專利名稱：松蘿酸和/或其鹽的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種化合物的用途，尤其涉及松蘿酸和/或其鹽在制備痤瘡丙酸桿菌抑制劑中的用途，還涉及松蘿酸和/或其鹽在制備用于治療或預(yù)防由痤瘡丙酸桿菌繁殖引起的粉刺的藥物或護(hù)膚品中的用途。
背景技術(shù)：
松蘿酸為松蘿科(Usneaceae)植 物松蘿Usnea diffracta Vain.和長松蘿Usnea longissima Ach.的干燥地衣體提取物。松蘿酸也稱地衣酸，英文名稱為Usninicacid ;分子式C18H16O7 ;化學(xué)名為:1，3 (2H, 9bH) -Dibenzofurandione, 2,6-diacetyl_7，9-dihydroxy-8,9b-dimethyl ;分子量為344. I。物理化學(xué)性質(zhì)松蘿酸具有旋光性，在地衣中發(fā)現(xiàn)有(+)_及(-)_兩種形式。松蘿酸易溶于氯仿，難溶于甲醇。在地衣顯色反應(yīng)中，松蘿酸與KOH反應(yīng)顯黃色；與KOH和NaCl混合液反應(yīng)顯深黃色；松蘿酸在丙酮溶液中是黃色斜方棱柱結(jié)晶，在氯仿乙醇混合液或者苯溶液中呈針形。松蘿酸的衍生物鈉鹽為淡黃色絲針晶，略溶于水；松蘿酸的衍生物通常以松蘿酸鈉存在，是脂肪酸和氫氧化鈉反應(yīng)的產(chǎn)物。松蘿酸及其衍生物具有很好的抗菌生物活性，松蘿酸的抗菌譜主要為革蘭陽性細(xì)菌及結(jié)核桿菌。在試管中，松蘿酸對肺炎球菌、溶血性鏈球菌、白喉?xiàng)U菌、結(jié)核桿菌都有很強(qiáng)的抑菌作用，抑菌濃度為1_5μ g/ml，50l·! g/ml可完全抑制細(xì)菌的生長。對金黃色葡萄球菌的抑制作用比對上述細(xì)菌稍弱，但強(qiáng)于對革蘭陰性細(xì)菌的作用。左旋與右旋型的抗菌作用無多大差別。但也有文獻(xiàn)記載，對革蘭陰性的百日咳桿菌、枯草桿菌、肺炎桿菌、大腸桿菌、變形桿菌有效，而對痢疾桿菌、傷寒桿菌無效。此外，松蘿酸還具有植物生長抑制劑作用和抗病毒作用。粉刺也稱痤瘡，是一種復(fù)雜的、慢性的和普遍性的皮脂腺功能紊亂疾病，主要發(fā)生在青少年的臉部、前胸和后背。它最初表現(xiàn)是由雄性激素過多引起的尖頭突起。近年來，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了粉刺的很多發(fā)病機(jī)理，但是還是有一些機(jī)理尚未明確。簡單地說，粉刺的發(fā)生機(jī)理主要有皮脂腺毛囊的堵塞而角質(zhì)化，厭氧細(xì)菌的繁殖，炎癥的產(chǎn)生。從臨床的表現(xiàn)來看，粉刺分為有炎癥伴發(fā)型和無炎癥伴發(fā)型。無炎癥的粉刺開始的表現(xiàn)是黑頭粉刺，它開始是不可見的微黑頭，最后可以轉(zhuǎn)化為任何類型的粉刺。微黑頭的形成原因是毛囊的漏斗樣真皮組織引起的異常角質(zhì)化。兩種類型的粉刺可以在形態(tài)上進(jìn)行區(qū)分，一個是閉合的黑頭，而另一個是開放的丘疹?，F(xiàn)在普遍認(rèn)同的粉刺發(fā)病機(jī)理是多重性的，四個最重要的發(fā)病機(jī)理已經(jīng)被鑒定了出來(1)雄性激素刺激皮脂腺的分泌。⑵角化過度和毛囊堵塞引起的漏斗樣真皮組織的異常脫屑。(3)痤瘡丙酸桿菌的大量繁殖。(4)炎癥的產(chǎn)生。粉刺發(fā)病的一個重要因素是細(xì)菌的大量繁殖，從痤瘡患者的粉刺毛囊皮脂腺單位中分離出痤瘡丙酸桿菌(P. acnes)、顆粒丙酸桿菌、金黃色葡萄球菌、中間葡萄球菌和表皮葡萄球菌等致病菌?？