使用胎盤(pán)干細(xì)胞治療脊髓損傷和外傷性腦損傷的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了治療患有中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷（例如脊髓損傷或外傷性腦損傷）的個(gè)體的方法，其中使用在此描述的胎盤(pán)干細(xì)胞和胎盤(pán)多效干細(xì)胞和這些胎盤(pán)細(xì)胞群。
【專(zhuān)利說(shuō)明】使用胎盤(pán)干細(xì)胞治療脊髓損傷和外傷性腦損傷
[0001]本申請(qǐng)要求提交于2010年12月17日的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/424，559的權(quán)益，其公開(kāi)內(nèi)容在此整體引入作為參考。
1.【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]在此提供了使用人胎盤(pán)干細(xì)胞治療患有外傷性脊髓損傷(SCI)或外傷性腦損傷(TBI)的個(gè)體的方法。
2.【背景技術(shù)】
[0003]中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)損傷代表了一類(lèi)醫(yī)學(xué)上很重要的問(wèn)題。約300，000在美國(guó)生活的人患有脊髓損傷(SCI)，且每年診斷新增10，000-14，000的SCI病例。SCI通常來(lái)自脊柱創(chuàng)傷，例如，由錯(cuò)位的骨骼或骨盤(pán)壓迫脊髓導(dǎo)致。SCI可能在沒(méi)有明顯椎骨骨折情況下發(fā)生，例如，由脊髓血液損失導(dǎo)致，而脊柱骨折可能在沒(méi)有SCI的情況下發(fā)生。
[0004]外傷性腦損傷(TBI)是導(dǎo)致全球青壯年殘疾和死亡的主要原因之一。其在軍隊(duì)的情況下為，例如，由諸如直接撞擊、諸如子彈和彈片等穿透性物體以及由爆炸導(dǎo)致的沖擊波等導(dǎo)致的腦損傷。
[0005]3.發(fā)明概述
[0006]在此提供了治療、控制和/或減輕CNS損傷相關(guān)紊亂和/或病況的方法。在一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了治療患有外傷性CNS損傷、或與CNS損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況的個(gè)體的方法，包括對(duì)個(gè)體給予治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基，其中治療有效量是足以對(duì)所述外傷性CNS損傷、或與所述CNS損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善或足以減輕其發(fā)展的量。在此還提供了胎盤(pán)干細(xì)胞在制備用于治療、控制和/或減輕例如SCI或TBI的CNS損傷的一種或多種癥狀的藥物中的應(yīng)用。
[0007]在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基在損傷的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、13、15、16、17、18、19、20，25、30，35、40、45、50 天或更多天內(nèi)，或CNS損傷后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多年內(nèi)被給予個(gè)體。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基在CNS損傷的21天、14天或7天內(nèi)，或在CNS損傷的48小時(shí)、24小時(shí)、12小時(shí)或3小時(shí)內(nèi)被給予個(gè)體。
[0008]在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，CNS損傷是SCI。在一些實(shí)施方式中，SCI來(lái)自直接創(chuàng)傷。在一些實(shí)施方式中，SCI來(lái)自骨折片、血腫或盤(pán)材料的壓迫。在一些實(shí)施方式中，SCI發(fā)生于頸椎、胸椎、腰椎、或骶椎的一種或多種。在一些實(shí)施方式中，SCI是針對(duì)頸髓、胸髓、腰骶椎、椎體、枕骨的一種或多種，或一種或多種馬尾神經(jīng)。
[0009]在一些實(shí)施方式中，與CNS損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況是由SCI導(dǎo)致的脊髓休克。在一些實(shí)施方式中，與CNS損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況是由SCI導(dǎo)致的神經(jīng)源性休克。在一些實(shí)施方式中，與CNS損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況是由SCI導(dǎo)致的自主反射障礙。在一些實(shí)施方式中，與CNS損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況是由SCI導(dǎo)致的水腫。在一些實(shí)施方式中，與CNS損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況選自由下述組成的組:中髓綜合癥、脊髓半切綜合癥、前髓綜合癥、脊髓圓錐綜合癥和馬尾綜合癥。
[0010]在一些實(shí)施方式中，給藥的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基的治療有效量是足以對(duì)一種或多種的以下SCI癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善或減輕其發(fā)展的量:在脊髓的頸段、胸段、腰段或骶段的運(yùn)動(dòng)功能、感覺(jué)功能、或運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)功能的缺失或損傷。在一些實(shí)施方式中，SCI的一種或多種癥狀包括臂部、軀干、腿部或盆腔內(nèi)器官的運(yùn)動(dòng)機(jī)能、感覺(jué)功能、或運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)功能的缺失或損傷。在一些實(shí)施方式中，SCI的一種或多種癥狀包括在皮節(jié)Cl、C2、C3、C4、C5、C6、C7、T1、T2、T3、T4、T5、T6、T7、T8、T9、T10、T11、T12、L1、L2、L3、L4 或 L5的一種或多種中的麻木。
[0011]在此提供的治療SCI的一些實(shí)施方式中，該方法進(jìn)一步包括對(duì)所述個(gè)體給予第二治療劑。在一些實(shí)施方式中，第二治療劑是皮質(zhì)類(lèi)固醇、神經(jīng)保護(hù)劑、免疫調(diào)節(jié)或免疫抑制劑、或抗凝劑。
[0012]在此提供的治療方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，與CNS損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況是TBI。在一些實(shí)施方式中，TBI是大腦額葉、頂葉、枕葉、顳葉、腦干、或小腦的損傷。在一些實(shí)施方式中，TBI為輕度TBI。在一些實(shí)施方式中，TBI是中度至重度TBI。
[0013]在一些實(shí)施方式中，給藥的治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基是足以對(duì)一種或多種的以下輕度TBI癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善或減輕其發(fā)展的量:頭痛、記憶力問(wèn)題、注意力缺陷、情緒波動(dòng)和挫折、疲勞、視力障礙、記憶力減退、注意力/專(zhuān)注度不佳、睡眠障礙、頭暈/失去平衡、煩躁不安、情緒障礙、感覺(jué)抑郁、抽搐、惡心、嗅覺(jué)損失、聲光敏感、情緒變化、迷失或糊涂、 或思維緩慢。
[0014]在一些實(shí)施方式中，給予的治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基是足以對(duì)一種或多種的以下中度至重度TBI癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善或減輕其發(fā)展的量:注意困難、專(zhuān)注度困難、注意力不集中、記憶困難、處理速度緩慢、混亂、持續(xù)言語(yǔ)、沖動(dòng)、語(yǔ)言處理困難、言語(yǔ)困難、不理解口語(yǔ)(感覺(jué)性失語(yǔ))、說(shuō)話(huà)和被理解困難(表達(dá)性失語(yǔ))、口齒不清、說(shuō)話(huà)過(guò)快或過(guò)慢、閱讀問(wèn)題、寫(xiě)作問(wèn)題、對(duì)觸摸、溫度、運(yùn)動(dòng)、肢體位置和細(xì)微區(qū)分的解釋困難、將感官印象整合或構(gòu)架至心理學(xué)有意義的數(shù)據(jù)的困難、部分或完全喪失視力、眼部肌肉衰弱和雙視(復(fù)視)、視力模糊、判斷距離困難、眼球不自主運(yùn)動(dòng)(眼球震顫)、不耐光(畏光)、聽(tīng)力下降或損失、耳鳴、對(duì)聲音敏感性增加、嗅覺(jué)損失或減退(嗅覺(jué)缺失癥)、味覺(jué)損失或減退、癲癇、癲癇相關(guān)的抽搐、身體癱瘓/痙攣、慢性疼痛、腸和/或膀胱失去控制、睡眠障礙、耐久力損失、食欲改變、體溫失調(diào)、月經(jīng)困難、社會(huì)情感困難、依賴(lài)行為、情感能力喪失、缺乏動(dòng)力、煩躁不安、易怒、抑郁、去抑制、或缺乏認(rèn)識(shí)。
[0015]在此提供的治療TBI的一些實(shí)施方式中，該方法進(jìn)一步包括對(duì)所述個(gè)體給予第二治療劑。在一些實(shí)施方式中，第二治療劑是抗癲癇藥、抗抑郁藥、金剛烷胺、哌醋甲酯、溴隱亭、卡馬西平或阿米替林。
[0016]在治療諸如SCI或TBI等CNS損傷的一些實(shí)施方式中，如在此提供的，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基通過(guò)選自下述的路徑給予個(gè)體:靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、心室內(nèi)、胸骨內(nèi)、顱內(nèi)、肌肉內(nèi)、滑膜內(nèi)、眼內(nèi)、玻璃體內(nèi)、大腦內(nèi)、腦室內(nèi)、囊內(nèi)、骨內(nèi)輸液、膀胱內(nèi)、透皮、腦池內(nèi)、硬腦膜外、腰椎穿刺、小腦延髓池或皮下給藥。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基直接在損傷部位給予個(gè)體。
[0017]在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞是⑶10+、⑶34'⑶105+、⑶200+胎盤(pán)干細(xì)胞。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞表達(dá)CD200且不表達(dá)HLA-G ;或表達(dá)⑶73、⑶105和⑶200 ;或表達(dá)⑶200和0CT-4 ;或表達(dá)⑶73和⑶105且不表達(dá)HLA-G ;或表達(dá)CD73和CD105且當(dāng)含有所述干細(xì)胞的胎盤(pán)細(xì)胞群在允許胚胎樣小體形成的條件下培養(yǎng)時(shí)有利于在所述胎盤(pán)細(xì)胞群中形成一種或多種胚胎樣小體；或表達(dá)0CT-4且當(dāng)含有所述干細(xì)胞的胎盤(pán)細(xì)胞群在允許胚胎樣小體形成的條件下培養(yǎng)時(shí)有利于在所述胎盤(pán)細(xì)胞群中形成一種或多種胚胎樣小體。在某些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞抑制免疫細(xì)胞的活性，例如，抑制T細(xì)胞增殖。
[0018]在某些實(shí)施方式中，在此提供了一種的方法抑制個(gè)體中對(duì)諸如SCI或TBI等CNS損傷的促炎性應(yīng)答的方法，包括用胎盤(pán)干細(xì)胞接觸CNS損傷相關(guān)的或作為CNS損傷一部分的T細(xì)胞(例如，CD4+T淋巴細(xì)胞或白細(xì)胞)，例如，用在此描述的胎盤(pán)干細(xì)胞接觸。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，炎性應(yīng)答是Thl應(yīng)答或Thl7應(yīng)答。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述接觸可檢測(cè)地減少Thl細(xì)胞成熟。在本方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述接觸可檢測(cè)地減少由所述T細(xì)胞產(chǎn)生的一種或多種的白介素-1 β (IL-1 β )、11^-12、11^-17、11^-21、11^-23、腫瘤壞死因子-a (TNFa)和/或干擾素-Y (IFN Y )。在本方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述接觸增強(qiáng)或上調(diào)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)表型。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述接觸下調(diào)樹(shù)突細(xì)胞(DC)和/或巨噬細(xì)胞表達(dá)促進(jìn)Thl和/或Thl7免疫應(yīng)答的標(biāo)志物(例如，CD80、⑶83、CD86、ICAM-1、HLA-1I)。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述T細(xì)胞還接觸IL-10，例如，外源性IL-10或不由所述T細(xì)胞產(chǎn)生的IL-10，例如，重組IL-10。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種減少產(chǎn)生來(lái)自巨噬細(xì)胞的促炎性細(xì)胞因子的方法，包括用有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞接觸巨噬細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種上調(diào)耐受原細(xì)胞和/或細(xì)胞因子的方法，例如，來(lái)自巨噬細(xì)胞的，包括用有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞接觸免疫系統(tǒng)細(xì)胞。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述接觸導(dǎo)致活化巨噬細(xì)胞生成較之不與所述胎盤(pán)干細(xì)胞接觸的活化巨噬細(xì)胞而言可檢測(cè)的更多IL-10。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種上調(diào)或增加抗炎性T細(xì)胞數(shù)量的方法，包括用有 效量的胎盤(pán)干細(xì)胞接觸免疫系統(tǒng)細(xì)胞。
[0019]在一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種抑制個(gè)體中CNS損傷相關(guān)的Thl應(yīng)答的方法，包括對(duì)個(gè)體給予有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞，其中所述有效量是在個(gè)體中導(dǎo)致所述CNS損傷相關(guān)的Thl應(yīng)答可檢測(cè)地減少的量。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種抑制個(gè)體中CNS損傷相關(guān)的Thl7應(yīng)答的方法，包括對(duì)個(gè)體給予有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞，其中所述有效量是在個(gè)體中導(dǎo)致Thl7應(yīng)答可檢測(cè)地減少的量。在這些方法的具體的實(shí)施方式中，所述給藥在所述個(gè)體中可檢測(cè)地降低由T細(xì)胞或抗原呈現(xiàn)細(xì)胞(例如，DC、巨噬細(xì)胞或單核細(xì)胞)生產(chǎn)的一種或多種的淋巴毒素-1a (LT-la)、IL_10、IL-12、IL-17、IL-21、IL_23、TNFa 和 /或IFN Y。在本方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述接觸加強(qiáng)或上調(diào)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述接觸在個(gè)體中調(diào)節(jié)(例如，減少)由樹(shù)突細(xì)胞(DC)和/或巨噬細(xì)胞生產(chǎn)的所述促進(jìn)Thl或Thl7應(yīng)答的標(biāo)志物(例如，⑶80、⑶83、⑶86、ICAM-U HLA-1I)。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，該方法另外包括對(duì)所述個(gè)體給藥IL-10。
