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一種包含青錢柳葉、綠茶和桑葉的降血糖保健組合物的制作方法

文檔序號:11898352閱讀:416來源:國知局
本發(fā)明屬于保健食品領域,具體涉及一種包含青錢柳葉、綠茶和桑葉的降血糖保健組合物及其制劑和用途。
背景技術(shù)
:青錢柳(cyclocaryapaliurus(Batal.)Ijinsk)為胡桃科青錢柳屬植物,是國家重點保護的瀕危植物之一,它是一種高大速生喬木,廣泛分布于江西、浙江、湖南、廣東等長江以南地區(qū)。據(jù)《中華本草》記載,具有祛風、消炎止痛和殺蟲止癢等功效。其主要成分有皂苷、黃酮、萜類、多糖、微量元素等。青錢柳葉味甜,研究表明青錢柳葉具有多種功效:能明顯抑制脂肪酶活性、減少脂肪的消化吸收,并能促進脂類物質(zhì)的代謝分解;能有效降低血糖、明顯改善糖耐量;抗氧化、抗疲勞。綠茶是中國的主要茶類之一,是指采取茶樹新葉或芽,未經(jīng)發(fā)酵,經(jīng)殺青、或者整形、烘干等典型工藝制作而成的產(chǎn)品。廣泛,河南、貴州、江西、安徽、浙江、江蘇、四川、陜西、湖南、湖北、廣西、福建是我國的綠茶主產(chǎn)省份。綠茶具有醒腦提神、利尿解乏、緩解疲勞、抗衰老等食用功效,適用于油膩食品食用過多者、高血壓、小便不利、發(fā)熱口渴的人群。常飲綠茶能防癌,降血脂和減肥。由于綠茶是未經(jīng)發(fā)酵制成的荼,因此保留了鮮葉的天然物質(zhì),含有的荼多酚、兒荼素、葉綠素、咖啡堿、氨基酸、維生素等營養(yǎng)成分也較多。綠茶中的這些天然營養(yǎng)成份對防衰老、防癌、抗癌、殺菌、消炎等具有特殊效果,是其他荼類所不及的。桑葉(MulberryLeaf,學名:FoliumMori)是??浦参锷5母稍锶~,又名家桑、荊桑、桑椹樹、黃桑葉等,我國南北各地廣泛種植桑樹,桑葉產(chǎn)量豐富。氣淡,味微苦澀。桑葉是藥食兩用品,民間用桑葉煎汁代荼,研究表明桑葉具有降壓利尿、降血脂等功效,能抑制α-葡萄糖苷酶,并能競爭性地阻斷小腸粘膜細胞刷狀緣內(nèi)的麥芽糖酶和蔗糖酶等雙糖水解酶,使攝食的多糖、寡糖和雙糖消化成葡萄糖、果糖等單糖的吸收過程受到阻止,從而降低血糖濃度,起到有效的降糖作用。糖尿病是一種常見的多病因的有遺傳傾向的內(nèi)分泌代謝紊亂性疾病,隨著生活水平的提高,其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢,成為繼癌癥、心腦血管疾病之后危害人體健康的第三殺手。2012年的最新研究報告顯示,我國糖尿病人位居全球第一,美國估計約有1600萬以上的糖尿病患者,約占人口總數(shù)的6%。該病如得不到控制,將會導致嚴重慢性并發(fā)癥進而致殘致死。因此,加強糖尿病的防治措施已受到世界各國的重視,研究防治糖尿病的新型藥物和保健食品是國內(nèi)外相關(guān)領域的前沿課題。非藥物性治療糖尿病已成為當今醫(yī)學、營養(yǎng)學、食品科學研究的熱點之一。引起糖尿病的原因固然很多,但是我國人們的生活習慣以及飲食結(jié)構(gòu)使血糖處于較高狀態(tài)也是不爭的事實。這就成了誘發(fā)糖尿病潛在的危險群體,因此國內(nèi)很多大的企業(yè)和科研機構(gòu),爭相研究和開發(fā)降糖藥物或者替代產(chǎn)品。盡管產(chǎn)品琳瑯滿目,但大多都因價格昂貴、載體不理想、效果不穩(wěn)定或者服用麻煩而不被人們認可和接受。目前治療糖尿病的藥物主要有:1、磺脲類西藥如苯磺環(huán)己脲,甲磺吡脲,美吡達,利糖妥等;2、雙胍類:苯乙雙胍,二甲雙胍等;3、胰島素敏感性增強劑類:吡格列酮,羅格列酮等;4、胰島素類以及一些治療糖尿病的中成藥。