用于處理傷口、皮膚疾病和脫發(fā)的濱豇豆、椰子樹或欖仁樹提取物中的一種或多種的制作方法
【專利摘要】描述了濱豇豆、椰子樹或欖仁樹中的一種或多種的生物活性提取物和包括一種或多種提取物的組合物。本發(fā)明還提供了提取物和組合物的治療用途和美容用途，尤其是用于促進(jìn)傷口愈合和用于治療皮膚疾病。
【專利說明】用于處理傷口、皮膚疾病和脫發(fā)的濱豇豆、椰子樹或欖仁樹 提取物中的一種或多種
[0001] 本申請是申請日為2010年5月4日、申請?zhí)枮?201080027510. 8"、發(fā)明名稱為"用 于處理傷口、皮膚疾病和脫發(fā)的濱豇豆、椰子樹或欖仁樹提取物中的一種或多種"的中國專 利申請的分案申請，原申請是國際申請PCT/AU2010/000519的中國國家階段申請。 發(fā)明領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明大體涉及植物提取物和包括所述植物提取物的組合物用于促進(jìn)傷口愈合 和用于治療皮膚疾病的用途。
[0003] 發(fā)明背景
[0004] 皮膚在保護(hù)方面具有重要的作用且是身體抵抗疾病的第一道防線，且表皮提供了 防御微生物入侵的屏障。因此，治療創(chuàng)傷、燒傷、擦傷和皮膚的其他損傷的主要目標(biāo)是為防 止感染而快速閉合和愈合傷口。
[0005] 傷口愈合是一個復(fù)雜的過程，通常認(rèn)為傷口愈合過程包括三個重疊階段：發(fā)炎、增 殖和重塑。第一階段包括凝結(jié)以獲得止血和募集嗜中性粒細(xì)胞以破壞細(xì)菌和壞死組織，然 后募集巨噬細(xì)胞。在第二階段期間，發(fā)生血管生成，其中內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入傷口部位，同時成纖 維細(xì)胞進(jìn)入傷口部位并幫助產(chǎn)生肉芽組織。肉芽組織的形成允許發(fā)生表皮再植。在最后的 重塑階段期間，產(chǎn)生的和降解的膠原水平是相等的且愈合的傷口是緩慢變化的以獲得最大 強(qiáng)度。當(dāng)這些過程中的任何一個未能合適地或以及時的方式起作用時，傷口愈合就受到延 遲或損害。這可能引起慢性傷口，慢性傷口可能既是對個體主要的復(fù)發(fā)，又是高成本的臨床 問題。因此，加速身體的皮膚和表皮組織再生的自然過程的組合物是有優(yōu)勢的。
[0006] 本發(fā)明人出人意料地發(fā)現(xiàn)本文公開的植物提取物和包括該提取物的組合物通過 引起上皮的及早增殖來促進(jìn)傷口愈合和皮膚修復(fù)。而且，這些組合物增大了愈合的傷口部 位的厚度和機(jī)械強(qiáng)度。此外，還發(fā)現(xiàn)這些組合物還可以提供其他治療益處。 發(fā)明概要
[0007] 根據(jù)本發(fā)明的第一個方面，提供了濱豇豆、椰子樹或欖仁樹中的一種或多種的生 物活性提取物。
[0008] 該提取物還可以包括黃槿。
[0009] 在一個實(shí)施方案中，該提取物是濱豇豆的提取物。該提取物可以從濱豇豆和欖仁 樹的組合、濱豇豆和椰子樹的組合或?yàn)I豇豆、椰子樹和欖仁樹的組合獲得。該提取物可以從 濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和黃槿的組合獲得。
[0010] 該提取物可以是葉子、藤、豆或堅(jiān)果提取物中的一種或多種。若從濱豇豆、欖仁樹 和黃槿獲得的，則提取物通常是葉子、藤和/或豆提取物。若從濱豇豆獲得的，提取物通常 是殼和/或堅(jiān)果提取物。
[0011] 提取物可以使用包括基于植物的油、烴和/或醇來制備，和/或包括基于植物的 油、烴和/或醇。基于植物的油可以從，如種子或果實(shí)獲得。在特定的實(shí)施方案中，提取物 使用椰子油來制備，和/或包括椰子油。椰子油可以是初榨的椰子油、精煉的椰子油、氫化 的椰子油或分餾的椰子油。
[0012] 本發(fā)明的第二個方面提供了包括濱豇豆、椰子樹或欖仁樹中的一種或多種的至少 一種生物活性提取物，任選地連同一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或佐劑的組合 物。該組合物還可以是從黃槿獲得的提取物。
[0013] 通常組合物被局部施用至受治療者的皮膚或表皮附屬器。表皮附屬器包括毛發(fā)、 毛囊、指甲和角質(zhì)層。在一個實(shí)施方案中，組合物被治療性或美容性地用于促進(jìn)傷口愈合或 用于治療皮膚疾病。傷口是手術(shù)傷口或非手術(shù)傷口。非手術(shù)傷口的示例是燒傷、擦傷、割傷 或擦破傷。皮膚疾病包括但不限于年齡相關(guān)的皮膚萎縮或類固醇相關(guān)的皮膚萎縮。年齡相 關(guān)的皮膚萎縮與雌激素缺乏有關(guān)。
[0014] 在另外的實(shí)施方案中，組合物用于促進(jìn)毛發(fā)的再生。在又一個實(shí)施方案中，組合物 用于增大皮膚和/或表皮附屬器的厚度和/或機(jī)械強(qiáng)度。
[0015] 本發(fā)明的第三個方面提供了一種用于處理傷口和/或用于促進(jìn)傷口愈合的方法， 該方法包括向受治療者的皮膚施用治療有效量的根據(jù)第一個方面的提取物或根據(jù)第二個 方面的組合物。
[0016] 本發(fā)明的第四個方面提供了一種用于治療皮膚疾病的方法，該方法包括向受治療 者的皮膚施用治療有效量的根據(jù)第一個方面的提取物或根據(jù)第二個方面的組合物。
[0017] 本發(fā)明的第五個方面提供了一種用于使毛發(fā)再生的方法，該方法包括向受治療 者的皮膚施用治療有效量的根據(jù)第一個方面的提取物或根據(jù)第二個方面的組合物。
[0018] 本發(fā)明的第六個方面提供了一種用于促進(jìn)毛發(fā)生長的方法，該方法包括向受治療 者的皮膚和/或毛發(fā)施用治療有效量的根據(jù)第一個方面的提取物或根據(jù)第二個方面的組 合物。
[0019] 本發(fā)明的第七個方面提供了一種用于增大皮膚和/或表皮附屬器的厚度和/或機(jī) 械強(qiáng)度的方法，該方法包括向受治療者的皮膚施用治療有效量的根據(jù)第一個方面的提取物 或根據(jù)第二個方面的組合物。
[0020] 本發(fā)明的第八個方面提供了根據(jù)本發(fā)明第一個方面的提取物用于制造處理傷口 和/或促進(jìn)傷口愈合的藥品的用途。
[0021] 本發(fā)明的第九個方面提供了根據(jù)本發(fā)明第一個方面的提取物用于制造治療皮膚 疾病的藥品的用途。
[0022] 本發(fā)明的第十個方面提供了根據(jù)本發(fā)明第一個方面的提取物用于制造使毛發(fā)再 生的藥品的用途。
[0023] 本發(fā)明的第十一個方面提供了根據(jù)本發(fā)明第一個方面的提取物用于制造促進(jìn)毛 發(fā)生長的藥品的用途。
[0024] 本發(fā)明的第十二個方面提供了根據(jù)本發(fā)明第一個方面的提取物用于制造增大皮 膚和/或皮膚附屬器的厚度和/或機(jī)械強(qiáng)度的藥品的用途。
[0025] 附圖簡述
[0026] 現(xiàn)在將僅通過非限制性的實(shí)施例參考附圖來描述本發(fā)明，其中附圖中：
[0027] 圖1顯示了 12周齡健康雌性大鼠的受治療的（A、C、E和G)和未受治療的（B、D、 F和H)手術(shù)產(chǎn)生的傷口部位在手術(shù)后第3、5、7和10天時的組織學(xué)變化。受治療的傷口經(jīng) 受每天施用椰子油中的濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和黃槿的組合提取物。用蘇木精和曙紅對皮 膚樣品進(jìn)行染色并以x400的放大倍數(shù)顯示。