[0020]在另一方面，在此提供了如在此描述的被遺傳修飾以表達(dá)一種或多種抗炎性細(xì)胞因子的胎盤(pán)干細(xì)胞。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述抗炎性細(xì)胞因子包括IL-10。
[0021]3.1 定義
[0022]如本文所使用的，當(dāng)涉及說(shuō)明的數(shù)值時(shí)，術(shù)語(yǔ)“約”表示所說(shuō)明的數(shù)值正或負(fù)10%內(nèi)的值。
[0023]如本文所使用的，當(dāng)涉及在此描述的胎盤(pán)干細(xì)胞時(shí)，術(shù)語(yǔ)“數(shù)量”表示特定數(shù)量的胎盤(pán)細(xì)胞，例如，以一種或多種劑量被給藥的若干胎盤(pán)干細(xì)胞，其足以在降低CNS損傷的一種或多種癥狀的嚴(yán)重程度或減緩其發(fā)展方面產(chǎn)生可檢測(cè)的改善。
[0024]如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“來(lái)源的”表示從中分離的或用其它方式純化的。例如，胎盤(pán)來(lái)源的貼壁細(xì)胞分離自胎盤(pán)。術(shù)語(yǔ)“來(lái)源的”涵蓋了由直接從諸如胎盤(pán)的組織中分離的細(xì)胞所培養(yǎng)的細(xì)胞，以及培養(yǎng)或擴(kuò)增自初級(jí)分離物的細(xì)胞。
[0025]在此使用的“免疫定位”表示在例如流式細(xì)胞術(shù)、熒光激活細(xì)胞分選、磁性細(xì)胞分選、原位雜交、免疫組織化學(xué)等中對(duì)諸如細(xì)胞標(biāo)志物的化合物進(jìn)行檢測(cè)，其中使用免疫蛋白，例如，抗體或其片段。
[0026]如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“SH2”是指結(jié)合標(biāo)志物⑶105上的表位的抗體。因此，稱(chēng)為SH2+的細(xì)胞是CD105+。
[0027]如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“SH3”和“SH4”是指結(jié)合標(biāo)志物⑶73上所存在的表位的抗體。因此，稱(chēng)為SH3.和/或SH4.的細(xì)胞是CD73+。
[0028]如本文所使用的，如果在例如干細(xì)胞的收集和/或培養(yǎng)期間從干細(xì)胞中除去了至少50%、60%、70%、80%、90%、95%或至少99%的與其天然相聯(lián)系的其他細(xì)胞，那么干細(xì)胞是“分離的”。“分離的”細(xì)胞群表示基本上與從中分離細(xì)胞群體的組織(例如，胎盤(pán))中的其他細(xì)胞分離的細(xì)胞群體。在一些實(shí)施方式中，如果在例如干細(xì)胞群的收集和/或培養(yǎng)期間從干細(xì)胞群中除去了至少50%、60%、70%、80%、90%、95%或至少99%的與其天然相聯(lián)系的其他細(xì)胞，那么干細(xì)胞群是“分離的”。
[0029]如本文所使用的，術(shù) 語(yǔ)“胎盤(pán)干細(xì)胞”是指來(lái)源于(例如分離自)哺乳動(dòng)物胎盤(pán)的干細(xì)胞或祖細(xì)胞，而不考慮形態(tài)、細(xì)胞表面標(biāo)志物或初代培養(yǎng)后的傳代數(shù)，其附著于組織培養(yǎng)基材(例如，塑料組織培養(yǎng)皿、纖連蛋白涂覆的組織培養(yǎng)板)。如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“胎盤(pán)干細(xì)胞”不是滋養(yǎng)層、細(xì)胞滋養(yǎng)層、胚胎生殖細(xì)胞或胚胎干細(xì)胞，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的那些細(xì)胞。如果細(xì)胞保持至少一種干細(xì)胞的性質(zhì)，例如:與一種或多種類(lèi)型的干細(xì)胞有關(guān)的標(biāo)志物或基因表達(dá)譜；在培養(yǎng)中復(fù)制至少10-40次的能力；多潛能性，例如能夠體外、體內(nèi)或體內(nèi)外分化成一種或多種的三個(gè)胚層細(xì)胞的能力；缺失成體(即，分化的)細(xì)胞特性；等等，那么認(rèn)為該細(xì)胞是“干細(xì)胞”。術(shù)語(yǔ)“胎盤(pán)干細(xì)胞”和“胎盤(pán)來(lái)源的干細(xì)胞”可交換使用。除非在本文中另作說(shuō)明，否則術(shù)語(yǔ)“胎盤(pán)”包括臍帶。在某些實(shí)施方式中，本文所公開(kāi)的胎盤(pán)干細(xì)胞是體外多效(即，細(xì)胞在分化條件下體外分化)、體內(nèi)多效(即，細(xì)胞在體內(nèi)分化)、或兩者兼有。
[0030]如本文所使用的，當(dāng)標(biāo)志物是可檢測(cè)的時(shí)，干細(xì)胞對(duì)特定標(biāo)志物是“陽(yáng)性的”。例如，由于CD73在胎盤(pán)干細(xì)胞上是以比背景(與(例如)抗體同型對(duì)照相比或給定分析的實(shí)驗(yàn)陰性對(duì)照相比)更大的量可檢測(cè)的，因此胎盤(pán)干細(xì)胞對(duì)于(例如)CD73是陽(yáng)性的。當(dāng)由細(xì)胞所提供或表達(dá)時(shí)標(biāo)志物可用于將該細(xì)胞與至少一種其他細(xì)胞類(lèi)型進(jìn)行區(qū)分或可用于選擇或分離該細(xì)胞時(shí)，該細(xì)胞對(duì)于標(biāo)志物也是陽(yáng)性的。
[0031]在此使用的“免疫調(diào)節(jié)”和“免疫調(diào)節(jié)的”表示導(dǎo)致或有能力導(dǎo)致可檢測(cè)的免疫應(yīng)答變化，以及導(dǎo)致可檢測(cè)的免疫應(yīng)答變化的能力。
[0032]在此使用的“免疫抑制”和“免疫抑制的”表示導(dǎo)致或有能力導(dǎo)致可檢測(cè)的免疫應(yīng)答減少，以及導(dǎo)致可檢測(cè)的免疫應(yīng)答減少的能力。
[0033]4.附圖簡(jiǎn)述[0034]圖1顯示了胎盤(pán)來(lái)源的貼壁細(xì)胞對(duì)選定的血管生成蛋白的分泌。
[0035]圖2顯示了胎盤(pán)來(lái)源的貼壁細(xì)胞條件培養(yǎng)基對(duì)人內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)管形成的血管生成效果。
[0036]圖3顯示了胎盤(pán)來(lái)源的貼壁細(xì)胞條件培養(yǎng)基對(duì)人內(nèi)皮細(xì)胞遷移的血管生成效果。
[0037]圖4顯示了胎盤(pán)來(lái)源的貼壁細(xì)胞條件培養(yǎng)基對(duì)人內(nèi)皮細(xì)胞增殖的效果。
[0038]圖5顯示了 HUVEC和胎盤(pán)來(lái)源的貼壁細(xì)胞的管形成。
[0039]圖6顯示了胎盤(pán)來(lái)源的貼壁細(xì)胞在低氧和常氧條件下的VEGF和IL_8的分泌。
[0040]圖7顯示了雞絨毛膜尿囊血管生成模型中PDAC對(duì)血管生成的正面效果。bFGF:堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(陽(yáng)性對(duì)照)。MDAMB231:血管生成性乳腺癌細(xì)胞系(陽(yáng)性對(duì)照)。Y軸:血管形成度。
[0041]圖8顯示了雞絨毛膜尿囊血管生成模型中PDAC條件培養(yǎng)基(上清)對(duì)血管生成的正面效果。bFGF:堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(陽(yáng)性對(duì)照)。MDAMB231:血管生成性乳腺癌細(xì)胞系(陽(yáng)性對(duì)照)。Y軸:血管形成度。
[0042]圖9:在星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)物或星形膠質(zhì)細(xì)胞和PDAC共培養(yǎng)物中存在的過(guò)氧化氫產(chǎn)生的活性氧。RFU ROS活性:活性氧的相對(duì)熒光單位。
[0043]5.發(fā)明詳述
[0044]5.1治療CNS損傷的方法
[0045]在此提供了用于治療患有諸如SCI或TBI的CNS損傷或與CNS損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況的個(gè)體的方法，包括對(duì)患有CNS損傷的個(gè)體給予一種或多種劑量的胎盤(pán)干細(xì)胞。用于治療該個(gè)體的方法和用于該干細(xì)胞單獨(dú)或與其它治療劑組合給藥的方法如下詳述。
[0046]5.1.1治療脊髓損傷(SCI)
[0047]在此提供了治療患有或正在經(jīng)歷SCI癥狀或其相關(guān)疾病、紊亂或病況的個(gè)體的方法，包括對(duì)個(gè)體給予治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基，其中治療有效量是足以對(duì)所述SCI的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善或足以減輕其發(fā)展的量。在此使用的“一種或多種癥狀”包括客觀檢測(cè)參數(shù)，例如炎癥程度、免疫應(yīng)答、與治療過(guò)程有關(guān)的損傷部位內(nèi)部的基因表達(dá)、損傷部位瘢痕的質(zhì)量和程度、患者運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)功能改進(jìn)等，以及主觀檢測(cè)參數(shù)，例如患者的健康、患者對(duì)運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)功能改進(jìn)的感覺(jué)、SCI相關(guān)的疼痛或不適減輕的感覺(jué)，等等。
[0048]SCI是一種對(duì)脊髓的破壞，導(dǎo)致其正常運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)或自主神經(jīng)功能暫時(shí)或永久性改變。SCI包括被稱(chēng)為四肢癱瘓(前身為四肢麻痹(quadriplegia))和截癱的兩種情況。從而，在此提供的SCI治療方法的一些實(shí)施方式中，患有或正在經(jīng)歷SCI癥狀或其相關(guān)疾病、紊亂或病況的個(gè)體是四肢癱瘓或截癱的。
[0049]四肢癱瘓指頸部脊髓損傷，其特征為由于椎管內(nèi)神經(jīng)元傷害導(dǎo)致的脊髓頸段運(yùn)動(dòng)和/或感覺(jué)功能的損傷或缺失。四肢癱瘓導(dǎo)致臂部、軀干、腿部和盆腔內(nèi)器官的功能損傷。其不包括臂叢神經(jīng)損害或椎管外周?chē)窠?jīng)損傷。
[0050]截癱指椎管內(nèi)神經(jīng)元傷害繼發(fā)性胸段、腰段或骶段(而非頸段)脊髓運(yùn)動(dòng)和/或感覺(jué)功能的損傷或缺失?；加薪匕c，手臂功能仍然存在，但是根據(jù)損傷程度不同，軀干、腿部和盆腔內(nèi)器官可能涉及(損傷)。該術(shù)語(yǔ)適用于馬尾和椎體髓損傷，但不適用于腰骶叢損傷或椎管外周?chē)窠?jīng)損傷。
[0051]SCI的一般誘因包括但不限于，機(jī)動(dòng)車(chē)事故、跌落、暴力、運(yùn)動(dòng)損傷、血管病變、椎關(guān)節(jié)強(qiáng)硬、醫(yī)源性損傷(特別是脊髓注射和硬腦膜外導(dǎo)管放置)、骨質(zhì)疏松和發(fā)育障礙繼發(fā)性椎骨骨折。
[0052]在某些實(shí)施方式中，SCI可能來(lái)自于，例如，鈍力外傷、壓迫、錯(cuò)位等。在某些實(shí)施方式中，脊髓被完全切斷。在某些其它實(shí)施方式中，脊髓受到傷害，例如，部分切斷但不完全切斷。在其它實(shí)施方式中，脊髓受到來(lái)自脊柱骨性結(jié)構(gòu)受傷、一種或多種椎骨相對(duì)于其它椎骨發(fā)生錯(cuò)位、炎癥或鄰近組織腫脹等等的壓迫。
[0053]在一個(gè)實(shí)施方式中，SCI發(fā)生于一種或多種的頸椎。在另一個(gè)實(shí)施方式中，SCI發(fā)生于一種或多種的胸椎。在另一個(gè)實(shí)施方式中，SCI發(fā)生于一種或多種的腰椎。在另一個(gè)實(shí)施方式中，SCI發(fā)生于一種或多種的骶椎。在某些實(shí)施方式中，SCI發(fā)生于椎骨Cl、C2、C3、C4、C5、C6 或 C7 ;或位于椎骨 Tl、T2、T3、T4、T5、T6、T7、T8、T9、T10、Tll 或 T12 ;或位于椎骨L1、L2、L3、L4或L5。在其它某些實(shí)施方式中，SCI是針對(duì)在Cl和C2之間、在C2和C3之間、在C3和C4之間、在C4和C5之間、在C5和C6之間、在C6和C7之間、在C7和Tl之間、在Tl和T2之間、在T2和T3之間、在T3和T4之間、在T4和T5之間、在T5和T6之間、在T6和T7之間、在T7和T8之間、在T8和T9之間、在T9和TlO之間、在TlO和Tll之間、在Tll和T12之間、在T12和LI之間、在LI和L2之間、在L2和L3之間、在L3和L4之間、或在L4和L5之間退出(exiting)脊柱的脊髓根。在某些實(shí)施方式中，損傷是針對(duì)頸髓。在其它實(shí)施方式中，損傷是針對(duì)胸髓。在其它實(shí)施方式中SCI是針對(duì)腰骶部脊髓。在其它某些實(shí)施方式中，SCI是針對(duì)椎 體。在其它某些實(shí)施方式中，CNS損傷是針對(duì)馬尾中的一種或多種神經(jīng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，SCI發(fā)生于枕骨。
[0054]在某些實(shí)施方式中，SCI的癥狀是一種或多種皮節(jié)(即，由給定脊髓平面神經(jīng)支配的一片皮膚)的麻木。在具體的實(shí)施方式中，SCI的癥狀是在一種或多種的皮節(jié)C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、Tl、T2、T3、T4、T5、T6、T7、T8、T9、T10、Til、T12、L1、L2、L3、L4 或 L5 的麻木。
[0055]脊髓休克是一種在損傷平面下的脊索功能暫時(shí)性生理(而非解剖)反射抑制狀態(tài)，伴有相應(yīng)的感覺(jué)運(yùn)動(dòng)功能損失。其中在初期由于兒茶酚胺的釋放導(dǎo)致血壓升高，繼而發(fā)生低血壓。可觀察到包括腸和/或膀胱的遲緩性癱瘓，且有時(shí)發(fā)生持續(xù)性異常勃起。這些癥狀傾向于持續(xù)幾小時(shí)至幾天，直至在損傷平面下的反射弧開(kāi)始再次發(fā)揮功能(例如，球海綿體肌反射，肌牽張反射[MSR])。因此，在該方法具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)由SCI造成的脊髓休克的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量，包括但不限于，一些或全部感覺(jué)運(yùn)動(dòng)功能損失、高血壓、低血壓、(例如，腸和/或膀胱的)遲緩性癱瘓和異常勃起。
[0056]神經(jīng)源性休克表現(xiàn)為低血壓、心動(dòng)過(guò)緩和體溫過(guò)低三項(xiàng)。休克一般更傾向于發(fā)生在T6之上，隨著來(lái)自T1-L2的交感傳出和非對(duì)抗性迷走緊張，導(dǎo)致血管阻力降低并伴隨著血管擴(kuò)張。神經(jīng)源性休克不同于脊髓休克和低血容量性休克，其傾向于與心動(dòng)過(guò)速有關(guān)。從而，在治療SCI方法的一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)由SCI造成的一種或多種神經(jīng)源性休克癥狀得到可檢測(cè)的改善的量，包括但不限于，低血壓，心動(dòng)過(guò)緩，體溫過(guò)低，血管阻力降低和血管擴(kuò)張。
