以假蓽拔果實(shí)提取物為有效成份的抗肥胖、抗糖尿病、肌肉量增加及運(yùn)動(dòng)能力提升用組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種通過(guò)利用脂肪細(xì)胞的UCP活性產(chǎn)生的生熱作用，改善抗肥胖及胰島素抗性而對(duì)抗糖尿病及肌肉量增加與運(yùn)動(dòng)能力提升非常有效的食品及藥物組合物，具體地說(shuō)，涉及一種含有假蓽拔(PiperretrofractumVahl.)提取物的組合物的新用途，也就是涉及一種通過(guò)減少體重及體脂肪而抗肥胖，通過(guò)降低血糖及血液中胰島素改善胰島素抗性而抗糖尿病，以及通過(guò)增加肌肉的能量源供給而使肌肉量增加和耐力增強(qiáng)在內(nèi)的運(yùn)動(dòng)能力提升相關(guān)的食品組合物或藥物組合物。
【專利說(shuō)明】以假蓽拔果實(shí)提取物為有效成份的抗肥胖、抗糖尿病、肌肉量增加及運(yùn)動(dòng)能力提升用組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種用于肥胖及糖尿病的預(yù)防與治療、使肌肉量增加及運(yùn)動(dòng)能力提升的組合物，具體地說(shuō)，涉及一種含有假蓽拔(Piper retrofractum Vahl.)提取物的組合物的新用途。本發(fā)明提供了一種通過(guò)增強(qiáng)人體的生熱作用而減少體重和體脂肪，通過(guò)降低人體的血糖與胰島素水平而產(chǎn)生抗糖尿病功能，通過(guò)增加人體肌肉的能量源供給而使肌肉量增加及耐力增強(qiáng)在內(nèi)的運(yùn)動(dòng)能力提升的功能性食品組合物或藥物組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]依據(jù)2010年經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(0E⑶)的肥胖報(bào)告，韓國(guó)的成人肥胖率(BM1:30以上)為4%，30%表現(xiàn)為超重(BM1: 25~30)。從世界范圍看，肥胖人口達(dá)到了 2億5000萬(wàn)人，預(yù)計(jì)到2025年將達(dá)到3億人以上。為了治療肥胖，需采用通過(guò)使消耗的熱量大于攝取熱量從而消耗體內(nèi)能量的方法。能夠消耗體內(nèi)能量的方法包括身體運(yùn)動(dòng)(exercise)和生熱作用(thermogenesis)?，F(xiàn)在,研發(fā)人員正在廣泛研究通過(guò)一定強(qiáng)度以上的規(guī)則性運(yùn)動(dòng)而激活與運(yùn)動(dòng)相關(guān)的基因從而提高其效率的方案。生熱作用就是，存在于線粒體中的運(yùn)輸?shù)鞍椎囊环N，即，解偶聯(lián)蛋白(UCP,uncoupling protein),使蛋白質(zhì)泄漏(protein leak)增加并通過(guò)解偶聯(lián)氧化(uncoupling oxidation),在不生成ATP的情況下產(chǎn)生熱量。其中,UCPl存在于褐色脂肪組織(BAT,Brown adipose tissue)中，UCP2和UCP3存在于肌肉及脂肪組織中，它們的作用在于調(diào)節(jié)體內(nèi)能量平衡。另外，肥胖人群的體內(nèi)代謝狀況與非肥胖人群相t匕，其脂肪代謝、糖代謝都不相同，這是由于胰島素抗性(insulin resistance)使胰島素不能正常發(fā)揮作用所導(dǎo)致的。持續(xù)性的胰島素抗性最終會(huì)產(chǎn)生糖尿病，據(jù)報(bào)道，相當(dāng)多的糖尿病患者都是因?yàn)榉逝侄鴮?dǎo)致的。
[0003]目前開發(fā)的具有代表性的抗肥胖藥物即諾美亭和賽尼可，具有導(dǎo)致嗓子干、暈眩癥或者腹?jié)q、脂肪便等多種副作用。最近`，研發(fā)人員正在研究利用植物提取物等副作用小、安全性高的天然物研發(fā)一種不同于上述化學(xué)合成品的功能性食品。
