一種從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚的方法，屬于油梨資源綜合利用與開發(fā)技術領域。
【背景技術】
[0002]油梨又稱鱷梨、酪梨或牛油果，系樟科鱷梨屬的常綠喬木樹種。其果肉富含脂肪酸，且不含膽固醇，營養(yǎng)價值高，享有“森林黃油”及“生命之源”的美譽
[0003]上世紀二十年代引種到福建、廣東等省，經(jīng)多年的引種，五十年代后已分布于海南、福建、廣東、廣西、云南、四川及浙江等省區(qū)，產(chǎn)量較為豐富。目前國內(nèi)外對油梨的研宄主要集中在油梨的栽培、保藏和油梨油的提取及利用等方面，而對油梨生產(chǎn)油梨油余下的殘渣一一果仁，綜合利用研宄甚少。油梨仁若不用于育苗，往往棄之，這無疑是一種資源的浪費。
[0004]植物多糖在植物中由單糖脫水形成，非淀粉、非纖維素的一類具有生理活性的高分子聚合物的總稱。具有修復糖代謝混亂、抗氧化、降血糖、抗腫瘤、抗凝血、抗血栓及抗病毒等藥理作用和多種保健功能，是目前食品、醫(yī)藥領域研宄的熱點領域之一，用于糖尿病等疾病的治療。目前關于油梨仁多糖的提取工藝研宄甚少，這些問題妨礙了油梨仁多糖在醫(yī)藥、食品等領域的直接應用。
[0005]多酚是植物中含多個酚羥基的一類天然活性物質(zhì)，主要包括黃酮醇、黃烷醇、酚酸酸類等化合物。植物多酚是良好的天然抗氧化劑，具有降血脂、降血糖、抗衰老、降血壓、抗癌防癌、防止冠狀動脈粥樣硬化等多種藥理功效，廣泛應用于食品、醫(yī)藥保健、日化等領域。對油梨仁中多酚的提取，具有多種功能和用途，例如可以作為天然的抗氧化劑應用到食品行業(yè)中，提高油脂的穩(wěn)定性，延長油脂的保質(zhì)期。且原料來源于量大、廉價的油梨仁，是一類具有良好開發(fā)前途的天然產(chǎn)物。
[0006]目前，有關油梨仁蛋白的提取已有相關報道，但油梨仁中除了蛋白外還富含多糖、多酚等活性成分，目前尚未有一個較為成熟的工藝能從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚等活性物質(zhì)，而無法合理的綜合利用與開發(fā)油梨資源。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明利用乙醇/水浸法和大孔樹脂純化法，提出一種適合產(chǎn)業(yè)化放大生產(chǎn)的從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚的方法。
[0008]本發(fā)明是通過下述技術方案實現(xiàn)的。
[0009]一種從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚的方法，包括以下步驟:
(1)油梨仁經(jīng)粉碎、干燥，過50?80目的篩得到油梨仁粉末；
(2)向油梨仁粉末中加入石油醚使料液比為Ig: 4mL?Ig: 1mL下浸提，固液分離，液相濃縮回收石油醚，并得到油梨仁油，固相干燥后得到脫脂油梨仁粉末；
(3)向脫脂油梨仁粉末中加入醇/水溶劑提取使料液比為Ig: 1mL?Ig: 18mL下浸提，固液分離，得到含有蛋白、多糖及多酚的提取液；
(4)將步驟(3)中所得提取液進行濃縮，調(diào)節(jié)溶液pH，固液分離，固相干燥得到蛋白；
(5)步驟(4)中的水相采用大孔樹脂吸附2?5h，用水洗脫，流出液干燥得到多糖；
(6)步驟(5)中的大孔樹脂用10?20%的乙醇溶液洗脫進行洗脫以去除雜質(zhì)，再用60?95%乙醇溶液解析，收集解析液，濃縮得到多酚；
(7)步驟(3)中固液分離得到的濾渣，經(jīng)濾渣干燥得到膳食纖維。
[0010]上述步驟(I)中，所得油梨仁粉末為紅色或棕紅色。
[0011]上述步驟(2)中，所用的石油醚沸程為30?60°C或60?90°C，于在30?90°C下連續(xù)浸提2?3次，每次I?3h。
[0012]上述步驟(3)中，所述的乙醇/水溶劑為純水溶劑或10?50%的乙醇水溶液，在50?90°C下浸提2?4h。
[0013]上述步驟(4)中，所得提取液濃縮至原體積的一半，再以I?10%的鹽酸或硫酸調(diào)節(jié)溶液pH為2.0?6.0，使蛋白沉淀；固液分離采用常壓過濾、減壓過濾、離心分離中的一種，固相經(jīng)常壓干燥或冷凍干燥得到蛋白。
[0014]上述步驟(5)中，所用大孔樹脂為D3520 ;所述的干燥方式為噴霧干燥。
[0015]本發(fā)明的優(yōu)點與積極效果:
(1)采用乙醇/水作為溶劑綜合提取蛋白、多糖及多酚，避免了其他有機溶劑(如甲醇等)提取所帶來的費用高、安全性差等不足。
(2)利用調(diào)節(jié)提取液pH至蛋白質(zhì)的等電點而使得蛋白質(zhì)沉降，固液分離獲得蛋白。
(3)采用大孔樹脂對多糖和多酚進行富集、分離及純化，提高了產(chǎn)品的純度以及生產(chǎn)效率，還有效的降低了能耗，實現(xiàn)了蛋白、多糖、多酚綜合提取及分離純化。同時大孔樹脂可以重復利用，不僅能有效的解決傳統(tǒng)提取及純化工藝難以放大、純化過程導致有毒溶劑殘留(如多糖的純化采用Sevag試劑(氯仿和正丁醇的混合液)、三氟乙酸等脫除蛋白)、產(chǎn)品失活等問題，還簡化了生產(chǎn)工序、降低生產(chǎn)成本。
(4)采用乙醇和水作為溶劑，有機溶劑回收率高，水可循環(huán)使用，對環(huán)境污染小。