[0057]自主反射障礙(AD)是發(fā)生在患有內(nèi)臟交感傳出之上(T5-T6)的SCI患者中的大規(guī)模不平衡反射交感神經(jīng)沖動(dòng)釋放的綜合癥。AD發(fā)生于其中反射返回的脊髓休克階段之后?；加兄饕獌?nèi)臟傳出之上損傷的個(gè)體可能發(fā)展成AD。在損傷之下，完整的周?chē)杏X(jué)神經(jīng)傳遞脈沖，其在脊髓丘腦和后柱中升高以刺激位于中側(cè)脊髓灰質(zhì)的交感神經(jīng)元。在SCI之上來(lái)自腦血管舒縮中樞的受抑傳出被增強(qiáng)，但其不能穿過(guò)下方SCI的阻隔。這一大的交感傳出導(dǎo)致各種神經(jīng)遞質(zhì)的釋放(去甲腎上腺素、多巴胺-b-羥化酶、多巴胺)，產(chǎn)生立毛、皮膚蒼白和嚴(yán)重的動(dòng)脈血管收縮。其結(jié)果是在損傷平面之上突然的血壓升高和血管舒張?；颊咄ǔ?huì)患有由疼痛敏感的腦血管舒張導(dǎo)致的頭痛。從而，在SCI治療方法的一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)由SCI造成的自主反射障礙的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量，包括但不限于，在損傷平面之上的立毛、皮膚蒼白和嚴(yán)重的動(dòng)脈血管收縮、血壓升高和血管舒張。
[0058]在SCI治療方法的一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)由SCI造成的水腫的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量。在本方法的一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)由直接創(chuàng)傷導(dǎo)致的SCI的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量。在本方法的一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)受椎骨碎片壓迫導(dǎo)致的一種或多種SCI癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量。在本方法的一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)受椎骨盤(pán)材料壓迫導(dǎo)致的一種或多種SCI癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量。
[0059]在此提供的治療SCI的方法還提供針對(duì)患有或正在經(jīng)歷涉及其它SCI種類(lèi)的癥狀或疾病、紊亂或病況的個(gè)體的治療，包括但不限于，中髓綜合癥、脊髓半切綜合癥、前髓綜合癥、脊髓圓錐綜合癥和馬尾綜合癥。
[0060]中髓綜合癥通常與頸部損傷相關(guān)，并導(dǎo)致上肢發(fā)生比下肢更嚴(yán)重的虛弱，且保留骶骨感知。從而，在SCI治療方法的【具體實(shí)施方式】中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)中髓綜合癥的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量，包括但不限于，上肢發(fā)生比下肢更嚴(yán)重的虛弱，且保留骶骨感知。
[0061]脊髓半切綜合癥，通常與脊索半切損傷相關(guān)，導(dǎo)致相對(duì)嚴(yán)重的同側(cè)本體感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)損失，以及對(duì)側(cè)痛覺(jué)和溫度敏感性損失。從而，在SCI治療方法的【具體實(shí)施方式】中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)脊髓半切綜合癥的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量,包括但不限于，同側(cè)本體感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)損失，以及對(duì)側(cè)痛覺(jué)和溫度感覺(jué)損失。
[0062]前髓綜合癥通常與導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)功能不定損失及痛覺(jué)和溫度敏感性損失的損傷相關(guān)；本體感受被保留。從而，在SCI治療方法的【具體實(shí)施方式】中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)前髓綜合癥的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量，包括但不限于，運(yùn)動(dòng)功能的不定損失及痛覺(jué)和溫度敏感性損失。
[0063]脊髓圓錐綜合癥與導(dǎo)致反射消失性膀胱、腸和下肢的骶索和腰神經(jīng)根損傷有關(guān)，而骶段偶爾可能表現(xiàn)出保留的反射(例如，球海綿體肌和排尿反射)。從而，在SCI治療方法的【具體實(shí)施方式】中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)脊髓圓錐綜合癥的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量，包括但不限于，反射消失性膀胱、腸和下肢。
[0064]馬尾綜合癥是由于椎管腰骶神經(jīng)根損傷，導(dǎo)致反射消失性膀胱、腸和下肢。從而，在SCI治療方法的【具體實(shí)施方式】中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)馬尾綜合癥的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量，包括但不限于，反射消失性膀胱、腸和下肢。
[0065]在某些實(shí)施方式中，用于檢測(cè)對(duì)SCI的一種或多種癥狀、病癥或綜合癥是否產(chǎn)生改善、減輕嚴(yán)重程度或減輕其發(fā)展的特定技術(shù)對(duì)于在此提供的SCI治療方法而言并不重要。在某些實(shí)施方式中，根據(jù)本領(lǐng)域從業(yè)者的判斷對(duì)針對(duì)SCI —種或多種癥狀、病癥或綜合癥發(fā)展的改善和減緩做出評(píng)價(jià)。在某些實(shí)施方式中，根據(jù)本領(lǐng)域從業(yè)者的判斷以及主體的主觀經(jīng)驗(yàn)對(duì)針對(duì)SCI —種或多種癥狀、病癥或綜合癥發(fā)展的改善和減緩做出評(píng)價(jià)。
[0066]在一些實(shí)施方式中，根據(jù)脊髓損傷的神經(jīng)和功能分類(lèi)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)來(lái)檢測(cè)對(duì)所述SCI一種或多種癥狀的改善或發(fā)展減輕。脊髓損傷的神經(jīng)和功能分類(lèi)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)由美國(guó)脊髓損傷協(xié)會(huì)(ASIA)公布，是一個(gè)基于神經(jīng)功能的系統(tǒng)性運(yùn)動(dòng)和感知檢查來(lái)描述SCI水平和程度的得到廣泛接受的系統(tǒng)。參見(jiàn) International Standards For Neurological ClassificationOf Spinal Cord Injury, J Spinal Cord Med.26Suppll: S50-6 (2003),其公開(kāi)內(nèi)容全文引入作為參考。
[0067]在特定的實(shí)施方式中,根據(jù)ASIA病損分級(jí)(修訂的Frankel分級(jí))對(duì)所述SCI —種或多種癥狀的改善或發(fā)展減輕進(jìn)行檢測(cè)，使用以下分類(lèi):
[0068]A—完全性損害:在骶段S4-S5.4無(wú)任何感覺(jué)或運(yùn)動(dòng)功能保留。“完全”指在最下方的骶段無(wú)無(wú)任何感覺(jué)或運(yùn)動(dòng)功能保留。
[0069]B—不完全性損害:在神經(jīng)平面以下并貫穿骶段(S4 — S5)存在感覺(jué)功能，但無(wú)運(yùn)動(dòng)功能。“不完全”指損傷平面以下保留感覺(jué)或運(yùn)動(dòng)功能，包括最下方的骶段。
[0070]C—不完全性損害:在神經(jīng)平面以下存在運(yùn)動(dòng)功能，并且神經(jīng)平面以下大部分關(guān)鍵肌的肌力小于3級(jí)。
[0071]D—不完全性損害:在神經(jīng)平面以下存在運(yùn)動(dòng)功能，并且神經(jīng)平面以下大部分關(guān)鍵肌的肌力大于或等于3級(jí)。
[0072]E—正常:感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)功能正常。
[0073]從而，在此提供的SCI治療方法的一個(gè)【具體實(shí)施方式】中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致根據(jù)ASIA病損分級(jí)(AIS)的損傷降低級(jí)別的量。在一些實(shí)施方式中，該降低為1、2、3、4或5級(jí)的損傷級(jí)別降低，其中一級(jí)對(duì)應(yīng)一個(gè)單獨(dú)的分類(lèi)改善，例如，從損傷類(lèi)別D降低到類(lèi)別E。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是根據(jù)AIS足以使個(gè)體從ASIA A變?yōu)锳SIA B、ASIA C、ASIA D或ASIA E的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是根據(jù)AIS足以使個(gè)體從ASIA B變?yōu)锳SIA C、ASIA D或ASIA E的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是根據(jù)AIS足以使個(gè)體從ASIA C變?yōu)锳SIA D或ASIA E的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是根據(jù)AIS足以使個(gè)體從ASIA D變?yōu)锳SIA E的量。
[0074]在一些實(shí)施方式中，根據(jù)測(cè)量患者肌力對(duì)所述SCI —種或多種癥狀的改善或發(fā)展減輕進(jìn)行檢測(cè)。在一些實(shí)施方式中，肌力可以使用以下醫(yī)學(xué)研究委員會(huì)(MRC)的0-5個(gè)級(jí)別進(jìn)行分級(jí):
[0075]5-正常力量
[0076]4+-對(duì)抗阻力的次最大運(yùn)動(dòng)
[0077]4-對(duì)抗阻力的中度運(yùn)動(dòng)[0078]4 _ -對(duì)抗阻力的輕度運(yùn)動(dòng)
[0079]3 -對(duì)抗重力但不對(duì)抗阻力的運(yùn)動(dòng)
[0080]2-消除重力下的運(yùn)動(dòng)
[0081]1-顫動(dòng)運(yùn)動(dòng)
[0082]O -無(wú)運(yùn)動(dòng)
[0083]對(duì)SCI患者的以下關(guān)鍵肌進(jìn)行測(cè)試并標(biāo)明對(duì)應(yīng)的損傷水平:
[0084]C5-肘屈肌(二頭肌，肱肌)
[0085]C6-腕伸肌(橈側(cè)伸腕長(zhǎng)肌和短肌)
[0086]C7-肘伸肌(三頭肌)
[0087]CS-中指手指屈肌(指深屈肌)
[0088]Tl-小手指外展肌(小指展肌)
[0089]L2-髖部屈肌(髂腰肌)
[0090]L3-膝伸肌(四頭肌) [0091 ] L4-踝背屈肌(脛骨前肌)
[0092]L5-趾長(zhǎng)伸肌(拇長(zhǎng)伸肌)
[0093]S1-踝跖屈肌(腓腸肌，比目魚(yú)肌)
[0094]從而，在此提供的SCI治療方法的一個(gè)【具體實(shí)施方式】中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是根據(jù)MRC分級(jí)足以導(dǎo)致對(duì)肌肉力量提升1、2、3、4或5分的量。例如，在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由SCI導(dǎo)致的無(wú)運(yùn)動(dòng)的肌肉具有顫動(dòng)運(yùn)動(dòng)、消除重力下的運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗重力但不對(duì)抗阻力的運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的輕度運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的中度運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的次最大運(yùn)動(dòng)、或正常力量的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由SCI導(dǎo)致的只有顫動(dòng)運(yùn)動(dòng)的肌肉具有消除重力下的運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗重力但不對(duì)抗阻力的運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的輕度運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的中度運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的次最大運(yùn)動(dòng)、或正常力量的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由SCI導(dǎo)致的只有消除重力下的運(yùn)動(dòng)的肌肉具有對(duì)抗重力但不對(duì)抗阻力的運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的輕度運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的中度運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的次最大運(yùn)動(dòng)、或正常力量的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由SCI導(dǎo)致的只有對(duì)抗重力但不對(duì)抗阻力的運(yùn)動(dòng)的肌肉具有對(duì)抗阻力的輕度運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的中度運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的次最大運(yùn)動(dòng)、或正常力量的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由SCI導(dǎo)致的只有對(duì)抗阻力的輕度運(yùn)動(dòng)的肌肉具有對(duì)抗阻力的中度運(yùn)動(dòng)、對(duì)抗阻力的次最大運(yùn)動(dòng)、或正常力量的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由SCI導(dǎo)致的只有對(duì)抗阻力的中度運(yùn)動(dòng)的肌肉具有對(duì)抗阻力的次最大運(yùn)動(dòng)或正常力量的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由SCI導(dǎo)致的只有對(duì)抗阻力的次最大運(yùn)動(dòng)的肌肉具有或正常力量的量。
[0095]在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的二頭肌力量提升1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的肱肌力量提升1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的橈側(cè)伸腕長(zhǎng)肌或短肌力量提升1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的三頭肌力量提升1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的指深屈肌力量提升1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的小指展肌力量提升1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的髂腰肌力量提升1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的四頭肌力量提升1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的脛骨前肌力量提升1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的拇長(zhǎng)伸肌力量提升1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)主體的腓腸肌或比目魚(yú)肌力量提升1、2、3、4或5分的量。
