一種長春瑞濱亞微乳注射液及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種長春瑞濱亞微乳注射液及其制備方法。該注射液含有長春瑞濱磷脂復(fù)合物、甘油三酯、乳化劑和水等成分。本發(fā)明長春瑞濱磷脂復(fù)合物中，長春瑞濱和磷脂的摩爾比為1：1～1：10本發(fā)明制備的長春瑞濱磷脂復(fù)合物，提高了長春瑞濱的脂溶性，使其在油相中的分布大大提高。用本發(fā)明長春瑞濱磷脂復(fù)合物制備的亞微乳注射液，降低了長春瑞濱的刺激性，使患者有更好的順應(yīng)性。
【專利說明】一種長春瑞濱亞微乳注射液及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種抗腫瘤藥物制劑及其制備方法，更具體涉及一種長春瑞濱磷脂復(fù)合物的亞微乳注射液及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]長春瑞濱是一種半合成的長春生物堿類抗腫瘤藥物，抗癌活性高，抗瘤譜廣，其作用機(jī)制與長春花堿和長春新堿基本相同，屬于長春堿類抑制細(xì)胞分裂的抗腫瘤藥物，直接作用于微管蛋白/微管的動(dòng)態(tài)平衡，可抑制微管蛋白的聚合，并使分裂期微管崩解，僅在高濃度下影響軸突微管，對管蛋白螺旋化的作用低于長春新堿，通過阻斷G2與M期細(xì)胞的有絲分裂，導(dǎo)致進(jìn)入間期或分裂后期的細(xì)胞死亡。長春瑞濱臨床上常用的劑型為注射液和凍干粉針，劑量為5-50mg/支，由于其與堿性物質(zhì)接觸容易產(chǎn)生沉淀，以及和輸液器接觸后容易吸附，因此在使用時(shí)必須先用生理鹽水稀釋，于短時(shí)間(6-10min)內(nèi)輸入，然后用250~500ml生理鹽水沖洗靜脈。同時(shí)長春瑞濱對血管有較強(qiáng)的刺激性，患者順應(yīng)性差。嚴(yán)重影響其臨床使用以及臨床安全性和臨床療效。
[0003]在控制刺 激性藥物的靜脈毒性方面，水包油型乳劑可能優(yōu)于傳統(tǒng)的溶液制劑，例如肌肉或靜脈注射溶液制劑形式的紅霉素或克拉霉素可引起嚴(yán)重的注射部位疼痛，但紅霉素或克拉霉素的脂肪乳劑(水包油型)沒有局部刺激性(W090/14094)。然而水包油型乳劑通常只用于親脂性的藥物，像氟比洛芬酯、紅霉素、克拉霉素等。像長春瑞濱等高水溶性的藥物不能很好的分配到乳劑油相中。專利CN 1634058A, CN100462076C, CN 1859898B中為增加藥物在油相中的分配采用了大量的穩(wěn)定劑或助溶劑，如油酸鈉、油酸、苯甲醇等，而此類穩(wěn)定劑或助溶劑具有明顯的不良作用。
[0004]磷脂復(fù)合物是由藥物與磷脂在非質(zhì)子溶劑中通過范德華力或氫鍵結(jié)合而成的，以一定配比關(guān)系結(jié)合而成的復(fù)合物。活性成分與磷脂結(jié)合形成復(fù)合物后，常表現(xiàn)出與原化合物顯著不同的理化性質(zhì)和生物特性，可顯著提高水溶性藥物的脂溶性和穩(wěn)定性，為進(jìn)一步制備水包油型乳劑提供了便利。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有長春瑞濱劑型存在的缺陷，提供一種長春瑞濱磷脂復(fù)合物的亞微乳注射液，同時(shí)還提供了其制備方法。本發(fā)明提供的這種亞微乳，其中> 70%的長春瑞濱分布在油相或油水界面膜中。因此，該亞微乳用于注射時(shí)能降低藥物對注射部位的刺激性。
[0006]本發(fā)明通過制備長春瑞濱磷脂復(fù)合物，顯著增加藥物的脂溶性，然后將其制備成藥學(xué)上可接受的供注射用的亞微乳。
[0007]本發(fā)明提供一種長春瑞濱磷脂復(fù)合物的亞微乳注射液，該乳劑含有長春瑞濱磷脂復(fù)合物、甘油三酯、乳化劑和水。
[0008]本發(fā)明所述的長春瑞濱磷脂復(fù)合物是由長春瑞濱和磷脂在有機(jī)溶劑中進(jìn)行復(fù)合--? 。
[0009]所述的長春瑞濱可以為長春瑞濱、重酒石酸長春瑞濱、長春瑞濱的其他可藥用鹽。
