一水合物的藥物制劑作為用于改善生物體低氧耐受性，和用于在高體力負(fù)荷下及在不利因素的影響下恢復(fù)勞動(dòng)能力以及用于消除多藥治療(polypragmasia)，用于預(yù)防職業(yè)聽(tīng)力損失的手段。

ru2019161：用于在地磁風(fēng)暴期間預(yù)防急性青光眼發(fā)作；

ru2138263：使用2-乙基硫代苯并咪唑氫溴酸鹽，用于治療婦女的下丘腦-垂體缺陷，利用改善腦抵抗窒息和循環(huán)低氧的作用，所述作用表現(xiàn)為腦循環(huán)明顯增加，改善對(duì)腦的氧供應(yīng)以及減緩神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞線粒體的能量功能退化的作用。

作為最接近的類似物，可以提及制劑bemactor(terramedicanova，no.4'98pharmacianews“bemactor”是一種常規(guī)醫(yī)學(xué)實(shí)踐的新制劑)。該制劑引起明顯的抗衰弱作用并加速各種疾病的恢復(fù)過(guò)程。bemactor被制成片劑(“icn-octyabr”企業(yè))。但其制造終止于1999年。醫(yī)生和病人無(wú)法獲得。作為對(duì)其使用狀態(tài)的建議，其以250至500mg的劑量口服2-3天或5-7天(但由于可能的過(guò)多的精神激活作用而不超過(guò)10-12天)使用。

當(dāng)創(chuàng)造本發(fā)明時(shí)，目的是找到一種能夠在生物體能量缺乏的病癥中發(fā)揮聯(lián)合生物學(xué)效應(yīng)的藥物制劑。

這個(gè)目標(biāo)是通過(guò)激活用于代謝過(guò)程發(fā)揮功能的能量供應(yīng)系統(tǒng)的兩種藥劑的新組合來(lái)解決的，并且在這樣做的同時(shí)，沒(méi)有通過(guò)任何手段在影響激活機(jī)制方面彼此交叉。在這種組合的基礎(chǔ)上，已經(jīng)開發(fā)了用于糾正衰弱和/或慢性疲勞綜合征的癥狀或治療衰弱和/或慢性疲勞綜合征的藥物組合物，所述衰弱和/或慢性疲勞綜合征是在哺乳動(dòng)物中分離的并處于多種疾病和/或病前和/或病后病癥中，所述藥物組合物的特征在于它包含作為活性組分的、治療有效量的2-乙基硫代苯并咪唑和/或其藥學(xué)上可接受的鹽以及左旋肉堿(左卡尼汀)。

對(duì)于2-乙基硫代苯并咪唑和/或其藥學(xué)上可接受的鹽的可接受的治療有效量為50-250mg，對(duì)于左旋肉堿的可接受的治療有效量為150-750mg。

例如，可以使用鹽諸如乙基硫代苯并咪唑氫溴酸鹽(bemithyl)或2-乙基硫代苯并咪唑鹽酸鹽作為藥學(xué)上可接受的鹽。

藥物組合物可以包含用于獲得便于攝入的劑型的目標(biāo)添加劑。特別地，其可以包含以百分比計(jì)的以下重量比的選自一組包括糖、糖替代物、調(diào)味劑替代物、崩解劑、膨松劑、芳化劑的賦形劑：

例如，可以使用乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、環(huán)糊精作為來(lái)自糖的組賦形劑。

例如，可以使用甘露醇、木糖醇、山梨糖醇、異麥芽糖醇、低聚果糖作為選自糖替代物的組的賦形劑。

檸檬汁、蜂蜜、甜菊苷、麥芽酚等可用作來(lái)自調(diào)味劑替代物組的賦形劑。

例如，交聯(lián)羧甲纖維素鈉、淀粉、微晶纖維素、瓊脂、明膠可用作來(lái)自崩解劑組的賦形劑。

例如，可以使用淀粉羥乙酸鈉、硅化微晶纖維素作為來(lái)自崩解劑組的賦形劑。

可以使用食品芳化劑作為來(lái)自芳化劑組的賦形劑。

組合物可以以固體劑型提供。用于口服溶解的片劑是這種形式的實(shí)例。

根據(jù)本發(fā)明的組合物用于通過(guò)如下方式來(lái)糾正衰弱和/或慢性疲勞綜合征的癥狀或治療衰弱和/或慢性疲勞綜合征——所述衰弱和/或慢性疲勞綜合征是單獨(dú)的和/或處于多種疾病和/或病前和/或病后病癥中：引入藥物制劑5到20天，且如有必要，在兩天或更多天的中斷后重復(fù)該過(guò)程。

