Glp-1受體激動(dòng)劑肽胃泌素綴合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明特別地涉及某些肽綴合物，以及所述綴合物在治療多種疾病或病癥(包括糖尿病(1型和/或2型)和糖尿病相關(guān)疾病或病癥)中的用途。
【專利說(shuō)明】GLP-1受體激動(dòng)劑肽胃泌素綴合物

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明特別地涉及某些肽綴合物，以及這些綴合物在治療和/或預(yù)防多種疾病或 病癥（包括糖尿?。?型和/或2型）和糖尿病相關(guān)的疾病或病癥）中的用途。

【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病（特別是1型和2型糖尿?。┻B同肥胖（其被認(rèn)為是發(fā)生2型糖尿病的主 要致病因素）構(gòu)成世界范圍內(nèi)主要且甚至增長(zhǎng)的健康問(wèn)題?？勺鳛樘悄虿≈Y(jié)果而發(fā)生的 疾病或病癥包括心血管和外周血管疾病、微血管和大血管并發(fā)癥、卒中以及可能的某些形 式的癌癥。
[0003] 糖尿病的特征在于血糖水平的生理調(diào)節(jié)缺陷?？蓪?dǎo)致糖尿病的根本條件是胰β 細(xì)胞量及功能的降低或損失，伴隨內(nèi)源性胰島素產(chǎn)生的附帶降低或損失和/或胰島素抗性 (對(duì)胰島素的敏感性降低），即內(nèi)源性胰島素對(duì)血糖水平之適當(dāng)調(diào)節(jié)能力的降低或損失。
[0004] 許多降低血糖水平的激素響應(yīng)腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物之存在和吸收而由胃腸粘膜分泌。這 些激素包括胰高血糖素樣肽-1 (glucagon-like peptide-1，GLP-1)、葡萄糖依賴性促胰島 素月太（glucose-dependent insulinotropic peptide，GIP)、胃泌素（gastrin)和膜泌素 (secretin)〇
[0005] GLP-1[參見(jiàn)例如 0rsk0V, Diabetologia35 :701-711(1"2)]由胰高血糖素 原（一種180個(gè)氨基酸的肽）的組織加工而產(chǎn)生[參見(jiàn)例如Drucker，Diabetes47 : 159-169(1998)]。胰高血糖素原的整個(gè)序列含有胰高血糖素的29個(gè)氨基酸序列、GLP-1 的36或37個(gè)氨基酸序列和胰高血糖素樣肽-2(GLP-2 ;-種腸營(yíng)養(yǎng)肽（intestinotrophic p印tide))的34個(gè)氨基酸序列。
[0006] 所謂的毒蜥外泌肽（exendin)(其構(gòu)成另一組降低血糖水平的肽）與GLP-1 (7-36) 有一定的序列類似性（53%)[參見(jiàn)例如 Goke 等，J. Biol. Chem. 268 :19650-19655 (1993)]。 毒蜥外泌肽見(jiàn)于毒蜥科（Helodermatidae)物種（珠蜥（beaded lizard))的唾液中。毒蜥 外泌膚-3 存在于珠毒晰（Heloderma horridum)(墨西哥珠晰（Mexican beaded lizard)) 的唾液中，而毒蜥外泌肽-4存在于鈍尾毒蜥（Heloderma suspectum)(希拉毒蜥（Gila monster))的唾液中。毒蜥外泌肽-4的氨基酸序列（其在位置2和位置3處不同于毒蜥外 泌肽-3 的氨基酸序列）為 hgegtftsdlskqmeeeavrlfiewlknggpssgappps-nh2。
[0007] 已報(bào)道毒蜥外泌肽-4是一種對(duì)于經(jīng)分離大鼠胰島素瘤細(xì)胞強(qiáng)大的GLP-1受體激 動(dòng)劑[Goke等，在上述引文中]。W099/07404公開(kāi)了全身施用的毒蜥外泌肽-4使得糖尿病 db/db小鼠內(nèi)的血糖糖水平降低40 %，且也已報(bào)道每日一次腹膜內(nèi)注射毒蜥外泌肽-4對(duì)糖 尿病ob/ob小鼠的持久血糖降低作用[Grieg等，Diabetologia42 :45-50 (1999)]。
[0008] US5, 424, 286和W098/05351公開(kāi)了毒蜥外泌肽-3、毒蜥外泌肽-4和毒蜥外 泌肽激動(dòng)劑可用于治療糖尿病、用于降低胃運(yùn)動(dòng)以及延遲胃排空且用于預(yù)防高血糖，且 W098/30231另外公開(kāi)了它們可用于降低食物攝取。
[0009] 肽激素胃泌素由胃黏膜內(nèi)的細(xì)胞以及十二指腸內(nèi)的G細(xì)胞分泌，且該激素對(duì)人的 主要生理學(xué)作用是刺激胃酸（即HC1)分泌且?guī)椭高\(yùn)動(dòng)。有顯示胃泌素可對(duì)胰島（islet) 新生發(fā)揮作用，即刺激胰島中分泌胰島素之β細(xì)胞的生長(zhǎng)[參見(jiàn)例如Korc，Μ.，J. Clin. Invest.，92 :1113-1114(1993) ;Rooman 等，Diabetes51 :686-690 (2002)]，并因此有助于血 糖的調(diào)節(jié)。
[0010] 胃泌素與另一胃腸肽激素膽囊收縮素（CCK)共享受體。受體CCK-A R和CCK-B R 對(duì)胃泌素及CCK變體具有不同親和力。CCK-AR(或CCK R1)主要用作硫酸化之CCK的受 體，而CCK-B R(或CCK R2)同等良好地結(jié)合CCK與胃泌素二者。CCK-B R由于胃泌素在 血漿中與CCK相比之較高水平而被認(rèn)為是"胃泌素受體" [Foucaud等，Reg.P印tidesl45 : 17-23(2008)]。
[0011] CCK-B R在結(jié)合配體后可起始若干細(xì)胞內(nèi)途徑，其被認(rèn)為是CCK多樣的生理作用 的原因。CCK-B R下游的關(guān)鍵途徑為MAPK (mitogen activated protein kinase,絲裂原活 化蛋白激酶）或ERK(extra-cellular regulated kinase,細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶）途徑，其也由 若干種生長(zhǎng)激素活化。由于CCK-B R在胰中表達(dá)，因此胃泌素能夠促成此組織中的細(xì)胞增 殖和胰島再生。
[0012] 在人中，胃泌素主要以三種形式出現(xiàn)，即胃泌素34、胃泌素17和胃泌素14(參考 所關(guān)注序列中的氨基酸總數(shù)）。也已鑒定了胃泌素6。較短形式由C端酰胺化之胃泌素 34的切割產(chǎn)生；因此胃泌素17由胃泌素34的最后17個(gè)C端殘基組成（對(duì)應(yīng)于前胃泌素 (55-71))，胃泌素14由胃泌素34的最后14個(gè)C端殘基組成（對(duì)應(yīng)于前胃泌素（58-71)) 且胃泌素6僅由胃泌素34的最后6個(gè)C端殘基組成（對(duì)應(yīng)于前胃泌素（66-71))。在人胃 泌素17中，N端氨基酸殘基為焦谷氨酸（PyroGlu)殘基。經(jīng)酰胺化的C端6個(gè)氨基酸為胃 泌素的關(guān)鍵受體結(jié)合殘基。
[0013] 發(fā)明概述
[0014] 現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，包含兩個(gè)共價(jià)偶聯(lián)或連接之肽部分的某些綴合物與所關(guān)注的兩種單獨(dú) 肽之組合的治療活性相比，在治療例如糖尿?。?型和/或2型糖尿?。┗蚨喾N其他糖尿病 相關(guān)疾病或病癥時(shí)可顯示出出乎意料的高治療活性。
[0015] 在一個(gè)廣泛的方面中，本發(fā)明提供GLP-1受體激動(dòng)劑與胃泌素（特別為在胃泌素 17之位置15處（對(duì)應(yīng)于胃泌素6的位置4)具有選自Leu、Nle、Phe及Thr之替換的胃泌 素）的肽綴合物。更特別地，本發(fā)明提供毒蜥外泌肽-4與胃泌素的肽綴合物。
[0016] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明因此提供具有式I的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑 合物，
[0017] RLZaH-R2 ⑴
[0018] 其中
[0019] R1為H、(V4烷基、乙?；⒓柞；?、苯甲酰基或三氟乙?；?；
[0020] R2為0H或順2;且
[0021] Za為具有式la的肽序列
[0022] His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Z9-Leu-Ser-Z12-Z13-Z14-Glu-Z16-Glu-Al a-Val-Z20-Leu-Phe-Ile-Z24-Z25-Leu-Z27-Z28(Ia)
[0023] 其中
[0024] Z9 選自 Asp 和 Glu ;
[0025] Z12 選自 Lys、Arg 和 Orn ;
[0026] Z13 選自 Gin 和 Tyr ;
[0027] Z14 選自 Met 和 Leu ;
[0028] Z16 選自 Glu、Cys、Arg、Orn 和 Lys ;
[0029] Z20 選自 Arg、Lys 和 Orn ;
[0030] Z24 選自 Lys、Arg、Orn 和 Glu ;
[0031] Z25 選自 Trp、Lys、Cys 和 Phe ;
[0032] Z27 選自 Lys、Arg 和 Orn ;且