[0010]所述的磷脂可以為大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化卵磷脂的一種或幾種的混合物，優(yōu)選為蛋黃卵磷脂。
[0011]所述的長春瑞濱和磷脂的摩爾比為1:1~1:10，優(yōu)選為1:2~1:5。
[0012]本發(fā)明提供的亞微乳注射液的平均粒徑為50nm~500nm,優(yōu)選為IOOnm~300nm。
[0013]本發(fā)明所述的甘油三酯是長鏈脂肪酸甘油三酯、中鏈脂肪酸甘油三酯或其混合物，優(yōu)選為長鏈脂肪酸甘油三酯，包括大豆油、紅花油、玉米油、茶油或其混合物，更優(yōu)選為大豆油。 [0014]本發(fā)明所述的表面活性劑選自吐溫、泊洛沙姆、油酸鈉、油酸或其混合物，優(yōu)選為泊洛沙姆，更優(yōu)選為泊洛沙姆188。
[0015]本發(fā)明所述的長春瑞濱磷脂復(fù)合物的乳劑，還可以含有等滲調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑、金屬螯合劑。所述的等滲調(diào)節(jié)劑為甘油、山梨醇、甘露醇、葡萄糖或其混合物，優(yōu)選為甘油、蔗糖；所述PH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉、鹽酸、緩沖鹽或其混合物；所述的金屬螯合劑為依地酸二鈉、依地酸鈣、依地酸鈣鈉或其混合物。
[0016]本發(fā)明的長春瑞濱磷脂復(fù)合物乳劑，以重量百分比計(jì)優(yōu)選組成為:
[0017]長春瑞濱磷脂復(fù)合物(以長春瑞濱計(jì))0.5%~5%
[0018]甘油三酯10%~30%
[0019]乳化劑0.03% ~3%
[0020]等滲調(diào)節(jié)劑2%~15%
[0021]pH調(diào)節(jié)劑氫氧化鈉/鹽酸調(diào)解pH至3~5
[0022]金屬螯合劑0.02%~0.05%
[0023]更優(yōu)選為:
[0024]長春瑞濱磷脂復(fù)合物(以長春瑞濱計(jì))1%~5%
[0025]長鏈甘油三酯10%~20%
[0026]泊洛沙姆1880.2%~1%
[0027]蔗糖10% ~15%
[0028]pH調(diào)節(jié)劑氫氧化鈉/鹽酸調(diào)解pH至3~5
[0029]金屬螯合劑0.02%~0.05%
[0030]最優(yōu)選為:
[0031]長春瑞濱磷脂復(fù)合物(以長春瑞濱計(jì))1%
[0032]大豆油10%
[0033]泊洛沙姆I880.5%
[0034]甘油2.5%
[0035]pH調(diào)節(jié)劑氫氧化鈉/鹽酸調(diào)解pH至4
[0036]依地酸鈣鈉0.05%
[0037]本發(fā)明提供了一種長春瑞濱磷脂復(fù)合物的亞微乳注射液的制備方法，其特征在于包括如下步驟:
[0038](I)取長春瑞濱和磷脂，加入有機(jī)溶劑中，25~60°C加熱回流I~4小時(shí)，減壓干燥除去有機(jī)溶劑，加入乙醚復(fù)溶，過濾除去游離長春瑞濱，再次減壓干燥得長春瑞濱磷脂復(fù)合物；
[0039](2)將長春瑞濱磷脂復(fù)合物加入到甘油三酯中，攪拌均勻形成油相；
[0040](3)將表面活性劑、等滲調(diào)節(jié)劑、金屬螯合劑加入注射用水中，攪拌至全部溶解作為水相；
[0041](4)緩慢將油相加入水相中，利用高速分散勻質(zhì)機(jī)，以每分鐘8000~10000轉(zhuǎn)的速度攪拌3~5分鐘，即得粗乳；
[0042](5)將粗乳轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機(jī)中，在1000~1500bar條件下，勻化3~10次；
[0043](6)加入pH調(diào)節(jié)劑，調(diào)解終乳的pH至3~5 ;
[0044](7)在層流通風(fēng)柜中，乳劑先經(jīng)0.45 μ m濾膜過濾，然后經(jīng)0.22 μ m濾膜過濾除菌；