西藥治療效果雖然明顯,但副作用大,如磺脲類久用傷害肝臟、腎臟及血細胞;雙胍類久用產(chǎn)生高乳酸血癥,胰島素類久用易產(chǎn)生抗體。此外,高血壓、高血脂也是近年來困擾人們的“現(xiàn)代文明病”,對人體健康的危害極大。對其防治的困難與糖尿病類似。高脂血癥(hyperlipemia)又稱高脂蛋白血癥,可表現(xiàn)為膽固醇血癥,高三酰甘油血癥或兩者兼有,它與動脈粥樣性硬化、糖尿病、脂肪肝、腎病等關(guān)系十分密切。尤其在心腦血管病的發(fā)病中有重要的地位而日益引起人們的重視。中醫(yī)認為高脂血癥屬“濁阻”、“痰濕、“肥胖、“濕熱”等范疇。高血壓是一種以動脈壓異常升高為主要特征的心血管疾病。按病因分為原發(fā)性高血壓和繼發(fā)性高血壓。根據(jù)血壓升高的程度,危險因素的數(shù)量,靶器官損害的程度以及并存的臨床情況把高血壓分為三期:(1)輕度高血壓:無器官損害客觀條件;(2)中度高血壓:至少有一項器官損害表現(xiàn)(左心室肥厚,視網(wǎng)膜動脈變窄,蛋白尿和血肌酐升高,超聲檢查有動脈硬化斑塊);(3)重度高血壓:出現(xiàn)器官損害的臨床表現(xiàn)(心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、短暫腦缺血發(fā)作、腦卒中、高血壓腦病、視網(wǎng)膜出血、腎功能衰竭、動脈閉塞性疾病)。本病屬于中醫(yī)的“眩暈”、“頭痛”等范疇?!叭摺辈∫驈碗s,目前病因尚不完全明確,西醫(yī)一般認為,主要是由:遺傳因素、環(huán)境因素,高胰島素血癥和胰島素抵抗、肥胖、脂代謝異常等相 互影響所致。目前西醫(yī)治療療效比較肯定,但對合并癥及其并發(fā)癥的治療困難較大,同時程度不同的副作用,患者往往難以忍受,不能堅持治療。中醫(yī)對上述疾病的認識和防治,則是從整體調(diào)理、辨證論治入手的,雖然沒有西藥快速,但通過整體調(diào)理,癥狀和指標都會得到有效控制,同時能夠有效保護靶器官等。國內(nèi)大量臨床資料表明,中醫(yī)藥預防和治療“三高”及其并發(fā)癥療效肯定,且副作用少。從臨床上看,往往是高血脂、高血糖、高血壓常合并出現(xiàn),互為因果??茖W研究證明,輕度的長期的慢性高血糖就可以導致所有慢性并發(fā)癥的發(fā)生,而長期血壓增高,同樣導致各種心腦血管系統(tǒng)疾病的發(fā)生。中醫(yī)認為,現(xiàn)代人“三高”患者多表現(xiàn)為“氣陰不足,痰瘀有余”,但目前能同時治療“三高”的中成藥的確了了無幾,因此,研究并開發(fā)能同時預防和治療“三高”及其合并癥的安全有效的保健組合為是當務之急,迫在眉睫。雖然目前我國生產(chǎn)具有降糖功能的藥物及替代產(chǎn)品的種類很多,但是具有理想的兼具降血糖、降血壓和降血脂效果的藥物組合物卻十分罕見。本發(fā)明人經(jīng)過長期的研究實踐,在浩瀚的藥食原材料中,通過創(chuàng)造性的勞動開發(fā)生產(chǎn)了一種同時具有降血糖、降血壓和降血脂功能的保健組合物,并經(jīng)藥效試驗和分析對比意外的發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的保健組合物對控制糖尿病患者的血糖以及降血壓和降血脂方面產(chǎn)生了明顯的協(xié)同作用。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供一種兼具降血糖、降血壓和降血脂功能、包含青錢柳葉、綠茶和桑葉的保健組合物,從而克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷。一方面,本發(fā)明提供了一種包含青錢柳葉、綠茶和桑葉的保健組合物,其中青錢柳葉、綠茶和桑葉的重量百分比為1-98%:1-98%:1-98%。