[0004]因此,將在東南亞傳統(tǒng)使用的藥用植物中的假蓽拔(Piper retrofractum Vahl.)提取物長(zhǎng)期讓誘導(dǎo)肥胖的動(dòng)物攝取后，對(duì)其體重及體脂肪量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)上述指標(biāo)均明顯降低，研發(fā)人員猜想這是由脂肪細(xì)胞的UCP活性產(chǎn)生生熱作用而導(dǎo)致的。
[0005]抗肥胖藥用植物提取物中普洱茶組合物在10-2001-22510號(hào)，葫蘆科植物提取物在10-2003-87280號(hào)，紅參提取物在10-2006-115006號(hào)，海菊地上部分提取物在10-2007-56192號(hào)，棱子芹提取物在10-2006-38254號(hào)，葡萄樹皮提取物在10-2007-82438號(hào)，決明子提取物在10-2006-91698中分別均有記載。
[0006]糖尿病大致分為I型糖尿病和2型糖尿病，主要發(fā)生在成人身上的2型糖尿病是由于胰島素分泌降低和胰島素抗性的原因造成的，其發(fā)病原因包括:胰島素受體減少、細(xì)胞內(nèi)胰島素受體基質(zhì)-1 (IRS-1, insulin receptor substrate-1)缺乏、酪氨酸激酶(tyrosine kinase)活性度缺乏等多種因素。特別是，通常還會(huì)伴隨多種代謝異常，它作為伴隨有糖尿病性網(wǎng)膜癥、腎衰竭、糖尿病足等并發(fā)癥的慢性疾病中的一種，越是發(fā)達(dá)國(guó)家其發(fā)病率越高。
[0007]曲格列酮(troglitazone)、吡格列酮(pioglitazoe)及羅格列酮(rogigaltazone)等TZD系列藥劑與其它治療糖尿病的藥劑相比,雖然其副作用較小,但是它們是到目前為止公認(rèn)為具有肝毒性及導(dǎo)致肥胖等副作用的藥物。
[0008]最近，研發(fā)人員正在研究利用植物提取物等副作用小、安全性高的天然物研發(fā)一種與上述化學(xué)合成品不同的功能性食品。
[0009]白樺茸子實(shí)體提取物的抗糖尿病效果在10-2005-36879號(hào)，榿木提取物的抗糖尿病效果在10-2002-48813號(hào)，木蹄層孔菌提取物的抗糖尿病效果在10-2003-69748號(hào)，桑葉提取物的抗糖尿病效果在10-2004-82926號(hào)中分別均有記載。 [0010]對(duì)于超重人群、肥胖人群或者雖然是正常體重但體脂肪量較高的人群，可以通過(guò)增加肌肉量并減少體脂肪對(duì)糖尿病、高血壓等代謝綜合癥進(jìn)行預(yù)防和治療。肌肉量的增加會(huì)導(dǎo)致基礎(chǔ)代謝能量的增加，可以防止減肥出現(xiàn)溜溜球效應(yīng)，從而可以有效地進(jìn)行減肥。為了增加肌肉量，可以通過(guò)運(yùn)動(dòng)、飲食療法或使用提高運(yùn)動(dòng)能力的輔助劑(ergogenic aids)?，F(xiàn)在，不論是東方還是西方，都正在進(jìn)行與提高運(yùn)動(dòng)能力的功能性食品相關(guān)的研究。另外，對(duì)于包括類固醇、咖啡因、碳酸氫鈉及檸檬酸鈉等化學(xué)性化合物在內(nèi)的輔助劑，雖然服用超過(guò)一定量可以顯著增加運(yùn)動(dòng)能力，但是上述藥物具有致命性的副作用，最終會(huì)給健康帶來(lái)危害。
[0011]具體地說(shuō)，作為肌肉的能量源，為了將血液中的游離脂肪酸(FFA)和存儲(chǔ)于肌肉內(nèi)的甘油三酸酯(intra-muscular triglyceride, IMTG)轉(zhuǎn)化為能量,就必須將其移動(dòng)到線粒體內(nèi)。為此，肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-1, carnitine palmitoyltransferase-1)的活性發(fā)揮重要的作用。同時(shí)，為了實(shí)現(xiàn)(6-氧化作用，在將長(zhǎng)鏈脂肪酸運(yùn)輸?shù)骄€粒體內(nèi)的過(guò)程中，它也發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。
