硫環(huán)紅素a在制備抗菌藥物中的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了從豚草的須根中分離得到的硫環(huán)紅素A在制備抗菌藥物中的應用。硫環(huán)紅素A的制備方法包括以下步驟：包括超臨界萃取、聚酰胺柱層析、氧化鋁柱層析以及重結(jié)晶等步驟。制備得到的硫環(huán)紅素A可用于制備抗菌藥物。
【專利說明】硫環(huán)紅素A在制備抗菌藥物中的應用

【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，涉及硫環(huán)紅素A及其制備方法和在制備抗菌藥物中的應用。

【背景技術】
[0002]硫環(huán)紅素A (Thiarubrin A)，分子式為C13H8S2,分子量為228.34，結(jié)構(gòu)式為:
硫環(huán)紅素A是從菊科(Compositae)豚草Ambrosia artemisiifolia L.的須根中分離得到的一種活性物質(zhì)。硫環(huán)紅素A對白色念珠菌和蘇煙色麴菌有強的抗菌作，作用濃度與兩性霉素B相當；對白色念珠菌、枯草桿菌及線蟲有細胞毒活性；具有光敏毒性；具有抗病毒作用，在UV-A存在下對鼠巨細胞病毒MCMV和Sindbis病毒敏感；在微分子濃度和紫外光輻射下，有好的抗HIV活性。
[0003]通過文獻檢索，國內(nèi)尚未見硫環(huán)紅素A用于制備抗菌藥物或保健品。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為滿足臨床需要，擴大用藥品種，更好地治療細菌感染疾病，應用硫環(huán)紅素A制備抗菌藥物或保健品。
[0005]硫環(huán)紅素A 的結(jié)構(gòu)分析:MS m/z (rel.1nt.):228 (M+, 100),83 (25),119 (13)，183 (20),184 (49)。
[0006]上述硫環(huán)紅素A的制備方法，包括以下步驟:
1)超臨界萃取:取豚草的須根粉碎，投入到超臨界CO2萃取釜中，再加入適量有機溶劑作為夾帶劑，通入CO2，在萃取壓力20-35MPa，萃取溫度30_50°C條件下進行萃取，CO2流速為10-30L/h，進行萃取l_3h，收集萃取物；
2)聚酰胺柱層析:將萃取物加入聚酰胺樹脂柱中，控制流速0.5-1.5BV/h，先用水洗脫至無色，再用30-90%乙醇梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮至相對密度1.08-1.12，得硫環(huán)紅素A粗提物；
3)氧化鋁柱層析:將硫環(huán)紅素A粗提物用3-4倍量的酸性氧化鋁吸附，50°C以下低溫烘干，干法裝柱，用混合溶劑梯度洗脫，收集含高含量硫環(huán)紅素A的流分，減壓濃縮至小體積，結(jié)晶，得粗晶；
4)重結(jié)晶:將粗晶用乙酸乙酯-丙酮混合溶液重結(jié)晶，得到高純度的硫環(huán)紅素A單體化合物。
[0007]步驟(1)所述夾帶劑為60-90%的乙醇或丙酮溶液,加入量為相當于原料重量的5-15%。
[0008]步驟(3)所述的混合溶劑為石油醚、乙酸乙酯、甲醇、丙酮、乙醇的混合溶液。
[0009] 本發(fā)明用于制備抗菌藥物時，其口服或非口服給藥均是安全有效的?？诜o藥可以制成任何常規(guī)劑型，如:散劑、顆粒、膠囊、片、口崩片、滴丸、軟膠囊等；非口服給藥，可制成各種常規(guī)劑型，如注射液等。
[0010]本發(fā)明用于制備抗菌藥物時，在其口服配方中添加腸吸收促進劑，包含中鏈脂肪酸鹽、膽酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。
[0011]本發(fā)明用于制備抗菌藥物時，其輔料及制備方法可選用任何藥學可接受的形式。
[0012]本發(fā)明的劑量可根據(jù)服用方式、病人的年齡、病情嚴重程度等因素而改變，成人口服劑量為l-200mg/日，成人注射劑量為l_50mg/日。
[0013]下面將結(jié)合【具體實施方式】進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

【具體實施方式】
[0014]實施例1:
將豚草的須根粉碎，取5kg投入超臨界萃取罐內(nèi)，加入體積百分比為80%的乙醇溶液作為夾帶劑，加入量為0.3kg (原料重量的6%)，在萃取壓力25MPa，萃取溫度45°C，CO2流量18L/h條件下萃取2h，得掌石蕊萃取物，萃取物用熱水分散，上聚酰胺樹脂柱，流速1.0BV/h,先用水洗至水洗液無色,再用30%乙醇洗脫，最后用80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至相對密度為1.08，得到硫環(huán)紅素A粗提物，將硫環(huán)紅素A粗提物用3倍量的酸性氧化鋁吸附，于50°C低溫烘干，干法上柱，用不同比例的石油醚、石油醚-乙酸乙酯、乙醇梯度洗脫，薄層層析檢查，收集高含量硫環(huán)紅素A流分，減壓濃縮至小體積，結(jié)晶，將粗晶用乙酸乙酯-丙酮重結(jié)晶，得到548mg硫環(huán)紅素A單體化合物，其含量為95.7%
為了更好的理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面將用硫環(huán)紅素A的藥理實驗及藥理來說明其在制藥和保健品中的用途。
[0015]1、受試提取物:硫環(huán)紅素A提取物
(I)性狀:結(jié)晶，味苦。
[0016](2)規(guī)格:含硫環(huán)紅素A≥90%ο
[0017](3)溶劑:乙醇或甲醇。
[0018](4)儲存條件:4°C，密封保存。
[0019]2、抗菌作用
(O實驗材料:供試菌種，白色念珠菌，由南京大學生命科學學院實驗室提供，LS-Sll全自動立式電熱壓力蒸汽滅菌器，上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠；GZX-9246MBE電熱恒溫鼓風干燥箱，上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠。
[0020](2)實驗方法與結(jié)果:采用液體培養(yǎng)基法，取硫環(huán)紅素A，用甲醇配置成不同濃度(2-50 μ g/ml)的溶液，分別加入液體培養(yǎng)基和白色念珠菌菌懸液，同時以水和甲醇作為對照，加入白色念珠菌菌懸液，攪拌均勻，于37°C恒溫震蕩8小時，測定吸光度值，各樣品吸光值均出現(xiàn)較大程度下降，結(jié)果如下:
表1硫環(huán)紅素A的抗菌實驗結(jié)果(液體培養(yǎng)法)

【權(quán)利要求】
1.結(jié)構(gòu)式如下所示的硫環(huán)紅素A在制備抗菌藥物中的應用。
【文檔編號】A61P31/04GK104069100SQ201410266221
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2014年6月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月16日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司