粘度降低的制劑的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法以及使用請(qǐng)求保護(hù)的方法制得的制劑。本發(fā)明還涉及通過(guò)本發(fā)明任一方法制備的穩(wěn)定制劑。本發(fā)明還涉及包含容器的制品，該容器包含本發(fā)明的制劑。
【專(zhuān)利說(shuō)明】粘度降低的制劑
發(fā)明領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及治療性蛋白的制劑領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及粘度降低的制劑以及制備其的方法。
[0002]發(fā)明背景
[0003]許多包含蛋白的藥品需要高治療劑量以實(shí)現(xiàn)有效的患者響應(yīng)。由于治療性蛋白(包括單克隆抗體)體積大以及易于蛋白分解，為了達(dá)到血流中的治療濃度，需要將其經(jīng)靜脈內(nèi)或皮下注射給藥。在這兩種給藥途徑中，皮下注射對(duì)患者更為便利，因?yàn)榭稍诩医o予靶向皮下給藥途徑的藥品。存在多種在預(yù)填充注射器中的已經(jīng)重新或作為產(chǎn)品線(xiàn)延伸而開(kāi)發(fā)的單克隆抗體藥品，用于皮下給藥途徑。通常，由于皮下空間對(duì)給藥劑量的體積限制，通過(guò)預(yù)填充注射器單次推注給藥(bolus administration)的方式可給藥不超過(guò)ImL藥品溶液。然而，給藥總體積和持續(xù)時(shí)間由給藥溶液中單克隆抗體的濃度控制。為在更小體積內(nèi)實(shí)現(xiàn)輸注或推注給藥更高劑量，需要溶液中高濃度的單克隆抗體。
[0004]多種濃度范圍超過(guò)100mg/mL的單克隆抗體以及大多數(shù)濃度為更高的200mg/mL的單克隆抗體具有相對(duì)高粘度，導(dǎo)致處置單克隆抗體藥品溶液的問(wèn)題。諸如用于濃縮抗體至高水平的切向流動(dòng)過(guò)濾以及無(wú)菌過(guò)濾的制備エ藝是困難的并導(dǎo)致高粘度溶液的產(chǎn)量損失。當(dāng)必須達(dá)到超過(guò)約20牛的カ以使用預(yù)填充注射器遞送藥品的皮下劑量時(shí)，還可出現(xiàn)患者或醫(yī)療專(zhuān)業(yè)人員藥品處理和注射能力的問(wèn)題。顯然需要降低粘度的制劑方法，且在制劑開(kāi)發(fā)期間使用降低粘度的賦形劑是一可行的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明涉及一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法。
[0006]在一項(xiàng)實(shí)施方案中，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的制劑；以及(b)將氯化鈉添加至該制劑中至約20mM至約150mM的濃度，其中具有氯化鈉的制劑的粘度比不具有氯化鈉的相同制劑的粘度小。
[0007]在另ー項(xiàng)實(shí)施方案中，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的制劑；以及(b)將甘氨酸和/或精氨酸添加至該制劑中至濃度約0.4%w/v至約1.l%w/v，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度比不具有甘氨酸和/或精氨酸的相同制劑的粘度小。
[0008]在另ー項(xiàng)實(shí)施方案中，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的制劑；以及(b)將苯丙氨酸添加至該制劑中至濃度約0.4%w/v至約1.l%w/v,其中具有苯丙氨酸的制劑的粘度比不具有苯丙氨酸的相同制劑的粘度小。
[0009]在另ー項(xiàng)實(shí)施方案中，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的制劑；以及(b)將酪氨酸添加至該制劑中至濃度約0.001%w/v至約0.005%w/v,其中具有酪氨酸的制劑的粘度比不具有酪氨酸的相同制劑 的粘度小。
[0010]在另ー項(xiàng)實(shí)施方案中，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的制劑；以及(b)將脯氨酸添加至該制劑中至濃度約4.0%w/v，其中具有脯氨酸的制劑的粘度比不具有脯氨酸的相同制劑的粘度小。[0011 ] 本發(fā)明還涉及通過(guò)本發(fā)明任一方法制備的穩(wěn)定制劑。
[0012]本發(fā)明還涉及包含容器的制品，該容器包含本發(fā)明制劑。
[0013]附圖簡(jiǎn)述
[0014]圖1.氯化鈉:在所有測(cè)試濃度下，氯化鈉降低了檸檬酸鹽緩沖液中的抗IL5mAb的粘度。
[0015]圖2.檸檬酸鹽緩沖液:除了 0.04%甲硫氨酸以外，所有濃度的直鏈氨基酸降低了樣品的粘度。
[0016]圖3.檸檬酸鹽:苯丙氨酸、酪氨酸和脯氨酸降低了抗IL5mAb制劑的粘度，而色氨酸未改變抗IL5mAb制劑的粘度。
[0017]發(fā)明詳述