[0012]ACC 經(jīng)由 5’腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)而被憐酸化及非活性化，上述5’腺苷酸活化蛋白激酶具有可檢測(cè)細(xì)胞能量源變化的機(jī)械性作用。當(dāng)運(yùn)動(dòng)時(shí)，AMPK的活性增加，這導(dǎo)致ACC被磷酸化，從而活性受到抑制，并且使丙二酸單酰輔酶A(malonyl-CoA)的濃度降低。CPT-1的抑制者即丙二酸單酰輔酶A的減少誘導(dǎo)CPT-1的活性，從而增加流入線粒體內(nèi)的被?；?acylate)的脂肪酸。
[0013]最近，研發(fā)人員正在研究利用植物提取物等副作用小、安全性高的天然物研發(fā)一種與上述化學(xué)合成品不同的功能性食品。
[0014]作為肌肉增加用制劑，韓國(guó)專利申請(qǐng)10-2005-709019號(hào)中有相應(yīng)記載。運(yùn)動(dòng)能力增強(qiáng)用食品組合物在10-2003-38486號(hào)中有記載。另外，符合運(yùn)動(dòng)科學(xué)的人參制品在10-1997-12503號(hào)，運(yùn)動(dòng)持續(xù)能力提高用飲食組合物在10-2007-104898號(hào)中分別均有記載。
[0015]本發(fā)明的藥用植物假蓽拔為屬于胡椒科(piperaceae family)的植物,是一種生長(zhǎng)在東南亞的野生植物，本發(fā)明中使用其果實(shí)部分。
[0016]上述植物傳統(tǒng)上常被用作香辛料、調(diào)味料、腹部及腸胃疾病的治療劑和暴露在寒冷的環(huán)境時(shí)產(chǎn)生生熱效果的體溫保存劑。假蓽拔的氨基化合物(amide)成份含有假蓽茇酰胺 A (retrofractamide A)、假蓽發(fā)酸胺 B (retrofractamide B, pipericide)、假蓽發(fā)酸胺C(retrofractamide C)、胡椒堿(piperine)、幾內(nèi)亞胡椒酰胺(guineensine)、胡椒酸甲酯(methyl piperate)、墻草堿(pelliorine)、蓽撥明寧堿(piperlongumininie)等，并具有抗氧化、抗菌、殺蟲效果及提高藥物的生物藥效率、通過(guò)血管擴(kuò)張產(chǎn)生生熱效果等作用。
[0017]但是，目前尚未發(fā)現(xiàn)本發(fā)明中所述的以下效果，即通過(guò)UCP活性產(chǎn)生生熱作用以減少體重及體脂肪的效果，通過(guò)降低空腹血糖及血液中的胰島素濃度以預(yù)防和治療糖尿病的效果，以及利用AMPK活性抑制ACC和通過(guò)增強(qiáng)CPT-1活性促進(jìn)肌肉量增加與運(yùn)動(dòng)量增加的效果。
[0018]在本發(fā)明中，將生長(zhǎng)在東南亞的藥用植物中的假蓽拔(Piper retrofractumVahl.)果實(shí)提取物給誘導(dǎo)肥胖的動(dòng)物長(zhǎng)期攝取后，對(duì)其體重及體脂肪量進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)其指標(biāo)明顯降低，并且，血糖及血液中胰島素濃度也下降，從而可以確認(rèn)其具有抗糖尿病的效果。即，連續(xù)7周給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給予高脂飲食，誘導(dǎo)其出現(xiàn)肥胖及糖尿病狀態(tài)后，在8周的時(shí)間內(nèi)投喂假蓽拔，結(jié)果可以觀察到體重及體脂肪減少，同時(shí)血液中的糖(glucose)及胰島素濃度也下降。這一結(jié)果表明，假蓽拔作為預(yù)防和治療肥胖及糖尿病的治療劑，可以用作抗肥胖及抗糖尿的功能性食品組合物或藥物組合物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0019]技術(shù)問(wèn)題
[0020]因此，本發(fā)明的目的在于，提供一種以假蓽拔(Piper retrofractum Vahl.)果實(shí)提取物為有效成份的組合物及含有該提取物的藥物組合物。
[0021]技術(shù)方案
