專利名稱：用于制備干燥、穩(wěn)定的止血組合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于制備儲(chǔ)存穩(wěn)定形式的止血組合物的方法。
背景技術(shù)：
根據(jù)例如W098/008550A或W02003/007845A已知一種干燥、儲(chǔ)存穩(wěn)定形式的止血組合物，所述止血組合物含有生物相容的、可生物降解的、干燥穩(wěn)定的顆粒狀材料。這些產(chǎn)品已經(jīng)被成功應(yīng)用于止血用領(lǐng)域中。Floseal 是用于有效的、多功能的止血?jiǎng)┑睦?，其含有溶脹于含凝血酶的溶液中的顆粒狀明膠基質(zhì)，以形成可流動(dòng)的糊劑。因?yàn)檫@樣的產(chǎn)品需用于人體，因此必需為最終產(chǎn)品及其成分的質(zhì)量、儲(chǔ)存穩(wěn)定性以及滅菌提供最高安全標(biāo)準(zhǔn)。另一方面，生產(chǎn)和處理應(yīng)當(dāng)盡量簡(jiǎn)便有效。如果止血組合物需要使用凝血酶組分，則在最終產(chǎn)品中提供這種凝血酶組分具有挑戰(zhàn)性。由于凝血酶及基質(zhì)材料通常具有不同的與性能相關(guān)的生產(chǎn)要求，因此它們必須單獨(dú)生產(chǎn)和供應(yīng)。例如，相對(duì)穩(wěn)定的顆粒狀(經(jīng)常也是交聯(lián)的)基質(zhì)材料與蛋白質(zhì)組分例如凝血酶之間的滅菌要求明顯不同。這樣的基質(zhì)材料通?？赏ㄟ^有效的滅菌方法進(jìn)行滅菌(例如高壓滅菌法、Y輻射等)，而凝血酶(作為酶)必須更小心地處理。那些有效的滅菌方法通常不能用于凝血酶，因?yàn)檫@樣粗糙的處理會(huì)導(dǎo)致酶活性喪失。出于穩(wěn)定性的原因，這類產(chǎn)品(以及根據(jù)本發(fā)明的產(chǎn)品)通常以干燥的形式提供，并且在使用前立即配成“即用”形式(其通常處于(水)凝膠、懸浮劑或溶液的形式)，這需要添加潤(rùn)濕劑或溶解(懸浮)劑以及混合基質(zhì)材料組分與凝血酶組分。凝血酶復(fù)原或凝血酶溶液與顆粒狀基質(zhì)材料的混合步驟是通常需要一些時(shí)間及處理的步驟，從而會(huì)在尤其是重癥監(jiān)護(hù)時(shí)引起問題。本發(fā)明的目的在于解決這些問題，并且提供適用于制備干燥、儲(chǔ)存穩(wěn)定的止血組合物的方法，所述止血組 合物可方便地提供及使用。這些方法應(yīng)提供一種產(chǎn)品劑型，其可便利地提供“即用型”止血組合物，尤其是在操作步驟數(shù)應(yīng)盡可能少的重癥監(jiān)護(hù)藥品中。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明提供一種用于制備干燥、穩(wěn)定的止血組合物的方法，所述方法包括a)提供第一組分，其含有凝血誘導(dǎo)劑的干制劑，如干凝血酶制劑，b)提供第二組分，其含有適用于止血的生物相容性聚合物的干制劑，c)在最終容器中提供組合形式的所述第一組分和所述第二組分，Cl)通過將所述第一組分和所述第二組分填充入所述最終容器中來獲得在所述最終容器中的干混合物，或者c2)通過在所述最終容器中提供所述第一組分或所述第二組分并且添加所述第二組分或所述第一組分來獲得在所述最終容器中的所述第一組分與所述第二組分的組合，d)將所述最終容器最終轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓛?chǔ)存的給藥器(Pharmaceutical device),其作為干燥、穩(wěn)定的止血組合物含有組合形式的所述第一組分和所述第二組分。本方法提供一種根據(jù)本發(fā)明的簡(jiǎn)便形式的干燥、穩(wěn)定的組合物，所述組合物可容易地被復(fù)原(reconstitute)用于醫(yī)療用途。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種將止血組合物運(yùn)送至患者身體靶位的方法，所述方法包括將通過本發(fā)明的方法制備的止血組合物運(yùn)送至靶位。另一方面，本發(fā)明涉及通過本發(fā)明所述的方法獲得的最終容器(finished finalcontainer)。本發(fā)明還涉及一種用于提供即用型止血組合物的方法，其包括使通過本發(fā)明的方法制備的止血組合物與藥學(xué)上可接受的稀釋劑接觸，以及一種包括最終容器和其他用于提供所述組合物的裝置(如稀釋劑容器)的試劑盒。根據(jù)本發(fā)明的組合物特別適用于出血部位的止血，包括外科手術(shù)出血部位、外傷性出血部位等。所述組合物的示例性用途是封住為了進(jìn)行血管導(dǎo)管插入術(shù)而形成的血管穿透之上的組織束。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明提供對(duì)止血組合物的運(yùn)送和處理的改進(jìn)，主要通過提供簡(jiǎn)便的單一組合物劑型的雙組分產(chǎn)品。根據(jù)本發(fā)明的止血組合物含有包含凝血誘導(dǎo)劑的干制劑比如干凝血酶制劑(“凝血酶組分”)的第一組分以及包含適用于止血的生物相容性聚合物的干制劑(“止血的生物相容性聚合物組分”)的第二組分。該止血組合物還可進(jìn)一步存在其他組分。這種產(chǎn)品在本技術(shù)領(lǐng)域中實(shí)質(zhì)上是已知的，然而其以不同的劑型存在通常，這些組分作為單獨(dú)體(separate entities)以干燥的形式被供給。在混合這些組分對(duì)患者給藥之前,通常將這些干燥的組分分別與適宜的稀釋劑接觸。然后通過混合分別復(fù)原的組分來進(jìn)行這些組分的混合。例如，可以提供一種干凝血酶組分，其被藥學(xué)上可接受的(含水)稀釋劑復(fù)原。然后，復(fù)原后獲得的凝血酶溶液通常以水凝膠的形式被用于潤(rùn)濕或溶解所述聚合物，然后其被應(yīng)用于患者。由于在該產(chǎn)品“即用”之前，這至少是兩步方法，故如果產(chǎn)品在即用之前僅需要一個(gè)步驟，那將變得更簡(jiǎn)便。然而，如上所述，主要因?yàn)榉€(wěn)定性和活性的喪失，所述兩種組分的性質(zhì)阻礙了所述組分之間在制備方法過程中的簡(jiǎn)單混合。通過本發(fā)明，提供了制備方法，所述制備方法可以使得兩種已經(jīng)處于組合、干燥形式的組分被提供從而可一起被復(fù)原。