技術(shù)效果是：藥劑可以顯著強(qiáng)化彼此的效果，包括與用于代謝過(guò)程發(fā)揮功能的能量供應(yīng)有關(guān)的效果，并因此改善了各種疾病或病外病癥(extramorbidcondition)下的患者病癥。當(dāng)它們組合時(shí)，觀察到抗衰弱、抗應(yīng)激作用的加強(qiáng)，身體和心理勞動(dòng)能力的增加，抗低氧效果明顯提高。

快速作用、口服溶解片劑形式的組合的使用能夠避免乙基硫代苯并咪唑的如累積效應(yīng)和增強(qiáng)的精神活化效應(yīng)的此類副作用，這可被認(rèn)為是額外的結(jié)果。

實(shí)施本發(fā)明的可能性可以通過(guò)以下實(shí)施例來(lái)證明。

實(shí)施例1

片劑，重量％

實(shí)施例2

膠囊，重量％

乙基硫代苯并咪唑15.15

左旋肉堿21.86

甘露醇其余部分。

實(shí)施例3

口服溶解片劑，重量％

實(shí)施例4藥理活性

本研究的目的是研究重復(fù)引入包括bemithyl和左旋肉堿的組合對(duì)小鼠的兩種慢性疲勞綜合征模型的影響。使用由重復(fù)的體力負(fù)荷引起的慢性疲勞綜合征作為第一個(gè)模型。使用由小鼠中的重復(fù)應(yīng)激引起的疲勞綜合征作為第二個(gè)模型。

使用riboxin作為參照物質(zhì)。

研究方法學(xué)

4.1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

根據(jù)赫爾辛基宣言，所有實(shí)驗(yàn)均按照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的工作原則(動(dòng)物護(hù)理原則(principlesofanimalcare)，指令86/609/eec)進(jìn)行。根據(jù)從道義委員會(huì)(愛(ài)沙尼亞共和國(guó)農(nóng)業(yè)部)獲得的相應(yīng)許可證購(gòu)買動(dòng)物并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所有對(duì)動(dòng)物進(jìn)行護(hù)理和進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的人員都具有能對(duì)動(dòng)物執(zhí)行實(shí)驗(yàn)的個(gè)人許可證。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，不遺余力地使動(dòng)物的數(shù)目及其痛苦降到最低。

所有實(shí)驗(yàn)都在120只c57bl/6系雄性小鼠上進(jìn)行。這些動(dòng)物是從哈蘭公司(harlancompany，英國(guó))買來(lái)的。在交付給塔爾圖大學(xué)生物醫(yī)學(xué)中心(biomedicalcenterattheuniversityoftartu)的生態(tài)飼養(yǎng)園(生態(tài)缸，vivarium)時(shí)，動(dòng)物的平均年齡為六周(120只小鼠)。抵達(dá)后，動(dòng)物在塔爾圖大學(xué)生物醫(yī)學(xué)中心的生態(tài)飼養(yǎng)園檢疫兩周。然后將動(dòng)物轉(zhuǎn)移到藥理學(xué)研究所的生態(tài)飼養(yǎng)園(3028室)中。將動(dòng)物容納在不限制飼料和水、具有12小時(shí)光周期(上午8點(diǎn)自動(dòng)轉(zhuǎn)換光)的尺寸為25cm×45cm×12cm(w×l×h)的塑料籠(每個(gè)籠中5只小鼠)中。具有動(dòng)物的籠子在特殊的氣候容器(scanbur,denmark)中。這些容器配備有用于清潔空氣的hepa過(guò)濾器，并在濕度和空氣溫度的24小時(shí)監(jiān)測(cè)下。容器中的相對(duì)濕度保持在50±2％，溫度22±1℃的限值內(nèi)。只有具有相應(yīng)許可證的人員才能接近這些動(dòng)物。每天一次，籠子被清潔并提供飼料和水。使用顆粒狀r70飼料(lactamin，stockholm，sweden)喂養(yǎng)動(dòng)物。在實(shí)驗(yàn)開始之前，動(dòng)物在氣候容器中一周。進(jìn)行兩個(gè)系列實(shí)驗(yàn)，且每個(gè)系列使用60只小鼠。第一系列實(shí)驗(yàn)旨在研究物質(zhì)對(duì)由重復(fù)的體力負(fù)荷(池中游泳)引起的疲勞綜合征發(fā)展的作用。第二系列實(shí)驗(yàn)旨在研究物質(zhì)對(duì)由應(yīng)激作用(慢性可變應(yīng)激)引起的行為綜合征的發(fā)展的作用。8-8.5周齡的小鼠進(jìn)行具有重復(fù)的體力負(fù)荷的實(shí)驗(yàn)；10-10.5周齡的小鼠用于具有可變應(yīng)激的實(shí)驗(yàn)中。

第一系列實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)開始時(shí)小鼠體重為22.7±0.3g(n＝60)；第二系列實(shí)驗(yàn)中小鼠的體重為23.1±0.2g(n＝60)。

