專利名稱：一種注射用含細(xì)胞色素c藥物組合物的凍干制劑、制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種注射用含細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑及其制備方法，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑，通用名稱注射用細(xì)胞色素C ;英文名稱Cytochrome C for Injection。本品是存在于細(xì)胞線粒體中的一種以鐵卟啉為輔基的蛋白質(zhì)，目前已能提純分離。藥用制劑是從動(dòng)物心臟或酵母中分離出來(lái)的，細(xì)胞色素是呼吸鏈的一環(huán)。各種細(xì)胞色素按一定順序排列組成細(xì)胞色素體系，其分子中的Fe3+在有關(guān)酶的作用下，能進(jìn)行可逆的氧化還原反應(yīng)，擔(dān)負(fù)傳遞電子的作用，是細(xì)胞呼吸所不可少的。細(xì)胞色素C不能透過細(xì)胞膜，因此對(duì)正常人無(wú)作用，但當(dāng)組織缺氧時(shí)，細(xì)胞膜通透性增高，外源性制劑即能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，從而發(fā)揮其糾正細(xì)胞呼吸和物質(zhì)代謝作用。用于各種組織缺氧急救的輔助治療，如一氧化碳中毒、催眠藥中毒、氰化物中毒、新生兒窒息、嚴(yán)重休克期缺氧、腦 血管意外、腦震蕩后遺癥、麻醉及肺部疾病引起的呼吸困難和各種心臟疾患弓I起的心肌缺氧的治療。細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑為細(xì)胞色素C加適宜穩(wěn)定劑和凍干保護(hù)劑的無(wú)菌凍干品，為粉紅色凍干塊狀物。細(xì)胞色素C凍干制劑現(xiàn)有生產(chǎn)流程為藥液配制-灌裝半加塞-冷凍干燥、壓塞-軋蓋-目檢包裝?，F(xiàn)有的生產(chǎn)工藝有(I)處方主藥細(xì)胞色素C ;輔料包括葡萄糖、亞硫酸氫鈉、無(wú)水亞硫酸鈉、注射用水。(2)溶液配制稱取處方量輔料溶解于總配制量50%的注射用水中，加處方量細(xì)胞色素C攪拌溶解，調(diào)節(jié)pH值過濾至澄明，用除菌濾器過濾后備用。(3)冷凍干燥23小時(shí)完成藥液預(yù)凍、升華干燥、二次干燥、壓塞過程。但是上述工藝均存在下述問題(I)細(xì)胞色素C是一種以鐵卟啉為輔基的蛋白質(zhì)，為輔酶類生化藥物，穩(wěn)定性較差，處方中的輔料雖然對(duì)細(xì)胞色素C有一定的保護(hù)作用，但按照現(xiàn)有處方工藝細(xì)胞色素C在經(jīng)歷整個(gè)生產(chǎn)過程后，產(chǎn)品質(zhì)量出現(xiàn)不穩(wěn)定性，常出現(xiàn)澄清度、可見異物不合格問題。(2)在冷凍干燥過程中凍干時(shí)間達(dá)到23小時(shí)，凍干時(shí)間越長(zhǎng)細(xì)胞色素C處于非干燥狀態(tài)時(shí)間越長(zhǎng)，產(chǎn)品質(zhì)量越不穩(wěn)定，能耗越大，生產(chǎn)成本越高。改進(jìn)凍干工藝、縮短凍干時(shí)間有利于提高產(chǎn)品質(zhì)量和節(jié)能降耗。(3)產(chǎn)品在貯存過程中，細(xì)胞色素C不穩(wěn)定易引起含量、活力明顯降低
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種注射用含細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑。本發(fā)明另一目的是提供注射用含細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑的制備方法。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明提供一種注射用含細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑，所述凍干制劑包括如下重量份的組分細(xì)胞色素C75 300份；L-精氨酸3(Γ60份；依地酸二鈉2 5份；甘露醇150份。