一種核桃葉水提物的制備方法及所得核桃葉醇液和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種核桃葉水提物的制備方法及所得的核桃葉醇液和應(yīng)用，制備方法包括以下步驟：將核桃葉干燥、用水浸泡，然后加熱煮沸，收集餾出成分，即為核桃葉水提物。本發(fā)明針對(duì)核桃廢葉多、未充分利用的問題，以核桃廢葉為原料，采用簡(jiǎn)單的水煮蒸餾的方法提取核桃葉中的有效成分，變廢為寶，為核桃葉的藥用有效成份的研究提供一種簡(jiǎn)單易行、清潔高效的制備方法，所得的核桃葉醇液經(jīng)驗(yàn)證具有抑菌、抑制癌細(xì)胞再生的功效，可用于抗腫瘤藥物領(lǐng)域。
【專利說明】一種核桃葉水提物的制備方法及所得核桃葉醇液和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種核桃葉有效成份的提取方法，具體涉及一種核桃葉水提物的制備方法、所得核桃葉醇液以及核桃葉醇液的應(yīng)用，屬于植物有效成份提取【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]核桃又名胡桃、羌桃，是胡桃科核桃屬落葉喬木。因其種仁營(yíng)養(yǎng)豐富，風(fēng)味獨(dú)特，為世界四大干果之一；又由于其含油量高，油味清香，成為高級(jí)食用及工業(yè)用油，同時(shí)具有醫(yī)療、保健功能。核桃的木材質(zhì)地堅(jiān)硬、紋理美觀，是軍事工業(yè)和高級(jí)家具、雕刻工藝、樂器等的珍貴木材。其樹皮、果皮、根皮、枝葉中均含有大量的單寧，是栲膠、鞣料及染料工業(yè)極為重要的原料。核桃花粉量大，營(yíng)養(yǎng)豐富，是新型花粉食品的重要原料。此外，由于核桃枝葉茂盛，根系龐大，對(duì)綠化山川，保持水土和改善環(huán)境方面也都發(fā)揮著良好的作用。因此，核桃渾身是寶，用途廣泛，經(jīng)濟(jì)價(jià)值極高，是我國(guó)特種經(jīng)濟(jì)樹種之一。
[0003]核桃葉中含有多種有效成分，如水溶性成分、維生素C、B、D、E，揮發(fā)油、黃酮類物質(zhì)等，核桃葉也可入藥，具有抑菌、解毒、消腫、改善新陳代謝、促進(jìn)肌體強(qiáng)壯的功效，現(xiàn)代研究表明，核桃葉還具有抗癌、抗腫瘤活性的作用。濟(jì)南周邊有20多萬畝核桃園，每天有無數(shù)的廢核桃葉產(chǎn)生，這些廢核桃葉一般作為廢棄物拋棄或者焚燒，沒有充分利用。如果將這些廢核桃葉充分收集起來，提取其中的藥用有效成分，可以使核桃葉變廢為寶，符合節(jié)約資源、可循環(huán)發(fā)展的要求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種核桃葉水提物的制備方法，該方法簡(jiǎn)便易行，充分提取核桃葉中有效成分，成本低，資源回用，變廢為寶。
[0005]本發(fā)明的目的還在于 提供采用上述方法得到的核桃葉水提物——核桃葉醇液。
[0006]本發(fā)明的目的還在于提供核桃葉醇液的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明技術(shù)方案如下:
一種核桃葉水提物的制備方法，其特征是包括以下步驟:將核桃葉干燥、用水浸泡，然后加熱煮沸，收集餾出成分，即為核桃葉水提物。
[0008]本發(fā)明制備方法，具體包括以下步驟:
(1)、將核桃葉干燥，放入帶有冷凝器的加熱容器中，壓實(shí)，加入水浸泡，水位沒過核桃
葉；
(2)、浸泡后加熱煮沸，同時(shí)收集餾出成分，當(dāng)水位降至接近核桃葉位置時(shí)向加熱容器中重新加水至初始位置，繼續(xù)加熱煮沸，收集餾出成分，所得餾出成分即為核桃葉水提物。