[0033] Z28選自Asn和Asp或不存在；
[0034] La為具有式lb的肽序列
[0035] L1_L2_L3_L4 (lb)
[0036] 其中
[0037] LI 選自 Orn、8Ado、Cys、Lys 和 Gin 或不存在；
[0038] L2 選自 Orn、8Ado、Cys、Lys 和 Gin 或不存在；
[0039] L3 選自 Orn、8Ado、Cys、Lys 和 Gin 或不存在；且
[0040] L4 選自 Orn、8Ado、Cys、Lys 和 Gin 或不存在；且
[0041] Ya為具有式Ic的肽序列：
[0042] Y12-Y13-Y14-Y15-Asp-Y17 (Ic)
[0043] 其中
[0044] Y12選自Tyr和Ala或不存在；
[0045] Y13選自Gly和Ala或不存在；
[0046] Y14 選自 Trp、INal 和 Phe ;
[0047] Y15 選自 Met、Leu、Nle、Thr 和 Phe ;且
[0048] Y17選自Phe和3- (3-吡啶基）-丙氨酸；
[0049] 其中式la及l(fā)b中Lys、Orn或Cys中的至少一個(gè)進(jìn)一步與親脂性和/或生物素基 (biotinylic)取代基綴合和/或聚乙二醇化。
[0050] 在另一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式I的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物， 其中
[0051] Za為具有式Ila的肽序列
[0052] His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Z9-Leu-Ser-Lys-Z13-Z14-Glu-Z16-Glu-Al a-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Z25-Leu-Lys-Z28 (Ila)
[0053] 其中
[0054] Z9 選自 Glu 和 Asp ;
[0055] Z13 選自 Gin 和 Tyr ;
[0056] Z14 選自 Met 和 Leu ;
[0057] Z16 選自 Glu、Cys 和 Lys ;
[0058] Z25 選自 Lys、Phe、Cys 和 Trp ;且
[0059] Z28選自Asn和Asp或不存在；
[0060] La為具有如上所述式lb的肽序列；且
[0061] Ya為具有式lie的肽序列
[0062] Tyr-Gly-Trp-Y15-Asp-Phe (lie)
[0063] 其中
[0064] Y15 選自 Leu 和 Thr ;且
[0065] 其中式Ila的位置Z16和Z25中的Lys殘基中至少一個(gè)進(jìn)一步與親脂性和/或生 物素基取代基（biotinylic substituent)綴合和/或聚乙二醇化。
[0066] 在一些特定實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及具有下式的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑 合物：
[0067] H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKN-8Ad〇-K(十六烷?；?異 Glu) -8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 1)
[0068] H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 2)
[0069] H-HGEGTFTSDLSKQLE-K (十六烷?；?異 Glu) -EAVRLFIEWLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2(化合物3)
[0070] H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-8Ad〇-C (生物素-Mai) -8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化 合物4)
[0071] H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIE-C (生物素-Mai) -LKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化 合物5)
[0072] H-HGEGTFTSDLSKQLE-C (生物素-Mai) -EAVRLFIEWLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化 合物6)
[0073] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷酰基-異 Glu) -LK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 7)
[0074] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LK-8Ad〇-QQYGWLDF-NH2 (化合物 8)
[0075] A。
[0076] 在另一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供具有式III的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑 合物，
[0077] RlZb-Lb-Yb-R2 (III)
[0078] 其中
[0079] R1為H、(V4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙?；?；
[0080] R2為0H或順2;且
[0081] Zb為具有式Ilia的肽序列
[0082] His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Glu-Leu-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-A la-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Z25-Leu-Lys-Z28 (Ilia)
[0083] 其中
[0084] Z25 選自 Phe 和 Trp ;且
[0085] Z28選自Asn和Asp或不存在；
[0086] Lb為具有式Illb的肽序列
[0087] L5-L6-L7-L8 (Illb)
[0088] 其中
[0089] L5 選自 8Ado、8Aoc、Ala、Gly 和 Gin 或不存在；
[0090] L6 選自 8Ado、8Aoc、Ala、Gly 和 Gin 或不存在；
[0091] L7 選自 8Ado、8Aoc、Ala、Gly 和 Gin 或不存在；且
[0092] L8 選自 8Ado、8Aoc、Ala、Gly 和 Gin 或不存在；且
[0093] Yb為具有式IIIc的肽序列
[0094] Y10-Yll-Tyr-Gly-Trp-Y15-Asp-Phe(IIIc)
[0095] 其中
[0096] Y10為Glu或不存在；
[0097] Y11為Ala或不存在；且
[0098] Y15 選自 Leu 和 Thr ;
[0099] 前提為式III不為
[0100] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 ；
[0101] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKYGWLDF-NH2 ;和
[0102] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-8Ad〇-YGWLDF-NH2。
[0103] 在另一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式III的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合 物，其中
[0104] Zb為具有式IVa的肽序列
[0105] His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Glu-Leu-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-A la-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Z25-Leu-Lys-Asn(IVa)
[0106] 其中
[0107] Z25 選自 Lys、Phe 和 Trp ;且
[0108] Lb為具有如上所述式Illb的肽序列；
[0109] Yb為具有式IVc的肽序列
[0110] Tyr-Gly-Trp-Y15-Asp-Phe (IVc)
[0111] 其中
[0112] Y15 選自 Leu 和 Thr。
[0113] 在一些特定實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及具有下式的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑 合物：
[0114] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkqqygwldf-nh2 (化合物 9)
[0115] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkqqeaygwldf-nh2 (化合物 10)