研究中的所有物質(zhì)以1％的凝膠化淀粉中的懸浮液形式，在白天(上午12點(diǎn)至下午1點(diǎn))使用胃管引入，一天一次，持續(xù)7天。這些物質(zhì)的溶液是每天在開始引入前直接制備的。研究中的物質(zhì)的劑量列于表1中。

表1

實(shí)驗(yàn)中使用的研究中的物質(zhì)的劑量及其在報(bào)告文本中的縮寫

由重復(fù)的體力負(fù)荷引起的身體疲勞綜合征

在開始本實(shí)驗(yàn)之前，將動(dòng)物編碼并利用隨機(jī)程序?qū)⑵浼?xì)分成6組，每組10只動(dòng)物。

顯示了動(dòng)物組、研究中的物質(zhì)以及實(shí)驗(yàn)布局。指出了最后一次引入研究中的物質(zhì)后過(guò)去的時(shí)間。

表2

體力負(fù)荷的方法學(xué)

小鼠每天進(jìn)行兩次體力負(fù)荷。為此，使用了填充有水(25℃)的尺寸為25×12×25cm的池。將動(dòng)物放入池中并在水中逗留6分鐘。上午8點(diǎn)至11點(diǎn)、晚上5點(diǎn)至晚上8點(diǎn)，除了第一個(gè)對(duì)照組外，所有動(dòng)物均施用負(fù)荷。在最后一次游泳期間，測(cè)量了動(dòng)物處于不動(dòng)的狀態(tài)的時(shí)間段。在實(shí)驗(yàn)中同時(shí)使用了四個(gè)相同的池，并在錄像帶上記錄了游泳時(shí)段。行為分析是根據(jù)不知道物質(zhì)引入方案的工作成員的錄像記錄而進(jìn)行的。

研究中的物質(zhì)每天在游泳時(shí)段之間的中斷過(guò)程中(12am-1pm)引入。最后一次引入研究中的物質(zhì)后24小時(shí)，根據(jù)表2中所示的布局進(jìn)行行為實(shí)驗(yàn)。

由重復(fù)可變應(yīng)激作用對(duì)小鼠引起的疲勞綜合征

在開始實(shí)驗(yàn)前，將動(dòng)物編碼并使用隨機(jī)化程序?qū)⑵浼?xì)分為6組，每組10只動(dòng)物。根據(jù)表3中所示的布置，每天兩次施加應(yīng)激作用，持續(xù)七天。引入研究中的物質(zhì)每天一次(12am-1pm)，持續(xù)7天。

應(yīng)激作用特征

表3

最后一次引入物質(zhì)后24-72小時(shí)內(nèi)評(píng)估動(dòng)物行為，諸如體力勞動(dòng)能力、抑郁癥狀、恐懼、焦慮和記憶功能(mnesticfunction)的存在。

行為反應(yīng)的評(píng)估

通過(guò)在最后一次游泳期間動(dòng)物的不動(dòng)狀態(tài)的持續(xù)時(shí)間以及使用轉(zhuǎn)棒表現(xiàn)試驗(yàn)來(lái)評(píng)估體力勞動(dòng)能力。在最后一次引入物質(zhì)后24小時(shí)內(nèi)，根據(jù)轉(zhuǎn)棒方法測(cè)試動(dòng)物。具有30mm直徑的旋轉(zhuǎn)棒，由tsesystems制造，型號(hào)337500-м/а；系列號(hào)120402-06(德國(guó))，具有動(dòng)物停留在棒上的時(shí)間段的自動(dòng)記錄。在初步實(shí)驗(yàn)中確定，該棒直徑的最佳轉(zhuǎn)速應(yīng)為20rpm。動(dòng)物停留在棒上的能力取決于它們的訓(xùn)練程度。因此，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，在引入第1、3和5天對(duì)所有小鼠(包括無(wú)體力負(fù)荷的對(duì)照動(dòng)物)進(jìn)行訓(xùn)練過(guò)程，在每次訓(xùn)練過(guò)程期間通過(guò)軟件將旋轉(zhuǎn)速度從0rpm逐漸增到20rpm。該設(shè)備使能同時(shí)測(cè)試最多五只動(dòng)物。將該設(shè)備連接到計(jì)算機(jī)，能夠自動(dòng)登記動(dòng)物停留在棒上的時(shí)間段數(shù)據(jù)。

在最后一次引入物質(zhì)后48小時(shí)內(nèi)，使用曠場(chǎng)試驗(yàn)來(lái)評(píng)估焦慮和恐懼。曠場(chǎng)是一個(gè)尺寸為40×40×40cm的箱子，分為16個(gè)方格。評(píng)估了穿過(guò)的方格的數(shù)目(運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性)和小鼠在中央方格中逗留的時(shí)間段。低焦慮水平的動(dòng)物在中央方格中花費(fèi)更多的時(shí)間。