[0009]上述制備方法中，所采用的核桃葉包括核桃落葉或枯葉，可以為泰安、濟(jì)南附近南部山區(qū)核桃樹的落葉、枯葉。
[0010]上述制備方法中，將核桃葉清洗后干燥，核桃葉干燥方法為自然晾曬或烘干。
[0011]上述制備方法中，步驟(I)中，加水至沒過核桃葉10-20cm為宜。[0012]上述制備方法中，步驟(2)中，水位降至沒過核桃葉2_4cm時(shí)重新加入水。
[0013]上述制備方法中，浸泡溫度為常溫或40_70°C，浸泡時(shí)間為0.5-2小時(shí)。
[0014]上述制備方法中，還包括以下優(yōu)選方法:核桃葉浸泡前，進(jìn)行以下處理:將核桃葉用液氮在-50~-60 °C進(jìn)行急速冷凍處理，處理時(shí)間為10-20min，急速冷凍后再在-10~_20°C下進(jìn)行冷凍儲(chǔ)藏。
[0015]上述制備方法中，加熱煮沸階段在氮?dú)鈿夥障逻M(jìn)行。
[0016]按照上述方法得到的核桃葉醇液也在本發(fā)明保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0017]本發(fā)明核桃葉醇液在制備抗腫瘤藥物中有較好的作用。
[0018]本發(fā)明針對(duì)核桃廢葉多、未充分利用的問題，以核桃廢葉為原料，采用簡(jiǎn)單的水煮蒸餾的方法提取核桃葉中的有效成分，變廢為寶，為核桃葉的藥用有效成份的研究提供一種簡(jiǎn)單易行、清潔高效的制備方法。所得的核桃葉醇液經(jīng)驗(yàn)證具有抑菌、抑制癌細(xì)胞再生的功效，可用于抗腫瘤藥物領(lǐng)域。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0019]圖1核桃葉提取設(shè)備的示意圖。
[0020]圖中，1、物料托架，2、反應(yīng)釜，3、冷凝器，4、冷凝盤管，5、導(dǎo)管。
【具體實(shí)施方式】
[0021]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說明。
[0022]本發(fā)明提取有效成分時(shí)，可以選用普通的可加熱的反應(yīng)容器，也可以使用下述本發(fā)明自行設(shè)置的提取裝置，該提取裝置如圖1所示，包括反應(yīng)釜(即加熱容器)2和冷凝器3，反應(yīng)釜內(nèi)底部設(shè)有物料托架1，冷凝器內(nèi)設(shè)有螺旋狀的冷凝盤管4，反應(yīng)釜上連接一導(dǎo)管5，導(dǎo)管一端與反應(yīng)釜頂部連通，另一端與冷凝器頂部連通，導(dǎo)管與冷凝器相連的一端向下傾斜，且導(dǎo)管向下傾斜0-30°。
[0023]上述裝置中，反應(yīng)釜的供熱設(shè)施可以是炭火、木材等一次能源加熱，也可以采用導(dǎo)熱油、電、蒸汽加熱，農(nóng)、工皆宜，使用便捷，可以簡(jiǎn)便的實(shí)現(xiàn)有效成分的提取和分離。
[0024]實(shí)施例1 本發(fā)明提取步驟如下:
1、收集濟(jì)南或泰安地區(qū)的核桃枯葉或落葉，清洗干凈，自然晾曬至黃褐色，放置于干燥處待用；
2、稱取核桃葉2.5kg放入加熱容器(反應(yīng)釜)內(nèi)，壓實(shí)，使廢葉緊密的位于加熱容器中，壓好廢葉后，加水至沒過核桃葉10-20cm，一般15cm左右，常溫浸泡2h ；
3、在加熱容器上安裝上冷凝器，通冷凝水，對(duì)加熱容器通氮?dú)猓瑢⑷萜鲀?nèi)的空氣全部置換掉，并在氮?dú)獾臍夥障麻_始對(duì)容器進(jìn)行加熱，直至沸騰，維持沸騰狀態(tài)，開始收集餾出成分；待加熱容器內(nèi)水位降至沒過核桃葉2-4cm時(shí)向加熱容器內(nèi)補(bǔ)充水至原始位置(沒過核桃葉10-20cm)，繼續(xù)加熱蒸煮并收集餾出成分。把兩次收集的餾出成分合并，即為核桃葉水提物——核桃葉醇液。