優(yōu)選組分為細(xì)胞色素C150份；L_精氨酸45份；依地酸二鈉3份；甘露醇150份。上述凍干制劑的制備方法，包括如下步驟1)配制藥液；2)冷凍干燥；所述冷凍干燥包括以下步驟預(yù)凍、一次干燥、二次干燥。所述預(yù)凍步驟包括將冷凝器溫度預(yù)降至_40°C以下，藥液進(jìn)箱后在O. 5 1. 5小時(shí)內(nèi)將板層溫度降至-35°C以下，保持低溫狀態(tài)2 3小時(shí)。所述一次干燥步驟包括開啟真空泵，保持真空度20Pa以下，I小時(shí)升溫至4 5°C，保溫3 4小時(shí)，進(jìn)行一次干燥。所述二次干燥步驟包括一次干燥后，I小時(shí)內(nèi)將板層升溫至14 16°C，真空度控制在10 20Pa，保溫2小時(shí)，再升溫I小時(shí)至37 39°C，保溫3 4小時(shí)；在凍干過程中，檢查板層溫度、制品溫度、冷凝器溫度，凍干結(jié)束后，進(jìn)行液壓加塞。所述冷凍干燥總時(shí)間為1Γ16小時(shí)。所述步驟I)中，將L-精氨酸和依地酸二鈉加入到經(jīng)活性炭過濾的甘露醇溶液中，再與細(xì)胞色素C溶液混合，采用濃度為O. 4 O. 6mol/l的磷酸或磷酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值
6.O 7. 5，過濾得到藥液。本發(fā)明具有如下技術(shù)效果(I)細(xì)胞色素C作為一種以鐵卟啉為輔基的蛋白質(zhì)，為輔酶類生化藥物，穩(wěn)定性較差，在本發(fā)明中，輔料選用依地酸二鈉和L-精氨酸，有利于提高細(xì)胞色素C的穩(wěn)定性，藥液配制過程選用甘露醇作凍干賦形劑，既可使凍干成形，又可保證產(chǎn)品的質(zhì)量。(2)選用磷酸或磷酸鈉溶液作為pH值調(diào)節(jié)劑，可使藥液pH值與產(chǎn)品凍干后再?gòu)?fù)溶的藥液PH值保持一致，從而使產(chǎn)品質(zhì)量更穩(wěn)定。(3)在甘露醇溶液經(jīng)活性炭處理后再加入細(xì)胞色素C，避免了細(xì)胞色素C因活性炭吸附而引起的含量降低問題。(4)縮短凍干時(shí)間可使細(xì)胞色素C盡快脫離非干燥狀態(tài)，在本發(fā)明中，將凍干時(shí)間由23小時(shí)縮短至1Γ16小時(shí)，從而使細(xì)胞色素C的穩(wěn)定性進(jìn)一步得到保證。(5)由于縮短凍干時(shí)間，降低能耗達(dá)30%，同時(shí)在不增加硬件投入的情況下，可提高了生產(chǎn)產(chǎn)能30%左右，顯著降低了生產(chǎn)成本。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1本發(fā)明的注射用含細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑由如下成分制成細(xì)胞色素C7. 5g ；L-精氨酸3g ;依地酸二鈉O. 20g ;甘露醇15g，注射用水加至1000ml。其制備方法如下I)稱取處方量的甘露醇，加入500ml的注射用水溶解，加2%?；钚蕴?，煮沸，保溫15分鐘后，過濾脫炭，得溶液①。2)將溶液①冷卻至20°C以下，先后加入處方量的L-精氨酸和依地酸二鈉，得溶液②。3)取處方量的細(xì)胞色素C溶液，加注射用水補(bǔ)充至300毫升，得溶液③。4)將溶液②、溶液③混合，再用冷注射用水補(bǔ)足體積至總量，調(diào)pH值6. 7，經(jīng)
O.22 μ m孔徑除菌濾器過濾，按每瓶Iml分裝于2ml管制瓶中，管制瓶置冷凍干燥機(jī)制品室板層，待冷凍干燥。PH調(diào)節(jié)劑為5%磷酸溶液。5)冷凍干燥工藝①預(yù)凍首先將冷凝器溫度預(yù)降至_42°C，產(chǎn)品進(jìn)箱后在I小時(shí)內(nèi)將板層溫度快速降至-35°C以下，保持低溫狀態(tài)2小時(shí)。②一次干燥開啟真空泵，保持真空度20Pa以下，I小時(shí)升溫至5°C，保溫3小時(shí)，進(jìn)行一次干燥。③二次干燥制品一次干燥后，I小時(shí)將板層升溫至15°C(真空度控制在l(T20Pa)保溫2小時(shí)，再升溫I小時(shí)至38°C，保溫3小時(shí)(凍干總時(shí)間14小時(shí))。④凍干過程中，檢查板層溫度、制品溫度、冷凝器溫度等，凍干結(jié)束后，進(jìn)行液壓加