[0116] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-8Ad〇-QQYGWLDF-NH2 (化合物 11)
[0117] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKDYGWLDF-NH2 (化合物 12)
[0118] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkaaaygwldf-nh2 (化合物 13)
[0119] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkgggygwldf-nh2 (化合物 14)
[0120] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-8Aoc-YGWLDF-NH2 (化合物 15)
[0121] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflknygwldf-nh2 (化合物 16)
[0122] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkaygwldf-nh2 (化合物 17)
[0123] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 18)
[0124] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKD-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 19)
[0125] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKNYGWTDF-NH2 (化合物 20)
[0126] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKDYGWTDF-NH2 (化合物 21)
[0127] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEWLKNYGWLDF-NH2 (化合物 22)
[0128] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEWLKDYGWLDF-NH2 (化合物 23)。
[0129] 在一些特定實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽綴合物可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)合成方法，通過(guò)使用重組 表達(dá)系統(tǒng)或通過(guò)任何其他合適的方法來(lái)制造。因此，綴合物可由多種方式來(lái)合成，包括例如 包括以下的方法：
[0130] (a)通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)固相或液相方法逐步或通過(guò)片段組裝（fragment assembly)合成肽 綴合物，并分離及純化最終肽綴合物產(chǎn)物；
[0131] (b)在宿主細(xì)胞中表達(dá)編碼肽綴合物的核酸構(gòu)建體并自宿主細(xì)胞培養(yǎng)物回收表達(dá) 產(chǎn)物；或
[0132] (c)影響編碼肽綴合物之核酸構(gòu)建體的無(wú)細(xì)胞體外表達(dá)，并回收表達(dá)產(chǎn)物；或通 過(guò)方法（a)、（b)或（c)之任意組合獲得肽綴合物的片段，隨后連接這些片段以獲得肽綴合 物，并回收肽綴合物。
[0133] 本發(fā)明的另一些實(shí)施方案為治療多種病狀、疾病或病癥（包括糖尿?。?型和2 型）和多種糖尿病相關(guān)病狀、疾病或病癥）的方法。這些實(shí)施方案包括施用本發(fā)明的肽綴 合物（呈游離形式或者其可藥用鹽或溶劑合物形式）以及包含本發(fā)明之肽綴合物或者其可 藥用鹽或溶劑合物的藥物組合物。
[0134] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽綴合物可用作用于治療以下疾病的藥劑：胰島素 抗性、葡萄糖不耐受、前驅(qū)糖尿病、代謝綜合征、空腹葡萄糖水平升高、與血糖水平升高相關(guān) 的疾病狀態(tài)、高血糖、1型和/或2型糖尿病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性 腎病、腎衰竭、高血壓和/或血脂異常（或這些代謝與心血管風(fēng)險(xiǎn)因素的組合）、動(dòng)脈粥樣 硬化、動(dòng)脈硬化、大血管疾病、微血管疾病、冠心病、外周動(dòng)脈疾病和卒中。其也可用于預(yù)防 體重增長(zhǎng)、促進(jìn)體重減輕、降低體重過(guò)重和/或治療肥胖（例如通過(guò)控制食欲、進(jìn)食、食物攝 取、熱量攝取和/或能量消耗），包括病態(tài)肥胖以及相關(guān)疾病、病癥及健康狀況，包括但不限 于肥胖相關(guān)性炎癥、肥胖相關(guān)性膽囊疾病和肥胖誘發(fā)的睡眠呼吸暫停。本發(fā)明的肽綴合物 對(duì)這些病狀的作用可通過(guò)對(duì)體重的作用而整體或部分介導(dǎo)，或可不依賴于這些。
[0135] 本發(fā)明的另一些實(shí)施方案為預(yù)防多種病狀、疾病或病癥（包括糖尿?。?型和2 型）和多種糖尿病相關(guān)病狀、疾病或病癥）的方法。這些實(shí)施方案包括施用本發(fā)明的肽綴 合物（呈游離形式或者其可藥用鹽或溶劑合物形式）以及包含本發(fā)明之肽綴合物或者其可 藥用鹽或溶劑合物的藥物組合物。
[0136] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽綴合物可用作用于預(yù)防以下疾病的藥劑：胰島素 抗性、葡萄糖不耐受、前驅(qū)糖尿病、代謝綜合征、空腹葡萄糖水平升高、與血糖水平升高相關(guān) 的疾病狀態(tài)、高血糖、1型和/或2型糖尿病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性 腎病、腎衰竭、高血壓和/或血脂異常（或這些代謝與心血管風(fēng)險(xiǎn)因素的組合）、動(dòng)脈粥樣 硬化、動(dòng)脈硬化、大血管疾病、微血管疾病、冠心病、外周動(dòng)脈疾病和卒中。其也可用于預(yù)防 體重增長(zhǎng)、促進(jìn)體重減輕、降低體重過(guò)重和/或治療肥胖（例如通過(guò)控制食欲、進(jìn)食、食物攝 取、熱量攝取和/或能量消耗），包括病態(tài)肥胖以及相關(guān)疾病、病癥及健康狀況，包括但不限 于肥胖相關(guān)性炎癥、肥胖相關(guān)性膽囊疾病和肥胖誘發(fā)的睡眠呼吸暫停。本發(fā)明之肽綴合物 對(duì)這些病狀的作用可通過(guò)對(duì)體重的作用而整體或部分介導(dǎo)，或可不依賴于這些。
[0137] 本發(fā)明的另一些方面將通過(guò)以下公開(kāi)內(nèi)容而變得明顯。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0138] 圖1.處理3周后的空腹血糖糖水平
[0139] 每天一次皮下（SC)施用載劑（vehichle)、利拉魯肽（liraglutide)(每天 100nmol/kg)及化合物18 (每天30和100nmol/kg)對(duì)db/db小鼠處理3周后對(duì)空腹血糖水 平的影響。數(shù)據(jù)以帶有SEM的平均值給出。
[0140] 統(tǒng)計(jì)學(xué)：通過(guò)單因素方差分析（1-way AN0VA)，繼之由Bonferroni' s MC檢驗(yàn)，相 對(duì)于載劑或相對(duì)于利拉魯肽來(lái)比較數(shù)據(jù)：* P < 〇. 〇〇1相對(duì)于載劑，##P < 〇. 01相對(duì) 于利拉魯肽。
[0141] 圖2.處理4周，繼之1周藥物假期后的空腹血糖水平
[0142] 對(duì)db/db小鼠處理4周、繼之1周藥物假期（載劑處理）后，每天一次皮下施用載 齊LI、利拉魯肽（每天l〇〇nmol/kg)及化合物18(每天30和100nmol/kg)對(duì)空腹血糖水平的 影響。數(shù)據(jù)以帶有SEM的平均值給出。
[0143] 統(tǒng)計(jì)學(xué)：通過(guò)單因素方差分析，繼之由Bonferroni' s MC檢驗(yàn)，相對(duì)于載劑或相對(duì) 于利拉魯肽來(lái)比較數(shù)據(jù)：* P < 0. 01相對(duì)于載劑，#P < 0. 05相對(duì)于利拉魯肽。
[0144] 圖3.處理3周后之0GTT，AUC
[0145] 對(duì)db/db小鼠處理3周后，每天一次皮下施用載劑、利拉魯肽（每天100nmol/kg) 及化合物18 (每天30和100nmol/kg)對(duì)葡萄糖耐量的影響。數(shù)據(jù)表示為帶有SEM的曲線 下面積（area under the curve，AUC) 〇
[0146] 統(tǒng)計(jì)學(xué)：通過(guò)單因素方差分析，繼之由Bonferroni' s MC檢驗(yàn)，相對(duì)于載劑或相對(duì) 于利拉魯肽來(lái)比較數(shù)據(jù)：* * * P < 0. 001相對(duì)于載劑，< 0. 001相對(duì)于利拉魯肽。
[0147] 圖4.處理4周+1周藥物假期后的0GTT，AUC
