專利名稱：血管生成素樣3表達的調(diào)節(jié)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本文提供的是減少血管生成素樣3(ANGPTL3)mRNA和蛋白在動物中的表達的方法、化合物和組合物。同時，本文提供的是具有用于減少動物的ANGPTL3相關(guān)疾病或疾患的ANGPTL3抑制劑的方法、化合物和組合物。此類方法、化合物和組合物例如用于治療、預(yù)防、延緩或減輕動物的ー種或多種心血管疾病或代謝綜合征或 其癥狀。
背景技術(shù)：
糖尿病和肥胖癥(有時統(tǒng)稱為“糖尿病-肥胖癥(diabesity)”)是相關(guān)的，因為已知肥胖癥加重糖尿病的病理學(xué)并且大于60%的糖尿病是肥胖的。大多數(shù)人肥胖癥與胰島素抵抗和瘦素抵抗相關(guān)。實際上，已提出肥胖癥可對胰島素作用的影響比糖尿病本身更大(Sindelka等人，Physiol Res.，2002，51，85-91)。此外，市場上用于治療糖尿病的數(shù)種化合物已知誘導(dǎo)體重増加，這對疾病的治療而言是ー種極不受歡迎的副作用。心血管疾病也是與肥胖癥和糖尿病相關(guān)。心血管疾病包括多種病因?qū)W并且具有同樣廣泛的致病因子和相關(guān)利益相關(guān)者。很多致病因子有助于癥狀例如升高的膽固醇(包括非-HDL膽固醇)血漿水平以及其它脂質(zhì)相關(guān)病癥。此類脂質(zhì)相關(guān)病癥(通常稱為血脂障礙)除了包括其它適應(yīng)癥之外，還包括聞脂血癥、聞膽固醇血癥和尚甘油ニ酷血癥。升聞的非-HDL膽固醇與動脈粥樣硬化及其后遺癥(包括心血管疾病例如動脈粥樣硬化、冠心病、心肌梗塞、缺血性休克及其它心臟病形式相關(guān)。這些在エ業(yè)化國家中是最普遍的疾病類型。實際上，美國中估計有1200萬人罹患冠心病并且約3600萬人需要用于升高膽固醇水平的治療。流行病和實驗證據(jù)已顯示高水平的循環(huán)甘油三酯(TG)可有助于心血管疾病和多種代謝病癥(Valdivielso 等人，2009, Atherosclerosis. 207 (2) : 573-8 ；Zhang 等人，2008,Circ Res. I ; 102 (2) :250-6)。在來自小腸的乳糜顆粒中或在來自肝的極低密度脂蛋白(VLDL)中并入且分泌從外源性或內(nèi)源性來源衍生的TG。一旦在循環(huán)中，TG被脂蛋白脂酶(LpL)水解并且所得游離脂肪酸然后可被局部組織吸收并且用作能源。由于通常LpL對血漿TG和代謝具有極高的效應(yīng)，發(fā)現(xiàn)和開發(fā)影響LpL活性的化合物是非常感興趣。代謝綜合征是增加個人患上心血管疾病和糖尿病的風(fēng)險的醫(yī)學(xué)病癥的組合。癥狀(包括高血壓、高甘油三酷、降低的HDL和肥胖癥)在某些個體中趨向于一起出現(xiàn)。其以集聚方式影響許多人。在ー些研究中，在USA的患病率被計算成高達25%的人口。代謝綜合征以各種其它名稱廣為人知，例如(代謝)綜合征X、胰島素抵抗綜合征、Reaven綜合征或CHAOS。在心血管病癥和代謝病癥的高患病率下，仍保持對治療這些疾患的改進方法的需求。
血管生成素是分泌型生長因子的家族。與其相應(yīng)內(nèi)皮特異性受體一起，血管生成素在血管發(fā)生中起著重要的作用。一個家族成員血管生成素樣3 (也稱為ANGPT5、ANGPTL3或血管生成素5)主要在肝中表達，并且被認(rèn)為在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝中起作用(Kaplan等人，J.脂質(zhì) Res.，2003，44，136-143)。作為檢索組合的EST數(shù)據(jù)庫的結(jié)果，血管生成素樣3的人基因被鑒定且被克隆。全長人cDNA編碼460氨基酸的多肽，該多肽具有血管生成素的特有結(jié)構(gòu)特征信號肽、延長的螺旋狀結(jié)構(gòu)域、短接頭肽和球狀纖維蛋白原同源性結(jié)構(gòu)域(FHD)。發(fā)現(xiàn)小鼠血管生成素樣3cDNA編碼與人多肽具有76%同一性的455氨基酸多肽。血管生成素的對準(zhǔn)顯示血管生成素樣3不像其它家庭成員，不包含決定I丐結(jié)合位點的酸性殘基的基序。Northern印跡分析揭示主要在成人組織的肝中的表達，而鼠胚胎Northern印跡顯示早在第15天就存在轉(zhuǎn)錄物，表明血管生成素樣3在肝發(fā)育期間的早期被表達且成年肝中維持表達。小鼠基因定位于染色體4，而人基因定位于lp31區(qū)域(Conklin等人，Genomics，1999，62，477-482)。KK肥胖小鼠具有中度肥胖癥的多基因綜合征和類似人遺傳性2型糖尿病的糖尿 病表型。這些小鼠顯不聞膜島素血癥、聞血糖癥和聞脂血癥的征兆。稱為KK/San的KK小鼠品系具有顯著低的血漿脂質(zhì)水平，盡管具有高胰島素血癥和高血糖癥的征兆。突變表型被隱性遺傳，并且基因座被稱為高脂質(zhì)血癥(hypl)?；蜃ㄎ挥谌旧w4的中間，并且該基因通過定位克隆被鑒定為血管生成素樣3。包含突變體KK/San小鼠中的全長小鼠或人血管生成素樣3cDNA的重組體腺病毒的注射引起甘油三酯、總膽固醇和非酯化脂肪酸(NEFA)的血漿水平的增加。類似地，將重組血管生成素樣3蛋白注射到突變體小鼠中增加了甘油三酯和非酯化脂肪酸的水平(Koishi等人，Nat. Genet.，2002，30，151-157)。在另一項專注于甘油三酯在KK/San小鼠中的代謝途徑的研究中，血管生成素樣3的過表達導(dǎo)致富集甘油三酯的極低密度脂蛋白(VLDL)的顯著增加。肝VLDL甘油三酯分泌率的差異在野生型KK與KK/San小鼠之間不顯著。然而，用標(biāo)記VLDL的研究表明KK/San小鼠中的低血漿甘油三酯水平主要歸因于增加的VLDL甘油三酯的酯解而不是增加的整顆粒攝取。KK/San小鼠的血漿apoBlOO和apoB48水平與野生型KK小鼠類似。ApoCIII缺陷型小鼠與KK/San小鼠具有類似的表型，并且認(rèn)為ApoCIII通過抑制VLDL甘油三酯的脂酶介導(dǎo)的水解的調(diào)節(jié)VLDL甘油三酯代謝。重組蛋白的體外分析揭示，血管生成素樣3直接抑制脂蛋白脂酶(LPL)活性(Shimizugawa 等人，J. Biol. Chem.，2002，277，33742-33748)。與脂質(zhì)代謝中的作用一致，發(fā)現(xiàn)血管生成素樣3mRNA在正常飼料飲食和4%膽固醇喂養(yǎng)的C57BL/6J小鼠和在用肝X受體(LXR)激動劑T0901317處理的鼠中上調(diào)。LXR是配體激活的轉(zhuǎn)錄因子，其在調(diào)節(jié)在肝和外周組織中支配膽固醇體內(nèi)穩(wěn)態(tài)的基因方面起作用。除膽固醇代謝之外，LXR還可在調(diào)節(jié)脂肪酸代謝的方面起作用。用激活LXR的天然或合成活性劑處理IfepG2細(xì)胞導(dǎo)致增加的血管生成素樣3表達。發(fā)現(xiàn)人血管生成素樣3基因的啟動子含有LXR反應(yīng)元件。此外，對于其它轉(zhuǎn)錄因子(包括HNF-1、HNF-4和C/EBP)而言，啟動子包含數(shù)種蛋白結(jié)合位點(Kaplan等人，J. Lipid Res. , 2003,44,136-143)。用T0901317處理嚙齒類動物與肝和血漿中的甘油三酯蓄積相關(guān)。肝甘油三酯蓄積通過增加的留醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白_lc(SREBP Ic)和脂肪酸合酶(FAS)(兩者均為LXR的靶)的表達來解釋。T0901317未能增加血管生成素樣3缺陷型小鼠中的血漿甘油三酯濃度，而經(jīng)刺激的肝甘油三酯蓄積與在經(jīng)處理的野生型小鼠中觀察到的類似。用T0901317處理的野生型小鼠中的血漿甘油三酯的升高類似血管生成素樣3mRNA在肝中的誘導(dǎo)和增加的蛋白血漿濃度(Inaba 等人，J. Biol. Chem.，2003，278，21344-21351)。更多的研究解決在用外源性血管生成素樣3處理的KK/Snk小鼠中觀察到的血漿游離脂肪酸(FFA)水平的増加。用熒光標(biāo)記的血管生成素樣3蛋白固定的人組織的探針證實，僅在脂肪組織上具有強結(jié)合。而且，在3T3-L1脂肪細(xì)胞中檢查放射性標(biāo)記的蛋白結(jié)合并且發(fā)現(xiàn)是可飽和的且特異性的。用血管生成素樣3孵育3T3-L1脂肪細(xì)胞導(dǎo)致増加的FFA和甘油進入培養(yǎng)基中的釋放(Shimamura 等人，Biochem. Biophys. Res. Commun. ,2003,301，604-609)。
