一種治療肝衰竭的藥物組合物及其制備方法和用途
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種治療肝衰竭的藥物組合物，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑：烏頭4-30份，人參2-15份。本發(fā)明還提供了該藥物組合物的制備方法和用途。本發(fā)明藥物組合物能有效的消除或極大緩解肝衰竭的并發(fā)癥，具有良好的抗肝衰竭的作用，為臨床用藥提供了一種新的選擇。
【專利說明】一種治療肝衰竭的藥物組合物及其制備方法和用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種治療肝衰竭的藥物組合物。

【背景技術(shù)】
[0002] 肝衰竭是多種因素引起的嚴(yán)重肝臟損害，導(dǎo)致其合成、解毒、排泄和生物轉(zhuǎn)化等 功能發(fā)生嚴(yán)重障礙或失代償，出現(xiàn)以凝血機(jī)制障礙和黃疽、肝性腦病、腹水等為主要表現(xiàn) 的一組臨床癥候群。它是全球公認(rèn)的危及患者生命的、極具挑戰(zhàn)性的臨床危重癥，內(nèi)科治 療尚缺乏特效藥物和手段。
[0003] 肝衰竭一直是國內(nèi)外肝病領(lǐng)域的研究熱點，目前認(rèn)為肝移植是治療本病的最有效 手段，但由于供體受限及高昂的治療費(fèi)用，其臨床運(yùn)用受到極大限制。近年來，雖然西醫(yī)內(nèi) 科綜合治療條件及人工肝系統(tǒng)不斷得到改善，但肝衰竭的死亡率仍高達(dá)40%。
[0004] 肝衰竭可歸屬于祖國醫(yī)學(xué)"瘟黃"、"黃疸"、"天行發(fā)黃"等范疇，且早在《黃帝內(nèi)經(jīng)》 中即有論述。目前雖常以"毒邪病因"學(xué)說認(rèn)識肝衰竭，認(rèn)為毒為致病之因，貫穿于疾病始 終，瘀、痰為病變之本，并且毒與瘀、痰又可互為因果，并據(jù)此提出"解毒、化瘀、祛痰"基 本治則，但臨證以此施治尚有相當(dāng)部分患者難以奏效，且一項全國多中心、大樣本的研究顯 示常規(guī)辨證論治肝衰竭的總體療效欠佳。而我們通過大量的文獻(xiàn)研究及大量臨床肝衰竭案 例的診治，得出陽氣虧虛才是本病進(jìn)展與死亡的關(guān)鍵，進(jìn)一步基于"微者逆之，甚至從之"中 醫(yī)理論提出運(yùn)用本發(fā)明藥物組合治療肝衰竭方案，療效滿意。而目前，尚未有將烏頭、人參 兩藥配伍治療肝衰竭的相關(guān)報道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了一種治療肝衰竭的藥物組合物。本發(fā)明的另一技術(shù)方 案是提供了該藥物組合物的制備方法和用途。
[0006] 本發(fā)明提供了一種治療肝衰竭的藥物組合物，它是由如下重量配比的原料藥制備 而成的制劑：
[0007] 烏頭4-30份，人參2-15份。
[0008] 進(jìn)一步優(yōu)選地，它是由下述重量配比的原料藥制備而成的制劑：
[0009] 烏頭30份，人參15份。
[0010] 其中，烏頭包含烏頭的母根和子根。
[0011] 所述的藥物是由烏頭、人參的原生藥粉或水或有機(jī)溶劑提取物為活性成分，加入 藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。
[0012] 所述的制劑是口服制劑。
[0013] 進(jìn)一步優(yōu)選地，所述口服制劑為顆粒劑、散劑、丸劑、膠囊劑、片劑或口服液。
[0014] 更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述口服制劑為滴丸劑、軟膠囊劑。
[0015] 本發(fā)明還提供了所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于：它包括如下操作步 驟：
[0016] (1)按重量配比取原料藥；
[0017] (2)直接打粉，或取烏頭先煎，再加入人參煎煮，收集水煎液，濃縮，加上藥學(xué)上可 用的輔料或輔助性成分制備成常規(guī)制劑。
[0018] 本發(fā)明還提供了所述的藥物組合物在制備治療肝衰竭的藥物中的用途。它可以快 速提高肝功能、縮短凝血酶原時間、減輕肝臟病理損害，同時顯著延長肝衰竭的生存期，為 肝細(xì)胞的再生提供更長的時間窗。
