用于組織創(chuàng)傷的愈合的產(chǎn)品的制作方法
【專利摘要】公開了通過給予包括治療上有效量的至少一種陽離子類固醇抗微生物劑(CSA)的組合物增大組織創(chuàng)傷愈合速率的方法。本文還公開在需要此種促進的受試者中促進創(chuàng)傷愈合的方法，其包含給予含治療上有效量的至少一種所述CSA的組合物。另外，本文公開包含至少一種CSA，或其藥學上可接受的鹽的化合物的組合物，用于組織創(chuàng)傷的治療。本文還涉及包含此種組合物和此種方法的說明的試劑盒。
【專利說明】用于組織創(chuàng)傷的愈合的產(chǎn)品
[0001]相關(guān)申請的交叉引用
[0002]本申請要求2011年9月13日提交的，題為“用于創(chuàng)傷愈合的組合物和方法(Composit1ns and Methods For Wound Healing) ” 的美國臨時專利申請第 61/534194 號的權(quán)益，其在此通過引用的方式并入本文。

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0003]本發(fā)明涉及在動物中使用陽離子類固醇抗微生物劑(CSA)用于提高組織創(chuàng)傷的愈合速率的組合物和方法。

【背景技術(shù)】
[0004]創(chuàng)傷愈合是一個復雜和動態(tài)的自我修復過程以在發(fā)生損傷后恢復細胞結(jié)構(gòu)和組織層。所述人類創(chuàng)傷愈合過程中被分成三個不同的期:炎癥期，增生期和重塑期。所述創(chuàng)傷愈合過程可進一步超出所述三大階段分為復雜而協(xié)調(diào)的一系列生化事件，其包括趨化作用、吞噬作用、新生膠原蛋白生成、膠原蛋白降解、以及膠原蛋白重塑以修復損害。另外，血管生成、上皮形成、和新的糖胺聚糖(GAG)和蛋白聚糖的生產(chǎn)對于所述創(chuàng)傷愈合過程是至關(guān)重要的。這些生物過程的終點導致正常的皮膚結(jié)構(gòu)被成纖維細胞介導的瘢痕組織替換。
[0005]所述炎癥期發(fā)生之前，凝血級聯(lián)開始通過凝血停止失血。一旦凝血已開始，各種可溶性因子包括趨化因子和細胞因子，被釋放以吸引細胞到損傷位點。生長因子，其為由血小板釋放的細胞因子，刺激細胞加速其分裂速度，導致提高的愈合速率。血小板還釋放其他前炎癥因子比如5-羥色胺、緩激肽、前列腺素，前列環(huán)素、血栓素、和組胺，從而服務于多種用途，包括增加細胞增殖和遷移到該地區(qū)，并導致血管變得擴張且多孔。
[0006]所述炎癥期可以進一步細分為四個生化過程。首先，緊接著血管被破壞之后，破裂的細胞膜釋放炎癥因子如導致血管收縮的血栓素和前列腺素以預防失血并收集炎癥細胞和因子。第二，多形核中性粒細胞(PMN)到達所述創(chuàng)傷位點，吞噬碎片和細菌。中性粒細胞還通過分泌分解受損害組織的蛋白酶來凈化創(chuàng)傷。第三，中性粒細胞通過碎片、細菌、中性粒細胞、受損害細胞和組織、以及任意其它外來細胞或物質(zhì)的吞噬作用來凈化所述受損傷區(qū)域。巨噬細胞還分泌的若干的把創(chuàng)傷愈合推向下一期的因子。最后，炎癥消失，分泌更少炎癥因子，現(xiàn)有的被分解，且在創(chuàng)傷位點中性粒細胞和巨噬細胞的數(shù)目減少。
[0007]所述增生期始于在創(chuàng)傷位點成纖維細胞的到達，標志著增生期的開始，其生物學上始于血管生成。血管生成或新生血管形成是在血管內(nèi)皮細胞遷移到所述創(chuàng)傷區(qū)域時，同時出現(xiàn)成纖維細胞增殖的過程。纖維素增生和肉芽形成在血管生成期間開始，作為成纖維細胞聚集和細胞外基質(zhì)形成的結(jié)果。然后膠原蛋白和纖連蛋白通過在組織肉芽形成位點的成纖維細胞沉積。一旦膠原蛋白沉積發(fā)生，由于到達新沉積的細胞外基質(zhì)的角化細胞的存在，發(fā)生上皮形成。所述增生期的最后步驟是收縮，這需要新生成肌細胞的存在以將所述瘢痕組織連接到周圍的健康組織并將所述瘢痕組織的邊緣拉倒一起，恢復抗張強度至先前受損傷區(qū)域周圍的皮膚。
[0008]存在發(fā)展組合物和方法以增強創(chuàng)傷愈合的需要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本文公開了通過提高愈合速率在受試者中治療創(chuàng)傷的方法和組合物。所述提升的愈合速率使用陽離子類固醇抗菌(CSA)的化合物來實現(xiàn)。所述CSA化合物包括固醇骨架和多個連接至其的陽離子基團。
