一種抗肺癌藥物組合物及其應用、藥盒和包裝件的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥【技術領域】，涉及一種抗肺癌用藥物組合物及應用、藥盒和包裝件。所述藥物組合物、藥盒及包裝件含有作為聯(lián)合制劑供同時、分開或順序使用的治療有效量的阿米洛利和治療有效量的表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑EGFR-TKI，包括但不僅限于厄洛替尼、吉非替尼；其中，所述阿米洛利與EGFR-TKI的摩爾比為500:1～1:50。本發(fā)明所述的藥物組合物、藥盒及包裝件用于治療腫瘤時，能獲得優(yōu)于EGFR-TKI單獨使用的藥效，并且對由于K-ras突變而導致EGFR-TKI耐藥的腫瘤也有療效。
【專利說明】一種抗肺癌藥物組合物及其應用、藥盒和包裝件
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥【技術領域】，具體涉及一種抗肺癌用藥物組合物及其應用、藥盒和包裝件。
【背景技術】
[0002]惡性腫瘤是危害人類健康的重要疾病之一，其中肺癌已經取代肝癌成為我國發(fā)病率最高的惡性腫瘤；據統(tǒng)計，僅2008年就有52.2萬人被確診為肺癌，其中超過85%的患者為難治療的非小細胞肺癌(Non-small-cell lung carcinoma, NSCLC)。相對于小細胞肺癌，所述NSCLC對化療不敏感，因此如何提高NSCLC術后化療的效果成為延長患者生存期的關鍵，也是我國醫(yī)藥研究工作者的重要任務。
[0003]當前已知，表皮生長因子受體(EpidermalGrowth Factor Receptor, EGFR)信號通路在NSCLC中高度活化，活化的EGFR可激活下游Ras/raf、PI3K/AKT和STAT3/5等信號通路，作用于腫瘤細胞的存活、增殖、凋亡、遷移等過程。目前，針對上述EGFR靶點開發(fā)的EGFR酪氨酸激酶抑制劑(EGFR TKI )，具有高靶向性、療效顯著、不良反應較小的特點，提高了患者的生存質量，尤其對女性、不吸煙者、腺癌患者和亞洲人群益處明顯，臨床上已用于肺癌臨床治療的EGFR TKI有厄洛替尼(erlotinib，商品名易瑞沙)、吉非替尼(gefitinib，商品名特羅凱)和?？颂婺?。
[0004]所述K-RAS基因突變廣泛存在惡性腫瘤中，21~43%的非小細胞肺癌(NSCLC)存在K-RAS的基因突變，K-RAS突變主要為G12，G13和Q61位點的點突變，發(fā)生在K-RAS的GAPs (GTPase-activating proteins)區(qū)域,使 GTPase 喪失水解 GTP 能力，導致 K-RAS 不依賴胞外信號的作用下持續(xù)結合GTP而呈過度激活狀態(tài)，持續(xù)性激活c-Raf/MEK/ERK(而不是B-RAF)和PI3K/AKT/mT0R信號通路，導致細胞惡性轉化和促進腫瘤細胞的生存、增殖以及轉移等。臨床研究顯示，K-RAS突變后，可不依賴EGFR激活而持續(xù)性活化EGFR下游信號通路，導致EGFR抑制劑的耐藥或無反應。
[0005]所述鹽酸阿米洛利是一種臨床應用很久的口服保鉀利尿藥，具有保鉀排鈉作用強、起效快、作用持續(xù)時間長、副反應輕、用量少等優(yōu)點，且有降壓及改善新功能的作用。鹽酸阿米洛利常和氫氯噻嗪、呋塞米合用，因不經肝代謝，肝功能損害者仍可應用，其臨床應用安全性較好。隨著后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)，所述阿米洛利也有其他靶點的抑制作用，包括調節(jié)腫瘤細胞內pH值的Na+-H+交換體I (Na+-H+exchangerl，NHEl)、介導腫瘤遷移、入侵以及轉移的尿激酶型纖溶酶原激活物(the urokinase-type plasminogen activator, uPA),因而具有一定的抗腫瘤作用；但其體外抗腫瘤作用的起效濃度均在幾個毫摩爾的范圍，為體內很難達到的濃度，因此，阿米洛利是否具有體內抗腫瘤的應用前景以及深入的機制闡述仍有待進一步研究。
