千里光注射液及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及獸用注射液【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種千里光注射液及其制備方法與應(yīng)用。該千里光注射液含有千里光提取物，所述的千里光提取物為千里光60％乙醇提取物。本發(fā)明采用千里光千里光60％乙醇提取物作為有效部位制備千里光注射液，其操作簡(jiǎn)單，成本較低，可以應(yīng)用于工業(yè)化大生產(chǎn)。制備得到的千里光注射液，具有良好的殺菌功效，對(duì)呼吸系和消化系混合性細(xì)菌感染的防治具有良好的效果，其有效治療率達(dá)到93％。
【專利說(shuō)明】千里光注射液及其制備方法與應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及獸用注射液【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種千里光注射液及其制備方法與應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]千里光(Sonec1 scandens Buch.-Ham.)為菊科千里光屬多年生攀緣草本植物，又名九里明、一掃光、千里及等，始載于《本草拾遺》。全草入藥，有清熱解毒、清肝明目、去腐生肌、殺蟲(chóng)止癢之效，能治風(fēng)濕、骨痛、皮炎、濕瘆、下痢、瘡癤和咽喉腫痛等。千里光在全國(guó)22個(gè)省和自治區(qū)均有分布。在廣東省，千里光在18個(gè)地級(jí)市有分布，以粵西地區(qū)最為明顯。
[0003]千里光有廣譜抗生素作用，對(duì)金黃色葡萄球菌、傷寒桿菌、甲型副傷寒桿菌、乙型副傷寒桿菌、志賀、鮑氏、宋內(nèi)痢疾桿菌均有較強(qiáng)的抑制作用，在較高濃度下，對(duì)致病性大腸桿菌及綠膿桿菌亦有抑制作用，對(duì)變形、蠟樣、炭疽等桿菌及八疊球菌也有不同程度的抑制作用。在植物學(xué)、藥理學(xué)和毒理學(xué)上，千里光均不同于千里光屬其他植物，民間將千里光用于治療皮膚濕瘆瘡癤、傷寒、菌痢、大葉性肺炎、目赤腫痛、殺蟲(chóng)、止癢等多種疾病，但將千里光作為獸用藥物用于治療動(dòng)物疾病的并不多見(jiàn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的首要目的在于提供一種千里光注射液。
[0005]本發(fā)明的另一目的在于提供所述的千里光注射液的制備方法。
[0006]本發(fā)明的再一目的在于提供所述的千里光注射液的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):一種千里光注射液，含有千里光提取物。
[0008]所述的千里光提取物為千里光60%乙醇提取物。
[0009]所述的千里光60%乙醇提取物采用如下方法進(jìn)行制備:取千里光藥材，加入純凈水進(jìn)行回流提取，過(guò)濾，取濾渣晾干后，加入60%乙醇回流提取2-3次，過(guò)濾，合并濾液，濃縮，得到千里光60%乙醇提取物；每克千里光藥材加入純凈水7-10毫升，每克千里光藥材加入60%乙醇7-10毫升。
[0010]所述的回流提取的次數(shù)優(yōu)選為2-3次；
[0011]所述的濃縮為于70-80°C濃縮2-3小時(shí)。
[0012]所述的回流提取優(yōu)選為90_100°C回流提取2-3小時(shí)。
[0013]所述的千里光注射液的制備方法，包括如下步驟:將3-10%千里光60%乙醇提取物、0.1-0.5%黃胺增效劑TMP、8-20%多元醇、0.1-0.5%增溶劑、0.05-0.50%防腐劑、注射用水?dāng)嚢杈鶆蛐纬蓱腋∫?；另?.2-0.6%穩(wěn)定劑加入上述懸浮液中，邊加邊攪拌，最后加注射用水至處方量，攪拌均勻，精濾，得到千里光注射液。
[0014]所述多元醇優(yōu)選為乙二醇、丙二醇或丙三醇。
[0015]所述的增溶劑優(yōu)選為聚山梨酯類、司盤(pán)類或甘油。
[0016]所述的防腐劑優(yōu)選為苯甲醇、苯扎氯銨或檸檬酸。
[0017]所述的穩(wěn)定劑優(yōu)選為檸檬酸鹽、酒石酸鹽或磷酸鹽。
[0018]所述的百分比均為質(zhì)量體積百分比。