[0019] 其中，所述藥物是治療肝衰竭之虛陽外越證的藥物。
[0020] 本發(fā)明藥物的功效：回陽固脫，通壅散滯；主治：各種原因所致的肝衰竭，尤以病 毒性肝炎所致者最佳。該制劑組方嚴(yán)謹(jǐn)，療效確切。
[0021] 目前己公認(rèn)"整體觀念"、"病證結(jié)合"、"辨證論治" "復(fù)方使用"、"復(fù)方配伍用藥如 用兵"是中醫(yī)最科學(xué)最有效的幾大優(yōu)勢，其中"復(fù)方配伍用藥如用兵"、"病證結(jié)合"是非?？?學(xué)的中醫(yī)藥原創(chuàng)理論。中醫(yī)組方中各藥如行兵布陣那樣環(huán)環(huán)相扣的嚴(yán)密配伍，以及以病為 中心隨證加減的整體觀念是其優(yōu)于西藥配方的有效于段。中醫(yī)方劑理論認(rèn)為，每一方劑，不 僅需要根據(jù)病因病機(jī)選擇合適的藥物妥善配伍，同時也應(yīng)符合組方的基本結(jié)構(gòu)，即"君、臣、 佐、使"的組方配伍，所滑"君、臣、佐、使"的組方配伍，就是其建立在對疾病病機(jī)的全方位判 斷基礎(chǔ)上的科學(xué)配比。中醫(yī)用方通過多環(huán)節(jié)、多靶點整合調(diào)節(jié)的生物學(xué)機(jī)制，對肝衰竭這樣 病因病機(jī)極度復(fù)雜、西醫(yī)治療乏力的疾患或癥狀進(jìn)行凋控，可以取得比西藥更好、更徹底的 治療效果，而這種療效是建立在上述中醫(yī)傳統(tǒng)原創(chuàng)理論的確切指導(dǎo)之上的，本發(fā)明組方正 遵循了這一原則。
[0022] "微者逆之，甚者從之"是中醫(yī)臨床不可或缺的重要治病原則，源于《素問?至真要 大論》："…寒者熱之，熱者寒之，微者逆之，甚者從之…"。意即：對于臨床病勢簡單、辨證清 楚的病證，當(dāng)逆其病癥，采用與病癥相對的藥物治療，亦稱逆治法或正治法；而對于深重復(fù) 雜的疑難重癥，常難以尋求病因、探取病機(jī)，常規(guī)辨證易于貽誤病情，臨證當(dāng)順從疾病的假 象而治之，亦稱反治法或從治法。正如王冰注曰："夫病之微小者，猶人火也，遇草而芮，得 木而燔，可以濕伏，可以水滅，故逆其性氣以折之攻之。病之大者，猶龍火也，得濕而焰，遇水 而燔，不識其性，以水濕折之，適足以光焰詣天，物窮方止矣。識其性者，反常之理，以火逐 之，則燔灼自削，焰光撲滅"。而張介賓注曰："病之微者，如陽病則熱，陰病則寒，真形易 見.其病則微，故可逆之……病之甚者，如熱極反寒，寒極反熱，假證難辨，其病則甚， 故當(dāng)從之"。眾所周知，肝衰竭病勢復(fù)雜，變化迅猛，一時難以確立病機(jī)者比比皆是。一項 全國多中心、大樣本的研究顯示常規(guī)辨證論治肝衰竭的總體療效欠佳，故當(dāng)從《素問?至真 要大論》:"諸寒之而熱者取之陰，熱之而寒者取之陽"。在我國，由于本病發(fā)病之特殊性，伏 邪內(nèi)蘊(yùn)，陽氣常不足，由此引發(fā)肝經(jīng)壅滯等一系列標(biāo)實之證，若遵"微者逆之"，則施之乏效。 先賢早有訓(xùn)言"大實有贏狀"、"至虛有盛候"，故當(dāng)嚴(yán)守"甚者從之"之訓(xùn)，去偽從真，法《素 問?至真要大論》"…必伏其所主，而先其所因，其始則同，其終則異，可使破積，可使?jié)?堅，可使氣和，可使必已…"。《道德經(jīng)》云："萬物負(fù)陰而抱陽，沖氣以為和。"《素問?生 氣通天論》曰："生之本，本于陰陽…陰者，藏精而起亟也，陽者，衛(wèi)外而為固也。"意即：陰陽 乃世界之本源、生命之根本。《素問·生氣通天論》亦曰："陽氣者，若天與日，失其所則折壽 而不彰，故天運(yùn)當(dāng)以日光明，是故陽因而上，衛(wèi)外者也。"表明陰陽并非等量的一分為二，"陽 主陰從"是陰陽平衡理論的前提，在陰陽動態(tài)平衡理念中，陽氣變化具有主導(dǎo)性和決定性的 作用。故治療本病當(dāng)首重溫陽行陽，同氣相求，一可化為內(nèi)力（陽氣），通壅散滯，正如《內(nèi) 經(jīng)》曰："血?dú)庹撸矞囟鴲汉?，寒則泣不能流，溫則消而去之";二可回陽固脫，以防或力破陰 陽離決之候，終至"謹(jǐn)守病機(jī)，各司其屬，…，令其調(diào)達(dá)，而致和平"。