[0148] 對(duì)db/db小鼠處理4周、繼之1周藥物假期（載劑處理）后，每天一次皮下施用載 齊LI、利拉魯肽（每天l〇〇nmol/kg)及化合物18 (每天30和100nmol/kg)對(duì)葡萄糖耐量的影 響。數(shù)據(jù)表示為帶有SEM的曲線下面積（AUC)。
[0149] 統(tǒng)計(jì)學(xué)：通過(guò)單因素方差分析，繼之由Bonferroni' s MC檢驗(yàn)，相對(duì)于載劑或相對(duì) 于利拉魯肽來(lái)比較數(shù)據(jù)：* P < 0. 05、* * * p < 0. 001相對(duì)于載劑，###p < 0. 001相對(duì)于 利拉魯膚。
[0150] 圖5.處理4周后的Λ體重
[0151] 對(duì)db/db小鼠處理4周后，每天一次皮下施用載劑、利拉魯肽（每天100nmol/kg) 及化合物18 (每天30和100nmol/kg)對(duì)Δ (結(jié)束-開(kāi)始）體重的影響。數(shù)據(jù)以帶有SEM 的平均值給出。
[0152] 統(tǒng)計(jì)學(xué)：通過(guò)單因素方差分析，繼之由Bonferroni' s MC檢驗(yàn)，相對(duì)于載劑或相對(duì) 于利拉魯肽來(lái)比較數(shù)據(jù)：* * * P < 0. 001相對(duì)于載劑，##P < 0. 01相對(duì)于利拉魯肽。
[0153] 圖6.處理5周后的空腹血糖水平
[0154] 對(duì)ZDF大鼠處理5周后，每天兩次皮下施用載劑、利拉魯肽（每天2X40nmol/kg) 及化合物18(每天2X 10和2X40nmol/kg)對(duì)空腹血糖水平的影響。數(shù)據(jù)以帶有SEM的平 均值給出。
[0155] 統(tǒng)計(jì)學(xué)：通過(guò)單因素方差分析，繼之由Bonferroni' s MC檢驗(yàn)，相對(duì)于載劑或相對(duì) 于利拉魯肽來(lái)比較數(shù)據(jù)：* P < 0. 01、* * * P < 0. 001相對(duì)于載劑，###P < 0. 001相對(duì) 于利拉魯肽。
[0156] 圖7.處理5周后的0GTT，AUC
[0157] 對(duì)db/db小鼠處理5周后，每天一次皮下施用載劑、利拉魯肽（每天2X40nmol/ kg)及化合物18(每天2X10及2X40nmol/kg)對(duì)葡萄糖耐量的影響。數(shù)據(jù)表示為帶有SEM 的曲線下面積（AUC)。
[0158] 統(tǒng)計(jì)學(xué)：通過(guò)單因素方差分析，繼之由Bonferroni' s MC檢驗(yàn)，相對(duì)于載劑或相對(duì) 于利拉魯肽來(lái)比較數(shù)據(jù)：* * * P < 0. 001相對(duì)于載劑，< 0. 001相對(duì)于利拉魯肽。
[0159] 圖8.處理6周后的HbAlc水平
[0160] 對(duì)ZDF大鼠處理6周后，每天兩次皮下施用載劑、利拉魯肽（每天2X40nmol/kg) 及化合物18(每天2X 10和2X40nmol/kg)對(duì)HbAlc水平的影響。數(shù)據(jù)以帶有SEM的平均 值給出。
[0161] 統(tǒng)計(jì)學(xué)：通過(guò)單因素方差分析，繼之由Bonferroni' s MC檢驗(yàn)，相對(duì)于載劑或相對(duì) 于利拉魯肽來(lái)比較數(shù)據(jù)：* * * P < 0. 001相對(duì)于載劑，#P < 0. 05相對(duì)于利拉魯肽。
[0162] 發(fā)明詳述
[0163] 如上文所示，本發(fā)明的一個(gè)方面涉及具有下式的肽綴合物：
[0164] H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKN-8Ad〇-K(十六烷酰基-異 Glu) -8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 1)
[0165] H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 2)
[0166] H-HGEGTFTSDLSKQLE-K (十六烷?；?異 Glu) -EAVRLFIEWLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2(化合物3)
[0167] H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-8Ad〇-C (生物素-Mai) -8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化 合物4)
[0168] H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIE-C (生物素-Mai) -LKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化 合物5)
[0169] H-HGEGTFTSDLSKQLE-C (生物素-Mai) -EAVRLFIEWLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化 合物6)
[0170] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷酰基-異 Glu) -LK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 7)
[0171] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LK-8Ad〇-QQYGWLDF-NH2 (化合物 8)。
[0172] 此外，在另一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及具有F式的肽綴合物：
[0173] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkqqygwldf-nh2 (化合物 9)
[0174] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkqqeaygwldf-nh2 (化合物 10)
[0175] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-8Ad〇-QQYGWLDF-NH2 (化合物 11)
[0176] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkdygwldf-nh2 (化合物 12)
[0177] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkaaaygwldf-nh2 (化合物 13)
[0178] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkgggygwldf-nh2 (化合物 14)
[0179] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-8Aoc-YGWLDF-NH2 (化合物 15)
[0180] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflknygwldf-nh2 (化合物 16)
[0181] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkaygwldf-nh2 (化合物 17)
[0182] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH 2 (化合物 l8)
[0183] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKD-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 19)
[0184] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKNYGWTDF-NH2 (化合物 2〇)
[0185] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkdygvvtdf-nh2 (化合物 21)
[0186] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEWLKNYGWLDF-NH2 (化合物 22)
[0187] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEWLKDYGWLDF-NH2 (化合物 23)
[0188] h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkeaygwldf-nh2 (化合物 24)
[0189] A。
[0190] 在另一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及具有下式的肽綴合物：
[0191] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKN-K (十六烷?；?異 Glu) -YGWLDF-NH2 (化合物 25)
[0192] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKN-K(十六烷?；?異 Glu)-WLDF-NH2(化合物 26)
