專利名稱：天然植物中一個活性新成分的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于新化合物及其制備方法技術(shù)領(lǐng)域，具體為從紅花芒毛苣苔中分離純化的新化合物的制備方法。
背景技術(shù)：
天然藥物是指自然界中存在的有藥理活性的天然產(chǎn)物。隨著社會的發(fā)展，人們越來越關(guān)注化學(xué)藥品給人類自身健康及生活環(huán)境帶來的負(fù)面影響；回歸自然、保護環(huán)境已成為一種處理人類和環(huán)境關(guān)系的潮流思想。對天然藥物的研究和開發(fā)順勢大力發(fā)展，天然藥物成為極為重要的藥物開發(fā)資源。我國擁有豐富的中藥材資源，中醫(yī)藥發(fā)展前景仍然非常廣闊，應(yīng)大力發(fā)展中醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)。當(dāng)前，由于從化學(xué)合成物中篩選新藥的難度越來越大、時間越來越長、投入越來越高，并且化學(xué)藥物對人體的毒副作用，易產(chǎn)生抗藥性和藥源性疾病等弱點越來越明顯，因此，許多國家轉(zhuǎn)向了天然藥物的研究、開發(fā)和利用，使其成為繼化學(xué)藥物、生物制劑、基因工程類藥品之后最具發(fā)展前景的特色產(chǎn)業(yè)，中藥產(chǎn)業(yè)也將成為世界醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的重要發(fā)展方向之一。世界許多國家在新藥開發(fā)方面都寄托于天然藥物。中國具有世界上最豐富的天然藥物資源，據(jù)全國中藥材資源調(diào)查表明，目前我國現(xiàn)有的中藥資源種類為12807種，有著廣闊的發(fā)展前景。隨著近年天然藥物有效成分提取、分離、純化及結(jié)構(gòu)研究技術(shù)的不斷發(fā)展和應(yīng)用，使得天然藥物獲得更為快速的增長。天然藥物作為來自植物的 “綠色藥品”已受到越來越多消費者的青睞，隨著全球崇尚自然熱潮的興起，天然藥物必將成為21世紀(jì)最受歡迎的藥物之一。紅花芒毛苣苔為苦苣苔科芒毛苣苔屬植物Aeschynanthus moningeriae (Merr.), 生于山谷林中或溪邊石上，海拔800-1200米，為野生海南植物。據(jù)文獻(xiàn)報道，苦苣苔科植物在全世界有120 140個屬，在我國有54個屬，其中藥用植物有100多種。該科植物中所含的化學(xué)成分主要為黃酮類、苯乙醇類、醌類和萜類等，具有顯著的抑菌、抗氧化、、抗病毒、 抗炎、祛痰止咳等作用。經(jīng)文獻(xiàn)檢索，尚未見有對紅花芒毛苣苔化學(xué)成分進(jìn)行研究的報道。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，本發(fā)明的目的在于設(shè)計提供一種從紅花芒毛苣苔中分離制備的新化合物的技術(shù)方案，其制備工藝簡單，加工制備的成本低、純度好、收得率高。制得的單體化合物具有較強的抑菌活性和抗氧化活性。所述的從紅花芒毛苣苔中分離純化的新成分，其特征在于包括以下步驟I)原料的處理取干燥的紅花芒毛苣苔，粉碎成粗粉，備用；2)冷浸提取將干燥的紅花芒毛苣苔用折合紅花芒毛苣苔藥材干重8倍量的 50% 80%含水乙醇進(jìn)行冷浸提取3次，每次提取12 20小時，合并提取液。3)閃蒸濃縮將提取液在水浴溫度60 70°C下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮，得到折合每毫升濃縮液含0. 5 I. 0克原藥材的濃縮液；4)萃取粗分得到的濃縮液分散到適量的水中，分別用乙酸乙酯、正丁醇萃取。萃取溶劑的用量為濃縮液與萃取溶劑的體積比為I : 1-3，萃取3 5次。分別得到乙酸乙酯、正丁醇萃取部位。將各萃取部位在水浴溫度60 70°C下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮，得到各部位的濃縮液；5)大孔樹脂純化得到的正丁醇濃縮液通過Diaion HP-20大孔吸附樹脂分離富集，先用H2O洗脫，再依次用10% 70%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫，最后用70%丙酮洗脫，分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液。將各含水乙醇部位的洗脫液在60 70°C以下真空閃蒸濃縮、干燥得粉末；6)柱色譜分離純化將上述50%含水乙醇洗脫部位的濃縮干粉溶于少量的水中， 通過S印hadex LH-20和MCI-gelCHP_20柱色譜，用水、10%含水乙醇、20%含水乙醇、40% 含水乙醇、60%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫，最后用70%丙酮洗脫，TLC檢識，相同流分合并，從中分離得到為白色粉末的新成分；所述的從紅花芒毛苣苔中分離純化的新成分，其特征在于所述的新成分為5， 7- 二羥基-8-C- ^ -D-葡萄糖色酮碳苷，其結(jié)構(gòu)式為
權(quán)利要求