[0006]迄今為止，尚未見有關聯(lián)合鹽酸阿米洛利與EGFR TKI的藥物組合應用于抗肺癌治療的報道。
【發(fā)明內容】

[0007]本發(fā)明的目的是提供阿米洛利及其衍生物的新的藥用用途，同時為以表皮生長因子酪氨酸激酶為靶點的抗腫瘤藥提供一種增強療效的新藥物組合物以及應用；具體涉及一種抗肺癌用藥物組合物及其應用、藥盒和包裝件。
[0008]本發(fā)明的抗肺癌用藥物組合物，含有作為聯(lián)合制劑供同時、分開或順序使用的治療有效量的阿米洛利和表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI)；
[0009]該組合物含有的阿米洛利和EGFR-TKI，兩者的摩爾比為500:1~1:50 ;
[0010]所述的阿米洛利可以堿基形式或者鹽的形式存在，包括但不限于鹽酸鹽、硫酸鹽等;[0011]上述藥物組合中，以阿米洛利為母核的衍生物，包括但不限于二甲基氨氯吡咪(dimethyl amiloride, DMA)、5_N_ 乙基-N-異丙基阿米洛利(5-ethylisopropylamiloride, EIPA)、甲基異丁基阿米洛利(methylisobutyl amiloride, MIBA)和 5-N, N-環(huán)己燒阿米洛利(5-N, N-hexamethylene amiloride, HMA)等；
[0012]所述的藥物組合物中以抑制表皮生長因子酪氨酸激酶為靶點的抗腫瘤藥，包括但不限于厄洛替尼、吉非替尼。
[0013]本發(fā)明中，所述阿米洛利和EGFR-TKI的組合可用于制備抗肺癌藥物；所述藥物組合中含有阿米洛利和EGFR-TKI，兩者的摩爾比為500:1~1:50 ;
[0014]其中，阿米洛利可以堿基形式或者鹽的形式存在，包括但不限于鹽酸鹽、硫酸鹽等;
[0015]該阿米洛利和EGFR-TKI的藥物組合中，以阿米洛利為母核的衍生物，包括但不限于二甲基氨氯吡咪(dimethyl amiloride, DMA)、5_N_乙基-N-異丙基阿米洛利(5-ethylisopropyl amiloride, EIPA)、甲基異丁基阿米洛利(methylisobutylamiloride, MIBA)和 5-N, N-環(huán)己燒阿米洛利(5-N, N-hexamethylene amiloride, HMA)等；
[0016]所述的阿米洛利和EGFR-TKI藥物組合中以抑制表皮生長因子酪氨酸激酶為靶點的抗腫瘤藥，包括但不限于厄洛替尼、吉非替尼。
[0017]本發(fā)明還提供了一種抗肺癌用藥盒，包括含有鹽酸阿米洛利的第一藥盒單元和含有EGFR-TKI的第二藥盒單元；
[0018]所述的藥盒中，含有鹽酸阿米洛利的第一藥盒單元包括臨床有效劑量的鹽酸阿米洛利，含有EGFR-TKI的第二藥盒包括臨床有效劑量的EGFR-TKI ；
[0019]該鹽酸阿米洛利和EGFR-TKI的組合中，以抑制表皮生長因子酪氨酸激酶為靶點的抗腫瘤藥，包括但不限于厄洛替尼、吉非替尼；
[0020]本發(fā)明同時提供了一種包裝抗肺癌藥物用的包裝件，包括包裝空間彼此獨立的含有阿米洛利的第一包裝單元和含有EGFR-TKI的第二包裝單元；
[0021]所述的包裝件中，含有鹽酸阿米洛利的第一包裝單元包括臨床有效劑量的鹽酸阿米洛利，含有EGFR-TKI的第二包裝單元包括臨床有效劑量的EGFR-TKI ；
[0022]該阿米洛利和EGFR-TKI的組合中，以抑制表皮生長因子酪氨酸激酶為靶點的抗腫瘤藥，包括但不限于厄洛替尼、吉非替尼。
[0023]本發(fā)明中，所述的藥盒或包裝件中，還包括說明書；所述說明書中規(guī)定，所述含有臨床有效劑量鹽酸阿米洛利的單元和所述含有臨床有效劑量的EGFR-TKI的單元，作為聯(lián)合應用于抗肺癌治療的制劑。