根據(jù)本發(fā)明的方法不僅可應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的科學(xué)實(shí)驗(yàn)，還適用于藥品的大批量工業(yè)化生產(chǎn)。通過本發(fā)明，可以在沒有不希望的降解或酶活性喪失的風(fēng)險(xiǎn)下提供這種已經(jīng)混合的止血組合物。因?yàn)橥ㄟ^本發(fā)明可獲得的產(chǎn)品在醫(yī)學(xué)給藥之前不再需要進(jìn)行分別的復(fù)原 和混合，故與以往已知的產(chǎn)品相比，所得的組合物具有儲(chǔ)存穩(wěn)定性、并且更便于處理。僅通過在最終容器中向組合物添加適宜的藥學(xué)上可接受的稀釋劑，就可以一步方法提供止血組合物的即用型水凝膠、懸浮劑或溶液。最終容器優(yōu)選設(shè)計(jì)為接觸稀釋劑后直接將復(fù)原的止血組合物給藥的注射器。凝血誘導(dǎo)劑是選自于包含凝血酶、蛇毒、血小板活化劑、凝血酶受體激活肽及纖維蛋白原沉淀劑的組中的物質(zhì)，優(yōu)選其為凝血酶。所述“凝血酶的干制劑”可以由任意的適用于人體(即藥學(xué)上可接受的)的凝血酶制劑制得。適宜的凝血酶的來源包括人或牛血、血漿或血清(如果預(yù)期無免疫不良反應(yīng)，則可應(yīng)用其他動(dòng)物來源的凝血酶)以及重組來源的凝血酶(如人的重組凝血酶);在某些應(yīng)用上可優(yōu)選自體人凝血酶。優(yōu)選止血組合物含有1(Γ100.000國(guó)際單位(1. U.)的凝血酶，更優(yōu)選為10(Tl0. 0001. U.，尤其優(yōu)選為50(Γ5. 0001. U.。優(yōu)選“即用型”組合物中的凝血酶濃度處于I (Γιο. 0001. U.的范圍內(nèi)，更優(yōu)選為50 5· 0001. U.，尤其優(yōu)選為100 1· 0001. U.。稀釋劑的用量為凝血酶達(dá)到在“即用型”組合物中所希望的終濃度。
例如，根據(jù)W098/08550A已知根據(jù)本發(fā)明的“生物相容性聚合物的干制劑”。優(yōu)選所述聚合物為生物相容的、可生物降解的干燥穩(wěn)定的顆粒狀材料。根據(jù)本發(fā)明的“干燥的”止血組合物僅有殘余量的水分，其近似相當(dāng)于可比較的已有產(chǎn)品比如Floseal 中的水分含量(例如，F(xiàn)loseal，作為干燥產(chǎn)品時(shí)含有約12%的水分)。通常，根據(jù)本發(fā)明的干燥的組合物含有的殘余水分含量低于這些產(chǎn)品，優(yōu)選水分低于10%，更優(yōu)選水分低于5%，特別優(yōu)選水分低于1%。根據(jù)本發(fā)明的止血組合物也可含有更低的水分含量，如O. 1%或者甚至更低。優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的干燥的止血組合物的水分含量為O. f 10%，尤其為O. 5 5%。根據(jù)本發(fā)明，止血組合物在最終容器中以干燥的形式被提供。通過使其為干燥形式，顯著并適當(dāng)?shù)亟档土私M分的降解或失活的過程，使穩(wěn)定的儲(chǔ)存成為可能。適宜的儲(chǔ)存穩(wěn)定性可基于凝血酶的活性來確定。因此，如果其復(fù)原后以干燥形式在室溫下(25° C)儲(chǔ)存24個(gè)月后仍然存在不少于4001. U. /ml (相對(duì)于5001. U. /ml的產(chǎn)品)(即與凍干之前的初始活性相比，80%或更多的凝血酶活性得到保持)，則這種干燥的止血組合物是儲(chǔ)存穩(wěn)定的。優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的組合物具有更高的儲(chǔ)存穩(wěn)定性，即24個(gè)月儲(chǔ)存后至少90%的凝血酶的活性得到保持，尤其優(yōu)選至少95%的凝血酶活性得到保持。然而，提供凝血酶和生物相容性聚合物的干混合物是重要的，這是因?yàn)榛旌衔镄枰恢瞥筛稍镄问?。以可溶?懸浮)的形式混合所述組分、以及接著開始干燥過程導(dǎo)致材料發(fā)生不可容忍的降解。例如，即使凝血酶和明膠在4°C處被保存，明顯的降解在24h后仍是可見的。根據(jù)本發(fā)明的“干燥的”聚合物和凝血酶通常以O(shè). Γ5. 000 μ m的粒徑被提供。通常，此處使用的凝血酶顆粒比聚合物顆粒??；優(yōu)選凝血酶顆粒具有廣100 μ m的平均粒徑，(“平均粒徑”是通過激光衍射測(cè)得的中值粒徑；“中值粒徑”(或質(zhì)量中值粒徑)是將頻率分布平分為二的粒徑；給定制劑的顆粒的50%具有更大的直徑，并且50%的顆粒具有更小的直徑)，尤其優(yōu)選為5 50μπι (中值粒徑);聚合物顆粒為1(Γ 000μπι，優(yōu)選為50-500μπι (中值粒徑)。是否應(yīng)用更大的顆粒主要取決于醫(yī)療需求；在制備過程中平均粒徑更小的顆粒通常更難處理。因此干燥的聚合物和凝血酶以顆粒狀形式被提供，尤其是粉末形式。雖然術(shù)語“粉末”和“顆粒狀”(或顆粒)有時(shí)被用來區(qū)分不同種類的材料，但此處粉末被定義為顆粒狀材料的一種特殊的子類。特別地，粉末指那些具有更細(xì)粒徑的顆粒狀材料，因此在流動(dòng)時(shí)其具有更大的形成團(tuán)塊的傾向；優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的干凝血酶粉末具有f 10 μ m的中值粒徑。顆粒包括除了潤(rùn)濕時(shí)以外不傾向于形成團(tuán)塊的更粗的顆粒狀材料。因此，為了達(dá)到該目的，本發(fā)明原則上采用兩種實(shí)施方式。第一原則包括在填充入最終容器之前以固體狀態(tài)混合兩種組分；另一種選擇是將所述組分相繼地添加到所述最終容器中。然后視需要可通過攪拌最終容器來實(shí)現(xiàn)混合。特別地，當(dāng)實(shí)施本發(fā)明的方法中的步驟cl)時(shí),優(yōu)選使用凝血誘導(dǎo)劑的干制劑,例如粉末形式的干凝血酶,即中間粒徑(Mediumsize)(中值粒徑)優(yōu)選為f 10 μ m的凝血誘導(dǎo)劑的干制劑。凝血誘導(dǎo)劑的凍干制劑，例如凝血酶，可包含更大的顆粒，其甚至可作為不連續(xù)的固體、多孔相(也取決于凍干凝血酶所用的技術(shù))獲得。如果將這樣的凍干產(chǎn)物碾碎成顆粒，則獲得的顆?？删哂袑捔椒植肌Ｔ谶@種情況下，優(yōu)選通過研磨凍干的凝血誘導(dǎo)劑，例如凝血酶以獲得粉末來縮小粒徑分布。