專利名稱：一種牛膝皂苷的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種從植物體內(nèi)提取制備皂苷的方法，具體涉及ー種牛膝皂苷的制備方法。
背景技術(shù)：
牛膝(Radix Achyranthis Bidentatae)為覓科植物牛膝的根。分布于非洲、俄羅斯、越南、印度、馬來(lái)西亞、菲律賓、朝鮮以及中國(guó)除東北外全國(guó)各地等地。具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、活血通經(jīng)、引火下行、利尿通淋的功效，用于腰膝酸痛、下肢痿軟、血滯經(jīng)閉、痛經(jīng)、產(chǎn)后血瘀腹痛、癥瘕、胞衣不下、熱淋、血淋、跌打損傷、癰腫惡瘡、咽喉腫痛等癥。根含皂苷，主要為三萜類皂苷。王麗景對(duì)牛膝提取及其藥理作用的研究表明牛膝皂苷有興奮子宮、抗生育作用，抗腫瘤作用，心血管藥理作用以及抗炎、鎮(zhèn)痛作用等。

目前，牛膝皂苷的提取純化方法很少，傳統(tǒng)多采用醇提正丁醇萃取法，該方法具有成本高、有機(jī)溶劑毒性殘留的缺點(diǎn)。如王曉娟等采用こ醇提取，硅膠低壓柱分離法曾獲得兩個(gè)新皂苷單體牛膝皂苷I (3-0-[a-L-吡喃鼠李糖-(1-3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸]-齊墩果酸-28-0- ( β -D-吡喃葡萄糖)，牛膝皂苷II (3-0- ( β -D-吡喃葡萄糖醛酸)-齊墩果酸-28-0-( β -D-卩比喃葡萄糖)。郭勝民等將正丁醇萃取所得懷牛膝總皂苷，經(jīng)硅膠柱層祈，用醋酸こ酯梯度洗脫，得到懷牛膝皂苷Α。再如中國(guó)專利(申請(qǐng)?zhí)枮?01010191221. 3) “牛膝皂苷的提純方法”，該專利公開(kāi)的方法是以牛膝為原料，選用大孔吸附樹(shù)脂富集純化，用DlOl大孔吸附樹(shù)脂柱吸附的流程式方法對(duì)牛膝的有效成分進(jìn)行分離提取，得到牛膝皂苷。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明所要解決的問(wèn)題是提供ー種牛膝皂苷的制備方法。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的ー種牛膝皂苷的制備方法，其特征在于包括以下步驟(I)酶解將牛膝藥材粉碎，加入適量蒸餾水和O. 3-0. 8%生物酶自然酶解，得酶解原料；(2)微波萃取將上述酶解原料置于微波提取沒(méi)備中，加入3-7倍蒸餾水，萃取1-2次，離心得到提取液；(3)分離上述提取液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，以蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用5-55%醇溶液洗脫，收集40-55%醇溶液洗脫液；(4)脫色將上述醇溶液洗脫液通過(guò)D-280柱，收集下柱液；(4)重結(jié)晶將上述下柱液濃縮成浸膏，無(wú)水こ醇回流溶解，趁熱過(guò)濾，放置結(jié)晶，重結(jié)晶，濾出結(jié)晶，真空干燥即得高純度牛膝皂苷。步驟(2)中微波萃取功率400-700W。步驟(3)所述大孔樹(shù)脂型號(hào)可選HPD-400、X-5、NKA-9和D-4020中的ー種，洗脫用醇溶液為こ醇溶液。
本發(fā)明的提取エ藝采用微波萃取法和酶法相結(jié)合，可以破壞植物纖維，切斷皂苷和大分子的鍵合，提取率高，提取時(shí)間短，提取效率高，能耗低，以水為溶媒對(duì)牛膝皂苷進(jìn)行提取，提取液經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂法進(jìn)行純化處理，除去大量糖類雜質(zhì)，收集不同濃度こ醇的洗脫物，經(jīng)過(guò)D-280樹(shù)脂柱脫色，こ醇重結(jié)晶得到牛膝皂苷，整個(gè)エ藝操作簡(jiǎn)單，易于放大。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)ー步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :
將牛膝藥材粉碎，取2kg，加入適量蒸餾水和6g生物酶自然酶解，得酶解原料，將酶解原料置于微波提取設(shè)備中，加入5倍蒸餾水，微波萃取功率600W，萃取2次，離心得到提取液，通過(guò)D-4020大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，以8L蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用5%、15%、40%、50%こ醇溶液洗脫，收集40-55%こ醇溶液洗脫液，通過(guò)D-280柱，收集下柱液，濃縮成浸膏，無(wú)水こ醇回流溶解，趁熱過(guò)濾，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，無(wú)水こ醇重結(jié)晶2次，真空干燥即得高純度牛膝皂苷16. 8g，含量為90. 3%0實(shí)施例2:將牛膝藥材粉碎，取2kg，加入適量蒸餾水和12g生物酶自然酶解，得酶解原料，將酶解原料置于微波提取設(shè)備中，加入7倍蒸餾水，微波萃取功率400W，萃取2次，離心得到提取液，通過(guò)NKA-9大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，以IOL蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用8%、15%、40%、55%こ醇溶液洗脫，收集4055%こ醇溶液洗脫液，通過(guò)D-280柱，收集下柱液，濃縮成浸膏,無(wú)水こ醇回流溶解，趁熱過(guò)濾，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，無(wú)水こ醇重結(jié)晶3次，真空干燥即得高純度牛膝皂苷18. 