專利名稱：一種治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種復(fù)方藥物新劑型，特別涉及一種穩(wěn)定透明的用于治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物的制備方法。
背景技術(shù)：
特比萘芬是廣譜抗真菌新一代丙烯胺類藥物，為白色或類白色結(jié)晶性粉末，難溶于水，可溶于有機(jī)溶劑。其突出的優(yōu)點(diǎn)在于它具有殺菌和抑菌的雙重作用，主要通過抑制真菌角鯊烯環(huán)氧化酶，導(dǎo)致角鯊烯聚集，脂滴沉積于細(xì)胞壁及細(xì)胞漿內(nèi)，引起細(xì)胞膜破裂達(dá)到殺菌的目的；其次可導(dǎo)致麥角固醇的缺乏，真菌細(xì)胞膜的生長受干擾，真菌停止生長，達(dá)到抑菌的目的。特比萘芬對(duì)臨床常見真菌具有較強(qiáng)抗菌作用，體內(nèi)無蓄積，副反應(yīng)低。丁香酚即4-烯丙基-2-甲氧基苯酚，是一種油狀有香味的化合物，是很多中草藥如丁香、肉桂中的有效成分，幾乎不溶于水，與乙醇、乙醚及油等可混溶。丁香酚來源廣泛， 易于制備，是一種良好的植物源藥物，有廣泛的藥理作用，其具有較強(qiáng)抑制真菌、細(xì)菌、殺除螨蟲等作用。紅霉素屬大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，為白色或類白色的結(jié)晶或粉末，無臭，味苦，微有引濕性，性狀穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有甲醇、乙醇等有機(jī)溶媒。對(duì)革蘭陽性菌有強(qiáng)大抗菌作用，敏感菌有葡萄球菌、草綠色鏈球菌、化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌等。對(duì)革蘭陰性菌如淋球菌、螺旋桿菌、百日咳桿菌、布魯菌屬等也有抑制作用。此外，對(duì)支原體、放線菌、鉤端螺旋體、立克次體、衣原體、奴卡菌、少數(shù)分枝桿菌和阿米巴原蟲有抑制作用。紅霉素毒性低，但刺激性強(qiáng)。肌注可發(fā)生局部炎癥，宜采用深部肌注。靜注速度要緩慢，同時(shí)應(yīng)避免露出血管外。犬、貓內(nèi)服則可引起嘔吐、腹痛、腹瀉等癥狀。以上三種藥物溶解性較差，物理性質(zhì)不穩(wěn)定，不能綜合性地預(yù)防及治療多種原因引起的寵物皮膚病，需同時(shí)多次給藥才能達(dá)到治療效果。目前市場(chǎng)上治療寵物皮膚病的藥物有伊維菌素、甲硝唑、林可霉素、多拉菌素等，但上述產(chǎn)品功能單一，使用不便，伊維菌素等藥物使用周期較長，對(duì)于寵物毒副作用較大。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷與不足，本發(fā)明目的在于提供一種適宜于臨床應(yīng)用的治療寵物皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，該藥物能夠同時(shí)治療真菌、細(xì)菌、寄生蟲等原因弓I起的寵物皮膚病，且安全有效，生物利用率較高。實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的的技術(shù)方案是一種治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，該藥物的粒徑為Inm IOOnm,由下列質(zhì)量百分比的原料組成
特比萘芬O. 1% 10%、丁香酚O. 1% 15%、紅霉素O. 1% 5%、油相O. 1% 10%、表面活性劑10% 40%、助表面活性劑4% 20%、余量為蒸餾水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為
100% ο制備本發(fā)明藥物的配方優(yōu)選質(zhì)量百分比范圍是特比萘芬0.2% 8%、丁香酚O. 2% 12%、紅霉素O. 2% 4. 5%、油相O. 5% 8%、表面活性劑15% 35%、助表面活性劑 5% 15%、余量為蒸餾水，上述成分的質(zhì)量百分比之和為100%。所述的表面活性劑是吐溫-80 (Tween-80)、吐溫-60 (Tween-60)、吐溫-20 (Tween-20)、聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油(RH-40)、聚氧乙烯(40)蓖麻油(EL-40)和司盤-80 (Span-80)中的一種或幾種的混合物。所述的助表面活性劑是無水乙醇、乙二醇、1，2-丙二醇、丙三醇、聚乙二醇200 (PEG 200)、聚乙二醇400 (PEG 400)、聚乙二醇600 (PEG 600)中的一種或幾種的混合物。