在尾巴懸掛的試驗(yàn)中，評(píng)估了動(dòng)物積極地避免應(yīng)激作用的能力(測(cè)試抑郁樣病癥)。在這種情況下，動(dòng)物積極地努力攀登支持物并走出這種狀況。具有抑郁癥癥狀的動(dòng)物不抵抗并保持不動(dòng)。動(dòng)物在不動(dòng)的狀態(tài)下的持續(xù)時(shí)間是在觀察180秒內(nèi)確定的。在最后一次引入物質(zhì)后48小時(shí)內(nèi)進(jìn)行了測(cè)試。

通過(guò)使用新物體理解試驗(yàn)，在新物體理解模型上測(cè)試了情景記憶。該試驗(yàn)廣泛用于評(píng)估動(dòng)物中的情景記憶。該試驗(yàn)是基于如下事實(shí)：相比于舊物體，一個(gè)健康的動(dòng)物花費(fèi)多得多的時(shí)間來(lái)研究新物體。

實(shí)驗(yàn)包括三個(gè)階段：習(xí)慣階段、訓(xùn)練階段和記憶(retention)階段(見(jiàn)表2)。

1)習(xí)慣階段.

在這個(gè)階段，將小鼠單獨(dú)放入在用提供60勒克斯連續(xù)光的白熾燈輕輕點(diǎn)亮的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的尺寸為50cm×50cm×50cm(長(zhǎng)×寬×高)的木箱中。箱底分為16個(gè)相似的具有12.5cm邊長(zhǎng)的方格。一只動(dòng)物停留在箱子里五分鐘，且實(shí)驗(yàn)者記錄了被穿過(guò)的方格的數(shù)目。隨后將該因子用于小鼠運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性的評(píng)估。五分鐘內(nèi)，將動(dòng)物從箱子中取出，并用5％的乙醇溶液清洗箱底，以消除氣味。

2)培訓(xùn)階段.

在習(xí)慣階段完成后兩個(gè)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行培訓(xùn)階段。為此，將動(dòng)物再次放置到箱子的中心上，在箱底上放置兩個(gè)相似物體。這些物體是位于箱子對(duì)角的兩個(gè)木制立方體(圖1)。

研究小鼠在新物體理解試驗(yàn)期間的情景記憶的實(shí)驗(yàn)布局

允許動(dòng)物研究物體五分鐘，并且記錄了其研究每個(gè)物體的時(shí)間段。該數(shù)據(jù)是評(píng)估動(dòng)物的動(dòng)機(jī)程度和探索活動(dòng)所必需的。每只動(dòng)物后，用5％的乙醇溶液清洗箱底。實(shí)驗(yàn)完成后，將動(dòng)物放入其家籠中。

3)記憶階段.

在最后一次體力負(fù)荷后72小時(shí)內(nèi)，將動(dòng)物再次放入試驗(yàn)箱中，其中一個(gè)物體被另外一種形狀和顏色的新物體替代(圖1)。

動(dòng)物再次被允許研究舊物體和新物體五分鐘，且實(shí)驗(yàn)者記錄了用于研究每個(gè)物體花費(fèi)的時(shí)間。

新物體研究的偏好系數(shù)表示為用于研究新物體花費(fèi)的時(shí)間與用于研究舊物體和新物體的總時(shí)間之間的關(guān)系，為其使用以下公式(t新×100)/(t舊+t新)，其中t舊和t新分別是研究舊物體和新物體花費(fèi)的時(shí)間。

統(tǒng)計(jì)分析

計(jì)算平均值(m)±平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m)。然后，使用單因素方差分析來(lái)分析該數(shù)據(jù)，隨后應(yīng)用bonferroni回顧標(biāo)準(zhǔn)(研究中的物質(zhì)的作用，劑量的影響)。當(dāng)p<0.05時(shí)，各組之間的差異被認(rèn)為是可靠的。使用統(tǒng)計(jì)軟件graphpadprtsm-5(us)進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理。

研究結(jié)果及其討論.

被選擇用于實(shí)驗(yàn)的bemithyl和左旋肉堿劑量的具體化(實(shí)體化，substantiation)。

研究中的物質(zhì)的劑量由研究客戶提供。協(xié)調(diào)后，對(duì)左旋肉堿酒石酸鹽重新計(jì)算左旋肉堿劑量(參見(jiàn)：研究方法學(xué)，表1)。

研究中的物質(zhì)對(duì)七天的重復(fù)的體力負(fù)荷背景下的小鼠行為的影響。

研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)的體力負(fù)荷下動(dòng)物體重的影響。

實(shí)驗(yàn)期間，來(lái)自具有體力負(fù)荷的對(duì)照組的一只動(dòng)物在引入所述物質(zhì)的第3天死亡。動(dòng)物尸體解剖顯示出食道穿孔。因此，該組中有九只小鼠。