在使用鏈脲霉素處理的小鼠(STZ)模擬胰島素缺陷型狀態(tài)并且使用db/db小鼠模擬胰島素抗性糖尿病狀態(tài)的研究中，相比于對照動物，在糖尿病小鼠中觀察到大量肝血管生成素樣3。糖尿病的兩種模型顯示高甘油三酯血癥，且由增加的血管生成素樣3表達則可至少部分地解釋觀察到的高脂血癥。這些結(jié)果表明，血管生成素樣3是糖尿病與血脂障礙之間的連接，升高將促進高脂血癥(Inukai等人，Biochem. Biophys. Res. Commun. , 2004,317，1075-1079)。隨后研究檢查了瘦素和胰島素對血管生成素樣3的調(diào)節(jié)，兩者均是代謝綜合征的關(guān)鍵參與者。相比于對照，在瘦素抗性db/db和瘦素缺陷型ob/ob小鼠中的血管生成素樣3表達和血漿蛋白水平増加。用瘦素補充ob/ob小鼠減少血管生成素樣3水平。表達的變化與血漿甘油三酯和游離脂肪酸水平的變化相關(guān)。在胰島素缺陷型的STZ處理的小鼠中的基因表達和血楽■蛋白水平也增加(Shimamura等人,Biochem Biophys Res Commun, 2004,322,1080-1085)。根據(jù)其血管生成素家族中的成員，發(fā)現(xiàn)重組血管生成素樣3蛋白與av03整合素結(jié)合以及誘導(dǎo)的整合素a J3依賴性趨觸性內(nèi)皮細(xì)胞粘著和遷移。其也刺激對整合素激活特有的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。血管生成素樣3在大鼠角膜血管發(fā)生試驗中強烈地誘導(dǎo)血管發(fā)生(Camenisch 等人，J. Biol. Chem.，2002，277，17281-17290)。通過數(shù)個組進行測量基因組的與HDL、LDL和甘油三酯的血漿濃度相關(guān)的共有變體的基因組相關(guān)性掃描(GWAS)。GWAS研究發(fā)現(xiàn)甘油三酯與鄰近ANGPTL3的單核苷酸多態(tài)現(xiàn)象(SNP)之間的聯(lián)系(Wilier 等人，Nature Genetics, 2008,40 (2) : 161-169)。U. S.專利 7，267，819、申請 USSN 12/128，545 和申請 USSN12/001, 012 通常描述血管生成素樣3激動劑和拮抗劑。PCT 公布 W0/02101039(EP02733390)和 W0/0142499 (USSN10/164, 030)公開了與小鼠血管生成素樣3互補的核酸序列(Ryuta，2002 ；Ryuta,2001)。目前缺乏用于治療心血管和代謝病癥的可接受的選擇。因為，本文的目的是提供用于治療此類疾病和病癥的化合物和方法。血管生成素樣3在脂質(zhì)代謝中的潛在作用使其成為對于研究有吸引力的靶。反義技術(shù)作為用于減少某些基因產(chǎn)物的表達的有效方法出現(xiàn)并且由此可證明其可獨特地用于多種調(diào)節(jié)血管生成素樣3的治療、診斷和研究應(yīng)用。發(fā)明概述本文提供的是可用于經(jīng)由作用反義機理例如RNA酶H、RNAi和dsRNA酶，以及其它基于靶降解或靶占有的反義機理來調(diào)節(jié)基因表達和相關(guān)途徑的反義化合物。
本文提供的是用于抑制ANGPTL3表達并且治療、預(yù)防、延緩或減輕ANGPTL3相關(guān)疾病、疾患或其癥狀的方法、化合物和組合物。在某些實施方案中，ANGPTL3相關(guān)疾病或疾患是心血管疾病或代謝疾病。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸。ANGPTL3靶可具有選自SEQ ID NO :1_5中任一個的序列。靶向ANGPTL3的經(jīng)修飾的寡核苷酸可具有包含與SEQ ID NO :1_5的等長部分互補的至少8個連續(xù)核堿基的核堿基序列。靶向ANGPTL3的經(jīng)修飾的寡核苷酸可具有包含選自SEQID NO =34-182中任一個的核堿基序列的至少8個連續(xù)核堿基的核堿基序列。經(jīng)修飾的寡核苷酸可具有包含選自SEQ ID NO :34-182中任一個的核堿基序列的至少8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個連續(xù)核堿基的核堿基序列。經(jīng)修飾的寡核苷酸的連續(xù)核堿基部分可與選自SEQ ID NO :1-5中任一個的ANGPTL3區(qū)域的等長部分互補。ANGPTL3區(qū)域可選自以下區(qū)域的一個或多個22-52、116-145、637-720、953-983、1333-1469 和 1463-1489。某些實施方案提供了減少動物中ANGPTL3表達的方法，其包括向所述動物施用包 含靶向本文描述的ANGPTL3的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物。某些實施方案提供了減少動物中的apoC-III表達、甘油三酯水平、膽固醇水平、低密度脂蛋白(LDL)或葡萄糖水平的方法，其包括向所述動物施用包含靶向本文描述的ANGPTL3的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，其中經(jīng)修飾的寡核苷酸減少動物中的ANGPTL3表達。某些實施方案提供了減輕動物中的心血管疾病或代謝疾病的方法，其包括向所述動物施用包含靶向本文描述的ANGPTL3的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，其中經(jīng)修飾的寡核苷酸減少動物中的ANGPTL3表達。某些實施方案提供了用于治療患有心血管疾病或代謝疾病的動物的方法，其包括1)鑒定患有代謝疾病或心血管疾病的所述動物，和2)向所述動物施用治療有效量的包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成并且具有與SEQ IDNO :1-5至少90%互補(如對經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性所測量)的核堿基序列，由此治療患有心血管疾病或代謝疾病的動物。在某些實施方案中，向動物施用的治療有效量的化合物減少動物中的心血管疾病或代謝疾病。某些實施方案提供了通過施用包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的ANGPTL3抑制劑減少人中ANGPTL3水平、LDL水平、apoC-111水平、甘油三酯水平、膽固醇水平、葡萄糖水平、脂肪墊重、心血管疾病和代謝疾病中的一者或多者的方法。發(fā)明詳述應(yīng)理解，前述一般描述和以下詳細(xì)描述僅僅是示例性的且說明性的，并不限制如要求保護的本發(fā)明。在本文，使用的單數(shù)包括復(fù)數(shù)，除非另有明確指出。如本文所用的，使用的“或”意指“和/或”，除非另有指出。而且，使用的術(shù)語“包括”以及其它形式例如“包括”和“被包括”并不是限制性的。同時，術(shù)語例如“要素”或“組分”包含要素和組分兩者，包含一個單元和要素以及包含一個以上亞單元的組分，除非另有明確指出。本文所述的部分標(biāo)題僅僅是為了組織的目的并不應(yīng)理解為限制所述的主題。本申請引用的所有文件、或文件的一部分(包括但不限于專利、專利申請、文章、書籍和書籍)據(jù)此通過引用清楚(針對本文所述的文件以及其整體)并入。
定義除非提供了明確定義，否則結(jié)合本文所述的分析化學(xué)、合成有機化學(xué)、以及醫(yī)藥和制藥化學(xué)所用的命名法、以及它們的方法和技術(shù)是本領(lǐng)熟知且常用的。標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)可用于化學(xué)合成以及化學(xué)分析。當(dāng)允許時，所有專利、申請、公布的申請和其它公布、GENBANK登記號及可通過數(shù)據(jù)庫例如National Center for Biotechnology Information (NCBI)和其它在本整個公開中提及的數(shù)據(jù)獲得的相關(guān)序列信息通過引用(針對本文所論述的文件的部分以及其整體)并入本文。
除非另有指出，下列術(shù)語具有以下含義“2’ -0-甲氧基こ基”(也稱為2’ -MOE和2’ -O(CH2)2-OCH3)是指呋喃糖基環(huán)的2’位的0-甲氧基-こ基修飾。2’ -0-甲氧基こ基修飾的糖是經(jīng)修飾的糖?！?’ -0-甲氧基こ基核苷酸”意指包含2’ -0-甲氧基こ基修飾的糖部分的核苷酸。“3’靶位點”是指與特定反義化合物的3’最末端核苷酸互補的靶核酸的核苷酸?！?’靶位點”是指與特定反義化合物的5’最末端核苷酸互補的靶核酸的核苷酸?！?5-甲基胞嘧啶”意指用與5 ’位連接的甲基修飾的胞嘧啶。5-甲基胞嘧啶是經(jīng)修飾的核堿基。“約”意指在值的土 10%內(nèi)。例如，如果提及“標(biāo)記可增加約50%”，則暗示標(biāo)記可增加 45%-55%。“活性藥用劑(Active pharmaceutical agent) ”意指當(dāng)施用于個體時提供了治療益處的藥物組合物中的物質(zhì)。例如，在某些實施方案中，靶向于ANGPTL3的反義寡核苷酸是活性藥用劑?！盎钚园袇^(qū)域”或“靶區(qū)域”意指靶向ー個或多個活性反義化合物的區(qū)域。“活性反義化合物”意指減少靶核酸水平或蛋白水平的反義化合物。“脂肪形成”意指脂肪細(xì)胞自前脂肪細(xì)胞的發(fā)展?！爸拘纬伞币庵钢镜漠a(chǎn)生或形成，脂肪變性或脂肪浸潤。“肥胖癥”或“肥胖癥”是指肥胖或與去脂肪體重有關(guān)的過度高量的體脂肪或脂肪組織的狀態(tài)。體脂肪的量包括關(guān)心脂肪遍及身體的分布和脂肪組織沉積的大小和質(zhì)量。體脂肪分布可通過皮膚褶測量、腰臀圍比或技術(shù)例如超聲、計算機斷層攝影術(shù)或核磁共振成像來評價。根據(jù)疾病控制和預(yù)防中心，體重指數(shù)(BMI)為30或以上的個體被認(rèn)為是肥胖的。本文所用的術(shù)語"肥胖癥"包括由于在體內(nèi)脂肪組織的過度積累而使體脂肪的増加超過身體需要的疾患。術(shù)語“肥胖癥”包括但不限于以下疾患成年型肥胖癥；營養(yǎng)性肥胖癥；內(nèi)源性或代謝肥胖癥；內(nèi)分泌性肥胖癥；家族性肥胖癥；胰島功能亢進性肥胖癥；增生性-肥大性肥胖癥；性腺機能衰退性肥胖癥；甲狀腺功能減退性肥胖癥；終身性肥胖癥；病態(tài)肥胖癥和外源性肥胖癥?！鞍殡S施用(Administered concomitantly) ”是指兩種活性劑的藥理學(xué)作用在患者中同時出現(xiàn)的任何方式兩種活性劑的共施用。伴隨施用不需要兩種活性劑以單一藥物組合物、以相同劑量形式或通過相同施用途徑施用。兩種活性劑的效應(yīng)不需要同時顯示它們自身。效應(yīng)僅需要在一定時段內(nèi)重疊并且不需要共存?！笆┯谩币庵附o動物提供活性剤，并且包括但不限于通過醫(yī)學(xué)專業(yè)人員施用和自身施用。
