用于猝滅自由基和調(diào)節(jié)炎癥的組合物和方法
【專利摘要】本發(fā)明提供用于猝滅自由基的組合物和方法，該組合物包含二氫槲皮素、維生素C和阿拉伯半乳聚糖，尤其是落葉松阿拉伯半乳聚糖，該組合物通過(guò)猝滅引起氧化應(yīng)激和炎癥的級(jí)聯(lián)反應(yīng)的自由基來(lái)有效增強(qiáng)落葉松阿拉伯半乳聚糖的免疫調(diào)節(jié)性質(zhì)。
【專利說(shuō)明】用于猝滅自由基和調(diào)節(jié)炎癥的組合物和方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明及其所公開(kāi)的內(nèi)容涉及猝滅哺乳動(dòng)物體內(nèi)、特別是人體內(nèi)的自由基的化合 物和方法，其導(dǎo)致抑制由氧化應(yīng)激引起的炎性細(xì)胞因子的上調(diào)以及獲得健康益處。

【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)如今，氧化應(yīng)激與人體健康之間的關(guān)系，特別是有關(guān)循環(huán)功能與患惡性腫瘤風(fēng) 險(xiǎn)之間的關(guān)系是公認(rèn)的科學(xué)（Harman, D，1067Ann N Y Acad Scil〇-21 (2006))。所有好氧生 物都需要氧。雖然人在沒(méi)有食物的情況下能夠生存數(shù)周，在沒(méi)有水的情況下能夠生存數(shù)天， 但是在沒(méi)有氧的情況下生存不會(huì)超過(guò)幾分鐘。然而，這個(gè)給予我們生命的相同分子還是衰 老的退行性疾病和衰老過(guò)程本身的根源，根本上其對(duì)我們的衰老的退行性疾病和死亡負(fù)有 責(zé)任。我們需要氧來(lái)生存，但是我們的好氧利用產(chǎn)生對(duì)我們體內(nèi)的器官、細(xì)胞、甚至細(xì)胞器、 細(xì)胞線粒體以及細(xì)胞核和核糖體的DNA和RNA具有毒性的危險(xiǎn)自由基。
[0003] 氧化應(yīng)激
[0004] 數(shù)以千計(jì)的發(fā)表的研究表明自由基導(dǎo)致了退行性疾病的發(fā)展且加速了衰老 (Knight JA. 28(6)Ann Clin Lab Sci. (1998) ；Huang H, Manton KG. 9110〇-17Front Biosci. (2004))。年輕人通常產(chǎn)生抗氧化酶、超氧化物歧化酶（SOD)、過(guò)氧化氫酶以及谷胱 甘肽過(guò)氧化物酶來(lái)減少和消除在正常生理過(guò)程中產(chǎn)生的自由基。S0D和其他重要的抗氧化 酶的水平會(huì)隨著年齡減退，從而成為與年齡有關(guān)的疾病的禍根。
[0005] 在1878年，當(dāng)將試驗(yàn)動(dòng)物暴露于純氧時(shí)第一次提到了氧毒性，并且在1899年進(jìn)一 步確立了這些有害作用。當(dāng)將試驗(yàn)動(dòng)物放入超過(guò)正常大氣壓的純氧高壓艙中時(shí)，試驗(yàn)動(dòng)物 會(huì)在幾分鐘之內(nèi)死亡。相比之下，當(dāng)在持續(xù)數(shù)天的時(shí)間內(nèi)緩慢提升純氧的壓力時(shí)，試驗(yàn)動(dòng)物 會(huì)存活下來(lái)，這是因?yàn)樗鼈兊纳眢w有時(shí)間產(chǎn)生高于正常的水平的可誘導(dǎo)抗氧化酶來(lái)使其免 受氧毒性。暴露于高于正常的氧濃度的動(dòng)物的肺顯示出由過(guò)多的氧（稱為高氧的條件）導(dǎo) 致的大規(guī)模組織損傷。因此，在高于正常的濃度時(shí)，氧是一種毒性元素，而在正常壓力下，允 許我們度過(guò)相當(dāng)完整的物種特異性壽命（Knight JA.28(6)Ann Clin Lab Sci. (1998))。
[0006] 在19世紀(jì)以及20世紀(jì)早期，隨著在深海潛水中呼吸高壓空氣的第一個(gè)案例的出 現(xiàn)（其中，氧中毒和氮麻醉引起了潛水員的死亡、麻痹或終生乏力），氧對(duì)人體的毒副作用 第一次顯現(xiàn)出來(lái)。在第二次世界大戰(zhàn)中的大不列顛戰(zhàn)役中，每天呼吸數(shù)小時(shí)純氧的飛行 員出現(xiàn)了肺氣腫、肺損傷，并且出現(xiàn)了大大加速衰老的作用。在某些情況中，飛行員的外表 和舉止看起來(lái)像高于其三倍年齡的人的外表和舉止。氧毒性的最悲慘事件之一發(fā)生在20 世紀(jì)40年代后期，當(dāng)時(shí)將新生兒放入了富氧恒溫箱中。一些嬰兒失明，這是因?yàn)樗麄兊难?睛組織還未積聚膳食抗氧化類胡蘿卜素來(lái)使其免受高于正常的氧濃度的毒性作用（Reedy ΕΑ· 23 (2)Neonatal New31-8(2004))。
[0007] 各種衰老的自由基理論以及衰老的氧自由基理論都假定衰老以及衰老的退行性 疾病主要由好氧生物的氧利用引起。在地球生命的進(jìn)化過(guò)程中，植物演化出如下駕馭太陽(yáng) 能的方法，即通過(guò)光合作用來(lái)利用二氧化碳并釋放氧作為毒性代謝產(chǎn)物。動(dòng)物的最終進(jìn)化 具備了大大提高的移動(dòng)能力，然而，由于需要更多的能源來(lái)穿越海洋和在陸地上漫步，因此 它們演化出在提高氧的氣氛下直接呼吸由植物群產(chǎn)生的氧的方式。它們的細(xì)胞演化出能夠 以四步還原過(guò)程利用細(xì)胞色素氧化酶將氧還原成水的線粒體。雖然氧分子本身不具獨(dú)特的 化學(xué)活性，但是其能夠在還原反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生強(qiáng)效的化學(xué)活性中間體。氧的部分還原形式 最終在四步中轉(zhuǎn)化，附著四個(gè)電子產(chǎn)生水并且將由氧的還原反應(yīng)釋放的能量存放于通用的 儲(chǔ)存分子ATP中。
[0008] 利用細(xì)胞色素 C氧化酶，接近80%的氧在線粒體中被還原成水，只有1%的電子 (超氧化物）跨越超氧自由基的初始形成之間的傳遞階段I漏入末端細(xì)胞色素 C氧化酶。 氧從一端進(jìn)入，水從另一端出來(lái)，其被完全還原，極少形成可檢測(cè)的自由基中間體。不幸地， 在好氧生物中，隨著單電子附著于氧分子，發(fā)生20 %的氧還原反應(yīng)，在此，細(xì)胞色素氧化酶 沒(méi)有被利用。這通常在遵循泡利不相容原理的量子定律的含銅和鐵的酶存在的情況下發(fā) 生，其中，單電子必須附著于氧原子，這是因?yàn)檠醴肿拥母餮踉又械姆浅蓪?duì)電子具有相同 的平行自旋且根據(jù)量子力學(xué)任何時(shí)候都禁止附著多于一個(gè)的平行電子。
[0009] 單電子附著于氧分子形成100%化學(xué)計(jì)量產(chǎn)率的超氧自由基。在生物系統(tǒng)中，超氧 化物是首先形成的自由基。第二個(gè)電子附著于氧分子產(chǎn)生過(guò)氧化氫，第三個(gè)電子附著于氧 分子產(chǎn)生氫氧自由基，以及附著的第四個(gè)電子將氧還原成水。
[0010] 炎性級(jí)聯(lián)反應(yīng)
