本發(fā)明涉及一種呈膠體的形式的注射型真皮填充劑組合物，該注射型真皮填充劑組合物包括交聯(lián)型玻尿酸(ha)、羧甲基纖維素(cmc)、以及任選地微粒子(諸如鈣羥基磷灰石(cahap)微粒子)。注射型真皮填充劑組合物具有改善的流變性質(zhì)，同時(shí)具有低擠出力。本發(fā)明還涉及制備此類(lèi)注射型真皮填充劑組合物的方法以及其關(guān)于美容與治療目的的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：目前普遍期望實(shí)現(xiàn)并保有年輕的外表，這是美麗的共同特征。然而，隨著時(shí)間流逝，皮膚開(kāi)始失去其年輕的外表，特別是臉部。臉部老化的最普遍的審美指標(biāo)包括可見(jiàn)的皮膚皺紋、深鼻唇溝、皺眉紋、木偶紋、頰接合紋和口圍皺紋。這些老化的改變通常通過(guò)真皮填充劑的注射進(jìn)行治療，以增大組織的體積。近來(lái)，存在許多可用的真皮填充劑，其可大致分為2個(gè)類(lèi)別。第一個(gè)類(lèi)別的填充劑通過(guò)產(chǎn)生體積來(lái)提供長(zhǎng)期的效果，并且包括填充劑諸如交聯(lián)型玻尿酸(ha)填充劑。第二個(gè)類(lèi)別的填充劑通過(guò)刺激膠原蛋白新生來(lái)提供長(zhǎng)期的效果。最著名且最廣為使用的示例為微晶瓷其包括cahap微球體、羧甲基纖維素(cmc)的膠體載體、以及丙三醇。理想的真皮填充劑應(yīng)具備生物相容性、具有低的不良事件數(shù)據(jù)、并且提供合理的長(zhǎng)期持續(xù)(持久)、有效的體積增大能力，并易于注射。玻尿酸基的填充劑提供許多真皮填充劑的這些期望的特性。由于玻尿酸幾乎存在于所有的物種中，因此其不具有抗原性，并且表現(xiàn)出優(yōu)異的耐受性。另外，玻尿酸的交聯(lián)使得形成交聯(lián)型玻尿酸產(chǎn)品，其具有良好的拉提能力并且穩(wěn)定性可達(dá)大于12個(gè)月至2年。然而，玻尿酸基的填充劑的主要缺點(diǎn)在于時(shí)常難以注射。有鑒于此原因，通常加入非交聯(lián)型的玻尿酸(“自由型”玻尿酸)作為潤(rùn)滑劑，以利于注射。遺憾的是，通過(guò)添加“自由型”玻尿酸而導(dǎo)致的期望的擠出力減少損害膠體的其他期望的物理特性。特別是，彈性模量(gprime,g')的參數(shù)下降，由此導(dǎo)致體積增大的效果降低，并且動(dòng)態(tài)黏度降低。微晶瓷是真皮填充劑，其還提供真皮填充劑的期望特性，包括可接受的持久性、生物相容性、以及良好的增大體積的能力。當(dāng)進(jìn)行注射時(shí)，少量的cahap微球體作為支架，促進(jìn)類(lèi)似于其周?chē)h(huán)境的新組織形成。然而，由于微晶瓷的cmc載體在活體中被快速吸收(大約3個(gè)月內(nèi))，膠原蛋白新生與cmc的消除可能不會(huì)同時(shí)發(fā)生，因此造成填充效果的潛在和短暫的降低。此外，目前還沒(méi)有能夠在填充劑的施加后對(duì)cmc進(jìn)行部分修復(fù)的解毒劑(逆轉(zhuǎn)劑)。1993年提交的歐洲專(zhuān)利1080698公開(kāi)了注射型軟組織填充材料，其包括微細(xì)地分開(kāi)的陶瓷粒子(例如cahap)，并且除此之外涵蓋陶晶瓷。此外，wo2014/056723描述了一種粘彈性的膠體，其包括濃度介于1％和4％(w/v)之間的交聯(lián)型玻尿酸以及濃度介于10％和70％(w/v)之間的羥基磷灰石粒子。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：鑒于以上所述，本發(fā)明的目的是提供持久型的真皮填充劑組合物，其具有改善的流變性質(zhì)，同時(shí)能夠易于注射。上述問(wèn)題是通過(guò)提供一種呈膠體形式的注射型真皮填充劑組合物來(lái)解決的，該注射型真皮填充劑組合物利用羧甲基纖維素作為潤(rùn)滑劑。這種新型的真皮填充劑提供良好的持久性，易于注射，并且具有改善的流變性質(zhì)(即，彈性模量和動(dòng)態(tài)黏度)，從而導(dǎo)致產(chǎn)生體積的優(yōu)異能力。在第一方面中，本發(fā)明提供呈膠體形式的注射型真皮填充劑組合物，該注射型真皮填充劑組合物包括交聯(lián)型(例如，bdde交聯(lián)型)玻尿酸(ha)和羧甲基纖維素(cmc)。交聯(lián)型ha通常以0.1％至4.0％重量/體積(例如，0.5％至4.0％或1.0％至4.0％重量/體積)的濃度存在，并且提供交聯(lián)型基質(zhì)，而cmc通常以1.0％至25％體積/體積的濃度存在，并且作為潤(rùn)滑劑/潤(rùn)滑相添加。在優(yōu)選實(shí)施方案中，注射型真皮填充劑組合物還包括可吸收生物相容性微粒子，特別是鈣羥基磷灰石微粒子。在第二方面中，本發(fā)明提供試劑盒，該試劑盒包括根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充劑組合物。在第三方面中，本發(fā)明提供一種制備根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充劑組合物的方法，包括以下步驟：(a)提供交聯(lián)型玻尿酸膠體，(b)提供羧甲基纖維素膠體，(c)將交聯(lián)型玻尿酸膠體與羧甲基纖維素膠體混合。在第四方面中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充劑組合物或根據(jù)本發(fā)明的第二方面的試劑盒在美容應(yīng)用中的使用，諸如臉部細(xì)紋的治療。在第五方面中，本發(fā)明提供用于治療的根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充劑組合物或根據(jù)本發(fā)明的第二方面的試劑盒，特別是用于治療壓力性尿失禁、膀胱輸尿管逆流、聲門(mén)閉合不全、以及聲帶內(nèi)移。在第六方面中，本發(fā)明提供一種用于替換或填充生物組織或增大生物組織的體積的方法，該方法包括對(duì)有需要的受治療者施用有效量的根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充劑組合物。本發(fā)明的特定實(shí)施方案描述于隨附的權(quán)利要求書(shū)中。