專利名稱：新型鉑配合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含鉬抗癌藥及氯原酸的研究，特別是涉及新型抗癌藥鉬配合物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
癌癥已成為人類健康的主要威脅之一，且呈明顯上升趨勢，我國癌癥死亡率在城市中已占各種死因的首位，因而我國已把抗癌藥物的研究列為新藥開發(fā)的最重要的戰(zhàn)略性課題之一，癌癥在美國也已成為最主要的死亡因素。因此，研究新型具有高效、低毒、高選擇特性的抗癌藥是我們長期的目標(biāo)和任務(wù)。自60年代末，順鉬抗癌活性的發(fā)現(xiàn)及臨床應(yīng)用以來，盡管其毒性大及鉬配合物較昂貴，但由于其良好的療效，人們對于新型含鉬抗癌藥的研究仍然情有獨(dú)鐘，通過逐步創(chuàng)新提高，已發(fā)展到第三代。有資料表明，手性藥物已經(jīng)占到整個(gè)藥物的70%，第一個(gè)手性鉬抗癌藥物奧沙利鉬已經(jīng)應(yīng)用臨床，在直腸癌方面發(fā)揮了巨大作用。白血病是一類常見的嚴(yán)重威脅人類健康的造血系統(tǒng)惡性腫瘤.目前，化療和造血干細(xì)胞移植是治療白血病的主要手段，但是，通過化療只能取得短暫緩解，而異基因造血干細(xì)胞移植治療白血病5年無病生存率僅為35% -50% .此外，因造血干細(xì)胞供體限制，只有部分患者能進(jìn)行這一治療，而且還存在移植相關(guān)死亡和復(fù)發(fā)危險(xiǎn)性.因此，尋找新的更有效抗白血病藥物仍然十分迫切和需要。氯原酸是手性化合物，是一種提取自中草藥的物質(zhì)，具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，氯原酸鈉是一種氯原酸和鈉鹽的半合成小分子化合物，近期有研究顯示氯原酸可以誘導(dǎo)包括Bcr-Abl陽性的慢性粒細(xì)胞白血病(CML)原代細(xì)胞在內(nèi)的 Bcr-Abl陽性細(xì)胞的凋亡，I. _20°C光保存的氯原酸鈉可以選擇性抑制bcr_abl陽性的CML 細(xì)胞系K562細(xì)胞的增殖.2. 4°C保存的氯原酸鈉對bcr-abl陽性的CML細(xì)胞系K562的增殖抑制作用增強(qiáng)，并且對bcr-abl陰性的Jurkat細(xì)胞亦具有增殖抑制作用.。為此，將氯原酸作為載體合成新型鉬抗癌藥物，能否顯著提高藥物對癌細(xì)胞的選擇性，能否對白血病細(xì)胞有靶向選擇性？這是我們研究的目的及意義所在。研究氯原酸與鉬形成鉬配合物，對于白血病細(xì)胞的抗癌活性有著積極的現(xiàn)實(shí)意義通過我們幾年的工作，成功地合成并鑒定了含氯原酸的鉬配合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種新的具有藥用價(jià)值的鉬配合物。本發(fā)明另一目的是提供一種前述化合物的制備方法。本發(fā)明目的之三是提供目的一所述化合物在治療癌癥藥物方面的用途。本發(fā)明目的所述的化合物名稱為(1S，3R，4R，5R) _3_ [ [3_ (3，4_ 二羥基苯基)-1_氧代-2-丙烯基]氧]-1，4，5-三羥基環(huán)己烷甲酸(反式-(-)-1，2_環(huán)己二胺)合鉬(II)鉬，其英文名稱為(IS,3R, 4R, 5R)~3-[[3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-l-oxo-2-propenyl]oxy]-I,4，5-trihydroxycycl(IR,2R)-(-)-1, 2-diamino eyeIohexanePlatinum(II)分子式PtC22H3ciN2O9分子量FW = 661，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式發(fā)明化合物的制備方法依次包括下列工藝步驟a. 