[0024]本發(fā)明進行了鹽酸阿米洛利增敏鹽酸厄洛替尼(Erlotinib，a)、吉非替尼(Gefitinib, b)對Calu_6細胞的短期生長抑制試驗,鹽酸阿米洛利增敏鹽酸厄洛替尼、吉非替尼的長期生長抑制試驗，并采用Western Blot法檢測鹽酸阿米洛利聯(lián)用鹽酸厄洛替尼、吉非替尼對EGFR磷酸化及其下游p-STAT3、p-AKt、p-Erk的影響，實驗結果表明，鹽酸阿米洛利在無明顯細胞毒作用的濃度下，能顯著增加EGFR TKI厄洛替尼和吉非替尼的抗腫瘤作用；
[0025]本發(fā)明的實驗中，將鹽酸阿米洛利與厄洛替尼或吉非替尼的組合物用于K-ras突變的人非小細胞肺癌calu-6細胞，結果顯示，與單獨使用厄洛替尼或吉非替尼相比，抑制腫瘤細胞短期生長以及長期生長的作用效果更明顯；
[0026]實驗結果還顯示，所述的藥物組合物與單用厄洛替尼或吉非替尼達到相同抗腫瘤效果時，明顯降低了厄洛替尼或吉非替尼的使用量，其增效作用隨阿米洛利用量的增加而增加；
[0027]此外，實驗結果還表明，鹽酸阿米洛利能顯著增加厄洛替尼或吉非替尼對其靶點EGFR磷酸化的抑制作用。
[0028]本發(fā)明提供了了鹽酸阿米洛利的制藥新用途，即作為腫瘤化療增敏劑，和EGFRTKI聯(lián)用增加其抗 肺癌的作用；尤其是對由于K-ras突變而對EGFR TKI耐藥的肺癌，可增加腫瘤對其的敏感性，提高臨床化療的效果。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0029]圖1鹽酸阿米洛利增敏鹽酸厄洛替尼(Erlotinib, a)、吉非替尼(Gefitinib, b)對Calu-6細胞的短期生長抑制試驗，其中，細胞存活率(Survival)采用MTT法測定，*,p〈0.05VS阿米洛利O組，**，p〈0.01VS阿米洛利O組；
[0030]鹽酸阿米洛利增敏鹽酸厄洛替尼、吉非替尼對HCC-827、NC1-H292、Η1975細胞的短期生長抑制試驗，其中，細胞存活率采用MTT法測定，*, p〈0.05VS阿米洛利O組，**,p〈0.01VS阿米洛利O組。
[0031]圖2鹽酸阿米洛利增敏鹽酸厄洛替尼、吉非替尼的長期生長抑制試驗，
[0032]其中，給藥14天的細胞用吉姆薩染液染色后拍照；
[0033]鹽酸阿米洛利增敏鹽酸厄洛替尼、吉非替尼對HCC-827、NC1-H292和H1975細胞的長期生長抑制作用，其中，給藥14天的細胞用吉姆薩染液染色后拍照。
[0034]圖3Western Blot法檢測鹽酸阿米洛利聯(lián)用鹽酸厄洛替尼、吉非替尼對EGFR磷酸化及其下游P-STAT3、p-AKt, p-Erk的影響。
【具體實施方式】
[0035]以下結合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。但并不意味著本發(fā)明僅限于此。
[0036]實施例1 MTT法檢測鹽酸阿米洛利與厄洛替尼、吉非替尼聯(lián)合用藥對人非小細胞肺癌Calu-6的細胞毒作用
[0037]實驗材料:
[0038]人非小細胞肺癌細胞calu-6 (中科院上海細胞庫)于37°C，5%C02條件下常規(guī)培養(yǎng)，培養(yǎng)基為含10%胎牛血清(Hyclone)的RPM1-1640 (Gibco)0鹽酸阿米洛利標準品購自中國藥品生物制品檢定所，母液50mM由DMSO配制。鹽酸厄洛替尼、吉非替尼原料藥由軒鴻醫(yī)藥(濟南)提供，母液IOmM DMSO配。MTT購自Sigma (美國)。實驗方法:
[0039]1.分化良好的細胞經胰酶消化，懸浮于常規(guī)培養(yǎng)基中，并調節(jié)細胞密度為5 X IO4細胞/ml。100 μ I/孔接種于96孔培養(yǎng)板中，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。
[0040]2.次日更換培養(yǎng)基，10μ I/孔加入工作液，使單獨用藥組鹽酸阿米洛利的終濃度分別為100，200，400μΜ(加入的系列工作液由PBS稀釋，DMSO的濃度小于1.3%)，鹽酸厄洛替尼和吉非替尼的終濃度分別為10，30，100 μ Μ，聯(lián)合用藥組則10 μ I/孔分別加入兩種藥物上述濃度的工作液?？瞻讓φ战M含DMSO 1.3%。