在本發(fā)明的一個實施方案中,所述青錢柳葉、綠茶和桑葉的重量百分比為10-80%:10-80%:10-80%。進一步優(yōu)選的,所述青錢柳葉、綠茶和桑葉的重量百分比為20-60%:20-60%:20-60%。更優(yōu)選的,所述青錢柳葉、綠茶和桑葉的重量百分比為40%:40%:20%。在本發(fā)明的另一個實施方案中,所述保健組合物中還可以包含陳皮、苦丁荼、紅茶、山藥、白芍、茯苓、葛根中的一種或其任意組合。在本發(fā)明的又一個實施方案中,上述保健組合物中還可包含選自由玉竹、羅漢果、枸杞子、黃精、昆布、烏梅、石斛、桑白皮、人參、三七、女貞子、山茱萸、川芎、蒼術(shù)、玄參、生地黃、當歸、紅景天、西洋參、蘆薈、五味子、麥門冬、制大黃、知母、蒺藜、銀杏葉、黃芪、絞股藍、苦瓜、苦蕎麥、南瓜、魔芋、芹菜、玉米須、銀耳、猴頭菇和大蒜所組成的組中的一種或更多種。在本發(fā)明中,所述保健組合物可以通過本領域任何常規(guī)的制備方法進行制備。另一方面,本發(fā)明提供了所述保健組合物在制備輔助治療高血糖、高血壓或高血脂保健組合物方面的應用。再一方面,本發(fā)明提供了一種含有所述保健組合物的藥物制劑。本發(fā)明的保健組合物可以根據(jù)需要和藥學上可接受的輔料制備成任何合適的口服制劑用于降血糖、降血壓或降血脂的治療。在本發(fā)明一個優(yōu)選的實施方案中,所述口服制劑可以為片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、泡騰劑、袋泡劑等劑型。在本發(fā)明一個優(yōu)選的實施方案中,所述藥學上可接受的輔料例如可以選自預膠化淀粉、β-環(huán)糊精、卡波姆、微晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素、聚乙二醇(PEG)、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、乙基纖維素、甘露醇、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、乳糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠、阿斯巴甜、碳酸氫鈉、碳酸鈉中的一種或更多種。本發(fā)明中各主要原料藥的功效活性青錢柳葉:味微苦、辛,性平。具有健脾化濕、清熱通腑、疏肝理氣、滋陰補腎的作用,對因脾運不健、痰濁、嗜食肥甘厚味、懶動、腹?jié)M積食、肝淤氣滯而致的肥胖,有良好的改善。綠茶:具有醒腦提神、利尿解乏、緩解疲勞、抗衰老之功效,適用于油膩食品食用過多者、高血壓、小便不利、發(fā)熱口渴的人群。桑葉:氣淡,味微苦澀。具有降壓利尿、降血脂等功效,能抑制α-葡萄糖苷酶,并能競爭性地阻斷小腸粘膜細胞刷狀緣內(nèi)的麥芽糖酶和蔗糖酶等雙糖水解酶,具有降糖作用。陳皮:味苦、辛,性溫;歸肺、脾經(jīng);具有理氣健脾,燥濕化痰之功效, 用于脘腹脹滿、食少吐瀉、咳嗽痰多等癥。山藥:味甘、性平,歸脾、肺、腎經(jīng);具有補脾養(yǎng)胃,生津益肺,補腎澀精之功效,用于治療脾虛、久瀉、肺虛、腎虛、帶下、尿頻等癥。白芍:性涼、味苦酸,微寒,具有補血養(yǎng)血、平抑肝陽、柔肝止痛、斂陰止汗等功效,適用于陰虛發(fā)熱、月經(jīng)不調(diào)、胸腹脅肋疼痛、四肢攣急,瀉痢腹痛、自汗盜汗、崩漏、帶下等癥。茯苓:味甘、淡,性平。歸心、肺、脾、腎經(jīng)。具有利水滲濕,健脾,寧心之功效。用于水腫尿少,痰飲眩悸,脾虛食少,便溏泄瀉,心神不安,驚悸失眠等癥。葛根:味甘、辛,性涼。歸肺、胃經(jīng)。具有解肌退熱、透疹、生津止渴、升陽止瀉之功效,用于表證發(fā)熱、項背強痛、麻疹不透、熱病口渴、陰虛消渴、熱瀉熱痢、脾虛泄瀉等癥。