二碘環(huán)己二胺鉬(或二氯環(huán)己二胺)與硝酸銀(或碳酸銀)避光反應(yīng)。b，過濾沉淀，得到母液，將母液在水浴上加熱后加入氯原酸納，過濾沉淀得到目標(biāo)化合物。前述的化合物制備方法可以在較寬松的條件下進(jìn)行，其反應(yīng)較為優(yōu)選的參數(shù)范圍如下步驟a中二碘環(huán)己二胺鉬與硝酸銀避光反應(yīng)。二碘環(huán)己二胺鉬與硝酸銀的摩爾比為 O. Olmmol比O. 02mmol，反應(yīng)溫度40_50°C (閉光反應(yīng))，反應(yīng)時(shí)間3_4小時(shí)。步驟b水浴溫度為70°C加入O. Olmmol氯原酸鈉，得到目標(biāo)化合物在水中重結(jié)晶提純。發(fā)明方法中步驟a及b的化學(xué)反應(yīng)式為發(fā)明人發(fā)現(xiàn)該配合物具有抑癌作用，特別在白血病方面，而且毒性低可以應(yīng)用其治療癌癥。本發(fā)明所用原料的純度只要達(dá)到化學(xué)純以上即可，來源均可從市場購得。本發(fā)明的配合物具有一定的脂溶性，易為人體吸收，在體外實(shí)驗(yàn)中對癌細(xì)胞有強(qiáng)烈的抑制作用，其初步毒性實(shí)驗(yàn)較降，已示出良好的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明。應(yīng)該正確理解的是本發(fā)明的實(shí)施例中的方法僅僅是用于說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明的限制。
綠原酸% pH6-7
實(shí)施例I發(fā)明所述配合物及其制備稱取5. 7克環(huán)鉬，即二碘環(huán)己二胺鉬(或二氯環(huán)己二胺(O. Olmmol)，用少量純化水?dāng)噭?，稱取3. 40克硝酸銀(O. 02mmol)，溶解后在避光攪拌條件下加入到環(huán)鉬懸濁液中，補(bǔ)充純化水至100ml，在40 50°C反應(yīng)約3. 5h，過濾AgI，得到淺黃色環(huán)鉬水解溶液。稱取綠原酸3. 54克,用少量純化水?dāng)嚦蓱覞嵋?稱取O. 4克氫氧化鈉,溶解后滴加到綠原酸懸濁液中至完全溶解，將溶液滴加到淺黃色環(huán)鉬水解溶液中，在室溫下用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH在 6 7之間，反應(yīng)約3小時(shí)后將得到的黃色固體濾除，先后用水、無水乙醇各洗2次后在常溫下干燥，得到3. 2克黃色粉末狀固體，產(chǎn)率約48%。元素分析分子式PtC22H3tlN2O9中C、N、H、Pt的計(jì)算值分別為C 39. 94 %, N
4.24%,H 4. 54%,Pt 29. 50% ；測量值為C39. 35%,N 4. 51%,H 4. 50%,Pt 29. 61%。FAB+-MS (m/z) :662 ([M+l]+，100% )。IR :0-H(3376)，N-H(3200)，C-H(2936，2864)，C = 0 (1620st)，Pt-N(483)， P-O (435)實(shí)施例2發(fā)明所述配合物的抗癌活性細(xì)胞株白血病乳腺肝癌肺癌結(jié)腸癌癌編號WangQKl2實(shí)驗(yàn)方法I.接種細(xì)胞用含10%胎牛血清的培養(yǎng)液(DMEM或者RMPI1640)配成單個(gè)細(xì)胞懸液，以每孔5000-10000個(gè)細(xì)胞接種到96孔板，每孔體積100 μ 1，貼壁細(xì)胞提前12小時(shí)接種培養(yǎng)。2.加入待測化合物溶液(固定濃度40 μ M初篩，在該濃度對腫瘤細(xì)胞生長抑制在 50%附近的化合物設(shè)5個(gè)濃度進(jìn)入梯度復(fù)篩)，每孔終體積200 μ 1，每種處理均設(shè)3個(gè)復(fù)孔。3.顯色37攝氏度培養(yǎng)48小時(shí)后，每孔加MTT溶液20 μ I。