[0010]使用CSA的組織創(chuàng)傷治療具有令人驚奇和意想不到的提高創(chuàng)傷愈合速率的結(jié)果。實驗數(shù)據(jù)表明，提高的創(chuàng)傷愈合速率不同于CSA已知的抗微生物效果。當應用于活體受試者的創(chuàng)傷位點，本文所描述的CSA化合物對創(chuàng)傷愈合速率具有深刻且令人驚訝的效果。所述提高的愈合速率在許多實例中幾倍快于使用傳統(tǒng)的抗微生物劑的愈合速率。研究表明，創(chuàng)傷愈合的這種增強至少部分不同于抗微生物利益。CSA已被發(fā)現(xiàn)提高愈合速率，甚至在其中抗微生物的負載是非常低的的創(chuàng)傷中，或在感染未出現(xiàn)的情況下。
[0011]提高的愈合速率結(jié)果是與使用傳統(tǒng)的抗微生物化合物的治療相比更健康且更自然的組織形成。所述提高的愈合速率的作用機理目前正在研究中。據(jù)信提高的組織愈合速率是由成纖維細胞遷移的增加和在創(chuàng)傷位點增強的上皮生長因子引起的，然而本發(fā)明并不限于任意特定的機理。受試者也表現(xiàn)出顯著降低的對于疼痛的敏感性。對于被認為僅有對抗外來微生物活性的CSA這些利益是意想不到的。
[0012]在一些實施方案中，描述用于在受試者中提高創(chuàng)傷愈合速率的方法。該方法包括(i)提供包括一種陽離子類固醇抗微生物(CSA)化合物的組織治療組合物，所述CSA化合物包括類固醇基團和連接至其的多個陽離子基團；(ii)鑒定需要加速的組織創(chuàng)傷愈合的受試者；和(iii)將所述組織創(chuàng)傷與使所述組織治療組合物接觸以提高其愈合速率。
[0013]在一些實施方案中，本發(fā)明涉及用于新穎的治療創(chuàng)傷方法的CSA。特別地，本發(fā)明涉及具有固醇骨架和連接至其的多個陽離子基團的藥學上可接受的CSA化合物，其中所述CSA化合物用于在受試者中提高創(chuàng)傷愈合速率。
[0014]在一些實施方案中，所述CSA為式(V)的化合物或其藥學上可接受的鹽:
[0015]

【權(quán)利要求】
1.一種用于提高組織創(chuàng)傷愈合速率的方法，其包含 提供包括一種陽離子類固醇抗微生物(CSA)化合物的組織治療組合物，所述CSA化合物包括類固醇基團和連接至其的多個陽離子基團；和 鑒定需要組織創(chuàng)傷加速愈合的受試者并將所述組織創(chuàng)傷與使所述組織治療組合物接觸以提高其愈合速率。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述組織治療組合物被應用于開放創(chuàng)傷持續(xù)一段足夠時間以使所述創(chuàng)傷閉合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述組織治療組合物被應用于閉合創(chuàng)傷。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其實所述組織治療組合物被應用于組織撕裂傷或切口點。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的方法，其中所述組織治療組合物在至少四次分開的施用中和/或經(jīng)過至少4天的時間被應用于所述組織創(chuàng)傷。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項所述的方法，其中所述組織治療組合物通過噴涂應用于所述組織。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項所述的方法，其中所述CSA從藥學上可接受的器械被給藥，所述器械選自由繃帶、外科敷料、紗布、粘合帶、外科縫合釘、夾子、止血鉗、子宮內(nèi)節(jié)育器、縫合線、套管針、導 管、管、膠原海綿和植入物組成的組。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項所述的方法，其中所述受試者為脊椎動物。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項所述的方法，其中所述受試者為哺乳動物。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項所述的方法，其中所述受試者為非人類的哺乳動物。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項所述的方法，其中所述受試者為人類、馬或狗。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項所述的方法，其中所述受試者為新生兒且所述組織創(chuàng)傷為所述新生兒的肚臍。
