本公開涉及局部給予制劑的領(lǐng)域，如眼用制劑，和這種制劑的使用方法。
發(fā)明背景
本文提供的信息和引用的參考文獻僅僅是為了協(xié)助讀者理解而提供，而非承認任一參考文獻或信息是本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。
美國專利申請?zhí)朥S2010/0310462和US2009/0092665公開了眼用藥物遞送系統(tǒng)，其具有包含維生素E TPGS的納米膠束。
曲伏前列素(Travoprost)涉及包括HCO-40和前列腺素類似物作為活性成分的用于青光眼或眼高壓的制劑。參見萬維網(wǎng)dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/lookup.cfm？setid＝338e7ff4-0d91-4208-a45d-bfa2be52334d?；钚猿煞忠?.004％存在。該制劑包括丙二醇，并且不包括納米膠束。曲伏前列素中存在0.5％的HCO-40。參見萬維網(wǎng)ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/EPAR_-_Product_Information/human/000665/W C500038389.pdf。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本公開涉及局部制劑，如適于眼睛給予活性成分如布林唑胺(brinzolamide)、拉坦前列素(latanoprost)、溴莫尼定(brimonidine)、波生坦(bosentan)、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)的制劑。在某些方面和實施方式中，本公開的制劑可包括聚氧乙烯(polyoxyl)脂質(zhì)或脂肪酸和/或聚烷氧基化醇，并且可包括納米膠束。
在本文描述的某些方面和實施方式中，本文描述的制劑可具有某些在本公開之前不能預料到的出人意料的特征和優(yōu)勢。例如，本公開的制劑可能夠支持活性成分如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)的劑量出人意料地高于很多現(xiàn)有技術(shù)制劑和/或產(chǎn)生出人意料地較高眼組織濃度。用于本文所述制劑的活性成分或用劑的劑量可基于各種標準來選擇，包括制劑可支持的量、各種治療應(yīng)用的期望劑量等。關(guān)于這點，在一些實施方式中，活性劑(如用于眼部給予)可以是制劑的至少約0.05wt％、或至少約0.08wt％、或至少約0.09wt％、或至少約0.1wt％、或至少約0.15wt％、或至少約0.2wt％、或至少約0.3wt％、或至少約0.4wt％、或至少約0.5wt％、或至少約0.6wt％、或至少約0.7wt％、或至少約0.8wt％、或至少約0.9wt％、或至少約1.0wt％、或至少約1.5wt％、或至少約2wt％、或至少約3wt％、或至少約4wt％、或至少約5wt％、或0.05和5wt％之間、或0.05和0.5wt％之間、或0.05和0.2wt％之間、或0.08和0.12wt％之間、或0.1和0.5wt％之間、或0.5和1wt％之間、或0.5和1.5wt％之間、或1和5wt％之間、或2和4wt％之間、或4和6wt％之間。
在一些實施方式中，制劑具有包埋效率相對增加的納米膠束；在這種實施方式中，活性劑(如用于眼部給予的布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、或波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體))可以是制劑的至少約0.05wt％、或至少約0.08wt％、或至少約0.09wt％、或至少約0.1wt％、或至少約0.15wt％；或至少約0.2wt％、或至少約0.3wt％、或至少約0.4wt％、或至少約0.5wt％、或至少約0.6wt％、或至少約0.7wt％、或至少約0.8wt％、或至少約0.9wt％、或至少約1.0wt％、或至少約1.5wt％、或至少約2wt％、或至少約3wt％、或至少約4wt％、或至少約5wt％、或0.05和5wt％之間、或0.05和0.5wt％之間、或0.05和0.2wt％之間、或0.08和0.12wt％之間、或0.1和0.5wt％之間、或0.5和1wt％之間、或0.5和1.5wt％之間、或1和5wt％之間、或2和4wt％之間、或4和6wt％之間，并且存在于制劑的納米膠束中。
在某些方面和實施方式中，本公開的制劑出人意料地有效溶解和/或遞送活性成分(如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、或波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體))，而無需在眼用制劑被包含時可能是刺激物的有機溶劑(如丙二醇)。
在一些實施方式中，本公開的制劑在高溫(例如，約40℃以上的溫度)下出人意料地穩(wěn)定。在一些方面和實施方式中，本文描述的一些制劑的納米膠束屬性允許改善的眼組織分布。在某些方面和實施方式中，本文描述的制劑特別適于前眼遞送、或后眼遞送、或前眼和后眼遞送。此外，本公開的某些方面和實施方式的制劑可具有出人意料的優(yōu)勢：可適于促進具有不同尺寸或性質(zhì)的活性劑的遞送；例如，在包括聚氧乙烯蓖麻油的制劑的某些實施方式中，HCO-60可用于具有相對小分子尺寸的活性劑，而HCO-80和/或HCO-100可用于相對較大尺寸的活性劑。
因此，第一方面提供眼用制劑，其包括活性劑如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)、聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸和聚烷氧基化醇。在一些實施方式中，制劑包括納米膠束。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是選自HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100的一種或多種。在一些實施方式中，存在的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸(如聚氧乙烯蓖麻油，如HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100)為制劑的按重量計1和6％之間；或2和6％之間；或2和6％之間；或3和6％之間；或4和6％之間；或2和5％之間；或3和5％之間；或3和5％之間；或2和6％之間；或約4％；或大于0.7％；或大于1％、或大于1.5％；或大于2％；或大于3％；或大于4％。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-60。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-80。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-100。在一些實施方式中，制劑包括聚烷氧基化醇，該聚烷氧基化醇是辛基酚聚醚(octoxynol)-40。在一些實施方式中，制劑包括聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)，存在的聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)為制劑的按重量計0.002和4％之間；或0.005和3％之間；或0.005和2％之間；或0.005和1％之間；或0.005和0.5％之間；或0.005和0.1％之間；或0.005和0.05％之間；或0.008和0.02％之間；或約0.01％。
如本文所用，術(shù)語“聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸(polyoxyl lipid or fatty acid)”指代脂質(zhì)或脂肪酸和聚氧乙烯二醇的單酯和二酯。聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸可如本領(lǐng)域公知根據(jù)氧乙烯單元的平均聚合物長度(例如，40、60、80、100)來編號(“n”)。術(shù)語“n≥40聚氧乙烯脂質(zhì)”意為聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸的平均氧乙烯聚合物長度等于或大于40個單元。硬脂酸酯氫化蓖麻油和蓖麻油是常規(guī)可作為聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸使用的常見脂質(zhì)/脂肪酸，然而，要理解任何脂質(zhì)或脂肪酸可被聚氧化，以形成本文考慮的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸。聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸的實例非限制地包括HCO-40、HCO-60、HCO-80、HCO-100、聚氧乙烯40硬脂酸酯、聚氧乙烯35蓖麻油、及類似物。
在本文描述的任一種組合物和方法的一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸的氧乙烯單元的平均聚合物長度在活性相對較大的成分中較長，而在活性相對較小的成分中較短；例如，在活性成分是布林唑胺的一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-60，而在活性成分是波生坦(大于布林唑胺)的一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-80或HCO-100。
如本文所用，術(shù)語″膠束″或“納米膠束”指代表面活性劑分子的聚集物(或簇團)。膠束僅在表面活性劑濃度大于臨界膠束濃度(CMC)時形成。表面活性劑是兩性化學劑，意味著其包含疏水和親水基團。膠束可以不同形狀存在，包括球形、圓柱形和圓盤形。包括至少兩種不同分子種類的膠束是混合膠束。在一些實施方式中，本公開的眼用組合物包括澄清的混合膠束水溶液。