在參見(jiàn)本發(fā)明的下列具體實(shí)施方式、附圖和實(shí)施例之后，本發(fā)明的其他目的、優(yōu)點(diǎn)、和特征對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員將變得顯而易見(jiàn)。附圖說(shuō)明圖1示出根據(jù)本發(fā)明的ha/cmc真皮填充劑組合物(具有15％(v/v)cmc的mhag膠體；灰色長(zhǎng)條)、以及ha/自由型ha真皮填充劑組合物(具有15％(v/v)自由型ha的mhag膠體；陰影長(zhǎng)條)，相比于“僅有玻尿酸”的膠體(mhag膠體；黑色長(zhǎng)條)的擠出力的示意圖。圖2示出根據(jù)本發(fā)明的ha/cmc真皮填充劑組合物(具有15％(v/v)cmc的mhag膠體；灰色長(zhǎng)條)、以及ha/自由型ha真皮填充劑組合物(具有15％(v/v)自由型ha的mhag膠體；陰影長(zhǎng)條)，相比于“僅有玻尿酸”的膠體(mhag膠體；黑色長(zhǎng)條)的彈性模量(g’)的示意圖。圖3示出根據(jù)本發(fā)明的ha/cmc真皮填充劑組合物(具有15％(v/v)cmc的mhag膠體；灰色長(zhǎng)條)、以及ha/自由型ha真皮填充劑組合物(具有15％(v/v)自由型ha的mhag膠體；陰影長(zhǎng)條)，相比于“僅有玻尿酸”的膠體(mhag膠體；黑色長(zhǎng)條)的黏度的示意圖。圖4示出根據(jù)本發(fā)明的ha/cahap/cmc真皮填充劑組合物(具有10％(v/v)cmc的mhai膠體；黑色長(zhǎng)條)，相比于ha/cahap膠體(mhai膠體；灰色長(zhǎng)條)、ha/cahap/自由型ha膠體(具有10％自由型ha的mhai膠體；陰影長(zhǎng)條)、以及稀釋的mhai膠體(具有稀釋的ha(15mg/mlha)的mhai膠體；空白長(zhǎng)條)的擠出力。圖5示出根據(jù)本發(fā)明的ha/cahap/cmc真皮填充劑組合物(具有10％(v/v)cmc的mhai膠體；黑色長(zhǎng)條)，相比于ha/cahap膠體(mhai膠體；灰色長(zhǎng)條)、ha/cahap/自由型ha膠體(具有10％自由型ha的mhai膠體；陰影長(zhǎng)條)、以及稀釋的mhai膠體(具有稀釋的ha(15mg/mlha)的mhai膠體；空白長(zhǎng)條)的彈性模量(g’)。圖6示出根據(jù)本發(fā)明的ha/cahap/cmc真皮填充劑組合物(具有10％(v/v)cmc的mhai膠體；黑色長(zhǎng)條)，相比于ha/cahap膠體(mhai膠體；灰色長(zhǎng)條)、ha/cahap/自由型ha膠體(具有10％自由型ha的mhai膠體；陰影長(zhǎng)條)、以及稀釋的mhai膠體(具有稀釋的ha(15mg/mlha)的mhai膠體；空白長(zhǎng)條)的黏度。圖7示出不同濃度的cmc對(duì)于ha/cahap/cmc真皮填充劑組合物(mhai膠體；黑色長(zhǎng)條)、具有5％cmc的ha/cahap膠體(具有5％cmc的mhai膠體；灰色長(zhǎng)條)、具有10％cmc的ha/cahap膠體(具有10％cmc的mhai膠體；陰影長(zhǎng)條)、以及具有15％cmc的ha/cahap膠體(具有15％cmc的mhai膠體；空白長(zhǎng)條)的影響。具體實(shí)施方式本發(fā)明的注射型真皮填充劑相較于熟知的填充劑提供許多優(yōu)點(diǎn)，包括優(yōu)異的生物相容性、改善的持久性、高保濕力、無(wú)免疫性、以及能夠被身體安全吸收、同時(shí)作為真皮填充劑保持期望的機(jī)械和流變性質(zhì)。尤其，本發(fā)明的發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)，將少量的羧甲基纖維素(cmc)添加至交聯(lián)型玻尿酸膠體驚喜地導(dǎo)致持久的真皮填充劑組合物展現(xiàn)低的擠出力，同時(shí)具有改善的機(jī)械特性(即，高彈性模量(g’)與高動(dòng)態(tài)黏度)，提供高的體積增大能力。換句話(huà)講，根據(jù)本發(fā)明的真皮填充劑預(yù)想不到地被發(fā)現(xiàn)其提供持久性、拉提能力和易注射性的最佳平衡。此外，在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，真皮填充劑組合物另外包括微粒子(例如鈣羥基磷灰石(cahap)微粒子)，由于可利用玻尿酸酶來(lái)降解和分解交聯(lián)型玻尿酸載體，微晶瓷的優(yōu)點(diǎn)(即，cahap粒子所造成的膠原蛋白新生)可與部分可逆性/可修復(fù)性的優(yōu)點(diǎn)相結(jié)合。另一優(yōu)點(diǎn)在于，交聯(lián)型玻尿酸載體相較于近來(lái)所使用(例如用于微晶瓷中)的非交聯(lián)型cmc載體而言，能夠持續(xù)更久。這將防止表現(xiàn)/體積增大效果的熟知差距(可見(jiàn)于cmc的溶解時(shí)間與微粒子的膠原蛋白新生的刺激之間)。在第一方面，本發(fā)明涉及一種呈膠體的形式的注射型真皮填充劑組合物，其包括交聯(lián)型玻尿酸和cmc。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“真皮填充劑”泛指被設(shè)計(jì)為在缺乏軟組織的區(qū)域增大體積的材料或組合物。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“真皮填充劑”與術(shù)語(yǔ)“軟組織填充劑”具有相同的意思并且可互換使用。即，術(shù)語(yǔ)“真皮填充劑”不應(yīng)理解為強(qiáng)加關(guān)于注射的位置和類(lèi)型的任何限制，并且一般包括使用于真皮之下的多個(gè)層，例如骨膜之上的肌肉下以及皮下平面中。在本發(fā)明的意思中，術(shù)語(yǔ)“軟骨組織”一般涉及連接、支撐或圍繞其他結(jié)構(gòu)和身體器官的組織。在本發(fā)明中，軟組織包括例如肌肉、肌腱(連接肌肉與骨頭的纖維條)、纖維組織、脂肪、血管、神經(jīng)、以及滑液組織(關(guān)節(jié)周?chē)慕M織)。根據(jù)本發(fā)明，注射型真皮填充劑組合物為膠體。