2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物及其制備方法與用途
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物及其制備方法與用途，可有效解決2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物的制備及實(shí)現(xiàn)2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，方法是，以2-甲氧基-3-芐氧基-雌甾-1,3,5(10)-三烯-17β-醇或17β-胺為原料，溶于有機(jī)溶劑中，在Lewis堿存在下與化合物（1）進(jìn)行?；磻?yīng)得到2-甲氧基-3-芐氧基-雌甾-1,3,5(10)-三烯-17β-酯或17β-酰胺化合物（2），然后經(jīng)催化加氫反應(yīng)得到化合物（3），最后再經(jīng)?；磻?yīng)或烴化反應(yīng)得到化合物2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物（4），反應(yīng)式為：本發(fā)明2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物的制備方法簡(jiǎn)單，條件溫和，收率高，可有效用于抗腫瘤藥物制劑的開(kāi)發(fā)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物及其制備方法與用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物及其制備方法與用途。
【背景技術(shù)】
[0002]20世紀(jì)70年代，在研究雌激素代謝過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)了雌二醇的內(nèi)源性代謝產(chǎn) 物2-甲氧基雌二醇（2-methoxyestradiol, 2-ME),它是在體內(nèi)的細(xì)胞色素P450s氧化 酶和兒茶酚-0-甲基轉(zhuǎn)移酶（C0MT)的作用，雌二醇進(jìn)行有序的羥基化和甲基化而產(chǎn)生 的。2-甲氧基雌二醇存在于正常人的尿液、血液中，據(jù)報(bào)道2-甲氧基雌二醇在男性及未 懷孕的婦女血衆(zhòng)中含量較低（分別為10?35pg ? mF1和18?138pg ? mF1),而在孕婦 血楽中含量較高（可達(dá) 216 ?10690pg ? mr1) (Dubey R. K. et al. Trends Endocrinol Metab. 2009，20 (80) : 374-379 )。研究發(fā)現(xiàn)2ME具有廣譜的抗腫瘤作用，且治療的耐受 性較好。Cushman M.等報(bào)道2-ME可以對(duì)多達(dá)55種不同腫瘤細(xì)胞有抑制作用（Cushman M. et al. J Med Chem. 1995，38 (12) : 2041-2049)，2-ME 單獨(dú)或聯(lián)合其他化療藥物可用于 治療乳腺癌、胃癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、多發(fā)性骨髓瘤及白血病等。Susan等研究發(fā)現(xiàn) 2ME只作用于活躍增殖期的癌細(xì)胞，并有相對(duì)較高的特異性，而對(duì)靜止期的細(xì)胞無(wú)作用， 因而不良反應(yīng)較?。⊿usan, et al. Drug Resist Updates. 2003，6 (6) : 355-361 )，具有高效 低毒、靶向性強(qiáng)、不易耐藥等優(yōu)點(diǎn)。另外，2ME對(duì)雌激素受體的親和力較弱，并且沒(méi)有雌二 醇或其他的雌二醇代謝物相關(guān)的一些雌激素活性（Pribluda V. S. et al. Cancer Metast Rev. 2000, 19:173-200)，因此2ME有可能成為一種高效低毒的抗癌新藥。目前，2-甲氧雌 二醇已由EntreMed公司注冊(cè)，以商品名Panzem進(jìn)行開(kāi)發(fā)，作為單一療法用于穩(wěn)定的或復(fù)發(fā) 的多發(fā)性骨髓瘤和前列腺癌治療、與多西他賽（docetaxel，Taxotere)聯(lián)合用于激素難治 性前列腺癌的II期臨床研究階段，新適應(yīng)癥抗風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎研究處于I期臨床試驗(yàn)階段。 Sanofi-aventis (賽諾菲-安萬(wàn)特）公司，Allergan (眼力健）公司等獲得部分適應(yīng)癥授權(quán) 并分別進(jìn)入I、II或III期臨床試驗(yàn)。