對(duì)于這樣的研磨，使用通常用于研磨蛋白質(zhì)凍干材料的研磨技術(shù)和儀器。優(yōu)選的凝血誘導(dǎo)劑的顆粒例如凝血酶顆粒(尤其噴墨干燥的凝血酶顆粒)的粒徑范圍為O. f500 μ m，更優(yōu)選為0.5 100μπι，尤其為1 50μπι。根據(jù)特別優(yōu)選的實(shí)施方式，所述第一組分包括通過噴霧干燥優(yōu)選通過無菌噴霧干燥獲得的凝血酶。噴霧干燥可以在任意的噴霧干燥設(shè)備中實(shí)施，其尤其用于蛋白質(zhì)材料，優(yōu)選在將用于噴霧干燥的凝血酶溶液投入所述設(shè)備之前立即對(duì)所述設(shè)備進(jìn)行滅菌。優(yōu)選緊接著噴霧干燥步驟進(jìn)行結(jié)塊步驟來制備凝血酶粉末。根據(jù)所述第二原則，所述干燥組分的一個(gè)被提供于最終容器中，然后加入第二組分。這可以通過將所述組分的一個(gè)以干燥形式置于所述最終容器中然后加入第二組分來實(shí)施。但是，這也可以通過將所述組分的一個(gè)以溶液或懸浮液(或其他濕制劑)的形式置于最終容器中，干燥所述組分，優(yōu)選通過凍干干燥所述組分，然后在完成干燥步驟之后(在最終容器中原地干燥)加入干燥形式的其他組分。優(yōu)選將凝血誘導(dǎo)劑，例如凝血酶提供于最終容器中，然后干燥，優(yōu)選通過凍干進(jìn)行干燥，然后與所述第二組分混合。因此，在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式中，步驟c2)通過凍干在所述最終容器中的包含組分的含水凝血誘導(dǎo)劑例如包含組分的含水凝血酶來提供在所述最終容器中的所述第一組份，并且在凍干之后通過加入所述第二組分來實(shí)施。優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的方法在無菌環(huán)境下實(shí)施，尤其是在最終容器中的混合步驟(步驟Cl)或c2))應(yīng)當(dāng)無菌操作。也優(yōu)選以已經(jīng)適當(dāng)滅菌的組分啟動(dòng)所述方法然后在無菌條件下進(jìn)行后續(xù)所有的步驟。所述方法的最后步驟是完成步驟。在該步驟中，最終容器被適當(dāng)密封并被制作成即存和/或即售。完成步驟可包括給最終容器貼標(biāo)簽、包裝及實(shí)施(進(jìn)一步)滅菌工序(例如在最終容器上或在包含最終容器的包裝產(chǎn)品或試劑盒上進(jìn)行)。優(yōu)選步驟d)包括EO (環(huán)氧乙烷)滅菌。EO滅菌是本技術(shù)領(lǐng)域中所常見的。環(huán)氧乙烷氣體殺滅細(xì)菌(及它們的芽孢)、霉菌及真菌。EO滅菌被用來對(duì)可被高溫技術(shù)比如巴氏滅菌法或高壓滅菌法破 壞的物質(zhì)進(jìn)行滅菌。滅菌的其它優(yōu)選實(shí)施方式是應(yīng)用電離輻射比如β或Y輻射或使用過氧化氫蒸汽。根據(jù)優(yōu)選實(shí)施方式，所述最終容器進(jìn)一步含有一定量的可有效抑制聚合物因暴露于滅菌射線而變性的穩(wěn)定劑，其優(yōu)選為抗壞血酸、抗壞血酸鈉、抗壞血酸的其他鹽、或抗氧化劑。所述最終容器可以是任意的適于存放(及儲(chǔ)存)藥學(xué)上可給藥的化合物的容器?？墒褂米⑸淦?、小瓶、管子等；然而，特別優(yōu)選用注射器提供根據(jù)本發(fā)明的止血組合物?，F(xiàn)有技術(shù)中也公開了注射器是優(yōu)選的用于止血組合物的給藥裝置，原因在于注射器在醫(yī)學(xué)應(yīng)用上的操作優(yōu)勢(shì)。然后，可優(yōu)選地通過特定的注射器的針管或通過適宜的導(dǎo)管應(yīng)用所述組合物(復(fù)原之后)。還可通過許多其他裝置，比如通過軟膏刀、刷子、噴霧器、手動(dòng)壓力或任何其他的傳統(tǒng)技術(shù)來應(yīng)用復(fù)原的止血組合物(其優(yōu)選被復(fù)原以形成水凝膠)。通常，根據(jù)本發(fā)明的復(fù)原的止血組合物的應(yīng)用是通過使用注射器或類似的可通過開口(Orifice)、孔(Aperture)、針、管或其他通道將復(fù)原的組合物擠出以形成材料珠、層或類似的部分。通過經(jīng)由注射器或其他點(diǎn)藥器的孔的擠出，可以進(jìn)行組合物的機(jī)械粉碎，所述孔典型地具有O. 01ι πΓ5· Omm范圍內(nèi)的尺寸，優(yōu)選為O. 5mnT2· 5mm。然而，優(yōu)選所述止血組合物從具有預(yù)期粒徑的干燥形式開始制備(尤其在通過水合作用進(jìn)行復(fù)原時(shí)，獲得所需粒徑的亞單元(如水凝膠亞單元))或在最終擠出或其他應(yīng)用步驟之前被部分或全部機(jī)械粉碎至所需粒徑。當(dāng)然，顯而易見的是，為了滿足人體使用的安全要求，這些機(jī)械組件必須以無菌形式被提供(內(nèi)部及外部)。尤其當(dāng)步驟c2)通過干燥步驟應(yīng)用時(shí)，最終容器的設(shè)計(jì)優(yōu)選適于最終容器中的凍干過程。根據(jù)本發(fā)明的干燥的止血組合物在使用之前，通常通過使干燥的組合物與適宜的稀釋劑接觸而被復(fù)原(復(fù)水)。根據(jù)本發(fā)明的稀釋劑可以是任何對(duì)干燥的止血組合物適宜的復(fù)原介質(zhì)，其允許干燥組合物適當(dāng)?shù)臐?rùn)濕。優(yōu)選干燥的止血組合物被復(fù)原成水凝膠作為“即用”形式。適宜的稀釋劑是藥學(xué)上可接受的含水液體，例如藥用級(jí)去離子水(若所有的離子組分或緩沖組分已經(jīng)被提供于干燥的組合物中，則為“注射用水”)或含有特定的離子及/或緩沖劑的藥用級(jí)水溶液。這些水溶液還可進(jìn)一步含有其它成分，如賦形劑?！百x形劑”是一種被添加到溶液中的惰性物質(zhì)，例如以確保凝血酶在儲(chǔ)存(或滅菌(例如通過輻射))時(shí)保持其化學(xué)穩(wěn)定性和生物活性，或出于美觀的原因，例如顏色。優(yōu)選的賦形劑包括人血白蛋白、甘露糖醇及乙酸鈉。在復(fù)原的產(chǎn)品中優(yōu)選的人血白蛋白的濃度為O. ri00mg/ml，優(yōu)選為l^lOmg/mL·優(yōu)選的甘露糖醇的濃度可以在O. 5、00mg/ml的濃度范圍內(nèi)，尤其是l(T50mg/ml ο優(yōu)選的乙酸鈉的濃度為l"10mg/ml的范圍,尤其為2 5mg/ml。 