繼續(xù)孵育4小時(shí)，終止培養(yǎng)，吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液，每孔加200 μ I的SDS溶液(10% )，過夜孵育(溫度37°C )， 使結(jié)晶物充分融解。4.比色選擇595nm波長，酶聯(lián)免疫檢測儀(Bio-Rad 680)讀取各孔光吸收值，記錄結(jié)果，以濃度為橫坐標(biāo)，細(xì)胞存活率為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長曲線，應(yīng)用兩點(diǎn)法(Reed and Muench法)計(jì)算化合物的IC50值。白血病肝癌肺癌乳腺癌結(jié)腸癌化合物編號化合物名稱HL-60SMMC-7 721A-549MCF-7SW480WangQK12-27. 8713. 689. 4114.4117. 79陽性對照 DDP順鉑3.974. 968. 1910. 7811.56 結(jié)論按照化合物IC5tl < 10 μ g/mL即可認(rèn)為對腫瘤細(xì)胞的增殖有明抑制作用的標(biāo)準(zhǔn)[新藥(西藥)臨床前研究指導(dǎo)原則編1993P137-139]，在所測試的濃度范圍內(nèi)，樣品 WangQK12可認(rèn)為它們對白血病、肺癌腫瘤細(xì)胞株的增殖有明顯抑制作用。
權(quán)利要求
1.一種鉬配合物，其特征在于其分子式為Pt(A) (B)，即PtC22H3ciN2O9，其分子量661，結(jié)構(gòu)式為式中A =反式-1,2-環(huán)己二胺(IS, 2S) -(+) -1,2-環(huán)己二胺，其分子量114. 19,式中B =(IS, 3R, 4R, 5R) -3-[ [3-(3,4- _■輕基苯基)_1_ 氧代 _2-丙稀基]氧]-1,4, 5-二輕基環(huán)己烷甲酸。
2.一種制取權(quán)利要求I所述的鉬配合物的制備方法，依次包括下列工藝步驟a、將一定量的二碘環(huán)己二胺鉬或二氯環(huán)己二胺鉬與AgNO3或AgCO3反應(yīng)時(shí)間3_4小時(shí)， 查無Ag+，Γ，后過濾，濾液在沸水浴中加熱后70°C加入氯原酸鈉，即刻沉淀出所述鉬配合物；b、將a步驟所得鉬配合物用純水重結(jié)晶提純。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的鉬配合物制備方法，其特征步驟在于步驟a中所述二碘環(huán)己二胺鉬或二氯環(huán)己二胺鉬與AgNO3的摩爾比為O. Olmmol O. 02mmol，反應(yīng)溫度40_50°C， 反應(yīng)時(shí)間3-4小時(shí)，閉光反應(yīng)，過濾所得濾液在沸水浴中加熱，水浴溫度為70°C，加入 O. Olmmol氯原酸鈉。
4.權(quán)利要求I所述鉬配合物在制備抗癌藥物或治療白血病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新的結(jié)構(gòu)式如下的鉑配合物，其分子式PtC22H30N2O9，分子量FW＝661。本發(fā)明還涉及化合物的制備方法，其關(guān)鍵的工藝步驟是二碘1，2環(huán)己二胺鉑(或二氯1，2環(huán)己二胺鉑)與AgNO3反應(yīng)所得濾液在沸水浴中加入氯原酸鈉，得到該配合物。此外還涉及該配合物在治療癌癥中的應(yīng)用。發(fā)明的配合物具有的抑癌作用，特別在白血病方面的療效。
文檔編號A61P35/02GK102603804SQ20121003029
公開日2012年7月25日 申請日期2012年2月10日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月10日
發(fā)明者何鍵, 彭娟, 普紹平, 李永年, 王慶昆 申請人:昆明貴研藥業(yè)有限公司