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“膠體”一般是指在室溫下具有介于液體與固體之間的流動(dòng)性的材料。此外，術(shù)語(yǔ)“膠體”意在表示能夠吸收水的材料(即“水膠”)。在本發(fā)明中，注射型真皮填充劑一般包括生理上可接受的載體流體，諸如非致熱性等張緩沖液，特別是具有優(yōu)選緩沖的生理食鹽水溶液。此外，本發(fā)明的真皮填充劑組合物是“注射型”。這表示真皮填充劑組合物適合于注射至皮膚或其他組織中，以將真皮填充劑組合物帶到期望的目標(biāo)部位。本發(fā)明意義中的“注射型”組合物可從注射器在正常條件在常壓下施加。根據(jù)本發(fā)明，cmc的濃度優(yōu)選介于1.0％至25.0％之間，更優(yōu)選介于5.0％至20％之間，并且最優(yōu)選介于10％至15％體積/體積(v/v)之間。在本發(fā)明中，其一般用作潤(rùn)滑劑或潤(rùn)滑相。本文所使用的合適的cmc可具有在5.0×104道爾頓(da)(低黏度cmc)至1.5×106da(高黏度cmc)范圍內(nèi)的分子量，例如在9.0x104da至7.0×105da范圍內(nèi)，特別是在1.5×105至5.0×105da范圍內(nèi)。此外，本文所用的合適的cmc可選自低黏度cmc、中等黏度cmc、以及高黏度cmc。低黏度cmc是使用布氏黏度劑(brookfieldspindleviscosimeter(型號(hào)lvt)在25℃，旋轉(zhuǎn)速度為60每分鐘轉(zhuǎn)速(rpm)，轉(zhuǎn)軸尺寸為第1或第2號(hào)，使用2％水溶液進(jìn)行測(cè)量的，具有75至750毫帕斯卡·秒(mpa·s)的黏度。中等黏度cmc是使用布氏黏度劑(型號(hào)lvt)在25℃，旋轉(zhuǎn)速度為30rpm，轉(zhuǎn)軸尺寸為第2或第3號(hào)，使用2％水溶液進(jìn)行測(cè)量的，具有750至4,000mpa·s的黏度。高黏度cmc是使用布氏黏度劑(型號(hào)lvt)在25℃，旋轉(zhuǎn)速度為30rpm，轉(zhuǎn)軸尺寸為第3或第4號(hào)，使用1％水溶液進(jìn)行測(cè)量的，具有4,000至25,000mpa·s的黏度。此外，cmc的取代度通常為0.20至1.50，優(yōu)選為0.40至1.10，更優(yōu)選為0.60至0.95，并且最優(yōu)選為0.70至0.90。如本文所用，“取代度”(醚化度)定義如下：[c6h7o2(oh)x(och2coom)y]n，其中n是聚合度(例如450至4.000)并且x+y＝3，其中y是取代度。取代度可由本領(lǐng)域已知的方法確定(例如根據(jù)國(guó)際酒類(lèi)規(guī)則(internationaloenologicalcodex)coei-1-cmc:2009所述的方法)。玻尿酸在組合物中的濃度優(yōu)選為0.1％至5.0％、或0.2％至4.5％、或0.3％至4.0％、或0.4％至4.0％、或0.5％至4.0％、或0.7％至4.0％、或1.0％至4.0％，更優(yōu)選為0.5％至3.0％、或1.0％至3.0％、或1.5％至3.0％、或2.0％至3.0％，最優(yōu)選為1.0％至2.5％、或2.0％至2.5％重量/體積。本發(fā)明中，交聯(lián)型玻尿酸形成“基質(zhì)”。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“基質(zhì)”用于表示呈溶液或膠體形式的交聯(lián)或非交聯(lián)的多醣網(wǎng)絡(luò)。此外，如本文所用，術(shù)語(yǔ)“玻尿酸”或“ha”表示玻尿酸、玻尿酸鹽、以及任何的玻尿酸鹽類(lèi)，諸如玻尿酸鈉。在本發(fā)明的上下文中，交聯(lián)型玻尿酸并非以任何方式限制，并且包括由單一玻尿酸或由分子量不同的兩種或更多種玻尿酸制備的交聯(lián)型玻尿酸(參照例如us2010/0316683a1或wo2013/185934a1，其以引用方式并入本文)。并且，在本發(fā)明的范圍內(nèi)，交聯(lián)型玻尿酸可形成“多密度”膠體(特征為在膠體中的交聯(lián)度的變化)。即，“多密度”膠體具有(至少)兩種不同的密度水平，具有密度較高的部分(交聯(lián)度較高)和密度較低的部分(交聯(lián)度較低)。例如，多密度膠體可通過(guò)第一交聯(lián)反應(yīng)以交聯(lián)第一一個(gè)或多個(gè)多醣，接著通過(guò)第二交聯(lián)反應(yīng)以交聯(lián)第二一個(gè)或多個(gè)多醣，以形成雙交聯(lián)膠體。例如，所述第一一個(gè)或多個(gè)多醣和所述第二一個(gè)或多個(gè)多醣可以獨(dú)立地為相同的玻尿酸或兩種不同的玻尿酸(平均分子量不同，例如低分子量和高分子量玻尿酸)。此雙交聯(lián)制程(動(dòng)態(tài)交聯(lián)技術(shù))為本領(lǐng)域所熟知的，并且描述于例如ep1711552b1，其以引用方式并入本文。在本發(fā)明中，交聯(lián)型玻尿酸可通過(guò)交聯(lián)單一的玻尿酸，或通過(guò)交聯(lián)第一玻尿酸與第二玻尿酸、以及任選地至少一個(gè)另外的玻尿酸來(lái)制備，其中第一玻尿酸、第二玻尿酸、和至少一個(gè)另外的玻尿酸的平均分子量不同。優(yōu)選地，所述單一的玻尿酸的平均分子量是0.1×106至4.0×106da、或0.3×106至4.0×106da、或0.5×106至4.0×106da，特別是1.0×106至3.0×106da、或1.5×106至2.5×106da。所述第一玻尿酸優(yōu)選的平均分子量是1.0×105da至小于1.0×106da，更優(yōu)選3.0×105da至9.0×105da，并且最優(yōu)選5.0×105da至8.0×105da。所述第二玻尿酸的平均分子量通常大于1.0×106da、最高至5.0×106da，特別是介于1.5×106da和4.0×106da之間，并且優(yōu)選介于2.0×106da和3.0×106da之間。本發(fā)明的注射型真皮填充劑中的第一玻尿酸與第二玻尿酸的重量比率在0.001:99.999至99.999:0.001的范圍內(nèi)，但并不以此為限，優(yōu)選約70:30至約99.9:0.1，并且最優(yōu)選90:10至約99.0:1.0。