(5)本發(fā)明工藝設計合理，可操作性強，生產(chǎn)條件溫和，安全無毒，操作簡單，所得產(chǎn)品純度較高，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0016]以下通過實施例對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明并不局限于這些實施例。
[0017]實施例1
(1)油梨仁粉末50g于50°C下用石油醚(30?60°C)浸提兩次，料液比Ig: 10mL，每次2.0h，過濾，合并提取液，濃縮回收石油醚得到油梨仁油及脫脂油梨仁粉末。
(2)向脫脂油梨仁粉末中加入純水，料液比Ig: 15mL，于60°C下浸提2.5h，過濾，過濾，殘渣烘干即可得到膳食纖維，提取液濃縮至原來體積的一半，用5%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH =4.0，離心分離得到沉淀下來的蛋白，干燥得到蛋白。
(3)取水相部分，用D3520大孔樹脂吸附3h，用I倍柱體積純水洗脫，收集流出液，噴霧干燥得到多糖。
(4)將D3520大孔樹脂用20%的乙醇溶液洗脫進行洗脫以去除雜質(zhì)，再用75%乙醇溶液進行解析，收集解析液，濃縮回收乙醇，并干燥得到多酚。
[0018] 實施例2
(1)油梨仁粉末500g于70°C下用石油醚(60?90°C)浸提兩次，料液比Ig: 5mL，每次2.5h，過濾，合并提取液，濃縮回收石油醚得到油梨仁油及脫脂油梨仁粉末。
(2)向脫脂油梨仁粉末中加入純水，料液比Ig: 10mL，于70°C下浸提3.0h，過濾，過濾，殘渣烘干即可得到膳食纖維，提取液濃縮至原來體積的1/2，用2%硫酸酸溶液調(diào)節(jié)pH= 4.6,離心分離得到沉淀下來的蛋白，干燥得到蛋白。
(3)取水相部分，用D3520大孔樹脂吸附5h，用1.5倍柱體積純水洗脫，收集流出液，噴霧干燥得到多糖。
(4)將D3520大孔樹脂用15%的乙醇溶液洗脫進行洗脫以去除雜質(zhì)，再用85%乙醇溶液進行解析，收集解析液，濃縮回收乙醇，并干燥得到多酚。
【主權項】
1.一種從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚的方法，其特征在于包括以下步驟: (1)油梨仁經(jīng)粉碎、干燥，過50?80目的篩得到油梨仁粉末； (2)向油梨仁粉末中加入石油醚浸提，固液分離，液相濃縮回收石油醚，并得到油梨仁油，濾渣干燥后得到脫脂油梨仁粉末； (3)向脫脂油梨仁粉末中加入醇/水溶劑提取，固液分離，得到含有蛋白、多糖及多酚的提取液； (4)將步驟(3)中所得提取液進行濃縮，調(diào)節(jié)溶液pH，固液分離，固相干燥得到蛋白； (5)步驟(4)中的水相采用大孔樹脂吸附，用水洗脫，流出液干燥得到多糖； (6)步驟(5)中的大孔樹脂用乙醇溶液洗脫進行解析，收集解析液，濃縮得到多酚； (7)步驟(3)中固液分離得到的濾渣，經(jīng)濾渣干燥得到膳食纖維。
2.根據(jù)權利要求1所述的從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚的方法，其特征在于:步驟(2)中，所用的石油醚沸程為30?60°C或60?90°C。
3.根據(jù)權利要求1所述的從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚的方法，其特征在于:步驟(3)中，所述的乙醇/水溶劑為純水溶劑或10?50%的乙醇水溶液。
4.根據(jù)權利要求1所述的從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚的方法，其特征在于:步驟(4)中，所得提取液濃縮至原體積的一半，再以I?10%鹽酸或硫酸溶液調(diào)節(jié)溶液pH=2.0?6.0，使蛋白沉淀；固液分離采用常壓過濾、減壓過濾、離心分離中的一種，固相經(jīng)常壓干燥或冷凍干燥得到蛋白。
5.根據(jù)權利要求1所述的從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚的方法，其特征在于:步驟(5)中，所用大孔樹脂為D3520 ;所述的干燥方式為噴霧干燥。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種從油梨仁中綜合提取蛋白、多糖及多酚的方法，該發(fā)明方法包括：①油梨仁經(jīng)粉碎、干燥、脫脂后，采用乙醇/水提取，濃縮，調(diào)節(jié)提取液pH達到蛋白質(zhì)等電點而使蛋白質(zhì)沉降，固液分離、干燥得到蛋白；②沉淀蛋白后的上清液，經(jīng)大孔樹脂吸附，流出液干燥得到較高純度的多糖；③大孔樹脂經(jīng)乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮干燥得到較高純度的多酚。本發(fā)明依次從油梨仁中獲得蛋白、多糖和多酚3種產(chǎn)品，且工藝簡單，生產(chǎn)條件溫和，所得產(chǎn)品純度較高，適用于工業(yè)生產(chǎn)；所用溶劑主要為水和乙醇，對環(huán)境污染小，生產(chǎn)成本低。
【IPC分類】A61K36-54, A23J1-00, C07K14-415, C07K1-14, C08B37-00
【公開號】CN104523836
【申請?zhí)枴緾N201410784044
【發(fā)明人】黎國慶, 麻文勝, 鐘華鋒, 楊洪元, 莫海霞, 梁立堅, 劉永智
【申請人】廣西職業(yè)技術學院
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2014年12月18日