[0045](8)將過濾 后的乳劑灌封于安瓿中，避光，2~8°C保存。
[0046]其中步驟(1)所述有機(jī)溶劑包括乙酸乙酯、丙酮、氯仿、二氯甲烷、四氫呋喃、正己烷、乙醇、甲醇或上述溶劑的各種比例的混合溶劑，優(yōu)選乙醇。
[0047]其中步驟⑴所述的復(fù)合條件為25~60°C加熱回流I~4小時(shí)，優(yōu)選25~35°C加熱回流2~3小時(shí)。
[0048]本發(fā)明所述長春瑞濱磷脂復(fù)合物的乳劑中長春瑞濱在油相或油水兩相的界面膜中分布不少于70%。其余部分長春瑞濱分布于水相及油相中。
[0049]本發(fā)明所述長春瑞濱磷脂復(fù)合物微乳首先將長春瑞濱與磷脂復(fù)合，提高了藥物的脂溶性，>70%的藥物能分布到油相或油水兩相的界面膜中。利用長春瑞濱磷脂復(fù)合物制備的微乳用于注射時(shí)能降低藥物對注射部位的刺激性，因而具有一定的創(chuàng)新性和實(shí)用性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:大鼠靜脈給予長春瑞濱磷脂復(fù)合物乳劑與其溶液性注射液后，藥物在組織器官中的分布未發(fā)生顯著改變，見圖8A、圖8B。在兔刺激性試驗(yàn)中，與注射液相比，長春瑞濱磷脂復(fù)合物乳劑的刺激性明顯降低。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0050]圖1A長春瑞濱藥物X-射線衍射分析圖譜；
[0051]圖1B卵磷脂X-射線衍射分析圖譜；
[0052]圖1C物理混合物X-射線衍射分析圖譜；
[0053]圖1D磷脂復(fù)合物X-射線衍射分析圖譜；
[0054]圖2A長春瑞濱藥物差示掃描量熱法圖譜；
[0055]圖2B卵磷脂差示掃描量熱法圖譜；
[0056]圖2C物理混合物差示掃描量熱法圖譜；
[0057]圖2D磷脂復(fù)合物差示掃描量熱法圖譜；
[0058]圖3A長春瑞濱藥物紫外光譜；
[0059]圖3B卵磷脂紫外光譜；
[0060]圖3C物理混合物紫外光譜；
[0061 ]圖3D磷脂復(fù)合物紫外光譜；
[0062]圖4長春瑞濱磷脂復(fù)合物亞微乳注射液的體外釋放曲線；[0063]圖5兔耳緣靜脈肉眼觀察；
[0064]圖6兔耳緣靜脈病理組織切片觀察(HE染色)；
[0065]圖7兔肌肉組織病理組織切片觀察(HE染色)；
[0066]圖8A乳劑組藥物在大鼠體內(nèi)的組織分布圖；
[0067]圖8B溶液組藥物在大鼠體內(nèi)的組織分布圖。
【具體實(shí)施方式】 [0068]實(shí)施例1磷脂復(fù)合物的制備
[0069]取重酒石酸長春瑞濱6.9g，大豆卵磷脂5g，將其加到丙酮中，25°C加熱回流0.5小時(shí)，將溶液減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑，得干燥物。將干燥物加入到乙醚中，溶解過濾，將濾液減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑，得長春瑞濱磷脂復(fù)合物。
[0070]各取長春瑞濱、卵磷脂、復(fù)合物以及長春瑞濱與磷脂的物理混合物進(jìn)行X-射線衍射分析(XRD)，結(jié)果見圖1A-圖1D。從XRD圖譜可以看出，長春瑞濱沒有明顯的晶形峰出現(xiàn)，說明長春瑞濱是以無定型狀態(tài)存在的；磷脂大約在3.V，7.2°有明顯的衍射峰，由此可證明其晶型特征；物理混合物在3.V，7.2°仍然有明顯的衍射峰，而在磷脂復(fù)合物圖譜中磷脂7.2°的晶體衍射峰消失了。由此可以看出復(fù)合物與簡單的物理混合物有明顯的區(qū)別。推測其原因，可能是在形成磷脂復(fù)合物的過程中長春瑞濱與磷脂分子中的極性部分發(fā)生定向結(jié)合，因此，長春瑞濱和磷脂實(shí)際上均處于一個(gè)高度分散的狀態(tài)，而其自身的晶體特征則被掩蔽了。