[0028] 圖2顯示了經(jīng)10天期間，受治療的動物（測試）和未受治療的動物（對照）的傷 口部位的機(jī)械傷口強(qiáng)度（A)和平均機(jī)械傷口強(qiáng)度（B)的增加。受治療的傷口經(jīng)受每天施 用椰子油中的濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和黃槿的組合提取物。圖2A顯示了線性關(guān)系，而圖2B 被建模成非線性愈合曲線。
[0029] 圖3顯示了 18個月大的雌激素缺乏（6周大時被切除卵巢）的大鼠的受治療的皮 膚（B、D和F)和未受治療的皮膚（A、C和E)的組織學(xué)變化。受治療的皮膚經(jīng)受每天施用椰 子油中的濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和黃槿的組合提取物，共持續(xù)7天。用蘇木精和曙紅對皮 膚樣品進(jìn)行染色并以x400的放大倍數(shù)顯示。
[0030] 圖4顯示了受治療的（每天施用椰子油中的濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和黃槿的組合 提取物）和對照的（未受治療的）雌激素缺乏的皮膚（在治療7天后）（A)，和鄰近治療區(qū) 域的雌激素缺乏的皮膚（在治療21天后）（B)的上皮厚度。
[0031] 圖5顯示了雌激素缺乏的皮膚在包括每天施用椰子油中的濱豇豆、椰子樹、欖仁 樹和黃槿的組合提取物的治療7天后的上皮厚度的變化百分?jǐn)?shù)。柱1(提取前），提取物在椰 子油中；柱2 (乙醇提取物），從提取后的提取物去除椰子油；柱3 (提取后），乙醇提?。ㄖ?2)后的殘余椰子油部分。
[0032] 圖6顯示了 10-14周齡大鼠在每天應(yīng)用下述方式7天后的皮膚的組織學(xué)曲線：A) 無治療；B)椰子油；C)椰子油中的濱豇豆，D)乙醇中的濱豇豆；E)用乙醇和異戊烷提取后 的椰子油中的濱豇豆；F)椰子油中的欖仁樹；G)乙醇中的欖仁樹；H)乙醇提取后的烴中的 欖仁樹，然后；I)用乙醇和烴提取后的椰子油中的欖仁樹；以及J)用乙醇和烴提取后的椰 子油中的欖仁樹。用蘇木精和曙紅對皮膚樣品進(jìn)行染色并以x400的放大倍數(shù)顯示。
[0033] 圖7顯示了 10-14周齡大鼠在每天應(yīng)用下述方式7天后的皮膚的上皮厚度的變化 百分?jǐn)?shù)：A)椰子油中的濱豇豆提取物（植物P);椰子油中的椰子樹提取物（植物N);椰子 油中的欖仁樹提取物（植物K);以及椰子油中的黃槿（植物A)以及B)兩兩組合上述提取 物。
[0034] 圖8顯示了用按照實(shí)施例10描述的方式制備的椰子油（100%)中的濱豇豆、椰子 樹和欖仁樹的提取物以下述濃度：A)0% ;B)1% ;C)5% ;D)10% ;E)50% ;以及F)100%治療 的10-14周齡大鼠的皮膚的組織學(xué)變化。用蘇木精和曙紅對皮膚樣品進(jìn)行染色并以x400 的放大倍數(shù)顯示。
[0035] 圖9顯示了按照實(shí)施例10描述的方式制備的椰子油（油中的NPK)中的濱豇豆、 椰子樹和欖仁樹的組合提取物以0%、1%、5%、10%、50%、100%的濃度每天施用來治療的 10-14周齡大鼠的皮膚的上皮厚度（A)和上皮厚度的變化百分?jǐn)?shù)（B)。
[0036] 圖10顯不了用A)氯己定中30% ;B) hydroderm保濕霜中5 % ;C)氯霉素溶液中 25% ;D)氯霉素軟膏中50% ;以及E)氯霉素軟膏中0%的椰子油中的濱豇豆、椰子樹和欖 仁樹的提取物治療的皮膚的組織學(xué)。
[0037] 發(fā)明詳述
[0038] 本文中使用的冠詞"一個（a) "和"一種（an) "指的是一個或超過一個（即，至少 一個）的冠詞的語法對象。舉個例子，"要素"意指一種要素或超過一種要素。
[0039] 除非上下文另外要求，否則在整個說明書和下面的權(quán)利要求中，詞匯"包括 (comprise) "以及諸如"包括（comprises) "和"包括（comprising) "的變化形式將被理解 成意味著包括所述的整數(shù)或步驟或整數(shù)或步驟的組，但不排除任何其他整數(shù)或步驟，或整 數(shù)或步驟的組。
[0040] 正如本文中使用的，術(shù)語"提取物"指的是從一種或多種植物獲得的活性制劑。在 說明書的上下文中，"活性"意指提取物能夠產(chǎn)生期望的如本文公開的治療益處或美容益 處。提取物通過正如本領(lǐng)域的技術(shù)人員將會理解的"提取"工藝獲得，就一般性的術(shù)語而 言，提取包括用溶劑、液體或超臨界流體處理植物材料以溶解活性制劑并將其與殘余的不 期望的植物材料分離。提取物可以呈液體形式（如，呈煎劑、溶液、浸劑或酊劑）或固體形 式（如，呈粉末或顆粒）。正如本文中使用的，術(shù)語"組合提取物"指的是由超過一種植物物 質(zhì)制備的提取物。在組合提取物中，每一種植物物質(zhì)中的植物材料可以一起或分別經(jīng)受提 取工藝。即，一些或全部物質(zhì)中的材料可以在加入溶劑、液體或超臨界流體之前被組合，和 /或一些或全部物質(zhì)中的材料可以用溶劑、液體或超臨界流體獨(dú)立地進(jìn)行處理，且這樣獲得 的制劑隨后被組合。同樣，相同或不同的溶劑（或液體或超臨界流體）可以用于從不同的 物質(zhì)中提取活性制劑。術(shù)語"提取物"和"組合提取物"可以在整個說明書中互換地使用。
[0041] 正如本文中使用的，在傷口愈合的背景下，術(shù)語"促進(jìn)（promoting) "、"促進(jìn) (promotion) "及其變化形式指的是本發(fā)明的提取物和組合物增加或提高傷口愈合所涉及 的自然生理過程的作用速率或程度的能力和本發(fā)明的提取物或組合物增加或提高毛發(fā)生 長速率的能力。
[0042] 正如本文中使用的，術(shù)語"治療（treating) " "治療（treatment) "、"預(yù)防 (preventing) "和"預(yù)防（prevention) "指的是醫(yī)治病癥或癥狀，預(yù)防病癥或疾病的產(chǎn)生， 或另外無論以什么方式預(yù)防、阻止、延遲或逆轉(zhuǎn)病癥或疾病或其他不期望的癥狀的進(jìn)展。因 而，術(shù)語"治療"和"預(yù)防"以及類似術(shù)語以它們最寬泛的內(nèi)容被考慮。例如，治療并不一定 意味著患者受到治療，直至完全康復(fù)。
[0043] 正如本文中使用的，術(shù)語"有效量"和"有效劑量"在它們的意思內(nèi)包括試劑或化合 物的提供期望效果的無毒性但足夠的量或劑量。所要求的確切的量或劑量將隨受治療者發(fā) 生變化，這取決于諸多因素，諸如待治療的物種、受治療者的年齡和總體狀況、受治療的病 癥的嚴(yán)重度、待施用的特定的試劑和施用模式等等。因而，不可能規(guī)定確切的"有效量"或 "有效劑量，，。然而，對任何給定的情形來說，合適的"有效量"或"有效劑量"可以由本領(lǐng)域 的技術(shù)人員僅使用常規(guī)試驗(yàn)來確定。
[0044] 正如本文中使用的，術(shù)語"受治療者"包括人類、靈長類動物、家畜動物（如綿羊、 豬、牛、馬、驢）、實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)動物（如，小鼠、兔子、大鼠、豚鼠）、伴侶動物（如狗、貓）和被 馴養(yǎng)的野生動物（如狐貍、大袋鼠和鹿）。通常，受治療者是人類或?qū)嶒?yàn)室試驗(yàn)動物。甚至 更通常地，受治療者是人類。