例如，適宜的稀釋劑包括注射用水；以及彼此獨(dú)立的NaCl (優(yōu)選為5(Tl50mM，尤其是llOmM)、CaCl2 (優(yōu)選為l(T80mM，尤其為40mM)、人血白蛋白(優(yōu)選最多2w/w，尤其為O. 5w/w)、乙酸鈉(優(yōu)選為(T50mM，尤其為20mM)和甘露糖醇(優(yōu)選最多10% w/w，尤其為2%w/w)0稀釋劑也可優(yōu)選包含緩沖劑或緩沖體系以緩沖復(fù)原的干燥組合物的pH，優(yōu)選pH為6. 4 7. 5，尤其為 ρΗ6· 9 7.1。在優(yōu)選實(shí)施方式中，稀釋劑被置于單獨(dú)的容器中。優(yōu)選其為注射器。然后，在注射器中的稀釋劑便可容易地被添加至最終容器中以復(fù)原根據(jù)本發(fā)明的干燥的止血組合物。如果最終容器也是注射器，則兩個(gè)注射器可一起打包制得。因此，優(yōu)選將根據(jù)本發(fā)明的干燥的止血組合物提供于注射器中，所述注射器由含有用于復(fù)原所述干燥、穩(wěn)定的止血組合物的藥學(xué)上可接受的稀釋劑的稀釋劑注射器最終完成。本發(fā)明的適用于止血的生物相容性聚合物(“干燥的止血聚合物”)的干制劑可以由生物和非生物聚合物形成。適宜的生物聚合物包括蛋白質(zhì)，如明膠、可溶性膠原蛋白、白蛋白、血紅蛋白、酪蛋白、纖維蛋白原、纖維蛋白、纖維連接蛋白、彈性蛋白、角蛋白、以及層粘連蛋白；或它們的衍生物或組合。特別優(yōu)選使用明膠或可溶性非原纖維膠原蛋白，更優(yōu)選為明膠，示例性的明膠配方展示如下。其它適宜的生物聚合物包括多糖，比如糖胺聚糖、淀粉衍生物、木聚糖、纖維素衍生物、半纖維素衍生物、瓊脂糖、藻酸鹽、以及殼聚糖；或它們的衍生物或組合。適宜的非生物聚合物通過如下兩種機(jī)制中的任一種被選定為可降解的，即
(I)聚合物骨架的崩解，或(2)導(dǎo)致水溶性的側(cè)鏈的降解。示例性的形成非生物水凝膠的聚合物包括合成材料，如聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚乙烯基樹脂、聚丙交酯-乙交酯、聚己內(nèi)酯以及聚氧乙烯；或它們的衍生物或組合。也可以是不同種類的聚合物的組合(如蛋白質(zhì)與多糖、蛋白質(zhì)與形成非生物水凝膠的聚合物等)。非交聯(lián)的聚合物與適宜的復(fù)水助劑一起可以以任意適于復(fù)原的方式例如以形成適宜的水凝膠基質(zhì)的方式進(jìn)行交聯(lián)。例如，聚合物分子可以使用雙官能或多官能交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)，所述交聯(lián)劑可共價(jià)結(jié)合于兩個(gè)以上聚合物分子鏈上。示例性的雙官能交聯(lián)劑包括醛、環(huán)氧化物、琥珀酰亞胺、碳化二酰亞胺、馬來酰亞胺、疊氮化物、碳酸酯、異氰酸酯、二乙烯基砜、醇、胺、酰亞胺酯、酸酐、鹵化物、硅烷、重氮基乙酸酯，氮雜環(huán)丙烷等?？蛇x地，交聯(lián)可以通過使用氧化劑和其他試劑，如高碘酸鹽進(jìn)行，氧化劑和其他試劑激活聚合物上的側(cè)鏈或部分以便它們可以與其他側(cè)鏈或部分反應(yīng)，從而形成交聯(lián)鍵。另一個(gè)交聯(lián)方法包括使聚合物暴露于輻射，例如Y輻射，從而激活聚合物鏈以使交聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行。脫水熱交聯(lián)法也是適用的。用于交聯(lián)明膠分子的優(yōu)選方法如下所述。因此，根據(jù)優(yōu)選實(shí)施方式，適用于止血的生物相容性聚合物含有交聯(lián)多糖、交聯(lián)蛋白、或交聯(lián)非生物聚合物；或它們的混合物。優(yōu)選適用于止血的生物相容性聚合物為顆粒狀材料。所述顆粒狀材料在暴露于液體(如稀釋劑)時(shí)可以迅速溶脹，這種溶脹形式有助于形成可流動(dòng)的糊劑，其可應(yīng)用于出血部位。生物相容性聚合物，如明膠，可以以薄膜形式提供，然后其可被研磨成顆粒狀材料。包含在這種顆粒狀材料中的大部分顆粒的粒徑優(yōu)選為10(Tl. 000 μ m，特別是30(Γ500 μ m (中值粒徑)。根據(jù)優(yōu)選實(shí)施方式，適用于止血的生物相容性聚合物是交聯(lián)明膠。干交聯(lián)明膠粉可被制備成接觸適宜的稀釋劑便可迅速?gòu)?fù)水。優(yōu)選明膠粉包含相對(duì)較大的顆粒，也稱作碎片或亞單元，如在W098/08550A及W02003/007845A中所述。其優(yōu)選(中值)粒徑為2(Γ ·000μπι的范圍，優(yōu)選為10(Γ750μπι，尤其為150 500 μ m，但該優(yōu)選范圍之外的粒徑也可以在許多情況下使用。干燥的組合物在暴露于含水的復(fù)水介質(zhì)(=稀釋劑)時(shí)，也將表現(xiàn)出顯著的“平衡溶脹度”。優(yōu)選所述溶脹度在400% 1000%的范圍內(nèi)?！捌胶馊苊浂取笨赏ㄟ^將明膠水凝膠粉完全水化從而完全溶脹時(shí)的重量減去其干重的值獲得。然后將該差值除以干重再乘以100，以進(jìn)行溶脹度的測(cè)定。應(yīng)當(dāng)將材料暴露于高溫下足夠長(zhǎng)的時(shí)間以除去全部的殘余水分之后，例如在120°`鹽水中足夠長(zhǎng)的時(shí)間，典型地18 24h，以使水分含量恒定，來實(shí)現(xiàn)材料的平衡水化。非交聯(lián)明膠與復(fù)水助劑一起可以以任意適于形成合適的水凝膠基質(zhì)的方式進(jìn)行交聯(lián)。根據(jù)本優(yōu)選實(shí)施方式的干燥的交聯(lián)明膠粉優(yōu)選通過在特定的復(fù)水助劑的存在下制備粉末而獲得。這樣的復(fù)水助劑將會(huì)存在于制備粉末的過程中，但通常會(huì)從最終產(chǎn)品中移除。例如，以約20%的總固體含量存在的復(fù)水助劑典型地被減少至低于最終產(chǎn)品的1%，通常低于O. 5% (以重量計(jì))。示例性的復(fù)水助劑包括聚乙二醇(PEG)，優(yōu)選其具有約1000的分子量；聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，優(yōu)選其具有約50，000的平均分子量；以及葡聚糖，其典型地具有約40，000的平均分子量。優(yōu)選在制備本發(fā)明的組合物時(shí)采用上述復(fù)水助劑的至少兩種，尤其更優(yōu)選采用所有的三種。用于制備交聯(lián)明膠的示例性的方法如下。明膠在水溶液中獲得并被懸浮以形成非交聯(lián)水凝膠，其典型地具有I % 70% (以重量計(jì))的固體含量，通常為3% 10% (以重量計(jì))。