[0019]所述的千里光注射液應(yīng)用于制備防治動(dòng)物呼吸系和消化系混合性細(xì)菌感染的藥物。
[0020]本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果:本發(fā)明采用千里光千里光60%乙醇提取物作為有效部位制備千里光注射液，其操作簡(jiǎn)單，成本較低，可以應(yīng)用于工業(yè)化大生產(chǎn)。制備得到的千里光注射液，具有良好的殺菌功效，對(duì)呼吸系和消化系混合性細(xì)菌感染的防治具有良好的效果，其有效治療率達(dá)到93%。

【具體實(shí)施方式】
[0021]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0022]實(shí)施例1
[0023]千里光60%乙醇提取物采用如下方法進(jìn)行制備:取千里光藥材，加入純凈水進(jìn)行100C回流提取3小時(shí)，過(guò)濾，取濾渣晾干后，加入60%乙醇90°C回流提取3小時(shí)、2次，過(guò)濾，合并濾液，80°C濃縮3小時(shí)，得到千里光60%乙醇提取物；每克千里光藥材加入純凈水10毫升，每克千里光藥材加入60%乙醇10毫升。
[0024]將3%千里光60%乙醇提取物、0.1%黃胺增效劑TMP、8%乙二醇、0.1%聚山梨酯類、0.05%苯甲醇、注射用水?dāng)嚢杈鶆蛐纬蓱腋∫海涣砣?.2%檸檬酸鹽加入上述懸浮液中，邊加邊攪拌，最后加注射用水至處方量，攪拌均勻，精濾，得到千里光注射液。
[0025]實(shí)施例2
[0026]千里光60%乙醇提取物采用如下方法進(jìn)行制備:取千里光藥材，加入純凈水進(jìn)行100C回流提取2小時(shí)，過(guò)濾，取濾渣晾干后，加入60%乙醇90°C回流提取2小時(shí)、3次，過(guò)濾，合并濾液，70°C濃縮3小時(shí)，得到千里光60%乙醇提取物；每克千里光藥材加入純凈水8毫升，每克千里光藥材加入60%乙醇8毫升。
[0027]千里光注射液的制備方法，包括如下步驟:將10%千里光60%乙醇提取物、0.5%黃胺增效劑TMP、20%丙二醇、0.5%甘油、0.50%苯扎氯銨、注射用水?dāng)嚢杈鶆蛐纬蓱腋∫?；另?.6%酒石酸鹽加入上述懸浮液中，邊加邊攪拌，最后加注射用水至處方量，攪拌均勻，精濾，得到千里光注射液。
[0028]實(shí)施例3
[0029]千里光60%乙醇提取物采用如下方法進(jìn)行制備:取千里光藥材，加入純凈水進(jìn)行100C回流提取3小時(shí)，過(guò)濾，取濾渣晾干后，加入60%乙醇100°C回流提取2小時(shí)、2次，過(guò)濾，合并濾液，80°C濃縮2小時(shí)，得到千里光60%乙醇提取物；每克千里光藥材加入純凈水7毫升，每克千里光藥材加入60 %乙醇7毫升。
[0030]千里光注射液的制備方法，包括如下步驟:將5%千里光60%乙醇提取物、0.3%黃胺增效劑TMP、10%丙三醇、0.3%甘油、0.30%檸檬酸、注射用水?dāng)嚢杈鶆蛐纬蓱腋∫?；另?.4%磷酸鹽加入上述懸浮液中，邊加邊攪拌，最后加注射用水至處方量，攪拌均勻，精濾，得到千里光注射液。
[0031]效果實(shí)施例
[0032]一、藥理學(xué)研宄
[0033](I)所進(jìn)行的5種不同提取物的提取率分別為:水提物24.09%，體積分?jǐn)?shù)60%乙醇提取物18.02%、體積分?jǐn)?shù)70%乙醇提取物16.67%、體積分?jǐn)?shù)80%乙醇提取物8.33%、體積分?jǐn)?shù)90 %乙醇提取物3.20 %。
[0034](2)千里光乙醇提取物中明顯含有黃酮及其甙類、蒽醌及其甙類、酚類、氨基酸和鞣質(zhì)等，還含有皂苷、有機(jī)酸、揮發(fā)油和生物堿等。新發(fā)現(xiàn)千里光含有強(qiáng)心苷。千里光全草總生物堿提取物中含PAs，但在5種提取物中未檢查出PAs。
[0035](3)體外抗菌試驗(yàn)篩選出千里光體積分?jǐn)?shù)60%乙醇提取物(SSE60)為千里光抗菌有效部位。
[0036](4)體內(nèi)感染試驗(yàn)結(jié)果表明:高劑量SSE60不但能顯著延長(zhǎng)胞內(nèi)菌鼠傷寒沙門(mén)氏菌感染小鼠的死亡時(shí)間，而且可以顯著提高小鼠存活率。