[0011] 就氧化應(yīng)激而言，已建立了良好的炎癥與各種疾病之間的關(guān)聯(lián)，尤其是衰老，但 是近期才證實(shí)了這兩種破壞性途徑之間的關(guān)系。它首次發(fā)表是關(guān)于始于20世紀(jì)80年 代的HIV流行病，此時(shí)，發(fā)現(xiàn)了 N-乙酰半胱氨酸的益處，其是膳食半胱氨酸的較低毒性 來(lái)源，且是谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的合成中的直接前體和限速因子。研究人員證實(shí)，感染 HTV的個(gè)體在其循環(huán)T細(xì)胞中具有降低的細(xì)胞內(nèi)GSH水平。由于GSH是細(xì)胞內(nèi)抵抗R0S 的產(chǎn)生的首要小分子，因此研究人員假設(shè)觀察到的GSH的降低是由持續(xù)暴露于提高的炎 性細(xì)胞因子的水平而導(dǎo)致的慢性氧化應(yīng)激引起（R〇ederer，M，et al，8(2)ADDS Res Hum Retroviruses209-17(1992))。近來(lái)，糖尿病被證實(shí)與活性氧簇的產(chǎn)生和抗氧化防御之間的 明顯失衡（稱為氧化應(yīng)激的情況）有關(guān)（Helmut Seiss，1990)，其導(dǎo)致應(yīng)激信號(hào)傳輸途徑 的改變，從而最終導(dǎo)致終末器官的損傷，即，胰島上的β細(xì)胞。氧化應(yīng)激和代謝炎癥上調(diào)促 炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，包括組織壞死因子α、單核細(xì)胞趨化蛋白-1、白介素-6,以及活化應(yīng) 激敏感激酶，諸如c-Jun氨基末端激酶（JNK)、磷酸化激酶C異構(gòu)體、裂原活化蛋白激酶和 kappa B抑制劑的激酶（Lamb, RE, Goldstein, BJ, 62(7) Int J Clin Practl087-95 (2008))。
[0012] 二氫槲皮素
[0013] 二氫槲皮素是生物類黃酮。類黃酮顯示出廣泛的生物化學(xué)和藥學(xué)性質(zhì)，其最突出 的特征在于起到化學(xué)預(yù)防活性的作用，該化學(xué)預(yù)防活性由化學(xué)預(yù)防指數(shù)（作為標(biāo)志物用于 篩選潛在藥劑）測(cè)量。二氫槲皮素，也稱為紫杉葉素，在細(xì)胞中展現(xiàn)出高解毒能力以及較低 的細(xì)胞毒性，這代表了一種高化學(xué)預(yù)防指數(shù)。它已證明能夠調(diào)節(jié)一些基因的表達(dá)，包括那些 對(duì)解毒酶、細(xì)胞周期調(diào)控蛋白、生長(zhǎng)因子和DNA修復(fù)蛋白的編碼。近期基因微陣列研究結(jié) 果表明，在紫杉葉素存在的條件下，II相解毒酶（NQ01和GSTM1)被上調(diào)，然而I相解毒酶 (CYP2El)被下調(diào)（Lee，SB等人，30(6)BiolPharmBulll074-1079(2007))。對(duì)人肺胚胎 成纖維細(xì)胞（TIG-1)和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVE)進(jìn)行了細(xì)胞毒性的測(cè)量，并且二氫槲皮素 在十種測(cè)試的類黃酮中表現(xiàn)出最低的細(xì)胞毒性，其中，二氫槲皮素在TIG-1細(xì)胞中具有大 于300微摩爾的50 %的致死濃度以及在HUVE細(xì)胞中具有大于200微摩爾的50 %的致死濃 度（Matsuo, Μ 等人，28 (2) Biol Pharm Bui 1253-9 (2005))。
[0014] 二氫槲皮素是一種強(qiáng)效抗氧化劑且是一種在食品中使用的物質(zhì)，其顯 著降低自由基氧簇和活性氮簇的不良反應(yīng)（Valko, Μ等人，39 (1) Int J Biochem Cell Biol.44-84(2007) ；Kostyuk VA,Potapovich AI,355(1)Arch Biochem Biophys43-8 (1998) ； So 1iman KF&Mazz io EA,218 (4)Proc Soc Exp Biol Med390-7(1998))。它被發(fā)現(xiàn)在類黃酮的生物合成途徑中是一種基本分子中間體，其負(fù)責(zé) 槲皮素、低聚原花青素（0PC)和兒茶素的形成，并且已多次證明了其作為抗氧化劑的優(yōu)越 性（Tiukavkina NA，Rulenko LA, Kolesnik LA，6Vopr Pitan. 12-5 (1997) ;Teselkin，10,et al，41 (3)Biofizika. 620-4 (1996))。
[0015] 二氫槲皮素保護(hù)細(xì)胞膜免受自由基損害、改善毛細(xì)血管的活性及有助于全身血液 微循環(huán)的恢復(fù)。正如所示，氧化應(yīng)激被減少至細(xì)胞水平，例如在培養(yǎng)的腎細(xì)胞中（Areias，F(xiàn)M 等人，62 (1) Biochem Pharmacol. 111-8 (2001))。
[0016] 由于二氫槲皮素對(duì)包括血細(xì)胞在內(nèi)的人體細(xì)胞具有滲透性，因此已證明二氫槲皮 素能夠在細(xì)胞水平上提供可靠的保護(hù)來(lái)遠(yuǎn)離各種活性自由基簇。
[0017] 在人體中，與普通槲皮素相比，二氫槲皮素的血漿濃度會(huì)保持得更高且更長(zhǎng)，這 是因?yàn)槎溟纹に夭粫?huì)被體內(nèi)的酶分解為較低活性的化合物，從而在速度或數(shù)量上達(dá)到 槲皮素的程度。此外，在細(xì)菌致突變?cè)囼?yàn)中，二氫槲皮素的致突變性比槲皮素低400倍； 對(duì)于DHQ，槲皮素具有4nmol至1626nmol的最低致突變劑量（Jurado, J.，et al.，6 (4) Mutagenesis289_95(1991))。
[0018] 已證明二氫槲皮素在活化的人中性粒細(xì)胞中能夠抑制魯米諾依賴的化學(xué) 發(fā)光（CLlum)產(chǎn)生（T Hart，Chem Biol Interact. 1990 ;73 (2-3):323-35)，并且能 夠在炎癥期間抑制活化的人中性粒細(xì)胞的粘附（Wang.，YH.等人，67 (12) Biochem Pharmacol2251-62 (2004))。據(jù)報(bào)導(dǎo)二氫槲皮素保護(hù)吞噬細(xì)胞免受二氧化娃誘導(dǎo)的損傷 (Kostyuk VA, Potapovich AL;355(l)Arch Biochem Biophys43_8(1998))。二氧懈皮素在 肥大細(xì)胞中已顯示出作為組胺釋放的抑制劑的活性（Bronner C, Landry Y., 16(3)Agents Actionsl47-51(1985))〇
[0019] 由于這些性質(zhì)也有助于這種類型的化合物的抗氧化性能，因此測(cè)定了仿生體 系中兒茶素和紫杉葉素的分配系數(shù)?；趲в胁煌姾傻哪z束（獲得了兩性離子和陽(yáng) 離子膠束的最高值）的化合物的靜電相互作用，測(cè)定了 log Ρ值。通過(guò)由銅催化且由 芬頓反應(yīng)誘導(dǎo)的8-羥基-2' -脫氧鳥(niǎo)苷的氧化，評(píng)估了化合物的促氧化性能。在該特定 體系中，獲得的數(shù)據(jù)顯示出研究中的類黃酮沒(méi)有體現(xiàn)促氧化活性（Teixeiria，S，39(8) Free Radic Biol Medl099-108(2005))。類黃酮、尤其是二氫槲皮素還有助于心血管功 能。已證明它能夠抑制脂氧合酶，該酶參與脂肪酸雙層中脂質(zhì)的氧化（Wheeler, E.L. and Berry, D. L.，7(l)Carcinogenesis33_6(1986))。與維生素 C 結(jié)合，二氫槲皮素能夠提高 紅細(xì)胞變形性且降低它們的聚合（Plotnikov, MB.，et al，104(12)Zh Nevrol Psikhiatr Im S S Korsakova33-7 (2004))。還證明二氫槲皮素能夠改善微粒體對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化的抗性 (Kravchenko LV, Morozov SV, Tutel'yan V. A. , 136 (6)Bull Exp Biol. :572-5(2003)) 〇