本文可使用不同的方法來(lái)確定玻尿酸的分子量，諸如特性粘度測(cè)量(例如，根據(jù)中國(guó)藥典(chinesepharmacopoeia)，第2版，2006年)，毛細(xì)管電泳(ce)(例如，根據(jù)kinoshita等人,biomed.chromatogr.,2002,16:141-45)，高效凝膠滲透層析(hpgpc)(根據(jù)kim等人,foodchem.,2008,109:63-770)，以及結(jié)合多角度激光散射與尺寸排除層析(sec-malls)(例如，根據(jù)hokputsa等人,eur.biophys.j.biophys.lett.,2003,32:450-456)。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的注射型真皮填充劑組合物與bdde(1,4-丁二醇二環(huán)氧丙酯)交聯(lián)。該bdde-交聯(lián)型玻尿酸可具有修飾度，其表示為單交聯(lián)和雙交聯(lián)的bdde交聯(lián)劑的總和與玻尿酸雙醣單元的總和的比率，為0.5％至25％，優(yōu)選為1.0％至15％，更優(yōu)選為2.0％至10％，并且最優(yōu)選為3.0％至8.0％或4.0％至7％。修飾度可通過(guò)核磁共振(nmr)根據(jù)本領(lǐng)域所熟知的方法來(lái)確定(edsman等人，玻尿酸真皮填充劑的膠體特性(gelpropertiesofhyaluronicaciddermalfillers),dermatol.surg.2012,38:1170-1179；guarise等人，尺寸排除層析所確定的玻尿酸填充劑的交聯(lián)效率(secdeterminationofcross-linkefficiencyinhyaluronanfillers),carbohydratepolymers2012,88:428-434；kenne等人，玻尿酸水凝膠的修飾和交聯(lián)參數(shù)-定義與分析方法(modificationandcross-linkingparametersinhyaluronicacidhydrogels-definitionsandanalyticalmethods),carbohydratepolymers2013,91:410-418)。簡(jiǎn)言之，經(jīng)透析且滅菌的膠體在進(jìn)行nmr測(cè)量之前已被降解。降解可通過(guò)硫酸軟骨素酶ac(edsman等人,supra；kenne等人,supra)，氫氧化鈉(naoh)(guarise等人,supra)，添加玻尿酸酶(例如，對(duì)1克(g)的膠體加150u的羊玻尿酸酶)，或通過(guò)在90℃下培養(yǎng)至少35小時(shí)來(lái)進(jìn)行。所得溶液接著被冷凍干燥，溶解于重水(d2o)中，并受到充分的均質(zhì)化。nmr測(cè)量可在20度脈沖在環(huán)境溫度下在例如500mhz下重復(fù)多次進(jìn)行測(cè)量，以接收具有合適分辨率的光譜。根據(jù)文獻(xiàn)，修飾度(mod)是通過(guò)計(jì)算玻尿酸的n-乙酰的信號(hào)與bdde的亞甲基的信號(hào)的比率而評(píng)估的。當(dāng)溶解于重水中時(shí)，對(duì)于n-乙酰而言，關(guān)鍵信號(hào)位于約2.0ppm，對(duì)于bdde而言，則位于大約1.6ppm。為了計(jì)算修飾度，積分值受到確認(rèn)，并且根據(jù)文獻(xiàn)(edsman等人,supra以及kenne等人,supra)，需采納n-乙酰的3個(gè)氫(h)(ch3)與bdde的亞甲基的4個(gè)氫(ch2ch2)的質(zhì)子的比率。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，注射型真皮填充劑還包括可吸收生物相容性微粒子。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“微粒子”一般涉及基本上圓形或球形的粒子。此外，微粒子的平均直徑優(yōu)選為5微米(μm)至500μm，更優(yōu)選為10μm至200μm，特別優(yōu)選為15μm至100μm或20μm至75μm，并且最優(yōu)選為25μm至45μm。在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語(yǔ)“可吸收”一般是指可被分解并被吸收至組織和/或體液中的材料。存在于組合物中的微粒子的濃度優(yōu)選為0.5％至50％、或1.0％至50％，更優(yōu)選為1.0％至40％，特別優(yōu)選為5.0％至35％，特別是15.0％至30％，或20％至25％，并且最優(yōu)選為25.0％至35％體積/體積。在本發(fā)明的上下文中，可吸收生物相容性微粒子可由磷酸鈣基的材料、氧化鋁基的材料、可生物分解的天然多醣類(lèi)、或它們的衍生物、或可生物分解聚酯、聚原酸酯、或聚酐合成聚合物組成。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“天然多醣類(lèi)”一般涉及天然存在的多醣類(lèi)。如本文所用，“衍生物”在結(jié)合天然多醣類(lèi)使用時(shí)，是指從天然多醣體通過(guò)化學(xué)修飾所衍生的，諸如羧化作用、醚化作用、甲基化作用、磺化作用等等。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“可生物分解”泛指能夠被活著的人類(lèi)在活體中分解的材料，并且不應(yīng)理解為限制于特定分解時(shí)間或持續(xù)時(shí)間。磷酸鈣基的材料可選自cahap、鈣氟磷灰石、鈣氯磷灰石、碳酸鈣磷灰石、磷酸四鈣、焦磷酸鈣、磷酸三鈣、以及磷酸八鈣。優(yōu)選地，磷酸鈣基的材料是cahap。可生物分解的聚酯、聚原酸酯、或聚酐合成聚合物可以是乙交酯、乳酸交酯、己內(nèi)酯、以及對(duì)二氧環(huán)己酮的同源聚合物或共聚物，或者是三亞甲基碳酸酯、或聚羥基丁酸酯或聚羥基戊酸酯聚合物。優(yōu)選地，可生物分解的聚酯、聚原酸酯、或聚酐合成聚合物選自聚己內(nèi)酯、聚乙交酯、聚乳酸交酯、聚二氧環(huán)己酮、聚乳酸-甘醇酸、聚甘醇酸-己內(nèi)酯、以及聚甘醇酸-三亞甲基碳酸酯，并且最優(yōu)選為聚己內(nèi)酯或聚二氧環(huán)己酮。