梢哉J(rèn)為，痤瘡患者致病因素中細(xì)菌感染是主要原因之一，而痤瘡丙酸桿菌(P. acnes)是主要致病菌。痤瘡丙酸桿菌是寄生于人類皮膚毛囊皮脂腺單位里的一種細(xì)菌，屬于革蘭氏陽性無芽孢厭氧菌。通常寄生在皮膚的粘膜上，屬于條件致病菌?，F(xiàn)代科學(xué)認(rèn)為痤瘡丙酸桿菌主要依賴皮質(zhì)中的脂肪為營養(yǎng)，獲取甘油三酯的能量，將甘油三酯分解成脂肪酸。游離在粉刺毛囊中的脂肪酸和痤瘡丙酸桿菌的數(shù)量正相關(guān)，這些游離的脂肪酸可以產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。同時，粉刺毛囊又為痤瘡丙酸桿菌的繁殖提供了很好的厭氧環(huán)境，還提供了細(xì)菌生長的良好的營養(yǎng)成分，從而痤瘡丙酸桿菌大量繁殖。顯微鏡下觀察痤瘡丙酸桿菌的超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)痤瘡丙酸桿菌長度為3 5um，寬度為O. 4 O. 7um ;大量的核糖體分布在細(xì)胞質(zhì)中；細(xì)胞壁以肽聚糖為主。一般認(rèn)為，痤瘡丙酸桿菌是諸多細(xì)菌感染的主要原因，同時也是主要的致病菌。痤瘡丙酸桿菌中的許多成分可以刺激角化細(xì)胞產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子和炎癥因子，這些成分包括，肽聚糖、脂多糖、細(xì)菌分泌的酶和一些相關(guān)的蛋白因子。而未受痤瘡丙酸桿菌感染的角化細(xì)胞幾乎不產(chǎn)生上述的細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子和炎癥因子可以趨化炎癥細(xì)胞到痤瘡周圍，引發(fā)炎癥損害，這種炎癥樣的因素也被認(rèn)為是痤瘡的發(fā)病機(jī)理之一。
痤瘡丙酸桿菌在促成大量細(xì)胞因子的同時,還產(chǎn)生大量的胞外酶,這些酶包括蛋白酶、透明質(zhì)酸酶和脂肪酶等酶物質(zhì)，這些因素都可以引發(fā)粉刺的炎癥反應(yīng)。痤瘡丙酸桿菌可以產(chǎn)生蛋白酶和一些趨化性因子，可以引發(fā)免疫反應(yīng)，誘導(dǎo)抗體的產(chǎn)生，并通過激活補(bǔ)體途徑，引發(fā)其免疫介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，從而加重粉刺的生成。同時粉刺本身部位的皮脂腺功能異常，皮脂代謝紊亂，又引起大量的細(xì)菌繁殖，這些菌群以痤瘡丙酸桿菌為主，同時又伴隨著大量的葡萄球菌。脂類成分除了作為痤瘡丙酸桿菌的營養(yǎng)成分之外，還有一部分直接參與到炎癥路徑中。多年來，科學(xué)家們對痤瘡丙酸桿菌誘導(dǎo)炎癥產(chǎn)生做了大量的研究。認(rèn)為痤瘡丙酸桿菌通過產(chǎn)生酯酶、蛋白酶、透明質(zhì)酸酶分解脂肪成為甘油和脂肪酸，并在此過程中，釋放出組胺和一些細(xì)胞趨化性物質(zhì)引發(fā)炎癥。不過由于T淋巴細(xì)胞浸潤是痤瘡炎癥早期的皮損中最早發(fā)現(xiàn)的，近年來研究更傾向認(rèn)為痤瘡丙酸桿菌導(dǎo)致炎癥生產(chǎn)的過程是一種超敏反應(yīng)。通過對患者血清抗體的檢測,發(fā)現(xiàn)患者體內(nèi)的針對痤瘡丙酸桿菌細(xì)胞壁成分一些特殊多糖的抗體濃度明顯升高，并且炎癥的程度跟抗體的濃度呈現(xiàn)正相關(guān)，而并未發(fā)現(xiàn)其他部位的抗原免疫反應(yīng)。隨后的研究證實(shí)參與到嚴(yán)重炎癥反應(yīng)中的免疫球蛋白是IgG，而參與到較輕炎癥反應(yīng)中的主要的免疫球蛋白是IgM，更充分顯示出痤瘡的嚴(yán)重程度跟免疫有關(guān)。