13.根據(jù)權(quán)利要求1-11任一項所述的方法，其中所述組織治療組合物用于獸用。
14.根據(jù)權(quán)利要求1-13任一項所述的方法，其中所述組織創(chuàng)傷不是燒傷。
15.根據(jù)權(quán)利要求1-14任一項所述的方法，其中所述組織創(chuàng)傷包括慢性感染。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-15任一項所述的方法，其中所述組織治療組合物包括濃度在0.01 % -5.0% wt/wt 范圍內(nèi)的所述 CSA0
17.根據(jù)權(quán)利要求1-16任一項所述的方法，其中所述組織治療組合物包括濃度在約0.01 % -2.0% wt/wt 范圍內(nèi)的所述 CSA0
18.根據(jù)權(quán)利要求1-17任一項所述的方法，其中所述組織治療組合物包括約0.04%wt/wt濃度的所述CSA。
19.根據(jù)權(quán)利要求1-18任一項所述的方法，其中所述多個陽離子基團各自通過可水解酯鍵連接至所述類固醇基團。
20.根據(jù)權(quán)利要求1-19任一項所述的方法，其中所述CSA為式(V)的化合物或其藥學上可接受的鹽:
其中 環(huán)A、B、C和D獨立地為飽和的，或完全或部分不飽和的，條件是環(huán)A、B、C和D中的至少兩個為飽和的； m、η、P和q獨立地為O或I ;和 R1-R18獨立地選自由氫、羥基、取代或未取代的烷基、取代或未取代的羥烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的烷基竣烷基、取代或未取代的燒氣基烷基、取代或未取代的烷氨基烷氨基、取代或未取代的烷氨基烷氨基烷氨基、取代或未取代的氨基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳氨基烷基、取代或未取代的鹵代烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、氧代、連接至第二個類固醇的連接基團、取代或未取代的氨基烷氧基、取代或未取代的氨基烷氧基烷基、取代或未取代的氨基烷基羧基、取代或未取代的氣基烷基氣基擬基、取代或未取代的氣基烷基酸胺基、取代或未取代的(烷基)氣基燒基、取代或未取代的 C-羧基基烷基、H2N-HC(Q5)-C(O)-O—、H2N —HC(Q5)-C(O) —NO!) —、取代或未取代的疊氮基烷氧基、取代或未取代的氰基烷氧基、P.G.-HN一HC(Q5)-C(O)一O一、取代或未取代的狐基烷氧基、取代或未取代的季按基烷基竣基、和取代或未取代的狐基燒基羧基組成的組，其中Q5為任意氨基酸的側(cè)鏈(包括甘氨酸的側(cè)鏈，即H)，且P.G.為氨基保護基團。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中 R1到R4> R6> R7, Rn、R12> R15、R16和R18獨立地選自由氫、羥基、取代或未取代的烷基、取代或未取代的羥烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的烷基羧烷基、取代或未取代的烷氨基烷基、取代或未取代的烷氨基烷氨基、取代或未取代的烷氨基烷氨基烷氨基、取代或未取代的氨基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳氨基烷基、取代或未取代的鹵代烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、氧代、連接至第二個類固醇的連接基團、取代或未取代的氨基烷氧基、取代或未取代的氨基烷氧基烷基、取代或未取代的氣基烷基竣基、取代或未取代的氣基烷基氣基擬基、取代或未取代的氣基烷基酸胺基、取代或未取代的二(烷基)氨基烷基、取代或未取代的C-羧基基烷基、H2N-HC (Q5)-C (O)-O—、H2N — HC(Q5)-C(O) — N(H) —、取代或未取代的疊氮基烷氧基、取代或未取代的氰基烷氧基、P.G.