[0071]取長春瑞濱、卵磷脂、長春瑞濱磷脂復(fù)合物以及長春瑞濱與磷脂的物理混合物進(jìn)行差示掃描量熱分析，結(jié)果見圖2A-圖2D。由圖可知，卵磷脂在218°C有一個(gè)吸熱峰，物理混合物的吸熱峰為205°C，兩者的峰形相似，吸熱峰位置差別較小，可認(rèn)為無顯著性差異。長春瑞濱的DSC圖譜沒有明顯的吸熱峰、放熱峰，這可能是由于長春瑞濱呈無定型態(tài)。制備成磷脂復(fù)合物后，磷脂的吸熱峰消失，這可能是由于磷脂復(fù)合物中磷脂與藥物形成無定型態(tài)所導(dǎo)致。
[0072]各取長春瑞濱、卵磷脂、長春瑞濱磷脂復(fù)合物以及長春瑞濱與磷脂的物理混合物，溶解于無水乙醇中，配成一定濃度的溶液，于200-400nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果見圖3A-圖 3D。
[0073]由紫外掃描結(jié)果可以看出，長春瑞濱及其磷脂復(fù)合物和物理混合物的紫外掃描圖譜形狀幾乎完全重疊，在220nm和267nm處均有吸收峰。由此表明長春瑞濱與磷脂形成復(fù)合物后，其原有的發(fā)色團(tuán)結(jié)構(gòu)并未發(fā)生改變，磷脂復(fù)合物不是一種新的化合物。
[0074]實(shí)施例2磷脂復(fù)合物的制備
[0075]取長春瑞濱鹽酸鹽5g，大豆磷脂25g，氫化卵磷脂25g，將其加到乙醇中，60°C加熱回流4小時(shí)，將溶液減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑，得干燥物。將干燥物加入到乙醚中，溶解過濾，將濾液減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑，得長春瑞濱磷脂復(fù)合物。
[0076]實(shí)施例3磷脂復(fù)合物的制備
[0077]取長春瑞濱5g，蛋黃卵磷脂25g，將其加到乙酸乙酯中，25°C加熱回流3小時(shí)，將溶液減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑，得干燥物。將干燥物加入到乙醚中，溶解過濾，將濾液減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑，得長春瑞濱磷脂復(fù)合物。[0078]實(shí)施例4磷脂復(fù)合物溶解性試驗(yàn)
[0079]通過以下試驗(yàn)研究長春瑞濱溶解性質(zhì)的變化。精密量取3.0ml去離子水于磨口瓶中，分別加入過量的長春瑞濱、磷脂復(fù)合物(實(shí)施例1~3)以及藥物與蛋黃卵磷脂的物理混合物(按各實(shí)施例項(xiàng)下的比例混合)，每個(gè)樣品各三份，密閉后在室溫下于振蕩器內(nèi)持續(xù)振搖，24h后將磨口瓶內(nèi)的液體轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)，于1000Orpm離心lOmin。各取上清液100 μ 1，用乙醇稀釋一定倍數(shù)，按上述色譜條件進(jìn)樣，測定各個(gè)樣品的溶解度。結(jié)果見表1。
[0080]表1長春瑞濱溶解性試驗(yàn)結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.一種長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，含有長春瑞濱磷脂復(fù)合物、甘油三酯、乳化劑和水；其中長春瑞濱磷脂復(fù)合物(以長春瑞濱計(jì))的百分含量為0.5%~5%，甘油三酯的百分含量為10%~30%，乳化劑的百分含量為0.03%~3%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，所述的長春瑞濱磷脂復(fù)合物由長春瑞濱和磷脂復(fù)合而成；所述的長春瑞濱為長春瑞濱、重酒石酸長春瑞濱、長春瑞濱的其他可藥用鹽；所述磷脂選自大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化磷脂的一種或幾種的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，所述的長春瑞濱和磷脂的摩爾比為1:1~10，優(yōu)選為1:2~5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，長春瑞濱在油相或油水兩相的界面膜中分布不少于70%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，亞微乳的平均粒徑為50nm~500nm,優(yōu)選為IOOnm~300nm。