[0037](5)體內(nèi)抗內(nèi)毒素試驗(yàn)表明:SSE60高、中劑量組小鼠死亡率分別比生理鹽水組均降低20% ;在延長(zhǎng)小鼠的生存時(shí)間方面，SSE60高、中、低劑量組和生理鹽水組相比，均差異不顯著。
[0038](6)免疫試驗(yàn)結(jié)果表明:SSE60能明顯抑制遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)。高劑量SSE60能顯著增強(qiáng)小鼠T淋巴細(xì)胞酯酶染色作用。SSE60高、中劑量組能增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬功能，其中高劑量組與生理鹽水組相比，差異極顯著。SSE60高、中和低劑量組小鼠的脾臟指數(shù)分別比生理鹽水對(duì)照組高25%、5%和14% ;與生理鹽水對(duì)照組相比，SSE60高、中和低劑量組小鼠的胸腺指數(shù)分別高68%、32%和32%，其中高劑量組增加顯著，中劑量組和低劑量組增加不顯著，并且隨著劑量的增加，胸腺指數(shù)呈上升的趨勢(shì)。
[0039]二、SSE60抗菌促生長(zhǎng)作用及藥物代謝動(dòng)力學(xué)研宄
[0040]從SSE60的化學(xué)成分分析著手，研宄了 SSE60的體內(nèi)外抗菌作用、促生長(zhǎng)作用；以抗炎藥理效應(yīng)法和鎮(zhèn)痛藥理效應(yīng)法，研宄了 SSE60的藥物代謝動(dòng)力學(xué)。
[0041](I) SSE60對(duì)腸炎沙門(mén)氏菌(Salmonella enteritidis，SE)、鼠傷寒沙門(mén)氏菌(Salmonella typhimurium，ST)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，SA)、錯(cuò)狀芽抱桿菌(Bacillus cereus，BC)、無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae，SAg)、大腸埃希氏菌(Escherichia coli，EC26、EC37)的體外抗菌試驗(yàn)表明，SsE對(duì)上述7種細(xì)菌的抑菌圈直徑均在10?19mm，為敏感；MIC試驗(yàn)表明，SSE60除對(duì)EC26和SA為0.0625g/mL，對(duì)其余5種細(xì)菌均為0.0313g/mL ；MBC試驗(yàn)表明，SSE60除對(duì)SAg為0.0313g/mL，對(duì)其余6種細(xì)菌均為 0.0625g/mL。
[0042](2) SSE60對(duì)EC37的體內(nèi)抗菌試驗(yàn)表明，SSE60對(duì)EC37感染小鼠有明顯治療作用，
效果與慶大霉素組相當(dāng)。
[0043](3) SSE60對(duì)小鼠的促生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明，各試驗(yàn)組小鼠全期平均日增重均有提高(P<0.05);料重比降低(P〈0.05);胴體重和屠宰率顯著提高(P〈0.05)。一定劑量SSE60對(duì)小鼠的腎臟指數(shù)、肺臟指數(shù)、腦指數(shù)的影響較小(P>0.05)，而對(duì)心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)影響較大。一定劑量SSE60能明顯提高小鼠血清ALB含量、提高A/B比值、血清CHO含量和GLU含量，能影響肝組織AKP、GOT和GPT活力。
[0044](4)以抗炎藥理效應(yīng)法研宄SSE60的藥動(dòng)學(xué)結(jié)果表明，SSE60最低起效量為
57.40mg/kgo在小鼠體內(nèi)的代謝符合一級(jí)反應(yīng)一室模型，模型表達(dá)式為C = 1436.227e~ ( 一
0.1334t) - 1436.227e'(~0.237t);一級(jí)消除速率常數(shù)Ke = 0.1334h_ 1，消除半衰期 t1/2Ke=5.1949h，一級(jí)吸收速率常數(shù)Ka = 0.237h~ 1，吸收半衰期t1/2Ka= 2.9241h，血藥峰濃度Cmax= 1436.227mg.kg _ 1，達(dá)峰時(shí)間 tmax= 5.5474h，清除率 Cl = 0.0553mg.kg _ 1.h_ 1，藥一時(shí)曲線下面積AUC = 16826.35mg.kg- 1.h，表觀分布容積V = 0.4142mg.kg- 1，滯后期 t0= 0.0104ho