[0022]本發(fā)明的上述目的需要通過(guò)以下幾個(gè)步驟實(shí)現(xiàn):從假蓽拔果實(shí)獲得提取物的步驟；將上述提取物向肥胖及糖尿病實(shí)驗(yàn)鼠投喂進(jìn)行抗肥胖及抗糖尿病效果與肌肉量及運(yùn)動(dòng)能力提升實(shí)驗(yàn)，并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行評(píng)估的步驟。
[0023]有益效果
[0024]依據(jù)本發(fā)明，含有假蓽拔提取物的組合物能夠通過(guò)減少體重及體脂肪而預(yù)防和治療肥胖，并通過(guò)降低血糖及血液中胰島素濃度而預(yù)防糖尿病，同時(shí)還能夠促進(jìn)肌肉量增加及運(yùn)動(dòng)能力提升。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0025]圖1是顯示在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，老鼠體重減少的效果。函數(shù)圖中用**表示的部分是通過(guò)單向方差分析(one-way ANOVA)的事后檢驗(yàn)即Tukey’ s多項(xiàng)比較試驗(yàn)觀察到*p < 0.05，**p < 0.01。
[0026]圖2是顯示在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，老鼠體脂肪減少的情況。柱形圖中用**表示的部分是通過(guò)單向方差分析的事后檢驗(yàn)即Tukey’ s多項(xiàng)比較試驗(yàn)觀察到 *P < 0.05，**p < 0.01。
[0027]圖3是在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，利用免疫印跡法顯示老鼠脂肪細(xì)胞(3T3-L1)內(nèi)UCP3蛋白活性增強(qiáng)與否。
[0028]圖4是顯示在依 據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，老鼠空腹血糖減少的情況。柱形圖中用**表示的部分是通過(guò)單向方差分析的事后檢驗(yàn)即Tukey’ s多項(xiàng)比較試驗(yàn)觀察到*P < 0.05，**p < 0.01。
[0029]圖5是顯示在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，老鼠空腹胰島素濃度降低的情況。柱形圖中用**表示的部分是通過(guò)單向方差分析的事后檢驗(yàn)即Tukey’ s多項(xiàng)比較試驗(yàn)觀察到*p < 0.05，**p < 0.01。
[0030]圖6是顯示在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，老鼠的HOMA-1R減少的情況。
[0031]圖7是在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，利用免疫印跡法顯示老鼠的肝臟內(nèi)IRS-1蛋白活性增強(qiáng)與否。
[0032]圖8是在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，通過(guò)老鼠大腿部肌肉的PET/CT掃描圖像顯示其肌肉的情況。
[0033]圖9是顯示在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，老鼠大腿部肌肉的體積。柱形圖中用**表示的部分是通過(guò)單向方差分析的事后檢驗(yàn)即Tukey’ s多項(xiàng)比較試驗(yàn)觀察到<0.01。
[0034]圖10是在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，將老鼠肌肉內(nèi)中性脂肪(MTG)用作能量源顯示其含量減少的情況。
[0035] 圖11是在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，利用踏旋器顯示老鼠運(yùn)動(dòng)能力增強(qiáng)的效果。柱形圖中用*表示的部分是通過(guò)單向方差分析的事后檢驗(yàn)即Tukey’ s多項(xiàng)比較試驗(yàn)觀察到*p < 0.05。