[0025]實(shí)施例2 本發(fā)明提取步驟如下 :1、收集濟(jì)南或泰安地區(qū)的核桃枯葉或落葉，清洗干凈，烘干水分至黃褐色，放置于干燥處待用；
2、稱取核桃葉2.0kg放入加熱容器(反應(yīng)釜)內(nèi)，壓實(shí)，使廢葉緊密的位于加熱容器中，壓好廢葉后，加水至沒過核桃葉10-20cm，一般15cm左右，40°C浸泡Ih ；
4、在加熱容器上安裝上冷凝器，通冷凝水，對(duì)加熱容器通氮?dú)?，將容器?nèi)的空氣全部置換掉，并在氮?dú)獾臍夥障麻_始對(duì)容器進(jìn)行加熱，直至沸騰，維持沸騰狀態(tài)，開始收集餾出成分；待加熱容器內(nèi)水位降至沒過核桃葉2-4cm時(shí)向加熱容器內(nèi)補(bǔ)充水至原始位置(沒過核桃葉10-20cm)，繼續(xù)加熱蒸煮并收集餾出成分。把兩次收集的餾出成分合并，即為核桃葉水提物——核桃葉醇液。 [0026]實(shí)施例3
按照實(shí)施例1的方法提取核桃葉水提物，不同的是:將核桃葉在70°C浸泡30min。
[0027]實(shí)施例4
1、收集濟(jì)南或泰安地區(qū)的核桃枯葉或落葉，清洗干凈，自然晾曬至黃褐色，放置于干燥處待用；
2、將核桃葉用液氮在-50~_60°C進(jìn)行急速冷凍處理，處理時(shí)間為10-20min，急速冷凍后再在-10~-20°C下進(jìn)行冷凍儲(chǔ)藏；
4、從冷凍儲(chǔ)藏室中稱取核桃葉2.5kg放入加熱容器(反應(yīng)釜)內(nèi)，壓實(shí)，使廢葉緊密的位于加熱容器中，壓好廢葉后，加水至沒過核桃葉10-20cm，一般15cm左右，常溫浸泡2h ；
5、在加熱容器上安裝上冷凝器，通冷凝水，對(duì)加熱容器通氮?dú)猓瑢⑷萜鲀?nèi)的空氣全部置換掉，并在氮?dú)獾臍夥障麻_始對(duì)容器進(jìn)行加熱，直至沸騰，維持沸騰狀態(tài)，開始收集餾出成分；待加熱容器內(nèi)水位降至沒過核桃葉2-4cm時(shí)向加熱容器內(nèi)補(bǔ)充水至原始位置(沒過核桃葉10-20cm)，繼續(xù)加熱蒸煮并收集餾出成分。把兩次收集的餾出成分合并，即為核桃葉水提物——核桃葉醇液。
[0028]采用此急速冷凍方法處理核桃廢葉后，葉子中的有效成分得到充分的保留，不會(huì)變質(zhì)和損失，提取所得有效成分的含量和品質(zhì)都得到了提升。
[0029]一、核桃葉提取物抑菌作用的研究 1、實(shí)驗(yàn)材料
1.1主要試劑
乙醇、瓊脂、牛肉膏、蛋白胨、K2HPO4、KH2PO4、MgS04、NaCl
1.2主要材料與儀器
供試細(xì)菌:枯草桿菌，金黃色葡萄球菌，根霉，曲霉；
主要儀器:電熱鼓風(fēng)干燥箱，電子天平，振蕩儀，恒溫水浴箱，電子調(diào)溫電熱套，低溫冷卻液循環(huán)泵，蒸餾裝置，生化培養(yǎng)箱，無菌水高壓蒸汽滅菌鍋，超凈工作臺(tái)，濾紙，接種環(huán)，刮鏟，培養(yǎng)皿，研缽。
[0030]2、實(shí)驗(yàn)過程
2.1菌懸液的制備
供試菌種為枯草桿菌，金黃色葡萄球菌，根霉，曲霉。預(yù)先將供試驗(yàn)的菌種進(jìn)行活化。量取5ml無菌水于試管中，接種環(huán)灼燒后挑取菌種放入無菌水中，每試管中取兩環(huán)菌種，充分搖勻震蕩，得菌懸液。[0031]2.2培養(yǎng)基的制備
取 3g 牛肉膏、IOg 蛋白胨、5gNaCl、0.5gMgS04，Ig K2HPO4 , 0.5g KH2PO4，1000ml 水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，高壓蒸汽滅菌待用。
[0032]2.3抑菌實(shí)驗(yàn)