[0045] 本發(fā)明是基于發(fā)明人的出人意料的發(fā)現(xiàn)預(yù)測的，正如本文中舉例說明的，當(dāng)施用 至哺乳動物的皮膚時，使用來自太平洋島嶼的各種植物的提取物具有生物活性，促進(jìn)傷口 愈合和皮膚修復(fù)，增加上皮厚度和增大皮膚的機(jī)械強(qiáng)度。不希望受到理論的束縛，提出這些 生物活性物來自提取物，直接或間接地引起上皮的及早增殖。
[0046]因此，本發(fā)明的一個方面提供濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和/或黃槿的生物活性提取 物。
[0047] 發(fā)明人出人意料地發(fā)現(xiàn)單獨(dú)的或各種組合的濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和/或黃槿 的提取物促進(jìn)身體的使皮膚和表皮組織再生的自然過程。
[0048] 因此，濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和/或黃槿的提取物以及含有該提取物的組合物在 促進(jìn)傷口愈合或在治療受治療者的皮膚疾病方面是有治療和/或美容用處的。傷口可以是 手術(shù)傷口或非手術(shù)傷口。非手術(shù)傷口的不例包括割傷、燒傷、擦傷和擦破傷。本發(fā)明的提取 物可以用于手術(shù)后促進(jìn)手術(shù)引起的傷口的愈合?？梢愿鶕?jù)本發(fā)明的實(shí)施方案受到治療的皮 膚疾病包括但不限于與年齡有關(guān)的皮膚萎縮或與類固醇有關(guān)的皮膚萎縮。與年齡有關(guān)的皮 膚萎縮可以與雌激素缺乏有關(guān)。
[0049] 本領(lǐng)域的技術(shù)人員將會理解，本發(fā)明的提取物和組合物還用于期望促進(jìn)皮膚或表 皮組織或表皮附屬器的產(chǎn)生或再生的任何情形中?；诒景l(fā)明的目的，表皮附屬器包括但 不限于，毛發(fā)、毛囊、指甲和角質(zhì)層。舉個例子，本發(fā)明的提取物和組合物可以用于促進(jìn)毛 囊、毛發(fā)和指甲的再生。本發(fā)明的提取物和組合物還可以用于增加皮膚和/或表皮附屬器 的厚度和/或機(jī)械強(qiáng)度。
[0050] 本發(fā)明的提取物可以是通過單次、組合和/或連續(xù)提取諸如葉子、根、莖皮、果實(shí)、 芽、堅(jiān)果、種子、花和/或木材的任何可利用的植物材料獲得的基于水、油和/或有機(jī)溶劑的 提取物。適合的萃取方法以及適用于萃取的溶劑和液體為本領(lǐng)域技術(shù)人員所已知。用于提 取的含水溶劑（如水、酸、堿）；油（如，椰子）；和有機(jī)溶劑，可以是極性的（諸如醇，如乙 醇）、非極性的（如己烷）和/或鹵代的（二氯甲烷）可以順次用于提取或呈組合的混合物 進(jìn)行提取。重要的是，正如本文中舉例說明的，當(dāng)提取到椰子油、極性溶劑（如乙醇）或非 極性溶劑（如異戊烷）中時，提取物的活性可以被維持。使用，如超臨界氮?dú)饣蚨趸嫉?超臨界流體提取也可以用于根據(jù)本發(fā)明獲得提取物。
[0051] 此外，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將會理解，本發(fā)明的提取物可以經(jīng)受一個或多個提取后 步驟，如增強(qiáng)或維持提取物的穩(wěn)定性，改變或改動提取物的物理形式或有助于將提取物配 制成組合物以便施用至受治療者。舉個例子，僅呈液體形式的提取物可以被凍干以產(chǎn)生固 體形式的提取物。
[0052] 本發(fā)明的提取物可以從任何合適的植物材料獲得。合適的植物材料包括葉子、根、 莖皮、果實(shí)、芽、堅(jiān)果、種子、花和/或木材。植物材料可以是，如新鮮的、干燥的或冷凍干燥 的。對于給定的植物物質(zhì)，超過一種植物材料可以用于產(chǎn)生提取物。如果從濱豇豆、欖仁樹 和黃槿獲得，則提取物通常是葉子、藤和/或豆提取物。如果從濱豇豆獲得，提取物通常是 新鮮的殼和/或堅(jiān)果提取物。
[0053] 本發(fā)明的提取物可以根據(jù)本發(fā)明以藥物組合物的形式被施用，該組合物可以包括 一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。提取物還可以與其他治療劑或美容劑 組合，其他治療劑或美容劑如但不限于，抗茵劑、抗微生物劑、消毒劑、麻醉劑、保濕霜或化 妝品基質(zhì)。這樣的組合物可以以任何常規(guī)的或合適的途徑被施用，諸如胃腸外、口服、鼻或 局部途徑。通常基于獲得本文公開的治療和美容益處的目的，施用途徑可以是局部的。可 選擇地，通過注射，如皮下注射施用也可以是合適的，這取決于期望的結(jié)果。
[0054] 將會理解，對任何特定的個體來說，本發(fā)明組合物的特定劑量水平將取決于多種 因素，包括如所采用的特定提取物的活性、受治療的個體的年齡、體重、總體健康和飲食、施 用時間、提取物的穩(wěn)定性、在身體上的施用部位以及任何其他治療或療法的組合?？梢赃M(jìn)行 單次或多次施用，且劑量水平和模式按照需要來確定，這取決于受治療的情形和個體。合適 的劑量方案可以易于由技術(shù)人員來確定。寬范圍的劑量可以是合適的?？紤]到人類受治療 者，每公斤體重每天可以施用如約〇. lmg到約lmg的提取物。劑量方案可以被調(diào)節(jié)以提供 最佳的治療響應(yīng)。例如，若干次分開的劑量可以被每小時、每天、每周、每月或以其他合適的 時間間隔被施用或劑量可以成比例地減少，正如情況的緊迫性所表示的。
[0055] 通常，有效劑量期望在約0· OOOlmg到約lOOOmg每kg體重每24小時的范圍內(nèi)；通 常，約0. OOlmg到約750mg每kg體重每24小時；約0. Olmg到約500mg每kg體重每24小 時；約0. lmg到約500mg每kg體重每24小時；約0. lmg到約250mg每kg體重每24小時； 約1. Omg到約250mg每kg體重每24小時。更通常地，有效劑量期望在約1. Omg到約200mg 每kg體重每24小時的范圍內(nèi)；約1. Omg到約lOOmg每kg體重每24小時；約1. Omg到約 50mg每kg體重每24小時；約1. Omg到約25mg每kg體重每24小時；約5. Omg到約50mg 每kg體重每24小時；約5. Omg到約20mg每kg體重每24小時；約5. Omg到約15mg每kg 體重每24小時。
[0056] 局部制劑通常包括本發(fā)明的一種或多種提取物連同一種或多種可接受的載體，以 及任選的任何形式的治療成分。適合于局部施用的制劑可以呈任何合適的形式，配制成如 擦劑、洗液、乳劑、凝膠、軟膏或糊劑。藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑的實(shí)例是去礦物質(zhì)的 水或去離子水；鹽水溶液；基于植物的油，諸如花生油、紅花油、橄欖油、棉籽油、玉米油、芝 麻油、花生油或椰子油；硅油，包括聚硅氧烷，諸如甲基聚硅氧烷、苯基聚硅氧烷和甲基苯基 聚硅氧烷；揮發(fā)性硅酮；礦物油，諸如液體石蠟、軟石蠟或角鯊?fù)椋焕w維素衍生物，諸如甲基 纖維素、乙基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉或羥丙基甲基纖維素；低級烷醇，如乙 醇或異丙醇；低級芳烷醇；低級聚烷撐二醇或低級烷撐二醇，如聚乙二醇、聚丙二醇、乙二 醇、丙二醇、1，3_ 丁二醇或甘油；脂肪酸酯，諸如棕櫚酸異丙酯、肉豆蘧酸異丙酯或油酸乙 酯；聚乙烯吡咯烷酮；瓊脂；角叉菜膠；黃蓍膠或阿拉伯樹膠以及石油膏。通常，載體將由組 合物重量的10%到99. 9%形成。
[0057] 根據(jù)本發(fā)明的洗液包括適合應(yīng)用到皮膚或表皮附屬器的那些。應(yīng)用到皮膚的洗液 或擦劑還可以包括加快干燥和冷卻皮膚的劑，諸如醇或丙酮，和/或保濕劑諸如甘油，或油 諸如椰子油、蓖麻油或花生油。