“活性剤(Agent) ”意指當(dāng)施用于動物時可提供治療益處的活性物質(zhì)?！暗谝换钚詣币庵副景l(fā)明的治療化合物。例如，第一活性劑可以是靶向ANGPTL3的反義寡核苷酸。“第ニ活性剤”意指本發(fā)明的第二治療化合物(例如靶向ANGPTL3的第二反義寡核苷酸)和/或非-ANGPTL3治療化合物。
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“減輕”是指減輕相關(guān)疾病、病癥或疾患的至少ー個指標(biāo)、癥狀或癥候。指標(biāo)的嚴(yán)重度可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的主觀或客觀量度來確定。“ANGPTL3 ”意指ANGPTL3的任何核酸或蛋白?！癆NGPTL3表達”意指從編碼ANGPTL3的基因轉(zhuǎn)錄的mRNA的水平或從mRNA翻譯的蛋白的水平。ANGPTL3表達可通過本領(lǐng)域已知的方法例如Northern或Western印跡來測定。“ANGPTL3核酸”意指任何編碼ANGPTL3的核酸。例如，在某些實施方案中，ANGPTL3核酸包括編碼ANGPTL3的DNA序列、從編碼ANGPTL3的DNA轉(zhuǎn)錄的RNA序列(包括包含內(nèi)含子和外顯子的基因組DNA)和編碼ANGPTL3的mRNA序列?！癆NGPTL3mRNA”意指編碼ANGPTL3蛋白的mRNA?！皠游铩笔侵溉嘶蚍?人動物，包括但不限于小鼠、大鼠、免、狗、貓、豬和非-人靈長類，包括但不限于猴和猩猩?！胺戳x活性”意指歸因于反義化合物與其靶核酸的雜交的任何可檢測或可測量的活性。在某些實施方案中，反義活性是由此類靶核酸編碼的把核酸或蛋白的量或表達的減少?！胺戳x化合物”意指能夠通過氫鍵合經(jīng)受與靶核酸雜交的寡聚化合物?！胺戳x抑制”意指在與靶核酸互補的反義化合物的存在下靶核酸水平或靶蛋白水平相比于在反義化合物存在下的靶核酸水平或靶蛋白水平的減少。“反義寡核苷酸”意指具有允許與相應(yīng)的靶核酸區(qū)域或區(qū)段雜交的核堿基序列的單鏈寡核苷酸。如本文所用的，術(shù)語“反義寡核苷酸”包括本文所述的化合物的藥學(xué)上可接受的衍生物?！昂蠥poB的脂蛋白”意指具有載脂蛋白B作為其蛋白組分的任何脂蛋白，并且應(yīng)理解為包括LDL、VLDL、IDL和脂蛋白，且可通常由脂質(zhì)降低劑和療法靶向?！昂蠥poB-IOO的LDL”意指含有ApoB-IOO同種型的LDL。“動脈粥樣硬化”意指影響大型和中型動脈的動脈的硬化并且其特征在于存在脂肪沉積物。脂肪沉積物被稱為"動脈粥樣化"或“斑塊”，其主要由膽固醇和其它脂肪、鈣和癜痕脂肪，以及動脈內(nèi)層的損傷組成?！半p環(huán)糖”意指通過兩個非孿位環(huán)原子的橋接修飾的呋喃糖基環(huán)。雙環(huán)糖是經(jīng)修飾的糖?！半p環(huán)核酸”或“BNA”是指核苷或核苷酸，其中該核苷或核苷酸的呋喃糖部分包括連接呋喃糖環(huán)上的兩個碳原子的橋，由此形成雙環(huán)系統(tǒng)?！懊苯Y(jié)構(gòu)”或“端帽部分”意指已在反義化合物的任一末端并入的化學(xué)修飾。“心血管疾病”或“心血管病癥”是指ー組涉及心、血管或循環(huán)的疾患。心血管疾病的實例包括但不限于，動脈瘤、心絞痛、心律不齊、動脈粥樣硬化、腦血管疾病(中風(fēng))、冠心病、高血壓、血脂障礙、高脂血癥和高膽固醇血癥。
“化學(xué)上不同的區(qū)域”是指以某種方式化學(xué)上不同于同一反義化合物的另一區(qū)域的反義化合物的區(qū)域。例如，具有2’ -0-甲氧基乙基核苷酸的區(qū)域化學(xué)上不同于具有無2’ -0-甲氧基乙基修飾的核苷酸的區(qū)域?！扒逗戏戳x化合物”意指具有至少兩個化學(xué)上不同的區(qū)域的反義化合物。“共施用”意指給個體施用兩種或更多種活性劑。兩種或更多種活性劑可以在單一藥物組合物中，或可以在分開的藥物組合物中。兩種或更多種活性劑中的每一種可通過相同或不同的施用路徑施用。共施用包括平行或相繼施用?！澳懝檀肌笔谴嬖谟谒袆游锝M織的細(xì)胞膜中的甾醇分子。膽固醇必須經(jīng)由脂蛋白在動物的血漿中進行轉(zhuǎn)運，所述脂蛋白包括極低密度脂蛋白(VLDL)、中等密度脂蛋白(IDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)?！把獫{膽固醇”是指存在于血漿或血清中的所有脂蛋白(VDL、IDL、LDL、HDL)酯化的和/或非酯化的膽固醇的總和。“膽固醇吸收抑制劑”意指抑制由飲食獲得的外源性膽固醇的吸收的活性劑?！盎パa性”意指第一核酸與第二核酸的核堿基之間配對的能力。在某些實施方案中，第一核酸與第二核酸之間的互補性可在兩條DNA鏈之間、在兩條RNA鏈之間，或在DNA和RNA鏈之間。在某些實施方案中，一條鏈上的一些核堿基基于其它鏈與互補氫鍵合匹配。在某些實施方案中，一條鏈上的所有核堿基基于其它鏈與互補氫鍵匹配。在某些實施方案中，第一核酸是反義化合物且第二核酸是靶核酸。在某些此類實施方案中，反義寡核苷酸是第一核酸且靶核酸是第二核酸?！斑B續(xù)核堿基”意指彼此直接相鄰的核堿基?！肮谛牟?CHD) ”意指供應(yīng)血和氧至心臟的小血管的狹窄，其通常是動脈粥樣硬化的結(jié)果。
“脫氧核糖核苷酸”意指在核苷酸的糖部分的2’位具有氫的核苷酸。脫氧核糖核苷酸可被多種取代基中的任一種修飾?！疤悄虿?Diabetes mellitus) 〃或〃糖尿病〃是特征在于紊亂的代謝和異常高的血糖(高血糖癥)的綜合征，這是由胰島素水平不足或胰島素敏感性降低引起的。特有癥狀是由于高血糖水平導(dǎo)致的過量尿生成(多尿癥)、過度口渴和試圖補償排尿增加的流體攝取的增加(煩渴)、由于高血糖對眼光學(xué)的效應(yīng)導(dǎo)致的視力模糊、不明體重減輕和嗜睡。“糖尿病性血脂障礙”或“具有血脂障礙的2型糖尿病”意指特征在于2型糖尿病、減少的HDL-C、升高的甘油三酯和升高的小且致密LDL顆粒的疾患?！跋♂寗币庵附M合物中缺少藥理學(xué)活性但是藥學(xué)上必需或期望的成分。例如，注射型組合物中的稀釋劑可以是液體，例如鹽水溶液?！把系K”是指脂質(zhì)和/或脂蛋白代謝的病癥，包括脂質(zhì)和/或脂蛋白過度生成或缺乏。血脂障礙可表現(xiàn)為脂質(zhì)例如膽固醇和甘油三酯以及脂蛋白例如低密度脂蛋白(LDL)膽固醇的升高?！皠┝繂挝弧币庵柑峁┧幱脛┑男问剑缤鑴?、片劑或其它本領(lǐng)域中已知的劑量單位。在某些實施方案中，劑量單位是含有凍干的反義寡核苷酸的小瓶。在某些實施方案中，劑量單位是含有復(fù)原的反義寡核苷酸的小瓶。“劑量”意指在單個施用中或在指定時間內(nèi)提供的指定量的藥用劑。在某些實施方案中，劑量可在一個、兩個或多個大丸劑(bolus)、片劑或注射劑中施用。例如,在某些實施方案中，當(dāng)期望皮下施用時，所需劑量需要不易由單次注射調(diào)節(jié)的體積，因此，兩個或更多個注射可用于實現(xiàn)所需劑量。在某些實施方案中，藥用劑通過在延長的時段內(nèi)或連續(xù)地輸注來施用。劑量可被陳述為姆小時、姆天、姆周或姆月藥用劑的量。劑量可以mg/kg或g/kg表不。“有效量”或“治療有效量”意指足以在需要活性劑的個體中實現(xiàn)所需生理學(xué)結(jié)果的活性藥用劑的量。有效量可在個體間變化，取決于待治療個體的健康和身體條件、待治療個體的分類群、組合物的制劑、個體的醫(yī)療條件的評價、以及其它相關(guān)因素?！巴耆パa”或“ 100%互補”意指第一核酸的核堿基序列的每個核堿基在第二核酸的第二核堿基序列中具有互補核堿基。在某些實施方案中，第一核酸是反義化合物且靶核酸是第二核酸。“缺ロ基體(Gapmer) ”意指其中具有多個支持RNA酶H切割的核苷的內(nèi)部區(qū)域位于具有一個或多個核苷的外部區(qū)域的嵌合反義化合物，其中包含內(nèi)部區(qū)域的核苷化學(xué)上不同于包含外部區(qū)域的核苷。內(nèi)部區(qū)域可被稱為“缺ロ區(qū)段”且外部區(qū)域可被稱為“翼區(qū)段”。 “缺ロ加寬的”意指具有12或更多個連續(xù)2’ -脫氧核糖核苷的缺ロ區(qū)段的嵌合反義化合物的位置在具有I至6個核苷的5’和3’翼區(qū)段之間和與所述5’和3’翼區(qū)段直接相鄰。“葡萄糖”是被細(xì)胞用作能量和代謝中間體的來源的單糖。“血漿葡萄糖”是指存在于血漿中的葡萄糖?！案呙芏戎鞍?C(HDL-C) ”意指與高密度脂蛋白顆粒相關(guān)的膽固醇。HDL-C在血清(或血漿)中的濃度通常以mg/dL或nmol/L量化?！癏DL-C”和“血漿HDL-C”是指分別在血清和血漿中的HDL-C。"HMG-CoA還原酶抑制劑”意指通過抑制酶HMG-CoA還原酶起作用的活性剤，例如阿托伐他汀、羅蘇伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀和辛伐他汀?！半s交”意指互補核酸分子的退火。在某些實施方案中，互補核酸分子包括反義化合物和靶核酸。