專利名稱：一種改進的載植物多酚類化合物緩釋微球的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種改進的載植物多酚類化合物緩釋微球的制備方法及由此制備的載植物多酚類化合物緩釋微球，屬于微球制備技術(shù)。
背景技術(shù)：
植物多酚類化合物是存在于植物中的具有多個酚羥基的化學(xué)物質(zhì)，可分布于植物的表皮、根、莖、葉、花和果實中。植物多酚類化合物具有還原性、清除自由基能力以及多種生理活性，例如可對自由基誘發(fā)的脂質(zhì)過氧化及生物大分子損傷起到有效的保護作用，延緩機體衰老、預(yù)防和治療心腦血管疾病、抗炎、抗腫瘤、抗?jié)兊?。海藻酸鹽微球因其制備過程簡單，不需要高溫、添加有機溶劑或其它有害化合物， 在藥物緩釋、細(xì)胞及酶的固定化等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。載藥海藻酸鹽微球的制備過程通常是先將藥物與海藻酸鈉水溶液混合，然后采用針頭注射法、氣體剪切法或毛細(xì)管破碎法等方法以微小液滴形式加入到海藻酸鈉的膠凝劑溶液(例如氯化鈣溶液)中，立刻就可形成載藥海藻酸鈣凝膠微球。這種載藥微球口服后藥物會被緩慢釋放，可減少血濃“峰·谷” 效應(yīng)與服藥次數(shù)。如果氯化鈣溶液中還含有殼聚糖，凝膠微球表面就會形成殼聚糖與海藻酸鈣聚電解質(zhì)膜，既可提高凝膠微球的穩(wěn)定性，還可進一步調(diào)節(jié)所載藥物的釋放速度。利用該法同樣可以制備出載植物多酚類化合物的緩釋微球，但是在制備過程中，植物多酚類化合物會從凝膠微球中泄露到膠凝劑溶液中，造成損失，尤其是當(dāng)植物多酚類化合物分子量較小或者為水溶性時，泄露損失更大。

發(fā)明內(nèi)容
為解決上述技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明的目的是提供一種改進的載植物多酚類化合物緩釋微球的制備方法，可以降低制備過程中植物多酚類化合物的泄露損失。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種改進的載植物多酚類化合物緩釋微球的制備方法，其特征是該方法包括以下步驟步驟1 將植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖混合；步驟2 將步驟1所得混合物與海藻酸鈉水溶液混合；步驟3 將步驟2所得混合液以微小液滴形式加入到膠凝劑溶液或含有殼聚糖的膠凝劑溶液中；步驟4 回收形成的球形物，清洗、干燥，即得載植物多酚類化合物的緩釋微球。其中所述的植物多酚類化合物的來源沒有限制，例如可以來自葡萄、柿子、蘋果、 藍(lán)莓、櫻桃、李子、山楂、柑橘、越橘、豆類、花生、紫薯、銀杏、大黃、肉桂皮、茶葉、桉葉、竹葉和松樹皮等，可以是一種化合物，也可以是不同化合物的組合物。步驟1中所述的水溶性殼聚糖是指可以溶于水的殼聚糖。步驟3中所述的殼聚糖，通常是指酸溶性殼聚糖，即不溶于水但溶于醋酸、甲酸、 鹽酸或檸檬酸等酸溶液的殼聚糖，也可以是水溶性殼聚糖。
所述的膠凝劑是指可以使海藻酸鈉凝膠化的物質(zhì)，例如氯化鈣、氯化鍶、氯化鋇等多價陽離子的鹽類。還提供按照本發(fā)明方法制備的載植物多酚類化合物的緩釋微球。按照本發(fā)明方法制備的載植物多酚類化合物的緩釋微球，其特征是該微球粒徑小于3mm，為單一核結(jié)構(gòu)，它的材質(zhì)是由植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖和海藻酸鹽組成 或者為核殼型結(jié)構(gòu)，它的核材由植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖和海藻酸鹽組成，它的殼材是殼聚糖與海藻酸鹽聚電解質(zhì)膜。本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果是本發(fā)明利用水溶性殼聚糖既能夠與植物多酚類化合物相互吸附，又能夠與海藻酸鈉產(chǎn)生靜電相互作用的性質(zhì)，先將植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖混合，然后再與海藻酸鈉水溶液混合后滴入膠凝劑溶液中制備凝膠微球，這樣就可有效地阻止制備過程中植物多酚類化合物從凝膠微球中泄露到膠凝劑溶液中，降低損失。并且，因為使用的是水溶性殼聚糖，其分子量遠(yuǎn)低于酸溶性殼聚糖，不會與植物多酚類化合物和海藻酸鈉形成大尺寸的不溶物，影響緩釋微球的制備。本發(fā)明方法制備過程簡單，條件溫和，不需要高溫、添加有機溶劑或其它有害化合物，利于保持植物多酚類化合物的活性。