[0058] 根據(jù)本發(fā)明的乳劑、軟膏或糊劑是用于外部施用的提取物的半固體制劑。它們可 以通過將呈細(xì)分散的或粉末形式的提取物與具有油脂的或非油脂的基質(zhì)單獨(dú)或在水性流 體或非水性流體中的溶液或懸浮液中混合來制備?；|(zhì)可以包括烴，諸如硬石蠟、軟石蠟或 液體石蠟，甘油、蜂蠟、金屬皂；粘膠；天然來源的油，諸如椰子油、杏仁油、玉米油、花生油、 蓖麻油或橄欖油；羊毛脂或其衍生物，或脂肪酸，諸如硬脂酸或油酸以及醇諸如丙二醇或聚 乙二醇。
[0059] 提取物和/或組合物還可以被浸漬到透皮貼劑、膏劑和傷口敷料諸如繃帶或優(yōu)選 呈液體或半液體形式的水膠體敷料中。僅舉個例子，根據(jù)本發(fā)明的局部施用的提取物和組 合物可以被配制成指甲護(hù)理產(chǎn)品、面罩和潔面露、發(fā)膠和摩絲、頭發(fā)染劑、染料和漂白劑、用 于燙發(fā)、拉直和固定頭發(fā)的產(chǎn)品、清潔產(chǎn)品諸如洗發(fā)水、調(diào)理產(chǎn)品諸如洗液和乳劑、油、剃須 產(chǎn)品諸如霜劑和凝膠、皮膚洗劑、起泡劑、洗浴和淋浴制劑諸如油和凝膠、保濕產(chǎn)品諸如洗 液、乳劑、凝膠和起泡劑、抗皺產(chǎn)品和抗老化產(chǎn)品。
[0060] 在特定的情形中，如在手術(shù)后促進(jìn)傷口愈合或治療特定的皮膚疾病時，通過注射、 通常是皮下注射來施用組合物可能是合適的。適合于注射用途的藥物形式包括無菌水溶液 (水溶性的）或用于臨時制備可無菌注射的溶液的分散體和無菌粉末。在制造和存儲條件 下，藥物形式必須是穩(wěn)定的且必須被保藏以防止諸如細(xì)菌和真菌的微生物的污染作用。載 體可以是溶劑或分散介質(zhì)，包含如水、乙醇、多元醇（如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇以及 類似物）、其合適的混合物以及植物油。合適的流動性可以被維持，如通過使用諸如卵磷脂 的包衣，在分散體的情形時是通過維持所要求的粒徑以及通過使用表面活性劑?？梢酝ㄟ^ 各種抗茵劑和抗真菌劑，如對羥基苯甲酸酯、氯代丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞以及類似物來 實(shí)現(xiàn)防止微生物的作用。在許多情形下，藥物形式將優(yōu)選包括等滲劑，如糖或氯化鈉。可以 通過使用延遲吸收的劑的組合物（如單硬脂酸鋁和明膠）實(shí)現(xiàn)可注射組合物的延長的吸收 作用。
[0061] 可無菌注射的溶液是通過將所需量的活性化合物結(jié)合到合適的溶劑與上面列舉 的各種其他成分（按照需要）中，然后無菌過濾來制備的。通常，分散體是通過將各種無 菌提取物結(jié)合到包含基本的分散體介質(zhì)和上面列舉的那些中的所需的其他成分的無菌載 體內(nèi)。在用于制備可無菌注射的溶液的無菌粉末的情形中，優(yōu)選的制備方法是真空干燥和 冷凍-干燥技術(shù)，這產(chǎn)生提取物粉末加上其先前無菌過濾的溶液中的任何額外的期望提取 物。
[0062] 本發(fā)明設(shè)想組合治療，其中如本文描述的提取物或組合物與可能有利于期望的治 療或美容效果的其他合適的劑或治療一起施用。例如，可以尋求借助抗菌素、抗微生物劑或 其他傷口愈合劑與本發(fā)明的提取物或組合物組合來幫助傷口愈合。就"共同施用"來說，意 指經(jīng)由相同的或不同的途徑同時施用或通過相同的或不同的途徑連續(xù)施用相同的制劑或 兩種不同的制劑。就"連續(xù)"施用而言，意指施用兩種類型的試劑之間的時間差為數(shù)秒、數(shù) 分鐘、數(shù)小時或數(shù)天。試劑可以被按照任何順序施用。
[0063] 說明書中引用的任何現(xiàn)有的出版物（或從出版物獲得的信息），或任何已知的內(nèi) 容不是，且不應(yīng)該被認(rèn)為是承認(rèn)或認(rèn)可或任何形式的提議：現(xiàn)有的出版物（或從出版物獲 得的信息）或已知內(nèi)容構(gòu)成說明書所涉及領(lǐng)域的公知常識的一部分。
[0064] 現(xiàn)在將參考下面的具體實(shí)施例來描述本發(fā)明，這些具體實(shí)施例決不應(yīng)該被解釋為 限制本發(fā)明。 實(shí)施例
[0065] 實(shí)施例1-制備椰子油中的濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和/或黃槿的組合提取物 [0066] 向?yàn)I豇豆的新切碎的葉子（100g)和欖仁樹的新切碎的葉子（100g)中添加椰子油 (200mL)。將混合物置于KKTC的水浴中的坩堝內(nèi)持續(xù)20分鐘。趁熱除去混合物并立即過 濾且壓榨以提取椰子油。向椰子樹的綠色堅(jiān)果的新碾碎的殼（l〇〇g)和黃槿的削過的莖皮 (100g)中添加所得到的含有濱豇豆和欖仁樹的椰子油。沉降混合物4h，然后過濾并壓榨以 提取椰子油。
[0067] 接著，倒置椰子油并在低于20°C下存儲，直至椰子油凝固。通過從凝固的椰子油 中傾析來去除混合物中剩余的水分或固體。接著在約56°C的熱水浴中加熱椰子油并過濾。 所得到的濾液包含濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和黃槿的組合提取物。
[0068] 實(shí)施例2-促進(jìn)傷口愈合
[0069] 進(jìn)行了評估按照實(shí)施例1描述的那樣制備的濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和黃槿的提 取物的傷口愈合能力的研究。為了研究，12周齡健康雌性大鼠被用作最佳愈合模型。傷口 是在麻醉和無菌的條件下由手術(shù)產(chǎn)生的，且通過借助手術(shù)中的抗菌素和干凈的罩進(jìn)行的一 期愈合（包括皮膚在內(nèi)的所有組織被縫線材料閉合）被閉合。向手術(shù)部位局部施用lmL日 劑量的提取物。每天施用提取物，共持續(xù)10天。對照的動物未接受治療。在部位產(chǎn)生后第 3、5、7和10天，評估傷口組織學(xué)且通過分散至失效試驗(yàn)測試了傷口的機(jī)械強(qiáng)度。
[0070] 圖1A到1H顯示了未受治療的傷口（對照）和受治療的傷口（試驗(yàn)）的傷口組織 學(xué)。受治療的傷口的組織學(xué)顯示出前3天內(nèi)覆蓋傷口的上皮及早增殖，然后浸潤細(xì)胞到傷 口內(nèi)以開始出現(xiàn)再生，且到第7天時完全愈合，到第10天時傷口痕跡最少。到第10天時也 在未受治療的傷口中觀察到傷口愈合的痕跡，但這比在受治療的傷口中觀察到的速率慢的 速率發(fā)生，由此證明提取物加快了自然愈合過程的速率。
[0071] 圖2A顯示了治療期間，傷口部位的機(jī)械強(qiáng)度變化的圖形表示。發(fā)現(xiàn)受治療的傷口 部位具有比未受治療的傷口部位高22 %的機(jī)械強(qiáng)度。圖2B顯示了當(dāng)機(jī)械強(qiáng)度數(shù)據(jù)被建模 成非線性愈合曲線（反映愈合模式）時，保留了差別。
[0072] 研究結(jié)果顯示出用實(shí)施例1的組合提取物治療傷口既促進(jìn)了傷口愈合，又增大了 傷口部位處的皮膚的機(jī)械強(qiáng)度。
[0073] 實(shí)施例3-治療雌激素缺乏的皮膚