[0018]應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明不限于具體的方法、試劑、化合物、組合物或生物系統(tǒng)，其當(dāng)然可以變化。還應(yīng)當(dāng)理解，本文所用的術(shù)語(yǔ)僅為描述具體的實(shí)施方案，而不是為了限制。如本說(shuō)明書(shū)及所附權(quán)利要求書(shū)中使用的，除非內(nèi)容明確另有所指，単數(shù)形式“ー個(gè)”、“ー種”和“該”包括所指事物的復(fù)數(shù)形式。因此，例如，提及“多肽”包括兩種或多種多肽的組合等。
[0019]當(dāng)涉及可測(cè)量值如量、持續(xù)時(shí)間等時(shí)，本文所用的“約”是指涵蓋從特定數(shù)值的±20%或±10%的變體(包括±5%、±1%和±0.1%),這樣的變體適于施行所公開(kāi)的方法。
[0020]除非另有所指，否則本文所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員通常所理解的相同的含義。盡管任何與本文所述的方法和材料相似或相當(dāng)?shù)姆椒ê筒牧峡捎糜诒景l(fā)明測(cè)試的實(shí)踐中，但優(yōu)選的材料和方法如本文所述。在描述和請(qǐng)求本發(fā)明中，將用到以下術(shù)語(yǔ)?！?br> [0021]本發(fā)明涉及一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法。
[0022]在本發(fā)明的示例性實(shí)施方案中，所生產(chǎn)的液體多肽組合物表現(xiàn)出理想的特性，如理想的粘度和表面張カ特性。
[0023]術(shù)語(yǔ)“表面張力”是指表面下的分子對(duì)表面/空氣界面的分子施加的吸引力，是由于液體的高分子濃度相對(duì)氣體的低分子濃度而引起。具有低表面張カ值的液體，如非極性液體，比水更容易流動(dòng)。通常，表面張カ值以牛/米或達(dá)因/厘米表示。
[0024]本文涉及的“動(dòng)態(tài)表面張力”是指表面/空氣界面和對(duì)表面/表面界面的動(dòng)態(tài)界面張力。有多種可選的方法測(cè)量動(dòng)態(tài)表面張力，例如，捕泡表面張カ計(jì)(captivebubble surface tensionometry)或搏胡氣泡表面張カ計(jì)(pulsating bubble surfacetensionometry)。
[0025]術(shù)語(yǔ)“粘度”指的是流體在規(guī)定溫度表現(xiàn)的對(duì)流動(dòng)的內(nèi)部阻力；是切應(yīng)力與剪切速率之比。如果I達(dá)因/平方厘米的カ導(dǎo)致兩個(gè)面積為I平方厘米且相距I厘米的平行液體表面以lcm/s的速度相對(duì)運(yùn)動(dòng)，則液體具有I泊的粘度。I泊=100厘泊。
[0026]當(dāng)涉及表觀(guān)粘度，應(yīng)當(dāng)理解粘度值取決于進(jìn)行測(cè)量的條件，如所采用的溫度、剪切速率和切應(yīng)力。表觀(guān)粘度定義為切應(yīng)カ與應(yīng)用的剪切速率之比。有多種可選的方法測(cè)量表觀(guān)粘度。例如，粘度可通過(guò)合適的錐和板、平行板或其它類(lèi)型的粘度計(jì)或流變儀測(cè)試。
[0027]在一些實(shí)施方案中，粘度降低的制劑具有小于約50cP、小于約45cP、小于約40cP、小于約35cP、小于約30cP、小于約25cP、小于約20cP或小于約15cP的粘度。
[0028]本文替換使用的“多肽”、“肽”和“蛋白”是指氨基酸殘基的聚合物。多肽可以是天然(組織衍生的)起源的、重組的或由原核或真核細(xì)胞制品天然表達(dá)的，或者是經(jīng)由合成方法化學(xué)生產(chǎn)的。該術(shù)語(yǔ)適用于氨基酸聚合物(其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基為相應(yīng)的天然存在的氨基酸的人工化學(xué)模擬物)，也適用于天然存在的氨基酸聚合物和非天然存在的氨基酸聚合物。氨基酸模擬物是指具有與氨基酸的一般的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同的結(jié)構(gòu)，但作用的方式與天然存在的氨基酸類(lèi)似的化學(xué)化合物?？茖W(xué)和專(zhuān)利文獻(xiàn)充分地描述了非天然殘基。ー些示例性的用作天然氨基酸殘基模擬物的非天然組合物和指導(dǎo)如下所述。芳香族氨基酸的模擬物可通過(guò)由以下替代而生成:例如D-或L-萘基丙氨酸(naphylalanine) ;D_或L-苯基甘氨酸；D_或L-2噻吩基丙氨酸(thieneylalanine) ;D_或L_l, _2，3_，或4-花基丙氨酸(pyreneylalanine) ;D_ 或 L-3 噻吩基丙氨酸(thieneylalanine) ;D_ 或 L-(2_ 吡唳基)-丙氨酸；D-或L- (3-吡啶基)-丙氨酸；D-或L- (2-吡嗪基)-丙氨酸；D-或L- (4-異丙基)-苯基甘氨酸；D- ( 二氟甲基)-苯基甘氨酸；D_ ( 二氟甲基)-苯丙氨酸；D_對(duì)-氟-苯丙氨酸；D-或L-對(duì)-聯(lián)苯基苯丙氨酸；K-或L-對(duì)-甲氧基-聯(lián)苯基苯丙氨酸；D-或L-2-吲哚(烷基)丙氨酸；和D-或L-烷基丙氨酸，其中烷基可以為取代或未取代的甲基、乙基、丙基、己基、丁基、戍基、異丙基、異丁基、sec-1sotyl、異戍基,或非酸性氨基酸。非天然氨基酸的芳香族環(huán)包括，例如噻唑基、噻吩基(thiophenyl)、吡唑基、苯并咪唑基、萘基、呋喃基、吡咯基，和吡啶基芳香族環(huán)。