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，所述甘油三酯油為長鏈脂肪酸甘油三酯、中鏈脂肪酸甘油三酯或其混合物；所述的長鏈脂肪酸甘油三酯選自大豆油、紅花油、玉米油、茶油或其混合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，所述的乳化劑選自吐溫、泊洛沙姆、油酸鈉、油酸或其混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，所述長春瑞濱磷脂復(fù)合物(以長春瑞濱計(jì) )的百分含量為1%~5%，甘油三酯的百分含量為10%~20%，乳化劑的百分含量為0.2%~1% ;優(yōu)選為長春瑞濱磷脂復(fù)合物(以長春瑞濱計(jì))的百分含量為1%，甘油三酯的百分含量為10%，乳化劑的百分含量為0.5%。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，含有等滲調(diào)節(jié)劑、PH調(diào)節(jié)劑、金屬螯合劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，所述的等滲調(diào)節(jié)劑為甘油、山梨醇、甘露醇、葡萄糖或其混合物；所述pH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉、鹽酸、緩沖鹽或其混合物；所述的金屬螯合劑為依地酸二鈉、依地酸鈣、依地酸鈣鈉或其混合物。
11.一種如權(quán)利要求1所述的長春瑞濱的亞微乳注射液制備方法，其特征在于，包括下述步驟: (1)取長春瑞濱和磷脂，加入有機(jī)溶劑中，25~60°C加熱回流I~4小時(shí)，減壓干燥除去有機(jī)溶劑，加入乙醚復(fù)溶，過濾除去游離長春瑞濱，再次減壓干燥得長春瑞濱磷脂復(fù)合物； (2)將長春瑞濱磷脂復(fù)合物加入到甘油三酯中，攪拌均勻形成油相； (3)將表面活性劑、等滲調(diào)節(jié)劑、金屬螯合劑加入注射用水中，攪拌至全部溶解作為水相； (4)緩慢將油相加入水相中，利用高速分散勻質(zhì)機(jī)，以每分鐘8000~10000轉(zhuǎn)的速度攪拌3~5分鐘，即得粗乳； (5)將粗乳轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機(jī)中，在1000~1500bar條件下，勻化3~10次； (6)加入pH調(diào)節(jié)劑，調(diào)解終乳的pH值為3~5;(7)在層流通風(fēng)柜中，乳劑先經(jīng)0.45 μ m濾膜過濾，然后經(jīng)0.22 μ m濾膜過濾除菌； (8)將過濾后的乳劑灌封于安瓿中，避光，2~8°C保存。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的長春瑞濱的亞微乳注射液，其特征在于，該注射液通過靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或關(guān)節(jié)內(nèi)給藥。`
【文檔編號】A61K47/24GK103720653SQ201210387085
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2012年10月12日 優(yōu)先權(quán)日:2012年10月12日
【發(fā)明者】李艷貞, 閻卉, 靳文仙, 王成港 申請人:天津藥物研究院