[0074] 進(jìn)行了評估按照實(shí)施例1描述的那樣制備的濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和黃槿的提 取物對雌激素缺乏的皮膚的影響。在此研究中，向18個月大的雌激素缺乏（6周大時切除 了卵巢）的大鼠（10只動物）背部的上皮表面局部施用lml日劑量的提取物。每天施用提 取物，共持續(xù)7天。對照的動物是未局部施用提取物的18個月大的雌激素缺乏出周大時 切除了卵巢）的大鼠（10只動物）。7天時，評估了受治療的皮膚和對照的皮膚的組織學(xué)且 測定了上皮厚度。
[0075] 圖3A至圖3F顯示了 7天時，來自單個動物的受治療的皮膚和對照的皮膚的組織 學(xué)曲線。與對照相比，受治療的皮膚的組織學(xué)顯示出非常厚的細(xì)胞上皮和膠原基質(zhì)的細(xì)胞 結(jié)構(gòu)的相對增加。
[0076] 圖4A顯示了受治療的和未受治療的動物的皮膚的上皮厚度的圖形表示。與未受 治療的動物相比，觀察到受治療的動物的皮膚的上皮厚度平均增大了 145%。
[0077] 進(jìn)行了同樣的研究，除了每天施用提取物持續(xù)3周（10只動物）。21天時，測定了 受治療的皮膚（施用部位和鄰近部位）和未受治療的（對照）皮膚的上皮厚度。此研究證 明了 7天后觀察到的上皮厚度和膠原基質(zhì)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)的增加（參見上文）在治療的21天 內(nèi)被維持。圖4B顯示了治療21天后的上皮厚度。圖4B的結(jié)果顯示出不僅在施用區(qū)域，而 且在鄰近施用區(qū)域的區(qū)域內(nèi)都看到了效果，這意味著只需要少的劑量就引起了老化的雌激 素缺乏的皮膚的效果。
[0078] 還證明了基于椰子油中的提取物的生物活性在乙醇中是可溶的。椰子油中的提取 物（提取前）以1 : 1與乙醇劇烈混合5分鐘，直到混合物是均勻的，然后靜置5分鐘。接 著冷凍混合物并去除乙醇（乙醇提取物）以僅留下椰子油（提取后）。測定第7天時的上 皮厚度。圖5顯示出受治療的雌激素缺乏的皮膚在治療后的上皮厚度的變化百分?jǐn)?shù)。結(jié)果 證明了當(dāng)提取到乙醇中時，提取物的活性被保持。
[0079] 實(shí)施例4-制備濱豇豆的提取物
[0080] 4. 1 :椰子油中的鑌豇豆提取物
[0081] 將濱豇豆的新碾碎的葉子、藤和豆（l〇〇g)浸沒在椰子油（100mL)中。通過冷壓濱 豇豆與椰子油的混合物；或通過加熱混合物來制備提取物。通過將濱豇豆和椰子油混合物 置于新的咖啡柱塞內(nèi)并使混合物沉降lh，然后壓下柱塞進(jìn)行冷壓，由此來提取油。使混合 物沉降另外5min且再次壓下柱塞以釋放更多的油。重復(fù)此過程5次，直到不再獲得油。當(dāng) 通過加熱制備提取物時，在l〇〇°C的水浴中在坩堝內(nèi)加熱濱豇豆和椰子油混合物20分鐘， 從熱中取出，然后立即過濾并壓榨以提取椰子油。在冷壓或加熱并過濾后，提取物中任何剩 余的水分或固體通過使椰子油提取物反相并在低于20°C下將其存儲來去除，直到椰子油凝 固，然后傾析凝固的椰子油；或通過在分液漏斗中傾析。
[0082] 4. 2 :在乙醇中提取后的椰子油中的鑌豇豆提取物
[0083] 將濱豇豆的新碾碎的葉子、藤和豆（1000g)浸沒在95-100%的乙醇（2000mL)中并 保持浸漬24h。用椰子油（250mL)攪拌濱豇豆的乙醇提取物。通過以下方法從溶液傾析椰 子油：通過在傾析容器內(nèi)靜置至少2h ;或通過將乙醇溶液從95%稀釋到較低濃度、通常是 但未必是50 %的乙醇，然后在層沉降后傾析。混合物中任何剩余的水分或固體通過以下方 法來除去：通過使椰子油提取物反相并在低于20°C下存儲，直到椰子油凝固，然后傾析凝 固的椰子油；或通過在分液漏斗中傾析。
[0084] 4. 3 :在乙醇和異戊烷中提取后的椰子油中的鑌豇豆提取物
[0085] 將濱豇豆的新碾碎的葉子、藤和豆（1000g)浸沒在95-100%的乙醇（2000mL)中并 保持浸漬6h，然后去除乙醇，且將濱豇豆在第二等分試樣乙醇（2000mL)中浸漬另外6h。
[0086] 用己烷、戊烷、甲基丁烷或當(dāng)量的烴或氟代/氯代/溴代烴（250mL)攪拌所得到的 乙醇。通過以下方法從溶液傾析烴：通過在傾析容器內(nèi)靜置至少2h ;或通過將乙醇溶液從 95%稀釋到較低濃度、通常是但未必是50%的乙醇，然后在層沉降后傾析。
[0087] 向烴溶液中添加椰子油（250mL)并在高于烴的沸點(diǎn)下加熱（如，當(dāng)采用己烷時， 將溶液加熱至67°C)以蒸發(fā)烴。向烴溶液中添加95%的乙醇（250mL)并在高于烴的沸點(diǎn) 下加熱。
[0088] 4. 4 :在乙醇中提取后的烴中的鑌豇豆提取物
[0089] 將濱豇豆的新碾碎的葉子、藤和豆（1000g)浸沒在95-100%的乙醇（2000mL)中并 保持浸漬6h，然后去除乙醇，且將濱豇豆在第二等分試樣乙醇（2000mL)中浸漬另外6h。用 己烷、戊烷、甲基丁烷或等同的烴或氟代/氯代/溴代烴（250mL)攪拌所得到的乙醇溶液。 通過以下方法從溶液傾析烴：通過在傾析容器內(nèi)靜置至少2h ;或通過將乙醇溶液從95%稀 釋到較低濃度、通常是但未必是50%的乙醇稀釋，然后在層沉降后傾析。
[0090] 4. 5 :在乙醇和烴中提取后的乙醇中的鑌豇豆提取物
[0091] 將濱豇豆的新碾碎的葉子、藤和豆（1000g)浸沒在95-100%的乙醇（2000mL)中并 保持浸漬6h，然后去除乙醇，且將濱豇豆在第二等分試樣乙醇（2000mL)中浸漬另外6h。用 己烷、戊烷、甲基丁烷或等同的烴或氟代/氯代/溴代烴（250mL)攪拌所得到的乙醇溶液。 通過以下方法從溶液傾析烴：通過在傾析容器內(nèi)靜置至少2h ;或通過將乙醇溶液從95%稀 釋到較低濃度、通常是但未必是50%的乙醇稀釋，然后在層沉降后傾析。向烴溶液中添加 95%的乙醇（250mL)并在高于烴的沸點(diǎn)下加熱（如，當(dāng)采用己烷時，將溶液加熱至67°C)以 蒸發(fā)烴。
[0092] 實(shí)施例5-制備椰子樹提取物
[0093] 5. 1 :椰子油中的椰子樹提取物
[0094] 按照關(guān)于濱豇豆的描述在實(shí)施例5. 1中制備提取物，除了使用椰子樹的幼嫩堅(jiān)果 的新殼（l〇〇g)。
[0095] 5. 2 :在乙醇中提取后的椰子油中的椰子樹提取物
[0096] 按照關(guān)于濱豇豆的描述在實(shí)施例5. 2中制備提取物，除了使用椰子樹的幼嫩堅(jiān)果 的新殼（l〇〇〇g)。
[0097] 5. 3 :在乙醇和烴中提取后的椰子油中的椰子樹提取物
[0098] 按照關(guān)于濱豇豆的描述在實(shí)施例5. 3中制備提取物，除了使用椰子樹的幼嫩堅(jiān)果 的新殼（l〇〇〇g)。
[0099] 5. 4 :在乙醇中提取后的烴中的椰子樹提取物
[0100] 按照關(guān)于濱豇豆的描述在實(shí)施例5. 4中制備提取物，除了使用椰子樹的幼嫩堅(jiān)果 的新殼（l〇〇〇g)。
[0101] 5. 5 :在乙醇和烴中提取后的乙醇中的椰子樹提取物
[0102] 按照關(guān)于濱豇豆的描述在實(shí)施例5. 5中制備提取物，除了使用椰子樹的幼嫩堅(jiān)果 的新殼（l〇〇g)。
[0103] 實(shí)施例6-制備欖仁樹提取物
[0104] 6. 1 :椰子油中的欖仁樹提取物
[0105] 按照實(shí)施例5. 1中關(guān)于濱豇豆的描述制備提取物，除了使用欖仁樹的新碾碎的葉 子、藤和見（io〇g)。
[0106] 6. 2 :在乙醇中提取后的椰子油中的欖仁樹提取物
[0107] 按照實(shí)施例5. 2中關(guān)于濱豇豆的描述制備提取物，除了使用欖仁樹的新碾碎的葉 子、藤和? (l〇〇〇g)。
[0108] 6. 3 :在乙醇和烴中提取后的椰子油中的欖仁樹提取物