體力負(fù)荷和研究中的物質(zhì)對(duì)動(dòng)物體重的影響在表4和圖2中示出。

表4.研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)的體力負(fù)荷下動(dòng)物體重動(dòng)力學(xué)的影響。顯示了9-10只小鼠的各組的平均值和平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。與對(duì)照相比*p<0.05；**p<0.01(bonferroni檢驗(yàn))。

表4

方差分析顯示體力負(fù)荷和物質(zhì)作用對(duì)體重動(dòng)力學(xué)的可靠影響：f5.53＝4.763，p＝0.001。隨后使用bonferroni檢驗(yàn)對(duì)組間差異的分析表明，重復(fù)的體力負(fù)荷可靠地(p<0.01)降低了小鼠的體重。研究中的物質(zhì)組合(bemithyl+左旋肉堿)降低了下次引入后的體重減損。物質(zhì)的影響最清楚地顯示在圖2中。從圖2可以看出，小劑量的bemithyl+左旋肉堿的組合對(duì)體力負(fù)荷結(jié)果的體重降低具有最顯著的影響。中等劑量和高劑量組合bemithyl+左旋肉堿的作用本身是在稍小的程度上呈現(xiàn)出。當(dāng)動(dòng)物體力疲勞時(shí)，riboxin對(duì)體重動(dòng)力學(xué)沒(méi)有顯著影響(表4、圖2)。

研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)的體力負(fù)荷后小鼠的體力勞動(dòng)能力的影響。

通過(guò)兩個(gè)測(cè)試評(píng)估小鼠的身體疲勞：第一個(gè)，在最后一個(gè)游泳過(guò)程在池中游泳期間不動(dòng)狀態(tài)的時(shí)間段，以及第二個(gè)，在動(dòng)物停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段。

第一個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示在表5中。

研究中的物質(zhì)對(duì)最后一個(gè)游泳過(guò)程在池中游泳期間小鼠不動(dòng)狀態(tài)的持續(xù)時(shí)間(以秒計(jì))的影響。顯示9-10只小鼠的各組的平均值和平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。與沒(méi)有體力負(fù)荷的對(duì)照相比**p<0.01(bonferroni檢驗(yàn))。

表5

如實(shí)驗(yàn)所示，在重復(fù)的體力負(fù)荷(池中游泳)后，動(dòng)物獲得疲勞綜合征，本身表現(xiàn)為最后一次游泳期間不動(dòng)的持續(xù)時(shí)間增加。方差分析顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)上可靠的差異：f5.53＝3.746；p＝0.0056。使用bonferroni檢驗(yàn)的組間差異統(tǒng)計(jì)分析也顯示出體力負(fù)荷對(duì)動(dòng)物不可動(dòng)性的持續(xù)時(shí)間的統(tǒng)計(jì)學(xué)上可靠(p<0.01)的影響(表5)。與具有體力負(fù)荷的對(duì)照組相比，小劑量(sd)的bemithyl+肉堿的組合降低了小鼠不可動(dòng)性的持續(xù)時(shí)間，但是該數(shù)據(jù)未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著水平。另一方面，與沒(méi)有體力負(fù)荷的對(duì)照相比，可靠的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異也消失了，這證明了組合bemithyl+左旋肉堿對(duì)體力勞動(dòng)能力的部分影響。中等劑量(md)和高劑量(hd)的組合bemithyl+左旋肉堿發(fā)揮了類似的作用。游泳試驗(yàn)期間riboxin組中不存在對(duì)體力勞動(dòng)能力的影響(表5)。

下一個(gè)實(shí)驗(yàn)的目的是通過(guò)轉(zhuǎn)棒表現(xiàn)試驗(yàn)來(lái)評(píng)估物質(zhì)對(duì)動(dòng)物體力體力勞動(dòng)能力的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果示于表6中。

研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠在重復(fù)的體力負(fù)荷后停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段的影響。9-10只小鼠的各組平均值和平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。與沒(méi)有體力負(fù)荷的對(duì)照相比，*p<0.05；與體力負(fù)荷后的對(duì)照相比，#p<0.05(bonferroni檢驗(yàn))。

表6

如實(shí)驗(yàn)所示，在重復(fù)的體力負(fù)荷(池中游泳)后，動(dòng)物獲得疲勞綜合征，本身表現(xiàn)為動(dòng)物停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段減少。方差分析顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)上可靠的差異：f5.53＝5.212；p＝0.0006。隨后使用bonferroni檢驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)組間分析也顯示出體力負(fù)荷對(duì)動(dòng)物停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段的統(tǒng)計(jì)學(xué)上可靠的(p<0.05)影響(表6)。以小劑量(sd)的組合bemithyl+肉堿統(tǒng)計(jì)學(xué)上可靠地(p<0.05)預(yù)防身體疲勞綜合征，這本身表現(xiàn)為小鼠停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段的增加。中等劑量(md)和高劑量(hd)的組合bemithyl+左旋肉堿不影響小鼠在體力負(fù)荷后的體力勞動(dòng)能力。沒(méi)有揭示riboxin的作用。