痤瘡丙酸桿菌細(xì)胞壁的肽聚糖可能參與到免疫反應(yīng)中，這個較短的多糖片段很容易進(jìn)入表皮，刺激真皮的免疫細(xì)胞生成IL-I a、TNF_a、IL-8等炎癥因子，這些炎癥因子可以調(diào)節(jié)粘附分子的表達(dá)。綜上，痤瘡丙酸桿菌可能在粉刺炎癥中，尤其在痤瘡的嚴(yán)重程度上起到重要的作用。當(dāng)然痤瘡丙酸桿菌也不是痤瘡產(chǎn)生的唯一因素，這是因?yàn)閹缀跛腥说拿抑卸即嬖谶@種細(xì)菌，而且并不是每個存在這種細(xì)菌的毛囊都會引發(fā)感染。有人研究發(fā)現(xiàn)痤瘡丙酸桿菌的密度跟痤瘡的嚴(yán)重程度并沒有太大相關(guān)性，同時也說明還有更多的因素參與的痤瘡炎癥形成的過程中來。痤瘡丙酸桿菌通過免疫途徑和非免疫途徑引起局部炎癥的機(jī)制有(I)痤瘡丙酸桿菌細(xì)胞壁中的肽聚糖擴(kuò)散到毛囊周圍組織，從而刺激免疫細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子-a和白介素_8，并異常表達(dá)粘附分子。(2)淋巴細(xì)胞趨化因子，中性粒細(xì)胞趨化因子，TNF-a、IL-8等細(xì)胞因子趨化淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞到皮脂腺毛囊中。(3)痤瘡丙酸桿菌與特異的抗體結(jié)合，通過補(bǔ)體途徑激活免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生補(bǔ)體片段C5a，這種片段可以很大程度的趨化中性粒細(xì)胞。(4)在痤瘡丙酸桿菌抗體參與時，中性粒細(xì)胞可以釋放多種水解酶，這些酶具有損傷真皮，破壞毛囊壁的作用。(5)痤瘡丙酸桿菌可以分泌大量的酯酶和蛋白酶，從而對毛囊壁結(jié)構(gòu)造成了破壞。(6)細(xì)胞壁中的肽聚糖刺激毛囊周圍產(chǎn)生肉芽腫脹反應(yīng)。(7)亞油酸物質(zhì)的缺乏造成自由基的生成，O2^H2O2和OH ·造成 周圍組織的損傷和毛囊完整性的破壞。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供了松蘿酸和/或其鹽作為痤瘡丙酸桿菌抑制劑的用途，本發(fā)明還提供了松蘿酸和/或其鹽在用于制備預(yù)防或治療由痤瘡丙酸桿菌繁殖引起的粉刺的藥物或化妝品中的用途。松蘿酸和/或其鹽可有效治療因痤瘡丙酸桿菌繁殖引起的粉刺生成，對人體毒性低，具有很好的應(yīng)用前景。本發(fā)明提供了松蘿酸和/或其鹽作為痤瘡丙酸桿菌抑制劑的用途。本發(fā)明還提供了松蘿酸和/或其鹽在用于制備預(yù)防或治療由痤瘡丙酸桿菌繁殖弓I起的粉刺的藥物或化妝品中的用途。本發(fā)明所述的松蘿酸可以是松蘿酸的純品、粗品或植物提取物。其中，所述的松蘿酸純品或粗品可通過本領(lǐng)域常規(guī)方法獲得，如從植物(尤其是松蘿)中提取、化學(xué)合成或者生物合成。其中，所述的松蘿酸的植物提取物通常是從植物地衣中采用本領(lǐng)域常規(guī)提取方法提取得到的。古麗娜 巴克等研究了分枝石蕊中松蘿酸提取方法以及提取條件的優(yōu)化(中國科學(xué)院上海冶金研究所；材料物理與化學(xué)(專業(yè))博士論文2000年度，《分枝石蕊有效成分分析》)。其結(jié)果表明，分枝石蕊中松蘿酸的最件提取條件為料液比為I : 10，提取時間為4h，提取溫度為60°C，提取次數(shù)為2次；黃綠色針狀結(jié)晶體測得的熔點(diǎn)范圍及吸收峰與松蘿酸的相關(guān)報道一致。