根據(jù)本發(fā)明，注射型真皮填充劑組合物還可包括一種或多種化合物，其選自由聚醇、維生素、胺基酸、金屬、抗氧化劑、以及礦物鹽類(lèi)組成的組。本文所使用的合適的聚醇包括但不限于丙三醇、己六醇、山梨醇、丙二醇、丁四醇、木醣醇、麥芽糖醇、以及乳醣醇。本文中特別適于使用的是己六醇和丙三醇。此外，聚醇優(yōu)選為乙二醇，任選地與一種或多種前述聚醇化合物結(jié)合，特別是己六醇。例如，聚醇包括于注射型真皮填充劑組合物中的濃度可以是1％至25％，或2％至17％，或3％至13％體積/體積，特別是濃度為5％至11％，或7％至10％體積/體積。合適的維生素包括維生素c、維生素e、以及維生素b群，即一個(gè)或多個(gè)維生素b1、b2、b3、b5、b6、b7、b9和b12。維生素c或維生素e的濃度優(yōu)選為約0.01毫克/毫升(mg/ml)至約10.0mg/ml，更優(yōu)選為約0.1mg/ml至約5.0mg/ml，并且維生素b群的總濃度優(yōu)選為約0.01mg/ml至約10.0mg/ml，更優(yōu)選為約0.1mg/ml至約5.0mg/ml。維生素的存在可刺激并維持細(xì)胞代謝，因而促進(jìn)膠原蛋白的產(chǎn)生。具體地，優(yōu)選本文使用的是維生素c、維生素e和維生素b6。此外，根據(jù)本發(fā)明的注射型真皮填充劑組合物可還包括麻醉劑，特別是局部麻醉劑，優(yōu)選為利多卡因，濃度例如是0.05重量百分比(wt.％)至5.0wt.％，0.1wt.％至4.0wt.％，0.2wt.％至3.0wt.％，0.3wt.％至2.0wt.％，或0.4wt.％至1.0wt.％。本文進(jìn)一步設(shè)想，除了交聯(lián)型玻尿酸和cmc之外，注射型真皮填充劑組合物可包括交聯(lián)型和/或非交聯(lián)型聚合物。特別是，注射型真皮填充劑組合物可還包括0.001％至15％，特別是1％至10％體積/體積非交聯(lián)型玻尿酸。所述非交聯(lián)型玻尿酸的分子量?jī)?yōu)選介于3.0×105da和4.0×106da之間，特別是介于1.0×106da和3.0×106da之間。其他交聯(lián)型或非交聯(lián)型聚合物(諸如硫酸軟骨素、角質(zhì)素、硫酸角質(zhì)素、肝素、硫酸肝素、纖維素以及它們的衍生物，幾丁聚醣、鹿角菜膠、三仙膠、和藻酸鹽，或它們的鹽類(lèi)中的一種)也可少量(例如，少于10％，通常是少于5％，或少于1％體積/體積)包括于本發(fā)明的注射型真皮填充劑組合物中。然而，本文還設(shè)想到，除了本文所述的交聯(lián)型ha之外，注射型真皮填充劑組合物缺少任何交聯(lián)型聚合物，并且/或者除了本文所述的cmc之外，缺少任何非交聯(lián)型聚合物。在該上下文中，如本文所用，術(shù)語(yǔ)“聚合物”是指任何天然的或合成的聚合化合物，具有重復(fù)的結(jié)構(gòu)單元，包括多醣(諸如ha)。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的注射型真皮填充劑組合物，其包括包含微粒子(例如，cahap微粒子)的組合物，還包括麻醉劑，優(yōu)選為利多卡因，和/或上述的一種或多種聚醇。特別優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的注射型真皮填充劑組合物，其包括包含cahap微粒子的組合物，還包括利多卡因和丙三醇。此外，根據(jù)本發(fā)明，注射型真皮填充劑組合物可具有以下特性中的一個(gè)或多個(gè)：(i)在0.4赫茲(hz)的頻率(f)下，25℃時(shí)，彈性模量g'是50帕(pa)至4.500pa，優(yōu)選為100pa至4000pa，更優(yōu)選為150pa至2,500pa。(ii)在0.4赫茲(hz)的頻率下，25℃時(shí)，黏度是20pa·s至1,400pa·s，優(yōu)選為25pa·s至1,000pa·s，更優(yōu)選為30pa·s至900pa·s。(iii)在0.4赫茲(hz)的頻率下，25℃時(shí)，損耗角正切值(g"/g')是0.20至0.8，優(yōu)選為0.25至0.6。此外，如通過(guò)25g×5/8"的針頭(例如neoject)，使用標(biāo)準(zhǔn)的1ml注射器(例如，1mlbd注射器)在約50mm/分鐘的擠出速率下測(cè)量的，根據(jù)本發(fā)明的不具有任何微粒子(例如，cahap微粒子)的注射型真皮填充劑組合物的擠出力一般在10n至30n的范圍內(nèi)。如通過(guò)25gtw3/4的針頭(例如，泰爾茂可沛注射針(terumokpackii))，使用標(biāo)準(zhǔn)的1.5ml注射器(例如，1.5ml塑料注射器)在約50mm/分鐘的擠出速率下測(cè)量的，根據(jù)本發(fā)明的具有微粒子(例如，cahap微粒子)注射型真皮填充劑組合物的擠出力一般在35n至70n的范圍內(nèi)。此外，注射型真皮填充劑組合物一般包括緩沖液，例如磷酸緩沖液，以調(diào)整ph值。由于本發(fā)明的注射型真皮填充劑組合物用于插入人體中，ph值一般在6.5至7.5的范圍內(nèi)，優(yōu)選在6.8至7.4的范圍內(nèi)。此外，滲透壓優(yōu)選為約200mosmol/l至約400mosmol/l，更優(yōu)選為約280mosmol/l至約330mosmol/l。在第二方面，本發(fā)明涉及包括根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充劑組合物的試劑盒。該試劑盒還可包括使用說(shuō)明。在第三方面，本發(fā)明涉及制備根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充劑組合物的方法，包括以下步驟：(a)提供交聯(lián)型玻尿酸膠體。(b)提供cmc膠體。(c)將交聯(lián)型玻尿酸膠體與cmc膠體混合。提供于步驟(a)的交聯(lián)型玻尿酸膠體和/或提供于步驟(b)的cmc膠體優(yōu)選包括一種或多種如上所述的聚醇，特別是丙三醇。除此之外或另選地，一種或多種如上所述的聚醇，特別是丙三醇，也可在步驟(c)中或步驟(c)之后添加。此外，在本發(fā)明中，微粒子可懸浮于提供于步驟(b)的cmc膠體中，或另選地，微粒子可在步驟(c)中與交聯(lián)型玻尿酸膠體和cmc膠體混合。