專利名稱：一種三七總皂苷的純化方法及其制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥化學領(lǐng)域，特別是涉及一種三七總皂苷的純化方法及其制劑。
背景技術(shù)：
三七為五加科植物三七Panax notoginseng (Burk. ) F. H. Chen的干燥根及根莖。其性溫，味甘、微苦，入胃經(jīng)。功能主治為化瘀止血，消腫定痛。用于咯血，吐血，便血，崩漏，夕卜傷出血，胸腹刺痛，跌撲腫痛。主產(chǎn)于云南文山、硯山、廣南、馬關(guān)及廣西靖西、睦邊、百色等地。三七中含有多種成分，其中，三七總皂苷為三七的主要活性成分，其主要分布于三七的根及根莖。藥理研究結(jié)果表明，三七總皂苷具有抑制血小板聚集、預防心腦梗塞、緩解心絞痛、保護腦組織、改善腦血液循環(huán)、抗冠心病、增強免疫力、調(diào)節(jié)血糖和血脂等活性?，F(xiàn)有三七總皂苷的生產(chǎn)純化工藝，主要通過柱色譜法、溶劑萃取法。目前常用的柱色譜法有硅膠柱色譜、凝膠柱色譜以及大孔吸附樹脂法。硅膠柱色譜與凝膠柱色譜法可純化得到高純度的皂苷成分，但其操作復雜，費用高，也不適合工藝化生產(chǎn)。大孔吸附樹脂是目前工業(yè)化生產(chǎn)純化三七總皂苷的普遍方法，但單一大孔樹脂用于分離純化總皂苷所得物含量不是很高，需要與其他樹脂或色譜填料聯(lián)合應用才能得到高純度的三七總皂苷，已有聯(lián)合應用較多的方法包括大孔吸附樹脂-離子交換樹脂(陰離子或陽陰離子串聯(lián))，大孔吸附樹脂-離子交換樹脂-氧化鋁，大孔吸附樹脂-氧化鋁；前兩者者因應用離子交換樹月旨，每批次都需酸堿反復前處理和后處理，過程較復雜且耗時，需較高的勞動安全保護，后兩者在用氧化鋁精制時，需依次水洗、醇洗，工藝較繁瑣。大孔吸附樹脂-聚酰胺-活性炭聯(lián)用技術(shù)可有效的除雜、脫色、富集總皂苷，工藝簡單，過聚酰胺時，僅水洗一步操作，節(jié)省有機溶劑，易于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種制備更高效、更高純度三七總皂苷的純化方法，同時解決現(xiàn)有生產(chǎn)技術(shù)的不足和缺陷。本發(fā)明所述的純化方法，突破常規(guī)的純化三七總皂苷的方法，充分結(jié)合大孔樹脂、 聚酰胺以及活性炭的不同純化作用，從而得到更高純度的三七總皂苷。本發(fā)明所述的大孔樹脂包括HPD700、HPD400、AB-8、DM130、ADS-7型。本發(fā)明所述的聚酰胺的規(guī)格為14-30目、30-60目、80-100目或100目以上。本發(fā)明所述的三七總皂苷，包括三七三醇組皂苷和三七二醇組皂苷，三七三醇組皂苷中主要含有三七皂苷R1、人參皂苷以及人參皂苷Re ；三七二醇組皂苷中主要含有人參皂苷Rb1和人參皂苷Rd，其特征在于，三七三醇組皂苷與三七二醇組皂苷的重量比為 2. 5 3. 5 1，三七皂苷札、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1和人參皂苷Rd的總含量占三七總皂苷的含量> 95%。本發(fā)明旨在通過以下方案來實現(xiàn)
一種三七總皂苷的純化方法，其特征在于以三七主根或根莖為原料，粉碎，過篩， 加8-12倍(V/W) 50-95%的乙醇低溫減壓回流提取1_3次，合并提取液，低溫減壓濃縮至乙醇盡，濃縮液加1倍的去離子水，置于冷藏室M小時，取出，過濾，濾液加入大孔樹脂吸附， 先用去離子水洗脫，用molish反應和薄層色譜控制洗脫終點，棄去洗脫液，再用8-12倍的 50-95%乙醇洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮至0. 2g藥材/ml，再加入聚酰胺樹脂柱吸附， 用4-8倍的去離子水洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮，干燥，干品用40-60倍(V/W) 70-95% 的乙醇加熱溶解，然后加入0. 05-2%的活性炭，于40°C保溫0. 5小時，濾膜過濾，收集濾液， 低溫減壓濃縮，55°C真空干燥，即得三七總皂苷。所述的低溫減壓回流、低溫減壓濃縮的溫度為40-60°C。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(1)所得產(chǎn)品純度高，本發(fā)明首次采用了大孔樹脂-聚酰胺-活性炭聯(lián)用技術(shù)，具有很好的脫色、除雜、富集總皂苷作用，總皂苷的純度可達到95%以上。(2)有機殘留少，本發(fā)明摒棄了傳統(tǒng)的溶劑萃取、硅膠柱色譜以及凝膠柱色譜法， 采用比較常用、價格便宜、能反復使用的大孔樹脂和聚酰胺、活性炭，并將三者聯(lián)合應用。大孔樹脂選擇性的吸附有效皂苷成分，同時不吸附糖等雜質(zhì)，利用該特征可通過水洗去除糖等大極性雜質(zhì)。聚酰胺的作用是選擇性好、脫色除雜顯著，研究表明，聚酰胺不吸附三七的活性皂苷成分，能夠選擇性吸附其中的其他有機酸、鞣質(zhì)、色素雜質(zhì)，利用該特征可進一步提高總