[0023] 本發(fā)明藥物組合物中以大劑烏頭為君，一可培護(hù)腎陽，以顧先天，二能益肝之陽， 補(bǔ)肝之氣，走而不守，通壅消滯。正如《神農(nóng)本草經(jīng)》言"烏頭味辛溫...破積聚寒熱..."， 烏頭性走不守，無所不至，為諸經(jīng)引用之藥，最能補(bǔ)肝陽，行肝氣，通壅滯，恰合肝衰竭之 生理病理。配人參為臣藥以補(bǔ)脾陽，顧護(hù)后天。君臣相配，兼顧先后之天，一可強(qiáng)盛一身之 陽，二可活躍一身之氣，共促病理偏性之速潰，激發(fā)生理功能之向復(fù)，亦可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫之 功能?？v觀全方，力大勢宏，以奏溫補(bǔ)之功，共發(fā)消壅之力，及時調(diào)節(jié)生理平衡，促進(jìn)病理恢 復(fù)，速使疾病向愈。
[0024] 本發(fā)明藥物組合物能有效的消除或極大緩解肝衰竭的并發(fā)癥，具有良好的抗肝衰 竭的作用，為臨床用藥提供了一種新的選擇。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0025] 圖1:生存曲線圖.
[0026] 圖2:肝組織鏡下觀（HE染色）
[0027] 圖3: PCAN免疫組化染色圖

【具體實施方式】
[0028] 實施例1本發(fā)明藥物組合物的制備
[0029] 取烏頭30g，人參15g。各藥味按量稱取，摻以足量的凈水，武火先煎烏頭，沸后改 文火再煎煮60min以上。繼下人參，沸后再煎煮30min。收集水煎液后，再加水煎煮2次，合 并各次水煎液，即得湯劑。
[0030] 本方中，烏頭的用量應(yīng)較大。
[0031] 實施例2本發(fā)明藥物組合物的制備
[0032] 取實施例1制備的湯劑，濃縮后，加適當(dāng)?shù)矸邸⒑靹蚝笾屏！?br> [0033] 實施例3本發(fā)明藥物組合物的制備
[0034] 取烏頭50g，人參25g。各藥味按量稱取，摻以足量的凈水，武火先煎烏頭，沸后改 文火再煎煮60min以上。繼下人參，沸后再煎煮30min。收集水煎液后，再加水煎煮2次，合 并各次水煎液，干燥，加入適量糊精、可溶性淀粉制粒后，壓片，即得片劑。
[0035] 實施例4本發(fā)明藥物組合物的制備
[0036] 取烏頭40g，人參20g。各藥味按量稱取，摻以足量的凈水，武火先煎烏頭，沸后改 文火再煎煮60min以上。繼下人參，沸后再煎煮30min。收集水煎液后，再加水煎煮2次，合 并各次水煎液，干燥后，加適量微晶纖維素，混勻后，裝膠囊，即得膠囊劑。
[0037] 以下通過藥效學(xué)實驗證明本發(fā)明的有益效果。
[0038] 試驗例1本發(fā)明藥物對D - GalN誘導(dǎo)肝衰竭大鼠肝損傷及肝再生的影響及機(jī)制 研究。
[0039] 1.實驗材料
[0040] 1. 1造模試劑：D-氨基半乳糖胺（D-GalN)，購自上海弘邦醫(yī)藥科技有限公司，產(chǎn) 品批號：HB-S0009-20111202。造模前用無菌生理鹽水配制成10%的濃度，配制過程中以 lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)液體pH值為7.0,配制完成后立即使用。
[0041] 1. 2實驗動物：清潔級雌性健康SD大鼠125只，體重范圍180±20g，由成都中醫(yī)藥 大學(xué)動物實驗中心提供，動物合格證號：SCXK(川）2008-011，檢疫后備用。實驗前將動物 置于成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院實驗中心大鼠飼養(yǎng)房飼養(yǎng)，環(huán)境：室溫24?28°C，相對濕度 40?70%，壓差25Pa，噪音彡60dB，定時通風(fēng)換氣，自然明暗周期，自由進(jìn)食和飲用自來水。
[0042] 1. 3實驗藥物
[0043] 本發(fā)明藥物試劑：實施例1方法所述的原料用量及方法制備，由成都中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院中藥制劑研究室提供；臨床擬定劑量為每日服用原生藥材45g，按成人體重一般 60kg計算，人用劑量為原生藥材0. 75g/kg體重。實驗室配成分別為4. 69g/kg/d (相當(dāng)于臨 床擬定劑量的6. 25倍）。給藥體積10ml/kg體重。
[0044] 陽性對照藥物：復(fù)方甘草酸苷片（美能），購自日本米諾發(fā)源制藥株式會社，產(chǎn)品 批號：10111。灌胃前用無菌生理鹽水配成濃度為1.56mg/ml。