[0020] 與維生素 A、C和E相比，二氫槲皮素是一種更加強(qiáng)效的抗氧化劑，這可由有關(guān)氧 自由基吸收能力（0RAC)的美國(guó)農(nóng)業(yè)部（USDA)的比較性排名來(lái)表明，并且受到其他研究的 支持，諸如對(duì)抗過(guò)氧自由基的基于細(xì)胞的抗氧化保護(hù)分析（CAP-e)，該分析用于測(cè)試含有抗 氧化劑的天然產(chǎn)品是否能夠進(jìn)入活細(xì)胞以及使保護(hù)活細(xì)胞免受氧化性損傷。因此，如果在 CAP-e分析中看到任何保護(hù)作用，則其表明由產(chǎn)品引起的生物學(xué)意義上的抗氧化保護(hù)。
[0021] 過(guò)氧化物自由基與脂肪酸和其他脂質(zhì)的氧化性損傷有關(guān)，并且證實(shí)為什么自由 基，諸如過(guò)氧化物自由基和氫氧自由基，能夠引起比預(yù)料的損害大得多損害，這是因?yàn)樽杂?基在脂質(zhì)中產(chǎn)生了增殖階段。根據(jù)有關(guān)的化學(xué)反應(yīng)，主要的抗氧化能力分析基本分為兩大 類：（1)基于氫原子轉(zhuǎn)移（HAT)反應(yīng)的分析和（2)基于單電子轉(zhuǎn)移（ET)反應(yīng)的分析。
[0022] 大多數(shù)的基于HAT的分析采用競(jìng)爭(zhēng)性的反應(yīng)方案，其中，抗氧化劑和底物通過(guò)偶 氮化合物的分解來(lái)競(jìng)爭(zhēng)由熱產(chǎn)生的過(guò)氧自由基。還可以采用0RAC和CAP-e作為用于抑制 誘導(dǎo)的低密度脂蛋白氧化和其他氧自由基吸收的分析方法。ORAChydro (水溶性成分抗氧化 值）和CAP-e測(cè)試由二氫槲皮素產(chǎn)生的氫原子轉(zhuǎn)移（HAT)競(jìng)爭(zhēng)由熱產(chǎn)生的過(guò)氧自由基和氫 氧自由基的能力。對(duì)于后者，有必要使用H0RAC分析測(cè)試。不像基于電子轉(zhuǎn)移的分析測(cè)量 抗氧化劑的還原能力，而基于HAT的分析測(cè)量氫原子給予能力。氫原子轉(zhuǎn)移在自由基鏈反 應(yīng)中是關(guān)鍵步驟。因此，基于HAT的分析與阻斷自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的抗氧化能力更相關(guān)。
[0023] 在所有基于HAT的分析方法中，0RAC和CAP-e采用一種AUC (曲線下面積）技術(shù) 來(lái)量化抗氧化能力。AUC方法的優(yōu)點(diǎn)是，能夠同樣良好的應(yīng)用于體現(xiàn)不同滯后期的抗氧化劑 以及那些不具有滯后期的樣品。該方法統(tǒng)一了滯后時(shí)間法和初始速率法，并且尤其對(duì)食物 樣品有用，其經(jīng)常含有多種成分且具有復(fù)雜反應(yīng)動(dòng)力學(xué)。
[0024] 因此，0RAC和CAP-e分析作為量化抗氧化能力可選的方法被廣泛地應(yīng)用于院校 和食品補(bǔ)充劑行業(yè)。事實(shí)上，已經(jīng)建立了應(yīng)用0RAC分析結(jié)合總酚類分析的抗氧化劑數(shù)據(jù) 庫(kù)。所測(cè)量的我們的二氫槲皮素的ORAChydro值是，每412. 3mg的膠囊為3, 890微摩爾的 Trolox(水溶性維生素 E)當(dāng)量，或者每克為28, 000微摩爾的Trolox當(dāng)量。所測(cè)量的我們 的二氫槲皮素的CAP-e值是9. 9CAP-e單位每克。
[0025] 西伯利亞和興安落葉松物種（落葉松物種：L. dahurica L.、L. gmelinii、 L. sibirica ledeb.，通常也稱為西伯利亞和蒙古落葉松）是公認(rèn)的商業(yè)上可用的大量二氫 槲皮素的優(yōu)異來(lái)源。
[0026] 維生素 C
[0027] 維生素 C (抗壞血酸）的生物學(xué)功能主要基于其能夠?yàn)楦鞣N生物化學(xué)反應(yīng)提供還 原力。由于它的還原力，維生素 C能夠還原大多數(shù)生理相關(guān)的活性氧簇。由此，維生素 C通 過(guò)細(xì)胞內(nèi)外途徑主要起如下作用：作為輔助因子用于要求還原的鐵或銅金屬酶的還原反應(yīng) 以及作為保護(hù)性抗氧化劑在水相中發(fā)揮作用。
[0028] 已知維生素是八種人類酶的電子給體。它們中的三種酶參與膠原蛋白羥基化反 應(yīng)，兩種被用于肉毒堿的生物合成以及三種被用于激素和氨基酸的生物合成。因此，維生素 C在鐵吸收、膠原蛋白形成、骨骼生長(zhǎng)和氨基酸代謝中起作用。維生素 C參與神經(jīng)系統(tǒng)的一 些激素組分的合成與調(diào)節(jié)，且?guī)椭３盅例X、牙齦、軟骨、肌肉、血管的健康和免疫系統(tǒng)的健 康。
[0029] 次氯酸產(chǎn)自源于免疫應(yīng)答細(xì)胞的過(guò)氧化氫，從而利用次氯酸來(lái)殺死入侵的外源蛋 白，諸如病毒和細(xì)菌，但是次氯酸還會(huì)損害正常的人體蛋白。為了提供抗氧化保護(hù)，成人的 維生素 C的推薦膳食供給量（RDA)將女性設(shè)為75mg/day且將男性設(shè)為90mg/day。該攝入 量可以以較少的尿排泄來(lái)保持接近最高的中性粒細(xì)胞抗壞血酸濃度。
[0030] 由于吸煙者處于提高的氧化應(yīng)激和維生素 C的代謝轉(zhuǎn)換狀態(tài)，因此他們的推薦攝 入量提高了約35mg/day。正如在人類臨床試驗(yàn)中所顯示，包含維生素 C的試劑應(yīng)當(dāng)符合或 超過(guò)這些推薦量，并且理想地應(yīng)當(dāng)包含二氫槲皮素作為維生素 C的增效劑和再生劑。這兩 種保健品都是由高低親和性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)的。由于穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)，抗壞血酸的生物半衰期從8 至40天不等，并且與抗壞血酸體庫(kù)相反。小于300mg的總體庫(kù)與人的壞血病癥狀有關(guān)，然 而體庫(kù)的最大值被限制在約2-4g。
[0031] 二氫槲皮素和維生素 C的結(jié)合，在俄羅斯也稱為Ascovertin(商品名），已在患 有血管性腦病的患者中用于改善細(xì)胞流變學(xué)指標(biāo)，這些指標(biāo)包括集合的降低、紅細(xì)胞變 形性的提高以及紅細(xì)胞膜和血楽中脂質(zhì)過(guò)氧化的降低（Plotnikov, MB, 104 (12) ZhNevrol Psikhiatr Im S S orsakova33-7(2004))。它還被證明能夠保護(hù)大鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞免受紫外 線造成的損傷（Logvinos，SV 等人，140 (5) Bull Exp Biol Med. 578-81 (2005))。
[0032] 阿拉伯半乳聚糖