在曠場(chǎng)試驗(yàn)中，研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠在重復(fù)的體力負(fù)荷后的運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性和焦慮水平的影響。

關(guān)于研究中的物質(zhì)對(duì)曠場(chǎng)試驗(yàn)期間動(dòng)物行為的影響的數(shù)據(jù)在表7中示出。

在曠場(chǎng)試驗(yàn)期間，研究中的物質(zhì)對(duì)在重復(fù)的體力負(fù)荷后的運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性(穿過(guò)的部分的數(shù)目)和焦慮水平(小鼠在中心部分中逗留的時(shí)間段，以秒計(jì))的影響。9-10只小鼠的各組的平均值和平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。

表7

統(tǒng)計(jì)分析顯示，曠場(chǎng)試驗(yàn)期間重復(fù)的體力負(fù)荷不影響運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性(穿過(guò)的部分的數(shù)目)和焦慮水平(逗留在中心部分中的時(shí)間段)。此外，揭示了物質(zhì)在曠場(chǎng)試驗(yàn)期間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)上可靠的影響(表6)。

通過(guò)尾巴懸掛試驗(yàn)期間研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠在重復(fù)的體力負(fù)荷后的抑郁樣狀態(tài)的影響。該試驗(yàn)的結(jié)果示于表8中。

研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)的體力負(fù)荷后小鼠的抑郁樣狀態(tài)的影響。抑郁樣狀態(tài)通過(guò)當(dāng)小鼠通過(guò)尾巴懸掛時(shí)不動(dòng)的時(shí)間段(以秒計(jì))來(lái)評(píng)估。對(duì)9-10只小鼠的各組給予平均值和平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差。

表8

重復(fù)的體力負(fù)荷以及研究中的物質(zhì)不影響通過(guò)尾巴懸掛試驗(yàn)期間小鼠不動(dòng)的時(shí)間段(表8)。

重復(fù)的體力負(fù)荷以及研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)的體力負(fù)荷后小鼠情景記憶的影響。

重復(fù)的體力負(fù)荷(池中游泳)和研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠情景記憶的影響的研究結(jié)果在表9中示出。

來(lái)自沒(méi)有體力負(fù)荷的對(duì)照組的動(dòng)物顯示出對(duì)探索新物體的顯著偏好：對(duì)照組的偏好指數(shù)為76.0±2.3％。對(duì)照組中重復(fù)的體力負(fù)荷不顯著影響動(dòng)物的情景記憶。此外，沒(méi)有揭示研究中的物質(zhì)對(duì)情景記憶的作用(表9)。

研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠在重復(fù)的體力負(fù)荷(池中游泳)后在新物體理解試驗(yàn)期間的情景記憶的影響。顯示9-10只動(dòng)物的各組的新物體偏好指數(shù)的平均值±平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。

表9

結(jié)論

重復(fù)的體力負(fù)荷(池中游泳每天兩次持續(xù)7天)引起小鼠的身體疲勞綜合征，這表現(xiàn)為最后一次在池中游泳期間不動(dòng)狀態(tài)的持續(xù)時(shí)間增加和小鼠停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段的減少。在兩個(gè)試驗(yàn)期間，以小劑量(74.2mg/kg+185.8mg/kg)重復(fù)引入研究中的物質(zhì)(bemithyl+左旋肉堿)的組合消除了身體疲勞。然而，在重復(fù)引入中等劑量(148.4mg/kg+371.6mg/kg)和高劑量(222.6mg/kg+5574mg/kg)的組合bemithyl+左旋肉堿后，這種作用本身表現(xiàn)為小得多的程度或消失。與體力負(fù)荷平行地引入的劑量為148.6mg/kg的riboxin每天一次持續(xù)7天不影響動(dòng)物的勞動(dòng)能力。

重復(fù)的體力負(fù)荷不影響自發(fā)運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性的水平、焦慮水平、情景記憶且并沒(méi)有引起小鼠抑郁狀態(tài)的癥狀。研究中的bemithyl+左旋肉堿的組合和riboxin也不影響小鼠的這些行為參數(shù)。

研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)應(yīng)激下的小鼠體重動(dòng)力學(xué)的影響。

研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)可變應(yīng)激下的體重動(dòng)力學(xué)的影響在表10中示出。

表10.研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)應(yīng)激下體重動(dòng)力學(xué)的影響。顯示9-10只小鼠的各組的平均值和平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。與應(yīng)激組的小鼠相比，#p<0.05。