[0096]在一些實(shí)施方式中，根據(jù)感官檢查對(duì)所述SCI —種或多種癥狀的改善或發(fā)展減輕進(jìn)行檢測(cè)。感官檢查可以在以下水平進(jìn)行:
[0097]C2-枕骨隆突
[0098]C3-鎖骨上窩
[0099]C4-肩鎖關(guān)節(jié)頂部
[0100]C5-肘窩側(cè)部
[0101]C6-拇指
[0102]C7-中指
[0103]C8-小指
[0104]Tl-肘窩內(nèi)側(cè)
[0105]T2-腋窩頂點(diǎn)
[0106]T3-第三肋間(IS)
[0107]T4-乳頭線第四IS
[0108]T5-第五 IS (T4 和 T6 中間)
[0109]T6-在劍突水平的第六IS
[0110]T7-第七 IS (T6 和 T8 中間)
[0111]T8-第八 IS (T6 和 TlO 中間)
[0112]T9-第九 IS (中間 T8 和 T10)
[0113]TlO-第 IOIS 或臍
[0114]Tll-第 IlIS (T10 和 T12 中間)
[0115]T12-腹股溝韌帶中點(diǎn)
[0116]L1- T12和L2之間一半的距離
[0117]L2-股前中部
[0118]L3-股骨內(nèi)側(cè)髁
[0119]L4-內(nèi)踝
[0120]L5-足背第三跖趾關(guān)節(jié)
[0121]S1-腳后跟外側(cè)[0122]S2-中線胭窩
[0123]S3-坐骨結(jié)節(jié)
[0124]S4-5-肛周區(qū)域(作為I級(jí))
[0125]感覺(jué)評(píng)分使用輕觸和針刺，如下:
[0126]O -無(wú)感覺(jué)
[0127]1-受傷或感覺(jué)過(guò)敏
[0128]2 -完整
[0129]如果患者無(wú)法區(qū)分針尖和鈍端的區(qū)別，則給出零分。從而，在此提供的治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)應(yīng)于一種或多種的 C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、Tl、T2、T3、T4、T5、T6、T7、T8、T9、T10、Til、T12、L1、L2、L3、L4、L5、S1、S2、S3、S4和S5的感覺(jué)評(píng)分增加I分或2分的量。
[0130]在一些實(shí)施方式中，根據(jù)監(jiān)控患者日常生活功能對(duì)所述SCI —種或多種癥狀的改善或發(fā)展減輕進(jìn)行檢測(cè)。在此提供的SCI治療方法的一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAO是足以影響患者日常生活活動(dòng)力的功能改善的量。在一些實(shí)施方式中，使用功能獨(dú)立性評(píng)定(FM)評(píng)價(jià)患者的功能改善。FIM專(zhuān)注于六個(gè)領(lǐng)域的功能:自我照顧、括約肌控制、移動(dòng)性、行走、交流和社會(huì)認(rèn)知。在每個(gè)領(lǐng)域內(nèi)衡量?jī)煞N或更多具體的活動(dòng)/項(xiàng)目，共18個(gè)項(xiàng)目。例如，自我照顧領(lǐng)域包含六個(gè)活動(dòng)項(xiàng)目(進(jìn)食、梳洗、沐浴、穿上衣、穿下衣和如廁)按照功能的獨(dú)立性對(duì)18項(xiàng)目各自評(píng)分，使用7分的等級(jí):
[0131]獨(dú)立(不需他人幫 助)
[0132]7=完全獨(dú)立:活動(dòng)通常能完全地完成，不需修改、輔助設(shè)備或用品，并在合理的時(shí)間內(nèi)完成
[0133]6=有條件的獨(dú)立:活動(dòng)需要輔助設(shè)備和/或比正常長(zhǎng)的時(shí)間和/或沒(méi)有安全地進(jìn)行
[0134]依賴(lài)(需要他人監(jiān)護(hù)或肢體協(xié)助)
[0135]5=監(jiān)護(hù)或布置(setup):不需要肢體協(xié)助，但是需要提示、勸告或布置。
[0136]4=最少接觸的幫助:患者所需的幫助只限于接觸，自己能付出75%或以上活動(dòng)需要的努力。
[0137]3=中度幫助:患者所需的幫助只限于接觸，自己能付出50±75%活動(dòng)需要的努力。
[0138]2=最大幫助:患者付出25±50%活動(dòng)需要的努力。
[0139]1=完全幫助:患者付出0±25%活動(dòng)需要的努力。
[0140]從而，根據(jù)FM的總分(全部項(xiàng)目之和)能夠估計(jì)出殘疾安全問(wèn)題的成本以及依賴(lài)他人和技術(shù)設(shè)備的成本。領(lǐng)域分值和項(xiàng)目分值分布能精確指明受到SCI影響而導(dǎo)致的最大的日常生活的具體問(wèn)題。在此提供的SCI治療方法的一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是根據(jù)FM分級(jí)足以導(dǎo)致患者功能提高1、2、3、4、5或6分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由于SCI的原因需要完全幫助的主體只需要中度幫助、只需要最少接觸的幫助、只需要監(jiān)護(hù)或布置，或能夠有條件的獨(dú)立或完全獨(dú)立的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由于SCI的原因需要中度幫助的主體只需要最少接觸的幫助、只需要監(jiān)護(hù)或布置，或能夠有條件的獨(dú)立或完全獨(dú)立的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由于SCI的原因需要最少接觸的幫助的主體只需要監(jiān)護(hù)或布置，或能夠有條件的獨(dú)立或完全獨(dú)立的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由于SCI的原因需要監(jiān)護(hù)或布置的主體能夠有條件的獨(dú)立或完全獨(dú)立的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以使得由于SCI的原因只能有條件獨(dú)立的主體能夠完全獨(dú)立的量。
[0141]患有或正在經(jīng)歷SCI癥狀的個(gè)體可以采用多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞以及可選的一種或多種治療劑在損傷過(guò)程的任意時(shí)刻進(jìn)行治療。例如，個(gè)體可以在損傷之后立即治療，或在損傷之后的 1、2、3、4、5、6 天內(nèi)，或在損傷之后的 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、13、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50 天或更多天內(nèi)，或在損傷之后的 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多年內(nèi)進(jìn)行治療。個(gè)體可以在損傷的臨床過(guò)程中治療一次或多次。在治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在SCI —種或多種癥狀發(fā)展的21天內(nèi)給予所述個(gè)體。在治療方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在SCI —種或多種癥狀發(fā)展的14天內(nèi)給予所述個(gè)體。在治療方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在SCI —種或多種癥狀發(fā)展的7天內(nèi)給予所述個(gè)體。在治療方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在SCI —種或多種癥狀發(fā)展的48小時(shí)內(nèi)給予所述個(gè)體。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在SCI —種或多種癥狀發(fā)展的24小時(shí)內(nèi)給予所述個(gè)體。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在SCI —種或多種癥狀發(fā)展的12小時(shí)內(nèi)給予所述個(gè)體。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在SCI —種或多種癥狀發(fā)展的3小時(shí)內(nèi)給予所述個(gè)體。
[0142]在本發(fā)明某些實(shí)施方式中，個(gè)體是動(dòng)物，優(yōu)選的哺乳動(dòng)物，更加優(yōu)選的非人靈長(zhǎng)類(lèi)。在某些實(shí)施方式中，個(gè)體是人患者。個(gè)體可以是男性或女性。在某些實(shí)施方式中，主體是非人動(dòng)物，例如，舉例而言，牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔、大鼠或小鼠。
[0143]用于治療SCI的胎盤(pán)干細(xì)胞可以是任意在此公開(kāi)的胎盤(pán)干細(xì)胞(參見(jiàn)第5.5節(jié))。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞表達(dá)⑶200且不表達(dá)HLA-G ;表達(dá)⑶73、⑶105和CD200 ;表達(dá)CD200和0CT-4 ; 表達(dá)CD73和CD105且不表達(dá)HLA-G ;表達(dá)CD73和CD105且當(dāng)胎盤(pán)干細(xì)胞群在允許胚胎樣小體形成的條件下培養(yǎng)時(shí)有利于在所述胎盤(pán)干細(xì)胞群中形成一種或多種胚胎樣小體；或表達(dá)0CT-4和(c)當(dāng)胎盤(pán)干細(xì)胞群在允許胚胎樣小體形成的條件下培養(yǎng)時(shí)有利于在所述胎盤(pán)干細(xì)胞群中形成一種或多種胚胎樣小體；或前述的任意組合。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞是⑶10+、⑶105+、⑶200+、⑶34_胎盤(pán)干細(xì)胞。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞是CD117—。
[0144]在一個(gè)實(shí)施方式中，對(duì)個(gè)體給予約3億劑量的胎盤(pán)干細(xì)胞。然而，劑量可以根據(jù)個(gè)體的物理特性(如重量)發(fā)生變化，其可能的劑量為100萬(wàn)-100億每劑，優(yōu)選的1000萬(wàn)-10億每劑，或I億-5億胎盤(pán)干細(xì)胞每劑。在一些實(shí)施方式中，給藥方式可以是任何醫(yī)學(xué)上可接受的活細(xì)胞給藥方式，例如，靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、心室內(nèi)、胸骨內(nèi)、顱內(nèi)、肌肉內(nèi)、滑膜內(nèi)、眼內(nèi)、玻璃體內(nèi)(例如，在存在眼部病變的位置)、大腦內(nèi)、腦室內(nèi)(例如，在存在神經(jīng)或腦部病變的位置)、囊內(nèi)、骨內(nèi)輸液、膀胱內(nèi)、透皮、腦池內(nèi)、硬腦膜外、或皮下給藥。在具體的實(shí)施方式中，給藥是通過(guò)快速濃注或直接輸液至SCI位置，例如，通過(guò)腰椎穿刺。
[0145]在一個(gè)實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞來(lái)自細(xì)胞庫(kù)，例如，胎盤(pán)干細(xì)胞庫(kù)。在一個(gè)實(shí)施方式中，一劑胎盤(pán)干細(xì)胞包含于一個(gè)血袋或類(lèi)似的袋子，其適合快速濃注或?qū)Ч芙o藥。[0146]胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基可以單劑量給藥，也可以多劑量給藥。如果胎盤(pán)干細(xì)胞多劑量給藥，那么該劑量可以是為緩解一種或多種急性SCI癥狀而設(shè)計(jì)的治療方案的一部分，或可以是為減輕SCI嚴(yán)重程度而設(shè)計(jì)的長(zhǎng)期治療方案的一部分。[0147]在此提供的用于治療SCI的方法進(jìn)一步包括通過(guò)給予治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞并聯(lián)用SCI療程中的一種或多種療法或處理治療SCI。該一種或多種額外的療法可以在胎盤(pán)干細(xì)胞的給藥前、同時(shí)或之后。在一些實(shí)施方式中，該一種或多種額外的療法包括應(yīng)用治療性脊椎牽引。治療性脊椎牽引使用手動(dòng)或機(jī)械產(chǎn)生的力來(lái)拉伸和運(yùn)動(dòng)脊椎，其基于沿著脊柱縱向軸施加作用力(通常為重力)來(lái)進(jìn)行。如果頸部或頸段骨折，牽引可以拉直脊柱并使其減壓。
[0148]在其它實(shí)施方式中，該一種或多種額外的療法包括手術(shù)固定脊柱，例如，通過(guò)插入棒和螺釘來(lái)適當(dāng)?shù)貙?duì)齊脊柱或連接臨近椎骨以強(qiáng)化椎骨、促進(jìn)骨再生并減少未來(lái)進(jìn)一步的SCI發(fā)生的可能性。在其它實(shí)施方式中，該一種或多種額外的療法包括修復(fù)術(shù)(例如，重復(fù)隨意運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，力量訓(xùn)練等等)，其能夠促進(jìn)新的局部CNS連接的形成。在其它實(shí)施方式中，該一種或多種額外的療法包括對(duì)特定神經(jīng)或肌肉進(jìn)行功能電刺激(FES)，例如，對(duì)膈神經(jīng)FES以幫助呼吸；對(duì)骶骨根FES以促進(jìn)膀胱和腸功能；對(duì)四肢肌肉FES以改善臂或手部功能以及站立或行走。
[0149]在此還提供了用于治療患有或正在經(jīng)歷SCI癥狀的個(gè)體的方法，包括對(duì)個(gè)體給予多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞，其足以導(dǎo)致所述SCI的一種或多種癥狀、病癥或綜合癥產(chǎn)生可檢測(cè)的改善，或減輕其一種或多種癥狀、病癥或綜合癥的發(fā)展；以及一種或多種治療劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，治療劑為皮質(zhì)類(lèi)固醇。在其它實(shí)施方式中，治療劑為抗凝劑，例如肝素。在其它實(shí)施方式中，治療劑為神經(jīng)保護(hù)劑。在一些實(shí)施方式中神經(jīng)保護(hù)劑是甲潑尼龍琥珀酸鈉(MPSS)、GM-1 (Sygen)、加環(huán)利定(GK-1l)、促甲狀腺激素釋放激素、單四環(huán)素(米諾環(huán)素)、鋰或紅細(xì)胞生成素(EPO)。
[0150]在其它實(shí)施方式中，治療劑是肌苷、咯利普蘭、AT1-355 (NOGO)、軟骨素酶、氨吡啶(4-氨基吡啶)、加巴噴丁、或Rho拮抗劑(例如，Cethrin? )。在另一個(gè)實(shí)施方式中，治療劑是免疫調(diào)節(jié)或免疫抑制試劑，例如，環(huán)孢菌素A、FTY506(他克莫司)或FTY720。在其它實(shí)施方式中，治療劑是與胎盤(pán)干細(xì)胞共同給藥的第二細(xì)胞群。在一些實(shí)施方式中，第二細(xì)胞群是自體巨噬細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、鼻嗅鞘細(xì)胞、胚胎嗅皮質(zhì)細(xì)胞、或許旺細(xì)胞的群體。
[0151]5.1.2外傷性腦損傷(TBI)的治療
[0152]在此還提供了治療患有或正在經(jīng)歷TBI癥狀的個(gè)體的方法，包括對(duì)個(gè)體給予治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基，其中治療有效量是足以對(duì)所述TBI的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善或足以減輕其發(fā)展的量。在此使用的“一種或多種癥狀”包括客觀檢測(cè)參數(shù)，例如炎癥程度、免疫應(yīng)答、與治療過(guò)程有關(guān)的損傷部位內(nèi)部的基因表達(dá)、損傷部位瘢痕的質(zhì)量和程度、患者運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)功能改進(jìn)等，以及主觀檢測(cè)參數(shù)，例如患者的健康、患者對(duì)運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)和認(rèn)知功能的改進(jìn)、TB I相關(guān)的疼痛或不適減輕的感覺(jué),等等。
