US6,312,711公開了一種藥物或食品組合物，其用于治療與移植排斥或過敏自身免疫性反應相關的疾病，包括施用應激蛋白和抗原結構表位的復合物。WO2013/011095公開了一種用于皮下注射的藥物組合物，含有0.5ng-200μg的HSP70和0.5-100μg的抗原結構片段。已有大量將熱休克蛋白包含在藥物制劑中以便耐受誘導的研究，但其臨床結果往往并不理想。仍需對這些制劑進行改進。意外地發(fā)現(xiàn)一種藥物制劑，含有-10-200μg/ml的抗原性結構片段，其誘導過敏反應-2-6％(w/v)甘露醇-0.5-2％(w/v)海藻糖-水，其中所述制劑基本上不含有熱休克蛋白，可用于安全、高效的治療?？乖越Y構片段在含有甘露醇和海藻糖(但不含有熱休克蛋白)的溶液中溶解，其不僅施用安全，而且還適用于相關抗原耐受誘導的治療。在現(xiàn)有技術中，甘露醇和海藻糖已被用于藥物制劑的配方中，但主要是用于凍干產(chǎn)品中。本發(fā)明藥物制劑在生產(chǎn)時并非凍干，但仍能提供優(yōu)越的儲藏穩(wěn)定性。所述藥物制劑含有約2-6％(w/v)甘露醇。海藻糖的合適量是0.5-2％(w/v)，其中，體積是在25℃下測得。所述制劑還含有緩沖劑，優(yōu)選為磷酸緩沖液。在本發(fā)明的一個實施例中，所述藥物制劑的形式是皮下注射劑。本發(fā)明制劑基本上不含熱休克蛋白?；旧喜缓瑹嵝菘说鞍字傅氖菨舛鹊陀?μg/ml，優(yōu)選低于1.0ng/ml，更優(yōu)選低于0.5ng/ml。抗原性結構片段優(yōu)選是通過對抗原性結構作酶促水解而制備。制備抗原性結構片段的優(yōu)選形式。獲得過敏原水解片段(優(yōu)選不含抗原的非蛋白組分)的優(yōu)選方法如WO2008/000783、WO2009/083589和WO2012/172037中的方法所述，這些方法通過引用合并入本文。這些方法的主要步驟為：·從過敏原來源提取過敏原性蛋白；·第一純化步驟然后進行變性，優(yōu)選采用還原劑或離液劑·再次純化步驟·蛋白水解。在水解前可再次進行變性步驟。所述抗原性結構選自可誘導過敏反應的抗原結構。該類抗原性結構還可指過敏原。優(yōu)選的過敏原為天然的蛋白過敏原。合適的例子選自牛奶過敏原、毒液過敏原、雞蛋過敏原、雜草過敏原、禾草過敏原、草粉過敏原、樹木過敏原、灌木過敏原、花類過敏原、谷物過敏原、菌類過敏原、水果過敏原、漿果過敏原、堅果過敏原、種子過敏原、豆類過敏原、魚類過敏原、貝殼類過敏原、肉類過敏原、香料過敏原、昆蟲過敏原、螨蟲過敏原、動物過敏原、動物皮屑過敏原、橡膠樹過敏原。優(yōu)選的過敏原是草粉過敏原、花生過敏原、屋塵螨過敏原、豚草過敏原和日本柳杉過敏原。在本發(fā)明的一個實施例中，采用所述藥物制劑的治療包括在不同時間點、向患者至少注射2次，優(yōu)選地，采用所述制劑的治療包括以遞增量的制劑進行2-20次注射。本發(fā)明的另一個實施例是一藥瓶或施用裝置，其含有0.2-1.50ml或0.5-1.5ml的本發(fā)明藥物制劑。本發(fā)明的又一實施例是一藥盒，其含有2-20或2-30個藥瓶或施用裝置，所述施用裝置含有必須量的本發(fā)明藥物制劑，所述本發(fā)明藥物制劑用于以遞增量的制劑進行注射的治療。所述施用裝置是一種更方便的形式，因為其避免了針尖表面上的活性成分在真皮中擴散。在典型的實施例中，所述施用裝置是注射器。例如，所述施用裝置可含有100μg/ml的制劑溶液，且第一注射器可含有50μl，其它裝置100、200、500μl和1000μl。優(yōu)點在于該制劑便于使用。預灌裝的施用裝置可以降低施用過程中的錯誤率。令人驚訝的是，本發(fā)明制劑在冰箱溫度下(存放)至少6個月、優(yōu)選一年以上均是穩(wěn)定的。即使存放于室溫下，其穩(wěn)定性也確保其存放相似的時間段。這些特質避免了施用前的溶解凍干制劑相關的繁瑣工作。據(jù)信，甘露醇和海藻糖向制劑提供了高穩(wěn)定性，從而提高了所述制劑的安全性和有效性。本發(fā)明另一實施方式是治療過敏的方法，包括采用本發(fā)明藥物制劑通過皮下注射向患者施用累積量為40-1000μg的抗原性結構片段。注射階段的時間間隔優(yōu)選為2-10天。在一優(yōu)選實施方式中，患者在注射階段(如醫(yī)生來訪時)，在患者身體上的不同位置接受2次皮下注射。進行注射時，優(yōu)選留有30-60分鐘的間隔。注射的優(yōu)選位置為患者的左臂和右臂。實施例對所述制劑的安全性和有效性進行了分析。本研究在德國德累斯頓的卡爾-古斯塔夫-卡魯斯大學醫(yī)院(UniversityHospitalCarl-Gustav-Carus)以及德國科隆的科隆大學醫(yī)院(UniversityHospitalofCologne)進行。效果采用多年生黑麥草(Loliumperenne)的過敏原提取物作為測試材料，包括：-根據(jù)WO2008/000783，制備了100μg/ml水解花粉抗原提取物-42mg/ml甘露醇-10.2mg/ml海藻糖-0.69mg/ml磷酸鹽-0.70mg/ml氯化鈉-和水。施用計劃包括6次訪視，每次對每個手臂進行共2次注射，時間間隔為30分鐘。