[0045](5)以鎮(zhèn)痛藥理效應(yīng)法研宄SSE60的藥動(dòng)學(xué)結(jié)果表明，SSE60最低起效量為
58.29mg/kgo在小鼠體內(nèi)的代謝符合一級(jí)反應(yīng)一室模型，模型表達(dá)式為C = 385.6512e~ ( 一
0.0701t) — 385.6512e~( - 0.2858t);一級(jí)消除速率常數(shù) Ke = 0.0701h_ 1，消除半衰期t1/2Ke= 9.8859h，一級(jí)吸收速率常數(shù)Ka = 0.2858h ~1，吸收半衰期t1/2Ka= 2.4248h，血藥峰濃度 Cmax= 385.6512mg.kg _ 1，達(dá)峰時(shí)間 tmax= 6.5154h，清除率 Cl = 0.1357mg.kg _1.h_^藥-時(shí)曲線下面積AUC = 6850.818mg.kg- 1.h，表觀分布容積V=1.9358mg.kg- 1，滯后期 t0= 0.0335ho
[0046]三、系統(tǒng)地進(jìn)行了 SSE60的毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)
[0047]采用改良寇氏法測(cè)定了 SSE60經(jīng)腹腔注射給予昆明系小鼠的半數(shù)致死量，根據(jù)急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)SSE60的毒性進(jìn)行了推斷；以所測(cè)LD5tl為劑量依據(jù)，利用劑量遞增法，研宄了 SSE60對(duì)昆明系小鼠的蓄積作用，并進(jìn)行了耐受性試驗(yàn)；利用小鼠骨髓微核試驗(yàn)、精子畸形試驗(yàn)和Ames試驗(yàn)，進(jìn)行了 SSE60致突變作用的研宄；進(jìn)行了 SSE60的亞急性毒性試驗(yàn)；進(jìn)行了 SSE60的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)和致肝癌性檢查(血清AFP檢測(cè));利用三段生殖毒性試驗(yàn)對(duì)SSE60的生殖毒性進(jìn)行了研宄；并對(duì)較長(zhǎng)時(shí)間給予SSE60能否引起小鼠的生長(zhǎng)發(fā)育、內(nèi)臟器官及血常規(guī)和血液生化指標(biāo)等變化進(jìn)行了研宄。以上研宄首次發(fā)現(xiàn):
[0048](1)SSE60對(duì)雌雄兼有昆明系小鼠腹腔注射的LD5tl為(3911.11 ±153.14)mg/kg，95%可信限是(3760.97?4067.24)mg/kg，屬于低毒物質(zhì)。
[0049](2)SSE60對(duì)雌雄兼有昆明系小鼠的蓄積系數(shù)為5.26，屬于弱蓄積性物質(zhì)；小鼠對(duì)SSE60具有明顯的耐受性。
[0050](3)391mg/kg及以下劑量的SSE60未引起昆明系小鼠骨髓細(xì)胞微核發(fā)生率升高。
[0051](4)391mg/kg及以下劑量的SSE60未引起昆明系小鼠精子畸形發(fā)生率升高。
[0052](5) Ames試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在有或無(wú)Sjg化液時(shí)，每平皿8 μ g?5000 μ g的SSE60均未使組氨酸缺陷型鼠傷寒沙門(mén)氏菌株TA97、TA98、TA100和TA102的菌落回變數(shù)發(fā)生變化。
[0053](6)亞急性毒性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，SSE60各劑量組分別與陰性對(duì)照組比較，供試小鼠無(wú)明顯病理組織學(xué)變化；391mg/kg和130mg/kg的SSE60能明顯提高小鼠的飼料利用率，促進(jìn)體重增加。
[0054](7)長(zhǎng)期(90天)給予391mg/kg及以下劑量的SSE60，對(duì)小鼠的行為、生長(zhǎng)發(fā)育、血液生理生化和臟器系數(shù)等指標(biāo)均無(wú)不良影響，能明顯促進(jìn)小鼠生長(zhǎng)；未引起血清AFP含量升高，不具有致肝癌性。