[0193] H-HGEGTFTSELSKYLE-K (十六烷酰基-異 Glu) -EAVRLFIEFLKNYGWLDF-NH2 (化合物 27)
[0194] H-HGEGTFTSELSKYLE-K (十六烷?；?異 Glu) -EAVRLFIEFLKNWLDF-NH2 (化合物 28)
[0195] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-K (十六烷酰基-異 Glu) -YGWLDF-NH2 (化合物 29)
[0196] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-K (十六烷?；?異 Glu) -WLDF-NH2 (化合物 30)
[0197] H-HGEGTFTSELSKYLE-K (十六烷?；?異 Glu) -EAVRLFIEFLKYGWLDF-NH2 (化合物 31)
[0198] H-HGEGTFTSELSKYLE-K (十六烷?；?異 Glu) -EAVRLFIEFLKWLDF-NH2 (化合物 32)
[0199] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LK-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化 合物33)
[0200] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷酰基-異 Glu) -LKQQYGWLDF-NH2 (化合物 34)
[0201] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LK-〇rn-〇rn-YGWLDF-NH2 (化合物 35)
[0202] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LKNYGWLDF-NH2 (化合物 36)
[0203] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LKDYGWLDF-NH2 (化合物 37) 。
[0204] 在另一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及具有下式的肽綴合物或者其可藥用的鹽或溶劑合 物：
[0205] H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEC (PEG5K) LKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 38)
[0206] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEC (PEG10K) LK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 39)
[0207] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEC (PEG20K) LK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 40)
[0208] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEC (PEG40K) LK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 (化合物 41)
[0209] H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNYGWTDF-OH (化合物 42)
[0210] H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWTDF-NH 2 (化合物 43)
[0211]
[0212] 縮寫8Ado、8A〇c、十六?；怗lu、Orn以及生物素-Mai分別表示以下非天然氨 基酸部分：
[0213] 8Ado (或 Peg3) :_NH_CH2_CH2 _0_CH2_CH2_0 _CH2_C (0)_ (衍生自 8_ 氣基 _3,6_ _氧 雜辛酸）；
[0214] 8Aoc :-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-CH 2-CH2-CH2-C (0)-(衍生自 8-氨基辛酸）1 ;
[0215] 十六醜基：CH3_ (CH2) 14_C (0)-;
[0216] 異 Glu :-NH-CH (COOH) -CH2-CH2-C (0)-;
[0217] Orn:鳥(niǎo)氨酸；且
[0218] 生物素 -Mai :生物素-馬來(lái)酰亞胺。
[0219] 關(guān)于本發(fā)明肽綴合物中接頭部分的取向，接頭部分-8Ad〇-8Ad〇-例如表示化學(xué)部 分
[0220] -NH-CH2-CH2-〇-CH2-CH 2-〇-CH2-C (0) -NH-CH2-CH2-〇-CH2-CH2-〇-CH 2-C (0)-
[0221]
[0222] 位于所關(guān)注接頭部分末端的-NH-....部分共價(jià)連接至所關(guān)注肽綴合物的GLP-1 激動(dòng)劑（例如毒蜥外泌肽-4衍生的）部分，且位于所關(guān)注接頭部分右側(cè)之....-C (0)-部 分連接至所關(guān)注肽綴合物的胃泌素衍生部分。
[0223] 在上文所列之本發(fā)明的肽綴合物中，應(yīng)了解，毒蜥外泌肽-4(1-28)肽序列部分衍 生自鈍尾毒蜥毒蜥外泌肽-4序列的序列或?yàn)槠漕愃莆铩?br> [0224] 本發(fā)明上下文中的術(shù)語(yǔ)"毒蜥外泌肽-4類似物"被定義為衍生自天然（native)毒 蜥外泌肽-4序列之任何替換、截?cái)?、缺失、添加或綴合的肽序列。這包括但不限于本發(fā)明的 替換。
[0225] 同樣地，綴合物中的[Leu4]胃泌素6部分合成地衍生自人胃泌素。
[0226] 也同樣地，綴合物中的[Leul5]胃泌素17部分合成地衍生自人胃泌素。
[0227] 上述肽綴合物1-41的每一個(gè)各自地（即化合物1或化合物2或化合物3...等 (直至化合物41)或者其可藥用鹽或溶劑合物）構(gòu)成本發(fā)明的另一個(gè)別方面。
[0228] 在本發(fā)明上下文中，除非氨基酸以其全名提及（例如丙氨酸、精氨酸等），否則其 由其常規(guī)的三個(gè)字母和/或單個(gè)字母縮寫表示（例如Ala或A表示丙氨酸、Arg或R表示 精氨酸，等）。
[0229] 本發(fā)明上下文中的術(shù)語(yǔ)"肽綴合物"指其中第一肽部分直接或經(jīng)由連接（即橋接 或間隔）化學(xué)部分通過(guò)共價(jià)化學(xué)鍵鍵合與第二肽部分連接（即偶聯(lián)或連接）的分子。
[0230] 在本發(fā)明的肽綴合物中，毒蜥外泌肽_4或者Z(Za或Zb)與天然鈍尾毒蜥毒蜥外 泌肽-4可具有至少75%同一性，例如至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或 100%的同一性。
[0231] 在本發(fā)明的肽綴合物中，胃泌素或Y(Ya*Yb)與天然人胃泌素17和/或胃泌素 6可具有至少70%同一性，例如當(dāng)可能時(shí)至少75%、80%、83%、85%、90%、94%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%的同一性。
[0232] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的多肽可包含以下編號(hào)化合物任意一種中所列的氨基 酸序列：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40和41或可能時(shí)其與一個(gè)或更多個(gè)所記載 序列具有至少約80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或99.5%同一性的功能性片段或 變體。氨基酸替換可以是例如保守替換。
[0233] 如本文所用的術(shù)語(yǔ)"保守替換"表示一個(gè)或更多個(gè)氨基酸由另一生物學(xué)類似殘 基替代。實(shí)例包括具有類似特征之氨基酸殘基的替換，例如小氨基酸、酸性氨基酸、極性 氨基酸、堿性氨基酸、疏水性氨基酸和芳族氨基酸。例如，在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案 中，Met殘基由正亮氨酸（norleucine，Nle)替換，Nle對(duì)于Met而言為生物電子等排體 (bioisostere)，但與Met相反不易于氧化。以通常不見(jiàn)于內(nèi)源性哺乳動(dòng)物肽和蛋白質(zhì)中 之殘基進(jìn)行的保守替換的另一個(gè)實(shí)例為以例如鳥(niǎo)氨酸、刀豆氨酸、胺基乙基半胱氨酸或其 他堿性氨基酸保守替換Arg或Lys。關(guān)于肽和蛋白質(zhì)中表型沉默替換的進(jìn)一步信息參見(jiàn) 例如Bowie等，Science247,1306-1310,1990。氨基酸的保守替換由物理化學(xué)性質(zhì)來(lái)分組。 I :中性、親水性，II :酸及酰胺，III :堿性，IV :疏水性，V :芳族、龐大氨基酸（bulky amino acid)。
[0234]

【權(quán)利要求】