“高膽固醇血癥”意指這樣的疾患，其特征在于升高的膽固醇或循環(huán)(血漿)膽固醇、LDL-膽固醇和 VLDL-膽固醇，如根據(jù) Expert Panel Report of the NationalCholesterol Educational Program(NCEP) of Detection, Evaluation of Treatment ofhigh Cholesterol in adults 的指南(參見，Arch. Int. Med. (1988) 148,36-39)。“高脂血癥”或“血脂過多(hyperlipemia) ”是特征在于升高的血清脂質(zhì)或循環(huán)(血漿)脂質(zhì)的疾患。這種疾患顯示異常高的脂肪濃度。循環(huán)血液中的脂質(zhì)部分是膽固醇、低密度脂蛋白、極低密度脂蛋白和甘油三酷。“高甘油三酯血癥”意指特征在于升高的甘油三酯水平的疾患?！拌b定”或“選擇患有代謝疾病或心血管疾病的受試者”意指鑒定或選擇已診斷有代謝疾病、心血管疾病或代謝綜合征的受試者；或，鑒定或選擇患有代謝疾病、心血管疾病或代謝綜合征的受試者包括但不限于高膽固醇血癥、高血糖癥、高脂血癥、高甘油三酯血癥、高血壓、増加的胰島素抵抗、減少的胰島素敏感性、超過正常體重、和/或超過正常體脂肪含量或其任何組合。此類鑒定可通過任何方法實現(xiàn)，包括但不限于標(biāo)準(zhǔn)臨床試驗或評價，例如測量血清或循環(huán)(血漿)膽固醇、測量血清或循環(huán)(血漿)血液-葡萄糖、測量血清或循環(huán)(血漿)甘油三酷、測量血壓、測量體脂肪含量、測量體重等。“鑒定”或“選擇糖尿病受試者”意指鑒定或選擇已被鑒定為糖尿病的受試者或鑒定或選擇具有糖尿病(I型或2型)的任何癥狀例如但不限于空腹葡萄糖為至少110mg/dL、糖尿、多尿癥、煩渴、増加的胰島素抵抗和/或降低的胰島素敏感性的受試者?！拌b定”或“選擇肥胖受試者”意指鑒定或選擇已被診斷為肥胖的受試者或鑒定或選擇BMI超過30和/或腰圍男性大于102cm或女性大于88cm的受試者?！拌b定”或“選擇患有血脂障礙的受試者”意指鑒定或選擇診斷有脂質(zhì)和/或脂蛋白代謝的病癥，包括脂質(zhì)和/或脂蛋白過度生成或缺乏。血脂障礙可表現(xiàn)為脂質(zhì)例如膽固醇和甘油三酯以及脂蛋白例如低密度脂蛋白(LDL)膽固醇的升高。 “鑒定”或“選擇”患有増加的脂肪過多(adiposity)的受試者”意指鑒定或選擇具有増加量的體脂肪(或脂肪過多)的受試者，包括關(guān)心脂肪遍及身體的分布和脂肪組織沉積物的大小與質(zhì)量的一者或兩者。體脂肪分布可通過皮膚褶測量、腰臀圍比或技術(shù)例如超聲、計算機斷層攝影術(shù)或核磁共振成像來評價。根據(jù)疾病控制和預(yù)防中心，體重指數(shù)(BMI)為30或以上的個體被認(rèn)為是肥胖的?！疤岣叩男难芙Y(jié)果”意指不良心血管事件或其風(fēng)險發(fā)生的減少。不良心血管事件的實例包括但不限于死亡、再梗塞、中風(fēng)、心源性休克、肺水腫、心跳停止和房性心律失常?！爸苯酉噜彙币庵冈谥苯酉噜彽囊刂g沒有插入要素?！皞€體”或“受試者”或“動物”意指對于治療或療法所選定的人或非-人動物?！耙种票磉_或活性”是指表達或活性的減少或阻斷并且不一定指示表達或活性的完全消除。“胰島素抵抗”被定義為其中正常量的胰島素不足以從細(xì)胞例如脂肪細(xì)胞、肌細(xì)胞和/或肝細(xì)胞產(chǎn)生正常胰島素響應(yīng)的疾患。脂肪細(xì)胞中的胰島素抵抗導(dǎo)致所存貯甘油三酯的水解，其升高血漿中的游離脂肪酸。肌肉中的胰島素抵抗減少葡萄糖攝取而肝中的胰島素抵抗減少葡萄糖存貯，兩種效應(yīng)用于升高血糖。胰島素和葡萄糖的高血漿水平由于胰島素抵抗而常引起代謝綜合征和2型糖尿病?！耙葝u素敏感性”是個體如何有效地加工葡萄糖的量度。具有高胰島素敏感性的個體有效地加工葡萄糖，而具有低胰島素敏感性的個體不能有效地加工葡萄糖。“核苷間鍵合”是指核苷之間的化學(xué)鍵?！办o脈內(nèi)施用”意指進入靜脈的施用?！斑B接核苷”意指鍵合在一起的相鄰核苷?！爸|(zhì)降低”意指受試者中的一種或多種脂質(zhì)的減少。脂質(zhì)降低可用ー個或多個劑量隨時間流逝而發(fā)生。“脂質(zhì)降低劑”意指給受試者提供以實現(xiàn)受試者中脂質(zhì)的降低的活性劑例如ANGPTL3-特異性調(diào)節(jié)劑。例如，在某些實施方案中，給受試者提供脂質(zhì)降低劑減少受試者中的apoB、apoC3、總膽固醇、LDL-C, VLDL-C, IDL-C、非-HDL-C、甘油三酯、小且致密LDL顆粒和Lp(a)中的一者或多者?！敖抵|(zhì)治療”意指給受試者提供以減少受試者中的ー種或多種脂質(zhì)的治療方案。在某些實施方案中，提供降脂質(zhì)治療以減少受試者中的apoB、apoC3、總膽固醇、LDL-C, VLDL-C, IDL-C、非-HDL-C、甘油三酷、小且致密LDL顆粒和Lp (a)中的一者或多者。
“脂蛋白”例如VLDL、LDL和HDL是指ー組存在于血清、血漿和淋巴且對于脂質(zhì)轉(zhuǎn)運重要的蛋白質(zhì)。每種脂蛋白的化學(xué)組成不同，因為HDL具有較高的蛋白與脂質(zhì)的比例，而VLDL具有較低的蛋白與脂質(zhì)的比例?！暗兔芏戎鞍?膽固醇(LDL-C) ”意指低密度脂蛋白顆粒中攜帯的膽固醇。LDL-C在血清(或血漿)中的濃度通常以mg/dL或nmol/L量化?！把錖DL-C”和“血漿LDL-C”是指分別在血清和血漿中的LDL-C。“主要風(fēng)險因子”是指歸因于特定疾病或疾患的高風(fēng)險的因子。在某些實施方案中，冠心病的主要風(fēng)險因子包括但不限于吸煙、高血壓、低HDL-C、冠心病的家族史、年齡和其它本文公開的因子?！按x病癥”或“代謝疾病”是指特征在于代謝功能改變或紊亂的疾患?！按x”和“新陳代謝”是本領(lǐng)域熟知的術(shù)語并且一般包括在活器官內(nèi)發(fā)生的一系列生物過程。代謝病癥包括但不限干，高血糖癥、糖尿病前期、糖尿病(I型和2型)、肥胖癥、胰島素抵抗、代謝綜 合征和由于2型糖尿病引起的血脂障礙?！按x綜合征”意指特征在于代謝來源的脂質(zhì)和非-脂質(zhì)心血管風(fēng)險因子的聚類的疾病。在某些實施方案中，代謝綜合征通過存在以下因素的任何3個來鑒定腰圍男性大于102cm或女性大于88cm ;血清甘油三酷為至少150mg/dL ；HDL-C男性低于40mg/dL或女性低于50mg/dL ;血壓為至少130/85mmHg ;和空腹葡萄糖為至少110mg/dL。這些決定子可在臨床實踐中容易測量(JAMA，2001，285 :2486-2497)?！板e配”或“非-互補核堿基”是指當(dāng)?shù)谝缓怂岬暮藟A基不能與第二靶核酸相應(yīng)核堿基配對的情況?！盎旌闲脱系K”意指特征在于升高的膽固醇和升高的甘油三酯的疾患?！敖?jīng)修飾的核苷間鍵合”是指來自天然存在核苷間鍵(即磷酸ニ酯核苷間鍵)的取代或任何變化?！敖?jīng)修飾的核堿基”是指不是腺嘌呤、胞嘧啶、鳥嘌呤、胸苷或尿嘧啶的任何核堿基?！拔唇?jīng)修飾的核堿基”意指嘌呤堿基腺嘌呤(A)和鳥嘌呤(G)以及嘧啶堿基胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)和尿嘧啶(U)。“經(jīng)修飾的核苷”意指獨立地具有一個或多個經(jīng)修飾的糖部分或經(jīng)修飾的核堿基的核苷?！敖?jīng)修飾的核苷酸”意指不獨立地具有一個或多個經(jīng)修飾的糖部分、經(jīng)修飾的核苷間鍵合或經(jīng)修飾的核堿基的核苷酸。“經(jīng)修飾的核苷”意指獨立地具有ー個或多個經(jīng)修飾的糖部分或經(jīng)修飾的核堿基的核苷?！敖?jīng)修飾的寡核苷酸”意指包含至少ー個經(jīng)修飾的核苷酸的寡核苷酸。“經(jīng)修飾的糖”是指天然糖的取代或變化?！盎颉币庵阜戳x化合物中化學(xué)上不同區(qū)域的模型?！癕TP抑制劑”意指抑制酶、微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白的活性剤?！疤烊淮嬖诤塑臻g鍵合”意指3’至5’磷酸ニ酯鍵合?！疤烊惶遣糠帧币庵赴l(fā)現(xiàn)于DNA (2’ -H)或RNA (2’ -0H)中的糖?！胺蔷凭灾靖渭膊　被颉癗AFLD ”意指特征在于不是由于過度酒精(例如，超過20g/天的酒精消耗)使用引起的肝的脂肪炎癥的疾患。在某些實施方案中，NAFLD與胰島素抵抗和代謝綜合征相關(guān)。NAFLD包括范圍為肝細(xì)胞(肝脂肪變性)中的單一甘油三酯蓄積到具有炎癥的肝脂肪變性(脂肪肝炎)、纖維化和肝硬化的疾病譜?！胺蔷凭灾靖窝住?NASH)從NAFLD的進展發(fā)生，遲于甘油三酯的沉積。能夠誘導(dǎo)壞死、炎癥和纖維化的“第二次打擊(second hit) ”對于NASH的發(fā)展是必需的。用于第二次打擊的候選可分為以下大類引起氧化性應(yīng)激增加的因素和促進促炎性細(xì)胞因子的表達的因素。已提出增加的肝甘油三酯導(dǎo)致動物和人的肝細(xì)胞中增加的氧化應(yīng)激，表明肝甘油三酯蓄積、氧化應(yīng)激和肝脂肪變性向NASH的進展之間的潛在因果關(guān)系(Bix)Wning和Horton，J Clin Invest, 2004，114，147-152)。高甘油三酯血癥和高脂肪酸血癥可引起外周組織中的甘油三酯蓄積(Shimamura 等人，Biochem Biophys Res Commun, 2004, 322,1080-1085)?！昂怂帷笔侵赣蓡误w核苷酸組成的分子。核酸包括核糖核酸(RNA)、脫氧核糖核酸(DNA)、單鏈核酸、雙鏈核酸、小干擾核糖核酸(siRNA)和微RNA(miRNA)。核酸還可以包含這 些要素在單個分子中的組合?！