本發(fā)明具有如下的優(yōu)點:本發(fā)明人意外的發(fā)現(xiàn)按照本發(fā)明的用量配比組成的含有青錢柳葉、綠茶和桑葉的保健組合物兼具降血糖、降血壓和降血脂的優(yōu)異效果,并在降血糖、降血壓和降血脂功能方面產(chǎn)生了明顯的協(xié)同作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明根據(jù)青錢柳葉的中藥特點,在眾多中藥和食品中進行了大量篩選,從而得到了一種保健組合物,其具有療效明確、使用方便、無毒副作用、協(xié)同作用明顯和易于大眾服用等優(yōu)點。具體實施方式下面將進一步的詳細說明本發(fā)明。需要指出的是,以下說明僅僅是對本發(fā)明要求保護的技術(shù)方案的舉例說明,并非對這些技術(shù)方案的任何限制。本發(fā)明的保護范圍以所附權(quán)利要求書記載的內(nèi)容為準。實施例1配方組成:青錢柳葉1.0kg、綠茶8.0kg、桑葉1.0kg。制備方法:2.1按照上述配方準確稱取各味中藥,將原料分別破碎,過60目篩,以除去原料細粉;2.2將青錢柳葉、綠茶、桑葉于混合機中混合約20分鐘至混合均勻,得 混合物料;2.3按1.5g/袋進行分裝,三角包狀,包裝材料為尼龍膜。實施例21、配方組成:青錢柳葉4.0kg、桑葉4.0kg、苦丁荼2.0kg。2、制備方法:同實施例1。實施例31、配方組成:青錢柳葉3.3kg、綠茶3.3kg、桑葉3.3kg。2、制備方法:同實施例1。實施例41、配方組成:青錢柳葉5.0kg、綠茶1.0kg、桑葉1.0kg、苦丁荼1.0kg、玉竹1.0kg、白芍1.0kg。2、制備方法:同實施例1。實施例51、配方組成:青錢柳葉8.0kg、綠茶0.5kg、桑葉0.5kg、紅茶0.5kg、葛根0.5kg2、制備方法:同實施例1。實施例61、配方組成:青錢柳葉1.0kg、綠茶1.0kg、陳皮1.0kg、山藥1.0kg、紅茶1.0kg、玄參1.0kg、西洋參1.0kg、銀杏葉1.0kg、絞股藍1.0kg、玉米須1.0kg。2、制備方法:同實施例1。對比例1選取青錢柳葉10kg按實施例1中的制備方法制得的樣品作為對比例1。對比例2選取綠茶10kg按實施例1中的制備方法制得的樣品作為對比例2。對比例3選取桑葉10kg按實施例1中的制備方法制得樣品作為對比例3。對比例4選取青錢柳葉3.5kg、綠茶3.5kg、桑葉3.0kg按實施例1中的制備方法制得的樣品作為對比例4。以上實施例中,各組分均為市售商品,可以制成藥劑學上所說的多種劑型,膠囊劑、顆粒劑、粉劑、片劑、口服液或袋泡荼。實驗例1:降血糖實驗1、材料和方法1.1樣品及試劑:實施例1-6及對比例1-4制備的樣品,分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6及D1、D2、D3、D4;鏈脲佐菌素,SIGMA公司產(chǎn)品,規(guī)格:1g/支,批號:SLBJ7785V;胰島素檢測試劑盒,進口分裝,南京建成生物工程公司,20141022;0.9%的氯化鈉注射液(生理鹽水),規(guī)格:250ml/瓶,四川科倫藥業(yè)股份有限公司,批號:C13102005-1;高脂飼料配方(79%基礎飲食+1%膽固醇+15%鮮蛋黃+5%豬油),苦味酸等。1.2儀器W-80A漩渦混合器,上海醫(yī)大儀器廠產(chǎn)品;電子天平,mettlerToledo,madebymettler-toledogroup,型號:pl303;LDZ5-2離心機,北京醫(yī)用離心機廠;強生穩(wěn)豪血糖儀(強生(中國)醫(yī)療器材有限公司);BECKMANSynchronCX5全自動血液生化分析儀(美國);酶標儀,bio-rad(美國),型號:iMark;DCA2000型糖化血紅蛋白分析儀,為德國拜耳公司產(chǎn)品;其他:臺秤、固定籠等。