[0045] 2.實驗方法
[0046] 2. 1復(fù)制肝衰竭動物模型：以1. 4g/kg (預(yù)實驗確定）劑量的D-GalN單次腹腔注 射構(gòu)建肝衰竭模型。正常空白對照組同等條件下用無菌蒸餾水腹腔注射。
[0047] 2. 2實驗分組與給藥
[0048] 將動物分別按體重隨機(jī)分為4組，分別為：
[0049] 空白對照組：分為亞組1(10只大鼠）和亞組2(10只大鼠）；均用等劑量無菌蒸餾 水腹腔注射并灌服生理鹽水；
[0050] 模型組：分為亞組1(20只大鼠）和亞組2(15只大鼠）；均用1.4g/kg劑量的 D-GalN腹腔注射并灌服生理鹽水；
[0051] 美能組：分為亞組1(20只大鼠）和亞組2(15只大鼠）；均用1.4g/kg劑量的 D-GalN腹腔注射并給予成人等效臨床劑量美能灌胃給藥15. 6mg/kg/d。
[0052] 本發(fā)明藥物組（實驗組）：分為亞組1(20只大鼠）和亞組2(15只大鼠）；均用 1. 4g/kg劑量的D-GalN腹腔注射并給予成人等效臨床劑量本發(fā)明藥物21. 9g/kg/d。
[0053] 給藥方法為每日灌胃1次，造模前3天開始灌胃，連續(xù)5天。
[0054] 2. 3觀察指標(biāo)和方法
[0055] (1)本發(fā)明藥物的藥效研究
[0056] 一般情況和生存期
[0057] 亞組1大鼠：從造模時間點起，連續(xù)觀察96小時，觀察大鼠的一般情況，記錄死亡 時間和大鼠死亡數(shù)，計算平均生存時間以及生存率。
[0058] 肝功能、凝血功能、肝組織病理
[0059] 亞組2大鼠：腹腔注射后36h經(jīng)股動脈取血4ml置于干燥管中，另再取2ml置于 枸櫞酸納抗凝管中，送成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科以3000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速離心10分 鐘分離出血清，以檢測肝功能（釆用全自動生化分析法）和凝血功能（釆用全自動血凝 分析法）。取血完成后斷頸處死大鼠，平攤于超凈工作臺上，去除其胸、腹部體毛并用碘 伏對去毛區(qū)進(jìn)行消毒，鋪無菌洞巾，沿腹正中線打開腹腔，分離出肝組織，取出大小約 1. 0x1. 0x0. 2cm的肝左葉相同部位，無菌生理鹽水洗凈血液后存放于10%甲醛溶液固定， 送成都里來生物醫(yī)學(xué)實驗中心作肝組織常規(guī)HE染色。
[0060] (2)本發(fā)明藥物的免疫機(jī)制研究
[0061] HMGB1、TLR4、NF- κ B、Caspase-3mRNA 表達(dá)水平及 PCNA 表達(dá)水平
[0062] 亞組2大鼠斷頸處死，取肝組織送常規(guī)HE染色的同時，另取出大小約 1. 0x1. 0x0. 2cm的肝左葉相同部位并置于冰塊上，以PBS緩沖液清洗干凈后存放于凍存管 中，快速轉(zhuǎn)移至液氮中速凍后立即存放于_70°C冰箱中保存，送上海艾迪康醫(yī)學(xué)檢驗中心， 采用半定量RT-PCR法檢測HMGB1、TLR4、NF- κ B、Caspase-3mRNA表達(dá)水平，采用免疫組織 化學(xué)染色法檢測PCNA表達(dá)水平。
[0063] 3.統(tǒng)計學(xué)方法
[0064] 本實驗統(tǒng)計處理均采用SPSS17. 0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計量資料以j±S表示，組 間差異比較采用單因素方差分析，方差齊性用LSD法，方差不齊采用Dunnett's法；應(yīng)用 Kaplan-Meier法估計各組大鼠的生存時間，并釆用log-rank檢驗進(jìn)行組間生存分布比較。 所有P值均為雙向，且P < 〇. 05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
[0065] 4.實驗結(jié)果
[0066] (1)主要藥效研究結(jié)果
[0067] 一般情況：造模后，模型組大鼠逐漸出現(xiàn)食欲下降，行為遲鈍及對刺激的反應(yīng)靈敏 度下降等行為學(xué)改變，同時誘發(fā)尿失禁，精神不振，嗜睡，煩躁，抽搐，出血等嚴(yán)重癥狀。但與 模型組相比，經(jīng)過本發(fā)明藥物或美能治療后，大鼠的飲食量及行為靈敏度有所提高，上述癥 狀均明顯減輕，且本發(fā)明藥物的作用更加明顯。更重要的是，在治療過程中沒有發(fā)現(xiàn)與藥物 相關(guān)的不良反應(yīng)。