7g，含量為89. 7%。實(shí)施例3 將牛膝藥材粉碎，取2kg，加入適量蒸餾水和15g生物酶自然酶解，得酶解原料，將酶解原料置于微波提取設(shè)備中，加入5倍蒸餾水，微波萃取功率500W，萃取2次，離心得到提取液，通過(guò)X-5大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，以8L蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用15 %、25 %、45 %、55%こ醇溶液洗脫，收集40-55%こ醇溶液洗脫液，通過(guò)D-280柱，收集下柱液，濃縮成浸膏，無(wú)水こ醇回流溶解，趁熱過(guò)濾，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，無(wú)水こ醇重結(jié)晶2次，真空干燥即得高純度牛膝皂苷15. 9g，含量為92. 6%。實(shí)施例4 將牛膝藥材粉碎，取5kg，加入適量蒸餾水和25g生物酶自然酶解，得酶解原料，將酶解原料置于微波提取設(shè)備中，加入6倍蒸餾水，微波萃取功率00W，萃取I次，離心得到提取液，通過(guò)HPD-400大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，以20L蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用10%、25%、40%、50%こ醇溶液洗脫，收集40-55%こ醇溶液洗脫液，通過(guò)D-280柱，收集下柱液，濃縮成浸膏，無(wú)水こ醇回流溶解，趁熱過(guò)濾，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，無(wú)水こ醇重結(jié)晶3次，真空干燥即得高純度牛膝皂苷50. 5g，含量為94. 2 %。實(shí)施例5 將牛膝藥材粉碎，取5kg，加入適量蒸餾水和40g生物酶自然酶解，得酶解原料，將酶解原料置于微波提取設(shè)備中，加入3倍蒸餾水，微波萃取功率400W，萃取2次，離心得到提取液，通過(guò)NKA-9大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，以24L蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用5%、15%、40%、55%こ醇溶液洗脫，收集40-55%こ醇溶液洗脫液，通過(guò)D-280柱，收集下柱液，濃縮成浸膏,無(wú)水こ醇回流溶解，趁熱過(guò)濾，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，無(wú)水こ醇重結(jié)晶2次，真空干燥即得高純度牛膝皂苷49. 8g，含量為91.0%。權(quán)利要求
1.一種牛膝皂苷的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)酶解將牛膝藥材粉碎，加入適量蒸餾水和0.3-0. 8%生物酶自然酶解，得酶解原料； (2)微波萃取將上述酶解原料置于微波提取設(shè)備中，加入3-7倍蒸餾水，萃取1-2次，離心得到萃取液； (3)分離上述萃取液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，以蒸餾水洗脫雜質(zhì)，再用5-55%醇溶液洗脫，收集40-55%醇溶液洗脫液； (4)脫色將上述醇溶液洗脫液通過(guò)D-280柱，收集下柱液； (4)重結(jié)晶將上述下柱液濃縮成浸膏，無(wú)水乙醇回流溶解，趁熱過(guò)濾，放置結(jié)晶，重結(jié)晶，濾出結(jié)晶，真空干燥即得高純度牛膝皂苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種牛膝皂苷的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中微波萃取功率400-700W。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種牛膝皂苷的制備方法，其特征在于步驟(3)所述大孔樹(shù)脂型號(hào)可選HPD-400、X-5、NKA-9和D-4020中的一種，洗脫用醇溶液為乙醇溶液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種牛膝皂苷的制備方法，包括以下步驟將牛膝干燥藥材粉碎，加入適量蒸餾水和0.3-0.8％生物酶自然酶解，得酶解原料，微波萃取，離心得萃取液，大孔樹(shù)脂柱吸附，D-280樹(shù)脂脫色，下柱液濃縮成浸膏，無(wú)水乙醇回流溶解，放置結(jié)晶，重結(jié)晶，濾出結(jié)晶干燥即得牛膝皂苷。本發(fā)明的方法具有操作簡(jiǎn)單、得率高、純度高的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/21GK102648925SQ201110045308
公開(kāi)日2012年8月29日 申請(qǐng)日期2011年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月25日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶 申請(qǐng)人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司