1.3實驗動物SPF級SD大鼠,體重160~180g,雄性,由南方醫(yī)科大學實驗動物中心提供,合格證號:SCXK(粵)2011-0015。動物于SPF級屏障級動物房飼養(yǎng),動物使用許可證號為:SYXK(粵)2012-0081。1.4劑量設置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天,人體10倍量為大鼠的劑量,劑量是以生藥量計。1.5統(tǒng)計學分析采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,參數(shù)用均數(shù)±標準差()表示,組間比較用ANOVA方差分析檢驗,p<0.05為有統(tǒng)計學差異。2.方法與結(jié)果2.1方法2.1.1大鼠飼料普通飼料:玉米粉80%,面粉15%,黃豆粉5%;高脂飼料:79%基礎飲食+1%膽固醇+15%鮮蛋黃+5%豬油。2.1.2造模:取160-180gSPF級SD大鼠120只,雄性,體重160~180g,適應性喂養(yǎng)一周后取10只作為正常對照組,以正常飼料喂養(yǎng),其它各組先用高脂飼料喂養(yǎng)1個月,抽查血脂指標明顯升高后,腹腔注射STZ35mg/kg誘發(fā)糖尿病模型(STZ臨用前用0.1mmol/LpH=4.5的檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖液配成6mg/mL的溶液,且在60min內(nèi)用完)。于注射后第7d,斷尾采集空腹靜脈血,以血糖儀測定血糖,將血糖值大于等于16.7mmol/L視為建模成功。模型穩(wěn)定后,根據(jù)血脂血糖高低分組,口服給予受試藥物以及對照藥物,觀察各項指標。2.1.3分組與給藥:選取狀態(tài)較好的110只造模成功動物按照血糖值和體重均勻分成11組:每組10只,即II型糖尿病模型對照組(給予蒸餾水),S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組、D3組和D4組。正常不造模的SD大鼠10只為正常對照組(給予蒸餾水)。各組按相應劑量口服給藥,每天給藥1次,給藥周期:4周(4W)。2.2測定指標2.2.1使用血糖儀分別測定給藥前以及給藥后2W和4W血糖值。2.2.2檢測血清胰島素、糖化血紅蛋白含量。2.2.3糖耐量試驗:于實驗結(jié)束前兩天進行檢測;糖耐量檢測:動物禁食約6小時,各組給予不同濃度受試樣品,15-20分鐘后經(jīng)口給予葡萄糖2.0g/kg,測定給葡萄糖后0、0.5、2小時的血糖值,觀察模型對照組與受試樣品組給葡萄糖后各時間點血糖曲線下面積的變化。血糖曲線下面積=1/2×(0小時血糖值+0.5小時血糖值)×0.5+1/2×(2小時血糖值+0.5小時血糖值)×1.5=0.25×(0小時血糖值+4×0.5小時血糖值+3×2小時血糖值)2.3結(jié)果2.3.1對II型糖尿病大鼠血糖的影響由表1可見,與正常對照組比較,給藥前糖尿病造模各組大鼠血糖顯著升高,表明糖尿病模型造模成功。給藥2w后,與模型對照組比較,S1-S6組、D1組和D4組血糖均有下降。給藥4w后,S1-S6組、D1組和D4組血糖均有下降。表1.樣品對II型糖尿病大鼠血糖的影響()注:與正常對照組比較:#p<0.05,##p<0.01;與模型組比較:*p<0.05,**p<0.012.3.2對II型糖尿病大鼠血清胰島素和糖化血紅蛋白的影響由表2可見,與正常對照組比較,模型對照組喂高脂飼料和糖尿病造模后,大鼠血清胰島素明顯降低(p<0.01),糖化血紅蛋白明顯升高(p<0.01),表明高脂血癥大鼠模型造模成功。與模型對照組比較,S1-S6組、D1組和D4組血清胰島素均有增加。與模型對照組比較,S1-S6組、D1組和D4組糖化血紅蛋白均有下降(與模型組比較P<0.05)。