所述的油相是肉豆蘧酸異丙酯、液體石蠟、維生素E油、霍霍巴油、三醋酸甘油酯、 乙酸乙酯、杏仁油、小麥胚芽油、橄欖油、蓖麻油中的一種或幾種的混合物。在表面活性劑的選擇上，本發(fā)明選用無毒性和生物相容性好的非離子型表面活性劑。非離子型表面活性劑在溶液中比較穩(wěn)定，不易受強(qiáng)電解質(zhì)、無機(jī)鹽類的影響，也不易受酸堿的影響，與其他表面活性劑的相容性好，溶血作用較小。理論上，0/W型納米乳狀液的制備需要表面活性劑的HLB值介于8 18之間，考慮到制備工藝的簡(jiǎn)單性，即納米乳的易形成性和納米乳的穩(wěn)定性，本發(fā)明選用HLB介于10 15之間的液態(tài)非離子型表面活性劑， 或者與一種HLB < 10的非離子型表面活性劑復(fù)配?？蛇x用的表面活性劑有Tween-80、 Tween-60> Tween-20、RH-40> EL-40 和 Span-80 中的一種或幾種的混合物。本發(fā)明根據(jù)當(dāng)乳化油相所需的表面活性劑的HLB值與表面活性劑相近時(shí)，所形成的乳狀液穩(wěn)定的原則，選用的油脂有肉豆蘧酸異丙酯、液體石蠟、維生素E油、霍霍巴油、 三醋酸甘油酯、乙酸乙酯、杏仁油、小麥胚芽油、橄欖油、蓖麻油中的一種或幾種的混合物。大部分納米乳的形成都需要加入助表面活性劑，其作用主要有降低油水間界面張力、增加界面膜的流動(dòng)性、調(diào)節(jié)表面活性劑的HLB值等。本發(fā)明選用的助表面活性劑有 無水乙醇、乙二醇、1，2-丙二醇、丙三醇、PEG 200、PEG 400、PEG 600中的一種或幾種的混合物。本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供上述治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物的制備方法，其特征在于，具體包括下列步驟
1)稱取特比萘芬、丁香酚、紅霉素、油、表面活性劑、助表面活性劑、蒸餾水，備用；
2)將特比萘芬、丁香酚、紅霉素加入助表面活性劑中完全溶解；
3)將油加入步驟2)制備的溶液中攪拌均勻；
4)再將表面活性劑加入步驟2)制備的溶液中，攪拌均勻，在20°C 25°C下緩慢加入蒸餾水充分?jǐn)嚢?，直至形成澄清透明、粘度小具有流?dòng)性的黃色或無色透明的復(fù)方特比萘芬納米乳。本發(fā)明的復(fù)方特比萘芬納米藥物具有治療動(dòng)物真菌性皮膚病、細(xì)菌性皮膚病、寄生蟲性皮膚病的功能。用法局部外涂，每天I 2次，連續(xù)I 2周。本發(fā)明經(jīng)透射電子顯微鏡檢測(cè)，液滴直徑分布在I IOOnm之間，外觀為黃色或無色透明液體，具有很好的穩(wěn)定性
I.光穩(wěn)定性
將本發(fā)明復(fù)方特比萘芬納米藥物裝入玻璃瓶中，密封，置于室溫中，光照10d，于Id、 3d、5d、7d、10d取樣檢測(cè)。結(jié)果表明，復(fù)方特比萘芬納米乳外觀仍然澄清透明，無混濁、分層、沉淀等現(xiàn)象，粒徑保持在InnTlOOnm之間。2.溫度穩(wěn)定性
將適量本發(fā)明復(fù)方特比萘芬納米藥物裝入玻璃瓶中，密封，分別置于4°C，25°C和37°C 三種溫度條件下留樣考察30d，每隔5d取樣觀察。結(jié)果表明，該復(fù)方特比萘芬納米藥物在此三種溫度條件下均保持澄清透明，未見分層、渾濁和沉淀的現(xiàn)象。3.抗冷凍穩(wěn)定性
將本發(fā)明復(fù)方特比萘芬納米乳于_4°C保存一周，取出后恢復(fù)至室溫。該復(fù)方特比萘芬納米藥物在-4°C時(shí)成固體，恢復(fù)至室溫后其恢復(fù)至透明，且放置一周后仍澄清透明。4.加速穩(wěn)定性
將本發(fā)明復(fù)方特比萘芬納米藥物置于離心管中，于15000rpm離心20min，觀察結(jié)果，發(fā)現(xiàn)其未分層，仍澄清透明。本發(fā)明的治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)
1)熱力學(xué)穩(wěn)定性好，貯存穩(wěn)定性高，久置不分層，經(jīng)離心加速試驗(yàn)仍未分層；
2)本發(fā)明屬于納米級(jí)藥物，外觀澄清透明，乳液液滴分散度良好，生物利用度高；
3 )本發(fā)明藥物能夠同時(shí)治療寵物真菌性、細(xì)菌性及寄生蟲性皮膚病，使用方便，療效顯著。4)制備工藝簡(jiǎn)單，適合規(guī)模化生產(chǎn)。


圖I是本發(fā)明復(fù)方特比萘芬納米藥物的透射電鏡圖。