熱衣木·馬木提(《中國釀造》，2010，11期，P122-124)等以新疆天山后峽地區(qū)英雄橋采集的角石蕊為材料，采用有機(jī)溶劑提取法，考察了提取次數(shù)、料液t匕、提取溫度和提取時間對角石蕊中松蘿酸提取率的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明角石蕊中提取松蘿酸的最佳提取工藝條件為提取3次，料液比I : 20，溫度70°C，提取時間3h。此條件下角石蕊中松蘿酸的含量為26.95%。本專利申請中對上述文獻(xiàn)的引用視為對該文獻(xiàn)的全文引用。其中，所述的松蘿酸鹽為本領(lǐng)域常規(guī)的松蘿酸鹽，較佳地為松蘿酸鈉和/或松蘿酸鉀。本發(fā)明所述的松蘿酸鹽可以是松蘿酸鹽的純品、粗品或植物提取物。其中，所述的松蘿酸衍生物純品或粗品可通過本領(lǐng)域常規(guī)方法獲得，如從植物(尤其是松蘿)中提取、化學(xué)合成或者生物合成。其中，所述的松蘿酸鹽的植物提取物通常是從植物松蘿中采用本領(lǐng)域常規(guī)提取方法提取得到的。
本發(fā)明中所述松蘿酸和/或其鹽的藥物載體可為本領(lǐng)域常規(guī)的各種載體，較佳地包括微球、脂質(zhì)體或微乳液。所述藥物的劑型可為本領(lǐng)域常規(guī)的各種外用劑型，較佳地包括噴霧劑、軟膏和乳膏等中的一種或多種。所述藥物的給藥形式為皮膚給藥。本發(fā)明中所述的化妝品可以是本領(lǐng)域各種類型的化妝品，如香皂、洗面奶、爽膚水、乳液或膏霜等。所述的松蘿酸及其鹽在所述藥物或化妝品中的含量較佳地為O. 000 Iwt % -99wt %，最佳地為 O. 00 Iwt % -5wt %。本發(fā)明所述的痤瘡丙酸桿菌抑制劑中除了松蘿酸以外，還可根據(jù)常識包含其他抗菌和/或抗炎的活性成分，只要該活性成分與松蘿酸不產(chǎn)生明顯的拮抗作用即可。本發(fā)明所述的預(yù)防或治療由痤瘡丙酸桿菌繁殖引起的粉刺的藥物或化妝品中除了松蘿酸以外，還可根據(jù)常識包含其他抗菌和/或抗炎的活性成分，只要該活性成分與松蘿酸不產(chǎn)生明顯的拮抗作用即可?！け景l(fā)明中，上述優(yōu)選條件在符合本領(lǐng)域常識的基礎(chǔ)上可任意組合，即得本發(fā)明各較佳實(shí)施例。本發(fā)明的原料和試劑皆市售可得。本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于I、本發(fā)明提供了松蘿酸及其鹽的新用途，是一種潛在的高效低毒藥物，為治療痤瘡丙酸桿菌大量繁殖弓I起的粉刺提供了應(yīng)用前景。2、松蘿酸及其鹽能夠制成各種藥物劑型和化妝品形式，應(yīng)用簡便，易于使用。


圖I為松蘿酸對痤瘡丙酸桿菌的抑制作用圖。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，但本發(fā)明并不限于此。實(shí)施例I松蘿酸對痤瘡丙酸桿菌的抑制實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)菌株痤瘡丙酸桿菌(ATCC6919)培養(yǎng)基(I)液體培養(yǎng)基胰蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，葡萄糖5g/L，NaCl 5g/L，酵母膏3g/L，醋酸鈉3g/L，可溶性淀粉lg/L，半胱氨酸鹽酸鹽O. 5g/L，蒸餾水溶解，調(diào)節(jié)pH為