[0153]TBI是一種由外部機(jī)械力作用于頭蓋骨和顱內(nèi)容物的非退化性、非先天性腦損傷，可能導(dǎo)致暫時(shí)或永久性的認(rèn)知、身體和心理社會(huì)功能損傷以及相關(guān)的意識(shí)減少或變態(tài)。TBI可能臨床表現(xiàn)為從腦震蕩到昏迷以及死亡。
[0154]在TBI治療方法的一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)初級(jí)TBI (即，外傷瞬間發(fā)生的TBI)的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量。在一些實(shí)施方式中，初級(jí)TBI是局部損傷，例如，頭蓋骨骨折、撕裂傷、挫傷或貫通傷。在一些實(shí)施方式中，初級(jí)TBI是彌漫性的，例如，彌漫性軸索損傷。
[0155]在TBI治療方法的一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)由初級(jí)TBI造成的次級(jí)損傷(其在外傷之后立即發(fā)生，并產(chǎn)生可能持續(xù)一段時(shí)間的影響)的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善的量。TBI的次級(jí)類(lèi)型可歸因于來(lái)自初級(jí)損傷效果的進(jìn)一步細(xì)胞傷害。在大腦的初次外傷后，次級(jí)損傷可能發(fā)展幾小時(shí)或幾天。
[0156]在此提供的用于TBI治療的方法還包括對(duì)大腦特定區(qū)域TBI損傷的治療。在一些實(shí)施方式中，在此提供的TBI治療方法可用于治療對(duì)大腦額葉(位于前額)、頂葉(靠近腦后頂部)、枕葉(位于最后、在頭的背部)、顳葉(位于腦側(cè)耳上部位)、腦干(位于腦內(nèi)深處)和小腦(位于顱底)的損傷。
[0157]在此提供的TBI治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)大腦額葉損傷的一種或多種癥狀產(chǎn)生改善的量，包括但不限于，身體各部位簡(jiǎn)單運(yùn)動(dòng)的損失(麻痹)、無(wú)法計(jì)劃完成多步驟任務(wù)所需的一系列復(fù)雜動(dòng)作(如煮咖啡(定序))、與他人互動(dòng)中的自發(fā)性損失、思想失去彈性、堅(jiān)持一個(gè)單一的想法(持續(xù)言語(yǔ))、無(wú)法專(zhuān)注于任務(wù)(注意力)、情緒變化(情緒不穩(wěn)定)、社會(huì)行為變化、人格變化、難以解決問(wèn)題、或不能表達(dá)語(yǔ)言(布洛卡失語(yǔ)癥)。
[0158]在此提供的TBI治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)頂葉損傷的一種或多種癥狀產(chǎn)生改善的量，包括但不限于，一次無(wú)法專(zhuān)注于多個(gè)對(duì)象、無(wú)法命名對(duì)象(命名障礙)、無(wú)法確定用于寫(xiě)作的詞語(yǔ)(失寫(xiě)癥)、閱讀問(wèn)題(失讀癥)、難以描繪對(duì)象、難以區(qū)分左右、難以進(jìn)行數(shù)學(xué)計(jì)算(計(jì)算障礙)、導(dǎo)致自我照顧困難的缺乏對(duì)某些身體部位和/或周?chē)臻g的認(rèn)識(shí)(失用癥)、視覺(jué)注意力無(wú)法集中、或眼睛和手協(xié)調(diào)困難。
[0159]在此提供的TBI治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)枕葉損傷的一種或多種癥狀產(chǎn)生改善的量，包括但不限于，視力缺陷(視野削減)、環(huán)境中定位對(duì)象困難、難以識(shí)別顏色(顏色失認(rèn))、產(chǎn)生幻覺(jué)、視覺(jué)錯(cuò)誤(不準(zhǔn)確地看到物體)、詞盲(無(wú)法識(shí)別單詞)、難以認(rèn)識(shí)描繪的對(duì)象、無(wú)法識(shí)別對(duì)象的運(yùn)動(dòng)(運(yùn)動(dòng)失認(rèn)癥)、或讀寫(xiě)困難。
[0160]在此提供的TBI治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)顳葉損傷的一種或多種癥狀產(chǎn)生改善的量，包括但不限于，難以認(rèn)識(shí)面孔(面容失認(rèn)癥)、難以理解所說(shuō)的話(huà)(韋尼克失語(yǔ)癥)、主體看到和聽(tīng)到內(nèi)容的選擇性注意干擾、鑒定和語(yǔ)言表達(dá)對(duì)象困難、短期記憶喪失、長(zhǎng)期記憶干擾、對(duì)性行為的興趣增加和減少、無(wú)力分類(lèi)對(duì)象(分類(lèi))、持久性說(shuō)話(huà)(右葉損傷指標(biāo))、或增加的攻擊行為。
[0161]在此提供的TBI治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)腦干損傷的一種或多種癥狀產(chǎn)生改善的量，包括但不限于，呼吸肺活量下降(對(duì)講話(huà)重要)、吞咽食物和水困難(吞咽困難)、難以組織/感知環(huán)境、平衡和運(yùn)動(dòng)問(wèn)題、頭暈和惡心(眩暈)、或睡眠困難(失眠、睡眠呼吸暫停)。
[0162]在此提供的TBI治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致對(duì)顱底損傷的一種或多種癥狀產(chǎn)生改善的量，包括但不限于，喪失協(xié)調(diào)精細(xì)動(dòng)作的能力、喪失行走能力、無(wú)法伸手和抓住對(duì)象、震顫、頭暈(眩暈)、口齒不清(斷續(xù)言語(yǔ))、或無(wú)法做出快速運(yùn)動(dòng)。
[0163]在此提供的用于TBI治療的方法還包括對(duì)輕度至重度TBI損傷的治療。如果意識(shí)喪失和/或混亂和定向障礙短于30分鐘，則TBI可以歸類(lèi)為輕度。從而，在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了對(duì)患有TBI的個(gè)體給藥有效劑量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDACS)，其中所述有效劑量是例如足以使得輕度TBI的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善、或降低其嚴(yán)重程度或減輕其發(fā)展的胎盤(pán)細(xì)胞的量，包括但不限于，認(rèn)知問(wèn)題例如頭痛、記憶力問(wèn)題、注意力缺陷、情緒波動(dòng)和挫折、疲勞、視力障礙、記憶力減退、注意力/專(zhuān)注度不佳、睡眠障礙、頭暈/失去平衡、煩躁不安、情緒障礙、感覺(jué)抑郁、抽搐、惡心、嗅覺(jué)和對(duì)聲光的敏感度損失、情緒變化、迷失或糊涂、或思維緩慢。
[0164]在具體的實(shí)施方式中，有效劑量是足以使得腦震蕩的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善、或降低其嚴(yán)重程度或減輕其發(fā)展的胎盤(pán)細(xì)胞的量，包括但不限于，混亂或感覺(jué)茫然、動(dòng)作笨拙、言語(yǔ)不清、惡心或嘔吐、頭痛、平衡問(wèn)題或頭暈、視力模糊、光敏感、噪音敏感、呆滯、耳鳴、行為或性格改變、精力難以集中、記憶喪失。在一些實(shí)施方式中，腦震蕩是I級(jí)(輕度)腦震蕩，其特征為意識(shí)不喪失和腦震蕩癥狀持續(xù)少于幾分鐘。在一些實(shí)施方式中，腦震蕩是2級(jí)(中度)腦震蕩，其特征為意識(shí)不喪失和腦震蕩癥狀持續(xù)長(zhǎng)于15分鐘。在一些實(shí)施方式中，腦震蕩是3級(jí)(重度)腦震蕩，其特征為至少幾秒的意識(shí)喪失。
[0165]在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了對(duì)患有TBI的個(gè)體給予有效劑量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)，其中所述有效劑量是足以對(duì)所述中度至重度TBI的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善、或降低其嚴(yán)重程度或足以減輕其發(fā)展的量，包括但不限于，認(rèn)知缺陷，例如，注意力、專(zhuān)注力、注意力不集中、記憶、加工速度、持續(xù)言語(yǔ)、沖動(dòng)、語(yǔ)言處理、講話(huà)和語(yǔ)言、不理解口語(yǔ)單詞(接受性失語(yǔ))、說(shuō)話(huà)和被理解困難(表現(xiàn)性失語(yǔ))、口齒不清、說(shuō)話(huà)非常快或非常慢、閱讀問(wèn)題、書(shū)寫(xiě)問(wèn)題等方面的困難；感覺(jué)缺陷，例如觸碰、溫度、移動(dòng)、四肢位置或細(xì)微區(qū)別的解釋困難；知覺(jué)缺陷，例如難以將感覺(jué)印象整合或模式化為心理學(xué)有意義的數(shù)據(jù)；視覺(jué)缺陷，包括部分或完全喪失視 覺(jué)、眼部肌肉衰弱和雙視(復(fù)視)、視力模糊、判斷距離困難、眼球不自主運(yùn)動(dòng)(眼球震顫)、不耐光(畏光)；聽(tīng)力缺陷，包括聽(tīng)力下降或損失、耳鳴、對(duì)聲音敏感性增加；嗅覺(jué)障礙，包括嗅覺(jué)損失或減退(嗅覺(jué)缺失癥)；味覺(jué)損失或減退；癲癇，包括癲癇相關(guān)的抽搐，該癲癇可以為幾種類(lèi)型，且可以涉及對(duì)意識(shí)、感覺(jué)知覺(jué)或運(yùn)動(dòng)的破壞；身體變化，包括身體癱瘓/痙攣；慢性疼痛、腸和/或膀胱失去控制、睡眠障礙、耐久力損失、食欲改變、體溫失調(diào)、月經(jīng)困難；社會(huì)情感困難，包括依賴(lài)行為、情感能力喪失、缺乏動(dòng)力、煩躁不安、易怒、抑郁、去抑制、或否認(rèn)/缺乏認(rèn)識(shí)。
[0166]在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了對(duì)患有TBI的個(gè)體給予有效劑量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)，其中所述有效劑量是足以對(duì)上述TBI的一種或多種癥狀產(chǎn)生可檢測(cè)的改善、或降低其嚴(yán)重程度或足以減輕其發(fā)展的量。在某些實(shí)施方式中，用于檢測(cè)對(duì)TBI的一種或多種癥狀、病癥或綜合癥是否產(chǎn)生改善、減輕嚴(yán)重程度或減輕其發(fā)展的特定技術(shù)對(duì)于在此提供的TBI治療方法而言并不重要。在某些實(shí)施方式中，根據(jù)本領(lǐng)域從業(yè)者的判斷對(duì)針對(duì)TBI 一種或多種癥狀、病癥或綜合癥發(fā)展的改善和減緩做出評(píng)價(jià)。在某些實(shí)施方式中，根據(jù)本領(lǐng)域從業(yè)者的判斷以及主體的主觀經(jīng)驗(yàn)對(duì)針對(duì)TBI —種或多種癥狀、病癥或綜合癥發(fā)展的改善和減緩做出評(píng)價(jià)。[0167]在一些實(shí)施方式中，對(duì)TBI —種或多種癥狀、病癥或綜合癥的改善和其發(fā)展的減緩是根據(jù)格拉斯哥昏迷評(píng)分(GCS)進(jìn)行測(cè)定的。GCS定義了損傷48小時(shí)內(nèi)TBI的嚴(yán)重程度，如下:
[0168]睜眼反應(yīng)
[0169]自然睜眼=4
[0170]呼喚會(huì)睜眼=3
[0171]有刺激或痛楚會(huì)睜眼=2
[0172]無(wú)應(yīng)答=1
[0173]運(yùn)動(dòng)應(yīng)答
[0174]依指令動(dòng)作=6
[0175]施以刺激時(shí)，可定位出疼痛位置=5
[0176]對(duì)疼痛刺激有反應(yīng)，肢體會(huì)回縮=4
[0177]對(duì)疼痛刺激有反應(yīng)，肢體彎曲呈“去皮質(zhì)強(qiáng)直”姿勢(shì)=3
[0178]對(duì)疼痛刺激有反應(yīng)，肢體伸直呈“去腦強(qiáng)直”姿勢(shì)=2
[0179]無(wú)應(yīng)答=1
[0180]語(yǔ)言應(yīng)答
[0181]能確定人物、地點(diǎn)和日期=5
[0182]能交流但無(wú)判斷力=4
[0183]說(shuō)話(huà)不適當(dāng)=3
[0184]發(fā)出不可理解的聲音=2
[0185]無(wú)應(yīng)答=1
[0186]TBI嚴(yán)重程度根據(jù)GCS分值(48h內(nèi))如下:
[0187]植物人TBI=少于3 (其特征為睡眠覺(jué)醒周期；覺(jué)醒但與環(huán)境無(wú)交互；對(duì)疼痛無(wú)局部應(yīng)答)
[0188]重度TBI=3_8(其特征為昏迷:無(wú)意識(shí)狀態(tài)；無(wú)意義應(yīng)答，無(wú)自發(fā)性活動(dòng))
[0189]中度TBI=9_12 (其特征為意識(shí)喪失多于30分鐘；可能或不能解決的身體或認(rèn)知障礙；患者可以從康復(fù)訓(xùn)練受益)
[0190]輕度TBI=13_15(其特征為精神狀態(tài)的短暫變化(混亂、迷失方向或喪失記憶)或意識(shí)喪失少于30分鐘)`[0191]從而，在此提供的TBI治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是足以導(dǎo)致患者的GCS分值提高1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或更高分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是根據(jù)GCS足以導(dǎo)致睜眼反應(yīng)的分值提高1、2或3分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是根據(jù)GCS足以導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)應(yīng)答的分值提高1、2、3、4或5分的量。在一些實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是根據(jù)GCS足以導(dǎo)致語(yǔ)言應(yīng)答的分值提高1、2、3或4分的量。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)是足以將外傷性損傷的嚴(yán)重程度從植物人TBI水平降低到重度、中度或輕度TBI水平的量。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)是足以將外傷性損傷的嚴(yán)重程度從重度TBI水平降低到中度或輕度TBI水平的量。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)是足以將外傷性損傷的嚴(yán)重程度從中度TBI水平降低到輕度TBI水平的量。
[0192]在一些實(shí)施方式中，對(duì)TBI —種或多種癥狀的改善和其發(fā)展的減緩是根據(jù)Ranchos Los Amigos評(píng)分進(jìn)行測(cè)定的。該Ranchos Los Amigos評(píng)分根據(jù)以下分級(jí)測(cè)量了意識(shí)、認(rèn)識(shí)、行為和與環(huán)境互動(dòng)的水平:
[0193]水平1:無(wú)應(yīng)答
[0194]水平I1:一般應(yīng)答
[0195]水平II 1:局部應(yīng)答
[0196]水平IV:混亂-躁動(dòng)
[0197]水平V:混亂-不適當(dāng)
[0198]水平V1:混亂-適當(dāng)
[0199]水平VI1:自動(dòng)-適當(dāng)
[0200]水平VII1:有目的-適當(dāng)