[0033] 許多草本植物很好地確立了免疫增強(qiáng)性質(zhì)，諸如紫松果菊、贗靛、金鐘柏，當(dāng)歸和 姜黃（Curcuma longa)也含有大量的阿拉伯半乳聚糖。在用于免疫增強(qiáng)的藥用草本植物中 經(jīng)常能夠發(fā)現(xiàn)多糖，包括松果菊和黃芪。
[0034] 阿拉伯半乳聚糖是一種長(zhǎng)且密的支鏈多糖，其具有6, 000至120, 000或更大的分 子量，并且發(fā)現(xiàn)于多種可食用的和不可食用的木本植物的細(xì)胞壁中。阿拉伯半乳聚糖是帶 有適度甜味的細(xì)小、干燥、類白色粉末，其能夠與液體良好混合。該安全而有效的植物化學(xué) 成分被FDA GRAS批準(zhǔn)可作為膳食纖維（甚至以大劑量）和食品添加劑來(lái)使用（5(5)Altern Med Rev463-6(2000)(沒(méi)有列出作者））。唯一報(bào)道的副作用是少量攝取它的人出現(xiàn)偶爾的 腫脹和腸胃脹氣。
[0035] 西部落葉松樹(shù)（Larix occidentalis)的木材能夠從其內(nèi)皮提供大量的免費(fèi)阿拉 伯半乳聚糖。由于阿拉伯半乳聚糖具有有效的生物學(xué)活性和免疫增強(qiáng)性質(zhì)，該獨(dú)特的膳食 纖維正作為一種臨床上有用的營(yíng)養(yǎng)劑而受到關(guān)注。
[0036] 落葉松作為藥物使用是因?yàn)檫@些多糖對(duì)腸道和免疫系統(tǒng)的作用。落葉松阿拉伯半 乳聚糖是一種不易消化的可溶性膳食纖維，其能夠抵抗酶的分解，完好無(wú)損地進(jìn)入大腸，在 此被結(jié)腸細(xì)菌發(fā)酵。許多可食用的和不可食用的植物是阿拉伯半乳聚糖的豐富來(lái)源，包括 亜菜種子、胡蘿卜、蘿卜、黑豆（black gram beans)、梨、玉米、小麥、紅葡萄酒、意大利黑麥 草、西紅柿、豚草、高粱、竹草、椰肉和牛奶。
[0037] 阿拉伯半乳聚糖在落葉松樹(shù)（Larix spp.)中最為豐富，落葉松阿拉伯半乳聚糖可 以提取自西部落葉松（Larix occidentalis),或西伯利亞落葉松和興安落葉松（落葉松物 種：L. dahurica L.、L. gmelinii、L. sibirica ledeb.)，前面已提到通常稱為西伯利亞落葉 松和蒙古落葉松。西部落葉松使用最為普遍。
[0038] 免疫調(diào)節(jié)
[0039] 阿拉伯半乳聚糖支持免疫系統(tǒng)功能的健康（Sch印etkin，IA，5 (13-14) Int Immunopharmacol 1783-99. (2005))。特別地，落葉松阿拉伯半乳聚糖提高有益的免 疫細(xì)胞水平，諸如白細(xì)胞，且不會(huì)刺激促炎性免疫細(xì)胞產(chǎn)生或活化（Kelly，GS，4(2) Altern Med Rev96-103(1999))。落葉松阿拉伯半乳聚糖降低骨髓中淋巴樣細(xì)胞的產(chǎn)生 (Currier, NL, 10 (2-3) Phytomedicine: 145-53 (2003))。落葉松阿拉伯半乳聚糖高效促進(jìn) 體外和體內(nèi)的巨噬細(xì)胞增殖，從而體現(xiàn)抗炎性、抗補(bǔ)體性和抗過(guò)敏作用（Kim LS, Waters RF, Burkholder ΡΜ·, 7(2)Altern Med Revl38-49(2002))。
[0040] 一些研究已經(jīng)證實(shí)落葉松阿拉伯半乳聚糖在動(dòng)物體重具有抗癌活性。在一項(xiàng)1987 年發(fā)表于癌癥研究和臨床腫瘤學(xué)雜質(zhì)的研究中，研究人員測(cè)試了他們的理論：在動(dòng)物體內(nèi)， 器官特異性凝集素（代表一種蛋白）幫助測(cè)定惡性腫瘤細(xì)胞將轉(zhuǎn)移至何處。注射阿拉伯 半乳聚糖被證實(shí)能夠在小鼠肝臟中有效阻止這些凝集素，從而能夠防止這種小鼠癌的擴(kuò)散 (Beuth，J·， 113(1)J Cancer Res Clin 0ncol51-5(1987))。
[0041] 該研究被德國(guó)科隆的研究人員成功復(fù)制，并于1988年發(fā)表（BeuthJ.，6 (2) Clin Exp Metastasisll5-20(1988))。在1991年的瑞典的類似研究發(fā)現(xiàn)，用阿拉伯半乳聚糖 預(yù)處理試驗(yàn)動(dòng)物減少了肝臟轉(zhuǎn)移數(shù)量并延長(zhǎng)了存活時(shí)間（Hagmar B.，Ryd W.，Skomedal Η·，11 (6)Invasion Metastasis348_55(1991)。
[0042] 在1999年刊登于替代醫(yī)學(xué)評(píng)論中的落葉松阿拉伯半乳聚糖的研究評(píng)論報(bào)道了該 物質(zhì)能夠刺激自然殺傷細(xì)胞的活性，并且也能夠增強(qiáng)免疫功能的其他方面（Kelly，GS，4 (2) Altern Med Rev96-103(1999))〇
[0043] 由于落葉松阿拉伯半乳聚糖能夠刺激"自然殺傷"（NK)細(xì)胞的細(xì)胞毒性（一種針 對(duì)健康的功能性標(biāo)志物），因此在某種程度上增強(qiáng)免疫應(yīng)答。在醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)的報(bào)導(dǎo)中，將降低 的NK細(xì)胞活性關(guān)聯(lián)至多種慢性疾病，包括慢性疲勞綜合癥、病毒性肝炎、HIV/AIDS以及諸 如多發(fā)性硬化癥的自身免疫疾病。改性的柑橘果膠在動(dòng)物體內(nèi)具有與落葉松阿拉伯半乳聚 糖相同的抗轉(zhuǎn)移作用機(jī)制，但是無(wú)法提供免疫-調(diào)節(jié)作用。
[0044] 在一個(gè)合理控制的研究中，落葉松阿拉伯半乳聚糖誘導(dǎo)了干擾素 Y (TFNY)、腫瘤 壞死因子α、白介素-1 β (IL-1 β )和白介素-6 (IL-6)的釋放的提高。這導(dǎo)致活化了免疫 系統(tǒng)的兩種強(qiáng)效細(xì)胞：巨噬細(xì)胞和ΝΚ細(xì)胞。發(fā)現(xiàn)IFN γ對(duì)觀察到的ΝΚ細(xì)胞毒性的增強(qiáng)負(fù) 有最大責(zé)任（Hauer J, Anderer FA.，36 (4) Cancer Immunol Immunother. 237-44 (1993))。
[0045] 其他研究表明落葉松阿拉伯半乳聚糖有助于由革蘭陰性桿菌、尤其由大腸埃希氏 菌和克雷伯氏菌引起的小兒中耳炎的發(fā)作頻率和嚴(yán)重程度的降低。
[0046] 消化
[0047] 消化不良非常普遍，并且影響著大量人群。低纖維且高蛋白和碳水化合物的典型 的美國(guó)飲食是這些消化不良盛行的因素。低水平的短鏈脂肪酸和提高的氨水平與該類型的 飲食有關(guān)。已表明攝入纖維、尤其落葉松阿拉伯半乳聚糖有助于對(duì)抗由不良飲食引起的有 害作用。已證實(shí)落葉松阿拉伯半乳聚糖能夠提高短鏈脂肪酸、降低結(jié)腸的氨水平、提高結(jié)腸 中有益細(xì)菌的數(shù)量以及蓋上免疫應(yīng)答。落葉松阿拉伯半乳聚糖的這些有益作用能夠積極調(diào) 解許多這些過(guò)于常見(jiàn)的腸道因素。
[0048] 腸道暴露于許多物質(zhì)一從抗生素到原生動(dòng)物寄生蟲(chóng)再到含糖加工食品一這在結(jié) 腸中造成了一種不利的氛圍。其結(jié)果可以導(dǎo)致便秘、腹瀉、念珠菌感染、寄生蟲(chóng)感染以及由 結(jié)腸健康欠佳引起的其他情況。結(jié)腸清洗是減少消化道暴露于每天遭遇的大量微生物的重 要方法。然而，相對(duì)而言，與填滿有毒物質(zhì)、寄生蟲(chóng)、致病酵母菌、真菌和細(xì)菌的結(jié)腸相比，正 常功能的結(jié)腸是非常干凈的。