[0036]圖12是在依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔提取物處理與否兩種情況下，利用免疫印跡法顯示老鼠肌肉中pAMPK，pACC，CPT-1蛋白活性增強(qiáng)與否。
【具體實(shí)施方式】
[0037]含有依據(jù)本發(fā)明假蓽拔提取物的組合物可以通過(guò)減少體重及體脂肪而預(yù)防及治療肥胖，并通過(guò)降低血糖及血液中胰島素濃度而預(yù)防及治療糖尿病，同時(shí)還可以通過(guò)調(diào)節(jié)作用于更加容易利用肌肉內(nèi)的能量源的基因(AMPK活性，ACC抑制及CPT-1活性)，從而促進(jìn)肌肉量增加，提升運(yùn)動(dòng)能力。
[0038]作為本發(fā)明的另一實(shí)施例，上述假蓽拔果實(shí)提取物既可以利用有機(jī)溶劑萃取，也可以單獨(dú)利用二氧化碳或者利用二氧化碳和有機(jī)溶劑一起采用超臨界萃取方式提取。
[0039]<實(shí)施例 >提取方法
[0040]將干燥的假蓽拔果實(shí)粉末與4倍至10倍的萃取溶劑一起放入萃取裝置內(nèi)，放置12小時(shí)以上或者進(jìn)行超臨界萃取，然后將其通過(guò)濃縮器濃縮并進(jìn)行干燥處理后獲得提取物。[0041 ] 上述萃取溶劑可以使用純凈水(water)、甲醇(methanol)、乙醇(ethanol)、丙醇(propanol)、異丙醇(isopropanol)、丁醇(butanol)、丙酮(acetone)、乙醚(ether)、苯(benzene)、三氯甲燒(chloroform)、乙酸乙酯(ethyl acetate)、二氯甲燒(methylenechloride)、正己燒(hexane)、環(huán)己燒(cyclohexane)、石油醚(petroleumether)或者它們的混合物等多種溶劑，優(yōu)選地，可以使用乙醇。除此之外，只要適合于將上述假蓽拔果實(shí)成份作為有效成份進(jìn)行提取的溶劑均可以使用，并無(wú)其它限制。
[0042]另外，本發(fā)明提供了利用上述組合物的抗肥胖及抗糖尿病的功能性健康食品及藥物組合物。由于上述健康食品及藥物組合物含有依據(jù)本發(fā)明的假蓽拔果實(shí)提取物，因此可以通過(guò)人體脂肪細(xì)胞的UCP活性機(jī)理減少體重及體脂肪而預(yù)防及治療肥胖，并通過(guò)降低血糖及血液中胰島素濃度改善胰島素抗性(insulin resistance)而預(yù)防及治療糖尿病。另外，即使不刻意運(yùn)動(dòng)，也能夠通過(guò)AMPK活性增強(qiáng)、ACC抑制及CPT-1活性增強(qiáng)使有氧運(yùn)動(dòng)的能量供給源的脂肪向肌肉內(nèi)的線粒體內(nèi)移動(dòng)，從而增加肌肉量，并提升運(yùn)動(dòng)能力，最終獲得運(yùn)動(dòng)模擬(mimic)效果。
[0043]本發(fā)明的抗肥胖的功能性健康食品及藥物組合物，如果采用口服，就可以采用本領(lǐng)域公知的方法將其與口服用載體一起制成粉末、顆粒、片劑、丸劑、糖衣片劑、膠囊、液體、凝膠體、糖漿、懸濁液、薄片等多種劑型。適合的載體包括:包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤蘚糖醇及麥芽糖醇等的糖類，包括玉米淀粉、小麥淀粉、大米淀粉及土豆淀粉的淀粉類，包括纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及羥丙甲纖維素等的纖維素類及類似明膠、聚乙烯吡咯烷酮等填充劑。另外，也可以根據(jù)情況將交聯(lián)聚乙烯基吡咯烷酮、瓊膠、藻酸或者褐藻酸鈉等作為崩解劑添加。此外，上述藥物組合物還可以包括抗凝劑、潤(rùn)滑劑、濕潤(rùn)劑、香料、乳化劑及防腐劑等。
[0044]下面，將通過(guò)實(shí)驗(yàn)例等對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更加詳細(xì)的說(shuō)明。但是，下述實(shí)驗(yàn)例等僅是為了對(duì)本發(fā)明進(jìn)行說(shuō)明而列舉的示例，它并不限定本發(fā)明的權(quán)利范圍。
[0045][實(shí)驗(yàn)例I]測(cè)定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重及體脂肪