表10

重復(fù)應(yīng)激引起減小小鼠體重增加的趨勢(shì)。體重增加在riboxin和小劑量組合bemithyl+左旋肉堿的影響下略微加快(圖3)。應(yīng)該注意的是，雖然方差分析的數(shù)據(jù)顯示在各組中存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上可靠的效果(f5.54＝3.421，p<0.01)，但是使用bonferroni檢驗(yàn)的進(jìn)一步分析揭示受應(yīng)激動(dòng)物和接受riboxin的動(dòng)物之間的小鼠體重動(dòng)力學(xué)上的統(tǒng)計(jì)學(xué)可靠差異(表10、圖3)。

研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠在重復(fù)應(yīng)激負(fù)荷后體力勞動(dòng)能力的影響。

通過(guò)池中游泳期間的不動(dòng)的時(shí)間段和小鼠停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段來(lái)評(píng)估小鼠的身體疲勞。實(shí)驗(yàn)結(jié)果在表11和表12中示出。

表11.研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)應(yīng)激后池中游泳期間小鼠不動(dòng)狀態(tài)的持續(xù)時(shí)間(以秒計(jì))的影響。顯示每組10只小鼠的各組的平均值和平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。與沒(méi)有應(yīng)激的對(duì)照相比，***p<0.001；與受應(yīng)激的對(duì)照相比，#p<0.05，##p<0.01(bonferroni檢驗(yàn))。

表11

如實(shí)驗(yàn)所示，重復(fù)應(yīng)激導(dǎo)致動(dòng)物疲勞綜合征，這本身表現(xiàn)為在池中游泳期間不動(dòng)的持續(xù)時(shí)間增加。方差分析顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)上可靠的差異：f5.54＝16.15；p＝0.0001。使用bonferroni檢驗(yàn)的進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析揭示應(yīng)激對(duì)動(dòng)物不動(dòng)持續(xù)時(shí)間的統(tǒng)計(jì)學(xué)可靠的(p<0.01)影響(表11)。與對(duì)照應(yīng)激組相比，任何劑量(sd、md和hd)的bemithyl+左旋肉堿組合在統(tǒng)計(jì)學(xué)上可靠地(p<0.001)降低了在池中游泳期間小鼠不動(dòng)的持續(xù)時(shí)間。riboxin也可靠地(p<0.05)降低了池中游泳期間小鼠不動(dòng)的持續(xù)時(shí)間(表11)。

表12.研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠在重復(fù)應(yīng)激后停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段的影響。顯示每組10只小鼠的各組的平均值和平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。與無(wú)應(yīng)激對(duì)照相比，*p<0.05(bonferroni檢驗(yàn))。

表12

如實(shí)驗(yàn)所示，在重復(fù)的應(yīng)激負(fù)荷后，動(dòng)物發(fā)展出疲勞綜合征，這本身表現(xiàn)為它們停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段的減少。方差分析顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)上可靠的差異：f5.54＝3.665；p＝0.0063。使用bonferroni檢驗(yàn)對(duì)單獨(dú)各組之間的差異的進(jìn)一步的統(tǒng)計(jì)分析揭示出應(yīng)激對(duì)動(dòng)物停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段的統(tǒng)計(jì)學(xué)可靠的(p<0.05)影響(表12)。小劑量(sd)的bemithyl+左旋肉堿的組合部分地緩解了身體疲勞，這表現(xiàn)為小鼠停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段的增加。并且與此同時(shí)，統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的差異在無(wú)應(yīng)激對(duì)照組與應(yīng)激負(fù)荷組之間消失。然而，中等劑量和高劑量(分別為md和hd)的bemithyl+左旋肉堿的組合不影響受應(yīng)激的動(dòng)物停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段。riboxin沒(méi)有影響受應(yīng)激的動(dòng)物停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段。

研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)應(yīng)激后曠場(chǎng)試驗(yàn)期間小鼠運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性和焦慮水平的影響。

關(guān)于研究中的物質(zhì)對(duì)在曠場(chǎng)試驗(yàn)期間動(dòng)物行為的影響的數(shù)據(jù)在表13中示出。重復(fù)的可變應(yīng)激可靠地(p<0.05)增加了動(dòng)物在曠場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性(表13)。研究中的物質(zhì)部分地抑制了運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性，但數(shù)據(jù)未達(dá)到可靠性水平。重復(fù)的應(yīng)激作用并不影響小鼠逗留在曠場(chǎng)中心部分的時(shí)間段(焦慮指數(shù))，也沒(méi)有觀察到研究中的物質(zhì)對(duì)該指標(biāo)的可靠影響。方差分析數(shù)據(jù)如下：f5.54＝2.19；p＝0.067。

表13.研究中的物質(zhì)對(duì)在曠場(chǎng)試驗(yàn)期間對(duì)小鼠的重復(fù)應(yīng)激作用之后的運(yùn)動(dòng)活動(dòng)性(穿過(guò)的部分的數(shù)目)和焦慮水平(在中心部分逗留的時(shí)間段，以秒計(jì))的影響。顯示每組10只小鼠的各組的平均值和平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。與無(wú)應(yīng)激對(duì)照相比，*p<0.05(bonferroni檢驗(yàn))。