塞，軋蓋。 包裝10瓶/盒X60盒/件實(shí)施例2本發(fā)明的注射用含細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑由如下成分制成細(xì)胞色素C15g ；L-精氨酸4. 5g ;依地酸二鈉O. 3g ;甘露醇15g，注射用水加至1000ml。其制備方法如下I)稱取處方量的甘露醇，加入500ml的注射用水溶解，加2%。活性炭，煮沸，保溫15分鐘后，過濾脫炭，得溶液①。2)將溶液①冷卻至20°C以下，先后加入處方量的L-精氨酸和依地酸二鈉，得溶液②。3)取處方量的細(xì)胞色素C溶液，加注射用水補(bǔ)充至300毫升，得溶液③。4)將溶液②、溶液③混合，再用冷注射用水補(bǔ)足體積至總量，調(diào)pH值6.8，經(jīng)
O.22 μ m孔徑除菌濾器過濾，按每瓶Iml分裝于2ml管制瓶中，管制瓶置冷凍干燥機(jī)制品室板層，待冷凍干燥。PH調(diào)節(jié)劑為5%磷酸溶液。5)冷凍干燥工藝①預(yù)凍首先將冷凝器溫度預(yù)降至_44°C，產(chǎn)品進(jìn)箱后在I小時(shí)內(nèi)將板層溫度快速降至-35°C以下，保持低溫狀態(tài)2小時(shí)。②一次干燥開啟真空泵，保持真空度20Pa以下，I小時(shí)升溫至5°C，保溫3小時(shí)，進(jìn)行一次干燥。③二次干燥制品一次干燥后，I小時(shí)將板層升溫至15°C(真空度控制在l(T20Pa)保溫2小時(shí)，再升溫I小時(shí)至38°C，保溫4小時(shí)(凍干總時(shí)間15小時(shí))。④凍干過程中，檢查板層溫度、制品溫度、冷凝器溫度等，凍干結(jié)束后，進(jìn)行液壓加
塞，軋蓋。包裝10瓶/盒X60盒/件
實(shí)施例3本發(fā)明的注射用含細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑由如下成分制成細(xì)胞色素C30g ；L-精氨酸6g ;依地酸二鈉O. 50g ;甘露醇15g，注射用水加至1000ml。其制備方法如下I)稱取處方量的甘露醇，加入500ml的注射用水溶解，加2%?；钚蕴?，煮沸，保溫15分鐘后，過濾脫炭，得溶液①。2)將溶液①冷卻至20°C以下，先后加入處方量的L-精氨酸和依地酸二鈉，得溶液②。3)取處方量的細(xì)胞色素C溶液，加注射用水補(bǔ)充至300毫升，得溶液③。4)將溶液②、溶液③混合，再用冷注射用水補(bǔ)足體積至總量，調(diào)pH值6. 9，經(jīng)
O.22 μ m孔徑除菌濾器過濾，按每瓶Iml分裝于2ml管制瓶中，管制瓶置冷凍干燥機(jī)制品室板層，待冷凍干燥。PH調(diào)節(jié)劑為5%磷酸鈉溶液。5)冷凍干燥工藝①預(yù)凍首先將冷凝器溫度預(yù)降至_45°C，產(chǎn)品進(jìn)箱后在I小時(shí)內(nèi)將板層溫度快速降至-35°C以下，保持低溫狀態(tài)2小時(shí)。

②一次干燥開啟真空泵，保持真空度20Pa以下，I小時(shí)升溫至5°C，保溫4小時(shí)，進(jìn)行一次干燥。③二次干燥制品一次干燥后，I小時(shí)將板層升溫至15°C(真空度控制在l(T20Pa)保溫2小時(shí)，再升溫I小時(shí)至38°C，保溫4小時(shí)(凍干總時(shí)間15小時(shí))。④凍干過程中，檢查板層溫度、制品溫度、冷凝器溫度等，凍干結(jié)束后，進(jìn)行液壓加