第二方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；和n≥40聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸。在一些實施方式中，制劑包括納米膠束。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是選自HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100的一種或多種。在一些實施方式中，存在的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸(如聚氧乙烯蓖麻油，如HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100)為制劑的按重量計0.5和2％之間、或0.7和2％之間、或1和6％之間、或2和6％之間、或2和6％之間、或3和6％之間、或4和6％之間、或2和5％之間、或3和5％之間、或3和5％之間、或2和6％之間、或約4％、或大于0.7％、或大于1％、或大于1.5％、或大于2％、或大于3％、或大于4％。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-60。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-80。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-100。
在一些實施方式中，制劑進一步包括聚烷氧基化醇。在一些實施方式中，制劑進一步包括聚烷氧基化醇，其為辛基酚聚醚-40。在一些實施方式中，制劑包括聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)，存在的聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)為制劑的按重量計0.002和4％之間、或0.005和3％之間、或0.005和2％之間、或0.005和1％之間、或0.005和0.5％之間、或0.005和0.1％之間、或0.005和0.05％之間、或0.008和0.02％之間、或0.01和0.1％之間、或0.02和0.08％之間、或0.005和0.08％之間、或約0.05％、或約0.01％。
第三方面，提供眼用制劑，其包括活性成分，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；和聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸的存在量等于或大于所述制劑的1wt％。在類似方面，提供眼用制劑，其包括活性成分，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物；和聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸的存在量等于或大于所述制劑的0.05wt％。在一些實施方式中，制劑包括納米膠束。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是選自HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100的一種或多種。在一些實施方式中，存在的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸(如聚氧乙烯蓖麻油，如HCO-60、HCO-80或HCO-100)為制劑的按重量計0.5和2％之間、或0.7和2％之間、或1和6％之間、或2和6％之間、或2和6％之間、或3和6％之間、或4和6％之間、或2和5％之間、或3和5％之間、或3和5％之間、或2和6％之間、或約4％、或大于1.5％、或大于2％、或大于3％、或大于4％。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-40。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-60。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-80。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-100。
在一些實施方式中，制劑進一步包括聚烷氧基化醇。在一些實施方式中，制劑進一步包括聚烷氧基化醇，其為辛基酚聚醚-40。在一些實施方式中，制劑包括聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)，存在的聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)為制劑的按重量計0.002和4％之間、或0.005和3％之間、或0.005和2％之間、或0.005和1％之間、或0.005和0.5％之間、或0.005和0.1％之間、或0.005和0.05％之間、或0.008和0.02％之間、或0.01和0.1％之間、或0.02和0.08％之間、或0.005和0.08％之間、或約0.05％、或約0.01％。
第四方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；和聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；其中所述制劑包括納米膠束。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是選自HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100的一種或多種。在一些實施方式中，存在的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸(如聚氧乙烯蓖麻油，如HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100)為制劑的按重量計0.5和2％之間、或0.7和2％之間、或1和6％之間、或2和6％之間、或2和6％之間、或3和6％之間、或4和6％之間、或2和5％之間、或3和5％之間、或3和5％之間、或2和6％之間、或約4％、或大于0.7％、或大于1％、或大于1.5％、或大于2％、或大于3％、或大于4％。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-40。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-60。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-80。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-100。
在一些實施方式中，制劑進一步包括聚烷氧基化醇。在一些實施方式中，制劑進一步包括聚烷氧基化醇，其為辛基酚聚醚-40。在一些實施方式中，制劑包括聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)，存在的聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)為制劑的按重量計0.002和4％之間、或0.005和3％之間、或0.005和2％之間、或0.005和1％之間、或0.005和0.5％之間、或0.005和0.1％之間、或0.005和0.05％之間、或0.008和0.02％之間、或0.01和0.1％之間、或0.02和0.08％之間、或0.005和0.08％之間、或約0.05％、或約0.01％。
在進一步方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1-5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.002-4wt％的辛基酚聚醚-40。
另一方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1-5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.005-3wt％的辛基酚聚醚-40。
再一方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1-5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.005-2wt％的辛基酚聚醚-40。
一方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1-5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.005-1wt％的辛基酚聚醚-40。
在進一步方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；約4wt％的HCO-60和約0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
另一方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；0.7-1.5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.002-4wt％的辛基酚聚醚-40。
另一方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；0.7-1.5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.005-3wt％的辛基酚聚醚-40。
再一方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；0.7-1.5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.005-2wt％的辛基酚聚醚-40。
一方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；0.7-1.5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.05wt％的辛基酚聚醚-40。
在進一步方面，提供眼用制劑，其包括活性劑，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意兩種或更多種的混合物(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；約1wt％的HCO-60；和約0.05wt％的辛基酚聚醚-40。
在本文描述的任一方面和實施方式的不同實施方式中，制劑包括納米膠束。
在本文描述的方面和實施方式的一些實施方式中，制劑包括聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是選自HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100的一種或多種。在一些實施方式中，存在的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸(如聚氧乙烯蓖麻油，如HCO-60、HCO-80或HCO-100)為制劑的按重量計0.5和2％之間、或0.7和2％之間、或1和6％之間、或2和6％之間、或2和6％之間、或3和6％之間、或4和6％之間、或2和5％之間、或3和5％之間、或3和5％之間、或2和6％之間、或約4％、或大于0.7％、或大于1％、或大于1.5％、或大于2％、或大于3％、或大于4％。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-40。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-60。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-80。在一些實施方式中，聚氧乙烯脂質(zhì)是HCO-100。