[0049] 落葉松阿拉伯半乳聚糖也被確信起到益生元的作用；它刺激結(jié)腸內(nèi)雙歧桿菌和乳 桿菌等細(xì)菌的生長(zhǎng)，這些細(xì)菌能夠給予一定的健康益處。落葉松阿拉伯半乳聚糖的攝取對(duì) 增強(qiáng)有益的腸道菌群具有巨大作用，尤其能夠提升諸如乳桿菌的厭氧菌的數(shù)量（Robinson RR, Feirtag J, Slavin JL, 20(4)J Am Coll Nutr279-85 (2001)) 〇
[0050] 短鏈脂肪酸，主要指乙酸、丙酸和丁酸，是由結(jié)腸中膳食碳水化合物、特別是抗降 解淀粉和膳食纖維的發(fā)酵產(chǎn)生的，其在腸道健康中起重要作用。這些酸是結(jié)腸上皮細(xì)胞的 主要能量來(lái)源。阿拉伯半乳聚糖的非吸收纖維容易被遠(yuǎn)端腸道菌群發(fā)酵，從而使短鏈脂肪 酸的產(chǎn)量提升，主要是丁酸，還有較少量的丙酸。
[0051] 氨是在結(jié)腸中由蛋白和其他含氮物質(zhì)的細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生的副產(chǎn)物。研究表明，氨水 平低至5mmol/L對(duì)排列結(jié)腸的上皮細(xì)胞具有有害作用。氨對(duì)結(jié)腸上皮細(xì)胞的毒性能夠?qū)е?細(xì)胞損傷和提高這些細(xì)胞的轉(zhuǎn)換。
[0052] 許多臨床醫(yī)生將益生元用作腸道疾病的補(bǔ)充劑，包括腸憩室病、腸道滲漏、腸道易 激綜合癥以及諸如克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎的炎性腸道疾病。研究證實(shí)，落葉松阿拉伯半 乳聚糖的消耗能夠減少腸道氨的產(chǎn)生（Robinson, RR.，F(xiàn)eirtag J.，Slavin, JL.，20(4) J Am Coll Nutr279-85 (2001))。由于低氨水平對(duì)腸道的結(jié)腸細(xì)胞具有損害作用，因此落葉松阿 拉伯半乳聚糖能夠支持不能夠解毒氨的患者。
[0053] 落葉松阿拉伯半乳聚糖已被分離且以低分子量為特征：9kDalton的阿拉伯半乳 聚糖片段和37kDa的精制的阿拉伯半乳聚糖，其提取自西部落葉松且由相似分子量和組合 物的重復(fù)單元構(gòu)成。9kDa的阿拉伯半乳聚糖可以通過(guò)在121°C下高壓釜或通過(guò)暴露于存在 硼氫化鈉的堿性溶液中從37kDa的阿拉伯半乳聚糖高產(chǎn)率地獲得。由散射光強(qiáng)度法和沉降 平衡法測(cè)定的37kDa的阿拉伯半乳聚糖的重均分子量分別為37和38kDa。由散射光強(qiáng)度法 和沉降平衡法測(cè)定的9kDa的阿拉伯半乳聚糖的重均分子量分別為9. 1和9. 5kDa。
[0054] MALDI-T0F質(zhì)譜顯示阿拉伯半乳聚糖（9kDa)的分子量具有8. 3kDa的峰值分布。 阿拉伯半乳聚糖（37kDa)和阿拉伯半乳聚糖（9kDa)都顯示出窄分子量分布（Mw/Mn約為 1.2)。阿拉伯半乳聚糖（37kDa)和阿拉伯半乳聚糖（9kDa)顯示出近似相同的13C-NMR譜、 單糖組合物和糖鍵。從而提出阿拉伯半乳聚糖（37kDa)由阿拉伯半乳聚糖（9kDa)的共價(jià) 鍵二級(jí)單元構(gòu)成。阿拉伯半乳聚糖（37kDa)和阿拉伯半乳聚糖（9kDa)結(jié)合分離的肝細(xì)胞 糖蛋白受體能夠同樣良好。因此，阿拉伯半乳聚糖（9kDa)能夠作為候選用于指導(dǎo)藥物遞送 的肝細(xì)胞且在這方面的使用中比阿拉伯半乳聚糖（37kDa)更加令人期待。
[0055] 典型地，粉末形式的落葉松阿拉伯半乳聚糖以約3克每茶匙的濃度用茶匙或湯匙 給藥。成人劑量的分劑量是每天一至三茶匙。
[0056] 由于其味道溫和且在水或果汁中具有優(yōu)異的溶解性，因此易于對(duì)兒童給藥。臨床 反饋顯示出現(xiàn)偶爾的腫脹和腸胃脹氣反應(yīng)的個(gè)體的數(shù)量低于3%，且通常為女性。
[0057] 美國(guó)專利第4, 950, 751號(hào)（DeWitt，Jill E·)，轉(zhuǎn)讓給了南茜國(guó)際集團(tuán)（Nanci Corporation International)，其公開(kāi)了一種從原料中提取半乳聚糖的方法，包括如下步 驟：提供一定量的原料固體顆粒、形成用于半乳聚糖的顆粒和液體提取介質(zhì)的混合物以及 回收提取的半乳聚糖。改進(jìn)點(diǎn)在于，對(duì)混合物施加有效量的聲波能量，從而增強(qiáng)半乳聚糖從 原料顆粒中的提取。
[0058] 美國(guó)專利第7, 241，461號(hào)（Myhill等人），轉(zhuǎn)讓給了生命線保健品公司（Lifeline Nutraceuticals Corp·)，其公開(kāi)了一種具有至少約150mg的假馬齒覽提取物的組合物， 其中，上述假馬齒莧提取物具有45%的假馬齒莧皂苷和至少約225mg的水飛薊（silybum marianum，水飛薊（milk thistle))提取物。上述水飛薊提取物具有在約70%和約80%之 間的水飛薊素、至少約150mg南非醉爺（印度人參（ashwagandha))粉末和至少約75mg茶 樹(shù)（綠茶提取物）。上述綠茶提取物具有98%的多酚，該多酚包含45%的表倍兒茶素沒(méi)食 子酸和至少75mg的姜黃（姜黃（turmeric))提取物，該姜黃提取物具有95%的姜黃素。其 中，當(dāng)以所需的有效量將上述組合物給藥于哺乳動(dòng)物時(shí)，該組合物提高至少一種抗氧化酶 的酶活性水平且降低硫代巴比土酸活性化學(xué)簇的血漿濃度水平，上述抗氧化酶包含超氧化 物歧化酶和過(guò)氧化氫酶。
[0059] 美國(guó)專利第5, 756, 098號(hào)（Price等人），轉(zhuǎn)讓給了蒙大拿大學(xué)（University of Montana)、拉瑞斯國(guó)際股份有限公司（Larex International Inc.)和皇冠鋼鐵廠有限公司 (Crown Iron Works Co.)，其公開(kāi)了一種從纖維狀木本植物原料回收具有阿拉伯半乳聚糖 的滲出物、壓縮的植物纖維產(chǎn)物和萃取液的方法。上述方法包括：在不存在任何添加溶劑的 情況下擠壓纖維狀木本植物原料，從該纖維狀木本植物原料回收具有阿拉伯半乳聚糖的液 體滲出物，以及從該纖維狀木本植物原料回收一次壓縮的植物纖維產(chǎn)物，并且用溶劑浸漬 上述一次植物纖維產(chǎn)物來(lái)回收萃取液和浸漬的植物纖維。
[0060] 美國(guó)專利第7, 288, 374號(hào)（Pincemail等人），轉(zhuǎn)讓給了 Probiox SA，其公開(kāi)了一種 在確定具有引起氧化應(yīng)激的危險(xiǎn)因素的一組個(gè)體中測(cè)定氧化應(yīng)激標(biāo)志物的相對(duì)量的方法。 上述方法提供如下：測(cè)量全血或組分樣品中至少10種不同氧化應(yīng)激標(biāo)志物的量，該樣品取 自確定具有引起氧化應(yīng)激的危險(xiǎn)因素的一組個(gè)體中的各個(gè)個(gè)體，并且比較確定具有引起氧 化應(yīng)激的危險(xiǎn)因素的一組個(gè)體中的各氧化應(yīng)激標(biāo)志物的量與健康個(gè)體中測(cè)量的各氧化應(yīng) 激標(biāo)志物的量。在此確定了，相對(duì)于健康個(gè)體，在確定具有引起氧化應(yīng)激的危險(xiǎn)因素的一組 個(gè)體中氧化應(yīng)激標(biāo)志物的相對(duì)量。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0061] 本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，將有效抗氧化劑、二氫槲皮素與作為強(qiáng)效免疫調(diào)節(jié)劑的落葉松阿 拉伯半乳聚糖結(jié)合，可以有效干擾上調(diào)促炎性細(xì)胞因子的表達(dá)的氧化應(yīng)激和代謝炎癥的級(jí) 聯(lián)反應(yīng)。在所述公開(kāi)內(nèi)容的實(shí)施方式中，有效猝滅自由氧基的膳食補(bǔ)充劑組合物包含：