[0109] 按照實(shí)施例5. 3中關(guān)于濱豇豆的描述制備提取物，除了使用欖仁樹的新碾碎的葉 子、藤和? (l〇〇〇g)。
[0110] 6. 4 :在乙醇中提取后的烴中的欖仁樹提取物
[0111] 按照實(shí)施例5. 4中關(guān)于濱豇豆的描述制備提取物，除了使用欖仁樹的新碾碎的葉 子、藤和? (l〇〇〇g)。
[0112] 6. 5 :在乙醇和烴中提取后的乙醇中的欖仁樹提取物
[0113] 按照實(shí)施例5. 5中關(guān)于濱豇豆的描述制備提取物，除了使用欖仁樹的新碾碎的 葉子、藤和豆（l〇〇〇g)。
[0114] 實(shí)施例7-制備黃槿提取物
[0115] 7. 1 :椰子油中的昔槿提取物
[0116] 按照實(shí)施例5. 1中關(guān)于濱豇豆的描述制備提取物，除了使用黃槿的新碾碎的葉 子、藤和見（io〇g)。
[0117] 實(shí)施例8-濱豇豆和欖仁樹的單個提取物對皮膚的上皮厚度的影響
[0118] 進(jìn)行了每一種提取物（按照實(shí)施例4至7中描述的那樣制備）對皮膚的上皮厚度 的影響的評估。向10-14周齡雌性大鼠背部的上皮表面局部施用lmL日劑量的提取物持續(xù) 7天。第一對照用lmL日劑量的椰子油治療。第二對照是10-14周齡雌性大鼠背部的未受 治療的表面。評估第7天時受治療的皮膚和對照的皮膚的組織學(xué)。
[0119] 圖6A至6J顯示出受治療的皮膚和對照的皮膚的組織學(xué)。結(jié)果顯示出單獨(dú)的椰子 油（圖6B)對皮膚的組織學(xué)曲線無明顯影響。用單獨(dú)的椰子油治療的皮膚的組織學(xué)與未受 治療的皮膚（圖6A)是相當(dāng)?shù)摹?br> [0120] 圖6C至6E顯示出每天施用椰子油中（圖6C);乙醇中（圖6D)以及用乙醇和烴 提取后的椰子油中（圖6E)的濱豇豆提取物后的組織學(xué)。結(jié)果顯示出上皮細(xì)胞厚度的顯著 變化。此外，在皮膚內(nèi)存在血管結(jié)構(gòu)的痕跡且無炎性浸潤。總之，在所有提取溶液中觀察到 了濱豇豆對皮膚的影響，這表明在醇和烴提取中濃縮提取物的能力。
[0121] 圖6F到6J顯示出每天施用椰子油中（圖6F);烴中（圖6G);乙醇中（圖6H)、用 乙醇提取后的椰子油中（圖61);以及用乙醇和烴提取后的椰子油中（圖6J)的欖仁樹提 取物制品后的組織學(xué)。組織學(xué)曲線顯示出提取物在單獨(dú)的乙醇或烴提取物中具有有限的活 性，但如果欖仁樹直接被提取到椰子油中，或提取到乙醇和烴中，然后再提取到椰子油中， 那么活性被維持。
[0122] 實(shí)施例9-濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和黃槿的單個提取物和組合提取物對皮膚的上 皮厚度的影響
[0123] 進(jìn)行了按照實(shí)施例4. 1、5. 1、6. 1和7. 1中描述的那樣制備的每一種提取物的活性 的評估。局部施用lmL日劑量的椰子油中的濱豇豆提取物（實(shí)施例4. 1);椰子油中的椰子 樹提取物（實(shí)施例5. 1);椰子油中的欖仁樹提取物（實(shí)施例6. 1)和/或lmL在椰子油中的 黃槿提取物（實(shí)施例7. 1)。每一種提取物單獨(dú)施用或與第二種組合提取物施用，如0. 5mL在 椰子油中的濱豇豆提取物+〇. 5ml在椰子油中的椰子樹提取物以得到lml的劑量。向10-14 周齡雌性大鼠背部的上皮表面局部施用提取物。測定第7天時皮膚的上皮厚度。
[0124] 圖7B和7B顯示出與同樣動物的對照的未受治療的皮膚相比，第7天時的上皮厚 度的變化百分?jǐn)?shù)。圖7A顯示出當(dāng)單獨(dú)施用提取物時，經(jīng)7天時段，局部施用椰子油中的濱 豇豆提取物和椰子油中的欖仁樹提取物引起上皮厚度的最大增加。圖7B詳細(xì)描述了當(dāng)每 一種提取物與另一種組合提取物施用時的上皮厚度的變化百分?jǐn)?shù)。結(jié)果顯示出椰子樹提取 物與濱豇豆提取物和欖仁樹提取物具有協(xié)同效應(yīng)且黃槿與濱豇豆提取物具有協(xié)同效應(yīng)。
[0125] 進(jìn)行了使用按照實(shí)施例4至7中描述的那樣制備的每一種提取物的另一種評估 (數(shù)據(jù)未顯示）并證實(shí)了圖6A至6J以及圖7A和7B中顯示的結(jié)果。評估采用303只雌性 sprague dawley大鼠和34只New Zealand白色兔子。向18個月大的去除雙側(cè)卵巢的大鼠 和假手術(shù)的去除雙側(cè)卵巢的大鼠、和12周齡大鼠的背部的上皮表面局部施用提取物21天， 以及向12周齡New Zealand白色兔子的皮膚局部施用提取物7天。
[0126] 在平行研究中，保濕霜（hydroderm)、局部抗茵的氯霉素（氯霉素）、椰子油或提取 到乙醇中的椰子油被施用到18個月大的去除雙側(cè)卵巢的大鼠和假手術(shù)的去除雙側(cè)卵巢的 大鼠的背部的上皮表面且與鄰近的未受治療的部位的上皮表面進(jìn)行比較。對用hydroderm、 局部抗茵的氯霉素（氯霉素）、椰子油或提取到乙醇中的椰子油治療的動物來說，記錄了受 治療的皮膚與未受治療的鄰近的皮膚之間無明顯差異。結(jié)果表明上皮內(nèi)表現(xiàn)的變化是因?yàn)?提取物的施用且與如提取物中的椰子油的保濕效果無關(guān)。結(jié)果還表明上皮內(nèi)表現(xiàn)的變化與 提取物的任何抗微生物能力無關(guān)，因?yàn)樽兓荒軌虮宦让顾刂貜?fù)。
[0127] 所有的動物都很好地忍受治療。沒有與局部治療相關(guān)的死亡或疾病。施用的皮膚 區(qū)域未顯現(xiàn)任何活性治療中的宏觀可見的或微觀可見的發(fā)炎。注意到施用提取物的區(qū)域 內(nèi)上皮的組織學(xué)變化。施用區(qū)域與對照區(qū)域之間的差異揭示出上皮結(jié)構(gòu)的變化，以及上皮 的許多層的肥大和分層外觀的增強(qiáng)。上皮厚度的增加高于100%，并且均可重現(xiàn)的和統(tǒng)計上 可量化的。
[0128] 幼年的動物中對施用提取物的皮膚的上皮的影響與年老的動物和年老的雌激素 缺乏的動物是相同的，盡管這些組中的每一組中，未受治療的動物的基準(zhǔn)動物學(xué)存在差異。 提取物對兔子皮膚的影響與大鼠中看到的類似，觀察到上皮和上皮結(jié)構(gòu)諸如毛囊具有類似 變化。
[0129] 實(shí)施例10-制備濱豇豆、椰子樹和欖仁樹的組合提取物
[0130] 分別覆蓋濱豇豆的新碾碎的葉子、藤和豆（2. 5kg)、椰子樹的幼嫩堅(jiān)果的新殼 (2.5kg)和欖仁樹的新碾碎的葉子、藤和豆（1kg)。
[0131] 將濱豇豆添加到95%乙醇（5L)中并攪拌，且使混合物靜置12h。去除濱豇豆的覆 蓋材料并添加到第二桶的95%乙醇（5L)中且使混合物靜置12h。將第一次的5L的乙醇添 加到大的桶中。
[0132] 從乙醇的第二等分試樣去除濱豇豆的覆蓋材料并添加到95%乙醇的第三等分試 樣（5L)中。將椰子樹的覆蓋材料添加到95%乙醇的第二容器（5L)中并靜置12h。從95% 乙醇的第三等分試樣去除濱豇豆的覆蓋材料（現(xiàn)在幾乎無色）并棄去。從第二容器去除椰 子樹的覆蓋材料并置于95%乙醇的第三等分試樣中。使第三等分試樣靜置12h。向第一等 分試樣中添加95%乙醇的第二等分試樣。
[0133] 從95%乙醇的第三等分試樣去除椰子樹的覆蓋材料并置于95%乙醇的第四等分 試樣（5L)中。向95%乙醇的第三等分試樣中添加欖仁樹的覆蓋材料。第三和第四等分試 樣均靜置12h。
[0134] 從第四等分試樣去除椰子樹的覆蓋材料并棄去。從95%乙醇的第三等分試樣去除 欖仁樹的覆蓋材料并置于95%乙醇的第四等分試樣中并靜置12小時。向第一和第二等分 試樣中添加95%乙醇的第三等分試樣。