昂藟A基”意指能夠與另一個核酸的堿基配對的雜環(huán)部分。“核堿基序列”意指不依賴于任何糖、鍵合或核堿基修飾的連續(xù)核堿基的次序?！昂塑铡币庵概c糖連接的核堿基?！昂塑漳M物”包括用于替換糖或糖和堿基并且不一定在寡聚化合物的一個或多個位置連接的那些結(jié)構(gòu)；例如具有嗎啉代、環(huán)己烯基、環(huán)己基、四氫呋喃基、二環(huán)或三環(huán)糖模擬物例如非呋喃糖單元的核苷模擬物?！昂塑账帷币庵妇哂泄矁r連接于核苷的糖部分的磷酸基的核苷?！昂塑账崮M物”包括用于替代核苷且寡聚化合物的一個或多個位置連接的那些結(jié)構(gòu)，例如肽核酸或嗎啉代(通過-N(H)-C(=0)-0-或其它非-磷酸二酯鍵合連接的嗎啉代)?！肮丫刍衔?或“寡聚物”是指包含兩個或更多個子結(jié)構(gòu)并且能夠與核酸分子的區(qū)域雜交的聚合結(jié)構(gòu)。在某些實施方案中，寡聚化合物是寡核苷。在某些實施方案中，寡聚化合物是寡核苷酸。在某些實施方案中，寡聚化合物是反義化合物。在某些實施方案中，寡聚化合物是反義寡核苷酸。在某些實施方案中，寡聚化合物是嵌合寡核苷酸。“寡核苷酸”意指連接核苷的聚合物，每個連接核苷可經(jīng)修飾或未經(jīng)修飾，彼此無關(guān)。“胃腸外施用”意指以除消化道之外的方式的施用。胃腸外施用包括局部施用、皮下施用、靜脈內(nèi)施用、肌內(nèi)施用、動脈內(nèi)施用、腹膜內(nèi)施用或顱內(nèi)施用，例如鞘內(nèi)或腦室內(nèi)施用。施用可以是連續(xù)的、或慢性的、或短期或間歇的?！半摹币庵竿ㄟ^連接至少兩個氨基酸經(jīng)由酰胺鍵形成的分子。肽是指多肽和蛋白質(zhì)?！八幱脛币庵府?dāng)施用于個體時提供治療益處的物質(zhì)。例如，在某些實施方案中，靶向于ANGPTL3的反義寡核苷酸是藥用劑?！八幬锝M合物”意指適用于給個體施用的物質(zhì)的混合物。例如，藥物組合物可包含一種或多種活性劑和無菌水溶液?！八帉W(xué)上可接受的載體”意指不干擾寡核苷酸的結(jié)構(gòu)或功能的介質(zhì)或稀釋劑。某些此類載體能使藥物組合物配制成例如片劑、丸剤、糖丸、膠囊、液體、凝膠劑、糖漿劑、漿液、混懸液和錠劑以給受試者ロ服攝入。某些此類載體能使藥物組合物配制成注射或輸注。例如，藥學(xué)上可接受的載體可以是無菌水溶液?！八帉W(xué)上可接受的鹽”意指反義化合物的生理學(xué)和藥學(xué)上可接受的鹽，即保留母體寡核苷酸的所需生物活性并且不賦予其不想要的毒理學(xué)效應(yīng)的鹽?！傲虼姿狨ユI合”意指核苷之間的鍵合，其中磷酸ニ酯鍵通過用硫原子替代非橋接氧原子之一來修飾。硫代磷酸酯鍵合是經(jīng)修飾的核苷間鍵合。“部分”意指核酸的確定數(shù)量的連續(xù)(即連接)核堿基。在某些實施方案中，部分是靶核酸的確定數(shù)量的連續(xù)核堿基。在某些實施方案中，部分是反義化合物的確定數(shù)量的連續(xù)核堿基?！邦A(yù)防”是指延緩或阻止疾病、病癥或疾患的發(fā)作或發(fā)展達到從數(shù)分鐘至無限期的時段。預(yù)防還意指減少疾病、病癥或疾患發(fā)展的風(fēng)險。
“前藥”意指以無活性形式制備的治療劑，其在體內(nèi)或其細(xì)胞內(nèi)通過內(nèi)源性酶或其它化學(xué)品或條件的作用被轉(zhuǎn)化為活性形式?！案弊饔谩币庵缚蓺w因于治療而不是所需效應(yīng)的生理學(xué)反應(yīng)。在某些實施方案中，副作用包括注射部位反應(yīng)、肝功能試驗異常、腎功能異常、肝毒性、腎毒性、中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常、肌病和不適。例如，増加的血清氨基轉(zhuǎn)移酶水平可指示肝毒性或肝功能異常。例如，增加的膽紅素可包括肝毒性或肝功能異常?！皢捂湽押塑账帷币庵覆慌c互補鏈雜交的寡核苷酸?！疤禺愋噪s交”是指與靶核酸具有足夠的互補性程度以誘導(dǎo)所需效應(yīng)同時在體內(nèi)測定和治療性處理的情況下在需要特異性結(jié)合的條件即在生理學(xué)條件下對非-靶核酸表現(xiàn)出最低效應(yīng)或無效應(yīng)的反義化合物“抑制素(Statin) ”意指抑制HMG-CoA還原酶活性的活性剤。 “皮下施用”意指在皮膚正下方的施用。“靶向”或“被靶向”意指設(shè)計和選擇與靶核酸特異性雜交并且誘導(dǎo)所需效應(yīng)的反義化合物的方法?！鞍泻怂帷?、“靶RNA”和“靶RNA轉(zhuǎn)錄物”均是指能夠通過反義化合物靶向的核酸?！鞍袇^(qū)域”被定義為具有至少ー個可識別的結(jié)構(gòu)、功能或特征的靶核酸的一部分。“靶區(qū)段”意指反義化合物所靶向的靶核酸的核苷酸的序列?！?’靶位點”是指靶區(qū)段的5’最末端核苷酸。“3’靶位點”是指靶區(qū)段的3’最末端核苷酸。“治療有效量”意指給個體提供了治療益處的活性劑的量。“治療性生活方式變化”意指g在降低脂肪/脂肪組織質(zhì)量/或膽固醇的飲食和生活方式變化。此類變化可減少發(fā)展心臟病的危險，并且可包括每天總卡路里、總脂肪、飽和脂肪、多不飽和脂肪、單不飽和脂肪、碳水化合物、蛋白質(zhì)、膽固醇、不溶纖維的飲食攝取的推薦以及體力活動的推薦?！案视腿帷币庵赣膳c三個脂肪酸分子組合的甘油的脂質(zhì)或中性脂肪。“2型糖尿病”(也稱為“2型糖尿病”或“糖尿病，2型”，并且之前稱為“糖尿病2型”、“非-胰島素依賴性糖尿病(NIDDM) ”、“肥胖癥相關(guān)性糖尿病”或“成人型糖尿病”)是主要特征在于胰島素抵抗、相對胰島素缺乏和高血糖癥的代謝病癥。
“治療”是指施用藥物組合物以實現(xiàn)疾病、病癥或疾患的改變或提高?！拔唇?jīng)修飾的核苷酸”意指由天然存在核堿基、糖部分和核苷間鍵合組成的核苷酸。在某些實施方案中，未經(jīng)修飾的核苷酸是RNA核苷酸(即P -D-核糖核苷)或DNA核苷酸(即P -D-脫氧核糖核苷)。某些實施方案在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸。ANGPTL3靶可具有選自SEQ ID NO :1_5中任一個的序列。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物包含經(jīng)修飾的寡核苷酸，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由10至30個核苷組成并且具有包含與SEQ ID NO :1-5的等長部分互補的至少8個連續(xù)核堿基的核堿基序列。 本發(fā)明的化合物和組合物包含經(jīng)修飾的寡核苷酸，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由10至30個核苷組成并且具有包含選自SEQ ID NO :34-182中任一個的核堿基序列的至少8個連續(xù)核堿基的核堿基序列。本發(fā)明的化合物和組合物包含經(jīng)修飾的寡核苷酸，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由10至30個核苷組成并且具有包含選自SEQ ID NO :34-182中任一個所述的核堿基序列的至少8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個連續(xù)核堿基的核堿基序列。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的鹽。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物還包含藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。在某些實施方案中，經(jīng)修飾的寡核苷酸的核堿基序列與SEQ ID NO :1-5中任一個至少70%、80%、90%、95%或100%互補，如對經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性所測量的。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物由單鏈的經(jīng)修飾的寡核苷酸組成。在某些實施方案中，經(jīng)修飾的寡核苷酸由8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個連接核苷組成。在某些實施方案中，經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成。在某些實施方案中，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的至少一個核苷間鍵合是經(jīng)修飾的核苷間鍵合。在某些實施方案中，每個核苷間鍵合是硫代磷酸酯核苷間鍵合。在某些實施方案中，經(jīng)修飾的寡核苷酸的至少一個核苷包含經(jīng)修飾的糖。在某些實施方案中，經(jīng)修飾的寡核苷酸包含至少一個經(jīng)四氫吡喃修飾的核苷，其中四氫吡喃環(huán)代替呋喃糖環(huán)。在某些實施方案中，每一個經(jīng)四氫吡喃修飾的核苷具有以下結(jié)構(gòu)
I—