皂苷含量?；钚蕴恐饕糜谶M一步精制三七總皂苷，起到脫色、改善總皂苷外觀的作用。(3)環(huán)保無污染，本發(fā)明制備過程中使用的有機溶劑可回收循環(huán)利用，不產(chǎn)生影響環(huán)境的廢水。(4)能夠?qū)崿F(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。本發(fā)明還提供包含所述三七總皂苷的藥物制劑，其含有治療有效量的三七總皂苷以及藥學上可接受的載體。所述藥物制劑的劑型可包括口服制劑，如片劑、膠囊等；注射制齊U，如粉針、水針等。本發(fā)明對三七總皂苷進行了純化，更多的保留療效確切的組分，所制備的三七總皂苷做成粉針后無需乙醇溶解，只需注射用水、生理鹽水或葡萄糖注射液溶解即可，因此， 使用更方便，刺激性更小。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例進一步說明本發(fā)明。制備實施例1 取干燥三七主根20. 0kg，用中草藥粉碎機(購自天津市泰斯特儀器有限公司)粉碎，過3號篩，用12倍藥材重量的濃度為60 %乙醇溶液55°C減壓回流提取2次，每次2. 0 小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液加1倍體積的純化水，攪拌均勻，置于冷藏室M小時。取出冷藏液，過濾，濾液上HPD-700樹脂(購自滄州寶恩吸附材料科技有限公司)吸附， 先用去離子水洗脫，用molish反應和薄層色譜控制洗脫終點，棄去洗脫液，再用12倍柱體積的70%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮至0. 2g藥材/ml，再加入到聚酰胺樹脂(30-60目)吸附，用8倍去離子水洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮，干燥，干品用40倍(V/ W) 95%的乙醇加熱溶解，然后加入0. 5%的活性炭，于40°C保溫0. 5小時，濾膜過濾，收集濾液，低溫減壓濃縮，55°C真空干燥，即得三七總皂苷2118. 3g (三七總皂苷含量為97. 9%，人參三醇型皂苷與人參二醇型皂苷重量比為3. 2 1)。制備實施例2 取干燥三七主根20. 0kg，用中草藥粉碎機(購自天津市泰斯特儀器有限公司)粉碎，過3號篩，用12倍藥材重量的濃度為60 %乙醇溶液50°C減壓回流提取2次，每次2. 0 小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液加1倍體積的純化水，攪拌均勻，置于冷藏室M小時。取出冷藏液，過濾，濾液上HPD-400樹脂(購自滄州寶恩吸附材料科技有限公司)吸附， 先用去離子水洗脫，用molish反應和薄層色譜控制洗脫終點，棄去洗脫液，再用12倍柱體積的70%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮至0. 2g藥材/ml，再加入到聚酰胺樹脂 (14-30目)吸附，用8倍去離子水洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮，干燥，干品用40倍(V/ W) 95%的乙醇加熱溶解，然后加入0. 1 %的活性炭，于40°C保溫0. 5小時，濾膜過濾，收集濾液，低溫減壓濃縮，55°C真空干燥，即得三七總皂苷2200. 3g (三七總皂苷含量為96. 8%，人參三醇型皂苷與人參二醇型皂苷重量比為3.0 1)。制備實施例3 取干燥三七主根20. 0kg，使用中草藥粉碎機(購自天津市泰斯特儀器有限公司) 粉碎，過3號篩，用10倍藥材重量的濃度為70%乙醇溶液55°C減壓回流提取1次，每次3. 0 小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液加1倍體積的純化水，攪拌均勻，置于冷藏室M小時。