[0029]本文所用的“肽”包括作為本文具體舉例說(shuō)明的那些肽的保守變體的肽。本文所用的“保守變體”表示使用另ー生物學(xué)上相似的殘基替代氨基酸殘基。保守變體的實(shí)例包括但不限于，ー個(gè)疏水性殘基如異亮氨酸、纈氨酸、亮氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、酪氨酸、正亮氨酸或甲硫氨酸取代另ー個(gè)疏水殘基，或一個(gè)極性殘基取代另ー個(gè)極性殘基，如精氨酸取代賴(lài)氨酸、谷氨酸取代天冬氨酸或谷氨酰胺取代天冬酰胺等?？苫ハ嗳〈闹行杂H水性氨基酸包括天冬酰胺、谷氨酰胺、絲氨酸和蘇氨酸?！氨Ｊ刈凅w”還包括使用取代的氨基酸代替未取代的母體氨基酸，條件是取代的多肽的抗體也與未取代的多肽起免疫反應(yīng)。這樣的保守取代在本發(fā)明的肽的種類(lèi)的定義之內(nèi)。本文所用的“陽(yáng)離子的”是指在PH7.4時(shí)具有凈正電荷的任何肽。肽的生物活性可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的和本文所述的標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定。
[0030]當(dāng)關(guān)于蛋白使用“重 組”時(shí)，表示該蛋白已通過(guò)引入異源核酸或蛋白或者改變天然核酸或蛋白進(jìn)行修飾。
[0031]本文所用的“治療性蛋白”指的是(例如)研究者或臨床醫(yī)生所尋找的、可向哺乳動(dòng)物給藥以引出組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人類(lèi)的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)應(yīng)答的任何蛋白和/或多肽。治療性蛋白可引出多于ー種生物學(xué)或醫(yī)學(xué)應(yīng)答。而術(shù)語(yǔ)“治療有效量”是指與未接受該量的相應(yīng)的受試者相比，導(dǎo)致(但不限干)疾病、病癥或副作用痊愈、預(yù)防或減輕，或者疾病或病癥進(jìn)展速率降低的任何量。該術(shù)語(yǔ)在其范圍內(nèi)還包括有效增強(qiáng)正常生理功能的量以及在患者中有效地引起增強(qiáng)或有助于第二種藥物的治療作用的生理功能的量。
[0032]本文所鑒定的所有“氨基酸”殘基為天然的L-構(gòu)型。與標(biāo)準(zhǔn)多肽命名一致，氨基酸殘基的縮寫(xiě)如下表所示。
[0033]表1.氨基酸縮寫(xiě)
[0034]
【權(quán)利要求】
1.一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的制劑；以及(b)將氯化鈉添加至該制劑中至約20mM至約150mM的濃度，其中具有氯化鈉的制劑的粘度比不具有氯化鈉的相同制劑的粘度小。
2.權(quán)利要求1的方法，其中氯化鈉添加至選自約25mM、約50mM和約IOOmM的濃度。
3.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中具有氯化鈉的制劑的粘度比不具有氯化鈉的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%或至少約 40% o
4.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中具有氯化鈉的制劑的粘度小于約50cP、小于約45cP、小于約40cP或小于約35cP。
5.一種 降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的制劑；以及(b)將甘氨酸和/或精氨酸添加至該制劑中至約0.4%w/v至約1.l%w/v的濃度，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度比不具有甘氨酸和/或精氨酸的相同制劑的粘度小。
6.權(quán)利要求5的方法，其中甘氨酸和/或精氨酸添加至選自約0.5%w/v和約l%w/v的濃度。
7.權(quán)利要求5或6的方法，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度比不具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%或至少約50%。
8.權(quán)利要求5、6或7的方法，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度小于約50cP、小于約45cP、小于約40cP、小于約35cP、小于約30cP或小于約25cP。
9.一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的制劑；以及(b)將苯丙氨酸添加至該制劑中至約0.4%w/v至約1.l%w/v的濃度，其中具有苯丙氨酸的制劑的粘度比不具有苯丙氨酸的相同制劑的粘度小。
10.權(quán)利要求9的方法，其中苯丙氨酸添加至為約0.8%w/v的濃度。
11.權(quán)利要求9或10的方法，其中具有苯丙氨酸的制劑的粘度比不具有苯丙氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%或至少約50%。