\F其中Bx是任選保護的雜環(huán)堿基部分。在某些實施方案中，至少一種經(jīng)修飾的糖是雙環(huán)糖。在某些實施方案中，至少一種經(jīng)修飾的糖包含2 ’ -0-甲氧基乙基或4 ’ - (CH2) n-0-2 ’橋，其中n是I或2。在某些實施方案中，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸中的至少一個核苷包含經(jīng)修飾的核堿基。在某些實施方案中，經(jīng)修飾的核堿基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，經(jīng)修飾的寡核苷酸包含a)由連接脫氧核苷組成的缺ロ區(qū)段；b)由連接核苷組成的5’翼區(qū)段；和c)由連接核苷組成的3’翼區(qū)段。缺ロ區(qū)段位于5’翼區(qū)段與3’翼區(qū)段之間并且每個翼區(qū)段中的每個核苷包含經(jīng)修飾的糖。在某些實施方案中，經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成，缺ロ區(qū)段由10個連接脫氧核苷組成，5’翼區(qū)段由5個連接核苷組成，3’翼區(qū)段由5個連接核苷組成，每個翼區(qū)段的每個核苷包含2’ -0-甲氧基こ基糖并且每個核苷間鍵合是硫代磷酸酯鍵合，在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物包含經(jīng)修飾的寡核苷酸，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成并且具有包含與SEQ ID NO :1-5的等長部分互補的至少8個連續(xù)核堿基的核堿基序列，其中經(jīng)修飾的寡核苷酸包含a)由10個連接脫氧核苷組成的缺ロ區(qū)段；b)由5個連接核苷組成的5’翼區(qū)段；和c)由5個連接核苷組成的3’翼區(qū)段。缺ロ區(qū)段位于5’翼區(qū)段與3’翼區(qū)段之間，每個翼區(qū)段的每個核苷包含2’ -0-甲氧基こ基糖，每個核苷間鍵合是硫代磷酸酯鍵合且每個胞嘧啶殘基是5-甲基胞嘧啶。 在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物包含經(jīng)修飾的寡核苷酸，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成并且具有包含與SEQ ID NO =34-182中任ー個的至少8個連續(xù)核堿基的核堿基序列，其中經(jīng)修飾的寡核苷酸包含a)由10個連接脫氧核苷組成的缺ロ區(qū)段；b)由5個連接核苷組成的5’翼區(qū)段；和c)由5個連接核苷組成的3’翼區(qū)段。缺ロ區(qū)段位于5’翼區(qū)段與3’翼區(qū)段之間，每個翼區(qū)段的每個核苷包含2’ -0-甲氧基こ基糖，每個核苷間鍵合是硫代磷酸酯鍵合且每個胞嘧啶殘基是5-甲基胞嘧啶。某些實施方案提供了用于抑制ANGPTL3表達的方法、化合物和組合物。某些實施方案提供了減少動物中的ANGPTL3表達的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物。某些實施方案提供了減少動物中的Ap0C-III表達的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸，由此減少動物中的ApoC-III表達。某些實施方案提供了減少動物中的甘油三酯水平的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸，由此減少動物中的甘油三酯水平。某些實施方案提供了減少動物中的膽固醇水平的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸，由此減少動物中的膽固醇水平。某些實施方案提供了減少動物中的低密度脂蛋白(LDL)水平的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸，由此減少動物中的低密度脂蛋白(LDL)水平。某些實施方案提供了減少動物中的葡萄糖水平的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸，由此減少動物中的葡萄糖水平。某些實施方案提供了減輕動物中的代謝疾病或心血管疾病的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸，由此減輕動物中的代謝疾病或心血管疾病。某些實施方案提供了用于治療患有ANGPTL3相關(guān)疾病或疾患的動物的方法，包括a)鑒定患有ANGPTL3相關(guān)疾病或疾患的所述動物，和b)向所述動物施用治療有效量的化合物，所述化合物包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸。在某些實施方案中，施用于動物的治療有效量的化合物減輕動物中的ANGPTL3相關(guān)疾病或疾患。某些實施方案提供了用于治療患有代謝疾病或心血管疾病的動物的方法，包括a)鑒定患有代謝疾病或心血管疾病的所述動物,和b)向所述動物施用治療有效量的包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成并且具有與SEQID NO :1-5至少90%互補(如對經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性測量)的核堿基序列，由此治療患有代謝疾病或心血管疾病的動物。在某些實施方案中，施用于動物的治療有效量的化合物減輕動物中的代謝疾病或心血管疾病。某些實施方案提供了通過施用包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的ANGPTL3抑制劑減少人中ANGPTL3水平、LDL水平、apoC-111水平、甘油三酯水平、膽固醇水平、葡萄糖水平、脂肪墊重、心血管疾病和代謝疾病中的一者或多者的方法，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成并且具有與SEQ ID NO :1-5至少90%互補的核堿基序列，如對所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性所測量的。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于抑制ANGPTL3表達的用途。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于減少動物中的ANGPTL3表達。某些實施方案包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于減少動物中的ApoC-III表達的用途。某些實施方案包括向動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，由此減少動物中的ApoC-III表達。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于減少動物中的甘油三酯水平的用途。某些實施方案包括給動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，由此減少動物中的甘油三酯水平。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于減少動物中的膽固醇水平的用途。某些實施方案包括給動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，由此減少動物中的膽固醇水平。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于減少動物中的低密度脂蛋白(LDL)水平的用途。某些實施方案包括給動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，由此減少動物中的低密度脂蛋白(LDL)水平。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于減少動物中的葡萄糖水平的用途。某些實施方案包括給動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷、的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，由此減少動物中的葡萄糖水平。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于減輕動物中的代謝疾病或心血管疾病的用途。某些實施方案包括給動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，由此減輕動物中的代謝疾病或心血管疾病。