[0201]從而，在此提供的TBI治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)的治療有效量是根據(jù)Rancho Los Amigos評(píng)分足以導(dǎo)致患者的評(píng)分增加1、2、3、4、5、6或7分的量。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)是足以將主體的意識(shí)、認(rèn)識(shí)、行為和與環(huán)境互動(dòng)的水平從無(wú)應(yīng)答提高至一般應(yīng)答、局部應(yīng)答、混亂躁動(dòng)、混亂不適當(dāng)應(yīng)答、混亂適當(dāng)應(yīng)答、自動(dòng)適當(dāng)應(yīng)答或有目的適當(dāng)應(yīng)答的量。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如， PDAC)是足以將主體的意識(shí)、認(rèn)識(shí)、行為和與環(huán)境互動(dòng)的水平從一般應(yīng)答提高至局部應(yīng)答、混亂躁動(dòng)、混亂不適當(dāng)應(yīng)答、混亂適當(dāng)應(yīng)答、自動(dòng)適當(dāng)應(yīng)答或有目的適當(dāng)應(yīng)答的量。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)是足以將主體的意識(shí)、認(rèn)識(shí)、行為和與環(huán)境互動(dòng)的水平從局部應(yīng)答提高至混亂躁動(dòng)、混亂不適當(dāng)應(yīng)答、混亂適當(dāng)應(yīng)答、自動(dòng)適當(dāng)應(yīng)答或有目的適當(dāng)應(yīng)答的量。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)是足以將主體的意識(shí)、認(rèn)識(shí)、行為和與環(huán)境互動(dòng)的水平從混亂躁動(dòng)提高至混亂不適當(dāng)應(yīng)答、混亂適當(dāng)應(yīng)答、自動(dòng)適當(dāng)應(yīng)答或有目的適當(dāng)應(yīng)答的量。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)是足以將主體的意識(shí)、認(rèn)識(shí)、行為和與環(huán)境互動(dòng)的水平從混亂不適當(dāng)應(yīng)答提高至混亂適當(dāng)應(yīng)答、自動(dòng)適當(dāng)應(yīng)答或有目的適當(dāng)應(yīng)答的量。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)是足以將主體的意識(shí)、認(rèn)識(shí)、行為和與環(huán)境互動(dòng)的水平從混亂適當(dāng)應(yīng)答提高至自動(dòng)適當(dāng)應(yīng)答或有目的適當(dāng)應(yīng)答的量。在一些實(shí)施方式中，治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)是足以將主體的意識(shí)、認(rèn)識(shí)、行為和與環(huán)境互動(dòng)的水平從自動(dòng)適當(dāng)應(yīng)答提高至有目的適當(dāng)應(yīng)答的量。
[0202]患有或正在經(jīng)歷TBI癥狀的個(gè)體可以在損傷過(guò)程的任意時(shí)刻采用多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞以及可選的一種或多種治療劑進(jìn)行治療。例如，個(gè)體可以在損傷之后立即治療，或在損傷之后的 1、2、3、4、5、6 天內(nèi)，或在損傷之后的 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30，35、40、45、50天或更多天內(nèi)進(jìn)行治療。個(gè)體可以在損傷的臨床過(guò)程中治療一次或多次。在治療方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在TBI的一種或多種癥狀發(fā)展的21天內(nèi)給予所述個(gè)體。在治療方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在TBI的一種或多種癥狀發(fā)展的14天內(nèi)給予所述個(gè)體。在治療方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在TBI的一種或多種癥狀發(fā)展的7天內(nèi)給予所述個(gè)體。在治療方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在TBI的一種或多種癥狀發(fā)展的48小時(shí)內(nèi)給予所述個(gè)體。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在TBI的一種或多種癥狀發(fā)展的24小時(shí)內(nèi)給予所述個(gè)體。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在TBI的一種或多種癥狀發(fā)展的12小時(shí)內(nèi)給予所述個(gè)體。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述胎盤(pán)干細(xì)胞在TBI的一種或多種癥狀發(fā)展的3小時(shí)內(nèi)給予所述個(gè)體。
[0203]在本發(fā)明某些實(shí)施方式中，個(gè)體是動(dòng)物，優(yōu)選的哺乳動(dòng)物，更加優(yōu)選的非人靈長(zhǎng)類(lèi)。在某些實(shí)施方式中，個(gè)體是人患者。個(gè)體可以是男性或女性。在某些實(shí)施方式中，主體是非人動(dòng)物，例如，舉例而言，牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔、大鼠或小鼠。
[0204]可用于治療TBI的胎盤(pán)干細(xì)胞可以是在此公開(kāi)的任意胎盤(pán)干細(xì)胞(參見(jiàn)第5.5節(jié))。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞表達(dá)⑶200且不表達(dá)HLA-G ;表達(dá)⑶73、⑶105和⑶200 ;表達(dá)⑶200和0CT-4 ;表達(dá)⑶73和⑶105且不表達(dá)HLA-G ;表達(dá)⑶73和⑶105且當(dāng)胎盤(pán)干細(xì)胞群在允許胚胎樣小體形成的條件下培養(yǎng)時(shí)有利于在所述胎盤(pán)干細(xì)胞群中形成一種或多種胚胎樣小體；或表達(dá)0CT-4和(c)當(dāng)胎盤(pán)干細(xì)胞群在允許胚胎樣小體形成的條件下培養(yǎng)時(shí)有利于在所述胎盤(pán)干細(xì)胞群中形成一種或多種胚胎樣小體；或前述的任意組合。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞是⑶10+、⑶105+、⑶200+、⑶34_胎盤(pán)干細(xì)胞。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞是CDl 17 _。
[0205]在一個(gè)實(shí)施方式中，對(duì)個(gè)體給予約2-8億劑量的胎盤(pán)干細(xì)胞。然而，劑量可以根據(jù)個(gè)體的物理特性(如重量)發(fā)生變化，其可能的劑量為100萬(wàn)-100億每劑，優(yōu)選的1000萬(wàn)-10億每劑，或I億-5億胎盤(pán)干細(xì)胞每劑。優(yōu)選通過(guò)靜脈內(nèi)給藥，但是給藥方式可以是任何醫(yī)學(xué)上可接受的活細(xì)胞給藥方式，例如，靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、心室內(nèi)、胸骨內(nèi)、顱內(nèi)、肌肉內(nèi)、滑膜內(nèi)、眼內(nèi)、玻璃體內(nèi)(例如，在存在眼部病變的位置)、大腦內(nèi)、腦室內(nèi)(例如，在存在神經(jīng)或腦部病變的位置)、囊內(nèi)、骨內(nèi)輸液、膀胱內(nèi)、透皮、腦池內(nèi)、硬腦膜外、或皮下給藥。在具體的實(shí)施方式中，給藥是通過(guò)快速濃注或直接輸液至TBI位置，例如，通過(guò)小腦延髓池。
[0206]胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基可以單劑量給藥，也可以多劑量給藥。如果胎盤(pán)干細(xì)胞多劑量給藥，那么該 劑量可以是為緩解一種或多種急性TBI癥狀而設(shè)計(jì)的治療方案的一部分，或可以是為減輕TBI嚴(yán)重程度而設(shè)計(jì)的長(zhǎng)期治療方案的一部分。
[0207]在此提供的用于治療SCI的方法進(jìn)一步包括通過(guò)給予治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞并聯(lián)用TBI療程中的一種或多種療法或處理治療TBI。該一種或多種額外的療法可以在胎盤(pán)干細(xì)胞的給藥前、同時(shí)或之后。在一些實(shí)施方式中，該一種或多種額外的療法包括外科手術(shù)。在一些實(shí)施方式中，可以在顱內(nèi)植入螺釘或ICP(顱內(nèi)壓)監(jiān)控設(shè)備來(lái)監(jiān)控大腦空腔內(nèi)的壓力。在一些實(shí)施方式中，如果頭骨空腔存在出血，其可以手術(shù)移除或排出，且可以在胎盤(pán)干細(xì)胞的給藥前、同時(shí)或之后進(jìn)行血管或組織的手術(shù)修補(bǔ)。在重癥情況下，如果存在嚴(yán)重腫脹和損傷的腦組織，那么可以在胎盤(pán)干細(xì)胞的給藥前、同時(shí)或之后對(duì)其一部分手術(shù)去除，來(lái)為活的腦組織提供空間。在一些實(shí)施方式中，該一種或多種額外的療法包括應(yīng)用機(jī)械通風(fēng)，其支持呼吸并幫助頭部穩(wěn)定降壓。
[0208]在此還提供了用于治療患有或正在經(jīng)歷TBI癥狀的個(gè)體的方法，包括對(duì)個(gè)體給予足以導(dǎo)致所述TBI —種或多種癥狀可檢測(cè)的改善、或足以減輕其發(fā)展多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞，和一種或多種治療劑。例如，胎盤(pán)干細(xì)胞可以與藥物聯(lián)合使用，以使患者鎮(zhèn)靜并使其進(jìn)入藥物引起的昏迷，從而使擾動(dòng)和二次損傷最小化。在一些實(shí)施方式中，如果個(gè)體患有癲癇，可以在治療早期和之后使用防癲癇藥。在一些實(shí)施方式中，在患者恢復(fù)功能時(shí)可以使用控制痙攣的藥物。另外，可以使用藥物改善注意力和集中度(例如，金剛烷胺和哌醋甲酯、溴隱亭和抗抑郁藥)，或控制攻擊行為(例如，卡馬西平和阿米替林)。
[0209]5.2胎盤(pán)干細(xì)胞在抑制由CNS損傷導(dǎo)致的或與之有關(guān)的炎性應(yīng)答中的用途
[0210]在另一方面，在此提供了治療患有CNS損傷的個(gè)體的方法，包括抑制由CNS損傷導(dǎo)致的或與之有關(guān)的炎性應(yīng)答。在此提供了通過(guò)將免疫細(xì)胞與多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞進(jìn)行接觸來(lái)調(diào)控(例如抑制)免疫細(xì)胞活性(例如增殖)的方法。
[0211]胎盤(pán)干細(xì)胞介導(dǎo)的免疫調(diào)節(jié)(例如，免疫抑制)能夠，例如，有利于CNS損傷，其中炎癥在CNS損傷早期和慢性期之一或之二中起作用。因此，在各實(shí)施方式中，在此提供了一種抑制由CNS損傷(例如，SCI或TBI)導(dǎo)致的或與之有關(guān)的免疫應(yīng)答的方法。
[0212]在一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種抑制由CNS損傷(例如，SCI或TBI)導(dǎo)致的或與之有關(guān)的免疫應(yīng)答的方法，包括用多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞接觸多個(gè)免疫細(xì)胞，接觸時(shí)間足以使所述胎盤(pán)干細(xì)胞可檢測(cè)地抑制免疫應(yīng)答，其中所述胎盤(pán)干細(xì)胞在MLR分析或回歸分析中可檢測(cè)地抑制T細(xì)胞增殖。[0213]胎盤(pán)干細(xì)胞是，例如，在此其它位置描述的胎盤(pán)干細(xì)胞(參見(jiàn)第5.5節(jié))。用于免疫抑制的胎盤(pán)干細(xì)胞可來(lái)自于或獲得自單一胎盤(pán)或多個(gè)胎盤(pán)。用于免疫抑制的胎盤(pán)干細(xì)胞還可來(lái)自單一物種，例如接受者的物種或其功能被減弱或抑制的免疫細(xì)胞的物種，或者可來(lái)自多個(gè)物種。
[0214]在本方法的上下文中，“免疫細(xì)胞”指免疫系統(tǒng)的任何細(xì)胞，特別是T細(xì)胞和自然殺傷(NK)細(xì)胞。從而，在本方法各實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞接觸多個(gè)免疫細(xì)胞，其中多個(gè)免疫細(xì)胞為，或含有，多個(gè)T細(xì)胞(例如，多個(gè)CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞和/或CD8+T細(xì)胞)和/或自然殺傷細(xì)胞。在本方法的上下文中，“免疫應(yīng)答”可以是免疫細(xì)胞對(duì)通常由免疫細(xì)胞感知的刺激的任意應(yīng)答，例如，對(duì)抗原存在的應(yīng)答。在各實(shí)施方式中，免疫應(yīng)答可以是T細(xì)胞(例如，CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞和/或CD8+T細(xì)胞)響應(yīng)CNS損傷(如SCI或TBI)的增殖。免疫應(yīng)答也可是自然殺傷(NK)細(xì)胞的任意活性，或樹(shù)突細(xì)胞的成熟化等等。免疫應(yīng)答也可是一類(lèi)或多類(lèi)免疫細(xì)胞活性的局部、組織或器官特異性的，或系統(tǒng)性的效果，例如，免疫應(yīng)答可以是炎癥和炎癥相關(guān)傷疤組織的形成等等。
[0215]在上下文中的“接觸”包括在一個(gè)容器中(例如，培養(yǎng)皿，燒瓶，小瓶等)或體內(nèi)(例如，在同一個(gè)體中(例如，哺乳動(dòng)物，例如，人))一起加入胎盤(pán)干細(xì)胞和免疫細(xì)胞。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，接觸足夠的時(shí)間和足夠劑量的胎盤(pán)干細(xì)胞和免疫細(xì)胞，使得能夠檢測(cè)到免疫細(xì)胞的免疫功能發(fā)生變化。更加優(yōu)選的，在各實(shí)施方式中，所述接觸與不存在胎盤(pán)干細(xì)胞的免疫功能相比足以抑制至少50%、60%、70%、80%、90%或95%的免疫功能(例如，在抗原應(yīng)答中的T細(xì)胞增殖)。在體內(nèi)環(huán)境中該抑制可以在體外分析中進(jìn)行檢測(cè)(參見(jiàn)下文)；即，在體外分析中的抑制程度可以被外推至在個(gè)體中的抑制程度，用于受試者體內(nèi)特定數(shù)量的胎盤(pán)干細(xì)胞和一些免疫細(xì)胞。
[0216]在某些實(shí)施方式中，在此提供了使用胎盤(pán)干細(xì)胞調(diào)控免疫應(yīng)答或多個(gè)一種或多種類(lèi)型的免疫細(xì)胞活性的體外方法。胎盤(pán)干細(xì)胞與多個(gè)免疫細(xì)胞的接觸可以包括在同一物理空間內(nèi)組合胎盤(pán)干細(xì)胞和免疫細(xì)胞，從而至少一部分的多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞與至少一部分多個(gè)免疫細(xì)胞相互作用；將胎盤(pán)干細(xì)胞和免疫細(xì)胞維持在使用共同培養(yǎng)基的分離的物理空間；或可以包括用來(lái)自一個(gè)或一種胎盤(pán)干細(xì)胞或免疫細(xì)胞培養(yǎng)物的培養(yǎng)基接觸另一種細(xì)胞(例如，從胎盤(pán)干細(xì)胞培養(yǎng)中獲得培養(yǎng)基并將分離的免疫細(xì)胞重懸于該培養(yǎng)基)。在一個(gè)具體的實(shí)施例中，該接觸在MLR分析中進(jìn)行。在另一個(gè)具體的實(shí)施例中，該接觸在回歸分析中進(jìn)行。在另一個(gè)具體的實(shí)施例中，該接觸在小珠T(mén)淋巴細(xì)胞反應(yīng)(BTR)分析中進(jìn)行。
[0217]接觸可以在檢測(cè)特定的多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞在何種程度上是免疫調(diào)節(jié)的，例如，免疫抑制的實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行。這一實(shí)驗(yàn)可以是例如，MLR或回歸分析。MLR和回歸分析的流程是本領(lǐng)域熟知的。參見(jiàn)，例如，Schwarz, “The Mixed Lymphocyte Reaction:An In Vitro Testfor Tolerance, ”J.Exp.Med.127(5): 879-890 (1968) ; Lacerda等人，“Human Epstein-BarrVirus (EBV)-Specific Cytotoxic T Lymphocytes Home Preferentially to and InduceSelective Regressions of Autologous EBV induced B Lymphoproliferations inXenografted C.B_17Scid/Scid Mice,，，J.Exp.Med.183:1215-1228 (1996)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，MLR中多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞接觸多個(gè)免疫細(xì)胞(例如，淋巴細(xì)胞，例如，CD3+、CD4+和/或⑶8+T淋巴細(xì)胞)。
