專利名稱：桑葉中提取的多酚類衍生物及制備方法與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，更具體地說(shuō)涉及從中藥桑葉中提取的具有酪氨酸酶抑制活性的多酚類衍生物及其制備方法與制藥用途。
背景技術(shù)：
桑葉，又名“鐵扇子”，屬于?？粕僦参锷Morus alba L.)。桑葉作為藥用始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，其味苦、性寒，具有補(bǔ)血、疏風(fēng)、散熱、益肝通氣、降壓利尿等功效。現(xiàn)代大量的藥理學(xué)研究證明了桑葉具有降血糖、降血壓、降血脂、清除自由基、抗衰老、抗炎、抗菌、 抗病毒和抗癌等諸多藥理作用。桑葉化學(xué)成分有黃酮、留體、香豆素、揮發(fā)油、生物堿、氨基酸、有機(jī)酸、維生素和多糖等。酪氨酸酶作為黑色素合成的關(guān)鍵酶，其異常過(guò)量表達(dá)可導(dǎo)致人體的色素沉著性疾病及黑色素瘤等。因此，酪氨酸酶抑制劑可作為黑色素抑制劑應(yīng)用于醫(yī)藥等領(lǐng)域。本發(fā)明涉及從桑葉中提取分離具有顯著酪氨酸酶抑制活性的衍生物及其制劑，能夠有效預(yù)防和治療黑色素合成異常導(dǎo)致的人體色素沉著性疾病、黑色素瘤以及其它需要抑制酪氨酸酶活性的病癥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種從桑葉中提取的多酚類衍生物，主要包括消旋化合物 OR) / (2S) -7-甲氧基-8-羥乙基-2’，4’ - 二羥基黃烷[OR) / (2S) -7-methoxyl -8-hydroethyl-2', 4' -dihydroxylflavane](化合物 Α)和差向異構(gòu)體 K2R) /(2S) -7-甲氧基-8乙基-2'，4'-二羥基黃烷-2’’-0-i3-D-吡喃葡萄糖苷K2R) / (2S)-7-methoxyl-8-ethyl-2i，4' -dihydroxylflavane-2J ‘ _0_β -D-glucopyranoside](化合物B)。其結(jié)構(gòu)如下
權(quán)利要求
1.一種從桑葉中提取的多酚類衍生物，其特征在于，所述衍生物主要包括化合物 A: (2R)/(2S)-7-甲氧基-8-羥乙基-2’，4’ -二羥基黃烷和化合物B (2R/2S)-7-甲氧基-8 乙基-2’，4’ - 二羥基黃烷_(kāi)2’ ’ -0- β -D-吡喃葡萄糖苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從桑葉中提取的多酚類衍生物的制備方法，其特征在于，通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)⑴將桑葉用70%乙醇回流提取，提取物減壓濃縮至浸膏；(2)將浸膏混懸于適量水中，用石油醚脫脂，乙酸乙酯萃取；C3)將乙酸乙酯萃取部分用正相硅膠分離，洗脫劑為體積比為100:(Γ 90:10的石油醚和乙酸乙酯，體積比為82:18的石油醚和乙酸乙酯，體積比為78:22飛5:35的石油醚和乙酸乙酯，體積比為60:40的石油醚和乙酸乙酯及乙酸乙酯；(4)分別收集體積比為60:40的石油醚和乙酸乙酯洗脫液及乙酸乙酯洗脫液，濃縮干燥后得衍生物，用制備液相色譜繼續(xù)分離得到衍生物；制備色譜的分離條件色譜柱為制備柱，流動(dòng)相為水和甲醇，梯度洗脫。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種從桑葉中提取的的制備方法，其特征在于，化合物A通過(guò)以下步驟獲得步驟(4)收集體積比為60:40的石油醚和乙酸乙酯洗脫液，濃縮干燥后得樣品，用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品，制備色譜的分離條件色譜柱為制備柱Agilent Zorbax SB-Cw柱250X21.2 mm, 7 μ m，流動(dòng)相為水A和甲醇B，梯度洗脫程序如下0 min，30%B ；20 min，50%B ；27 min，50%B ；28 min，60%B ；35 min，60%B ；36 min，70%B ；50 min, 70%B ；60 min，80%B ；流速:10ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng):210nm，收集47. 5 min的色譜峰，減壓回收溶劑，得化合物A。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種從桑葉中提取的的制備方法，其特征在于，化合物B通過(guò)以下步驟獲得步驟(4)收集乙酸乙酯洗脫液，濃縮干燥后得樣品，用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品；制備色譜的分離條件色譜柱=Agilent Zorbax SB-Cw柱250X21.2 謹(jǐn)，7 μ m，流動(dòng)相為水A和甲醇B，梯度洗脫程序如下0 min,25%B ；32 min,44%B ；47 min, 44%B ；48 min,55%B ；71 min,60%B ；75 min，100%B，流速10ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)210nm，收集 72. 3min的色譜峰，減壓回收溶劑，得化合物B。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從桑葉中提取的多酚類衍生物在制備預(yù)防和治療黑色素合成異常導(dǎo)致的人體色素沉著性疾病、黑色素瘤藥物中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物由化合物A或化合物B加入藥劑學(xué)上可接受的輔料，按照藥劑學(xué)上記載的制劑制備方法制成。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的制劑包括液體制劑或固體制劑。
全文摘要
本發(fā)明提供一種從桑葉中提取的多酚類衍生物，包括消旋化合物(2R)/(2S)-7-甲氧基-8-羥乙基-2',4'-二羥基黃烷和差向異構(gòu)體混合物(2R/2S)-7-甲氧基-8乙基-2',4'-二羥基黃烷-2''-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。將桑葉通經(jīng)乙醇水溶液加熱提取，濃縮，硅膠柱分離，洗脫，洗脫液濃縮干燥，再用制備液相色譜繼續(xù)分離，收集溶液，溶液濃縮干燥后得到樣品并進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。本發(fā)明提供的二種多酚類衍生物具有較強(qiáng)的酪氨酸酶抑制活性，可在制備預(yù)防和治療黑色素合成異常導(dǎo)致的人體色素沉著性疾病、黑色素瘤以及其它需要抑制酪氨酸酶活性的病癥藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K31/7048GK102161649SQ20111005906
公開(kāi)日2011年8月24日 申請(qǐng)日期2011年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月13日
發(fā)明者張玉峰, 程翼宇, 范驍輝, 邵青 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)