[0041]3.將給藥后的細胞于37°C，5%C02條件下培養(yǎng)48小時。
[0042]4.每孔加入10 μ I MTT (5mg/ml)溶液，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4小時。
[0043]5.洗去培養(yǎng)基，加入100 μ I DMS0，置于搖床上37°C使充分溶解，以檢測波長570nm測定吸光度的值。計算細胞的生長抑制率。N=4，實驗平行三次。
[0044]實驗結果:
[0045]選取代表性的實驗結果如圖1所示，結果顯示，在calu-6細胞上鹽酸阿米洛利增加了鹽酸厄洛替尼及吉非替尼對腫瘤細胞的短期抑制作用。
[0046]實施例2 MTT法檢測鹽酸阿米洛利與厄洛替尼、吉非替尼聯(lián)合用藥對人非小細胞肺癌HCC-827、NC1-H 292、H1975的細胞毒作用
[0047]實驗材料:
[0048]人非小細胞肺癌細胞HCC-827、NC1-H292、H1975 (中科院上海細胞庫)于37°C，5%0)2條件下常規(guī)培養(yǎng)，培養(yǎng)基為含10%胎牛血清(Hyclone)的RPM1-1640 (Gibco)0鹽酸阿米洛利標準品購自中國藥品生物制品檢定所，母液50mM由DMSO配制。鹽酸厄洛替尼、吉非替尼原料藥由軒鴻醫(yī)藥(濟南)提供，母液IOmM DMSO配。MTT購自Sigma (美國)。
[0049]實驗方法:
[0050]1.分化良好的細胞經胰酶消化，懸浮于常規(guī)培養(yǎng)基中，并調節(jié)細胞密度為5 X IO4細胞/ml。100 μ I/孔接種于96孔培養(yǎng)板中，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。
[0051]2.次日更換培養(yǎng)基，加入相應濃度的單獨用藥或聯(lián)合用藥的藥物，給藥后的細胞于37°C，5%C02條件下培養(yǎng)48小時。
[0052]4.每孔加入10 μ I MTT (5mg/ml)溶液，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4小時。
[0053]5.洗去培養(yǎng)基，加入100μ I DMS0，置于搖床上37°C使充分溶解，以檢測波長570nm測定吸光度的值。計算細胞的生長抑制率。N=4，實驗平行三次。
[0054]實驗結果顯示，在HCC-827、NC1-H292、H1975細胞上鹽酸阿米洛利增加了鹽酸厄洛替尼及吉非替尼對腫瘤細胞的短期抑制作用(如圖1所示)。
[0055]實施例3鹽酸阿米洛利增敏鹽酸厄洛替尼、吉非替尼的長期生長抑制試驗
[0056]實驗材料:
[0057]吉姆薩染液購自Sigma-Aldrich(071M4343);其余材料同實施例1。
[0058]實驗方法:
[0059]1.分化良好的細胞經胰酶消化，懸浮于常規(guī)培養(yǎng)基中，并調節(jié)細胞密度為IXlO3細胞/ml。600 μ I/孔接種于6孔培養(yǎng)板中(培養(yǎng)板預先放1.9mL培養(yǎng)基),于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。
[0060]2.72h后更換含藥培養(yǎng)基，使單獨用藥組鹽酸阿米洛利的終濃度為100 μ Μ，鹽酸厄洛替尼和吉非替尼的終濃度分別為10 μ Μ，聯(lián)合用藥組含有上述兩種相同終濃度的藥物。空白對照組含DMSO 0.3%。
[0061]3.將給藥后的細胞于37°C，5%C02條件下培養(yǎng)6天。
[0062]4.去掉含藥培養(yǎng)基，加入新鮮空白培養(yǎng)基，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6天。
[0063]5.去掉培養(yǎng)基，PBS洗一遍。加入吉姆薩染液染色I小時，數(shù)碼相機拍照。
[0064]實驗結果:
[0065]選取代表性的實驗結果如圖2所示，結果顯示，在calu-6細胞上鹽酸阿米洛利增加了鹽酸厄洛替尼及吉非替尼對腫瘤細胞的長期抑制作用。