-HN — HC (Q5)-C (O) — O—、取代或未取代的胍基烷氧基、取代或未取代的季銨基烷基羧基、和取代或未取代的胍基烷基羧基組成的組，其中Q5為任意氨基酸的側(cè)鏈(包括甘氨酸的側(cè)鏈，即H)，且P.G.為氨基保護基團；并且 當環(huán)A、B、C或D之一為不飽和時，R5、R8、R9、R1(1、R13、R14和R17獨立地被刪除以滿足在該位點的碳原子的化合價，或者R5、R8、R9、Rltl、R13和R14獨立地選自由氫、羥基、取代或未取代烷基、取代或未取代羥烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的氨基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的鹵代烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、氧代、連接至第二個類固醇的連接基團、取代或未取代的氨基烷氧基、取代或未取代的氨基烷基竣基、取代或未取代的氣基烷基氣基擬基、取代或未取代的 (烷基)氣基烷基、取代或未取代的C-羧基烷基、H2N-HC (Q5) -C (O) -O—、H2N-HC (Q5) -C (O)一N⑶一、疊氮基烷氧基、氰基烷氧基、P.G.-HN — HC (Q5)-C (O) — O —、胍基烷氧基、和胍基烷基羧基組成的組，其中Q5為任意氨基酸的側(cè)鏈，P.G.為氨基保護基團， 條件是RnRpRpR1PRmR1PR1PR17和R18的至少兩個或三個獨立地選自由取代或未取代的氨基烷基、取代或未取代的氨基烷氧基、取代或未取代的烷基羧烷基、取代或未取代的烷氨基烷氨基、取代或未取代的烷氨基烷氨基烷氨基、取代或未取代的氨基烷基羧基、取代或未取代的芳氨基烷基、取代或未取代的氨基烷氧基氨基烷基氨基羰基、取代或未取代的氣基烷基氣基擬基、取代或未取代的氣基烷基酸胺基、季氣基烷基竣基、取代或未取代的 (烷基)氨基烷基、取代或未取代的C-羧基烷基、H2N-HC (Q5)-C (O)-O—、H2N-HC (Q5)-C (O) —N(H) _、疊氮基烷氧基、氰基烷氧基、P.G.-HN-HC(Q5)-C(O) — O —、取代或未取代的胍基烷氧基和取代或未取代的狐基烷基竣基組成的組。
22.根據(jù)權(quán)利要求20-21任一項所述的方法，其中 R1到R4> R6> R7> Rn、R12> R15、R16和R18獨立地選自由氫、羥基、取代或未取代的(C1-C18)烷基、取代或未取代的(C1-C18)羥烷基、取代或未取代的(C1-C18)烷氧基-(C1-C18)烷基、取代或未取代的(C1-C18)烷基羧基-(C1-C18)烷基、取代或未取代的(C1-C18)烷氨基-(C1-C18)烷基、取代或未取代 的(C1-C18)烷氨基-(C1-C18)烷氨基、取代或未取代的(C1-C18)烷氨基-(C1-C18)烷氨基-(C1-C18)烷氨基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳氨基-(C1-C18)烷基、取代或未取代的(C1-C18)鹵代烷基、取代或未取代的C2-C6烯基、取代或未取代的C2-C6炔基、氧代、連接至第二個類固醇的連接基團、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷氧基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷氧基-(C1-C18)烷基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基羧基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基氨基羰基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基酰胺基、取代或未取代的二(C1-C18烷基)氨基烷基、取代或未取代的 C-羧基(C1-C18)烷基、H2N-HC(Q5)-C(O)-O—、H2N —HC(Q5)-C(O) —NO!)—、取代或未取代的(C1-C18)疊氮基烷氧基、取代或未取代的(C1-C18)氰基烷氧基、P.G.