[0003]然而，2-ME要廣泛應(yīng)用于臨床還存在一些急需解決的問(wèn)題：（1) 2-ME是一種濃 度時(shí)間依賴(lài)性的抗腫瘤藥物，在水中溶解度極低（37°C水中約為1. 669 u g ? ml—1，脂水分 配系數(shù)約2. 86 (郭新紅等，鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版)，2010，45(1): 141-143)) (2) 口服吸 收和劑量之間缺乏相關(guān)性，在體內(nèi)又易快速羥基化、脫氫等生物變化產(chǎn)生非活性的代謝 產(chǎn)物，導(dǎo)致半衰期較短(約20min)，生物利用度較低，口服血藥及組織藥物濃度極低（小 于100ng ? mr1),不能滿(mǎn)足藥物本身的時(shí)間劑量依賴(lài)性的藥理學(xué)作用特點(diǎn)（James J, et al. Invest New Drugs，2007，25:41-48)。另外，在對(duì)2-ME衍生物的構(gòu)效關(guān)系（SAR)研究中發(fā) 現(xiàn)，2-ME存在的主要問(wèn)題不是其抗腫瘤活性較低，而是其在體內(nèi)較快的首過(guò)代謝(Agoston G.E.et al. Bioorg Med Chem Lett, 2009，19:6241-6244)。這提示我們?cè)趯?duì) 2-ME 的結(jié)構(gòu)進(jìn) 行修飾時(shí)應(yīng)著重減緩2-ME衍生物在體內(nèi)的代謝，而不僅是提高其體外干擾微管聚合或抑 制增殖作用。2-ME的水溶性低、口服劑量大、吸收無(wú)規(guī)律、半衰期較短、存在首過(guò)效應(yīng)及生物 利用度低等缺點(diǎn)限制著2-ME的臨床應(yīng)用。因此，以2-ME為先導(dǎo)化合物對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和改造是一個(gè)可行的并且有價(jià)值的途徑。
[0004]國(guó)外早在20世紀(jì)80年代就有關(guān)于2-甲氧基雌二醇衍生物研究的報(bào)道，有關(guān)其衍生物的研究主要是在近20年中進(jìn)行的。研究者主要是針對(duì)其2-位、3-位、16-位和17-位等進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾研究。在這些研究成果中，有代表性的是ENMD-1198 (Zhou Q.etal.1nvest New Drugs.2011，29:340-346)和STX140(Newman S.P.et al.Cell Clin CancerRes.2008，14:597-606)，目前已進(jìn)入I期臨床實(shí)驗(yàn)階段，有較好的耐受性，毒副作用小。另外還有部分2-ME衍生物也顯示了較好的抗腫瘤活性。因此對(duì)2-甲氧基雌二醇進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和改造是一種獲得新型抗腫瘤藥物的有效途徑，具有現(xiàn)實(shí)意義和研究?jī)r(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物及其制備方法與用途，可有效解決2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物的制備及實(shí)現(xiàn)2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，本發(fā)明的2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物其結(jié)構(gòu)通式為:
[0007]
【權(quán)利要求】
1.一種2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物，其特征在于，其結(jié)構(gòu)通式為:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物，其特征在于，為下列通式化合物的一種:
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物，其特征在于，所述的通式(I)化合物為下列中的一種:
4.權(quán)利要求1所述的2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物的制備方法，其特征在于，反應(yīng)式為:
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物的制備方法，其特征在于，在冰浴條件下，將0.48g2-甲氧基-3-芐氧基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-17 β-醇溶于IOml 二氯甲烷中，邊攪拌邊滴加入0.417ml三乙胺；慢慢滴加含0.14ml氯乙酰氯的二氯甲烷溶液，控制滴速約I滴/2s，30min內(nèi)滴加完畢；室溫下繼續(xù)攪拌，薄層檢測(cè)至完全反應(yīng)，向反應(yīng)液中加入適量水，并用二氯甲烷萃取3次，合并有機(jī)相，再依次蒸餾水、飽和碳酸氫鈉、飽和食鹽水各洗I次，無(wú)水硫酸鈉干燥，抽濾，濾液減壓濃縮，再用適量甲醇重結(jié)晶，得白色針狀2-甲氧基-3-芐氧基-17 β -羥基-雌甾-1, 3，5 (10)-三烯-氯乙酸酯0.52g，收率92.98% ； 在60°C條件下，將2-甲氧基-3-節(jié)氧基-17 β -羥基_雌留-1, 3, 5 (10) - 二稀_氣乙酸酯溶于50ml乙醇中，加入0.03g質(zhì)量含量為10%鈀碳催化劑，維持氫氣壓力為50psi，薄層檢測(cè)至完全反應(yīng)，抽濾除`去鈀碳，減壓濃縮溶劑，經(jīng)甲醇重結(jié)晶析出白色粉末狀2-甲氧基-3，17 β - 二羥基-雌甾-1, 3，5 (10)-三烯-17-氯乙酸酯0.38g，收率90%。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物的制備方法，其特征在于，冰浴下將無(wú)水甲酸169.8μ I逐滴加入到氯磺酰異氰酸酯391.8μ I中，快速攪拌，15分鐘后往體系加入乙腈6ml，室溫?cái)嚢?小時(shí)；然后在冰浴條件下，慢慢加入含有1.50g的2-甲氧基-3-芐氧基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-17 β -醇的N，N- 二甲基乙酰胺溶液8ml，繼續(xù)攪拌反應(yīng)兩小時(shí)；然后加入蒸餾水20ml，用乙酸乙酯萃取三次，有機(jī)相加入無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，抽濾，蒸干溶劑，用柱層析硅膠過(guò)柱，流動(dòng)相為乙酸乙酯:石油醚=1:3，得白色粉末狀固體2-甲氧基-3-芐氧基-17 β-羥基-雌甾_1，3，5 (10)-三烯-17-氨基磺酸酯1.56g，產(chǎn)率87% ; 用50ml乙醇將2-甲氧基-3-芐氧基-17 β-羥基-雌留_1，3，5 (10)-三烯-17-氨基磺酸酯1.0Og溶解，放置在鋼瓶中，加入質(zhì)量含量為10%的鈀碳50mg，攪拌，油浴60°C，在50-60psi氫氣壓力下反應(yīng)；4小時(shí)后，由體積比計(jì)二氯甲烷:丙酮=15: I作薄層色譜檢測(cè)，反應(yīng)完全后，將混合物用200-300目的柱硅膠過(guò)濾，濾液濃縮得到白色粉末2-甲氧基-3，17 β - 二羥基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-17-氨基磺酸酯0.72g，收率90% ； 在冰浴條件下，將120mg2-甲氧基-3，17 β - 二羥基-雌甾_1，3，5 (10)-三烯-17-氨基磺酸酯溶于二氯甲烷中，邊攪拌邊滴加入65 μ I三乙胺；取50μ I正丁酰氯，用5ml 二氯甲燒稀釋后，加入恒壓滴液漏斗中，控制滴速約I滴/2s,30min內(nèi)滴加完畢,將反應(yīng)體系置于室溫下，繼續(xù)攪拌2h，然后分別用蒸餾水、10%碳酸氫鈉溶液、飽和氯化鈉溶液各洗滌2次，IOml/次，取有機(jī)層加入無(wú)水硫酸鎂干燥4-5h后，過(guò)濾，旋蒸除去溶劑，得透明油狀物，經(jīng)柱層析，得化合物2-甲氧基-3- 丁酰氧基-17 β -羥基-雌留-1, 3，5 (10)-三烯-17-氨基磺酸酯116mg，收率82%。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物的制備方法，其特征在于，在冰浴條件下，將0.300g2-甲氧基-3-節(jié)氧基-雌留-1, 3, 5 (10) -二烯-17 β _胺溶于IOml乙酸乙酯中，邊攪拌邊滴加入0.1Oml吡啶；然后慢慢滴加0.159ml正丁酰氯的乙酸乙酯溶液，控制滴速約I滴/2s，30min內(nèi)滴加完畢；室溫?cái)嚢?，薄層檢測(cè)至完全反應(yīng)，向反應(yīng)液中加入適量水，并用二氯甲烷萃取3次，合并有機(jī)相，再依次水洗、飽和碳酸氫鈉、飽和食鹽水各洗I次，無(wú)水硫酸鈉干燥，抽濾，濾液減壓濃縮，再用甲醇重結(jié)晶，得2-甲氧基-3-芐氧基-17 β -N-正丁酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯0.253g，收率71.5% ； 在60°C，將0.200g2-甲氧基-3-芐氧基-17 β -N-正丁酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯溶于50ml乙醇中，加入0.02gl0%鈀碳催化劑，并在氫氣壓力為50psi的作用下反應(yīng)，薄層檢測(cè)至完全反應(yīng)，抽濾除去鈀碳，減壓濃縮溶劑，經(jīng)體積比計(jì)乙酸乙酯:石油醚=1:2柱層析得2-甲氧基-17 β -N-正丁酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-醇0.138g，收率85.7%。