在本文公開的方面和實施方式的一些實施方式中，制劑包括聚烷氧基化醇。在一些實施方式中，制劑包括聚烷氧基化醇，其為辛基酚聚醚-40。在一些實施方式中，制劑包括聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)，存在的聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)為制劑的按重量計0.002和4％之間、或0.005和3％之間、或0.005和2％之間、或0.005和1％之間、或0.005和0.5％之間、或0.005和0.1％之間、或0.005和0.05％之間、或0.008和0.02％之間、或0.01和0.1％之間、或0.02和0.08％之間、或0.005和0.08％之間、或約0.05％、或約0.01％。
在一些實施方式中，活性成分是碳酸脫水酶抑制劑，如布林唑胺、醋甲唑胺(methazolamide)、多佐胺(dorzolamide)、托吡酯(topiramate)、石榴鞣質(zhì)(punicalin)、安石榴苷(punicalagin)、石榴皮亭B(granatin B)、加拉巴酸二內(nèi)酯(gallagyldilactone)、木麻黃鞣寧(casuarinin)、赤芍素(pedunculagin)、特里馬素I(tellimagrandin I)及類似物、以及其藥學上可接受的鹽、前藥或變體。在一些實施方式中，碳酸脫水酶抑制劑是布林唑胺，其具有結(jié)構(gòu)：
在一些實施方式中，活性劑是類前列腺素(prostaniod)，如拉坦前列素，其具有結(jié)構(gòu)：
拉坦前列素也以品牌名稱Xalatan(由Pfizer生產(chǎn))為名。
在一些實施方式中，活性劑是α2腎上腺素能激動劑，如溴莫尼定，其具有結(jié)構(gòu)：
溴莫尼定可作為如下使用：滴眼液，品牌名稱Alphagan和Alphagan-P；和凝膠，品牌名稱Mirvaso。
在一些實施方式中，活性成分是內(nèi)皮素受體拮抗劑，如波生坦(屬于無手性中心的高度取代型嘧啶衍生物類別)、安立生坦(ambrisentan)、西他生坦(sitaxsentan)、及類似物。在一些實施方式中，內(nèi)皮素受體拮抗劑是波生坦，其具有如下結(jié)構(gòu)：
如本文所用，術(shù)語“藥學上可接受的鹽”包括根據(jù)在本文所述化合物上找到的具體取代基利用相對無毒的酸或堿而制備的活性化合物的鹽。當本發(fā)明的化合物包含相對酸性的官能團時，可通過使這種化合物的中性形式與足量期望的堿接觸(純凈或在適當?shù)亩栊匀軇┲?獲得堿加成鹽。藥學上可接受的堿加成鹽的實例包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、銨鹽、有機胺鹽、或鎂鹽、或類似鹽。當本發(fā)明的化合物包含相對堿性的官能團時，可通過使這種化合物的中性形式與足量期望的酸接觸(純凈或在適當?shù)亩栊匀軇┲?獲得酸加成鹽。藥學上可接受的酸加成鹽的實例包括衍生自諸如鹽酸、氫溴酸、硝酸、碳酸、一氫碳酸、磷酸、一氫磷酸、二氫磷酸、硫酸、一氫硫酸、氫碘酸、或亞磷酸及類似物的無機酸的那些鹽、以及衍生自諸如乙酸、丙酸、異丁酸、馬來酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富馬酸、乳酸、扁桃酸、苯二甲酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、檸檬酸、酒石酸、草酸、甲磺酸、及類似物的相對無毒的有機酸的鹽。還包括氨基酸鹽，如精氨酸鹽及類似物；和諸如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸及類似物的有機酸的鹽(參見，例如，Berge等，“Pharmaceutical Salts”，Journal of Pharmaceutical Science，1977，66，1-19)。本發(fā)明的某些具體化合物包含堿性和酸性官能團，其允許化合物轉(zhuǎn)化成堿加成鹽或酸加成鹽。
因此，本發(fā)明實踐應(yīng)用考慮的化合物可作為鹽(如與藥學上可接受的酸一起)存在。本發(fā)明包括這種鹽。這種鹽的實例包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、甲磺酸鹽、硝酸鹽、馬來酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽(例如、(+)-酒石酸鹽、(-)-酒石酸鹽、或其混合物，包括消旋混合物)、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽、和與氨基酸如谷氨酸的鹽。這些鹽可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。
除鹽形式外，本公開還提供前藥形式的化合物。術(shù)語“前藥”及類似術(shù)語在通常和習慣意義上指代在生理條件下容易發(fā)生化學變化以提供本公開的化合物的化合物。另外，前藥可在離體環(huán)境中通過化學或生物化學方法轉(zhuǎn)化成本公開的化合物。
如本文所用，術(shù)語“藥學上可接受的賦形劑”、“藥學上可接受的載體”及類似術(shù)語在通常和習慣意義上指代有助于向?qū)ο蠼o予和對象吸收活性劑并且可被包含本發(fā)明的組合物中而不對患者引起顯著不良毒理作用的物質(zhì)。術(shù)語“不良毒理作用”及類似術(shù)語在通常和習慣意義上指代如醫(yī)療或獸醫(yī)學從業(yè)者判斷的或本領(lǐng)域已知的、候選賦形劑不應(yīng)被使用的象征。除非有相反的說明，術(shù)語“藥物”、“活性劑”、“活性成分”、“治療活性劑”、“治療劑”和類似術(shù)語同義使用。藥學上可接受的賦形劑的非限制性實例包括水、NaCl、生理鹽水溶液、乳酸化Ringer’s、正蔗糖(normal sucrose)、正葡萄糖(normal glucose)、粘合劑、填充劑、崩解劑、潤滑劑、包衣、甜味劑、調(diào)味劑、藥學上可接受的鹽的溶液(例如，Ringer’s溶液)、醇、油、明膠、碳水化合物如乳糖、直鏈淀粉或淀粉、脂肪酸酯、羥基甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、和著色劑、及類似物。這種制劑可被滅菌，并且如需與下列混合：與本發(fā)明化合物無不利反應(yīng)的輔助劑，如潤滑劑、保存劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑、影響滲透壓的鹽、緩沖劑、著色物、和/或芳香物及類似物。本領(lǐng)域技術(shù)人員將知道，其它藥物賦形劑可用于本發(fā)明。
本公開進一步涉及治療或預防眼部疾病或障礙——例如通過局部給予本文描述的制劑。
通過本公開的組合物或方法的任一種治療的患者或?qū)ο罂梢鉃槿嘶蚍侨藙游?。在實施方式中，本公開提供治療對其有需要的人類患者的眼部疾病的方法。在實施方式中，本公開提供治療對其有需要的人類患者的炎性眼部疾病的方法。在另一實施方式中，本公開提供治療對其有需要的獸醫(yī)學患者的眼部疾病的方法，該獸醫(yī)學患者包括但不限于狗、馬、貓類、兔、沙鼠、倉鼠、嚙齒動物、鳥、水生哺乳動物、牛、豬、駱駝科、和其它動物學動物。
在本文公開的組合物和方法的一些實施方式中，活性劑包括兩種或更多種不同的活性成分(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)的組合。在一些實施方式中，活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑(如布林唑胺)和至少一種第二活性劑——如PCT公開號WO 2014/032026(其全部內(nèi)容通過引用并入本文)描述的那些。在一些實施方式中，活性劑包括內(nèi)皮素受體拮抗劑(如波生坦)和至少一種第二活性劑——如PCT公開號WO 2014/032026(其全部內(nèi)容通過引用并入本文)描述的那些。
在一些實施方式中，活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑和內(nèi)皮素受體拮抗劑。在一些實施方式中，活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑和消退素(resolvin)。在一些實施方式中，活性劑包括內(nèi)皮素受體拮抗劑和消退素。在一些實施方式中，活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑和類前列腺素。在一些實施方式中，活性劑包括內(nèi)皮素受體拮抗劑和類前列腺素。在一些實施方式中，活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑和α2腎上腺素能激動劑。在一些實施方式中，活性劑包括內(nèi)皮素受體拮抗劑和α2腎上腺素能激動劑。
術(shù)語″治療″指代：防止疾病、障礙或狀況在可易患疾病、障礙和/或狀況但還未被診斷患有該疾病、障礙和/或狀況的細胞、組織、系統(tǒng)、動物或人中發(fā)生；穩(wěn)定化疾病、障礙或狀況，即，遏制其發(fā)展；和/或緩解疾病、障礙或狀況的一種或多種癥狀，即，導致疾病、障礙和/或狀況消退。
如本文所用，“預防”障礙或狀況的治療劑指代在統(tǒng)計樣本中，使經(jīng)治療的樣本中障礙或狀況的發(fā)生相對于未治療對照樣本減少，或使障礙或狀況的一種或多種癥狀相對于未治療對照樣本發(fā)作延遲或嚴重程度降低的化合物。
如本文所用，術(shù)語″眼部疾病″、″眼部狀況″、″眼疾病″和″眼狀況″指代眼睛疾病/狀況，其可以威脅視力，導致眼睛不適，和可發(fā)出全身性健康問題信號。
如本文所用，術(shù)語″前段疾病″指代所有感染眼睛的眼表面、前房、虹膜和睫狀體和晶狀體的障礙。眼表面由角膜、結(jié)膜、眼瞼、淚腺和瞼板腺、和互連神經(jīng)構(gòu)成。
如本文所用，術(shù)語″后段眼疾病″和″眼后疾病″指代所有感染眼睛后段的障礙。后眼疾病是原發(fā)性感染后眼部位如脈絡(luò)膜或鞏膜、玻璃體、玻璃體腔、視網(wǎng)膜、視神經(jīng)和血管以及后眼部位的血管化或神經(jīng)支配神經(jīng)的疾病。