此外，微粒子可添加到在步驟(c)中獲得的混合物。優(yōu)選地，步驟(a)的交聯(lián)型玻尿酸膠體和/或步驟(b)的cmc膠體包括麻醉劑(例如利多卡因)。更優(yōu)選地，麻醉劑(例如利多卡因)在步驟(c)中或在步驟(c)之后添加到在步驟(c)中獲得的混合物。在第四方面中，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充劑組合物或根據(jù)本發(fā)明的第二方面的試劑盒在美容應(yīng)用中的使用。根據(jù)第四方面的使用，優(yōu)選地包括皮膚的皺紋和細(xì)紋(例如，臉部細(xì)紋和臉部皺紋)、皺眉紋、鼻唇溝、下巴紋、木偶紋、頰接合紋、口圍皺紋、魚(yú)尾紋、皮膚下垂、疤痕、鬢角、眉毛的皮下支撐、顴骨和頰脂墊、淚溝、鼻子、嘴唇、臉頰、口周?chē)鷧^(qū)域、眼框區(qū)域、臉部不對(duì)稱(chēng)、下顎輪廓和下巴的美容治療。在第五方面中，本發(fā)明涉及用于治療的根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充劑組合物。特別是，根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充劑組合物可用于治療壓力性尿失禁、膀胱輸尿管逆流、聲門(mén)閉合不全、聲帶內(nèi)移。在第六方面中，本發(fā)明涉及一種用于替換或填充生物組織，或增大生物組織的體積的方法，包括對(duì)有需要的受治療者施用有效量的根據(jù)本發(fā)明的第一方面的注射型真皮填充物組合物。通常，注射型真皮填充劑是通過(guò)注射而施用的，諸如通過(guò)皮下或皮內(nèi)注射。例如，該組合物可使用連續(xù)穿刺注射法來(lái)進(jìn)行皮內(nèi)或皮下注射。術(shù)語(yǔ)“有效量”是指足以實(shí)現(xiàn)有益的或期望的美容(美感)或治療結(jié)果的注射型真皮填充劑的量?！笆苤委熣摺痹诒景l(fā)明的意思中是需要治療特定情況或疾病的任何個(gè)體或患者。在本發(fā)明的架構(gòu)中，受治療者通常是人類(lèi)。該組合物優(yōu)選施用用于治療美容狀況，諸如皺紋或皮膚細(xì)紋(例如，臉部細(xì)紋或臉部皺紋)的治療、皺眉紋、鼻唇溝、下巴紋、木偶紋、頰接合紋、口圍皺紋、魚(yú)尾紋、皮膚下垂、疤痕、鬢角、眉毛的皮下支撐、顴骨及頰脂墊、淚溝、鼻子、嘴唇、臉頰、口周?chē)鷧^(qū)域、眼框區(qū)域、臉部不對(duì)稱(chēng)、下巴外形和下巴。然而，該組合物也可施用用于治療治療上的癥狀，諸如壓力性尿失禁、膀胱輸尿管逆流、聲門(mén)閉合不全、聲帶內(nèi)移。以上所提供的關(guān)于本發(fā)明的第一方面的所有解釋和評(píng)論(例如，關(guān)于包括于注射型真皮填充劑組合物中的成分或物質(zhì)、其制造方法、以及一些技術(shù)名詞的定義)相同地應(yīng)用于根據(jù)本發(fā)明的第六方面的方法。本發(fā)明現(xiàn)在將進(jìn)一步通過(guò)以下非限制性實(shí)施例進(jìn)行說(shuō)明。實(shí)施例以下提供的實(shí)施例說(shuō)明根據(jù)本發(fā)明的真皮填充劑組合物具有顯著降低的擠出力，而機(jī)械性質(zhì)(即，彈性模量(g')和黏度)出人意料地維持或甚至改善。擠出力的測(cè)量玻尿酸(ha)膠體的擠出力(具有或不具有cmc或自由型玻尿酸的潤(rùn)滑相)是使用1.0mlbd注射器和25g×5/8"(neoject)的針頭來(lái)確定的。為此，使用物性測(cè)試儀(textureanalyzer,ta.xtplus)。測(cè)試是使用0.500nd的預(yù)加載進(jìn)行的，并且測(cè)試速度為2in/分鐘。ha/cahap膠體的擠出力(具有或不具有cmc或自由型玻尿酸的潤(rùn)滑相)是使用1.5ml塑料注射器和泰爾茂可沛注射針27gtw3/4的針頭來(lái)確定的。為此，使用物性測(cè)試儀(ta.xtplus)。測(cè)試是使用0.500nd的預(yù)加載進(jìn)行的，并且測(cè)試速度為2in/分鐘。彈性模量(g’)和動(dòng)態(tài)黏度的測(cè)量彈性模量和黏度是使用由配備有直徑20mm的平板系統(tǒng)的流變儀(antonpaarmcr302)測(cè)量的。在ha膠體的實(shí)例中(具有或不具有cmc或自由型玻尿酸的潤(rùn)滑相)，彈性模量g'和黏度是使用以下設(shè)定來(lái)確定的：溫度30℃間隙尺寸1.0mm平板尺寸pp35tau(應(yīng)力)5pa頻率范圍0.1-10hz頻率/十進(jìn)數(shù)6在ha/cahap膠體的實(shí)例中(具有或不具有cmc或自由型玻尿酸的潤(rùn)滑相)，彈性模量g'和黏度是使用以下設(shè)定來(lái)確定的：溫度25℃間隙尺寸2mm平板尺寸pp20tau(應(yīng)力)30pa頻率范圍0.1-10hz頻率/十進(jìn)數(shù)6實(shí)施例1不具潤(rùn)滑相且具有或不具有cahap粒子的ha膠體(mhag膠體和mhai膠體)的制備(比較膠體)交聯(lián)溶液的制備ha“塊”(“cake”)是通過(guò)將43g的玻尿酸鈉(平均分子量約2.8mda)溶解于270.35g的磷酸緩沖液中制備而成的。所得的ha塊可儲(chǔ)存于冰箱中直到需要。另外，堿性溶液是通過(guò)將3.31g的固體氫氧化鈉溶解于10ml的緩沖液中制備而成的。此外，bdde溶液是通過(guò)將12.5g的2m的氫氧化鈉溶液與88.5g的磷酸緩沖液進(jìn)行混和，接著再將8.21ml的所得溶液與3.395ml的bdde混合制備而成的。交聯(lián)將ha塊手工地分為小碎片，將所有的堿性溶液加入杯，接著于12rpm下混合30至40分鐘。接著，將bdde溶液加入杯中，并于25rpm下持續(xù)混合10至15分鐘。溫度設(shè)定點(diǎn)改為33.33℃，并且混合物在該溫度下持續(xù)4小時(shí)。中和和純化中和溶液是通過(guò)添加920.99g的緩沖液到84.62g1m氯化氫(hcl)制備而成的。接著將整個(gè)中和溶液加入杯中，并在5℃下攪拌2小時(shí)。此后，膠體根據(jù)本領(lǐng)域熟知的方法進(jìn)行純化。