1. 具有式I的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物： Ri-Za-W2 ⑴ 其中 R1為H、Ci_4烷基、乙?；?、甲?；?、苯甲?；蛉阴；?；并且 R2 為 0H 或 NH2 ; Za為具有式la的肽序列 His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Z9-Leu-Ser-Z12-Z13-Z14-Glu-Z16-Glu-Ala-Va l-Z20-Leu-Phe-Ile-Z24-Z25-Leu-Z27-Z28(Ia) 其中 Z9選自Asp和Glu ; Z12 選自 Lys、Arg 和 Orn ; Z13 選自 Gin 和 Tyr ; Z14 選自 Met 和 Leu ; Z16 選自 Glu、Arg、Orn、Cys 和 Lys ; Z20 選自 Arg、Lys 和 Orn ; Z24 選自 Arg、Orn、Lys 和 Glu ; Z25 選自 Trp、Lys、Cys 和 Phe ; Z27選自Lys、Arg和Orn ;并且 Z28選自Asn和Asp或不存在； La為具有式lb的肽序列 L1-L2-L3-L4 (lb) 其中 L1 選自 Orn、8Ado、Cys、Lys 和 Gin 或不存在； L2 選自 Orn、8Ado、Cys、Lys 和 Gin 或不存在； L3選自O(shè)rn、8Ado、Cys、Lys和Gin或不存在；并且 L4 選自 Orn、8Ado、Cys、Lys 和 Gin 或不存在； Ya為具有式Ic的肽序列 Y12-Y13-Y14-Y15-Asp-Y17 (Ic)； 其中 Y12選自Tyr和Ala或不存在； Y13選自Gly和Ala或不存在； Y14 選自 Trp、lNal 和 Phe ; Y15 選自 Met、Leu、Nle、Thr 和 Phe ;并且 Y17選自Phe和3- (3-吡啶基）-丙氨酸； 其中在式la和lb中Lys、Orn或Cys中的至少一個(gè)進(jìn)一步與親脂性和/或生物素基取 代基綴合和/或聚乙二醇化。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中 &為具有式Ila的肽序列 His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Z9-Leu-Ser-Lys-Z13-Z14-Glu-Z16-Glu-Ala-Va 1-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Z25-Leu-Lys-Z28(Ila) 其中 Z9選自Glu和Asp ; Z13 選自 Gin 和 Tyr ; Z14 選自 Met 和 Leu ; Z16 選自 Glu、Cys 和 Lys ; Z25 選自 Lys、Phe、Cys 和 Trp ;并且 Z28選自Asn和Asp或不存在； La為具有式lb的肽序列； 之為具有式lie的肽序列 Tyr-Gly-Trp-Y15-Asp-Phe(lie) 其中 Y15選自Leu和Thr ;并且 其中在式Ila或式lib的位置Z16或Z25中Lys或Cys中的至少一個(gè)進(jìn)一步與親脂性 和/或生物素基取代基綴合和/或聚乙二醇化。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中式 I的肽序列選自 H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKN-8Ad〇-K (十六烷酰基-異 Glu) -8Ad〇-YGWLDF-NH2 H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 H-HGEGTFTSDLSKQLE-K (十六烷酰基-異 Glu) -EAVRLFIEWLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-8Ad〇-C (生物素-Mai) -8Ad〇-YGWLDF-NH2 H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIE-C (生物素-Mai) -LKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 H-HGEGTFTSDLSKQLE-C (生物素-Mai) -EAVRLFIEWLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 和 H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LK-8Ad〇-QQYGWLDF-NH2
4. 具有式III的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物 RLZb-Lb-YbKlII) 其中 R1為H、Ci_4烷基、乙?；⒓柞；⒈郊柞；蛉阴；?； R2 為 0H 或 NH2 ; Zb為具有式Ilia的肽序列 His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Glu-Leu-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-Ala-V al-Arg-Leu-Phe-1le-Glu-Z25-Leu-Lys-Z28(Ilia) 其中 Z25選自Phe和Trp ;并且 Z28選自Asn和Asp或不存在； Lb為具有式Illb的肽序列 L5-L6-L7-L8(IIIb) 其中 L5 選自 8Ado、8Aoc、Ala、Gly 和 Gin 或不存在； L6 選自 8Ado、8Aoc、Ala、Gly 和 Gin 或不存在； L7選自8Ado、8Aoc、Ala、Gly和Gin或不存在；并且 L8 選自 8Ado、8Aoc、Ala、Gly 和 Gin 或不存在； Yb為具有式nic的肽序列 Y10-Yll-Tyr-Gly-Trp-Y15-Asp-Phe(IIIc) 其中 Y10為Glu或不存在； Y11為Ala或不存在；并且 Y15 選自 Leu 和 Thr ; 前提為式III不是 H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 ； H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKYGWLDF-NH2 ;和 H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-8Ad〇-YGWLDF-NH2〇
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中 Zb為具有式IVa的肽序列 His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Glu-Leu-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-Ala-V al-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Z25-Leu-Lys-Asn(IVa) 其中 Z25選自Phe和Trp ;并且 Lb為具有式Illb的肽序列； Yb為具有式IVc的肽序列 Tyr-Gly-Trp-Y15-Asp-Phe(IVc) 其中 Y15 選自 Leu 和 Thr。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4或權(quán)利要求5所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中式 III的肽序列選自 h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkqqygwldf-nh2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkqqeaygwldf-nh2 ； H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-8Ad〇-QQYGWLDF-NH2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkdygwldf-nh2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkaaaygwldf-nh2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkgggygwldf-nh2 ； H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-8Aoc-YGWLDF-NH2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfieflknygwldf-nh2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkaygwldf-nh2 ； H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 ； H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKD-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfieflknygwtdf-nh2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkdygwtdf-nh2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfiewlknygwldf-nh2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfiewlkdygwldf-nh2 ； h-hgegtftselskyleeeavrlfieflkeaygwldf-nh2 ； H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKN-K (十六烷酰基-異 Glu) -YGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKN-K (十六烷?