1.天然植物中一個活性新成分的制備方法，其特征在于包括以下步驟1)原料的處理取干燥的紅花芒毛苣苔，粉碎成粗粉，備用；2)冷浸提取將干燥的紅花芒毛苣苔用折合紅花芒毛苣苔藥材干重8倍量的50% 80%含水乙醇進(jìn)行冷浸提取3次，每次提取12 20小時，合并提取液；3)閃蒸濃縮將提取液在水浴溫度60 70°C下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮， 得到折合每毫升濃縮液含O. 5 I. O克原藥材的濃縮液；4)萃取粗分得到的濃縮液分散到適量的水中，分別用乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取溶劑的用量為濃縮液與萃取溶劑的體積比為I : 1-3，萃取3 5次，分別得到乙酸乙酯、正丁醇萃取部位，將各萃取部位在水浴溫度60 70°C下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮， 得到各部位的濃縮液；5)大孔樹脂純化得到的正丁醇濃縮液通過DiaionHP-20大孔吸附樹脂分離富集，先用H2O洗脫，再依次用10% 70%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫，最后用70%丙酮洗脫，分別收集 3倍柱體積的各部位洗脫液，將各含水乙醇部位的洗脫液在60 70°C以下真空閃蒸濃縮、 干燥得粉末；6)柱色譜分離純化將上述50%含水乙醇洗脫部位的濃縮干粉溶于少量的水中，通過 Sephadex LH-20和MCI_ge 1CHP-20柱色譜，用水、10 %含水乙醇、20 %含水乙醇、40 %含水乙醇、60%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫，最后用70%丙酮洗脫，TLC檢識，相同流分合并，從中分離得到為白色粉末的新成分；
2.如權(quán)利要求I所述的紅花芒毛苣苔中的活性新成分的制備方法，其特征在所述的化合物為5，7- 二羥基-8-C- β -D-葡萄糖色酮碳苷，其結(jié)構(gòu)式為
3.如權(quán)利要求I所述的一個活性新成分的制備方法，其特征在于步驟2)中冷浸所用含水乙醇的濃度為55% 70%，優(yōu)選65% 70% ;每次提取時間為15 20小時，優(yōu)選 16 18小時。
4.如權(quán)利要求I所述的一個活性新成分的制備方法，其特征在于步驟4)中萃取溶劑的用量為濃縮液與萃取溶劑的體積比為I : 1-2。
5.如權(quán)利要求I所述的一個活性新成分的制備方法，其特征在于步驟5)中先用H2O 洗脫，再依次用10 %含水乙醇、20 %含水乙醇、40 %含水乙醇、60 %含水乙醇、70 %含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫，最后用70%丙酮洗脫，分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液，合并20%含水乙醇、40 %含水乙醇、60 %含水乙醇部位的洗脫液。
6.如權(quán)利要求I所述的一個活性新成分的制備方法，其特征在于步驟5)中先用H2O洗脫，再依次用10 %含水乙醇、25 %含水乙醇、45 %含水乙醇、65 %含水乙醇、70 %含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫，最后用70%丙酮洗脫，分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液，合并25%含水乙醇、50 %含水乙醇、65 %含水乙醇部位的洗脫液。
7.如權(quán)利要求I所述的一個活性新成分的制備方法，其特征在于步驟5)中先用H2O 洗脫，再依次用15 %含水乙醇、30 %含水乙醇、40 %含水乙醇、55 %含水甲乙醇、70 %含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫，最后用70%丙酮洗脫，分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液，合并15%含水乙醇、30 %含水乙醇、45 %含水乙醇、55 %含水乙醇部位的洗脫液。
8.如權(quán)利要求I所述的一個活性新成分在防氧化、抑菌方面的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種從天然植物紅花芒毛苣苔中分離純化活性新成分的制備方法。本發(fā)明的特點是采用傳統(tǒng)提取及色譜分離技術(shù)從紅花芒毛苣苔中分離純化新新化合物，包括冷浸提取、閃蒸濃縮、柱色譜分離等，從紅花芒毛苣苔中分離得到1個新化合物5，7-二羥基-8-C-β-D-葡萄糖色酮碳苷。該化合物的提取率為1.1％，純度達(dá)96％以上。本發(fā)明具有制備工藝較簡單、經(jīng)濟、安全，得率高。無污染等特點。經(jīng)初步活性研究表明，所制備的該化合物具有一定的抑菌和抗氧化作用，具有很好的開發(fā)應(yīng)用前景。
文檔編號A61K31/352GK102584805SQ20111041217
公開日2012年7月18日 申請日期2011年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月7日
發(fā)明者劉輝鑫, 袁珂 申請人:浙江農(nóng)林大學(xué)