典型地通過暴露于戊二醛(例如，O. 01% O. 05% w/w，在含水緩沖液中、在0°C 15°C下過夜)、高碘酸鈉(例如，O. 05M,于(TC 15°C處保持48小時(shí))、或1-乙基-3- (3- 二甲基氨基丙基)碳二酰亞胺(“EDC”)(例如，O. 5% ^1.5% w/w，在室溫下過夜)的任意一種，或通過暴露于約O. 3 3兆拉德的Y射線或電子束輻射，來使明膠交聯(lián)?？蛇x地，明膠顆?？梢砸?% 70% (以重量計(jì))、通常3% 10% (以重量計(jì))的固體含量懸浮于醇，優(yōu)選甲醇或乙醇中，并通過暴露于交聯(lián)劑而交聯(lián)，所述交聯(lián)劑典型地為戊二醛(例如，O. 01% O. 1% w/w,在室溫下過夜)。醛類的情況下，PH值應(yīng)保持在約6 11，優(yōu)選疒10。當(dāng)用戊二醛進(jìn)行交聯(lián)時(shí)，交聯(lián)通過希夫堿(Schiff bases)形成,所述希夫堿通過隨后的還原，比如通過用硼氫化鈉處理可被穩(wěn)定。交聯(lián)后，可將所得顆粒在水中洗滌，并可選地用醇沖洗，然后干燥。接著，將制得的干粉末提供于此處所述的最終容器中。交聯(lián)后，至少50% (w/w)復(fù)水助劑將從所得水凝膠中移除。通常，通過過濾水凝膠、洗滌所得的濾餅而移除復(fù)水助劑。這樣的過濾/洗滌步驟可以重復(fù)一次或多次，以便將將產(chǎn)品清洗至滿意的級(jí)別，并除去至少50%的復(fù)水助劑，優(yōu)選除去初始存在的復(fù)水助劑的至少90% (w/w)0過濾后，典型地通過干燥最終得到的濾餅來干燥明膠。然后將干燥的濾餅破碎或研磨，以制備具有上述所陳述的理想粒徑范圍的交聯(lián)粉末。根據(jù)優(yōu)選實(shí)施方式，所述最終容器進(jìn)一步包括一定量的可有效防止聚合物在暴露于滅菌射線時(shí)的變性的穩(wěn)定劑，其優(yōu)選為抗壞血酸、抗壞血酸鈉、抗壞血酸的其他鹽或抗氧化劑。根據(jù)另一個(gè)方面，本發(fā)明還提供用于將止血組合物運(yùn)送至患者身體靶位的方法，所述方法包括將通過根據(jù)本發(fā)明的方法制備的止血組合物運(yùn)送至靶位。雖然在某些實(shí)施方式中，也可將干燥的組合物直接應(yīng)用于靶位(且必要時(shí)，可選地使其在靶位處與稀釋劑接觸)，優(yōu)選在對(duì)靶位給藥前使干燥的止血組合物與藥學(xué)上可接受的稀釋劑接觸，以便獲得濕的形式尤其是水凝膠形式的止血組合物。本發(fā)明還涉及通過根據(jù)本發(fā)明的方法獲得的最終容器。所述最終容器包含無菌的、儲(chǔ)存穩(wěn)定的及可出售形式的組合組分。 本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種用于提供即用型止血組合物的方法，所述方法包括使根據(jù)本發(fā)明的方法制備的止血組合物與藥學(xué)上可接受的稀釋劑接觸。本發(fā)明還涉及一種試劑盒，其包含根據(jù)本發(fā)明的成品形式的干燥、穩(wěn)定的止血組合物及含有適宜的稀釋劑的容器。所述試劑盒的其他組件可以是使用說明、給藥裝置，比如注射器，導(dǎo)管，刷子等(如果組合物尚未通過給藥裝置提供)、或其他醫(yī)療(外科手術(shù))操作中需要使用的組件，比如替代針管或?qū)Ч?、額外的小瓶或進(jìn)一步覆蓋傷口的裝置。優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的試劑盒包含裝有干燥、穩(wěn)定的止血組合物的注射器及含有稀釋劑的注射器(或被提供用以采集來自另一稀釋劑容器的稀釋劑)。優(yōu)選這兩種注射器以適于彼此的形式被提供，以便稀釋劑可通過用于給藥復(fù)原組合物的出口之外的另一入口被運(yùn)送至干燥的止血組合物。在下面的實(shí)施例中進(jìn)一步描述本發(fā)明，但本發(fā)明不限制于此。實(shí)施例1.根據(jù)本發(fā)明的干燥的止血組合物的制備材料及方法所有的實(shí)施例都采用同樣的組合，即提供試劑盒，其具有一個(gè)包含穩(wěn)定形式的Floseal明膠基質(zhì)和凝血酶的注射器、以及一個(gè)含有適宜的液體復(fù)原介質(zhì)(例如O. 9 %NaCl，或40mM CaCl2)的注射器。兩個(gè)注射器的內(nèi)部和外部都是無菌的，所以整個(gè)復(fù)原都可由手術(shù)室(Operation theater)的洗手護(hù)士進(jìn)行。通過以熟悉的方式連通兩個(gè)注射器并通過“傾倒”混合兩個(gè)注射器中的成分(即在兩個(gè)注射器之間來回重復(fù)地轉(zhuǎn)移成分)，來完成復(fù)原。實(shí)施例“粉末混合”(Cl) 所述“粉末混合”實(shí)施例是通過混合干燥明膠和凍干的凝血酶，并且將其填充入單個(gè)注射器中來實(shí)施的。如果可適用，則明膠基質(zhì)通過射線被大量滅菌(與用于已經(jīng)市售的產(chǎn)品的最終滅菌相同)。實(shí)施例“在注射器Lyo中的凝血酶”(c2)所述“在注射器Lyo中的凝血酶”是通過首先在Floseal注射器中凍干凝血酶溶液，然后將明膠顆粒填充于凍干的凝血酶的上部來實(shí)施的。如果可適用，則明膠基質(zhì)通過射線被大量滅菌(與用于現(xiàn)有產(chǎn)品的最終滅菌相同)。配制凝血酶溶液并將其填充入止動(dòng)的Floseal注射器，其允許從用于閉合容器的注射器的內(nèi)部排氣。使用合適的凍干程序來冷凍和凍干所述凝血酶溶液。注射器并不是在后部被止動(dòng)來允許明膠粉末從后部填充。所需量的明膠被填充至凝血酶凍干制劑的上部。然后在注射器主體中設(shè)置活塞。將注射器置于合適的排氣室的內(nèi)部的支架中，所述排氣室具有用于止動(dòng)注射器的活動(dòng)板。在排氣使得所述注射器閉合后，所述活動(dòng)板在注射器活塞上被向下推動(dòng)。其也用于壓縮凍干濾餅，以使其占據(jù)注射器內(nèi)部很小的空間?，F(xiàn)在，所述產(chǎn)品可隨時(shí)與稀釋劑注射器、EPO滅菌袋包裝在一起，然后儲(chǔ)存。稀釋劑注射器稀釋劑注射器包括用于使產(chǎn)品復(fù)水的合適的復(fù)原介質(zhì)。其可與Floseal注射器直接連接或通過連接器連接。稀釋劑被轉(zhuǎn)移至Floseal注射器中，并且復(fù)水產(chǎn)品在連接的注射器之間反復(fù)來回地轉(zhuǎn)移，以產(chǎn)生可流動(dòng)的糊劑。