12.權(quán)利要求9、10或11的方法，其中具有苯丙氨酸的制劑的粘度小于約50cP、小于約45cP、小于約40cP、小于約35cP、小于約30cP或小于約25cP。
13.一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的制劑；以及(b)將酪氨酸添加至該制劑中至約0.001%w/v至約0.005%w/v的濃度，其中具有酪氨酸的制劑的粘度比不具有酪氨酸的相同制劑的粘度小。
14.權(quán)利要求13的方法，其中酪氨酸添加至為約0.004%w/v的濃度。
15.權(quán)利要求13或14的方法，其中具有酪氨酸的制劑的粘度比不具有酪氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%或至少約50%。
16.權(quán)利要求13、14或15的方法，其中具有酪氨酸的制劑的粘度小于約50cP、小于約45cP、小于約40cP、小于約35cP、小于約30cP或小于約25cP。
17.一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的制劑；以及(b)將脯氨酸添加至該制劑中至約4.0%w/v的濃度，其中具有脯氨酸的制劑的粘度比不具有脯氨酸的相同制劑的粘度小。
18.權(quán)利要求17的方法，其中具有脯氨酸的制劑的粘度比不具有脯氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%或至少約75%。
19.權(quán)利要求17或18的方法，其中具有酪氨酸的制劑的粘度小于約50cP、小于約45cP、小于約40cP、小于約35cP、小于約30cP、小于約25cP、小于約20cP或小于約15cP。
20.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該方法進(jìn)ー步包括測(cè)定蛋白制劑的穩(wěn)定性。
21.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該制劑進(jìn)ー步包含蔗糖。
22.權(quán)利要求21的方法，其中該制劑進(jìn)ー步包含濃度為約234mM的蔗糖。
23.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該制劑配制為pH約6.0。
24.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該制劑進(jìn)ー步包含聚山梨酷-80。
25.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該治療性蛋白是抗原結(jié)合多肽。
26.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該抗原結(jié)合多肽是抗體。
27.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該抗原結(jié)合多肽是免疫球蛋白單一可變域。
28.權(quán)利要求25的方法，其中該抗原結(jié)合多肽結(jié)合至白細(xì)胞介素5(IL5)。
29.權(quán)利要求28的方法，其·中該抗原結(jié)合多肽是抗IL5抗體。
30.權(quán)利要求29的方法，其中該抗IL5抗體包括包含SEQID NO:1的重鏈以及包含SEQID NO:2的輕鏈。
31.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該治療性蛋白的存在濃度為至少約150mg/ml、至少約175mg/ml、至少約200mg/ml、至少約225mg/ml、至少約250mg/ml、至少約275mg/ml或至少約300mg/ml。
32.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該治療性蛋白的存在濃度為至少約150mg/ml至約 300mg/ml。
33.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該制劑是重構(gòu)制劑。
34.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該制劑是液體藥物制劑。
35.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該制劑適于腸胃外給藥。
36.前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)的方法，其中該制劑包含約IOmM至約50mM檸檬酸鹽。
37.權(quán)利要求36的方法，其中該制劑包含約20mM檸檬酸鹽。
38.通過(guò)前述權(quán)利要求任ー項(xiàng)方法制備的穩(wěn)定制劑。
39.包含容器的制品，該容器包含權(quán)利要求38的制劑。
40.權(quán)利要求39的制品，其進(jìn)ー步包含用于給藥該制劑的說(shuō)明書(shū)。
【文檔編號(hào)】A61K39/00GK103596585SQ201280026486
【公開(kāi)日】2014年2月19日 申請(qǐng)日期:2012年4月6日 優(yōu)先權(quán)日:2011年4月7日
【發(fā)明者】M.A.蒙克, M.Y.王, K.張 申請(qǐng)人:葛蘭素史密斯克萊有限責(zé)任公司