采用抑菌圈法作為檢測(cè)指標(biāo)，檢測(cè)核桃葉提取物的抑菌效果。
[0033]抑菌圈的測(cè)定方法
事先將試驗(yàn)所用器材在潔凈工作臺(tái)中用紫外光滅菌，然后在無菌操作條件下，將供試菌菌懸液各Iml，分別涂布在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上，用刮鏟涂抹均勻，然后取直徑IOmm圓片濾紙，濾紙分別浸潰在本發(fā)明實(shí)施例1提取物、本發(fā)明實(shí)施例4提取物和無菌水中，浸潰30s后取出，濾干溶液后均勻貼于培養(yǎng)基上。操作完成后，將平板在28°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)24和72h，觀察培養(yǎng)基內(nèi)各菌的生長(zhǎng)狀況。用十字交叉法測(cè)量抑菌圈直徑(_)。其中核桃葉提取物組為實(shí)驗(yàn)組，無菌水組為陰性對(duì)照組。
[0034]3、結(jié)果與分析
本發(fā)明提取物抑菌作用見下表1。
【權(quán)利要求】
1.一種核桃葉水提物的制備方法，其特征是包括以下步驟:將核桃葉干燥、用水浸泡，然后加熱煮沸，收集餾出成分，即為核桃葉水提物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是具體包括以下步驟: (1)、將核桃葉干燥，放入帶有冷凝器的加熱容器中，壓實(shí)，加入水浸泡，水位沒過核桃葉； (2)、浸泡后加熱煮沸，同時(shí)收集餾出成分，當(dāng)水位降至接近核桃葉位置時(shí)向加熱容器中重新加水至初始位置，繼續(xù)加熱煮沸，收集餾出成分，所得餾出成分即為核桃葉水提物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是:所述核桃葉包括核桃落葉或枯葉。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是:將核桃葉清洗后干燥，核桃葉干燥方法為自然晾曬或烘干。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征是:步驟(I)中，加水至沒過核桃葉10-20cm為宜；步驟(2)中，水位降至沒過核桃葉2-4cm時(shí)重新加入水。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、2或5所述的制備方法，其特征是:浸泡溫度為常溫或40-70°C，浸泡時(shí)間為0.5-2小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是:核桃葉浸泡前，進(jìn)行以下處理:將核桃葉用液氮在-50~_60°C進(jìn)行急速冷凍處理，處理時(shí)間為10-20min，急速冷凍后再在-10~_20°C下進(jìn)行冷凍儲(chǔ)藏。
8.根據(jù)權(quán)利要求 1或2所述的制備方法，其特征是:加熱煮沸階段在氮?dú)鈿夥障逻M(jìn)行。
9.一種核桃葉醇液，其特征是:采用權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的方法制得。
10.權(quán)利要求9所述的核桃葉醇液在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K127/00GK103463181SQ201310391799
【公開日】2013年12月25日 申請(qǐng)日期:2013年9月2日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月2日
【發(fā)明者】王書漢, 張其坤, 張啟明, 王斌 申請(qǐng)人:王書漢