例如，稀釋劑注射器可以通過下述的方法來制造所述介質(zhì)被無菌過濾并且被填充入合適的注射器中(如Toppac注射器、Clearshot等)；并且如果需要，通過輻射進(jìn)行最終滅菌。明膠顆粒根據(jù)已建立的方法(W098/08550A ；W02003/00785A ;等)進(jìn)行明膠顆粒塊體生產(chǎn)。所述顆粒(“Floseal”顆?！?“Floseal”基質(zhì))通過Y-輻射立即滅菌。將Floseal基質(zhì)填充到適當(dāng)大小的肖特玻璃瓶中以進(jìn)行臨床前滅菌。在目前最大的生物負(fù)荷水平下(IOOOcfu/樣品)，最終容器中的產(chǎn)品的所需輻射劑量是25 40kGy。然后,在_20°C下儲(chǔ)存塊體材料(bulk material)用于進(jìn)一步的制造。Cl 粉末混合”凝血酶制劑在本實(shí)施例中的滅菌凝血酶粉末通過兩種不同的方式制造通過以無菌方式研磨凍干的凝血酶或通過無菌噴霧干燥。塊體凍干之后緊接著進(jìn)行無菌研磨將配制的500IU/ml凝血酶、50g/l的人血清蛋白(HSA)和4，4g/l的NaCl的凝血酶溶液轉(zhuǎn)移至層流凈化罩中合適大小的無菌凍干托盤中，然后用無菌鋁箔覆蓋所述托盤用于將其運(yùn)送至凍干步驟中。將所述凍干托盤置于干凈的凍干器中，并且用合適的程序進(jìn)行凍干。完成凍干之后，用醫(yī)療等級(jí)的氮?dú)鈱?duì)凍干器進(jìn)行通風(fēng)，并且再次用無菌鋁箔覆蓋所述凍干托盤。對(duì)于使用RetschMM200球磨機(jī)的研磨，通過高壓滅菌法或酒精浸泡的任一種對(duì)25ml的有螺口蓋的研磨容器和合適的研磨球(12mm)進(jìn)行滅菌，然后將無菌研磨容器運(yùn)送至層流凈化罩中。研磨容器被適量的凍干凝血酶填充，并且加入無菌研磨球。然后，所述容器通過螺口蓋封閉并且被送至球磨機(jī)進(jìn)行研磨。研磨之后，所述容器被送回層流凈化罩中，在此處用無菌勺將其清空至無菌收集容器(50ml的Falcon或玻璃瓶)中并且再次填充用于再次研磨。無菌噴霧干燥對(duì)臨床前產(chǎn)品的噴霧干燥使用設(shè)置有用于載氣的氣體調(diào)節(jié)裝置(Gasconditioning)的Biichi噴霧器來進(jìn)行。 將無菌凝血酶和明膠粉末填充入注射器將兩種分析量的無菌粉末相繼填充入Floseal注射器中。Floseal基質(zhì)的重量作為填充重量(單位g) =70, 4/固體含量(比值單位為％)被計(jì)算，以確保將704mg的干燥的Floseal基質(zhì)填充入注射器。每5ml的Floseal最終產(chǎn)品中含有2000IU凝血酶的凝血酶粉末的重量是4 (ml) X55 (mg/ml) =220mg。以+/-5%精確度進(jìn)行填充，需對(duì)每批Floseal基質(zhì)進(jìn)行極限(limit)的計(jì)算。首先，將研磨的凝血酶粉末填充入無菌Floseal注射器，所述Floseal注射器已經(jīng)被合適的滅菌魯爾接頭(Luer cap)封閉并且使用小的支架將其置于分析天平上。將天平去皮重，并且使用帶有合適的配件的滅菌手動(dòng)勺或振動(dòng)勺的任一種將適量的凝血酶粉末填充入注射器中。接著再次將天平去皮重，并且使用帶有合適的配件的滅菌手動(dòng)勺或振動(dòng)勺的任一種將適量的Floseal基質(zhì)填充入注射器中。如果需要，接著將活塞從背面設(shè)置于Floseal基質(zhì)的正上方的位置，如果需要，通過輕微打開魯爾接口塞進(jìn)行?？蛇x地，填充的順序可以顛倒，使得凝血酶粉末處于注射器的后部?？蛇x地，兩種粉末可以在填充前混合，省略第二填充步驟。c2 在注射器Iyo中的凝血酶”將4，Oml的500IU/ml的凝血酶填充入凍干注射器中，在真空下凍干并且壓縮。然后通過將其填充在壓縮的凝血酶的上部，稱量Floseal明膠將其填充入注射器。關(guān)閉注射器并且在真空下再次壓縮。所有的步驟均在無菌條件下完成。2.在豬肝損傷模型中的有效性本研究的目的在于比較根據(jù)本發(fā)明的干燥的止血組合物與已經(jīng)出品的標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品(Floseal VH S/D ;巴克斯特保健公司)在豬肝損傷模型中的有效性。Floseal VH S/D是一種明膠基質(zhì)，其可在應(yīng)用2分鐘之內(nèi)運(yùn)送凝血酶以止住活動(dòng)性出血。這種產(chǎn)品需要2步制備，即(I)復(fù)原凝血酶以及(2)用復(fù)原的凝血酶使明膠顆粒水化。根據(jù)本發(fā)明的產(chǎn)品被設(shè)計(jì)為通過一個(gè)步驟使干燥的止血組合物復(fù)原，這相對(duì)于2步制備具有顯著的進(jìn)步，所述2步制備在需要迅速或大量使用產(chǎn)品時(shí)是不利的。豬肝臟損傷模型進(jìn)行外科手術(shù)時(shí),稱量六頭從Oak Hill Genetics公司(Ewing,伊利諾伊州)獲得的平均體重為55. Okg (在52. 4 58. 4kg的范圍)的雌性家豬。抵達(dá)后，將動(dòng)物隔離觀察6天。手術(shù)時(shí)，所有的六頭豬皆未表現(xiàn)出臨床疾病。使用耳標(biāo)以識(shí)別動(dòng)物并且分配識(shí)別編號(hào)使它們互相參照。將動(dòng)物群飼于圍欄內(nèi)。豬自由進(jìn)水，每日進(jìn)食一次標(biāo)準(zhǔn)豬糧。豬類是被廣為接受的心血管模型并且其適于進(jìn)行這類研究。其肝臟的多個(gè)大的葉片允許多個(gè)用于直接比較不同測(cè)試項(xiàng)目的損傷。麻醉及輸液療法用咪達(dá)唑侖(O. 3mg/kg, IM)醫(yī)治豬并用氮?dú)馀c氧氣2:1的載體攜帶的異氟醚對(duì)其進(jìn)行口罩誘導(dǎo)(masked induced)。對(duì)豬插管，以10 15次呼吸/min進(jìn)行通氣。用氧氣載體攜帶的異氟醚對(duì)豬進(jìn)行持續(xù)麻醉。用溫?zé)岬娜樗崃指袷弦簩?duì)豬進(jìn)行持續(xù)比率的輸液肝損傷方法將豬肝損傷模型用于本項(xiàng)研究。準(zhǔn)備6頭豬，目標(biāo)在于評(píng)價(jià)120個(gè)損傷(每治療組40個(gè))并用α =0.05、功率=90%足以檢測(cè)80%對(duì)40%的比率差。每組都依賴于中間、左側(cè)或右側(cè)葉片。