因此，一方面，提供治療或預防眼部疾病或狀況的方法，包括局部給予本文公開的任何方面或?qū)嵤┓绞降闹苿Ｔ谝恍嵤┓绞街?，眼部疾病是前段疾病。在一些實施方式中，眼部疾病是后段疾病。在一些實施方式中，眼部疾病是選自原發(fā)性開角型青光眼、原發(fā)性閉角型青光眼、眼高壓、炎性青光眼、藥物誘發(fā)的青光眼、糖尿病性視網(wǎng)膜病(DR)、視神經(jīng)炎、球后視神經(jīng)炎、和黃斑皺褶的一種或多種。在一個實施方式中，眼部疾病是原發(fā)性開角型青光眼。在一個實施方式中，眼部疾病是原發(fā)性閉角型青光眼。在一個實施方式中，眼部疾病是視神經(jīng)炎。在一個實施方式中，眼部疾病是糖尿病性視網(wǎng)膜病。
具體實施方式
活性劑
根據(jù)本文提供的方法和組合物的不同方面和實施方式，活性劑可以是任何能夠影響生物學過程的用劑(例如，布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、或波生坦)?；钚詣?術(shù)語活性成分與術(shù)語活性劑在本文中互換使用)包括藥物、激素、細胞因子、毒素、治療劑、維生素及類似物。在一些實施方式中，根據(jù)本文公開的方面和實施方式的活性劑是能夠或被批準用于治療或預防疾病或狀況的用劑，例如，在一些實施方式中，活性劑能夠或被批準用于治療或預防眼部疾病或狀況。
在一些實施方式中，活性劑是碳酸脫水酶抑制劑，如布林唑胺、醋甲唑胺、多佐胺、托吡酯、石榴鞣質(zhì)、安石榴苷、石榴皮亭B、加拉巴酸二內(nèi)酯、木麻黃鞣寧、赤芍素、特里馬素I、及類似物、以及其藥學上可接受的鹽、前藥或變體。
在一些實施方式中，活性劑是內(nèi)皮素受體拮抗劑，其屬于無手性中心的高度取代型嘧啶衍生物類別。示例性內(nèi)皮素受體拮抗劑包括波生坦、安立生坦、西他生坦、及類似物、以及其藥學上可接受的鹽、前藥或變體。
在一些實施方式中，活性劑是類前列腺素，如拉坦前列素、曲伏前列素、他氟前列腺素(tafluprost)、unaprostone、比馬前列素(bimatoprost)、及類似物、以及其藥學上可接受的鹽、前藥或變體。
在一些實施方式中，活性劑是α2腎上腺素能激動劑，如安普樂定(apraclonidine)、溴莫尼定、可樂定(clonidine)、地托咪定(detomidine)、右旋美托咪啶(dexmedetomidine)、fadolmidine、胍那芐(guanabenz)、胍法新(guanfacine)、洛非西定(lofexidine)、美托咪定(medetomidine)、甲基苯丙胺(methamphetamine)、米伐西醇(mivazerol)、利美尼定(rilmenidine)、羅米非定(romifidine)、他利克索(talipexole)、替扎尼定(tizanidine)、托洛尼定(tolonidine)、賽拉嗪(xylazine)、賽洛唑啉(xylometazoline)、及類似物、以及其藥學上可接受的鹽、前藥或變體。
在本文公開的組合物和方法的一些實施方式中，活性劑包括兩種或更多種不同活性成分的組合。在一些實施方式中，活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑(如布林唑胺)和至少一種第二活性劑——如PCT公開號WO 2014/032026(其全部內(nèi)容通過引用并入本文)描述的那些。在一些實施方式中，活性劑包括內(nèi)皮素受體拮抗劑(如波生坦)和至少一種第二活性劑——如PCT公開號WO 2014/032026(其全部內(nèi)容通過引用并入本文)描述的那些。
在一些實施方式中，活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑和內(nèi)皮素受體拮抗劑。在一些實施方式中，活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑和類前列腺素。在一些實施方式中，活性劑包括內(nèi)皮素受體拮抗劑和類前列腺素。在一些實施方式中，活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑和α2腎上腺素能激動劑。在一些實施方式中，活性劑包括內(nèi)皮素受體拮抗劑和α2腎上腺素能激動劑。在一些實施方式中，活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑和β-腎上腺素能受體拮抗劑。在一些實施方式中，活性劑包括內(nèi)皮素受體拮抗劑和β-腎上腺素能受體拮抗劑。
眼部疾病
在不同方面和實施方式中，本文公開的制劑可用于治療或預防眼部疾病或障礙。在此考慮的眼部疾病和障礙包括前段疾病和后段疾病。在某些實施方式中可用本文公開的制劑治療的示例性眼部疾病包括下列。
開角型青光眼是帶有特征性獲得性視神經(jīng)纖維損失的慢性和進行性多因素視神經(jīng)病。這種損失在存在前房開角、特征性視野異常、和對于眼睛持續(xù)健康而言過高眼內(nèi)壓的情況·下產(chǎn)生。
閉角型青光眼由眼內(nèi)壓快速或突然增加引起。
糖尿病可以多種方式影響眼睛。糖尿病性視網(wǎng)膜病(DR)是眼睛后方(視網(wǎng)膜)的感光組織血管損傷導致的糖尿病并發(fā)癥。最初，糖尿病性視網(wǎng)膜病可不引起癥狀或僅引起輕度視覺問題。然而，最終，糖尿病性視網(wǎng)膜病可導致失明。糖尿病性黃斑水腫(DME)是糖尿病中流體在黃斑內(nèi)從血管泄露造成的視網(wǎng)膜腫脹。
增生性玻璃體視網(wǎng)膜病(PVR)是眼睛內(nèi)瘢痕組織形成?！逶錾浴迨且驗榧毎鲋?，而″玻璃體視網(wǎng)膜病″是因為問題涉及玻璃體和視網(wǎng)膜。在PVR中，瘢痕組織在收縮的視網(wǎng)膜上成片形成。這種顯著收縮將視網(wǎng)膜拉向眼睛中心，并使視網(wǎng)膜嚴重分離和變形。PVR在前部和后部皆可發(fā)生，伴隨視網(wǎng)膜前部和圓周皺褶。
視神經(jīng)炎在視神經(jīng)發(fā)炎和髓鞘損傷或破壞時發(fā)生。在眼睛后方視神經(jīng)所在區(qū)域發(fā)生的神經(jīng)損壞被稱為球后視神經(jīng)炎，這是另一有時用于視神經(jīng)炎的術(shù)語。
也被稱為黃斑皺褶，視網(wǎng)膜前膜是在黃斑上形成的瘢痕組織樣膜。其一般進展緩慢，并且通過引起模糊和變形影響中央視覺。隨其進展，黃斑上的膜拉動可導致腫脹。
其它制劑成分
本公開的組合物還可包含其它組分，如但不限于，添加劑、佐劑、緩沖劑、張力劑(tonicity agents)、生物粘附聚合物、和保存劑。在局部給予眼睛的任何本公開組合物中，混合物優(yōu)選在約pH 5至約pH 8下配制。此pH范圍可通過向組合物添加緩沖劑來實現(xiàn)，如實施例所述。在實施方式中，制劑中組合物的pH范圍為約pH 6.6至約pH 7.0。應(yīng)理解，本公開的組合物可通過任意常見緩沖劑系統(tǒng)來緩沖，如磷酸鹽、硼酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、碳酸鹽和硼酸鹽-多元醇復合物，其中按照公知技術(shù)將pH和同滲質(zhì)量摩爾濃度調(diào)節(jié)至適當?shù)纳碇怠１竟_的混合膠束組合物在緩沖水溶液中是穩(wěn)定的。也就是說，緩沖劑和任何其它組分之間不存在導致組合物不穩(wěn)定的不利相互作用。
張力劑包括例如甘露醇、氯化鈉、木糖醇等。這些張力劑可用于調(diào)節(jié)組合物的同滲質(zhì)量摩爾濃度。一方面，制劑的同滲質(zhì)量摩爾濃度被調(diào)節(jié)到約250至約350mOsmol/kg的范圍內(nèi)。在優(yōu)選方面，制劑的同滲質(zhì)量摩爾濃度被調(diào)節(jié)到約280至約300mOsmol/kg之間。
添加劑，如糖、甘油和其它糖醇，可被包含在本公開的組合物中?？商砑铀幬锾砑觿┮栽黾咏M合物中其它成分的效力或效能。例如，為提高神經(jīng)鈣蛋白抑制劑或mTOR抑制劑的穩(wěn)定性，調(diào)節(jié)組合物的同滲質(zhì)量摩爾濃度，調(diào)節(jié)組合物的粘度，或因其他理由如實現(xiàn)藥物遞送，可添加藥物添加劑至本公開的組合物。本公開的藥物添加劑的非限制性實例包括糖，如，海藻糖、甘露糖、D-半乳糖、和乳糖。在實施方式中，糖可在水合薄膜前被摻入組合物(即，內(nèi)部地)。在另一實施方式中，糖可在水合步驟過程中被摻入組合物(即，外部地)(參見實施例17)。在實施方式中，本公開的澄清混合膠束水溶液包括添加劑，如糖。
在實施方式中，本公開的組合物進一步包括一種或多種生物粘附聚合物。生物粘附指代某些合成和生物大分子和水合膠體粘附至生物組織的能力。生物粘附是復雜現(xiàn)象，部分取決于聚合物的性質(zhì)、生物組織、和周圍環(huán)境。已發(fā)現(xiàn)若干因素有助于聚合物的生物粘附能力：能夠形成氫橋的官能團(--OH，COOH)的存在，陰離子電荷的存在和強度，聚合物鏈與粘膜層相互穿透的充足彈性，和高分子量。生物粘附系統(tǒng)已被用于牙科、骨科、眼科、和外科應(yīng)用。然而，最近出現(xiàn)了對生物粘附材料在其它領(lǐng)域如軟組織系人工置換、和用于生物活性劑局部釋放的受控釋放系統(tǒng)中的應(yīng)用的明顯關(guān)注。這種應(yīng)用包括用于藥物在口腔或鼻腔中釋放和用于腸道或直腸給予的系統(tǒng)。
在實施方式中，本公開的組合物包括至少一種生物粘附聚合物。生物粘附聚合物可增強組合物粘度，并從而增加在眼中的停留時間。本公開的生物粘附聚合物包括，例如，羧基聚合物，如Carbopol.RTM.(卡波姆(carbomers))、Noveon.RTM.(聚卡波非(polycarbophils))；纖維素衍生物，包括烷基和羥基烷基纖維素，如甲基纖維素、羥基丙基纖維素、羧基甲基纖維素；膠，如刺槐豆(locust beam)、黃原膠(xanthan)、瓊脂糖、刺梧桐樹膠(karaya)、瓜爾膠；和其它聚合物，包括但不限于聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、Pluronic.RTM.(泊洛沙姆)、黃蓍膠(tragacanth)、和透明質(zhì)酸；提供封閉藥物至眼的持續(xù)和受控遞送的相變聚合物(例如，海藻酸、角叉菜膠(例如、麒麟菜屬(Eucheuma))、黃原膠和刺槐豆膠混合物、果膠、乙酸鄰苯二甲酸纖維素、烷基羥基烷基纖維素和其衍生物、羥基烷基化聚丙烯酸酸和其衍生物、泊洛沙姆和其衍生物、等。這些聚合物的物理特征可被環(huán)境因素變化介導，如離子強度、pH、或溫度——單獨或與其它因子組合。在實施方式中，組合物中存在的任選的一種或多種生物粘附聚合物為約0.01wt％至約10wt％/體積，優(yōu)選約0.1至約5wt％/體積。在實施方式中，本公開的組合物進一步包括至少一種親水聚合物賦形劑，該選自親水聚合物賦形劑，例如，PVP-K-30、PVP-K-90、HPMC、HEC、和聚卡波非。在實施方式中，聚合物賦形劑選自PVP-K-90、PVP-K-30或HPMC。在實施方式中，該聚合物賦形劑選自PVP-K-90或PVP-K-30。