[0055](8)在妊娠前期及中期分別給予39mg/kg?391mg/kg的SSE60，對(duì)小鼠交配行為、受孕能力未產(chǎn)生不良影響。在器官形成期，未表現(xiàn)出胎兒致畸性。在圍產(chǎn)期和哺乳期，對(duì)孕鼠、哺乳鼠和胎鼠及新生仔鼠無(wú)潛在不良影響。
[0056]四、對(duì)千里光注射液進(jìn)行質(zhì)量檢查，總體結(jié)果令人滿意?？咕囼?yàn)證明，其抗菌能力與市售雙黃連注射液相當(dāng)。自2005年以來(lái)，共在某三個(gè)養(yǎng)雞場(chǎng)的12000只三黃肉雞亞臨床和臨床病例中應(yīng)用千里光注射液，用于呼吸系和消化系混合性細(xì)菌感染的防治，總有效數(shù)為11200，總有效率達(dá)93 %，按每只育成雞挽回生產(chǎn)性能和死亡損失平均10元計(jì)算，挽回經(jīng)濟(jì)損失112000元，效果十分顯著。
[0057]上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種千里光注射液，其特征在于，所述的千里光注射液含有千里光提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的千里光注射液，其特征在于，所述的千里光提取物為千里光60%乙醇提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的千里光注射液，其特征在于，所述的千里光60%乙醇提取物采用如下方法進(jìn)行制備:取千里光藥材，加入純凈水進(jìn)行回流提取，過(guò)濾，取濾渣晾干后，加入60%乙醇回流提取2-3次，過(guò)濾，合并濾液，濃縮，得到千里光60%乙醇提取物；每克千里光藥材加入純凈水7-10毫升，每克千里光藥材加入60%乙醇7-10毫升。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的千里光注射液，其特征在于，所述的回流提取的次數(shù)為2-3次；所述的濃縮為于70-80°C濃縮2-3小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的千里光注射液，其特征在于，所述的回流提取為90-100°C回流提取2-3小時(shí)。
6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的千里光注射液的制備方法，其特征在于，包括如下步驟:將3-10%千里光60%乙醇提取物、0.1-0.5%黃胺增效劑TMP、8-20%多元醇、0.1-0.5%增溶劑、0.05-0.50%防腐劑、注射用水?dāng)嚢杈鶆蛐纬蓱腋∫?；另?.2-0.6%穩(wěn)定劑加入上述懸浮液中，邊加邊攪拌，最后加注射用水至處方量，攪拌均勻，精濾，得到千里光注射液；所述的百分比為質(zhì)量體積百分比。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的千里光注射液的制備方法，其特征在于，所述多元醇為乙二醇、丙二醇或丙三醇。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的千里光注射液的制備方法，其特征在于，所述的增溶劑為聚山梨酯類、司盤(pán)類或甘油。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的千里光注射液的制備方法，其特征在于，所述的防腐劑為苯甲醇、苯扎氯銨或檸檬酸；所述的穩(wěn)定劑為檸檬酸鹽、酒石酸鹽或磷酸鹽。
10.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的千里光注射液應(yīng)用于制備防治動(dòng)物呼吸系和消化系混合性細(xì)菌感染的藥物。
【文檔編號(hào)】A61K9/08GK104473988SQ201410821557
【公開(kāi)日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年12月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月24日
【發(fā)明者】陳進(jìn)軍, 聶芳紅, 陳進(jìn)東, 何盛昱, 林紅英 申請(qǐng)人:廣東海洋大學(xué)