[0066]實施例4鹽酸阿米洛利增敏鹽酸厄洛替尼、吉非替尼對HCC-827、NC1-H292和H1975細胞的長期生長抑制試驗
[0067]實驗材料:
[0068]吉姆薩染液購自Sigma-Aldrich(071M4343);其余材料同實施例1。
[0069]實驗方法:
[0070]1.分化良好的細胞經胰酶消化，懸浮于常規(guī)培養(yǎng)基中，并調節(jié)細胞密度為IXlO3細胞/ml。600 μ I/孔接種于6孔培養(yǎng)板中(培養(yǎng)板預先放1.9mL培養(yǎng)基),于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。
[0071]2.72h后更換含藥培養(yǎng)基，將給藥后的細胞于37°C，5%C02條件下培養(yǎng)21天，每4
天更換一次含藥培養(yǎng)基。
[0072]3.去掉培養(yǎng)基，PBS洗一遍。加入吉姆薩染液染色I小時，數(shù)碼相機拍照。
[0073]實驗結果顯示，在HCC-827、NC1-H292和H1975細胞上鹽酸阿米洛利增加了鹽酸厄洛替尼及吉非替尼對腫瘤細胞的長期抑制作用(如圖2所示)。
[0074]實施例5鹽酸阿米洛利聯(lián)用鹽酸厄洛替尼、吉非替尼對EGFR磷酸化及其下游信號通路的影響
[0075]實驗材料:
[0076]RIPA裂解液、PMSF購自碧云天生物生物技術研究所(江蘇)。Protease InhibitorCocktail 購自 Merck 公司(德國)?？?P-EGFR—抗購自 Invitrogen,抗 P-STAT3、P_Akt、P-Erk —抗購自cell Signaling Technology,抗β-actin—抗、抗小鼠及抗兔二抗均購自Santa Cruze ;其余材料同實施例1。
[0077]實驗方法:
[0078]1.細胞培養(yǎng)及給藥
[0079]分化良好的細胞經胰酶消化，懸浮于常規(guī)培養(yǎng)基中，并調節(jié)細胞密度為5X103細胞/孔接種于6孔培養(yǎng)板中。
[0080]培養(yǎng)48h后加入含藥培養(yǎng)基，使鹽酸阿米洛利的終濃度為400 μ Μ,鹽酸厄洛替尼的終濃度為30 μ Μ，空白對照組含DMSO 1.1%。
[0081]將給藥后的細胞于37°C，5%C02條件下培養(yǎng)24小時。
[0082]2.蛋白提取:
[0083]臨用前將PMSF(IOOmM, 1:100)及 Protease Inhibitor Cocktail Set III (1:200)加入RIPA裂解液；
[0084]6孔板培養(yǎng)的細胞倒去培養(yǎng)基后，用PBS清洗一遍，加入150 μ I裂解液冰浴裂解20min ；
[0085]裂解后轉移至EP管中，9000g離心5min ；
[0086]吸取上清進行定量，同時取部分上清,加入1/4體積的上樣緩沖液(5X )，90_95°C煮 8min ；
[0087]變性后的蛋白保存于_80°C冰箱中。
[0088]3.Western Blot 檢測 P-EGFR、p_STAT3、P-Akt、P-Erk 的表達
[0089]上樣量:BCA蛋白定量藥盒對各組提取的蛋白樣品進行定量，校正后蛋白樣品上樣量為60 μ g ;
[0090]電泳方法:60V恒壓 電泳50分鐘進行樣品的濃縮；120V電泳I小時進行樣品的分離，根據marker判斷電泳程度；
[0091]轉膜:采用濕轉，200mA，橫流轉膜2小時；
[0092]抗體雜交:首先用5%的BSA (封閉液)在37°C搖床上封閉I小時；用封閉液將一抗按說明書稀釋，將轉好的膜在雜交袋中4°C雜交過夜；TBST洗膜四次(37°C搖床，每次5mL，5min);用封閉液將二抗稀釋，在雜交袋中37°C搖床雜交I小時；TBST洗膜四次后進行化學發(fā)光檢測；
[0093]化學發(fā)光檢測:采用增強型化學發(fā)光法(ECL法)進行目的蛋白的檢測。
[0094]實驗結果:
[0095]選取代表性的實驗結果如圖3所示，結果顯示，在calu-6細胞上鹽酸阿米洛利增加了鹽酸厄洛替尼及吉非替尼對P-EGFR的抑制作用。
【權利要求】
1.一種抗肺癌藥物組合物，其特征在于，含有作為聯(lián)合制劑供同時、分開或順序使用的治療有效量的阿米洛利和表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑EGFR-TKI。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，其含有的阿米洛利和EGFR-TKI，兩者的摩爾比為500:1~1:50。
3.根據權利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于，所述阿米洛利以堿基形式或者鹽的形式存在，包括但不限于鹽酸鹽、硫酸鹽。
4.根據權利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物中，以阿米洛利為母核的衍生物，包括但不限于二甲基氨氯吡咪、5-N-乙基-N-異丙基阿米洛利、甲基異丁基阿米洛利和5-N，N-環(huán)己烷阿米洛利。
5.根據權利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于，所述以抑制表皮生長因子酪氨酸激酶為靶點的抗腫瘤藥，包括但不限于厄洛替尼、吉非替尼。
6.阿米洛利和EGFR-TKI的組合在制備抗肺癌藥物中的用途。
7.根據權利要求6所述的用途，其特征在于，所述阿米洛利和EGFR-TKI的組合中含有阿米洛利和EGFR-TKI，兩者的摩爾比為500:1~1:50。
8.根據權利要求6或7用途，其特征在于，所述阿米洛利以堿基形式或者鹽的形式存在，包括但不限于鹽酸鹽、硫酸鹽。
9.根據權利要求6或7所述的用途，其特征在于，所述阿米洛利和EGFR-TKI的組合中，以阿米洛利為母核的衍 生物，包括但不限于二甲基氨氯吡咪、5-N-乙基-N-異丙基阿米洛利、甲基異丁基阿米洛利和5-N，N-環(huán)己烷阿米洛利。
10.根據權利要求6或7所述的用途，其特征在于，所述阿米洛利和EGFR-TKI的組合中，以抑制表皮生長因子酪氨酸激酶為靶點的抗腫瘤藥，包括但不限于厄洛替尼、吉非替尼。
11.一種抗肺癌用藥盒，包括含有鹽酸阿米洛利的第一藥盒單元和含有EGFR-TKI的第二藥盒單元。
12.根據權利要求11所述的藥盒，其特征在于，所述含有鹽酸阿米洛利的第一藥盒單元包括臨床有效劑量的鹽酸阿米洛利，所述含有EGFR-TKI的第二藥盒包括臨床有效劑量的 EGFR-TKI。
13.根據權利要求11或12所述的藥盒，其特征在于，所述鹽酸阿米洛利和EGFR-TKI的組合中，以抑制表皮生長因子酪氨酸激酶為靶點的抗腫瘤藥，包括但不限于厄洛替尼、吉非替尼。
14.一種包裝抗肺癌藥物用的包裝件，其特征在于，包括包裝空間彼此獨立的含有阿米洛利的第一包裝單元和含有EGFR-TKI的第二包裝單元。
15.根據權利要求14所述的包裝件，其特征在于，所述含有阿米洛利的第一包裝單元包括臨床有效劑量的鹽酸阿米洛利，所述含有EGFR-TKI的第二包裝單元包括臨床有效劑量的 EGFR-TKI。
16.根據權利要求14或15所述的包裝件，其特征在于，所述含有阿米洛利和含有EGFR-TKI的組合中，以抑制表皮生長因子酪氨酸激酶為靶點的抗腫瘤藥，包括但不限于厄洛替尼、吉非替尼。
17.根據權利要求11-13中任一項所述的藥盒或權利要求14-16中任一項所述的包裝件，其特征在于，還包括說明書，該說明書中規(guī)定，所述含有臨床有效劑量鹽酸阿米洛利的單元和所述含有臨床 有效劑量的EGFR-TKI的單元，作為聯(lián)合應用于抗肺癌治療的制劑。
【文檔編號】A61K45/00GK103933569SQ201310753527
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2013年12月31日 優(yōu)先權日:2013年1月22日
【發(fā)明者】鄭媛婷, 蔡衛(wèi)民, 李濤, 邵騰飛, 周寧, 楊慧瑩 申請人:復旦大學