[0218]MLR可用于檢測(cè)多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞的免疫抑制能力。例如，可以在MLR中檢測(cè)多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞，包括組合的CD4+或CD8+T細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞(DC)和胎盤(pán)干細(xì)胞，其比例為約10:1: 2，其中T細(xì)胞用例如分入子細(xì)胞的CFSE的染料染色，且其中允許T細(xì)胞增殖約6天。如果與存在DC但不存在胎盤(pán)干細(xì)胞時(shí)的T細(xì)胞增殖相比，在胎盤(pán)干細(xì)胞存在下6天的T細(xì)胞增殖被可檢測(cè)的減少，那么該多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞是免疫抑制的。在這樣一個(gè)MLR中，胎盤(pán)干細(xì)胞是解凍的或來(lái)自培養(yǎng)。將約20，000胎盤(pán)干細(xì)胞重懸于100 μ I的培養(yǎng)基中(RPMI1640，ImM HEPES緩沖液，抗生素和5%混合人血清)并使其接觸孔底2小時(shí)。⑶4+和/或⑶8+Τ細(xì)胞分離自完整外周血單核細(xì)胞Miltenyi磁珠。細(xì)胞用CFSE染色，每孔加入總量為100,000的T細(xì)胞(單獨(dú)的CD4+T細(xì)胞、單獨(dú)的CD8+T細(xì)胞、或等量的CD4+和CD8+T細(xì)胞)?？字械捏w積達(dá)到200 μ 1，進(jìn)行MLR。
[0219]因此，在一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種抑制免疫應(yīng)答的方法，包括用多個(gè)免疫細(xì)胞接觸多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞，接觸時(shí)間足以使得在MLR分析或回歸分析中所述胎盤(pán)干細(xì)胞可檢測(cè)地抑制T細(xì)胞增殖。在一個(gè)實(shí)施方式中，MLR中使用的所述胎盤(pán)干細(xì)胞代表來(lái)自更大的胎盤(pán)干細(xì)胞群的一個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞樣品或等分部分。
[0220]來(lái)自不同胎盤(pán)或同一胎盤(pán)不同組織的胎盤(pán)干細(xì)胞群可能在其調(diào)控免疫細(xì)胞活性方面各不相同，例如可能具有不同的抑制T細(xì)胞活性或增殖或NK細(xì)胞活性的能力。因此需要在使用前測(cè)定特定的胎盤(pán)干細(xì)胞群的免疫抑制能力。該能力可通過(guò)例如在MLR或回歸分析中測(cè)定胎盤(pán)干細(xì)胞群的一個(gè)樣品來(lái)測(cè)定。在一個(gè)實(shí)施方式中，對(duì)樣品進(jìn)行MLR并在分析中測(cè)定由于胎盤(pán)干細(xì)胞導(dǎo)致的免疫抑制程度。然后可以將該免疫抑制程度歸功于取樣的胎盤(pán)干細(xì)胞群。從而，MLR可被用作一種測(cè)定特定胎盤(pán)干細(xì)胞群抑制免疫功能的絕對(duì)和相對(duì)能力的方法。MLR的參數(shù)可以改變以提供更多的數(shù)據(jù)或最好地測(cè)定胎盤(pán)干細(xì)胞樣品免疫抑制的能力。例如，由于胎盤(pán)干細(xì)胞的免疫抑制大致與分析中存在的胎盤(pán)干細(xì)胞數(shù)量同比增加，因此，在一個(gè)實(shí)施方式中，MLR可以使用兩倍或更多數(shù)量的胎盤(pán)干細(xì)胞，例如，每個(gè)反應(yīng)使用11103、31103、11104和/或31104的胎盤(pán)干細(xì)胞。胎盤(pán)干細(xì)胞相對(duì)于T細(xì)胞的數(shù)量也可以在分析中改變。例如，在分析中胎盤(pán)干細(xì)胞和T細(xì)胞可以任意比例存在，例如約10:1至約1:10、優(yōu)選的約1:5，當(dāng)然也可以使用相對(duì)更大的胎盤(pán)干細(xì)胞或T細(xì)胞數(shù)量。[0221]回歸分析或BTR分析可以按照類(lèi)似方式使用。
[0222]在此提供了使用胎盤(pán)干細(xì)胞調(diào)控免疫應(yīng)答或多個(gè)一種或多種類(lèi)型的免疫細(xì)胞體內(nèi)活性的方法，例如，由CNS損傷(例如，SCI或TBI)導(dǎo)致的或與之有關(guān)的。胎盤(pán)干細(xì)胞和免疫細(xì)胞可以在例如作為多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞接受者的個(gè)體中接觸。如果在個(gè)體中進(jìn)行接觸，在一個(gè)實(shí)施方式中，接觸是在外源性胎盤(pán)干細(xì)胞(即，不來(lái)自個(gè)體的胎盤(pán)干細(xì)胞)和多個(gè)個(gè)體內(nèi)源性的免疫細(xì)胞之間進(jìn)行。在具體的實(shí)施方式中，在個(gè)體中的免疫細(xì)胞是CD3+T細(xì)胞、⑶4+T細(xì)胞、⑶8+T細(xì)胞和/或NK細(xì)胞。
[0223]胎盤(pán)干細(xì)胞可以按照已知或期望的免疫細(xì)胞(例如T細(xì)胞)數(shù)量的比例被給藥至個(gè)體，比例為約10:1至約1:10、優(yōu)選的約1:5。然而，多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞可被給予個(gè)體，其比例為，以非限制性的實(shí)施例，約10，000: 1、約1,000:1、約100: 1、約10: 1、約1: 1、約1:10、約1:100，約1:1,000或約1:10,000。一般，約IxlO5至約IxlO8胎盤(pán)干細(xì)胞每受試者公斤，優(yōu)選的約IxlO6至約IxlO7胎盤(pán)干細(xì)胞每受試者公斤可被給藥來(lái)影響免疫抑制。在各實(shí)施方式中，多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞被給予個(gè)體或主體，包括至少、約、或不多于1x105、3x105、1x106、3x106、1x107、3x107、1x108、3x108、1x109、3x109 胎盤(pán)干細(xì)胞，或更多。
[0224]胎盤(pán)干細(xì)胞也可與一種或多種第二類(lèi)型的干細(xì)胞一起給藥，例如來(lái)自骨髓的間質(zhì)干細(xì)胞。該第二干細(xì)胞可與胎盤(pán)干細(xì)胞一起被給予個(gè)體，其比例為，例如，約1:10至約10:1。
[0225]為了利于使得體內(nèi)的胎盤(pán)干細(xì)胞和免疫細(xì)胞接觸或接近，胎盤(pán)干細(xì)胞可通過(guò)足以將胎盤(pán)干細(xì)胞和免疫細(xì)胞彼此接觸的任意途徑被給藥至個(gè)體。例如，胎盤(pán)干細(xì)胞可通過(guò)下述方式被給藥至個(gè)體，例如，靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、眼內(nèi)、胃腸外、囊內(nèi)，或直接進(jìn)入器官，例如，胰臟。為了體內(nèi)給藥，胎盤(pán)干細(xì)胞可制劑為藥物組合物，如以下第5.9.1.2節(jié)所述。
[0226]免疫抑制的方法可以額外包括一種或多種免疫抑制試劑的加入，特別是在體內(nèi)環(huán)境中。在一個(gè)實(shí)施方式中，在個(gè)體體`內(nèi)多個(gè)胎盤(pán)干細(xì)胞接觸多個(gè)免疫細(xì)胞，并對(duì)個(gè)體給予含有免疫抑制試劑的組合物。免疫抑制試劑是本領(lǐng)域熟知的，包括例如，抗T細(xì)胞受體抗體(單克隆或多克隆，或抗體片段或其衍生物)，抗IL-2受體抗體(例如，巴利昔單抗,(SIMULECT8)或達(dá)珠單抗,(ZENAPAX)?)，抗 T 細(xì)胞受體抗體(例如,Muromonab-a)3)、
硫唑嘌呤、皮質(zhì)類(lèi)固醇、環(huán)孢菌素、他克莫司、麥考酚酯嗎乙、西羅莫司、鈣神經(jīng)素抑制劑等等。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，免疫抑制劑是巨噬細(xì)胞炎性蛋白(MIP)-1a或MIP-1 β中和抗體。優(yōu)選的，抗MIP-1 a或MIP-1 β抗體以足以導(dǎo)致所述個(gè)體MIP-1 a和/或MIP-1 β可檢測(cè)的減少的量被給藥。
[0227]胎盤(pán)干細(xì)胞除了抑制T細(xì)胞增殖外，還對(duì)免疫系統(tǒng)細(xì)胞具有其他抗炎性效果，其可能有利于治療CNS損傷，例如SCI或TBI。例如，當(dāng)胎盤(pán)干細(xì)胞在例如體外或體內(nèi)給予個(gè)體時(shí)，能降低由Thl和/或Thl7T細(xì)胞亞群介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。在另一方面，在此提供了一種抑制促炎性應(yīng)答的方法，例如，Thl應(yīng)答或Thl7應(yīng)答，無(wú)論其是體內(nèi)或體外，其包括用胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，在此描述的胎盤(pán)干細(xì)胞)接觸T細(xì)胞(例如，CD4+T淋巴細(xì)胞或白細(xì)胞)。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述接觸可檢測(cè)地降低Thl細(xì)胞成熟。在本方法的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述接觸可檢測(cè)地降低所述T細(xì)胞或抗原生成細(xì)胞所產(chǎn)生的一種或多種的淋巴毒素 _1 a (LT-1 ct)、白介素 I β (IL-1 β )、IL-12、IL-17、IL-21、IL-23、腫瘤壞死因子-a (TNFa)和/或干擾素Y (IFNy)0在本方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述接觸加強(qiáng)或上調(diào)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)表型，和/或減少樹(shù)突細(xì)胞(DC)和/或巨噬細(xì)胞中促進(jìn)Thl和/或Thl7應(yīng)答的大分子表達(dá)(例如，⑶80、⑶83、⑶86、ICAM-1、HLA-1I)。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述T細(xì)胞還接觸IL-10，例如，不由所述T細(xì)胞產(chǎn)生的外源性IL-10或IL-10，例如，重組IL-10。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種減少產(chǎn)生來(lái)自巨噬細(xì)胞的促炎性細(xì)胞因子的方法，包括用有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞接觸巨噬細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種增加耐受原細(xì)胞數(shù)量、促進(jìn)免疫細(xì)胞耐受原功能和/或上調(diào)(例如，來(lái)自巨噬細(xì)胞的)耐受原細(xì)胞因子的方法，包括用有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞接觸免疫系統(tǒng)細(xì)胞。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，較之未接觸所述胎盤(pán)干細(xì)胞的活化巨噬細(xì)胞而言，所述接觸導(dǎo)致活化巨噬細(xì)胞生產(chǎn)可檢測(cè)的更多的IL-10。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種上調(diào)或增加抗炎性T細(xì)胞數(shù)量的方法，包括用有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞接觸免疫系統(tǒng)細(xì)胞。
[0228]在一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種抑制患有或正在經(jīng)歷CNS損傷癥狀(例如，SCI或TBI)的個(gè)體中Thl應(yīng)答的方法，包括對(duì)個(gè)體給予有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞，其中所述有效量是導(dǎo)致在個(gè)體中的Thl應(yīng)答產(chǎn)生可檢測(cè)的降低的量。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在此提供了一種抑制患有或正在經(jīng)歷CNS損傷癥狀(例如，SCI或TBI)的個(gè)體中Thl7應(yīng)答的方法，包括對(duì)個(gè)體給予有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞，其中所述有效量是在個(gè)體中的Thl7應(yīng)答產(chǎn)生可檢測(cè)的減少的量。在這些方法具體的實(shí)施方式中，所述給藥可檢測(cè)地降低所述個(gè)體中的T細(xì)胞或抗原呈遞細(xì)胞生產(chǎn)一種或多種的IL-Ιβ、IL-12、IL-17、IL-21、IL-23、TNFa和/或IFN Y。在本方法的另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述接觸加強(qiáng)或上調(diào)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)表型，或調(diào)節(jié)所述個(gè)體的樹(shù)突細(xì)胞(DC)和/或巨噬細(xì)胞中促進(jìn)Thl或Thl7應(yīng)答的標(biāo)志物的產(chǎn)生。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，該方法另外包括對(duì)所述個(gè)體給藥IL-10。
[0229]在另一方面，在此提供了如在此描述的被遺傳改造為表達(dá)一種或多種抗炎性細(xì)胞因子的胎盤(pán)干細(xì)胞。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述抗炎性細(xì)胞因子包括IL-10。
[0230]5.3血管生成和治療CNS損傷
[0231]在另一方面,在此提供了患有個(gè)體腦內(nèi)或腦周?chē)髯钄?disruption)的個(gè)體的治療方法，例如，患有由CNS損傷(例如，SCI或TBI)導(dǎo)致的個(gè)體大腦或CNS內(nèi)部或周?chē)难髯钄嘁鸬陌Y狀或神經(jīng)性缺乏，其包括對(duì)所述個(gè)體給藥治療有效量的分離的胎盤(pán)干細(xì)胞(例如，PDAC)。在某些實(shí)施方式中，血流阻斷導(dǎo)致個(gè)體大腦或CNS缺氧損傷或低氧損傷。在某些實(shí)施方式中，PDAC是血管生成的。在某些實(shí)施方式中，PDAC能夠支持內(nèi)皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞群和上皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞群在體內(nèi)外的生長(zhǎng)。
[0232]如本文所使用的，在提及在此描述的胎盤(pán)來(lái)源的貼壁細(xì)胞時(shí)，術(shù)語(yǔ)“血管生成的”表示細(xì)胞能夠形成管或管樣芽，或細(xì)胞能促進(jìn)另一個(gè)細(xì)胞群(例如，內(nèi)皮細(xì)胞)中的血管生成(例如，管或管樣結(jié)構(gòu)的形成)。
[0233]如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“血管生成”指血管形成的過(guò)程，包括但不限于內(nèi)皮細(xì)胞活化、遷移、增殖、基質(zhì)重塑和細(xì)胞穩(wěn)定化。