；?異 Glu) -WLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLE-K (十六烷酰基-異 Glu) -EAVRLFIEFLKNYGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLE-K (十六烷?；?異 Glu) -EAVRLFIEFLKNWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-K (十六烷?；?異 Glu) -YGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLK-K (十六烷?；?異 Glu)-WLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLE-K (十六烷酰基-異 Glu) -EAVRLFIEFLKYGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLE-K (十六烷?；?異 Glu) -EAVRLFIEFLKWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LK-8Ad〇-YGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LKQQYGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LK-〇rn-〇rn-YGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LKNYGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIE-K (十六烷?；?異 Glu) -LKDYGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEC(PEG5K)LKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEC(PEG10K)LK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEC(PEG20K)LK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEC(PEG40K)LK-8Ad〇-8Ad〇-YGWLDF-NH2 ; H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNYGWTDF-OH ;和 H-HGEGTFTSELSKYLEEEAVRLFIEFLKN-8Ad〇-8Ad〇-YGWTDF-NH2〇
7. 根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中Za 或Zb與天然鈍尾毒蜥（Heloderma suspectum)的毒蜥外泌肽-4具有至少755^805^85?^ 90 %或95 %的同一性。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的肽綴合物，其中Ya或Yb與天然人胃泌素17和 /或胃泌素6具有至少70%、80%、83%、85%、90%、94%或95%的同一性。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其用作 藥物。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其用作用于治療選 自以下之疾病或病癥的藥物：1型糖尿病、2型糖尿病、前驅(qū)糖尿病、胰島素抗性綜合征、糖 耐量減低（IGT)、與血糖水平升高相關(guān)的疾病狀態(tài)、高血糖、高血壓、致動(dòng)脈粥樣化的血脂異 常、動(dòng)脈硬化（例如動(dòng)脈粥樣硬化）、冠心病、外周動(dòng)脈疾病、卒中、微血管疾病、胃病、代謝 綜合征、癌癥（例如結(jié)腸癌）、炎性腸?。↖BD)、腸易激綜合征（IBS)、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿 病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性腎病和腎衰竭。
11. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其用作用于在有此 需要的對(duì)象中誘導(dǎo)胰β細(xì)胞和/或胰島新生的藥物。
12. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其用作用于在有此 需要的對(duì)象中誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞存活的藥物。
13. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其用作用于在有此 需要的對(duì)象中預(yù)防胰島中β細(xì)胞凋亡和/或壞死的藥物。
14. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其用作用于在有此 需要的對(duì)象中誘導(dǎo)胰島中β細(xì)胞增殖的藥物。
15. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其用作用于在有此 需要的對(duì)象中誘導(dǎo)胰島中β細(xì)胞新生、胰島新生、β細(xì)胞存活、β細(xì)胞增殖和/或預(yù)防β 細(xì)胞凋亡和/或壞死之任意組合的藥物。
16. 根據(jù)權(quán)利要求9至15中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中 所述對(duì)象是人。
17. 用于在有此需要的對(duì)象中治療選自以下之疾病或病癥的方法： 1型糖尿病、2型糖尿病、前驅(qū)糖尿病、胰島素抗性綜合征、糖耐量減低（IGT)、與血糖水 平升高相關(guān)的疾病狀態(tài)、高血糖、高血壓、致動(dòng)脈粥樣化的血脂異常、動(dòng)脈硬化（例如動(dòng)脈 粥樣硬化）、大血管疾病、冠心病、外周動(dòng)脈疾病、卒中、微血管疾病、胃病、代謝綜合征、癌癥 (例如結(jié)腸癌）、炎性腸病（IBD)、腸易激綜合征（IBS)、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性視網(wǎng)膜 病、糖尿病性腎病和腎衰竭， 所述方法包括向所述有需要的對(duì)象施用治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng) 所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物。
18. 用于在有此需要的對(duì)象中預(yù)防選自以下之疾病或病癥的方法： 1型糖尿病、2型糖尿病、前驅(qū)糖尿病、胰島素抗性綜合征、糖耐量減低（IGT)、與血糖水 平升高相關(guān)的疾病狀態(tài)、高血糖、高血壓、致動(dòng)脈粥樣化的血脂異常、動(dòng)脈硬化（例如動(dòng)脈 粥樣硬化）、大血管疾病、冠心病、外周動(dòng)脈疾病、卒中、微血管疾病、胃病、代謝綜合征、癌癥 (例如結(jié)腸癌）、炎性腸?。↖BD)、腸易激綜合征（IBS)、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性視網(wǎng)膜 病、糖尿病性腎病和腎衰竭， 所述方法包括向所述有需要的對(duì)象施用治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng) 所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物。
19. 根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中所述對(duì)象是人。
20. 藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用 鹽或溶劑合物以及可藥用載體、賦形劑或載劑。
21. 根據(jù)權(quán)利要求19所述的藥物組合物，其用于治療1型糖尿病、2型糖尿病、前驅(qū)糖 尿病、胰島素抗性綜合征、糖耐量減低（IGT)、與血糖水平升高相關(guān)的疾病狀態(tài)、高血糖、高 血壓、致動(dòng)脈粥樣化的血脂異常、動(dòng)脈硬化（例如動(dòng)脈粥樣硬化）、大血管疾病、冠心病、夕卜 周動(dòng)脈疾病、卒中、微血管疾病、胃病、代謝綜合征、癌癥（例如結(jié)腸癌）、炎性腸病（IBD)、腸 易激綜合征（IBS)、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性腎病和腎衰竭。