接著使用所得的膠體(“mha膠體”)制備下述的mhag(不具有cahap)和mhai(具有cahap)膠體制劑。mhag膠體為了制備mhag膠體，濃縮的利多卡因溶液“l(fā)s1”是通過(guò)添加2g利多卡因至2g磷酸緩沖液，接著使用磁攪拌器溫和攪拌至完全溶解制備而成的。接著，使用合適的混合器將實(shí)施例1中所制備的467g的mha膠體與2116μl的“l(fā)s1”溶液混合15分鐘。此后，加入33g的丙三醇，并且適度地混和化合物1.5小時(shí)。在另外的脫氣步驟之后，裝填1ml注射器，并在127℃下滅菌4分鐘。mhai膠體此外，對(duì)應(yīng)于mhag膠體但另外包含cahap粒子的膠體是根據(jù)上述針對(duì)mhag膠體的制程進(jìn)行制備的，其與實(shí)施例4至6所制備的膠體的量相同。該交聯(lián)的ha膠體與cahap在下文中命名為“mhai”。實(shí)施例2具有15％cmc作為潤(rùn)滑相的ha膠體的制備(本發(fā)明的膠體)溶液“l(fā)b1”是通過(guò)添加62.75g的丙三醇至2.150g的利多卡因氫氟酸，并將該混合物溶解于135.142g的磷酸緩沖液中所制備而成的。接著，使用磁攪拌器進(jìn)行溫和攪拌直到完全溶解。接下來(lái)，將2.764g的羥甲基纖維素鈉(nacmc)與105.24g的lb1在杯中強(qiáng)烈混合1小時(shí)。脫氣之后，加入392.025g的實(shí)施例1所制備的mhag膠體，并適度混合1.5小時(shí)。在另外的脫氣步驟之后，裝填1ml注射器，并且在127℃下滅菌4分鐘。實(shí)施例3具有15％(v/v)的自由型ha作為潤(rùn)滑相的ha膠體的制備(比較膠體)溶液“l(fā)b2”是通過(guò)將1.131g的利多卡因氯化氫溶解于72.743g的磷酸緩沖液中所制備而成的。接著，加入1.170g的玻尿酸鈉(2.5-3.0mda)。完全溶解之后，加入33.005g的丙三醇。該混合物接著在適當(dāng)?shù)乃俣认聰嚢?小時(shí)30分鐘，并在使用之前維持在5℃下。具有15％(v/v)自由型ha潤(rùn)滑劑的ha膠體是通過(guò)將106.721g的lb2與387.357g的實(shí)施例1中所制備的mhag膠體混合所制備而成的。維持2小時(shí)的適度混合。脫氣之后，混合物轉(zhuǎn)移至1ml的注射器中，并在127℃下滅菌4分鐘。實(shí)施例4具有5％(v/v)cmc作為潤(rùn)滑相的ha/cahap膠體的制備(本發(fā)明的膠體)溶液“l(fā)b3”是使用與lb1相同的方式制備的，不同的是使用了以下材料和量：4.633g的nacmc，274.16g的丙三醇，以及121.3g的磷酸緩沖液。通過(guò)將280.02g的cahap(25μm至45μm)、48.22g的lb3、以及171.84g的實(shí)施例1中所制備的mhag膠體放置于混合杯中來(lái)制備具有5％(v/v)cmc潤(rùn)滑劑的ha/cahap膠體。接著，加入2.120ml的利多卡因溶液(2g的利多卡因溶于2g的磷酸緩沖液中)。在合適的速度下攪拌混合物1.5小時(shí)。在真空下脫氣之后，裝填1ml注射器，并且在121℃下滅菌20分鐘。實(shí)施例5具有10％(v/v)cmc作為潤(rùn)滑相的ha/cahap膠體的制備(本發(fā)明的膠體)溶液“l(fā)b4”是使用與lb1相同的方式制備的，不同的是使用了以下材料和量：7.039g的nacmc、208.527g的丙三醇、以及184.46g的磷酸緩沖液。具有10％(v/v)cmc潤(rùn)滑劑的ha/cahap膠體是如同實(shí)施例4所述的方式制備的，除了使用了以下量：280.02g的cahap(25μm至45μm)、63.29g的lb4、以及156.79g的實(shí)施例1中所制備的mhag膠體。實(shí)施例6具有15％(v/v)cmc作為潤(rùn)滑相的ha/cahap膠體的制備(本發(fā)明的膠體)溶液“l(fā)b5”是使用與lb1相同的方式制備的，不同的是使用了以下材料和量：8.529g的nacmc、168.266g的丙三醇、以及223.29g的磷酸緩沖液。具有15％(v/v)cmc潤(rùn)滑劑的ha/cahap膠體是如同實(shí)施例4所述的方式制備的，除了使用了以下量：280.02g的cahap(25μm至45μm)、78.46g的lb5、以及141.562g的實(shí)施例1中所制備的膠體mhag。實(shí)施例7具有10％(v/v)自由型ha作為潤(rùn)滑相的ha/cahap膠體的制備(比較膠體)溶液“l(fā)b6”是使用與lb2相同的方式制備的，不同的是使用了以下材料和量：208.548g的丙三醇、3.108g的玻尿酸鈉、以及188.581g的磷酸緩沖液。具有10％(v/v)自由型ha潤(rùn)滑劑的ha/cahap膠體是通過(guò)將156.781g的實(shí)施例1中所制備的mhag膠體與63.32g的lb6以及2120μl的利多卡因溶液(2g的利多卡因溶于2g的磷酸緩沖液中)混合而制備的。接著，加入280.02g的cahap(25μm至45μm)，并且適度混合1.5小時(shí)。脫氣之后，裝填1ml注射器，并且在121℃下滅菌20分鐘。實(shí)施例8cmc潤(rùn)滑劑或自由型ha潤(rùn)滑劑對(duì)于交聯(lián)型ha膠體的擠出力的效果在此實(shí)施例中，檢測(cè)添加cmc或自由型ha作為潤(rùn)滑劑對(duì)于ha膠體的擠出力的效果。為此，測(cè)量以下膠體的擠出力：mhag膠體(實(shí)施例1)、具有15％cmc的mhag膠體(實(shí)施例2)、以及具有15％自由型ha的mhag膠體(實(shí)施例3)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用cmc作為潤(rùn)滑劑顯著降低了擠出力。該降低類(lèi)似于自由型ha所觀(guān)察到的降低(參見(jiàn)圖1)。實(shí)施例9cmc潤(rùn)滑劑或自由型ha潤(rùn)滑劑對(duì)于膠聯(lián)型ha膠體的彈性模量(g')的影響在此實(shí)施例中，檢測(cè)cmc潤(rùn)滑劑和自由型ha潤(rùn)滑劑對(duì)于ha膠體的彈性模量(g')的影響。為此，測(cè)量與實(shí)施例8相同的膠體的彈性模量g'(在1hz，25℃下)。