具體實(shí)施例方式以下通過試驗(yàn)例進(jìn)一步闡述本發(fā)明說述藥物的有益效果，這些試驗(yàn)例包括本發(fā)明藥物的透射電子顯微鏡觀察試驗(yàn)、體外藥效試驗(yàn)和臨床療效試驗(yàn)。試驗(yàn)例I本發(fā)明復(fù)方特比萘芬納米藥物透射電子顯微鏡觀測(cè)
本發(fā)明藥物用透射電子顯微鏡進(jìn)行微觀形態(tài)觀察，結(jié)果顯示見圖1，圖I是復(fù)方特比萘芬納米乳透射電鏡照片，顯示復(fù)方特比萘芬納米乳滴呈球形且分布均勻、分散型良好，粒徑均小于IOOnm。試驗(yàn)例2本發(fā)明復(fù)方特比萘芬納米藥物體外抗菌活性試驗(yàn)
采用微量稀釋法測(cè)定藥物對(duì)金黃色葡萄球菌、中間葡萄球菌、溶血性鏈球菌(菌種均來自西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)醫(yī)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室)的最小殺菌濃度(MBC)和最低抑菌濃度 (MIC)。試驗(yàn)設(shè)復(fù)方特比萘芬納米乳組、紅霉素溶液組、硫酸新霉素溶液組。方法取無菌微孔板，第I孔加入180 μ L 2Χ 105CFU/mL的菌液，其余每孔均加 100 μ L，加至14孔，在第I孔內(nèi)加入濃度為640μ g/mL的復(fù)方特比萘芬納米乳20 μ L，吹打混勻后吸取100 μ L加入第2孔中，同法依次稀釋至第13孔，棄去100 μ L，第14孔為菌液對(duì)照，第15孔只加藥液做藥物對(duì)照。37°C培養(yǎng)16 24h后觀察結(jié)果。以無細(xì)菌生長的最低濃度為MIC，將所有完全清晰無細(xì)菌生長孔內(nèi)液體移種于瓊脂平板內(nèi)，用滅菌玻棒推勻， 經(jīng)37°C培養(yǎng)過夜，菌落數(shù)不超過5個(gè)的平板的最低藥物濃度即為該藥物的MBC。同法測(cè)定對(duì)照藥物紅霉素溶液和硫酸新霉素溶液的MBC和MIC。
6
體外抗菌活性試驗(yàn)表明，復(fù)方特比萘芬納米乳對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC、MBC分別為O. 0625 μ g /mL和O. 125 μ g /mL,顯著低于紅霉素和硫酸新霉素；對(duì)中間葡萄球菌的 MIC、MBC分別為O. 5 μ g /mL和I μ g /mL，較紅霉溶液小，與硫酸新霉素溶液相當(dāng)；對(duì)溶血性鏈球菌的MIC、MBC分別為O. 0156 μ g /mL和O. 0625 μ g /mL,顯著低于紅霉素和硫酸新霉素，表明復(fù)方特比萘芬納米乳體外抗菌作用強(qiáng)于紅霉素和硫酸新霉素。結(jié)果見表I。表I最小殺菌濃度(MBC)和最低抑菌濃度(MIC)(單位μ g /mL)
試驗(yàn)例3本發(fā)明復(fù)方特比萘芬納米藥物的離體殺螨試驗(yàn)
刮取自然感染螨蟲的家兔耳道內(nèi)長滿血痂的痂皮和表皮患部皮屑，并用鑷子取出置于玻璃平皿內(nèi)，平皿邊緣涂少量螨蟲趨避劑，稍微加溫，用挑蟲針挑取活性強(qiáng)的螨蟲供試驗(yàn)用。在解剖鏡下進(jìn)行蟲體鑒定，鑒定其為兔癢螨及兔疥螨。用分離針挑取螨蟲于凹形載玻片上，滴加供試藥兩滴，將挑選的螨蟲8只置于藥液中并加蓋玻片，在倒置顯微鏡下持續(xù)觀察24h，每隔5min觀察一次，每次持續(xù)觀察2min， 對(duì)每組觀察直至8只螨蟲全部死亡，記錄螨蟲死亡時(shí)間。試驗(yàn)共分為5組，其余四組分別為蒸餾水試驗(yàn)組，殺螨靈水溶液組、伊維菌素注射液組和1% 丁香酚溶液組，試驗(yàn)方法同復(fù)方特比萘芬納米乳組。試驗(yàn)結(jié)果不同藥液處理24h結(jié)果顯示，復(fù)方特比萘芬納米乳殺螨時(shí)間為3 4min， 低于600倍稀釋殺螨靈水溶液，與伊維菌素殺螨效果相當(dāng)，強(qiáng)于1% 丁香酚溶液。結(jié)果見表 2。表2離體殺螨效果比較結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，其特征在于，該藥物的粒徑為Inm IOOnm,由下列質(zhì)量百分比的原料組成特比萘芬O. 1% 10%、丁香酚O. 1% 15%、紅霉素O. 1% 5%、油O. 1% 10%、表面活性劑10% 40%、助表面活性劑4% 20%、余量為蒸餾水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100% ；所述表面活性劑是 Tween-80、Tween-60、Tween-20、RH-40、EL_40 和 Span-80 中的一種或幾種的混合物；所述助表面活性劑是無水乙醇、乙二醇、1，2-丙二醇、丙三醇、PEG 200、PEG 400、PEG 600中的一種或幾種的混合物；所述油是肉豆蘧酸異丙酯、液體石蠟、維生素E油、霍霍巴油、三醋酸甘油酯、乙酸乙酯、杏仁油、小麥胚芽油、橄欖油、蓖麻油中的一種或幾種的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，其特征在于，由下列質(zhì)量百分比的原料組成特比萘芬O. 2% 8%、丁香酚O. 2% 12%、紅霉素O. 2% 4. 5%、油O. 5% 8%、表面活性劑15% 35%、助表面活性劑5% 15%、余量為蒸餾水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%。