取出冷藏液，過濾，濾液上AB-8樹脂(購自滄州寶恩吸附材料科技有限公司)吸附， 先用去離子水洗脫，用molish反應和薄層色譜控制洗脫終點，棄去洗脫液，再用10倍柱體積的80%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮至0. 2g藥材/ml，再加入到聚酰胺樹脂 (60-80目)吸附，用6倍去離子水洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮，干燥，干品用50倍(V/ W) 80%的乙醇加熱溶解，然后加入0. 5%的活性炭，于40°C保溫0. 5小時，濾膜過濾，收集濾液，低溫減壓濃縮，55°C真空干燥，即得三七總皂苷2128. 6g (三七總皂苷含量為96. 6%，人參三醇型皂苷與人參二醇型皂苷重量比為2. 8 1)。制備實施例4:取干燥三七主根20. 0kg，使用中草藥粉碎機(購自天津市泰斯特儀器有限公司) 粉碎，過3號篩，用10倍藥材重量的濃度為70%乙醇溶液60°C減壓回流提取1次，每次3. 0 小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液加1倍體積的純化水，攪拌均勻，置于冷藏室M小時。取出冷藏液，過濾，濾液上DM130樹脂(購自滄州寶恩吸附材料科技有限公司)吸附， 先用去離子水洗脫，用molish反應和薄層色譜控制洗脫終點，棄去洗脫液，再用10倍柱體積的85%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮至0. 2g藥材/ml，再加入到聚酰胺樹脂 (14-30目)吸附，用6倍去離子水洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮，干燥，干品用50倍(V/ W) 80 %的乙醇加熱溶解，然后加入1. 5%的活性炭，于40°C保溫0. 5小時，濾膜過濾，收集濾液，低溫減壓濃縮，55°C真空干燥，即得三七總皂苷2234. 6g (三七總皂苷含量為95. 8%，人參三醇型皂苷與人參二醇型皂苷重量比為2. 5 1)。制備實施例5 取干燥三七主根20. 0kg，使用中草藥粉碎機(購自天津市泰斯特儀器有限公司)粉碎，過3號篩，用8倍藥材重量的濃度為80%乙醇溶液55°C減壓回流提取3次，每次1. 0 小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液加1倍體積的純化水，攪拌均勻，置于冷藏室M小時。取出冷藏液，過濾，濾液上ADS-7樹脂(購自滄州寶恩吸附材料科技有限公司)吸附， 先用去離子水洗脫，用molish反應和薄層色譜控制洗脫終點，棄去洗脫液，再用8倍柱體積的85%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮至0. 2g藥材/ml，再加入到聚酰胺樹脂 (30-60目)吸附，用4倍去離子水洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮，干燥，干品用60倍(V/ W) 70%的乙醇加熱溶解，然后加入0. 5%的活性炭，于40°C保溫0. 5小時，濾膜過濾，收集濾液，低溫減壓濃縮，55°C真空干燥，即得三七總皂苷2114. 5g (三七總皂苷含量為98. 4%，人參三醇型皂苷與人參二醇型皂苷重量比為3. 5 1)。制備實施例6 取干燥三七主根20. 0kg，使用中草藥粉碎機(購自天津市泰斯特儀器有限公司) 粉碎，過3號篩，用8倍藥材重量的濃度為80%乙醇溶液55°C減壓回流提取3次，每次1. 0 小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液加1倍體積的純化水，攪拌均勻，置于冷藏室M小時。取出冷藏液，過濾，濾液上HPD-700樹脂(購自滄州寶恩吸附材料科技有限公司)吸附，先用去離子水洗脫，用molish反應和薄層色譜控制洗脫終點，棄去洗脫液，再用8倍柱體積的85%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮至0. 2g藥材/ml，再加入到聚酰胺樹脂(100目以上)吸附，用4倍去離子水洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮，干燥，干品用 60倍(V/W) 70%的乙醇加熱溶解，然后加入0. 5%的活性炭，于40°C保溫0. 5小時，濾膜過濾，收集濾液，低溫減壓濃縮，55°C真空干燥，即得三七總皂苷2216. 7g (三七總皂苷含量為 97.2%，人參三醇型皂苷與人參二醇型皂苷重量比為3.1 1)。制備實施例7 三七總皂苷粉針