據(jù)發(fā)現(xiàn)，添加cmc稍微增大g'，而添加自由型ha則降低g'(參見(jiàn)圖2)。由于g'的參數(shù)影響填充劑的拉提能力，因此g'的維持相當(dāng)重要。因此，由于相對(duì)于cmc觀(guān)察到甚至稍微的增大，預(yù)期具有15％(v/v)cmc的mhag膠體一旦位于皮膚之下便較不可能移位，由此導(dǎo)致更加“拉提”。實(shí)施例10cmc潤(rùn)滑劑或自由型ha潤(rùn)滑劑對(duì)于膠聯(lián)型ha膠體的黏度的影響在此實(shí)施例中，檢測(cè)cmc潤(rùn)滑劑和自由型ha潤(rùn)滑劑對(duì)于黏度的影響。為此，對(duì)與實(shí)施例8相同的膠體進(jìn)行黏度測(cè)定(在0.4hz，25℃下)。據(jù)發(fā)現(xiàn)，cmc的添加增大黏度，而ha的添加則稍微降低黏度(參見(jiàn)圖3)。由于增大的黏度將限制膠體在軟組織中的擴(kuò)展，并且還將有助于體積增大的效果，因此黏度也是填充劑組合物的重要參數(shù)。實(shí)施例11cmc潤(rùn)滑劑或自由型ha潤(rùn)滑劑對(duì)于交聯(lián)型ha/cahap膠體的擠出力的效果為了研究添加cahap粒子是否改變上述添加cmc或自由型ha至交聯(lián)型ha膠體所得的結(jié)果，制備以下膠體：mhai(包括交聯(lián)型ha和cahap粒子；參加實(shí)施例1)，具有10％cmc的mhai(實(shí)施例5)，以及具有10％自由型ha的mhai(實(shí)施例7)。此外，除了“稀釋的mhai”膠體的ha濃度為15mg/g之外，稀釋的mhai膠體對(duì)應(yīng)于mhai膠體進(jìn)行制備。接著，測(cè)量上述膠體的擠出力。據(jù)發(fā)現(xiàn)，添加10％cmc潤(rùn)滑劑顯著降低擠出力。該降低稍微大于自由型ha所觀(guān)察到的降低。此外，應(yīng)注意的是，cmc或自由型ha潤(rùn)滑劑的使用提供擠出力的降低，類(lèi)似于具有較低濃度的ha基質(zhì)的“稀釋的mhai膠體”所觀(guān)察到的擠出力的降低(參見(jiàn)圖4)。因此，將cahap粒子加入交聯(lián)型ha膠體并不改變針對(duì)不具有cahap粒子的交聯(lián)型ha膠體所觀(guān)察到的基本結(jié)果。然而，在ha膠體具有cahap粒子的情況下，擠出力的降低甚至更為明顯。實(shí)施例12cmc潤(rùn)滑劑或自由型ha潤(rùn)滑劑對(duì)于交聯(lián)型ha/cahap膠體的彈性模量(g')的影響在此實(shí)施例中，檢測(cè)cmc潤(rùn)滑劑或自由型ha潤(rùn)滑劑對(duì)于交聯(lián)型ha/cahap膠體的彈性模量(g')的影響。為此，對(duì)于與實(shí)施例11相同的膠體進(jìn)行彈性模量(g')測(cè)定(在1hz,25℃下)。據(jù)發(fā)現(xiàn)，添加10％的cmc導(dǎo)致g'的極大增大。相對(duì)地，添加10％的自由型ha卻伴隨著g'的輕微下降，并且ha基質(zhì)的稀釋造成彈性模量的巨幅下降，這將劇烈改變膠體的性質(zhì)和臨床結(jié)果(參見(jiàn)圖5)。如同上述，具有高彈性模量g'的膠體將導(dǎo)致更優(yōu)良的體積增大效果。因此，此實(shí)施例顯示將cmc潤(rùn)滑劑添加至交聯(lián)型ha/cahap膠體造成更優(yōu)異的提升能力。實(shí)施例13cmc潤(rùn)滑劑或自由型ha潤(rùn)滑劑對(duì)于交聯(lián)型ha/cahap膠體的黏度的影響在此實(shí)施例中，檢測(cè)cmc潤(rùn)滑劑或自由型ha潤(rùn)滑劑對(duì)于交聯(lián)型ha/cahap膠體的黏度的影響。為此，使用與實(shí)施例11相同的膠體對(duì)黏度進(jìn)行測(cè)定(在0.4hz，25℃下)。據(jù)發(fā)現(xiàn)，添加10％cmc導(dǎo)致黏度的顯著增大，而添加ha僅有微小的影響。如所預(yù)期的，ha基質(zhì)的稀釋造成不小于約75％的黏度損失。在此方面，需指出的是，所添加的cmc潤(rùn)滑劑的濃度可根據(jù)所需的擠出力進(jìn)行調(diào)整，如下文實(shí)施例14所示。實(shí)施例14改變cmc潤(rùn)滑劑的濃度對(duì)于交聯(lián)型ha/cahap膠體的擠出力的影響在此實(shí)施例中，檢測(cè)所添加的cmc潤(rùn)滑劑的濃度改變與擠出力之間的關(guān)系。為此，測(cè)量以下膠體的擠出力：mhai(交聯(lián)型ha/cahap膠體，實(shí)施例1)、具有5％cmc的mhai(實(shí)施例4)、具有10％cmc的mhai(實(shí)施例5)、以及具有15％cmc的mhai(實(shí)施例6)。據(jù)發(fā)現(xiàn)，僅添加5％的cmc導(dǎo)致擠出力的顯著減小，這可通過(guò)添加10％的cmc而進(jìn)一步地減小，并且通過(guò)添加15％的cmc而再進(jìn)一步地減小(參見(jiàn)圖7)。總的來(lái)講，上述實(shí)施例1至14顯示ha膠體的稀釋導(dǎo)致擠出力的下降，但還與彈性模量和黏度的顯著下降相關(guān)，這將顯著地?fù)p害填充劑的臨床結(jié)果。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步顯示，如果添加自由型ha作為潤(rùn)滑劑，擠出力降低，但遺憾的是，彈性模量和黏度也出現(xiàn)輕微至中等的降低。相比之下，根據(jù)本發(fā)明，如果使用cmc作為潤(rùn)滑劑，則驚喜地發(fā)現(xiàn)，不僅導(dǎo)致擠出力的顯著降低，還造成彈性模量g'和黏度的增大，特別是在具有分散粒子(cahap粒子)的交聯(lián)型ha膠體的情況下。彈性模量g'的增大和黏度的增大均在注射時(shí)導(dǎo)致真皮填充劑組合物的改善的拉提效果。此外，由于ha膠體的交聯(lián)性質(zhì)，將在人體中獲得長(zhǎng)期的持久性。因此，上文所呈現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)提供證據(jù)，根據(jù)本發(fā)明的真皮填充劑組合物提供持久性、拉提能力和易注射性的最佳平衡。當(dāng)前第1頁(yè)12