每個(gè)損傷組包含使用配設(shè)了砂紙的手搖鉆制造出的3個(gè)直徑為1cm、深3 4_的肝損傷。評(píng)價(jià)出血，并用參照對(duì)象或試驗(yàn)對(duì)象對(duì)損傷進(jìn)行隨機(jī)、無偏見地處理。參照對(duì)象和試驗(yàn)對(duì)象使用隨機(jī)數(shù)產(chǎn)生器進(jìn)行隨機(jī)化。將各個(gè)對(duì)象置于損傷的上面，用濕紗布按住2分鐘，對(duì)治療2、5和10分鐘后的止血情況進(jìn)行無偏見評(píng)價(jià)。5分鐘評(píng)價(jià)后對(duì)剩下的參照對(duì)象或試驗(yàn)對(duì)象進(jìn)行灌洗。肝素化協(xié)議 設(shè)置基準(zhǔn)全血激活凝血時(shí)間(ACT)并且對(duì)每頭豬給予負(fù)荷劑量200IU/kg的肝素。每10分鐘測(cè)定一次ACT直至ACT為至少2倍基準(zhǔn)值。如果測(cè)得的ACT小于或約等于2倍基準(zhǔn)值，則對(duì)豬給予75IU/kg的單次劑量的肝素。一旦大于2倍基準(zhǔn)值，每20分鐘測(cè)定一次ACT。若測(cè)得的ACT小于或約等于作為目標(biāo)的2倍基準(zhǔn)值，則給予豬單次劑量40IU/kg的肝素。若測(cè)得ACT大于作為目標(biāo)的2倍基準(zhǔn)值，則對(duì)豬不作處理、或給予維持劑量的肝素，其不得超過2，000IU/ho所有肝素都通過外周靜脈導(dǎo)管給藥。所有的血液樣本都從頸靜脈導(dǎo)管取得。血壓及心率的參考值在測(cè)定ACT時(shí)記錄。止血評(píng)價(jià)建立及治療損傷組后，在0、2、5及10分鐘時(shí)評(píng)價(jià)止血情況，其中，O分鐘指預(yù)處理階段。將0、1、2、3、4及5的分?jǐn)?shù)分別指定為不出血、滲出、非常溫和、溫和、中等及嚴(yán)重。所有的三個(gè)損傷都在幾乎相同的時(shí)間下處理，以避免位置及凝血因各自獨(dú)立處理而產(chǎn)生差異。根據(jù)需要，各次評(píng)價(jià)后吸去來自損傷的血液。測(cè)量及記錄通過標(biāo)準(zhǔn)方法評(píng)價(jià)ACT、止血、血壓及心率。統(tǒng)計(jì)分析本研究的采樣單元為對(duì)于總計(jì)120個(gè)損傷來說，每個(gè)治療組中具有40個(gè)損傷的肝損傷位。采用多元回歸分析，根據(jù)治療2、5及10分鐘后的出血分?jǐn)?shù)評(píng)價(jià)治療效果(0=不出血、1=滲出、2=非常輕微，3=輕微、4=中度及5=嚴(yán)重)。獨(dú)立的變量包括治療組、豬、肝葉(中間、右側(cè)或左側(cè))及初始出血分?jǐn)?shù)。在治療后的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)處計(jì)算FB/FS、Lyo/FS、FB/Lyo、以及它們的置信區(qū)間(confidence intervals)的機(jī)會(huì)比率(odds ratios)。
損傷部位不均勻地分布于三枚葉片及豬上。發(fā)現(xiàn)葉片的影響不顯著，因此去除該影響再次進(jìn)行分析。下述結(jié)果是對(duì)沒有葉片影響的模型的分析。結(jié)果
根據(jù)本發(fā)明的干燥的止血組合物的性能并不在所有的時(shí)間點(diǎn)處均顯著不同于Floseal VH S/D。這表明，根據(jù)本發(fā)明的制備方法(cl/c2)以及I步復(fù)原方式?jīng)]有對(duì)所述組合物的性能產(chǎn)生負(fù)面影響，但卻給實(shí)際處理帶來了預(yù)期優(yōu)勢(shì)，據(jù)此證明本發(fā)明的目的得以解決。進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在非常嚴(yán)格的模型中(高度抗凝血)，進(jìn)行臨床前評(píng)價(jià)以比較“粉末混合”和“在注射器Lyo中的凝血酶”的Floseal與Floseal VH的體內(nèi)活性。所述模型包括具有以十字交叉的方式從穿刺病灶處發(fā)散的4個(gè)追加切口的總厚度5mm的肝穿刺。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組使用6只動(dòng)物，這些動(dòng)物被給予4. 0001. U. /kg肝素。在損傷被放置之后，應(yīng)用復(fù)原的Floseal，并用濕紗布以輕微的壓力按住2分鐘。在此時(shí)間后，評(píng)價(jià)初期止血。若未實(shí)現(xiàn)初期止血，重新應(yīng)用產(chǎn)品直至實(shí)現(xiàn)止血，或產(chǎn)品以(5ml)/時(shí)間(15min)被耗盡。主要的終點(diǎn)是初期止血的實(shí)現(xiàn)(是/否)及止血時(shí)間(min)。若初期止血被實(shí)現(xiàn)，則縫合動(dòng)物，并在24小時(shí)后評(píng)價(jià)動(dòng)物的再出血。所有的實(shí)施例(cl/c2)的結(jié)果顯示，在這種特殊的臨床前實(shí)驗(yàn)階段，就止血時(shí)間來說，本發(fā)明的組合物相當(dāng)于或優(yōu)于標(biāo)準(zhǔn)Floseal。
權(quán)利要求
1.一種用于制備干燥、穩(wěn)定的止血組合物的方法，所述方法包括 a)提供第一組分，其含有凝血誘導(dǎo)劑的干制劑， b)提供第二組分，其含有適用于止血的生物相容性聚合物的干制劑， c)通過下述方式，在最終容器中提供組合形式的所述第一組分和所述第二組分， Cl)將所述第一組分和所述第二組分填充入所述最終容器中來獲得所述最終容器中的干混合物，或者 c2)在所述最終容器中提供所述第一組分或所述第二組分，以及添加所述第二組分或所述第一組分來獲得在所述最終容器中的所述第一組份與所述第二組分的組合， d)將所述最終容器完成為可儲(chǔ)存的給藥器，其含有組合形式的所述第一組分和所述第二組分來作為干燥、穩(wěn)定的止血組合物。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟Cl)或步驟c2)在無菌條件下進(jìn)行。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，步驟c2)以如下方式實(shí)施通過凍干所述最終容器中的凝血誘導(dǎo)劑的含水制劑來提供所述最終容器中的所述第一組分，以及在凍干之后添加所述第二組分。