某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于治療的用途。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于治療患有ANGPTL3相關(guān)疾病或疾患的動物的用途。在某些實施方案中，ANGPTL3相關(guān)疾病或疾患是代謝疾病或心血管疾病。某些實施方案包括a)鑒定患有ANGPTL3相關(guān)疾病或疾患的所述動物，和b)向所述動物施用治療有效量的化合物，所述化合物包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸。在某些實施方案中，施用于動物的治療有效量的化合物減輕動物中的ANGPTL3相關(guān)疾病或疾患。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于治療患有代謝疾病或心血管疾病的動物的用途。包括a)鑒定患有代謝疾病或心血管疾病的所述動物，和b)向所述動物施用包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，由此治療患有代謝疾病或心血管疾病的動物，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成并且具有與SEQ ID NO :1-5至少90%互補的核堿基序列，如對所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性所測量的。在某些實施方案中，施用于動物的治療有效量的化合物減輕動物中的代謝疾病或心血管疾病。某些實施方案提供了本文所述的化合物和組合物用于減少人中ANGPTL3水平、LDL水平、apoC-III水平、甘油三酯水平、膽固醇水平、葡萄糖水平、脂肪墊重、心血管疾病和代謝疾病中的一者或多者的用途，通過施用包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的ANGPTL3抑制劑，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成并且具有與SEQ ID NO :1-5至少90%互補的核堿基序列，如對所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性所測量的。在某些實施方案中，ANGPTL3具有如GenBank登記號BG400407. I中所述的mRNA序列(以SEQ ID NO :1并入本文)。在某些實施方案中，ANGPTL3具有如GenBank登記號BG562555. I中所述的mRNA序列(以SEQ ID NO 2并入本文)。在某些實施方案中，ANGPTL3具有如GenBank登記號BG562798. I中所述的mRNA序列(以SEQ ID NO 3并入本文)。在某些實施方案中，ANGPTL3具有如GenBank登記號NM_014495. I中所述的mRNA序列(以SEQID NO 4并入本文)。在某些實施方案中，ANGPTL3具有如GenBank登記號NT_032977. 5的核苷酸15511702至15521082中所述的序列(以SEQ ID NO 5并入本文)。在某些實施方案中，ANGPTL3具有如GenBank登記號AF162224. I中所述的mRNA序列(以SEQ ID NO 6并入本文)。在某些實施方案中，ANGPTL3具有如GenBank登記號Al 195524. I中所述的mRNA序列(以SEQ ID NO 7并入本文)。在某些實施方案中，ANGPTL3具有如GenBank登記號BB717501. I中所述的mRNA序列(以SEQ ID NO 8并入本文)。表I基因革巴名稱和序列
權(quán)利要求
1.一種減少動物中的ANGP T L 3表達的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，其中減少所述動物中的ANGPTL3表達。
2.一種減少動物中的apoC-III表達的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，其中減少所述動物中的apoC-III表達。
3.—種減少動物中的甘油三酯水平的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，其中減少所述動物中的甘油三酯水平。
4.一種減少動物中的膽固醇水平的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，其中減少所述動物中的膽固醇水平。
5.一種減少動物中的低密度脂蛋白(LDL)水平的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，其中減少所述動物中的低密度脂蛋白(LDL)水平。
6.一種減少動物中的葡萄糖水平的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，其中減少所述動物中的葡萄糖水平。
7.一種減輕動物中的代謝疾病或心血管疾病的方法，其包括向所述動物施用包含靶向于ANGPTL3的長度為10至30個連接核苷的經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，其中減輕所述動物中的代謝疾病或心血管疾病。
8.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸具有與SEQID NO:1-5至少90%互補的核堿基序列，如對所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性所測量的。
9.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸具有包含SEQIDNO =34-182中任一個所述的序列的至少8個連續(xù)核堿基的核堿基序列。
10.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述動物是人。
11.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述化合物是第一活性劑，并且還包括施用第二活性劑。
12.權(quán)利要求11所述的方法，其中共施用所述第一活性劑和第二活性劑。
13.權(quán)利要求11中任一項所述的方法，其中所述第二活性劑是葡萄糖降低劑。
14.權(quán)利要求13所述的方法，其中所述葡萄糖降低劑是治療性生活方式改變、PPAR激動劑、二肽基肽酶(IV)抑制劑、GLP-I類似物、胰島素或胰島素類似物、胰島素促泌素、SGLT2抑制劑、人胰淀素類似物、雙胍類、a -糖苷酶抑制劑或其組合。
15.權(quán)利要求13所述的方法，其中所述葡萄糖降低劑是二甲雙胍、磺酰脲、羅格列酮或其組合。
16.權(quán)利要求13所述的方法，其中所述葡萄糖降低劑是選自以下的磺酰脲醋酸己脲、氯磺丙脲、甲苯磺丁脲、妥拉磺脲、格列美脲、格列吡嗪、格列本脲或格列奇特。
17.權(quán)利要求13所述的方法，其中所述葡萄糖降低劑是二甲雙胍。
18.權(quán)利要求13所述的方法，其中所述葡萄糖降低劑是選自那格列奈或瑞格列奈的美格列奈。
19.權(quán)利要求13所述的方法，其中所述葡萄糖降低劑是選自吡格列酮或羅格列酮的噻唑烷二酮類。
20.權(quán)利要求13所述的方法，其中所述葡萄糖降低劑是選自阿卡波糖或米格列醇的a-糖苷酶抑制劑。
21.權(quán)利要求11所述的方法，其中所述第二活性劑是降脂質(zhì)治療。
22.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述降脂質(zhì)治療是治療性生活方式改變、HMG-CoA還原酶抑制劑、膽固醇吸收抑制劑、MTP抑制劑、靶向于ApoB的反義化合物或其任何組合。
23.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述降脂質(zhì)治療是選自以下的HMG-CoA還原酶抑制劑阿托伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀、羅蘇伐他汀或辛伐他汀。
24.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述降脂質(zhì)治療是膽固醇吸收抑制劑依澤替米貝。
25.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中施用包含胃腸外施用。
26.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述化合物由單鏈經(jīng)修飾的寡核苷酸組成。
27.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸具有與SEQIDNO :1-5中任一個至少95%互補的核堿基序列，如對所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性所測量的。
28.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸具有與SEQIDNO :1-5中任一個至少100%互補的核堿基序列，如對所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性所測量的。
29.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的至少一個核苷間鍵合是經(jīng)修飾的核苷間鍵合。
30.權(quán)利要求29所述的方法，其中每個核苷間鍵合是硫代磷酸酯核苷間鍵合。
31.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的至少一個核苷包含經(jīng)修飾的糖。
32.權(quán)利要求31所述的方法，其包含至少一個經(jīng)四氫吡喃修飾的核苷，其中四氫吡喃環(huán)代替呋喃糖環(huán)。
33.權(quán)利要求32所述的方法，其中至少一個經(jīng)四氫吡喃修飾的核苷中的每一個具有以下結(jié)構(gòu)
34.權(quán)利要求31所述的方法，其中至少一種經(jīng)修飾的糖是雙環(huán)糖。
35.權(quán)利要求31所述的方法，其中至少一種經(jīng)修飾的糖包含2’-0-甲氧基乙基或,4’ -(CH2)n-0_2’ 橋，其中 n 是 I 或 2。
36.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法,其中經(jīng)修飾的寡核苷酸的至少一個核苷包含經(jīng)修飾的核堿基。
37.權(quán)利要求36所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的核堿基是5-甲基胞嘧啶。