[0068] 生存期：如圖1所示，空白組在截止點沒有大鼠死亡，因此我們從生存曲線圖上 排除了空白組。經(jīng)過Kaplan-Meier分析，估計模型組的平均生存時間為64.6小時，美 能組的平均生存時間為71. 9小時，本發(fā)明藥物組的平均生存時間為83. 9小時，同時經(jīng) 過log-rank檢驗提示，本發(fā)明藥物組的累積生存率高于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x2 =4.434, P〈0. 05);而美能組與模型組和本發(fā)明藥物組相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（x2 = 0. 635, P>0. 05 ；x2 = 1. 563, P>0. 05) 〇
[0069] 肝功能和凝血功能
[0070] 如表1所示，單次腹腔注射D-GalNl. 4g/kg后36h，模型組大鼠血清ALT、AST、TBIL 及PT水平顯著升高，同時血清ALB、CHE水平顯著下降，與空白組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意 義（P〈0.05);而經(jīng)過本發(fā)明藥物治療后，血清ALT、AST、TBIL及PT水平顯著下降，同時血清 ALB、CHE水平顯著上升，與模型組和美能組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P〈0. 05。
[0071] 表 1:血清 ALT, AST, TBIL, ALB, CHE 和 PT 水平·
[0072]

【權(quán)利要求】
1. 一種治療肝衰竭的藥物組合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料藥制備而 成的制劑： 烏頭4-30份，人參2-15份。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料藥制 備而成的制劑： 烏頭30份，人參15份。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于：它是由烏頭、人參的原生藥粉 或水或有機(jī)溶劑提取物為活性成分，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制 劑。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于：所述的制劑是口服制劑。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于：所述口服制劑為顆粒劑、散劑、丸 齊U、膠囊劑、片劑或口服液。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于：所述口服制劑為滴丸劑、軟膠囊 劑。
7. 權(quán)利要求1?3任意一項所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于：它包括如下 操作步驟： (1) 按重量配比取原料藥； (2) 直接打粉，或取烏頭先煎，再加入人參煎煮，收集水煎液，濃縮，加上藥學(xué)上可用的 輔料或輔助性成分制備成常規(guī)制劑。
8. 權(quán)利要求1?6任意一項所述的藥物組合物在制備治療肝衰竭的藥物中的用途。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于：所述藥物是治療肝衰竭之虛陽外越證的 藥物。
【文檔編號】A61K36/258GK104083462SQ201410363428
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年7月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月28日
【發(fā)明者】扈曉宇, 張揚(yáng), 駱建興, 扈曉剛 申請人:成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院