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物的制備方法，其特征在于，在冰浴條件下，將0.300g2-甲氧基-3-芐氧基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-17 β -胺溶于IOml四氫呋喃中，邊攪拌邊滴加入0.10ml4-二甲氨基吡啶；然后慢慢滴加76mg丁二酸酐的四氫呋喃溶液，控制滴速約I滴/2s，30min內(nèi)滴加完畢；室溫?cái)嚢?，薄層檢測(cè)至完全反應(yīng)，向反應(yīng)液中加入適量水，并用二氯甲烷萃取3次，合并有機(jī)相，再依次水洗、飽和碳酸氫鈉、飽和食鹽水各洗I次，無(wú)水硫酸鈉干燥，抽濾，濾液減壓濃縮，再用乙醇重結(jié)晶，得到2-甲氧基-3-芐氧基-17β-Ν-3'-羧基丙酰胺基-雌甾_1，3，5 (10)-三烯0.30g，收率80.3% ; 在60 °C，將0.30g2-甲氧基-3-芐氧基-17 β -Ν-3 !-羧基丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯溶于50ml乙醇中，加入0.03gl0%鈀碳催化劑，并在氫氣壓力為50psi的作用下反應(yīng)，薄層檢測(cè)至完全反應(yīng)，抽濾除去鈀碳，減壓濃縮溶劑，經(jīng)體積比計(jì)乙酸乙酯:石油醚=1: 2柱層析得2-甲氧基-17 β -Ν-3，-羧基丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-醇 0.214g，收率 87.5%。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物的制備方法，其特征在于，在室溫的條件下，將0.605g的N-叔丁氧擬基-β _丙氨酸和1.16g2-甲氧基-3-節(jié)氧基-雌留-1, 3, 5(10)-三烯-17 β -胺溶于75ml乙酸乙酯中，邊攪拌邊先后加入0.93g縮合劑1，3- 二環(huán)己基碳二亞胺和0.01Og催化劑4- 二甲氨基吡啶，攪拌10小時(shí)，反應(yīng)完全后，過(guò)濾，濾液減壓濃縮，得淡黃色油狀物，經(jīng)柱色譜純化，得到2-甲氧基-3-芐氧基-17 β -Ν-3' - (N-叔丁氧羰基)氨基-丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯白色固體1.51g，收率為89.3%； 然后將1.51g2-甲氧基-3-芐氧基-17β-Ν-3' -(N-叔丁氧羰基)氨基-丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯白色固體溶于無(wú)水乙醇中，加入0.5g的質(zhì)量含量10%鈀碳催化劑，加氫至壓力為60Psi，反應(yīng)4小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮，得灰白色固體，用乙酸乙酯-石油醚混合溶劑重結(jié)晶，得到2-甲氧基-17 β-N_3' -(N-叔丁氧擬基)氨基-丙酸胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-醇白色固體1.19g，收率94% ；將1.0g2-甲氧基-17β-Ν-3 ' -(N-叔丁氧羰基)氨基-丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-醇白色固體溶于二氯甲烷，然后慢慢滴加1.31g甲基膦酸二異丁酯，然后加入15.46ml氨基磺酰氯，混合液在室溫下攪拌反應(yīng)20小時(shí)，然后分別用乙酸乙酯和蒸餾水萃取，有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，干燥，濃縮，然后經(jīng)色譜柱純化得到2-甲氧基-17 β -Ν-3/ - (N-叔丁氧羰基)氨基-丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-氨基磺酸酯 1.04g，收率 90% ； 然后將1.04g2-甲氧基-17β-Ν-3，-(N-叔丁氧羰基)氨基-丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-氨基磺酸酯溶于IOml 二氯甲烷溶液，滴加2ml85%磷酸水溶液，室溫下劇烈攪拌反應(yīng)8小時(shí)，混合物用25ml蒸餾水稀釋并冷卻到0°C，用乙酸乙酯萃取3次，每次用量30ml，有機(jī)層用硫酸鎂干燥，濃縮得到白色固體2-甲氧基-17 β-Ν-3'-氨基-丙酰胺基-雌留-1, 3，5 (10)-三烯-3-氨基磺酰酯0.75g，收率88%。
10.權(quán)利要求1或2-4所 述的2-甲氧基雌二醇類(lèi)似物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K31/565GK103772463SQ201310753425
【公開(kāi)日】2014年5月7日 申請(qǐng)日期:2013年12月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月30日
【發(fā)明者】施秀芳, 張振中, 姚海峰, 孫帥軍, 吳丹丹, 景飛, 路翔, 李鵬 申請(qǐng)人:鄭州大學(xué)