在實施方式中，如果需要保存劑，組合物可任選地與多種公知保存劑中的人一種一起保存，該保存劑包括芐基醇——有/無EDTA、苯扎氯銨、氯己定、Cosmocil.RTM.CQ、或Dowicil.RTM.200。在某些實施方式中，可期望本文描述的制劑不包含任何保存劑。關(guān)于這點，在一些實施方式中，在單用途容器中包含的制劑中，保存劑可以不是必須或期望的。在其它實施方式中，包含保存劑可以是有利的，如在制劑被包含在多用途容器中的某些實施方式中。
眼用組合物可作為生物相容性澄清混合膠束水溶液被局部給予眼。組合物具有摻入和/或封裝在膠束中的藥物，該膠束分散在含水介質(zhì)中。
示例性實施方式的非限制性列舉
除本公開其它部分描述和提供方面和實施方式外，還具體考慮下列具體實施方式的非限制性列舉。
1.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)、聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸和聚烷氧基化醇。
2.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)和n≥40聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸。
3.眼用制劑，包括活性成分，該活性成分選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)和聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸的存在量等于或大于所述制劑的1wt％。
4.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)和聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；其中所述制劑包括納米膠束。
5.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1-5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
6.眼用制劑，包括大于0.2wt％的活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1-5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
7.眼用制劑，包括大于0.5wt％的活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1-5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
8.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1.5-4wt％的一種或多種聚氧乙烯脂質(zhì)，該一種或多種聚氧乙烯脂質(zhì)選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100；和約0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
9.眼用制劑，包括大于0.2wt％的活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；和約0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
10.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；和約0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40；其中制劑包括納米膠束。
11.眼用制劑，包括大于0.2wt％的疏水活性劑，該疏水活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；和約0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40；其中制劑包括納米膠束。
12.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)，約4wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
13.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；約4wt％的HCO-60；和約0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
14.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1-5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
15.眼用制劑，包括大于0.2wt％的活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1-5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
16.眼用制劑，包括大于0.5wt％的活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1-5wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
17.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1.5-4wt％的一種或多種聚氧乙烯脂質(zhì)，該聚氧乙烯脂質(zhì)選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100；和約0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
18.眼用制劑，包括大于0.2wt％的活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；和約0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
19.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；和約0.01wt％的辛基酚聚醚-40；其中制劑包括納米膠束。
20.眼用制劑，包括疏水活性劑，該疏水活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸；和約0.01wt％的辛基酚聚醚-40；其中制劑包括納米膠束。
21.眼用制劑，包括活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；約4wt％的選自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一種或多種；和約0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
22.眼用制劑，包括大于0.2wt％的活性劑，該活性劑選自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其藥學上可接受的鹽、前藥或變體)；約4wt％的HCO-60；和約0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
23.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計0.5和6％之間。
24.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計0.5和2％之間。
25.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計0.5和3％之間。
26.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計0.5和4％之間。
27.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計0.5和5％之間。
28.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計1和6％之間。
29.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計1和2％之間。
30.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計1和3％之間。
31.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或臘肪酸在所述制劑的按重量計1和4％之間。
32.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計1和5％之間。
33.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計1和6％之間。
34.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計2和6％之間。
35.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計3和6％之間。
36.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計4和6％之間。
37.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計2和5％之間。
38.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸在所述制劑的按重量計3和5％之間。
39.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸為所述制劑的按重量計約4％。
40.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸大于所述制劑的按重量計約0.7％。
41.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸大于所述制劑的按重量計約1％。
42.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸大于所述制劑的按重量計約1.5％。
43.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸大于所述制劑的按重量計約2％。