[0135] 從第四等分試樣去除欖仁樹的覆蓋材料，并添加到95%乙醇的第五等分試樣 (5L)中且靜置12h。從第五等分試樣去除欖仁樹的覆蓋材料（現(xiàn)在無色）。向前三個等分 試樣中添加95%乙醇的第四和第五等分試樣。向所得到的提取混合物中添加初榨的椰子油 (1L)。每15分鐘劇烈混合混合物5分鐘，持續(xù)4h時間段。然后將混合物加熱至沸騰并保 持在高于80°C下，直至混合物從26L減少至3L。冷卻并沉降所得到的混合物。從混合物的 頂部傾析椰子油并放在倒置于冰箱中的密封的容器內(nèi)。使椰子油凝固并去除剩余的含水成 分且棄去。接著在約56°C的熱水浴中加熱椰子油并過濾。
[0136] 實(shí)施例11-濱豇豆、椰子樹和欖仁樹的組合提取物的劑量依賴關(guān)系
[0137] 評估了按照實(shí)施例10中描述的那樣制備的組合提取物，向10-14周齡雌性大鼠背 部的上皮表面局部施用lmL日劑量的提取物。提取物濃度是100%。還施用了 50%、10%、 5%和1%的提取物。通過用椰子油稀釋100%的提取物來制備這些提取物。借助每天局部 施用持續(xù)7天來治療皮膚。對照的動物是未受治療的10-14周齡雌性大鼠。圖8A至8F顯 示了第7天時皮膚的組織學(xué)。結(jié)果證明了在每天施用50%或100%的提取物后，提取物與 上皮厚度和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的劑量依賴關(guān)系更明顯。圖9A和9B顯示了 7天時皮膚的上皮厚度和 上皮厚度的變化百分?jǐn)?shù)。對用50%或100%的組合提取物治療的動物來說，觀察到皮膚的 上皮厚度增大了 130%。
[0138] 實(shí)施例12-混合物中的濱豇豆、椰子樹或欖仁樹的組合提取物的影響
[0139] 按照實(shí)施例10中描述的那樣制備的椰子油（100% )中的濱豇豆、椰子樹或欖仁樹 的提取物與氯己定、hydroderm保濕霜、25%的氯霉素和50%的氯霉素混合。向10-14周齡 雌性大鼠背部的上皮表面局部施用每一種混合物持續(xù)7天。評估了第7天時受治療的皮膚 的組織學(xué)。
[0140] 圖10A到10E顯示了組織學(xué)曲線且顯示出提取物的功效并不因商用軟膏或溶液的 存在而受到削弱，且提取物與消毒劑或抗茵劑應(yīng)用是相容的。
[0141] 以下實(shí)施方案內(nèi)容對應(yīng)于原申請的權(quán)利要求書：
[0142] 1.濱豇豆、椰子樹或欖仁樹中的一種或多種的生物活性提取物。
[0143] 2.如實(shí)施方案1所述的提取物，還包括黃槿的生物活性提取物。
[0144] 3.如實(shí)施方案1所述的提取物，其中所述提取物包括濱豇豆的提取物。
[0145] 4.如實(shí)施方案1所述的提取物，其中所述提取物包括濱豇豆和欖仁樹的提取物的 組合。
[0146] 5.如實(shí)施方案1所述的提取物，其中所述提取物包括濱豇豆和椰子樹的提取物的 組合。
[0147] 6.如實(shí)施方案1所述的提取物，其中所述提取物包括濱豇豆和椰子樹和欖仁樹的 提取物的組合。
[0148] 7.如實(shí)施方案2所述的提取物，其中所述提取物包括濱豇豆、椰子樹、欖仁樹和黃 槿的提取物的組合。
[0149] 8.如實(shí)施方案1至7中任一項(xiàng)所述的提取物，其中所述提取物是從葉子、藤、豆、殼 或堅(jiān)果中的一種或多種獲得的。
[0150] 9.如實(shí)施方案1所述的提取物，其中所述濱豇豆、欖仁樹和/或黃槿的提取物是從 葉子、藤和/或豆中的一種或多種獲得的。
[0151] 10.如實(shí)施方案2所述的提取物，其中所述黃槿的提取物是從葉子、藤和/或豆中 的一種或多種獲得的。
[0152] 11.如實(shí)施方案1至10中任一項(xiàng)所述的提取物，其中所述提取物是使用基于植物 的油、烴和/或醇制備的，和/或包括基于植物的油、烴和/或醇。
[0153] 12.如實(shí)施方案11所述的提取物，其中所述基于植物的油是從種子或果實(shí)獲得 的。
[0154] 13.如實(shí)施方案11所述的提取物，其中所述基于植物的油是椰子油。
[0155] 14.如實(shí)施方案13所述的提取物，其中所述椰子油是初榨的椰子油、精煉的椰子 油、氫化的椰子油或分餾的椰子油。
[0156] 15. -種組合物，其包括如實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的提取物和藥學(xué)上可接 受的載體、稀釋劑和/或賦形劑。
[0157] 16.如實(shí)施方案15所述的組合物，其中所述組合物被局部應(yīng)用至受治療者的皮膚 或表皮附屬器。
[0158] 17.如實(shí)施方案16所述的組合物，其中所述表皮附屬器是毛發(fā)、毛囊、指甲或角質(zhì) 層。
[0159] 18.如實(shí)施方案15或16所述的組合物，其用于處理傷口和/或治療性促進(jìn)和/或 美容促進(jìn)傷口愈合。
[0160] 19.如實(shí)施方案18所述的組合物，其中所述傷口是手術(shù)傷口或非手術(shù)傷口。
[0161] 20.如實(shí)施方案19所述的組合物，其中所述非手術(shù)傷口是燒傷、擦傷、割傷或擦破 傷。
[0162] 21.如實(shí)施方案15或16所述的組合物，其用于治療性治療和/或美容治療皮膚疾 病。
[0163] 22.如實(shí)施方案21所述的組合物，其中所述皮膚疾病是年齡相關(guān)的皮膚萎縮或類 固醇相關(guān)的皮膚萎縮。
[0164] 23.如實(shí)施方案22所述的組合物，其中所述年齡相關(guān)的皮膚萎縮與雌激素缺乏有 關(guān)。
[0165] 24.如實(shí)施方案15或?qū)嵤┓桨?6所述的組合物，其用于毛發(fā)的再生。
[0166] 25.如實(shí)施方案15或?qū)嵤┓桨?6所述的組合物，其用于促進(jìn)毛發(fā)生長。
[0167] 26.如實(shí)施方案15或?qū)嵤┓桨?6所述的組合物，其用于增大皮膚和/或表皮附屬 器的厚度和/或機(jī)械強(qiáng)度。
[0168] 27. -種用于處理傷口和/或治療性促進(jìn)和/或美容促進(jìn)傷口愈合的方法，所述方 法包括向受治療者的皮膚施用治療有效量的如實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的生物活性 提取物或如實(shí)施方案15所述的組合物。
[0169] 28.如實(shí)施方案27所述的方法，其中所述傷口是手術(shù)傷口或非手術(shù)傷口。
[0170] 29.如實(shí)施方案28所述的方法，其中所述非手術(shù)傷口是燒傷、擦傷、割傷或擦破 傷。
[0171] 30. -種用于治療性治療和/或美容治療皮膚疾病的方法，所述方法包括向受治 療者的皮膚施用治療有效量的如實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物或如實(shí) 施方案15所述的組合物。
[0172] 31.如實(shí)施方案30所述的方法，其中所述皮膚疾病是年齡相關(guān)的皮膚萎縮或類固 醇相關(guān)的皮膚萎縮。
[0173] 32.如實(shí)施方案30所述的方法，其中所述年齡相關(guān)的皮膚萎縮與雌激素缺乏有 關(guān)。
[0174] 33. -種用于使毛發(fā)再生的方法，所述方法包括向受治療者的皮膚施用治療有效 量的如實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物或如實(shí)施方案15所述的組合物。