22. 根據(jù)權(quán)利要求19所述的藥物組合物，其用于預(yù)防1型糖尿病、2型糖尿病、前驅(qū)糖 尿病、胰島素抗性綜合征、糖耐量減低（IGT)、與血糖水平升高相關(guān)的疾病狀態(tài)、高血糖、高 血壓、致動(dòng)脈粥樣化的血脂異常、動(dòng)脈硬化（例如動(dòng)脈粥樣硬化）、大血管疾病、冠心病、夕卜 周動(dòng)脈疾病、卒中、微血管疾病、胃病、代謝綜合征、癌癥（例如結(jié)腸癌）、炎性腸?。↖BD)、腸 易激綜合征（IBS)、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性腎病和腎衰竭。
23. 根據(jù)權(quán)利要求19所述的藥物組合物，其用于預(yù)防體重增長(zhǎng)或促進(jìn)體重減輕。
24. 根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其用 于選自以下的方法：改善循環(huán)葡萄糖水平、改善葡萄糖耐量和/或改善循環(huán)膽固醇水平、降 低循環(huán)LDL水平、提高HDL/LDL比值及其組合。
25. 根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其用 于治療或預(yù)防由體重過(guò)重所引起或以體重過(guò)重為特征之病狀的方法。
26. 根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物用于在 有此需要的個(gè)體中預(yù)防體重增長(zhǎng)或促進(jìn)體重減輕的用途。
27. 根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物在有此 需要的個(gè)體中改善循環(huán)葡萄糖水平、葡萄糖耐量和/或循環(huán)膽固醇水平、降低循環(huán)LDL水平 和/或提高HDL/LDL比值之方法中的用途。
28. 根據(jù)權(quán)利要求1至27中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物、用途 或方法，其中所述化合物作為與質(zhì)子泵抑制劑或者用于治療或預(yù)防糖尿病、肥胖、血脂異常 或高血壓之藥劑的組合治療的一部分來(lái)施用。
29. 根據(jù)權(quán)利要求28所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物、用途或方法，其中 所述用于治療或預(yù)防糖尿病的藥劑是二甲雙胍、磺酰脲類、格列奈類、DPP-IV抑制劑、格列 酮類、胰島素或胰島素類似物。
30. 根據(jù)權(quán)利要求28所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物、用途或方法，其中 所述用于治療或預(yù)防肥胖的藥劑是胰高血糖素樣肽受體1激動(dòng)劑、肽YY或其類似物、大麻 素受體1拮抗劑、脂肪酶抑制劑、黑皮質(zhì)素受體4激動(dòng)劑或黑色素聚集激素受體1拮抗劑。
31. 根據(jù)權(quán)利要求28所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物、用途或方法，其中 所述用于治療或預(yù)防高血壓的藥劑是血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素 II受體阻斷 齊U、利尿劑、β -阻斷劑或鈣通道阻斷劑。
32. 根據(jù)權(quán)利要求28所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物、用途或方法，其中 所述用于治療或預(yù)防血脂異常的藥劑是他汀類、貝特類、煙酸類和/或膽固醇吸收抑制劑。
33. 根據(jù)權(quán)利要求28所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物、用途或方法，其中 已知類型的所述質(zhì)子泵抑制劑（即具有作為Η7Κ+-ΑΤΡ酶抑制劑之藥理活性的藥劑）包括 但不限于苯并咪唑衍生物類型或咪唑并吡啶衍生物類型的藥劑。
34. 以合成方式制造根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述之肽綴合物的方法。
35. 以重組方式制造根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述之肽綴合物或者其可藥用鹽或 溶劑合物綴合物的方法。
36. 根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物在有此 需要的個(gè)體中的選自以下方法中的用途：改善循環(huán)葡萄糖水平、改善葡萄糖耐量和/或改 善循環(huán)膽固醇水平、降低循環(huán)LDL水平、提高HDL/LDL比值及其組合，其中使用藥物假期給 藥方案。
37. 用于制造肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物或者根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所 述的方法。
38. 藥物組合物，所述藥物組合物包含根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的肽綴合物 或者其可藥用鹽或溶劑合物，其與一種或更多種根據(jù)權(quán)利要求1至16所述的肽綴合物或者 其可藥用鹽或溶劑合物連同可藥用載體、賦形劑或載劑相組合。
39. 裝置，其包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥 用鹽或溶劑合物，所述裝置用于向?qū)ο筮f送所述肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物。
40. 試劑盒，其包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可 藥用鹽或溶劑合物以及包裝或使用說(shuō)明。
41. 根據(jù)權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物用于制 備藥物的用途。
42. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物的用途，其中所述藥 物用于在有此需要的對(duì)象中治療或預(yù)防選自以下的疾病或病癥： 1型糖尿病、2型糖尿病、前驅(qū)糖尿病、胰島素抗性綜合征、糖耐量減低（IGT)、與血糖水 平升高相關(guān)的疾病狀態(tài)、高血糖、高血壓、致動(dòng)脈粥樣化的血脂異常、動(dòng)脈硬化（例如動(dòng)脈 粥樣硬化）、大血管疾病、冠心病、外周動(dòng)脈疾病、卒中、微血管疾病、胃病、代謝綜合征、癌癥 (例如結(jié)腸癌）、炎性腸病（IBD)、腸易激綜合征（IBS)、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性視網(wǎng)膜 病、糖尿病性腎病和腎衰竭。
43. 根據(jù)權(quán)利要求41所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物的用途，其中所述藥 物用于在有此需要的對(duì)象中誘導(dǎo)胰β細(xì)胞和/或胰島新生。
44. 根據(jù)權(quán)利要求41所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物的用途，其中所述藥 物用于在有此需要的對(duì)象中改善胰島β細(xì)胞的存活率。
45. 根據(jù)權(quán)利要求41所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物的用途，其中所述藥 物用于在有此需要的對(duì)象中預(yù)防胰島中β細(xì)胞凋亡和/或壞死。
46. 根據(jù)實(shí)施方案權(quán)利要求41所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物的用途，其 中所述藥物用于在有此需要的對(duì)象中誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞的增殖。
47. 根據(jù)實(shí)施方案41至46中任一項(xiàng)所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物的用 途，其中所述對(duì)象是人。
48. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中所述由體重過(guò) 重所引起或以體重過(guò)重為特征的病狀選自肥胖、病態(tài)肥胖、肥胖相關(guān)炎癥、肥胖相關(guān)膽囊疾 病、肥胖誘發(fā)的睡眠呼吸暫停、代謝綜合征、前驅(qū)糖尿病，所述方法包括向所述對(duì)象施用治 療有效量的根據(jù)權(quán)利要求23所述的肽綴合物或者其可藥用鹽或溶劑合物。
【文檔編號(hào)】A61P3/10GK104144704SQ201280060332
【公開(kāi)日】2014年11月12日 申請(qǐng)日期:2012年11月2日 優(yōu)先權(quán)日:2011年11月3日
【發(fā)明者】雅各布·林德·托爾博爾格, 特賴因·斯科夫隆德·呂厄·內(nèi)魯普, 克爾德·福斯格勞, 托爾文·奧斯特爾隆德, 多爾特·倫納特·克里斯藤森·阿爾姆霍爾特, 隆娜·弗羅斯特·拉森 申請(qǐng)人:西蘭制藥公司