44.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸大于所述制劑的按重量計約3％。
45.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制劑的按重量計0.002和4％之間。
46.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制劑的按重量計0.005和3％之間。
47.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制劑的按重量計0.005和2％之間。
48.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制劑的按重量計0.005和1％之間。
49.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制劑的按重量計0.005和0.5％之間。
50.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制劑的按重量計0.005和0.1％之間。
51.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制劑的按重量計0.005和0.05％之間。
52.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制劑的按重量計0.008和0.02％之間。
53.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，為所述制劑的按重量計約0.01％。
54.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計0.2％。
55.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計0.3％。
56.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計0.4％。
57.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計0.5％。
58.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計0.6％。
59.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計0.7％。
60.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計0.8％。
61.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計0.9％。
62.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計1％。
63.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計1.5％。
64.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計2％。
65.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計3％。
66.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑在所述制劑中的存在量大于按重量計4％。
67.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。
68.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是選自HCO-60、HCO-80或HCO-100的一種或多種。
69.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述聚氧乙烯脂質(zhì)或脂肪酸是HCO-60。
70.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑是布林唑胺、或其藥學上可接受的鹽。
71.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑是波生坦、或其藥學上可接受的鹽。
72.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述活性劑包括兩種不同用劑的組合。
73.前述實施方式中任一個的制劑，其中活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑和/或?qū)儆跓o手性中心的高度取代型嘧啶衍生物類別的內(nèi)皮素受體拮抗劑中的至少一種，和選自類前列腺素、α2腎上腺素能激動劑、消退素或消退素樣化合物、類固醇(如皮質(zhì)類固醇)、環(huán)孢素A(cyclosporine A)、和voclosporin的至少一種另外的活性劑。
74.前述實施方式中任一個的制劑，其中活性劑進一步包括類前列腺素和/或α2腎上腺素能激動劑。
75.前述實施方式中任一個的制劑，其中活性劑包括碳酸脫水酶抑制劑。
76.前述實施方式中任一個的制劑，其中活性劑包括屬于無手性中心的高度取代型嘧啶衍生物類別的內(nèi)皮素受體拮抗劑。
77.前述實施方式中任一個的制劑，其中活性劑進一步包括類前列腺素、α2腎上腺素能激動劑、和/或皮質(zhì)類固醇。
78.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述制劑不包括保存劑。
79.前述實施方式中任一個的制劑，其中所述制劑不包括帶有/不帶有EDTA的芐基醇、苯扎氯銨、氯己定、Cosmocil.RTM.CQ、或Dowicil.RTM.200。
80.治療或預防眼部疾病或狀況的方法，所述方法包括局部給予前述實施方式中任一個的制劑。
81.治療或預防眼部疾病或狀況的方法，所述方法包括局部給予前述實施方式中任一個的制劑；其中所述疾病是前段疾病。
82.治療或預防眼部疾病或狀況的方法，所述方法包括局部給予前述實施方式中任一個的制劑；其中所述疾病是后段疾病。
83.治療或預防眼部疾病或狀況的方法，所述方法包括局部給予前述實施方式中任一個的制劑；其中所述疾病是選自開角型青光眼、閉角型青光眼、糖尿病性視網(wǎng)膜病(DR)、糖尿病性黃斑水腫(DME)、視神經(jīng)炎和球后視神經(jīng)炎的一種或多種。
84.治療或預防眼部疾病或狀況的方法，所述方法包括局部給予前述實施方式中任一個的制劑；其中所述疾病是干眼綜合征。
下文實施例的提供進一步示例本發(fā)明的方面。這些實施例是非限制性的，不應(yīng)被解釋為限制本發(fā)明的任何方面。
實施例1
利用透析法制備混合納米膠束制劑
以不同比例的聚合物和藥物通過透析法制備布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦的混合納米膠束制劑。實驗設(shè)計軟件JMP 9.0用于設(shè)計實驗和分析結(jié)果。將準確稱量重量的兩種聚合物(即，聚氧乙烯氫化蓖麻油-60(HCO-60)和辛基酚聚醚-40(Oc-40))溶解在300微升體積的丙二醇中。將80微升包含PG中的布林唑胺或波生坦的丙二醇、或80mg布林唑胺或波生坦添加至此聚合物混合物，并渦旋混合，獲得澄清均質(zhì)溶液?；旌衔矬w積用丙二醇補足(500微升)。將溶液渦旋混合，獲得均質(zhì)溶液。將500微升體積蒸餾去離子水添加至此混合物，獲得1000微升(1毫升)總體積。水向有機溶劑中藥物-聚合物混合物的添加將自發(fā)產(chǎn)生膠束，從而將藥物活性劑包埋在混合納米膠束的疏水核中。
將混合物轉(zhuǎn)移至透析袋(分子量截止值(molecular weight cut off)1000)并轉(zhuǎn)移至包含1升蒸餾去離子水的燒杯。通過覆以鋁箔保護燒杯和其內(nèi)容物隔絕陽光，并將其保持在室溫、緩慢恒定攪拌下?；旌衔锿肝鲞M行24h時間，以從混合物去除水溶性有機溶劑丙二醇。透析室中的水在預定時間點：1h、2h、4h、6h、12h和24h更換。在透析結(jié)束時(24h)，將透析袋的內(nèi)容物小心轉(zhuǎn)移至15-mL離心管，并使制劑在水浴中進行聲處理(時間范圍0min至5min)。最終體積用2X磷酸鹽緩沖鹽水補足，并將制劑的pH調(diào)節(jié)至6.5±0.1。用0.22微米尼龍過濾器過濾所得制劑，以去除任何外來顆粒物。
將制備的制劑進行各種測試，如包埋效率、負載效率、混合納米膠束尺寸和多分散指數(shù)。
混合納米膠束尺寸和多分散指數(shù)：制劑尺寸和多分散指數(shù)利用Zetadizer，Malvern Instruments，NJ來確定。簡言之，將大約1ml各制劑轉(zhuǎn)移至比色皿，并置于儀器中。利用激光束確定混合納米膠束尺寸。
包埋效率：為確定制劑的包埋效率，所有制備的制劑進行包埋效率測試。簡言之，將制劑渦旋混合均勻，并將1mL轉(zhuǎn)移至新備的(1.5mL)eppendorf管。將各制劑凍干，以在eppendorf管底部獲得固體。將所得固體懸浮于1mL有機溶劑(二乙醚)以生成反膠束，并使藥物釋放到外部有機溶劑中。將有機溶劑在高速真空中蒸發(fā)過夜。將所得反膠束重懸浮于1mL的2-丙醇(考慮稀釋因素)，并進一步稀釋，以利用HPLC確定各膠束制劑中包埋的布林唑胺和波生坦?jié)舛取＠孟铝泄接嬎阒苿┑陌裥?其中MNF＝混合納米膠束制劑)：
通過HPLC法藥物定量：布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦的體外分析通過如下進行：反相高效液相色譜(RP-HPLC)法——利用Shimadzu HPLC泵(Shimadzu，Shimadzu Scientific instruments，Columbia，MD)、Alcott自動進樣器(model 718AL)、Shimadzu UV/可見光檢測器(Shimadzu，SPD-20A/20AV，USA)、在40±1℃下恒溫的ODS柱(5μm，150x 4.6mim)和Hewlett Packard HPLC積分器(Hewlett Packard，Palo Alto，CA)。流動相由甲醇(MeOH)、水和三氟乙酸(TFA)(70∶30∶0.05％v/v)組成，設(shè)置在0.5mL/min流速。檢測波長設(shè)置在272nm。樣本托盤溫度保持在4℃。通過在2-丙醇中由原液制成適當?shù)南♂屢海苽洳剂诌虬泛筒ㄉ沟男是€(0.5至5μg/mL)。將10μl注入體積注入HPLC柱以分析。所有制備的標準品和樣本在分析之前和期間儲存在4℃。
實施例2
利用乙酸乙酯溶劑蒸發(fā)法制備混合納米膠束制劑