[0046]< 1-1 >實(shí)駘動(dòng)物及飼料
[0047]在抗肥胖及抗糖尿?qū)嶒?yàn)中使用的高脂肪食物為40%脂肪熱量，假蓽拔提取物按老鼠體重每kg用IOOmg(EXTlOO)， 將5周齡的雄性C57BL/6J老鼠按照高脂肪對(duì)照群(HFD群)和根據(jù)攝取用量確定的提取物投喂群(EXT群)隨意配備后，使它們對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室環(huán)境適應(yīng)I周，對(duì)其投喂7周高脂飲食后，在8周內(nèi)強(qiáng)制投喂賦形劑(Vehicle)或者利用賦形劑分散的提取物。
[0048]在運(yùn)動(dòng)能力提升實(shí)驗(yàn)中使用的高脂肪食物為40%脂肪熱量，假蓽拔提取物按老鼠體重每kg用IOOmg(PRElOO)或者300mg (PRE300)。將5周齡的雄性C57BL/6J老鼠按照高脂肪對(duì)照群(HFD群)和根據(jù)攝取用量確定的提取物投喂群2群(PRE100和PRE300群)隨意配備后，使它們對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室環(huán)境適應(yīng)I周，給每個(gè)實(shí)驗(yàn)群的動(dòng)物均投喂7周高脂飲食后，在8周內(nèi)強(qiáng)制向它們投喂賦形劑或者利用賦形劑分散的提取物。
[0049]< 1-2 >測(cè)定體重及體脂肪
[0050]在8周內(nèi)強(qiáng)制向它們投喂賦形劑或者利用賦形劑分散的萃取物后，測(cè)定其死亡之前的體重，死亡后將其附睪脂肪摘出并測(cè)定重量[圖1與圖2]。
[0051][實(shí)驗(yàn)例2]測(cè)定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血糖、胰島素及HOMA-1R
[0052]< 2-1 >測(cè)定血糖及胰島素
[0053]在8周內(nèi)讓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物攝取本發(fā)明的假蓽拔果實(shí)提取物后，中斷飼料供給6小時(shí)，切斷老鼠尾巴提取少量的血清(serum)，并利用該血清測(cè)定血糖及胰島素。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖4和圖5所示，與對(duì)照群(HFD)相比，攝取了實(shí)驗(yàn)物質(zhì)即假蓽拔提取物的EXT100群的血糖及胰島素明顯減少。
[0054]< 2-2 >III Ct? HOMA-1R
[0055]通過(guò)上述< 2-1 >的血糖和胰島素測(cè)定值計(jì)算出HOMA-1R值，計(jì)算公式如下:
[0056]HOMA-1R=FBg(mg.dL) XFI (ng/ml) X0.0717225161669606[0057]如圖6所示，假蓽拔提取物攝取群與對(duì)照群(HFD)相比，攝取了實(shí)驗(yàn)物質(zhì)即假蓽拔提取物的EXT100群的HOMA-1R值明顯減少，由此可知改善了胰島素抗性。
[0058][實(shí)驗(yàn)例3]評(píng)估實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肌肉體積、肌肉脂肪及運(yùn)動(dòng)能力提升
[0059]< 3-1 >測(cè)定肌肉體積
[0060]在8周內(nèi)讓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物攝取假蓽拔提取物后,利用微型PET/CT(positron emissiontomography/Computed tomography, INVEON, Siemens, USA)測(cè)定最終肌肉體積，結(jié)果如圖8和圖9所示，與攝取高脂肪食物對(duì)照群(HFD)相比，攝取了實(shí)驗(yàn)物質(zhì)即假蓽拔提取物的PRE100群和PRE300群的肌肉體積增加了 200%。
[0061]< 3-2 >測(cè)定肌肉脂肪含暈