4.如權(quán)利要求f3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述步驟d)包含環(huán)氧乙烷滅菌步驟或電離輻射處理。
5.如權(quán)利要求1 4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述第一組分是干燥的凝血酶制劑，優(yōu)選為顆粒形式，優(yōu)選為粉末形式。
6.如權(quán)利要求1飛中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述第一組分含有通過噴霧干燥、優(yōu)選通過無菌噴霧干燥獲得的凝血酶。
7.如權(quán)利要求1飛中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟c2)通過在組合之后混合所述第一組分和所述第二組分來進(jìn)行。
8.如權(quán)利要求Γ7中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，注射器用作所述最終容器。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述注射器是將稀釋劑注射器配以藥學(xué)上可接受的稀釋劑而得到的注射器，所述稀釋劑用于復(fù)原所述干燥、穩(wěn)定的止血組合物。
10.如權(quán)利要求1、中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述第一組分含有人凝血酶。.
11.如權(quán)利要求廣10中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述第一組分含有重組人凝血酶。
12.如權(quán)利要求f11中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述適用于止血的生物相容性聚合物含有選自于由明膠、可溶性膠原蛋白、白蛋白、血紅蛋白、纖維蛋白原、纖維蛋白、酪蛋白、纖維連接蛋白、彈性蛋白、角蛋白及層粘連蛋白構(gòu)成的組中的蛋白質(zhì)；或它們的衍生物或組合。
13.如權(quán)利要求f12中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述適用于止血的生物相容性聚合物含有選自于由糖胺聚糖、淀粉衍生物、纖維素衍生物、半纖維素衍生物、木聚糖、瓊脂糖、藻酸鹽及殼聚糖構(gòu)成的組中的多糖；或它們的衍生物或組合。
14.如權(quán)利要求f13中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述適用于止血的生物相容性聚合物含有選自于由聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚乙烯樹脂、聚丙交酯-乙交酯、聚己內(nèi)酯及聚氧乙烯構(gòu)成的組中的聚合物；以及它們的衍生物和組合。
15.如權(quán)利要求f14中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述適用于止血的生物相容性聚合物含有交聯(lián)多糖、交聯(lián)蛋白、或交聯(lián)非生物聚合物；或它們的混合物。
16.如權(quán)利要求f15中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述適用于止血的生物相容性聚合物為顆粒材料，優(yōu)選為顆粒狀材料。
17.如權(quán)利要求f16中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述適用于止血的生物相容性聚合物為交聯(lián)明膠。
18.如權(quán)利要求f17中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述最終容器進(jìn)一步含有可有效抑制聚合物因暴露于滅菌射線時(shí)的變性的量的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑優(yōu)選為抗壞血酸、抗壞血酸鈉、抗壞血酸的其他鹽、或抗氧化劑。
19.一種用于將止血組合物運(yùn)送至患者身體的靶位的方法，所述方法包括將通過如權(quán)利要求f 18中任一項(xiàng)所述的方法制備的止血組合物運(yùn)送至靶位。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其進(jìn)一步包含使所述止血組合物與藥學(xué)上可接受的稀釋劑接觸以獲得水凝膠形式的止血組合物的步驟。
21.—種最終容器，其通過如權(quán)利要求1 18中任一項(xiàng)所述的方法獲得。
22.一種用于提供即用型止血組合物的方法，其包括使通過如權(quán)利要求f 18中任一項(xiàng)所述的方法制備的止血組合物與藥學(xué)上可接受的稀釋劑接觸。
23.用于給藥止血組合物的試劑盒，其包含權(quán)利要求21所述的最終容器和配有藥學(xué)上可接受的稀釋劑的容器。
全文摘要
本發(fā)明描述的是一種用于制備干燥、穩(wěn)定的止血組合物的方法，所述方法包括a)提供第一組分，其含有凝血誘導(dǎo)劑的干制劑，b)提供第二組分，其含有適用于止血的生物相容性聚合物的干制劑，c)在最終容器中以組合形式提供所述第一組分和所述第二組分c1)通過將所述第一組分和所述第二組分填充入所述最終容器中來獲得在所述最終容器中的干混合物，或者c2)通過在所述最終容器中提供所述第一組分或所述第二組分并且添加所述第二組分或所述第一組分來獲得在所述最終容器中的所述第一組份與所述第二組分的組合，d)將所述最終容器最終轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓛?chǔ)存的給藥器，其作為干燥、穩(wěn)定的止血組合物含有組合形式的所述第一組分和所述第二組分。
文檔編號(hào)A61L24/10GK103037847SQ201180037586
公開日2013年4月10日 申請(qǐng)日期2011年6月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月1日
發(fā)明者A·格斯?fàn)? A·E·奧薩瓦, C·J·賴布 申請(qǐng)人:巴克斯特國(guó)際公司, 巴克斯特保健股份有限公司