通過溶劑蒸發(fā)法以如下兩個步驟制備封裝布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦的混合納米膠束制劑：1)制備堿性制劑；和2)再水合。第一步，將布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、或波生坦、HCO-60和辛基酚聚醚-40分別溶解在0.3mL乙酸乙酯中。將這三種溶液在15-mL離心管中混合在一起。將所得混合物進行渦旋，以獲得均質(zhì)溶液。利用高速真空去除乙酸乙酯溶劑，以獲得固體薄膜。將剩余物維持在室溫高度真空下過夜，以去除剩余有機溶劑。
第二步，將所得薄膜利用1mL雙蒸去離子水通過渦旋溶液而水合。將再水合制劑懸浮于2X磷酸鹽緩沖溶液中(pH 6.5)。將其通過0.2μm尼龍過濾膜過濾，以去除未包埋的藥物聚集物和其它外來顆粒。在下文描述的膠束瓦解和布林唑胺和/或波生坦在稀釋劑(2-丙醇)中溶解后，通過RP-HPLC確定布林唑胺和/或波生坦的包埋。
按照實施例1描述的方法，將制備的制劑進行各種測試，如包埋效率、負載效率、混合納米膠束尺寸和多分散指數(shù)。
按照包埋效率方法確定負載到MNF中的藥物的重量分數(shù)。如上所述利用Malvernzetasizer確定制劑的尺寸和多分散指數(shù)。制劑表觀澄清，并且具有小尺寸和窄尺寸分布。
實施例3
利用熔體法制備混合納米膠束制劑
稱重200毫克氫化蓖麻油-60(HCO-60)(4wt％)，并將其轉(zhuǎn)移至10mL圓底燒瓶(RBF)。圓底燒瓶的頸部用鋁箔封閉，用石蠟膜密封，并將其轉(zhuǎn)移至設(shè)置在40℃的水浴。圓底燒瓶在水浴中留置過夜，以液化/熔融HCO-60。第二天，將10微升辛基酚聚醚-40稀釋100倍，并使其在水浴中在40℃平衡1h。類似地，使布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦在水浴中在40℃平衡1h。向HCO-60熔體添加40℃的50μL 100倍稀釋的辛基酚聚醚-40(0.01wt％)。向上述混合物添加40℃的～20μL布林唑和/或波生坦并攪拌。向此混合物緩慢添加在40℃平衡的蒸餾去離子水(大約2mL)并攪拌。將圓底燒瓶的頸部用鋁箔封閉并用石蠟膜密封。將溶液在設(shè)置在40℃的水浴中攪拌過夜，隔絕陽光(覆以鋁箔)。第二天，從水浴取出如上獲得的40℃溶液，并使其冷卻至室溫并觀察澄清度。將2毫升磷酸鹽緩沖劑(2X)添加至如上制備的溶液(磷酸鹽緩沖劑提前制備，并且pH調(diào)節(jié)至5.5)。將制劑的體積用2X磷酸緩沖鹽水補足至5mL。將制備的制劑利用0.2μm尼龍過濾器過濾并儲存在4℃。
制備的制劑按照實施例1描述的方法進行各種測試，如包埋效率、負載效率、混合納米膠束尺寸和多分散指數(shù)。
實施例4
利用第二熔體法制備混合納米膠束制劑
封裝布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦的MNF的制備可分成兩步。例如，封裝0.4wt％布林唑胺和/或波生坦的3.0wt％HCO-40或HCO-60MNF的產(chǎn)生描述如下。第1步，使HCO-40或HCO-60，150mg，在水浴中恒溫在40℃，以熔融和產(chǎn)生澄清稠質(zhì)粘性液體。向此熔體聚合物添加恒溫在40℃的布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦(～20mg)，并混合以實現(xiàn)均質(zhì)分布。使混合物達到室溫，生成帶有HCO-40的淺黃色粘性液體和帶有HCO-60的蠟狀固體。進一步，為固化HCO-40粘性液體，將混合物儲存在4℃(在冷凍機中)。
第2步，使丸粒和/或粘性液體在自然條件下達到室溫。使丸粒和/或粘性液體在40℃水浴中恒溫，并在恒定攪拌下重懸浮于2.0mL蒸餾水(恒溫在40℃)中。這導致0.4wt％布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦MNF的澄清水溶液自發(fā)產(chǎn)生。使此水溶液在自然條件下達到室溫。將溶液pH調(diào)節(jié)至5.5，并用包含辛基酚聚醚-40(0.01wt％)和PVP-K-90(1.2wt％)的2X磷酸緩沖鹽水(pH 5.5)補足體積。將制劑通過0.2μm尼龍過濾器過濾，以去除任何外來物質(zhì)和獲得澄清均質(zhì)的水制劑。
1H NMR定性研究：為確定外部含水環(huán)境中不存在游離藥物，進行定性研究。定性質(zhì)子核磁共振(NMR)研究利用Varian 400MHz NMR進行。利用氘代氯仿和水作為溶劑系統(tǒng)重懸浮制劑，并進行NMR研究。
結(jié)果：在40℃下添加至HCO-40或HCO-60的化合物可用于包埋布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦。在較高溫度下，聚合物和藥物混合物保持處于粘性液體狀態(tài)。當允許達到室溫時，在自然條件下，HCO-60混合物固化并產(chǎn)生蠟狀固體。這種蠟狀固體在恒溫在40℃時有助于在蒸餾水中重懸浮制劑，從而自發(fā)產(chǎn)生布林唑胺和/或波生坦MNF。HCO-40粘性液體獲得類似的觀察和結(jié)果?；旌衔镎扯瘸尸F(xiàn)在較低溫度(4℃)下提高。因此，其如稠質(zhì)粘性液體一般呈現(xiàn)粘著于容器壁。在允許恢復室溫后，粘度呈現(xiàn)降低，并且混合物保留其流回(flow back)。
利用HCO-60與布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦的混合物所產(chǎn)生的蠟狀固體可有助于通過惰性氣體表面覆層保護藥物和防止藥物降解。其它聚合物(HCO-40)在高至大約3.0wt％使用時不導致在室溫下或在低溫冷藏條件(4℃)下產(chǎn)生蠟狀固體。
定性質(zhì)子NMR研究顯示，在水相(D2O)中重懸浮制劑自發(fā)地產(chǎn)生混合納米膠束，水溶液中無顯著游離藥物峰。如果藥物不被包埋在混合納米膠束的核中，則油將作為單獨的油相漂浮在表面。而另一方面，在有機溶劑如氘代氯仿(CDCl3)中重懸浮相同制劑顯示藥物對應(yīng)的特征峰和聚合物峰。這表明藥物沒有被封裝在膠束核中，并且在有機溶劑中存在時游離可利用。
結(jié)論。這些研究顯示，聚合物HCO-60可用于利用熱熔體法包埋布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦。HCO-40在較高重量百分比(3.0wt％)下在本文描述的條件下不生成蠟狀固體。另一方面，HCO-60在2.0wt％下產(chǎn)生蠟狀固體。這種方法具有獨有的優(yōu)勢：是一種容易并且快速的方法，在制備MNF時避免使用有機溶劑。而且，制備方法容易且快速。在第1階段產(chǎn)生的蠟狀固體可有助于防止藥物降解，并且有助于藥物通過惰性氣體覆層在室溫下停留在蠟狀固體狀態(tài)。定性質(zhì)子NMR研究顯示，藥物在重懸浮于水溶液時不游離可利用。另一方面，當相同制劑重懸浮于有機溶劑CDCl3時，藥物峰清楚顯著，表明藥物因形成而存在于外部有機溶劑環(huán)境中。
實施例5
制備混合納米膠束布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦制劑
通過溶劑蒸發(fā)法以如下兩個步驟制備布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦的MNF制劑：1.制備堿性制劑；和2.再水合。第一步，將布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦、HCO-40和辛基酚聚醚-40分別溶解在0.5mL等份乙醇中。將這三種溶液在圓底燒瓶中混合在一起。攪拌所得混合物，獲得均質(zhì)溶液。通過高速真空蒸發(fā)過夜，去除乙醇溶劑，獲得固體薄膜。
第二步，將所得薄膜用2.0mL雙蒸去離子水水合，并在攪拌下重懸浮過夜。再水合的制劑進行pH調(diào)節(jié)，并用2X磷酸鹽緩沖溶液補足體積(pH 6.8)。進一步將制劑通過0.2μm尼龍過濾膜過濾，以去除未包埋的藥物聚集物和其它外來顆粒。
表征制劑的外觀、尺寸和多分散指數(shù)。發(fā)現(xiàn)制劑澄清并且具有極小尺寸和窄多分散指數(shù)。
水法。布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦的MNF制劑還可通過水法來制備。在圓底燒瓶中將1mL雙蒸去離子水加熱至60℃。在攪拌下維持此熱水。將HCO-40添加至該熱水，并在恒定攪拌下使其溶解。然后將辛基酚聚醚-40添加至此混合物并使其溶解。在單獨的容器中，通過手動振蕩幾分鐘，將磷酸鹽、氯化鈉和布林唑胺和/或波生坦摻混。在攪拌條件下，將磷酸鹽/布林唑胺/波生坦/氯化鈉摻混物添加至HCO-40和辛基酚聚醚-40的溶液以分散藥物。使此混合物在攪拌的同時冷卻至室溫，并檢查藥物的完全溶解。利用剩余1mL雙蒸去離子水單獨制備PVP K 90溶液。將此PVP K 90溶液添加至聚合物/表面活性劑/藥物/磷酸鹽/氯化鈉溶液。加水補足最終體積。然后，將制劑通過0.2μm尼龍膜過濾，以去除藥物聚集物和其它外來顆粒。
實施例6
制劑在兔中的局部耐受性
健康年輕成年新西蘭白兔(3-4Kg)用于研究本制劑(例如，實施例1-5的制劑)的局部耐受性。將一滴(大約30.mu.L)鹽水置于兔子的一只眼睛，并將一滴制劑置于另一只眼睛。獸醫(yī)學眼科醫(yī)生利用手持式裂隙燈和間接檢眼鏡檢查每只動物的兩眼。根據(jù)結(jié)膜充血、腫脹和出血(discharge)、房水閃光(aqueous flare)、虹膜光反射和受累、角膜混濁嚴重程度和面積、翳、熒光素檢查和晶狀體不透明度，將對照和測試眼睛定級——利用Hackett/McDonald評分系統(tǒng)(參見，例如，Hackett，R.B.和McDonald，T.O.Ophthalmic Toxicology and Assessing Ocular Irritation.Dermatoxicology，5.sup.th Edition.Ed.F.N.Marzulli和H.I，Maibach.Washington，D.C.：Hemisphere Publishing Corporation.1996；299-305和557-566.)。
在熒光素檢查中，大約一滴0.9％氯化鈉，USP，施加于熒光素浸漬條的端部，然后施加于左眼和右眼的上鞏膜(一個熒光素浸漬條用于一只動物)。在大約15秒暴露后，用0.9％氯化鈉，USP，從每只眼輕輕洗去熒光素染料。然后利用帶有鈷藍過濾光源的裂隙燈檢查眼睛。關(guān)于晶狀體檢查，將大約一滴短效散瞳溶液溶液滴注到每只眼睛上以擴大瞳孔。在可接受的擴大發(fā)生后，利用裂隙燈生物顯微鏡檢查每只眼睛的晶狀體。
借助裂隙燈生物顯微鏡觀察晶狀體，并通過直接和反向照明辨別晶狀體不透明位置。將晶狀體不透明位置(一處或多處)任意分成如下晶狀體區(qū)域，從前囊開始：
前囊下，
前皮層核后皮層，
后囊下，和
后囊。
晶狀體在眼評價過程中進行常規(guī)評價，并定級為0(正常)或1(異常)。描述晶狀體不透明的存在和標注位置。
實施例7
本公開混合膠束制劑中0.05wt％、0.2wt％和0.5wt％制劑的眼組織分布