3.一種治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，其特征在于，由下列質(zhì)量百分比的原料組成特比萘芬2%、丁香酚3%、紅霉素1%、油2%、表面活性劑20%、助表面活性劑10%、蒸餾水62%。
4.一種治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，其特征在于，由下列質(zhì)量百分比的原料組成特比萘芬O. 2%、丁香酚O. 2%、紅霉素O. 1%、乙酸乙酯8%、Tween-80為30%、乙二醇6%、 蒸懼水55. 5%ο
5.一種治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，其特征在于，由下列質(zhì)量百分比的原料組成特比萘芬6%、丁香酚1%、紅霉素1%、三醋酸甘油酯2%、Tween-80為20%、無水乙醇10%、 蒸餾水60%。
6.一種治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，其特征在于，由下列質(zhì)量百分比的原料組成特比萘芬O. 5 %、丁香酚12%、紅霉素O. 5%、乙酸乙酯2%、Tween-80為10%、無水乙醇 10%、蒸餾水65%。
7.一種治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，其特征在于，由下列質(zhì)量百分比的原料組成特比萘芬1%、丁香酚1%、紅霉素3%、蓖麻油1%、RH_40為40%、無水乙醇8%、蒸餾水46%。
8.一種治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，其特征在于，由下列質(zhì)量百分比的原料組成特比萘芬2%、丁香酚2%、紅霉素1%、霍霍巴油1%、Tween-80為20%、無水乙醇4%、蒸餾水 70%ο
9.權(quán)利要求I所述治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物的制備方法，其特征在于，具體包括下列步驟1)稱取特比萘芬、丁香酚、紅霉素、油、表面活性劑、助表面活性劑、蒸餾水，備用；2)將特比萘芬、丁香酚、紅霉素加入助表面活性劑中完全溶解；3)將油加入步驟2)制備的溶液中攪拌均勻；4)再將表面活性劑加入步驟2)制備的溶液中，攪拌均勻，在20°C 25°C下緩慢加入蒸餾水充分?jǐn)嚢?，直至形成澄清透明、粘度小具有流?dòng)性的黃色或無色透明的復(fù)方特比萘芬納米乳。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于治療皮膚病的復(fù)方特比萘芬納米藥物，該藥物的粒徑為1nm～100nm，由下列組分的原料組成特比萘芬0.1%～10%、丁香酚0.1%～15%、紅霉素0.1%～5%、油0.1%～10%、表面活性劑10%～40%、助表面活性劑4%～20%、余量為蒸餾水，上述成分的質(zhì)量百分比之和為100%。該藥物顆粒小、粘度小、流動(dòng)性好、性質(zhì)穩(wěn)定，有較好的經(jīng)皮滲透性，不僅對(duì)寵物皮膚真菌病有較強(qiáng)療效，而且對(duì)寵物細(xì)菌性皮膚病及寄生蟲性皮膚病均有強(qiáng)有力的治療作用，本發(fā)明產(chǎn)品制備簡(jiǎn)單、耗能低、不需特殊設(shè)備就能大量生產(chǎn)。在寵物皮膚病的治療方面具有廣闊應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A61K31/7048GK102600192SQ20111024611
公開日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2011年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月25日
發(fā)明者劉梅雪, 歐陽五慶, 歐陽伸雨 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)