-HN — HC(Q5)-C(O) —O—、取代或未取代的(C1-C18)胍基烷氧基、，取代或未取代的(C1-C18)季銨基烷基羧基和取代或未取代的(C1-C18)胍基烷基羧基組成的組，其中Q5為任意氨基酸的側(cè)鏈(包括甘氨酸的側(cè)鏈，即H)，且P.G.為氨基保護基團； 當環(huán)A、B、C或D之一為不飽和時，R5、R8、R9、R1(1、R13、R14和R17獨立地被刪除以滿足在該位點的碳原子的化合價，或者R5、R8、R9、Rltl、R13和R14獨立地選自由氫、羥基、取代或未取代的(C1-C18)烷基、取代或未取代的(C1-C18)羥烷基、取代或未取代的(C1-C18)烷氧基-(C1-C18)烷基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的(C1-C18)鹵代烷基、取代或未取代的(C2-C6)烯基、取代或未取代的(C2-C6)炔基、氧代、連接至第二個類固醇的連接基團、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷氧基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基羧基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基氨基羰基、取代或未取代的二(C1-C18烷基)氨基烷基、取代或未取代的 C-羧基(C1-C18)烷基、H2N — HC (Q5)-C (O) — O—、H2N — HC (Q5)-C (O) —N (H) —、取代或未取代的(C1-C18)疊氮基烷氧基、取代或未取代的(C1-C18)氰基烷氧基、P.G.-HN — HC(Q5)-C(O) — O —、取代或未取代的(C「C18)胍基烷氧基和(C「C18)胍基烷基羧基組成的組，其中Q5為任意氨基酸的側(cè)鏈，且P.G.為氨基保護基團； 條件是R H、R6、R7、R1 1、R12、R15、R16、R17 和R18中的至少兩個或三個獨立地選自由取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷氧基、取代或未取代的(C1-C18)氨基羧基-(C1-C18)烷基、取代或未取代的(C1-C18)烷氨基-(C1-C18)烷氨基、取代或未取代的(C1-C18)烷氨基-(C1-C18)烷氨基(C1-C18)烷氨基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基羧基、取代或未取代的芳氨基(C1-C18)烷基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷氧基(C1-C18)氨基烷基氨基羰基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基氨基羰基、取代或未取代的(C1-C18)氨基烷基酰胺基、取代或未取代的(C1-C18)季銨基烷基羧基、取代或未取代的二(C1-C18烷基)氨基烷基、取代或未取代的 C-羧基(C「C18)烷基、H2N-HC (Q5) -C (O) -O—、H2N-HC (Q5) -C (O) 一N (H) —、取代或未取代的(C1-C18)疊氮基烷氧基、取代或未取代的(C1-C18)氰基烷氧基、P.G.-HN-HC(Q5)-C(O) — O —、取代或未取代的(C1-C18)胍基烷氧基和取代或未取代的(C1-C18)胍基烷基羧基組成的組。
23.根據(jù)權(quán)利要求20-22任一項所述的方法，其中所述CSA化合物具有式(Ia)
24.根據(jù)權(quán)利要求20-23任一項所述的方法，其中至少R3、R7和R12獨立地為氨基烷氧基或氨基烷基羧基。
25.根據(jù)權(quán)利要求20-24任一項所述的方法，其中R18為烷氨基烷基、二(烷基)氨基烷基、烷氧基羰基烷基、烷基羧烷基或C-羧烷基。
26.根據(jù)權(quán)利要求20-25任一項所述的方法，其中所述CSA，或其藥學上可接受的鹽，選自由下列組成的組:
27.根據(jù)權(quán)利要求20-26任一項所述方法，其中所述CSA，或其藥學上可接受的鹽，為
【文檔編號】A61P17/02GK104080458SQ201280055665
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2012年9月13日 優(yōu)先權(quán)日:2011年9月13日
【發(fā)明者】卡爾·吉尼伯格, 保羅·B·薩維奇 申請人:布萊阿姆青年大學