[0062]在8周內(nèi)讓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物攝取假蓽拔提取物，動(dòng)物死亡后將肌肉摘出，實(shí)施蘇木精一伊紅染色(H & E)染色，然后觀察其脂肪含量。結(jié)果如圖10所示，與攝取高脂肪食物對(duì)照群(HFD)相比，攝取了假蓽拔提取物的PRE100群和PRE300群的肌肉脂肪含量明顯減少。這是由于存儲(chǔ)于肌肉內(nèi)的甘油三酸酯(intra-muscular triglyceride, IMTG)轉(zhuǎn)換為能量而導(dǎo)致肌肉脂肪含量減少的。
[0063]< 3-3 >評(píng)估運(yùn)動(dòng)能力提升
[0064]在8周內(nèi)讓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物攝取假蓽拔提取物后，利用踏旋器評(píng)估運(yùn)動(dòng)能力，按照每分鐘Ilm的速度進(jìn)行測(cè)定，其結(jié)果如圖4所示，與攝取高脂肪食物對(duì)照群(HFD)相比，攝取了假蓽拔提取物的PRE100群和PRE300群的運(yùn)動(dòng)能力明顯增強(qiáng)[圖11]。
[0065][實(shí)驗(yàn)例4]在實(shí)驗(yàn)動(dòng) 物中與抗肥胖、抗糖尿病、運(yùn)動(dòng)能力提升相關(guān)基因的蛋白質(zhì)表達(dá)增強(qiáng)效果
[0066]< 4-1 >通過(guò)熱產(chǎn)生與抗肥胖相關(guān)基因的蛋白質(zhì)表達(dá)增強(qiáng)效果
[0067]對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞利用胰島素、地塞米松、IBMX處理十天左右，使其分化形成脂肪后，再利用假蓽拔提取物進(jìn)行處理，然后再通過(guò)免疫印跡法(western blot)確認(rèn)UCP蛋白質(zhì)表達(dá)[圖3]，通過(guò)α-微管蛋白(α-tublin)表示出各實(shí)驗(yàn)樣本的蛋白質(zhì)載量都保持一定的水平。
[0068]< 4-2 >與抗糖尿病相關(guān)基因的蛋白質(zhì)表達(dá)增強(qiáng)效果
[0069]在8周內(nèi)讓實(shí)驗(yàn)老鼠攝取假蓽拔果實(shí)提取物后，將老鼠的肝臟摘出，通過(guò)免疫印跡法(westerm blot)確認(rèn)IRS-1的蛋白質(zhì)表達(dá)增強(qiáng)[圖7],通過(guò)α-微管蛋白表示出各實(shí)驗(yàn)樣本的蛋白質(zhì)載量都保持一定的水平。
[0070]< 4-3 >與運(yùn)動(dòng)能力提升相關(guān)基因的蛋白質(zhì)表達(dá)增強(qiáng)效果
[0071]在8周內(nèi)讓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物攝取假蓽拔果實(shí)提取物后，將大腿部的肌肉摘出，通過(guò)免疫印跡法(westerm blot)確認(rèn)pAMPK，pACC，CPT-1的蛋白質(zhì)表達(dá)[圖12]，通過(guò)α -微管蛋白表示出各實(shí)驗(yàn)樣本的蛋白質(zhì)載量都保持一定的水平。其結(jié)果表明，pAMPK，pACC，CPT-1的蛋白質(zhì)表達(dá)量增加。
[0072]工業(yè)實(shí)用性
[0073]如上所述，本發(fā)明提供了一種源于假蓽拔果實(shí)提取物的抗肥胖的功能性組合物，特別是，以通過(guò)脂肪細(xì)胞的UCP活性而產(chǎn)生熱量的機(jī)理為特征的減少體重及體脂肪的功能性組合物，以降低血糖及血液中胰島素濃度的機(jī)理為特征的胰島素抗性改善用抗糖尿病的功能性組合物，以利用IRS-1活性為特征的胰島素抗性改善用抗糖尿病的功能性食品及藥物組合物。同時(shí)，本發(fā)明還提供了以通過(guò)AMPK活性實(shí)現(xiàn)ACC抑制及CPT-1活性增強(qiáng)為特征的肌肉量增加、運(yùn)動(dòng)能力提升及疲勞恢復(fù)用功能性食品及藥物組合物。因此，本發(fā)明在保健醫(yī)藥方面有非常廣闊的前 景。
【權(quán)利要求】