三七總皂苷IOOg
乳糖28g
注射用水加至2000ml
制成1000支取制備實施例1制得的三七總皂苷100g，乳糖^g，加適量注射用水加熱溶解，力口入0. 3%針用活性炭(w/v)，于40°C保溫0. 5小時，過濾，加注射用水補充至總體積2000ml， 調(diào)節(jié)pH至6. 0 7. 0，濾過、分裝、凍干、軋蓋、制成1000支，即得。規(guī)格為每支含三七總皂苷lOOmg。制備實施例8三七總皂苷粉針
三七總皂苷200g24§ 注射用水加至4000ml
制成1000支取制備實施例2制得的三七總皂苷200g，甘露醇Mg，加適量注射用水加熱溶解，加入0. 3%針用活性炭(w/v)，于40°C保溫0. 5小時，過濾，加注射用水補充至總體積 4000ml，調(diào)節(jié)pH至6.0 7.0，濾過、分裝、凍干、軋蓋、制成1000支，即得。規(guī)格為每支含三七總皂苷200mg。制備實施例9三七總皂苷粉針
權(quán)利要求
1.一種三七總皂苷的純化方法，其特征在于，以三七主根或根莖為原料，粉碎，過篩，力口 8-12 (V/W)倍50-95%的乙醇低溫減壓回流提取1_3次，合并提取液，低溫減壓濃縮至乙醇盡，濃縮液加1倍的去離子水，置于冷藏室M小時，取出，過濾，濾液加入大孔樹脂吸附，先用去離子水洗脫，用molish反應和薄層色譜控制洗脫終點，棄去洗脫液，再用50-95%乙醇洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮至0. 2g藥材/ml，再加入聚酰胺樹脂柱吸附，用4-8倍的去離子水洗脫，收集洗脫液，低溫減壓濃縮，干燥，干品用40-60倍(V/W) 70-95 %的乙醇加熱溶解，然后加入0. 05-2%的活性炭，于40°C保溫0. 5小時，濾膜過濾，收集濾液，低溫減壓濃縮，55°C真空干燥，即得三七總皂苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法制得的三七總皂苷，其特征在于，三七總皂苷的含量彡 95%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法制得的三七總皂苷，其特征在于，三七總皂苷中人參三醇型皂苷與人參二醇型皂苷的重量比為2. 5-3. 5 1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三七總皂苷的純化方法，其特征在于，低溫減壓回流和低溫減壓濃縮的溫度為40-60°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述三七總皂苷的純化方法，其特征在于，大孔樹脂為HPD700、 HPD400、AB-8、DM130 或 ADS-7 型。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述三七總皂苷的純化方法，其特征在于，聚酰胺的規(guī)格為14-30 目、30-60目、80-100目或100目以上。
7.一種含有權(quán)利要求2或3所述三七總皂苷的藥物制劑，其特征在于，劑型為粉針劑、 水針劑、片劑或膠囊。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物制劑，其特征在于，劑型為粉針劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種三七總皂苷的純化方法及其制劑，旨在提供一種能制備出更高效、更高純度三七總皂苷的純化方法，同時解決現(xiàn)有生產(chǎn)技術(shù)的不足和缺陷。所述的純化方法，突破常規(guī)的純化三七總皂苷的方法，充分結(jié)合大孔樹脂、聚酰胺以及活性炭的不同純化作用，可有效的除雜、脫色、富集總皂苷，過聚酰胺時，僅水洗一步操作，工藝簡單，節(jié)省有機溶劑，易于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明還包括三七總皂苷的藥物制劑，劑型為粉針劑、水針劑、片劑或膠囊。
文檔編號A61P7/02GK102526147SQ20121007537
公開日2012年7月4日 申請日期2012年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月21日
發(fā)明者孫武興, 李青原, 秦玉霞, 黃海 申請人:北京中?？滇t(yī)藥科技發(fā)展有限公司