表2.樣品對II型糖尿病大鼠血清胰島素和糖化血紅蛋白的影響()組別n胰島素(mmol/L)糖化血紅蛋白(mmol/L)正常對照組1019.85±2.783.96±0.59模型對照組109.42±2.16##9.37±1.29##S1組1013.87±2.74*7.40±1.23*S2組1013.81±2.62*7.34±1.44*S3組1013.50±3.26*7.40±1.87*S4組1013.55±2.66*7.38±1.42*S5組1013.49±2.70*7.42±1.59*S6組1013.54±2.21*7.23±1.28*D1組1013.16±2.52*7.20±1.70*D2組1010.75±2.898.64±2.33D3組1010.88±2.648.45±1.86D4組1013.02±2.027.62±1.16*注:與正常對照組比較:#p<0.05,##p<0.01;與模型組比較:*p<0.05,**p<0.012.3.3對II型糖尿病大鼠糖耐量試驗結(jié)果由表3可見,與模型對照組比較,S1-S6組、D1組和D4組的血糖曲線下面積均有下降。表3.樣品對II型糖尿病大鼠糖耐量試驗結(jié)果()組別n血糖曲線下面積正常對照組1011.23±0.89模型對照組1040.75±6.18##S1組1032.56±5.95*S2組1031.74±5.93*S3組1026.01±5.47**S4組1032.12±6.72*S5組1031.89±5.97*S6組1031.90±6.31*D1組1032.03±5.72*D2組1036.74±7.01D3組1035.92±6.45D4組1033.17±6.20*注:與正常對照組比較:#p<0.05,##p<0.01;與模型對照組比較:p均大于0.05.3.結(jié)論:S1-S6、D1和D4對糖尿病模型大鼠具有明顯的降血糖作用,且S1-S6的組合物在降血糖方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。實驗例2:降血脂實驗1、材料和方法1.1藥品及試劑:實施例1-6及對比例1-4制備的樣品,分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6及D1、D2、D3、D4;0.9%的氯化鈉注射液(生理鹽水),規(guī)格:250ml/瓶,四川科倫藥業(yè)股份有限公司,批號:C13102005-1;高脂飼料配方(79%基礎飲食+1%膽固醇+15%鮮蛋黃+5%豬油),蒸餾水,苦味酸,等。1.2儀器W-80A漩渦混合器,上海醫(yī)大儀器廠產(chǎn)品;電子天平,mettlerToledo,madebymettler-toledogroup,型號:pl303;LDZ5-2離心機,北京醫(yī)用離心機廠;BECKMANSynchronCX5全自動血液生化分析儀(美國);其他:臺秤、固定籠等。1.3實驗動物SPF級SD大鼠,體重160~180g,雄性,由南方醫(yī)科大學實驗動物中心提供,合格證號:SCXK(粵)2011-0015。動物于SPF級屏障級動物房飼養(yǎng),動物使用許可證號為:SYXK(粵)2012-0081。1.4劑量設置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天,人體10倍量為大鼠的劑量,劑量是以生藥量計。1.5統(tǒng)計學分析采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,參數(shù)用均數(shù)±標準差(x±S)表示,組間比較用ANOVA方差分析檢驗,p<0.05為有統(tǒng)計學差異。2.方法與結(jié)果2.1分組與方法取SPF級SD大鼠120只,雄性,體重160~180g,適 應性喂養(yǎng)一周后取10只作為正常對照組,以正常飼料喂養(yǎng);剩余給予高脂飼料喂養(yǎng)。