1.一種抗肥胖的功能性食品組合物，其特征在于: 其含有藥用植物假蓽拔^Piper retrofractum Vahl.)果實(shí)提取物為有效成份,并具有減少體重及體脂肪的機(jī)理。
2.如權(quán)利要求1所述的抗肥胖的功能性食品組合物，其特征在于: 上述假蓽拔提取物利用有機(jī)溶劑萃取或者采用超臨界萃取方式提取果實(shí)粉末。
3.—種抗肥胖的藥物組合物，其特征在于: 其含有假蓽拔果實(shí)提取物為有效成份，并具有通過(guò)脂肪細(xì)胞的UCP活性產(chǎn)生熱量的機(jī)理。
4.如權(quán)利要求3所述的抗肥胖的藥物組合物，其特征在于: 上述組合物是一種具有減少體重及體脂肪機(jī)理的抗肥胖的保健藥用輔助品。
5.如權(quán)利要求3所述的抗肥胖的藥物組合物，其特征在于: 上述假蓽拔果實(shí)提取物相對(duì)于組合物的總重量計(jì)，其含量為0.001重量％至80重量％，并具有減少體重及體脂肪的機(jī)理。
6.一種抗肥胖的功能性食品組合物，其特征在于: 上述權(quán)利要求1所述的組合物為粉末、顆粒、片劑、膠囊、糖漿或者飲料中的任意一種形態(tài)，并具有通過(guò)脂肪細(xì)胞的UCP活性產(chǎn)生生熱作用而減少體重及體脂肪的機(jī)理。
7.一種改善胰島素抗性的抗糖尿病的功能性食品組合物，其特征在于: 其含有藥用植物假蓽拔果實(shí)提取物為有效成份，并具有降低血糖和血液中胰島素濃度的機(jī)理。
8.如權(quán)利要求7所述的改善胰島素抗性的抗糖尿病的功能性食品組合物，其特征在于: 上述假蓽拔提取物利用有機(jī)溶劑萃取或者采用超臨界萃取方式提取果實(shí)粉末。
9.一種改善胰島素抗性的抗糖尿病的藥物組合物，其特征在于: 其含有假蓽拔果實(shí)提取物為有效成份，并具有IRS-1活性機(jī)理。
10.如權(quán)利要求9所述的改善胰島素抗性的抗糖尿病的藥物組合物，其特征在于: 上述組合物是一種具有降低血糖和血液中胰島素濃度機(jī)理的改善胰島素抗性的抗糖尿病的保健藥用輔助品。
11.如權(quán)利要求9所述的改善胰島素抗性的抗糖尿病的藥物組合物，其特征在于: 上述假蓽拔果實(shí)提取物相對(duì)于組合物的總重量計(jì)，其含量為0.001重量％至80重量％，并具有降低血糖和血液中胰島素濃度的機(jī)理。
12.—種改善胰島素抗性的抗糖尿病的功能性食品組合物，其特征在于: 上述權(quán)利要求7所述的組合物為粉末、顆粒、片劑、膠囊、糖漿或者飲料中的任意一種形態(tài)，并具有降低血糖和血液中胰島素濃度的機(jī)理。
13.一種健康功能性食品組合物,其特征在于: 其含有藥用植物假蓽拔果實(shí)提取物為有效成份，并具有促進(jìn)肌肉量增加、提升運(yùn)動(dòng)能力及恢復(fù)疲勞的機(jī)理。
14.如權(quán)利要求13所述的健康功能性食品組合物，其特征在于: 上述假蓽拔提取物利用有機(jī)溶劑萃取或者采用超臨界萃取方式提取果實(shí)粉末。
15.一種藥物組合物，其特征在于:其含有假蓽拔果實(shí)提取物為有效成份，并具有AMPK活性機(jī)理。
16.如權(quán)利要求15所述的藥物組合物，其特征在于: 上述組合物能促進(jìn)肌肉量增加、提升運(yùn)動(dòng)能力及恢復(fù)疲勞。
17.如權(quán)利要求15所述的藥物組合物，其特征在于: 上述假蓽拔果實(shí)提取物相對(duì)于組合物的總重量計(jì)，其含量為0.001重量％至80重量％，并具有促進(jìn)肌肉量增加、提升運(yùn)動(dòng)能力及恢復(fù)疲勞的機(jī)理。
18.一種健康功能性食品組合物,其特征在于: 上述權(quán)利要求13所述的組合物為粉末、顆粒、片劑、膠囊、糖漿或者飲料中的任意一種形態(tài)，并具有促進(jìn) 肌肉量增加、提升運(yùn)動(dòng)能力及恢復(fù)疲勞的機(jī)理。
【文檔編號(hào)】A61P3/10GK103717229SQ201280027034
【公開日】2014年4月9日 申請(qǐng)日期:2012年5月31日 優(yōu)先權(quán)日:2011年5月31日
【發(fā)明者】金炅真, 金旼善, 黃在寬 申請(qǐng)人:Cj第一制糖株式會(huì)社, 延世大學(xué)校產(chǎn)學(xué)協(xié)力團(tuán)