[0062] ?二氫槲皮素，也稱為紫杉葉素；
[0063] ?抗壞血酸，也稱為維生素 C ;和
[0064] ?阿拉伯半乳聚糖，具體是低分子量的落葉松阿拉伯半乳聚糖。
[0065] 上述組合物可以以膠囊、片劑、液劑、微粒體、栓劑或皮膚貼劑形式給藥且可以包 含可藥用的載體。

【具體實(shí)施方式】
[0066] 在下述描述中，為了對(duì)本發(fā)明提供更全面的描述，提出了大量具體細(xì)節(jié)。然而，對(duì) 于本領(lǐng)域的技術(shù)人員，沒(méi)有這些具體細(xì)節(jié)也可以實(shí)施本發(fā)明。另一方面，為了不混淆本發(fā) 明，沒(méi)有對(duì)公知特征進(jìn)行詳細(xì)描述。
[0067] 在
【發(fā)明內(nèi)容】
、【具體實(shí)施方式】、權(quán)利要求和摘要中，可以涉及本發(fā)明的具體特征（包 括方法步驟）。將會(huì)理解的是，該公開(kāi)包含這些具體特征的可能的組合。例如，如果某個(gè)特 定的特征被公開(kāi)于本發(fā)明的特定方面或特定實(shí)施方式、或者特定權(quán)利要求中，則也可以在 可能的程度內(nèi)將該特征與本發(fā)明的其它特定方面或?qū)嵤┓绞浇Y(jié)合，和/或用于與本發(fā)明的 其它特定方面或?qū)嵤┓绞剑约巴ǔ？梢杂糜诒景l(fā)明。
[0068] 本文中使用的術(shù)語(yǔ)"包括"及其語(yǔ)法上的等同意義是指其他組分、成分、步驟等是 任選存在的。例如，文章"包含"（或"其包含"）組分A、B和C可以指由組分A、B和C組成 (即，僅包含），或可以指不僅包含組分A、B和C，還可以包含一種或多種其他組分。如果此 處涉及的是包含兩種或多種定義的步驟的方法，該定義的步驟可以以任意順序或同時(shí)（除 了文章中排出了這種可能）進(jìn)行，并且該方法可以包括一種或多種其他步驟，該一種或多 種其他步驟可以在任何定義的步驟之前進(jìn)行、在兩個(gè)定義的步驟之間進(jìn)行或在全部定義的 步驟之后進(jìn)行（除了文章中排出了這種可能）。
[0069] 本文中使用的后接數(shù)字或不定冠詞"a"（指"one"（一個(gè)或一種））的術(shù)語(yǔ)"至少" 是指以上述數(shù)字開(kāi)始的范圍的起始點(diǎn)（基于變量的定義，該范圍可以具有上限或不具有上 限）。例如，"至少one"或"至少a"是指1或大于1。本文中使用的后接數(shù)字的術(shù)語(yǔ)"最多" 是指以上述數(shù)字結(jié)束的范圍的結(jié)束點(diǎn)（基于變量的定義，該范圍可以是以1或〇作為下限 的范圍或不具有下限的范圍）。例如，"最多4"是指4或小于4,且"最多40% "是指40 % 或小于40%。如果在本公開(kāi)文本中，一個(gè)范圍是以"（第一個(gè)數(shù)字）至（第二個(gè)數(shù)字）"或 "（第一個(gè)數(shù)字）_(第二個(gè)數(shù)字）"的形式給出，則它的意思是，上述范圍的下限是第一個(gè)數(shù) 字，上限是第二個(gè)數(shù)字。例如，〇-l〇mm是指范圍的下限是0mm且上限是10mm。
[0070] 本文中使用的術(shù)語(yǔ)"或"作為連接詞用于連接一系列可供選擇的事物。本文中使 用的術(shù)語(yǔ)"和/或"作為連接詞是指可以是兩者中的一種或全部?jī)煞N。
[0071] 在一個(gè)【具體實(shí)施方式】中，阿拉伯半乳聚糖是低分子量落葉松阿拉伯半乳聚糖， LAG。二氫槲皮素的含量可以是在約4mg至約450mg的范圍內(nèi)，維生素 C的含量是在7mg至 約700mg的范圍內(nèi)以及拉伯半乳聚糖的含量是在約38mg至約3000mg的范圍內(nèi)。
[0072] 更具體地，二氫槲皮素的含量是在約15mg至約150mg的范圍內(nèi)，維生素 C的含量 是在20mg至約200mg的范圍內(nèi)以及落葉松阿拉伯半乳聚糖的含量是在約12mg至約1500mg 的范圍內(nèi)。在其最具體的實(shí)施方式中，二氫槲皮素的含量為約50mg，維生素 C的含量為約 70mg以及落葉松阿拉伯半乳聚糖的含量為約500mg。
[0073] 上述組合物通過(guò)猝滅由引發(fā)氧化應(yīng)激和炎癥的級(jí)聯(lián)反應(yīng)的自由基有效增強(qiáng)落葉 松阿拉伯半乳聚糖的免疫調(diào)節(jié)性質(zhì)，從而可以證明抗炎性和抗過(guò)敏性質(zhì)，或者免疫功能的 增強(qiáng)。
[0074] 在一個(gè)附加實(shí)施方式中，由組合物引起的自由基的猝滅進(jìn)一步提高血細(xì)胞的適應(yīng) 性來(lái)調(diào)節(jié)微脈管系統(tǒng)。
[0075] 在另一實(shí)施方式中，在抗壞血酸-抗壞血酸氧化酶反應(yīng)混合物中，二氫槲皮素與 落葉松阿拉伯半乳聚糖積極影響抗壞血酸自由基的初期強(qiáng)度以及延長(zhǎng)抗壞血酸自由基的 壽命。
[0076] 在又另一實(shí)施方式中，由組合物引起的自由基的猝滅進(jìn)一步保持膠原蛋白健康和 刺激體內(nèi)膠原蛋白的產(chǎn)生。
[0077] 在一個(gè)附加實(shí)施方式中，由組合物引起的自由基的猝滅進(jìn)一步維持毛細(xì)血管強(qiáng)度 和幫組調(diào)節(jié)毛細(xì)血管滲透性。
[0078] 在另一實(shí)施方式中，上述組合物進(jìn)一步清除活性氧物質(zhì)和活性氮物質(zhì)（R0S-RNS)， 諸如氫氧自由基、過(guò)氧自由基、超氧自由基、過(guò)氧亞硝酸自由基和氮氧自由基，以及單態(tài)氧 和次氯酸。
[0079] 在另一實(shí)施方式中，由組合物引起的自由基的猝滅進(jìn)一步對(duì)眼睛提供實(shí)質(zhì)性保護(hù) 以免受紫外線產(chǎn)生的自由基損害。
[0080] 在另一實(shí)施方式中，由組合物引起的自由基的猝滅對(duì)中性粒細(xì)胞進(jìn)一步提供抗氧 化保護(hù)。
[0081] 在另一實(shí)施方式中，由組合物引起的自由基的猝滅進(jìn)一步提供抗氧化保護(hù)來(lái)抵抗 在吞噬作用過(guò)程中產(chǎn)生的R0S。
[0082] 在另一實(shí)施方式中，由組合物引起的自由基的猝滅在精液中進(jìn)一步提供抗氧化保 護(hù)，以抵抗對(duì)精子DNA的氧化性損害。
[0083] 在另一實(shí)施方式中，由組合物引起的自由基的猝滅通過(guò)在R0S引發(fā)細(xì)胞膜或脂肪 酸脂質(zhì)過(guò)氧化之前清除水相中的R0S來(lái)進(jìn)一步防止LDL氧化。
[0084] 在另一實(shí)施方式中，由組合物引起的自由基的猝滅進(jìn)一步使維生素 E恢復(fù)至其還 原態(tài)。