6.8±0. 2，115°C高壓滅菌20min。(2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加入瓊脂15g/L0實(shí)驗(yàn)方法抑菌圈測定將痤瘡丙酸桿菌接種于固體培養(yǎng)基中，于37°C厭氧條件培養(yǎng)2d進(jìn)行活化，活化后的直接將菌斑用生理鹽水稀釋，制備成菌懸液。取活化后菌懸液O. 5ml于液體培養(yǎng)基中，于37°C厭氧條件培養(yǎng)2d，為實(shí)驗(yàn)菌懸液。實(shí)驗(yàn)方法采用杯碟法，在培養(yǎng)皿中倒入5ml固體培養(yǎng)基，待凝固；另取固體培養(yǎng)基于微波爐中溶化，待溫度降到50°C左右時，加入實(shí)驗(yàn)菌懸液，調(diào)整痤瘡丙酸桿菌濃度為105CFU/ml，將含有痤瘡丙酸桿菌的固體培養(yǎng)基約7ml倒入5ml凝固的固體培養(yǎng)基上層，凝固后，在培養(yǎng)基上等距離放2個無菌牛灃杯[內(nèi)徑出.0±0. Dmm,外徑(8. 0±0· l)mm，高(10. 0±0· l)mm，在杯內(nèi)分別注入100 μ I待測樣品(用含10% DMSO的生理鹽水稀釋)，用含10% DMSO的生理鹽水作為對照。37°C厭氧培養(yǎng)2d后，用直尺測量松蘿酸的抑菌圈直徑，取其平均值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表I和圖I :表I松蘿酸對痤瘡丙酸桿菌的抑制作用
權(quán)利要求
1.松蘿酸和/或其鹽作為痤瘡丙酸桿菌抑制劑的用途。
2.如權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于所述的鹽為鈉鹽和/或鉀鹽。
3.松蘿酸和/或其鹽在用于制備預(yù)防或治療由痤瘡丙酸桿菌繁殖引起的粉刺的藥物或化妝品中的用途。
4.如權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于所述的鹽為鈉鹽和/或鉀鹽。
5.如權(quán)利要求3或4所述的用途，其特征在于所述的松蘿酸和/或其鹽在所述藥物或化妝品中的含量為O. OOO Iwt % -99wt%。
6.如權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于所述的松蘿酸和/或其鹽在所述藥物或化妝品中的含量為O. 00 Iwt % -5wt%。
7.如權(quán)利要求3或4所述的用途，其特征在于所述的松蘿酸和/或其鹽的藥物載體包括微球、脂質(zhì)體或微乳液。
8.如權(quán)利要求3或4所述的用途，其特征在于所述藥物的劑型為外用劑型，較佳地為噴霧劑、軟膏或乳膏。
9.如權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于所述藥物的給藥方式為皮膚給藥。
10.如權(quán)利要求3或4所述的用途，其特征在于所述的化妝品包括香皂、爽膚水、乳液或膏霜。
全文摘要
本發(fā)明公開了松蘿酸和/或其鹽作為痤瘡丙酸桿菌抑制劑的用途本發(fā)明還公開了松蘿酸和/或其鹽在用于制備預(yù)防或治療由痤瘡丙酸桿菌繁殖引起的粉刺的藥物或化妝品中的用途。本發(fā)明可有效的治療因痤瘡丙酸桿菌繁殖引起的粉刺生成。松蘿酸和/或其鹽即可來源于松蘿植物中又可來源于人工合成，其對人體毒性低，對痤瘡丙酸桿菌的抑菌作用高，能夠制成各種外用藥物劑型和化妝品，具有很好的應(yīng)用前景。
文檔編號A61P17/10GK102949298SQ20111043093
公開日2013年3月6日 申請日期2011年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月20日
發(fā)明者孫常磊, 段朝輝, 朱麗平, 翟春濤 申請人:上海萊博生物科技有限公司