表13

研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠在通過(guò)尾部懸掛試驗(yàn)期間在重復(fù)應(yīng)激作用后的抑郁樣狀態(tài)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果在表14中示出。

表14.研究中的物質(zhì)對(duì)重復(fù)應(yīng)激后小鼠的抑郁樣狀態(tài)的影響。以通過(guò)尾巴懸掛期間不動(dòng)的期間(以秒計(jì))來(lái)評(píng)估抑郁樣狀態(tài)。每組10只小鼠的各組平均值和平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。與無(wú)應(yīng)激對(duì)照相比，***p<0.001；與受應(yīng)激對(duì)照相比，#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001(bonferroni檢驗(yàn))。

表14

方差分析數(shù)據(jù)顯示對(duì)各組的可靠影響：f5.54＝10.48；p<0.0001。組間差異的分析揭示出應(yīng)激對(duì)發(fā)展抑郁樣狀態(tài)的可靠的(p<0.001)影響，這本身表現(xiàn)為在通過(guò)尾巴懸掛試驗(yàn)期間不動(dòng)的時(shí)間段的增加。研究中的物質(zhì)以任何劑量的組合可靠地減少在通過(guò)尾巴懸掛試驗(yàn)期間不動(dòng)的時(shí)間段(表14)。在這個(gè)試驗(yàn)期間，riboxin也減少了不動(dòng)的時(shí)間段。因此，可以得出結(jié)論：研究中的物質(zhì)緩解了在小鼠中的抑郁樣狀態(tài)，其在重復(fù)應(yīng)激作用的結(jié)果中顯現(xiàn)。

重復(fù)應(yīng)激和研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠的情景記憶的影響。

重復(fù)應(yīng)激和研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠情景記憶的影響的研究結(jié)果在表15中示出。

觀察到對(duì)照組的動(dòng)物喜歡探索新物體：對(duì)照組的偏好指數(shù)為67.7±4.4％。對(duì)對(duì)照組的重復(fù)應(yīng)激作用對(duì)動(dòng)物情景記憶沒(méi)有顯著影響。此外，沒(méi)有顯示研究中的物質(zhì)對(duì)情景記憶的作用(表15)。

表15.研究中的物質(zhì)對(duì)小鼠在重復(fù)的應(yīng)激作用之后在新物體理解試驗(yàn)期間的情景記憶的影響。示出了每組10只動(dòng)物的各組的新物體偏好指數(shù)的平均值±平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(m±m(xù))。

表15

結(jié)論

對(duì)小鼠的重復(fù)應(yīng)激作用導(dǎo)致其更高的身體疲勞，這本身表現(xiàn)為體重增加的微不足道的減少、池中游泳期間不動(dòng)狀態(tài)的時(shí)間段增加以及小鼠停留在旋轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間段的減少。此外，重復(fù)的應(yīng)激作用引起了本身表現(xiàn)為在通過(guò)尾巴懸掛試驗(yàn)期間不動(dòng)的時(shí)間段的增加的抑郁樣狀態(tài)的發(fā)展。當(dāng)以小劑量(74.2mg/kg+185.8mg/kg)引入時(shí)，bemithyl+左旋肉堿的組合稍微提高了應(yīng)激期間的體重增加，并且在游泳試驗(yàn)和轉(zhuǎn)棒表現(xiàn)試驗(yàn)期間統(tǒng)計(jì)上可靠地減輕了身體疲勞。重復(fù)引入中等劑量(148.4mg/kg+371.6mg/kg)和高劑量(222.6mg/kg+557.4mg/kg)的組合bemithyl+左旋肉堿也減少了在池中游泳期間的不動(dòng)時(shí)間段，但在轉(zhuǎn)棒表現(xiàn)試驗(yàn)期間，這種效果本身就表現(xiàn)得程度小得多或者消失了。劑量為148.6mg/kg的riboxin每天引入一次持續(xù)7天，在池中游泳期間增加了動(dòng)物的體力勞動(dòng)能力，但不影響小鼠停留在旋轉(zhuǎn)棒上的能力。

bemithyl+左旋肉堿的組合在整個(gè)劑量范圍內(nèi)減輕了由重復(fù)應(yīng)激引起的動(dòng)物的抑郁樣狀態(tài)。然而，應(yīng)該注意的是，這種效應(yīng)可能與這些物質(zhì)的提高體力勞動(dòng)能力的作用有關(guān)。更有可能的是，這些物質(zhì)在體力勞動(dòng)能力上的作用在這些物質(zhì)的作用范圍內(nèi)普遍存在，而不是它們的抗抑郁作用。