38.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成。
39.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸包含 a.由連接脫氧核苷組成的缺口區(qū)段； b.由連接核苷組成的5’翼區(qū)段； c.由連接核苷組成的3’翼區(qū)段； 其中所述缺口區(qū)段位于5’翼區(qū)段與3’翼區(qū)段之間并且每個翼區(qū)段中的每個核苷包含經(jīng)修飾的糖。
40.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成，具有包含選自SEQ ID NO :34-182中任一個的核堿基序列的至少8個連續(xù)核堿基的核堿基序列，并且包含 a.由10個連接脫氧核苷組成的缺口區(qū)段； b.由5個連接核苷組成的5’翼區(qū)段； c.由5個連接核苷組成的3’翼區(qū)段； 其中所述缺口區(qū)段位于5’翼區(qū)段與3’翼區(qū)段之間，其中每個翼區(qū)段的每個核苷包含2’ -O-甲氧基乙基糖，其中每個核苷間鍵合是硫代磷酸酯鍵合，并且其中每個胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。
41.一種用于治療患有代謝疾病或心血管疾病的動物的方法，其包括 a.鑒定患有代謝疾病或心血管疾病的所述動物， b.向所述動物施用治療有效量的包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成并且具有與SEQ ID NO :1-5至少90%互補的核堿基序列，如對經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性所測量的， 其中患有代謝疾病或心血管疾病的所述動物被治療。
42.權(quán)利要求41所述的方法，其中向所述動物施用所述治療有效量的化合物減少所述動物中的代謝疾病或心血管疾病。
43.權(quán)利要求7或41的方法，其中所述代謝疾病或心血管疾病是肥胖癥、糖尿病、動脈粥樣硬化、血脂障礙、冠心病、非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)、高脂肪酸血癥或代謝綜合征或其組合。
44.權(quán)利要求43所述的方法，其中所述血脂障礙是高脂血癥。
45.權(quán)利要求44所述的方法，其中所述高脂血癥是高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥、高膽固醇血癥和高甘油三酯血癥兩者。
46.權(quán)利要求43所述的方法，其中所述NAFLD是肝脂肪變性或脂肪肝炎。
47.權(quán)利要求43所述的方法，其中所述糖尿病是2型糖尿病或具有血脂障礙的2型糖尿病。
48.權(quán)利要求I所述的方法，其中所述施用導(dǎo)致脂質(zhì)水平減少，包括甘油三酯水平、膽固醇水平、胰島素抵抗、葡萄糖水平或其組合。
49.權(quán)利要求48所述的方法，其中所述水平獨立地減少5%、10%、20%、30%、35%或40%。
50.權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述施用導(dǎo)致提高的胰島素敏感性。
51.權(quán)利要求50所述的方法，其中所述施用導(dǎo)致提高的胰島素敏感性。
52.一種通過施用包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的ANGPTL3抑制劑減少人中ANGPTL3水平、LDL水平、apoC-III水平、甘油三酯水平、膽固醇水平、葡萄糖水平、脂肪墊重、心血管疾病和代謝疾病中的一者或多者的方法，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成并且具有與SEQ ID NO :1-5至少90%互補的核堿基序列，如對所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的整體性所測量的。
53.權(quán)利要求1-52中任一項所述的方法，其中所述施用導(dǎo)致動脈粥樣硬化斑塊、肥胖癥、葡萄糖、脂質(zhì)、葡萄糖抗性、膽固醇減少或胰島素敏感性增加或其任何組合。
54.—種包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由10至30個連接核苷組成并且具有包含選自SEQ ID NO :34-182中任一個的核堿基序列的至少8個連續(xù)核堿基的核喊基序列。
55.權(quán)利要求54所述的化合物，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的核堿基序列與SEQIDNO :1-5至少95%互補。
56.權(quán)利要求54所述的化合物，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸的核堿基序列與SEQIDNO :1-5至少100%互補。
57.權(quán)利要求54所述的化合物，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸是單鏈寡核苷酸。
58.權(quán)利要求54所述的化合物，其中至少一個核苷間鍵合是經(jīng)修飾的核苷間鍵合。
59.權(quán)利要求58所述的化合物，其中每個核苷間鍵合是硫代磷酸酯核苷間鍵合。
60.權(quán)利要求54所述的化合物，其中至少一個核苷包含經(jīng)修飾的糖。
61.權(quán)利要求60所述的化合物，其中至少一種經(jīng)修飾的糖是雙環(huán)糖。
62.權(quán)利要求60所述的化合物，其中至少一種經(jīng)修飾的糖包含2’-0-甲氧基乙基或4’ -(CH2)n-0_2’ 橋，其中 n 是 I 或 2。
63.權(quán)利要求54所述的化合物，其中至少一個核苷包含經(jīng)修飾的核堿基。
64.權(quán)利要求63所述的化合物，其中所述經(jīng)修飾的核堿基是5-甲基胞嘧啶。
65.權(quán)利要求54所述的化合物，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸包含 由連接脫氧核苷組成的缺口區(qū)段； 由連接核苷組成的5’翼區(qū)段； 由連接核苷組成的3’翼區(qū)段； 其中所述缺口區(qū)段位于5’翼區(qū)段與3’翼區(qū)段之間，并且其中每個翼區(qū)段的每個核苷包含經(jīng)修飾的糖。
66.權(quán)利要求54所述的化合物，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成并且包含 由10個連接脫氧核苷組成的缺口區(qū)段； 由5個連接核苷組成的5’翼區(qū)段； 由5個連接核苷組成的3’翼區(qū)段； 其中所述缺口區(qū)段位于5’翼區(qū)段與3’翼區(qū)段之間，其中每個翼區(qū)段的每個核苷包含2’ -0-甲氧基乙基糖；且其中每個核苷間鍵合是硫代磷酸酯鍵合。
67.權(quán)利要求54所述的化合物，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成。
68.一種包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物或其鹽和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由10至30個連接核苷組成并且具有包含選自SEQ ID NO :34-182中任一個所述的序列的核堿基序列的至少8個連續(xù)核堿基的核堿基序列。
69.權(quán)利要求68所述的化合物，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸是單鏈寡核苷酸。
70.權(quán)利要求68所述的化合物，其中所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成。
71.—種包含經(jīng)修飾的寡核苷酸的化合物，所述經(jīng)修飾的寡核苷酸由20個連接核苷組成，并且具有包含選自SEQ ID NO :34-182中任一個的核堿基序列的至少8個連續(xù)核堿基的核堿基序列，其中經(jīng)修飾的寡核苷酸包含 由10個連接脫氧核苷組成的缺口區(qū)段； 由5個連接核苷組成的5’翼區(qū)段； 由5個連接核苷組成的3’翼區(qū)段； 其中所述缺口區(qū)段位于5’翼區(qū)段與3’翼區(qū)段之間，其中每個翼區(qū)段的每個核苷包含2’ -O-甲氧基乙基糖，其中每個核苷間鍵合是硫代磷酸酯鍵合，并且其中每個胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。
全文摘要
本文提供的是用于減少動物中ANGPTL3mRNA和蛋白的表達的方法、化合物和組合物。本文還提供的是用于在動物中減少血漿脂質(zhì)、血漿葡萄糖和動脈粥樣硬化斑塊的方法、化合物和組合物。此類方法、化合物和組合物可用于治療、預(yù)防、延緩或減輕任何一種或多種心血管疾病或代謝疾病或其癥狀。
文檔編號A61K31/7105GK102753186SQ201180008657
公開日2012年10月24日 申請日期2011年1月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月8日
發(fā)明者K·W·多比, M·J·格雷厄姆, R·M·克魯克, R·李 申請人:Isis制藥公司