連續(xù)喂養(yǎng)4周(通過定時抽血檢測血脂四項來確定造模是否成功)后,選取狀態(tài)較好的110只造模成功動物按照血脂數(shù)值和體重均勻分成11組:每組10只,即高脂血癥模型對照組(給予蒸餾水),S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組、D3組和D4組。高脂飼料喂養(yǎng)4周后按以上分組情況開始給藥并繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料(正常對照組喂養(yǎng)普通飼料),每天1次,連續(xù)給藥4w。末次給藥后,隔夜禁食,次日稱量體重后,水合氯醛麻醉,下腔靜脈采血后處死。離心后取上清液測血清中的生化指標。2.2檢測指標:(1)一般狀況觀察,并記錄每周體重。(2)各組大鼠血清脂質(zhì)指標:每兩周眼眶靜脈叢取血,分離血清檢測:總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。2.3結(jié)果2.3.1對血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的影響表4.造模成功均勻分組后大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)()注:與正常對照組比較:#p<0.05,##p<0.01;與模型對照組比較:p均大于0.05.表5.給藥2W后各組大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)()注:與正常對照組比較:#p<0.05,##p<0.01;與模型組比較:*p<0.05,**p<0.01表6.給藥4W后各組大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)()注:與正常對照組比較:#p<0.05,##p<0.01;與模型組比較:*p<0.05,**p<0.01由表4可見,與正常對照組比較,模型對照組喂高脂飼料4W后,大鼠血清TC、LDL-C顯著升高(p<0.01),TG明顯升高(p<0.05),表明高脂血癥大鼠模型造模成功。根據(jù)血脂水平均勻分成4組。由表5可見,給藥2W后,與模型對照組比較,S1-S6組、D1組和D4組均有降低血清中脂質(zhì)水平的作用。由表6可見,給藥4W后,與模型對照組比較,S1-S6組、D1組和D4組能降低血清中TC、TG、LDL-C水平(p<0.05或p<0.01)。3.結(jié)論:S1-S6、D1和D4對高脂血癥模型大鼠有明顯的降血脂作用,且S1-S6的組合物在降血脂方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。實驗例3:降血壓實驗1、材料和方法1.1藥品及試劑:實施例1-6及對比例1-4制備的樣品,分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6及D1、D2、D3、D4;0.9%的氯化鈉注射液(生理鹽 水),規(guī)格:250ml/瓶,四川科倫藥業(yè)股份有限公司,批號:C13102005-1;蒸餾水,苦味酸,等。1.2儀器DKB-501A型超級恒溫水槽,為上海森信實驗儀器有限公司產(chǎn)品;電熱恒溫干燥箱,為長沙醫(yī)療器械廠產(chǎn)品;Powlab/4spML125型無創(chuàng)測壓系統(tǒng)(ML125/RNIBP,MLT1199BPTrans-ducer/CableKit),澳大利亞埃德儀器有限公司產(chǎn)品;MP120-1電子天平,為上海第二天平儀器廠產(chǎn)品。