[0234]在某些實(shí)施方式中，PDAC和該細(xì)胞群可被用于促進(jìn)呈現(xiàn)外傷性組織損失的個(gè)體血管生成，或防止由CNS損傷例如SCI或TBI造成的傷疤形成。
[0235]在某些實(shí)施方式中，個(gè)體得益于以下治療，例如得益于細(xì)胞支持其他細(xì)胞生長(zhǎng)的能力，包括寡突細(xì)胞和神經(jīng)元；得益于組織向內(nèi)生長(zhǎng)或組織血管生成；以及得益于有益細(xì)胞因素、趨化因子、細(xì)胞因子等的存在，但是細(xì)胞并不整合或在體內(nèi)繁殖。在另一個(gè)實(shí)施方式中，患者得益于用細(xì)胞進(jìn)行治療處理，但是細(xì)胞并不在患者體內(nèi)存活延長(zhǎng)的時(shí)間。在一個(gè)實(shí)施方式中，細(xì)胞數(shù)量、活力或生化活性逐漸減少，在其它實(shí)施方式中，細(xì)胞減少前可以存在一個(gè)活性階段，例如生長(zhǎng)、分裂或生化活性。在其它實(shí)施方式中，衰老的、無(wú)法生存的或甚至死亡的細(xì)胞能夠具有有益的治療效果。
[0236]PDAC或含有該細(xì)胞的治療組合物對(duì)有需求的個(gè)體的給藥可以通過(guò)例如移植、植入(例如，細(xì)胞自身或作為基質(zhì)細(xì)胞組合一部分的細(xì)胞)、注射(例如，直接注射至CNS損傷部位)、輸液、經(jīng)導(dǎo)管遞送或任意本領(lǐng)域已知的提供細(xì)胞治療的其它方式來(lái)實(shí)現(xiàn)。
[0237]為此，在此進(jìn)一步提供了 PDAC群，其接觸一種或多種能刺激干細(xì)胞或祖細(xì)胞沿著生成血管的、形成血管的或血管源性的方向分化的因子，例如在其存在下培育或培養(yǎng)。所述因子包括但不限于因子，例如生長(zhǎng)因子、趨化因子、細(xì)胞因子、細(xì)胞產(chǎn)物、脫甲基試劑和其它因子，其目前已知或之后被判斷為能夠刺激例如干細(xì)胞等沿著生成血管的、形成血管的或血管源性的方向或譜系分化。
[0238]在某些實(shí)施方式中，PDAC可以通過(guò)在包括至少一種的脫甲基試劑、BMP (骨形態(tài)生成蛋白)、FGF(成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子)、Wnt因子蛋白、Hedgehog蛋白、和/或抗Wnt因子的存在下培養(yǎng)，從而沿著生成血管的、形成血管的或血管源性的方向或譜系體外分化。
[0239]PDAC可以治療組合物的形式對(duì)個(gè)體給藥，其中含有細(xì)胞和另一治療劑，例如，胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)、血小板來(lái)源的生長(zhǎng)因子(PDGF)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、白細(xì)胞介素18(IL_8)、抗血栓形成劑(例如肝素、肝素衍生物、尿激酶、或PPack (D-苯丙氨酰脯氨酰精氨酰氯甲酮)、抗凝血酶化合物、血小板受體拮抗劑、抗凝血酶抗體、抗血小板受體抗體、阿司匹林、雙嘧達(dá)莫、魚(yú)精蛋白、水蛭素、前列腺素抑制劑、和/或血小板抑制劑)、抗凋亡劑(如促紅細(xì)胞生成素(ΕΡ0)、促紅細(xì)胞生成素衍生物或其類(lèi)似物或它們的鹽、血小板生成素(TPO)、IGF-1、IGF-11、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、或胱天蛋白酶抑制劑)、抗炎劑(例如P38MAP激酶抑制劑、他汀藥物、IL-6抑制劑、IL-1抑制劑、吡嘧司特、曲尼司特、英利昔單抗、西羅莫司和/或非類(lèi)固醇抗炎化合物(例如乙酰水 楊酸、布洛芬、替泊沙林、托美丁、或舒洛芬))、免疫抑制或免疫調(diào)節(jié)劑(例如鈣神經(jīng)素抑制劑，如環(huán)孢素、他克莫司、mTOR抑制劑如西羅莫司、依維莫司；抗增殖劑如硫唑嘌呤和/或霉酚酸酯、皮質(zhì)類(lèi)固醇，如強(qiáng)的松龍或氫化可的松；抗體，如抗-1L-2Ra受體的單克隆抗體、巴利昔單抗、賽尼哌、多克隆抗-T細(xì)胞抗體如抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)、抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)、和/或單克隆抗T細(xì)胞抗體0KT3，或美國(guó)專(zhuān)利第7，468，276號(hào)和美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)第2007/0275362號(hào)中所描述的貼壁胎盤(pán)干細(xì)胞，其中每一個(gè)均全文引入作為參考)、和/或抗氧化劑(例如普羅布考、維生素A、C和/或E、輔酶Q-10、谷胱甘肽、L半胱氨酸、N-乙酰半胱氨酸、或抗氧化劑衍生物、模擬物或任何前述的鹽)。在某些實(shí)施例中，含有PDAC的治療組合物進(jìn)一步包括一種或多種其他類(lèi)型的細(xì)胞，例如，成體細(xì)胞(例如，成纖維細(xì)胞或內(nèi)胚層細(xì)胞)、干細(xì)胞和/或祖細(xì)胞。該治療劑和/或一種或多種其他類(lèi)型的細(xì)胞可被分別或組合給予有需要的個(gè)體，或給予兩種或更多該化合物或試劑。
[0240]5.4第二治療組合物和第二治療
[0241]在上述任意治療方法中，所述方法可以包括第二治療組合物的給藥或第二療法。對(duì)上述治療特定疾病的特定的第二治療組合物或第二療法的描述不是排他性的。例如，在此討論的任何疾病、紊亂或病況均可以采用任意在此描述的抗炎性化合物或免疫抑制化合物進(jìn)行治療。在胎盤(pán)干細(xì)胞與第二治療劑或第二類(lèi)干細(xì)胞一起給藥的實(shí)施方式中，胎盤(pán)干細(xì)胞和第二治療劑和/或第二類(lèi)干細(xì)胞可同時(shí)給藥或不同時(shí)給藥，例如，給藥可以在彼此的 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、或 50 分鐘內(nèi)，或彼此的 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、或22小時(shí)內(nèi)，或彼此的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10天內(nèi)進(jìn)行。
[0242]在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，與不適當(dāng)、有害的或危害性的免疫應(yīng)答有關(guān)的或由其造成的疾病、紊亂或病況的治療包括給藥第二類(lèi)干細(xì)胞，或第二類(lèi)干細(xì)胞群。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述第二類(lèi)干細(xì)胞是間質(zhì)干細(xì)胞，例如，骨髓來(lái)源的間質(zhì)干細(xì)胞。在其它實(shí)施方式中，第二類(lèi)干細(xì)胞是多效干細(xì)胞、多能干細(xì)胞、祖細(xì)胞、造血干細(xì)胞例如⑶34+造血干細(xì)胞、成體干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞或胚胎生殖干細(xì)胞。第二類(lèi)干細(xì)胞，例如，間質(zhì)干細(xì)胞，可以任何比例與胎盤(pán)干細(xì)胞一起給藥，例如，比例為約100:1、75:1、50:1、25:1、20:1、15:1、10:1、5: 1、1: 1、1:5、1:10、1:15、1:20、1:25、1:50、1:75 或 1:100。間質(zhì)干細(xì)胞可商業(yè)獲得或從一個(gè)初始來(lái)源獲得，例如骨髓、骨髓穿刺液、脂肪組織等。
[0243]在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述第二療法包括免疫調(diào)節(jié)化合物，其中免疫調(diào)節(jié)化合物是3-(4-氨基-1-氧-1,3-二氫異吲哚-2-基)-哌啶-2，6-二酮；3_(4’氨基異吲哚啉-1’ -酮)-1-哌啶_2，6- 二酮；4_ (氨基)-2- (2，6- 二氧(3-哌啶))-異吲哚啉_1，3- 二酮；或α-(3-氨基苯二甲酰亞氨基)戊二酰亞胺。在一個(gè)更具體的實(shí)施方式中，所述免疫調(diào)節(jié)化合物是具有下述結(jié)構(gòu)的化合物:
[0244]
【權(quán)利要求】
1.一種治療患有與脊髓損傷或外傷性腦損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況或存在發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的個(gè)體的方法，包括對(duì)個(gè)體給予治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基，其中治療有效量是足以在所述疾病、紊亂或病況的一種或多種癥狀中產(chǎn)生可檢測(cè)到的改善的量。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述胎盤(pán)干細(xì)胞是⑶10+、⑶34—、⑶105+、⑶200+胎盤(pán)干細(xì)胞。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述胎盤(pán)干細(xì)胞表達(dá)⑶200且不表達(dá)HLA-G，或表達(dá)⑶73、CD105和CD200，或表達(dá)CD200和0CT-4，或表達(dá)CD73和CD105且不表達(dá)HLA-G，或表達(dá)CD73和CD105且當(dāng)含有所述干細(xì)胞的胎盤(pán)細(xì)胞群在允許胚胎樣小體形成的條件下培養(yǎng)時(shí)有利于在所述胎盤(pán)細(xì)胞群中形成一種或多種胚胎樣小體，或表達(dá)0CT-4且當(dāng)含有所述干細(xì)胞的胎盤(pán)細(xì)胞群在允許胚胎樣小體形成的條件下培養(yǎng)時(shí)有利于在所述胎盤(pán)細(xì)胞群中形成一種或多種胚胎樣小體。
4.權(quán)利要求2的方法，其中個(gè)體患有與脊髓損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況或存在發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
5.權(quán)利要求4的方法，其中脊髓損傷來(lái)自于直接創(chuàng)傷。
6.權(quán)利要求4的方法，其中脊髓損傷來(lái)自于骨折片、血腫或盤(pán)材料的壓迫。
7.權(quán)利要求4的方法，其中脊髓損傷來(lái)自于由于脊髓動(dòng)脈傷害或撞擊的局部缺血。
8.權(quán)利要求2的方法，其 中所述疾病、紊亂或病況是由脊髓損傷導(dǎo)致的脊髓休克。
9.權(quán)利要求2的方法，其中所述疾病、紊亂或病況是由脊髓損傷導(dǎo)致的神經(jīng)源性休克。
10.權(quán)利要求2的方法，其中所述疾病、紊亂或病況是由脊髓損傷導(dǎo)致的自主反射障礙。
11.權(quán)利要求2的方法，其中所述疾病、紊亂或病況是由脊髓損傷導(dǎo)致的水腫。
12.權(quán)利要求2的方法，其中所述疾病、紊亂或病況是選自由下述組成的組:中髓綜合癥、脊髓半切綜合癥、前髓綜合癥、脊髓圓錐綜合癥和馬尾綜合癥。
13.權(quán)利要求4的方法，其中脊髓損傷位于頸椎、胸椎、腰椎、或骶椎的一種或多種。
14.權(quán)利要求4的方法，其中脊髓損傷是對(duì)于頸髓、胸髓、腰骶椎、椎體、枕骨的一種或多種，或一種或多種的馬尾神經(jīng)。
15.權(quán)利要求4的方法，其中所述一種或多種癥狀包括脊髓的頸段、胸段、腰段或骶段的運(yùn)動(dòng)功能、感覺(jué)功能、或運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)功能的缺失或損傷。
16.權(quán)利要求4的方法，其中所述一種或多種癥狀包括臂部、軀干、腿部或盆腔內(nèi)器官的運(yùn)動(dòng)機(jī)能、感覺(jué)功能、或運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)功能的缺失或損傷。
17.權(quán)利要求4的方法，其中所述一種或多種癥狀包括在皮節(jié)Cl、C2、C3、C4、C5、C6、C7、T1、T2、T3、T4、T5、T6、T7、T8、T9、T10、T11、T12、L1、L2、L3、L4 或 L5 的一種或多種處的麻木。
18.權(quán)利要求4的方法，其中治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基在脊髓損傷的14天內(nèi)被給予個(gè)體。
19.權(quán)利要求4的方法，包括對(duì)所述個(gè)體給予第二治療劑。
20.權(quán)利要求9的方法，其中所述第二治療劑是皮質(zhì)類(lèi)固醇、神經(jīng)保護(hù)劑、免疫調(diào)節(jié)或免疫抑制劑或抗凝劑。
21.權(quán)利要求2的方法，其中個(gè)體患有與外傷性腦損傷相關(guān)的疾病、紊亂或病況或存在發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
22.權(quán)利要求21的方法，其中外傷性腦損傷是大腦額葉、頂葉、枕葉、顳葉、腦干、或小腦的損傷。
23.權(quán)利要求21的方法，其中外傷性腦損傷是輕度外傷性腦損傷。
24.權(quán)利要求21的方法，其中外傷性腦損傷是中度至重度外傷性腦損傷。
25.權(quán)利要求21的方法，其中所述癥狀是下述一種或多種:頭痛、思考困難、記憶力問(wèn)題、注意力缺陷、情緒波動(dòng)和挫折、疲勞、視力障礙、記憶力減退、注意力/專(zhuān)注度不佳、睡眠障礙、頭暈/失去平衡、煩躁不安、情緒障礙、感覺(jué)抑郁、抽搐、惡心、嗅覺(jué)損失、對(duì)聲光敏感、情緒變化、迷失或糊涂或思維緩慢。
26.權(quán)利要求21的方法，其中所述癥狀是下述一種或多種:注意困難、專(zhuān)注度困難、注意力不集中、記憶困難、處理速度緩慢、混亂、持續(xù)言語(yǔ)、沖動(dòng)、語(yǔ)言處理困難、言語(yǔ)困難、不理解口語(yǔ)(感覺(jué)性失語(yǔ))、說(shuō)話(huà)和被理解困難(表達(dá)性失語(yǔ))、口齒不清、說(shuō)話(huà)過(guò)快或過(guò)慢、閱讀問(wèn)題、寫(xiě)作問(wèn)題、對(duì)觸摸、溫度、運(yùn)動(dòng)、肢體位置和細(xì)微區(qū)分的解釋困難、將感官印象整合或構(gòu)架至心理學(xué)有意義的數(shù)據(jù)的困難、部分或完全喪失視力、眼部肌肉衰弱和雙視(復(fù)視)、視力模糊、判斷距離困難、眼球不自主運(yùn)動(dòng)(眼球震顫)、不耐光(畏光)、聽(tīng)力下降或損失、耳鳴、對(duì)聲音敏感性增加、嗅覺(jué)損失或減退(嗅覺(jué)缺失癥)、味覺(jué)損失或減退、癲癇、癲癇相關(guān)的抽搐、身體癱瘓/痙攣、慢性疼痛、腸和/或膀胱失去控制、睡眠障礙、耐久力損失、食欲改變、體溫失調(diào)、月經(jīng)困難、社會(huì)情感困難、依賴(lài)行為、情感能力喪失、缺乏動(dòng)力、煩躁不安、易怒、抑郁、去抑制、或缺乏認(rèn)識(shí)。
27.權(quán)利要求21的方法，包括對(duì)所述個(gè)`體給予第二治療劑。
28.權(quán)利要求9的方法，其中所述第二治療劑是抗癲癇藥、抗抑郁藥、金剛烷胺、哌醋甲酯、溴隱亭、卡馬西平或阿米替林。
29.權(quán)利要求1的方法，其中治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基通過(guò)選自以下的路徑給予個(gè)體:靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、心室內(nèi)、尿道內(nèi)、胸骨內(nèi)、顱內(nèi)、肌肉內(nèi)、滑膜內(nèi)、眼內(nèi)、玻璃體內(nèi)、大腦內(nèi)、腦室內(nèi)、囊內(nèi)、骨內(nèi)輸液、膀胱內(nèi)、透皮、腦池內(nèi)、硬腦膜外或皮下給藥。
30.權(quán)利要求1的方法，其中治療有效量的胎盤(pán)干細(xì)胞或胎盤(pán)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基直接在損傷部位給予個(gè)體。
【文檔編號(hào)】A61K48/00GK103501822SQ201180067894
【公開(kāi)日】2014年1月8日 申請(qǐng)日期:2011年12月15日 優(yōu)先權(quán)日:2010年12月17日
【發(fā)明者】斯圖爾特·阿博特, 詹姆士·W·愛(ài)丁格, 亞歷山大·弗蘭茨基, 弗拉基米爾·揚(yáng)科維奇, 亞歷山大·卡普魯諾維斯基, 克利斯登·拉巴左, 埃里克·勞, 畢濤·梁, 羅伯特·J·哈黎里 申請(qǐng)人:人類(lèi)起源公司