在眼應(yīng)用后評估本公開(眼溶液)(例如，實施例1-5的制劑)的暫時分布和潛在積累——作為重復用藥、性別差異和潛在黑色素結(jié)合的函數(shù)。此評估通過確定新西蘭白兔(NZW)和荷蘭束帶兔(Dutch Belted rabbit)(DB)的眼組織、眼淚和血液中的活性成分濃度來進行。
NZW兔用于單次用藥(SD)和7天重復用藥(RD)研究。DB兔也用于單次用藥研究。動物未經(jīng)治療(對照)或被給予單次或每日局部眼劑量7天(混合膠束制劑中0.05wt％、0.2wt％或0.5wt％，給予單眼或雙眼)。評估血液和眼組織濃度。
藥物濃集在眼前(角膜、結(jié)膜、鞏膜)和眼后(視網(wǎng)膜、視神經(jīng))組織處，而在眼睛中間(房水和玻璃體液)最少，表明藥物通過被動運輸以外的機制穿過眼睛運輸。眼睛后方實現(xiàn)的高藥物水平使得本公開組合物的局部給予對于治療眼后疾病(例如，涉及視神經(jīng)的視網(wǎng)膜疾病，如青光眼)可行。本公開的組合物實現(xiàn)極高水平——特別是在目標組織，如淚腺中。
實施例8
混合納米膠束制劑用于治療干眼的應(yīng)用
經(jīng)1個月至1年或更長的時間，將根據(jù)實施例1-5的混合納米膠束制劑以0.05％和0.2％之間的濃度b.i.d.給予患有干眼的患者。
實施例9
混合納米膠束制劑用于治療糖尿病性視網(wǎng)膜病的應(yīng)用
經(jīng)1個月至1年或更長的時間，將根據(jù)實施例1-5的混合納米膠束制劑以0.2wt％至0.5wt％之間的濃度b.i.d.給予患有增生性糖尿病性視網(wǎng)膜病的患者。
實施例10
布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦混合納米膠束制劑的耐受性和眼組織分布
在兔中進行研究，測試布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦的納米膠束制劑相對于其安慰劑和平衡鹽水溶液(BSS)的耐受性和眼組織分布。健康新西蘭雌性白兔(2-3kg)用于本研究。制備具有0.1％布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、或波生坦的布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦研究藥物，基本如本文實施例所述。下表顯示活性制劑和安慰劑的制劑組成。
表
制劑組合物
4x/天以兩小時間隔o.d.施用一滴(大約35μL)研究藥物5天。向?qū)?cè)眼施加一滴BSS。
評價的耐受性參數(shù)是：物理檢查(馴化研究釋放(acclimation study release))；存活率(每日)；臨床觀察(每日)；Hackett-McDonald眼刺激評分(每只兔子的用藥前基線數(shù)據(jù)，然后每天用藥前[在第一次日劑(daily dose)前]，和然后最后一個日劑后30min)；眼內(nèi)壓(IOP)，每只兔子用藥前基線數(shù)據(jù)和然后每日晚間檢查后30分鐘；視網(wǎng)膜電圖(ERG)，每只兔子用藥前(研究前)基線數(shù)據(jù)和然后最后一次治療后1小時；和安樂死時的眼組織學病理。
平均累積Hackett-McDonald眼刺激評分證明，貫穿研究始終、治療前和治療后檢查時間BSS治療的左眼和環(huán)孢素治療的右眼均為非常小的評分。在經(jīng)治療劑、安慰劑和BSS治療的眼睛中觀察到小于2的平均累積炎性評分。這些臨床評分代表輕度結(jié)膜充血(發(fā)紅)和腫脹。然而，小組之間平均累積Hackett-McDonald眼刺激評分無顯著差異，表明在HCO-40、HCO-40安慰劑、和BSS中局部施用0.1％治療劑不帶來刺激差異。
經(jīng)BSS、HCO-40、或治療劑治療眼睛中觀察不到IOP變化。在測試品治療5天后在ERG上觀察不到視網(wǎng)膜功能的毒理學變化。在任一小組的眼睛前段(結(jié)膜/角膜/虹膜)或后段(玻璃體/視網(wǎng)膜)在組織學上觀察不到毒理學或炎性變化。
選擇的眼組織(房水、玻璃體液、結(jié)膜、角膜、虹膜-睫狀體、晶狀體、視網(wǎng)膜/脈絡(luò)膜、和鞏膜)的樣本在第5天最后一劑后1小時從所有接受伴隨HCO-40(OD)和BSS(OS)的0.1％治療劑的兔子和一只接受安慰劑HCO-40制劑(OD)和BSS(OS)的兔子(21號)采集。通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)分析樣本的治療劑。內(nèi)標是d4-布林唑胺、d4-拉坦前列素、d4-溴莫尼定、或d4-波生坦。治療劑的已建立分析范圍對于全血是0.100-100ng/mL，對于房水和玻璃體液是2.00-2000ng/mL。固體組織的分析范圍是0.125-30ng(低范圍)和1.00-2500ng(高范圍)。固體組織分析結(jié)果通過組織分析量校準轉(zhuǎn)化成ng/g。
在重復給予0.1％治療劑-HCO-40制劑后，在角膜中觀察到被治療眼睛中的最高平均治療劑濃度，然后是結(jié)膜、鞏膜、虹膜-睫狀體、和房水。在晶狀體、視網(wǎng)膜/脈絡(luò)膜、和玻璃體液中觀察到最低治療劑濃度。經(jīng)BSS治療的對側(cè)眼睛中的治療劑濃度相當?shù)?，表明最低限度的全身性藥物轉(zhuǎn)移。
在此觀察到的0.1％治療劑制劑的眼組織濃度總體上高于在Allergan 0.2％3H環(huán)孢素A制劑對兔重復藥劑給予(bid，7天)后的Cmax值(參見Acheampong AA，Shackleton M，Tang-Liu D，Ding S，Stern ME，Decker R Distribution of cyclosporin A in ocular tissues after topical administration to albino rabbits and beagle dogs；Current Eye Research 18(2)；1999；pp91-103)。
實施例11
治療劑混合納米膠束制劑的耐受性和眼組織分布
在兔中進行研究，測試治療劑的兩種納米膠束制劑相對于匹配的安慰劑和平衡鹽水溶液(BSS)的耐受性和眼組織分布。健康新西蘭雌性白兔(2-3kg)用于本研究。4x/天以兩小時間隔o.d.施用一滴(大約35μL)研究藥物5天。向?qū)?cè)眼睛施用一滴BSS。
評價的耐受性參數(shù)是：物理檢查(馴化研究釋放)；存活率(每日)；臨床觀察(每日)；Hackett-McDonald眼刺激評分(每只兔子的用藥前基線數(shù)據(jù)，然后每天用藥前[在第一次日劑(daily dose)前]，和然后最后一個日劑后30min)；眼內(nèi)壓(IOP)，每只兔子用藥前基線數(shù)據(jù)和然后每日晚間檢查后30分鐘；視網(wǎng)膜電圖(ERG)，每只兔子的用藥前(研究前)基線數(shù)據(jù)和然后最后一次治療后1小時；和安樂死時的眼組織學病理。
累積Hackett-McDonald眼刺激評分證明，貫穿研究始終、治療前和治療后檢查時間BSS治療的左眼和測試品治療的右眼均為非常小的平均值。小組之間平均累積Hackett-McDonald眼刺激評分無顯著差異。所有小組中觀察到的眼刺激被解讀為最低限度的和暫時的。
經(jīng)BSS或測試品治療的眼睛中觀察不到IOP變化。測試品治療5天后在ERG上觀察不到視網(wǎng)膜功能的毒理學變化。在任一小組的眼睛的前段(結(jié)膜/角膜/虹膜)或后段(玻璃體/視網(wǎng)膜)在組織學上觀察不到毒理學或炎性變化。
通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)分析選定眼流體/組織(房水、玻璃體液、結(jié)膜、角膜、虹膜-睫狀體、晶狀體、視網(wǎng)膜/脈絡(luò)膜、和鞏膜)(從分別在治療劑(HCO-60中0.15wt％、HCO-40中0.1wt％)治療小組中的兩只兔子采集、和從每個匹配安慰劑小組中的一只兔子采集)的治療劑。Warfarin-d5和5-HAD用作房水和玻璃體液中治療劑分析的內(nèi)標。關(guān)于其它眼組織(固體組織)，warfarin-d5和苯基乙酸-d5(PAA-d5)分別用作布林唑胺和波生坦的內(nèi)標。固體組織的分析范圍是0.125-100ng。固體組織分析結(jié)果通過組織分析量校準轉(zhuǎn)化成ng/g。
鞏膜和結(jié)膜中僅觀察到零星的相對低濃度的治療劑。治療劑在大部分眼組織中檢測不到或在分析定量限值以下。
在此示例性描述的本發(fā)明可在缺少本文沒有具體公開的任何一個或多個元素、一個或多個限制的情況下實踐。已采用的術(shù)語和表述作為描述而非限制術(shù)語使用，并且這種術(shù)語和表述的使用不意圖排除所示和所述特征或其部分的任何等同形式，而是認為在本發(fā)明主張范圍內(nèi)可以進行各種改動。因此，應(yīng)理解，雖然本發(fā)明通過優(yōu)選實施方式和任選特征具·體地進行了公開，但本領(lǐng)域技術(shù)人員可采取本文公開思路的改動和變型，并且認為這種改動和變型處于所附權(quán)利要求限定的本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
本文提到或引用的論文、專利、專利申請和所有其它文件的內(nèi)容以及可電子獲得的信息其全部內(nèi)容通過引用并入本文，如同表示每一個出版物被具體和單獨地通過引用而并入。申請人保留將這些論文、專利、專利申請或其它文件的任何和所有資料和信息實體上引入本申請的權(quán)利。
在此示例性描述的本發(fā)明可在缺少本文未具體公開的任何一個或多個元素、一個或多個限制的情況下適當?shù)貙嵺`。因此，例如，術(shù)語“包括”、“含有”、“包含”等應(yīng)被無限制地廣義閱讀。另外，本文使用的術(shù)語和表述作為描述而非限制術(shù)語使用，并且這種術(shù)語和表述的使用不意圖排除所示和所述特征或其部分的任何等同形式，而是認為在本發(fā)明主張范圍內(nèi)可以進行各種改動。因此，應(yīng)理解，雖然本發(fā)明通過優(yōu)選實施方式和任選特征具體地進行了公開，但本領(lǐng)域技術(shù)人員可采取各處公開的實施的本發(fā)明的改動和變型，并且認為這種改動和變型處于本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
在此發(fā)明已被寬泛和概括地描述。落入上位公開的每個較窄物種和下位分組也構(gòu)成本發(fā)明一部分。這包括具有從該種屬去除任何主題的條件或否定限制的本發(fā)明的上位描述，而不論本文是否具體記載了該切除的材料。
另外，在以馬庫什組描述本發(fā)明的特征或方面時，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解本發(fā)明因而以該馬庫什組的單個成員或子組被描述。
所附權(quán)利要求提出其它實施方式。