1.3實驗動物SPF級SHR大鼠,體重190~230g,雄性,由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供,合格證號:SCXK(京)2012-0001。動物于SPF級屏障級動物房飼養(yǎng),動物使用許可證號為:SYXK(粵)2012-0081,SPF級WISTAR雄性大鼠,北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供,實驗動物生產(chǎn)許可證號為:SCXK(京)2012-0001。1.4劑量設置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天,人體10倍量為大鼠的劑量,劑量是以生藥量計。1.5統(tǒng)計學分析采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,參數(shù)用均數(shù)±標準差(x±S)表示,組間比較用ANOVA方差分析檢驗,p<0.05為有統(tǒng)計學差異。2.方法與結(jié)果將9-10周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)隨機分11組,每組10只,即高血壓模型對照組(給予蒸餾水),S組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組、D3組和D4組。另取正常WISTAR大鼠10只為正常對照組(給予蒸餾水)。各組動物分別灌胃給予各種劑量藥物,每天1次,共給藥4周。分別于給藥前以及給藥后2周、4周以無創(chuàng)尾動脈測壓系統(tǒng)檢測大鼠尾動脈血壓值(收縮壓,SAP,mmHg)。無創(chuàng)尾套法(NIBP):將大鼠放入大鼠固定器內(nèi),露出鼠尾。用紅外取暖器,溫度設置為38℃,照射加熱鼠尾大約10min后,鼠尾變軟,鼠尾動脈充分擴張。將其穿過加壓尾套并固定在鼠尾的根部,使大鼠尾動脈與PowerlabML125/R無創(chuàng)尾動脈血壓測定分析系統(tǒng)的脈搏傳感器緊密接觸,同時觀測系統(tǒng)的脈搏波形,出現(xiàn)穩(wěn)定的脈搏波時即可開始測定血壓。待動物安靜后,選擇90~420BPM(大鼠加壓檔)給尾套充氣加壓,可見脈搏波逐漸減小至消失,然后尾套開始放氣,鼠套壓力降低,當壓力等于收縮壓時,開始出現(xiàn)脈搏波,此點的血壓值即為鼠尾收縮壓。重復測量3次,取平均值。計 算壓降值(血壓下降值),給藥后SAP減去給藥前SAP得。結(jié)果見表7:表7樣品對SHR大鼠血壓(SAP,mmHg)的影響()注:與正常對照組比較:#為P<0.01;與模型對照組比較:*為P<0.05.結(jié)果表明,與正常對照組比較,模型對照組大鼠血壓顯著升高,可見自發(fā)性高血壓大鼠模型成功。與模型對照組,S1-S6組、D1組和D4組在給藥4W能顯著降低SHR大鼠的血壓(P<0.05)。3.結(jié)論:S1-S6、D1和D4樣品有顯著的降血壓作用,且S1-S6的組合物在降血壓方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。本
發(fā)明內(nèi)容僅僅舉例說明了要求保護的一些具體實施方案,其中一個或更多個技術(shù)方案中所記載的技術(shù)特征可以與任意的一個或多個技術(shù)方案相組合,這些經(jīng)組合而得到的技術(shù)方案也在本申請保護范圍內(nèi),就像這些經(jīng)組合而得到的技術(shù)方案已經(jīng)在本發(fā)明公開內(nèi)容中具體記載一樣。當前第1頁1 2 3 
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