[0175] 34. -種用于促進(jìn)毛發(fā)生長的方法，所述方法包括向受治療者的皮膚施用治療有 效量的如實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物或如實(shí)施方案15所述的組合 物。
[0176] 35. -種用于增大皮膚的厚度和/或機(jī)械強(qiáng)度的方法，所述方法包括向受治療者 的皮膚施用治療有效量的如實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物或如實(shí)施方 案15所述的組合物。
[0177] 36.如實(shí)施方案27至35中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述受治療者是人類。
[0178] 37.實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物用于制造處理傷口和/或治 療性促進(jìn)和/或美容促進(jìn)傷口愈合的藥品或藥物組合物的用途。
[0179] 38.如實(shí)施方案37所述的用途，其中所述傷口是手術(shù)傷口或非手術(shù)傷口。
[0180] 39.如實(shí)施方案38所述的方法，其中所述非手術(shù)傷口是燒傷、擦傷、割傷或擦破 傷。
[0181] 40.實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物用于制造治療性治療和/或 美容治療皮膚疾病的藥品或藥物組合物的用途。
[0182] 41.如實(shí)施方案40所述的用途，其中所述皮膚疾病是年齡相關(guān)的皮膚萎縮或類固 醇相關(guān)的皮膚萎縮。
[0183] 42.如實(shí)施方案41所述的用途，其中所述年齡相關(guān)的皮膚萎縮與雌激素缺乏有 關(guān)。
[0184] 43.實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物用于制造使毛發(fā)再生的藥品 或藥物組合物的用途。
[0185] 44.實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物用于制造促進(jìn)毛發(fā)生長的藥 品或藥物組合物的用途。
[0186] 45.實(shí)施方案1至14中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物用于制造增大皮膚的厚度和 /或機(jī)械強(qiáng)度的藥品或藥物組合物的用途。
【權(quán)利要求】
1. 一種生物活性提取物，其包括椰子樹的提取物和濱豇豆的提取物的組合。
2. 如權(quán)利要求1所述的提取物，其中所述提取物是從葉子、藤、豆、殼或堅(jiān)果中的一種 或多種獲得的。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的提取物，其中所述椰子樹的提取物是從殼或堅(jiān)果獲得的。
4. 如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的提取物，其中所述椰子樹的提取物是椰子油。
5. 如權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的提取物，其中所述提取物是使用基于植物的油、烴 和/或醇制備的，和/或包括基于植物的油、烴和/或醇。
6. 如權(quán)利要求5所述的提取物，其中所述基于植物的油是從種子或果實(shí)獲得的。
7. 如權(quán)利要求6所述的提取物，其中所述基于植物的油是椰子油。
8. 如權(quán)利要求4或權(quán)利要求7所述的提取物，其中所述椰子油是初榨的椰子油、精煉的 椰子油、氫化的椰子油或分餾的椰子油。
9. 一種組合物，其包括如權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的提取物和藥學(xué)上可接受的載 體、稀釋劑和/或賦形劑。
10. 如權(quán)利要求9所述的組合物，其中所述組合物被局部應(yīng)用至受治療者的皮膚或表 皮附屬器。
11. 如權(quán)利要求10所述的組合物，其中所述表皮附屬器是毛發(fā)、毛囊、指甲或角質(zhì)層。
12. 如權(quán)利要求9或10所述的組合物，其用于處理傷口和/或治療性促進(jìn)和/或美容 促進(jìn)傷口愈合。
13. 如權(quán)利要求12所述的組合物，其中所述傷口是手術(shù)傷口或非手術(shù)傷口。
14. 如權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述非手術(shù)傷口是燒傷、擦傷、割傷或擦破傷。
15. 如權(quán)利要求9或10所述的組合物，其用于治療性治療和/或美容治療皮膚疾病。
16. 如權(quán)利要求15所述的組合物，其中所述皮膚疾病是年齡相關(guān)的皮膚萎縮或類固醇 相關(guān)的皮膚萎縮。
17. 如權(quán)利要求16所述的組合物，其中所述年齡相關(guān)的皮膚萎縮與雌激素缺乏有關(guān)。
18. 如權(quán)利要求9或權(quán)利要求10所述的組合物，其用于毛發(fā)的再生。
19. 如權(quán)利要求9或權(quán)利要求10所述的組合物，其用于促進(jìn)毛發(fā)生長。
20. 如權(quán)利要求9或權(quán)利要求10所述的組合物，其用于增大皮膚和/或表皮附屬器的 厚度和/或機(jī)械強(qiáng)度。
21. 權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物用于制造處理傷口和/或治療性 促進(jìn)和/或美容促進(jìn)傷口愈合的藥品或藥物組合物的用途。
22. 如權(quán)利要求21所述的提取物的用途，其中所述傷口是手術(shù)傷口或非手術(shù)傷口。
23. 如權(quán)利要求22所述的提取物的用途，其中所述非手術(shù)傷口是燒傷、擦傷、割傷或擦 破傷。
24. 權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物用于制造治療性治療和/或美容 治療皮膚疾病的藥品或藥物組合物的用途。
25. 如權(quán)利要求24所述的提取物的用途，其中所述皮膚疾病是年齡相關(guān)的皮膚萎縮或 類固醇相關(guān)的皮膚萎縮。
26. 如權(quán)利要求25所述的提取物的用途，其中所述年齡相關(guān)的皮膚萎縮與雌激素缺乏 有關(guān)。
27. 權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物用于制造使毛發(fā)再生的藥品或藥 物組合物的用途。
28. 權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物用于制造促進(jìn)毛發(fā)生長的藥品或 藥物組合物的用途。
29. 權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的生物活性提取物用于制造增大皮膚的厚度和/或 機(jī)械強(qiáng)度的藥品或藥物組合物的用途。
【文檔編號】A61K36/48GK104138487SQ201410275983
【公開日】2014年11月12日 申請日期:2010年5月4日 優(yōu)先權(quán)日:2009年5月4日
【發(fā)明者】格拉哈姆·馬西森 申請人:庫克島醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司