具體實施例方式結(jié)合實施例對本發(fā)明進一步說明，目的在于幫助讀者更好地理解本發(fā)明的精神實質(zhì)，但不作為對本發(fā)明實施范圍的限定。按照下述步驟制備載植物多酚類化合物的緩釋微球步驟1 將植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖混合。水溶性殼聚糖可以購自市售水溶性殼聚糖產(chǎn)品，也可以采用酸溶性殼聚糖為原料，經(jīng)酶法降解而得。可以先將水溶性殼聚糖溶于水中，然后再加入固體粉末狀的植物多酚類化合物，快速混勻；也可以直接將粉末狀的水溶性殼聚糖與粉末狀的植物多酚類化合物相混合。水溶性殼聚糖與植物多酚類化合物的重量比可選為1 1 1 1000，優(yōu)選為 1 20 1 400。步驟2 將步驟1所得混合物與海藻酸鈉水溶液混合。所得混合液中海藻酸鈉的終濃度可為0. 5 10% (w/v)，優(yōu)選為1. 5 6% (w/v)； 植物多酚類化合物的終濃度可為0. 05 15% (w/v)，優(yōu)選為0. 5 6% (w/v)?；旌弦旱?PH值通常為4. 5 7. 5，優(yōu)選為5 6。步驟3 將步驟2所得混合液以微小液滴形式加入到膠凝劑溶液或含有殼聚糖的膠凝劑溶液中?？梢圆捎冕橆^注射法、高壓噴槍噴射法、氣體剪切法、毛細(xì)管破碎法或其它方法將混合液以微小液滴形式加入。膠凝劑溶液中膠凝劑的濃度為可以使海藻酸鈉形成完整、 結(jié)實的凝膠微球的濃度，可以通過試驗進行選擇。例如，當(dāng)膠凝劑為氯化鈣時，濃度可為 0.5 10% (w/v)，優(yōu)選為1 6% (w/v) 0當(dāng)膠凝劑溶液中含有殼聚糖時，殼聚糖的濃度可為0. 01 2% (w/v)，優(yōu)選為0. 1 1 % (w/v)。膠凝劑溶液的pH值可為4. 5 6. 5，優(yōu)選為5 6。步驟4 回收形成的球形物，清洗、干燥，即得載植物多酚類化合物的緩釋微球。
可以采用過濾或離心的方法從膠凝劑溶液中分離形成的凝膠微球，干燥方法可以采用真空冷凍干燥、真空干燥、噴霧干燥或其它干燥方法。按照上述方法制備的載植物多酚類化合物的微球，其粒徑通常小于3mm，口服后微球內(nèi)的植物多酚類化合物會被緩慢釋放。當(dāng)膠凝劑溶液中不含有殼聚糖時，形成的微球為單一核結(jié)構(gòu)，由植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖和海藻酸鹽組成；當(dāng)膠凝劑溶液中含有殼聚糖時，制備出的微球為核殼型結(jié)構(gòu)，核材由植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖和海藻酸鹽組成，殼材為殼聚糖與海藻酸鹽形成的聚電解質(zhì)膜。在下述實施例1 實施例5中，植物多酚類化合物均以葡萄籽原花青素提取物 (低聚原花青素含量> 85%，總酚含量> 95% )為例，海藻酸鈉的膠凝劑均以氯化鈣為例。實施例1 常規(guī)法制備(膠凝劑溶液中不含殼聚糖)取1克葡萄籽原花青素提取物，溶于IOmL水中，然后加入到30mL、4%的海藻酸鈉水溶液中，充分混勻，以6號針頭將混合液滴入到3%的氯化鈣溶液中，輕微攪拌30min，過濾分離所得球形物，并檢測泄露到氯化鈣溶液中酚類物質(zhì)的總酚含量。實施例2 常規(guī)法制備(膠凝劑溶液中含有殼聚糖)以0. 5%的醋酸配制的殼聚糖溶液，然后與6%的氯化鈣溶液等體積混合，制成殼聚糖-氯化鈣溶液。取1克葡萄籽原花青素提取物，溶于IOmL水中，然后加入到30mL、 4%的海藻酸鈉水溶液中，充分混勻，以6號針頭將混合液滴入到上述殼聚糖-氯化鈣溶液中，輕微攪拌30min，過濾分離所得球形物。