塞，軋蓋。包裝10瓶/盒X60盒/件實(shí)驗(yàn)例1、穩(wěn)定性加速試驗(yàn)將實(shí)施例1 3制成的細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑分別于0、1、3、6個(gè)月檢查PH值、澄清度、可見異物、活力、含量五個(gè)考察項(xiàng)目(參見表I)。表I穩(wěn)定性加速試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種注射用含細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑，其特征在于，包括如下重量份的組分細(xì)胞色素C75 300份；L-精氨酸3(Γ60份；依地酸二鈉2飛份；甘露醇150份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凍干制劑，其特征在于，包括如下重量份的組分細(xì)胞色素C150份；L-精氨酸45份；依地酸二鈉3份；甘露醇150份。
3.制備權(quán)利要求1或2所述凍干制劑的方法，其特征在于，包括如下步驟1)配制藥液；2)冷凍干燥；所述冷凍干燥包括以下步驟預(yù)凍、一次干燥、二次干燥。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述預(yù)凍步驟包括將冷凝器溫度預(yù)降至_40°C以下，藥液進(jìn)箱后在O. 5 1. 5小時(shí)內(nèi)將板層溫度降至-35 V以下，保持低溫狀態(tài)2 3小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述一次干燥步驟包括開啟真空泵，保持真空度20Pa以下，I小時(shí)升溫至4 5°C，保溫3 4小時(shí)，進(jìn)行一次干燥。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述二次干燥步驟包括一次干燥后，I小時(shí)內(nèi)將板層升溫至14 16°C，真空度控制在10 20Pa，保溫2小時(shí)，再升溫I小時(shí)至37 39°C，保溫3 4小時(shí)；在凍干過程中，檢查板層溫度、制品溫度、冷凝器溫度，凍干結(jié)束后，進(jìn)行液壓加塞。
7.根據(jù)權(quán)利要求3-6中任一所述的方法，其特征在于，所述冷凍干燥總時(shí)間為1Γ16小時(shí)。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟I)中，將L-精氨酸和依地酸二鈉加入到經(jīng)活性炭過濾的甘露醇溶液中，再與細(xì)胞色素C溶液混合，調(diào)節(jié)PH值，過濾得到藥液。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述pH值為6.O 7. 5。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，采用濃度為O.4 O. 6mol/l的磷酸或磷酸鈉溶液作為PH值調(diào)節(jié)劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種注射用含細(xì)胞色素C藥物組合物的凍干制劑，包括如下重量份的組分細(xì)胞色素C75~300份；L-精氨酸30~60份；依地酸二鈉2~5份；甘露醇150份。該凍干制劑選用依地酸二鈉和L-精氨酸作為輔料，有利于提高細(xì)胞色素C的穩(wěn)定性，藥液配制過程選用甘露醇作為凍干賦形劑，選用磷酸或磷酸鈉溶液作為pH值調(diào)節(jié)劑，可使產(chǎn)品質(zhì)量更穩(wěn)定；在甘露醇溶液中經(jīng)活性炭處理后再加入細(xì)胞色素C，避免了細(xì)胞色素C因活性炭吸附而引起的含量降低的問題；本發(fā)明采用的制備方法，將凍干時(shí)間由23小時(shí)縮短至14~16小時(shí)，降低能耗30%，同時(shí)在不增加硬件投入的情況下，可提高產(chǎn)能30%左右，顯著降低了生產(chǎn)成本。
文檔編號(hào)A61K47/18GK103055305SQ201210578970
公開日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2012年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月27日
發(fā)明者尹雙青, 劉永宏 申請(qǐng)人:蚌埠豐原涂山制藥有限公司