6次訪視總共12次皮下注射，累計劑量為490μg。在治療前和治療后，再進行一次額外的訪視(訪視1，訪視8)。此次為單中心研究，包含了61名因草粉過敏原引起過敏性鼻炎或鼻結膜炎的患者。在本次分析中，包含了44名患者，其他人仍在治療中。給藥方案為按100μg/ml的濃度，5μg、10μg、20μg、40μg、70μg、100μg。在各手臂上施用時，每次訪視均采用雙倍的量。從對這44名患者的期中分析看來，38名完成了研究，出現(xiàn)6名退出，即1名產(chǎn)生全身反應、1名為個人原因、另4人再無法取得聯(lián)系。包括退出的在內，向患者施用的累積劑量可見表1.表1：累積劑量[μg]頻率百分比3012.36012.37012.315012.319024.529024.539012.34903579.5總計44100.0在治療之前進行了皮膚點刺實驗。皮膚反應的結果(以mm表示)可見于表2。陽性對照是注射組胺。表2：DP：屋塵螨DF：粉塵螨此外，對血清的IgE水平進行了測試。結果可見于表3。表3：采用ALK-艾貝爾(ALK-Abellò)的診斷溶劑對實驗的有效性進行了測試。采用了遞增量進行注射，并在訪視1、訪視6和訪視8的結膜激發(fā)試驗(CPT)中對反應進行了測試。CPT階段如表4所示(格朗內梅爾分級(Gronemeyer’sgrading)，Richelman等2003Arch.Allergy.Immunol.130；51-59)。表4：階段結果0無主觀或可見反應I瘙癢、發(fā)紅、異物感II階段I以及另有流淚，球結膜血管擴張III階段II以及另有瞼結膜血管擴張和紅疹、眼瞼痙攣IV階段III以及另有球結膜水腫、眼瞼水腫結果可見于表5-7。表5：表6：表7：總之，只有一名患者(2.7％)在治療前對表現(xiàn)出無反應性。這在治療過程中改善為29名患者(79.3％)、治療后為24名患者(64.9％)。CPT的改善在訪視8時達到了所有患者的93.8％。安全性24名患者未提及任何副反應，20名患者有一種或多種副反應，但是無人經(jīng)歷嚴重的副反應。在注射部位，通常在注射部位出現(xiàn)發(fā)紅和水皰。水皰的大小是安全性的重要指征。其在注射后的30分鐘左右進行測量。表8顯示了在訪視和注射階段出現(xiàn)發(fā)紅的直徑(cm)變化。出乎意料的是，隨著注射量的遞增而出現(xiàn)的發(fā)紅直徑的典型性增加并未出現(xiàn)。與此相反，發(fā)紅的直徑幾乎是穩(wěn)定的，甚至在治療期間輕微下降。這是出乎意料的，且這是對施用耐受良好的一個指征。表8：表9：此外，典型的水皰反應小于1cm。根據(jù)指南，當局部反應達到約5cm的限制時，需要適應治療。在本研究中，所觀察到的水皰最大值為3.5cm。特別是水皰直徑是系統(tǒng)性反應的良好指征。注射后的30分鐘內，有報道少數(shù)病人產(chǎn)生了即發(fā)性系統(tǒng)性過敏反應，這些反應根據(jù)AWMF的推薦分級從而對這些反應進行治療(Ring,J.,過敏反應的急性治療(AkuttherapieanaphylaktischerReaktionen).德國變態(tài)反應與臨床免疫學學會指南《LeitliniederDeutschenGesellschaftfürAllergologieundklinischeImmunologie》(DGAKI),德國過敏癥協(xié)會《desDeutscherAllergologen》兒科變態(tài)反應和環(huán)境醫(yī)學學會《derGesellschaftfürAllergologieundUmweltmedizin》(GPA)和德國變態(tài)反應與環(huán)境醫(yī)學科學院《derDeutschenAkademiefürAllergologieundUmweltmedizin》(DAAU).AllergoJ2007,16:第420-434頁))。在44名患者中，報道有2名患者I級即發(fā)性系統(tǒng)性過敏反應(輕度)(占患者的3.3％)，以及5例II級即發(fā)性系統(tǒng)性過敏反應(中度)(占患者的6.6％)。這些頻度低于文獻中報道的頻度(在CalderonMA,AlvesB,JacobsonM,HurwitzB,SheikhA,DurhamS，季節(jié)性過敏性鼻炎的過敏原注射免疫療法，(綜述)克隆圖書館2007第1期的薈萃分析中有22％的II級系統(tǒng)性反應)。結論該治療耐受性良好并請具有高度有效性。本文所引用的文獻均通過引用全文合并入本文，其不與本文的教導所沖突。對比性研究用于比較含有甘露醇/海藻糖的本發(fā)明制劑和工藝磷酸緩沖鹽水制劑的安全性。該對比制劑含有-如第一項研究中所用的100μg/ml花粉肽-0.35mg/ml磷酸鹽-0.56mg/ml的NaCl-0.01mg/ml的KCl。本研究不同在于，該產(chǎn)品具有不同的配方，且各次治療被分為兩次注射，例如：施用了更多的過敏原。表10：*理論日劑量；部分患者若在之前觀察到較大的反應，可能在下一劑中接受較低的劑量。令人驚訝的是，采用海藻糖/甘露醇的組合物致使水皰直徑降低。當前第1頁1 2 3