經(jīng)檢測，泄露到殼聚糖-氯化鈣溶液中酚類物質(zhì)的總酚含量約為實施例1的48%。實施例3 改進法制備(膠凝劑溶液中不含殼聚糖)取1克葡萄籽原花青素提取物，加入到10mL、0. 1 %的市售水溶性殼聚糖溶液中， 快速混勻，然后再加入到30mL、4%的海藻酸鈉水溶液中，其它步驟同實施例1，過濾分離所得球形物，水洗后50°C干燥，即得載原花青素的緩釋微球。該緩釋微球的平均粒徑約1mm， 為單一核結(jié)構(gòu)，它的材質(zhì)是由葡萄籽原花青素提取物與水溶性殼聚糖和海藻酸鈣組成。經(jīng)檢測，泄露到氯化鈣溶液中酚類物質(zhì)的總酚含量約為實施例1的20%。實施例4 改進法制備(膠凝劑溶液中含有殼聚糖)以0. 5%的醋酸配制的殼聚糖溶液，然后與6%的氯化鈣溶液等體積混合，制成殼聚糖-氯化鈣溶液。取1克葡萄籽原花青素提取物，加入到10mL、0. 的市售水溶性殼聚糖溶液中，快速混勻，然后再加入到30mL、4%的海藻酸鈉水溶液中，充分混勻，以6號針頭將混合液滴入到上述殼聚糖-氯化鈣溶液中，輕微攪拌30min，過濾分離所得球形物， 水洗后50°C干燥，即得載原花青素的緩釋微球。該緩釋微球為核殼型結(jié)構(gòu)，核材由葡萄籽原花青素提取物與水溶性殼聚糖和海藻酸鈣組成，殼材是殼聚糖與海藻酸鈣聚電解質(zhì)膜。經(jīng)檢測，泄露到殼聚糖-氯化鈣溶液中酚類物質(zhì)的總酚含量約為實施例2的18%。上述微球在模擬胃液中處理1小時，酚類物質(zhì)的釋放率約10%，微球再次放置在模擬腸液中，酚類物質(zhì)12小時的累積釋放率約85%。實施例5 用自制的水溶性殼聚糖以2%的醋酸配制5%的殼聚糖溶液，調(diào)節(jié)pH5 6，加纖維素酶，50°C反應(yīng)，待反應(yīng)液粘度大為降低后過濾、濃縮、冷凍干燥，干燥物磨成粉末，得自制的水溶性殼聚糖。取1克葡萄籽原花青素提取物，加入到10mL、0. 2%的自制水溶性殼聚糖溶液中，快速混勻，其它步驟同實施例4。經(jīng)檢測，制備過程中泄露到殼聚糖-氯化鈣溶液中酚類物質(zhì)的總酚含量約為實施例4的80%。
權(quán)利要求
1.一種改進的載植物多酚類化合物緩釋微球的制備方法，其特征是該方法包括以下步驟步驟1 將植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖混合； 步驟2 將步驟1所得混合物與海藻酸鈉水溶液混合；步驟3 將步驟2所得混合液以微小液滴形式加入到膠凝劑溶液或含有殼聚糖的膠凝劑溶液中；步驟4 回收形成的球形物，清洗、干燥，即得載植物多酚類化合物的緩釋微球。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法制備的載植物多酚類化合物的緩釋微球。
3.權(quán)利要求2所述的載植物多酚類化合物的緩釋微球，其特征是該微球粒徑小于3mm， 為單一核結(jié)構(gòu)，它的材質(zhì)是由植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖和海藻酸鹽組成；或者為核殼型結(jié)構(gòu)，它的核材由植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖和海藻酸鹽組成，它的殼材是殼聚糖與海藻酸鹽聚電解質(zhì)膜。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種改進的載植物多酚類化合物緩釋微球的制備方法，包括(1)將植物多酚類化合物與水溶性殼聚糖混合，(2)將所得混合物與海藻酸鈉水溶液混合，(3)將所得混合液以微小液滴形式加入到膠凝劑溶液或含有殼聚糖的膠凝劑溶液中，(4)回收形成的球形物，清洗、干燥等步驟。本發(fā)明方法可以降低制備過程中植物多酚類化合物的泄露損失，制備過程簡單，條件溫和，利于保持植物多酚類化合物的活性。
文檔編號A61K9/16GK102274193SQ20111025492
公開日2011年12月14日 申請日期2011年9月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月1日
發(fā)明者唐柳, 張峻, 楊麗維, 陳曉云, 陳穎, 齊欣 申請人:天津市林業(yè)果樹研究所