[0085] 在另一實(shí)施方式中，維生素 C以二氫抗壞血酸形式存在，該形式更容易滲透血細(xì) 胞膜和腸道細(xì)胞膜，之后，二氫抗壞血酸（即維生素 C的氧化形式）在細(xì)胞內(nèi)被還原為抗壞 血酸（即維生素 C的還原形式）。
[0086] 在另一實(shí)施方式中，由組合物引起的自由基的猝滅進(jìn)一步增強(qiáng)維生素 C在細(xì)胞質(zhì) 中的定位和在血漿中的細(xì)胞內(nèi)積聚。
[0087] 本發(fā)明人還公開(kāi)了一種增強(qiáng)落葉松阿拉伯半乳聚糖的免疫調(diào)節(jié)性能的方法，其通 過(guò)給藥上述包含二氫槲皮素、維生素 C和阿拉伯半乳聚糖的組合物來(lái)猝滅引發(fā)氧化應(yīng)激和 炎癥的級(jí)聯(lián)反應(yīng)的自由基的過(guò)量產(chǎn)生。
[0088] 在【具體實(shí)施方式】中，該方法包括由自由基的猝滅引起的各種附加益處。之所以自 由基的猝滅是有益的，是因?yàn)槠涮岣哐?xì)胞適應(yīng)性；保持膠原蛋白健康和刺激所述膠原蛋 白的產(chǎn)生；維持毛細(xì)血管的強(qiáng)度和調(diào)節(jié)毛細(xì)血管的滲透性；對(duì)眼睛提供實(shí)質(zhì)性抗氧化保護(hù) 以免受紫外線產(chǎn)生的自由基損害；對(duì)中性粒細(xì)胞提供實(shí)質(zhì)性抗氧化保護(hù)；提供實(shí)質(zhì)性抗氧 化保護(hù)來(lái)抵抗在吞噬作用過(guò)程中產(chǎn)生的R0S ;對(duì)精液提供實(shí)質(zhì)性抗氧化保護(hù)，以抵抗對(duì)精 子DNA的氧化性損害；在細(xì)胞膜或脂肪酸脂質(zhì)過(guò)氧化之前通過(guò)清除水相中的R0S來(lái)防止 LDL氧化；使維生素 E恢復(fù)成其還原形式；有效協(xié)助維生素 C在細(xì)胞質(zhì)中的定位和在血漿中 提供細(xì)胞內(nèi)積聚。
[0089] 在又另一實(shí)施方式中，教導(dǎo)了將上述組合物給藥至哺乳動(dòng)物、尤其給藥至人來(lái)調(diào) 節(jié)免疫系統(tǒng)的方法。該組合物顯示出免疫刺激性質(zhì)，并且該組合物可以用于控制炎癥和過(guò) 敏反應(yīng)。
[0090] 還教導(dǎo)如下方法，即在抗壞血酸-抗壞血酸氧化酶反應(yīng)混合物中給藥維生素 C來(lái) 提商抗壞血酸自由基的初期強(qiáng)度和所述抗壞血酸自由基的壽命。
[0091] 在又另一實(shí)施方式中，公開(kāi)了一種用于猝滅活性氧物質(zhì)和活性氮物質(zhì)的方法，包 括氫氧自由基、過(guò)氧自由基、超氧自由基、過(guò)氧亞硝酸自由基、氮氧自由基、單態(tài)氧和次氯 酸。
[0092] 在又另一實(shí)施方式中，將落葉松阿拉伯半乳聚糖的免疫刺激性質(zhì)的增強(qiáng)用在如下 方法中，即通過(guò)將權(quán)利要求6的組合物給藥至哺乳動(dòng)物來(lái)調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的方法。該方法可 以用于控制炎癥和過(guò)敏反應(yīng)，或用于增強(qiáng)免疫功能。
[0093] 在又另一實(shí)施方式中，公開(kāi)了一種方法，其中，維生素 C以二氫抗壞血酸的形式存 在，該形式更容易滲透血細(xì)胞膜和腸道細(xì)胞膜，之后，二氫抗壞血酸在細(xì)胞內(nèi)被還原為抗壞 血酸。
[0094] 雖然本發(fā)明通過(guò)參考優(yōu)選的實(shí)施方式進(jìn)行了具體的展示和說(shuō)明，但是本領(lǐng)域的技 術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，在不脫離本發(fā)明的權(quán)利要求的精神和范圍的情況下，可以進(jìn)行各種形式 的變形和細(xì)化。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將會(huì)識(shí)別或無(wú)需額外的常規(guī)實(shí)驗(yàn)就可以確認(rèn)許多等同于 本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】所描述的具體內(nèi)容。這種等同也包含在本發(fā)明的權(quán)利要求的范圍 內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1. 一種膳食補(bǔ)充劑組合物，包含： 二氫槲皮素； 維生素 C ;和 阿拉伯半乳聚糖。
2. 如權(quán)利要求1所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，所述阿拉伯半乳聚糖以落葉松阿拉 伯半乳聚糖形式存在。
3. 如權(quán)利要求2所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，所述落葉松阿拉伯半乳聚糖具有在 約9. lkDas和約37kDas之間的分子量。
4. 如權(quán)利要求2所述膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，所述組合物被配制成膠囊、片劑、液劑、 微粒體、栓劑或皮膚貼劑形式給藥。
5. 如權(quán)利要求3所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，進(jìn)一步包含可藥用的載體。
6. 如權(quán)利要求2所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，所述組合物通過(guò)猝滅引發(fā)氧化應(yīng)激 和炎癥的級(jí)聯(lián)反應(yīng)的自由基來(lái)有效增強(qiáng)所述落葉松阿拉伯半乳聚糖的免疫調(diào)節(jié)性能。
7. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，所述二氫槲皮素和落葉松阿拉伯半 乳聚糖從西伯利亞落葉松和興安落葉松的鋸材原木和樹(shù)皮中提取。
8. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，所述二氫槲皮素的含量是在約4mg至 約450mg的范圍內(nèi)，所述維生素 C的含量是在7mg至約700mg的范圍內(nèi)，以及所述落葉松阿 拉伯半乳聚糖的含量是在約38mg至約3000mg的范圍內(nèi)。
9. 如權(quán)利要求8所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，所述二氫槲皮素的含量是在約15mg 至約150mg的范圍內(nèi)，所述維生素 C的含量是在20mg至約200mg的范圍內(nèi)，以及所述落葉 松阿拉伯半乳聚糖的含量是在約12mg至約1500mg的范圍內(nèi)。
10. 如權(quán)利要求9所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，所述二氫槲皮素的含量為約50mg， 所述維生素 C的含量為約70mg，以及所述落葉松阿拉伯半乳聚糖的含量為約50mg。
11. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅提高血細(xì)胞的適 應(yīng)性。
12. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅保持膠原蛋白健 康以及刺激人體產(chǎn)生所述膠原蛋白。
13. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅維持毛細(xì)血管的 強(qiáng)度和調(diào)節(jié)毛細(xì)血管的滲透性。
14. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅有效清除活性氮 物質(zhì)。
15. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅有效防護(hù)眼鏡免 受紫外線產(chǎn)生的自由基損害。
16. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅在中性粒細(xì)胞中 有效提供實(shí)質(zhì)性抗氧化保護(hù)。
17. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅有效提供實(shí)質(zhì)性 抗氧化保護(hù)來(lái)抵抗在吞噬作用過(guò)程中所產(chǎn)生的ROS。
18. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅通過(guò)防止對(duì)精子 DNA的氧化性損害來(lái)有效為精液提供實(shí)質(zhì)性抗氧化保護(hù)。
19. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅通過(guò)在細(xì)胞膜或 脂肪酸脂質(zhì)的過(guò)氧化之前清除水相中的ROS來(lái)有效防止LDL氧化。
20. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅有效使維生素 E 恢復(fù)至其活化狀態(tài)。
21. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，所述維生素 C以二氫抗壞血酸形式 存在，且更容易地滲透血細(xì)胞膜和腸道細(xì)胞膜，之后，所述二氫抗壞血酸在細(xì)胞內(nèi)被還原為 抗壞血酸，即，維生素 C的還原形式。
22. 如權(quán)利要求6所述的膳食補(bǔ)充劑組合物，其中，自由基的所述猝滅有效地顯著協(xié)助 維生素 C在細(xì)胞質(zhì)中定位以及在血漿中有效提供細(xì)胞內(nèi)積聚。
23. -種增強(qiáng)落葉松阿拉伯半乳聚糖的免疫調(diào)節(jié)性能的方法，其包括如下步驟：通過(guò) 將包含二氫槲皮素、維生素 C和阿拉伯半乳聚糖的組合物給藥至需要該組合物的哺乳動(dòng) 物，猝滅引發(fā)氧化應(yīng)激和炎癥的級(jí)聯(lián)反應(yīng)的自由基，所述阿拉伯半乳聚糖以落葉松阿拉伯 半乳聚糖的形式存在。
24. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅進(jìn)一步提高血細(xì)胞的適應(yīng)性。
25. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，抗壞血酸-抗壞血酸氧化酶反應(yīng)混合物提高抗壞 血酸自由基的初期強(qiáng)度和所述抗壞血酸自由基的壽命。
26. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅進(jìn)一步保持膠原蛋白健康以 及刺激產(chǎn)生所述膠原蛋白。
27. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅進(jìn)一步維持毛細(xì)血管的強(qiáng)度 和調(diào)節(jié)毛細(xì)血管的滲透性。
28. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅進(jìn)一步清除自由基氧物質(zhì)和 活性氮物質(zhì)。
29. 如權(quán)利要求28所述的方法，其中，所述活性氧物質(zhì)和活性氮物質(zhì)（ROS-RNS)選自由 氫氧自由基、過(guò)氧自由基、超氧自由基、過(guò)氧亞硝酸自由基、氮氧自由基、單態(tài)氧和次氯酸鹽 組成的組。
30. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅進(jìn)一步對(duì)眼睛提供實(shí)質(zhì)性抗 氧化保護(hù)來(lái)抵抗紫外線產(chǎn)生的自由基損害。
31. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅進(jìn)一步對(duì)中性粒細(xì)胞提供實(shí) 質(zhì)性抗氧化保護(hù)。
32. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅進(jìn)一步提供實(shí)質(zhì)性抗氧化保 護(hù)以抵抗在吞噬作用過(guò)程中產(chǎn)生的ROS。
33. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅通過(guò)防止對(duì)精子DNA的氧化性 損害為精液進(jìn)一步提供實(shí)質(zhì)性抗氧化保護(hù)。
34. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅通過(guò)在細(xì)胞膜或脂肪酸脂質(zhì) 的過(guò)氧化之前清除水相中的ROS來(lái)進(jìn)一步有效防止LDL氧化。
35. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅進(jìn)一步使維生素 E恢復(fù)至其活 化狀態(tài)。
36. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，當(dāng)所述維生素 C以二氫抗壞血酸形式存在，所述 二氫抗壞血酸更容易滲透血細(xì)胞膜和腸道細(xì)胞膜，之后，所述二氫抗壞血酸在細(xì)胞內(nèi)被還 原為抗壞血酸。
37. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中，自由基的所述猝滅顯著協(xié)助維生素 C在細(xì)胞質(zhì)中 定位且在血漿中提供細(xì)胞內(nèi)積聚。
38. -種調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的方法，其通過(guò)將包含二氫槲皮素、維生素 C和阿拉伯半乳聚糖 的組合物給藥至需要所述組合物的哺乳動(dòng)物，所述阿拉伯半乳聚糖以落葉松阿拉伯半乳聚 糖的形式存在。
39. 如權(quán)利要求38所述的調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的方法，其中，控制了炎癥和過(guò)敏反應(yīng)。
40. 如權(quán)利要求38所述的調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的方法，其中，增強(qiáng)了免疫功能。
【文檔編號(hào)】A61P29/00GK104159582SQ201280069969
【公開(kāi)日】2014年11月19日 申請(qǐng)日期:2012年8月17日 優(yōu)先權(quán)日:2012年2月16日
【發(fā)明者】謝爾蓋·菲利波夫, 伊戈?duì)枴げ└炅_多夫 申請(qǐng)人:弗拉維特普雷有限公司