專利名稱：氫化型人參皂苷苷元及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及氫化型人參皂苷苷元及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
人參及其同屬植物的抗腫瘤作用始于上世紀(jì)80年代，Kikuchi發(fā)現(xiàn)紅參的提取物 能顯著抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，延長荷瘤小鼠的生存期。此后，在人參中先后發(fā)現(xiàn)人參皂苷 Rg3,RgURhURh2等抗腫瘤成分，這些成分中二醇型抗腫瘤活性>三醇型，相同類型皂苷的 苷元>單糖苷型>二糖苷型。天然人參皂苷較難吸收，但由天然皂苷轉(zhuǎn)化而來的低極性皂苷、甙元或兩者的衍 生物是天然人參皂苷發(fā)揮其藥效的原形。近年來，低極性皂苷及其衍生物的抗腫瘤研究非 常活躍，已發(fā)現(xiàn)它們?cè)诰哂卸喾N抗腫瘤作用的同時(shí)，基本無毒副作用。長谷川秀夫(日本公開特許8-291194)報(bào)道的制備方法為酸水解天然或3位羥 基游離的人參皂苷，水解產(chǎn)物經(jīng)常規(guī)和色譜分離后僅獲得A2°(22)-PPD和A^li22)-PPT單品。 酸水解人參皂苷的主要產(chǎn)物為側(cè)鏈環(huán)化的人參二醇和人參三醇，因而，該專利所提供的制 備和Δ2°(22)-PPT方法定向轉(zhuǎn)化率低，產(chǎn)物收率低、分離純化難度高，不適應(yīng)工業(yè) 生產(chǎn)。中國專禾IjCN1249076C 報(bào)道 了新的化合物3 β，12 β - 二羥-20 (21)，M Q5) - 二 烯-達(dá)瑪燒[dammar-3 β , 12 β -dihydroxyl-20 (21), 24 (25) -diene,簡稱 Δ20(21)-ΡΡ ] 禾口 3β，6α，12β-三羥-達(dá)瑪烷[dammar-3 3，6α，12 3-trihydroxyl-20(21)， 24 (25)-diene,簡稱 Δ2(1 (21)-PPT]。Δ20⑵)-PPD 和 Δ 2CI(21)-PPT 分別是 Δ 20(22)-ΡΡ ^P Δ 20(22)-ΡΡΤ構(gòu)型異構(gòu)體，具有Δ 20(22)-PPD和Δ 20(22)-ΡΡΤ類似的生物活性，生產(chǎn)制備方便，可 實(shí)現(xiàn)工業(yè)批量制備，能有效解決A^li22)-PPD和Δ2°(22)-PPT的供給短缺的矛盾。但該專利由 于含有二烯鍵，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，生物利用度較差，其抗腫瘤效果仍有很大提高余地。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供氫化型人參皂苷苷元。本發(fā)明所提供的氫化型人參皂苷苷元，其結(jié)構(gòu)式如式I所示
權(quán)利要求
1.一種化合物，其結(jié)構(gòu)式如式I所示
2.權(quán)利要求1所述的化合物的制備方法，包括如下步驟(1)將人參破碎，加入有機(jī)溶劑i進(jìn)行回流提取，取有機(jī)相，去除有機(jī)溶劑i，即得到人 參總皂苷；(2)將步驟(1)得到的人參總皂苷用有機(jī)溶劑ii溶解，得到皂苷溶液；向所述皂苷溶 液中加入有機(jī)溶劑ii的堿溶液進(jìn)行反應(yīng)，進(jìn)行第一次靜置，離心后收集沉淀；用水將所述 沉淀制成懸濁液，向所述懸濁液中加入有機(jī)溶劑ii的堿溶液進(jìn)行反應(yīng)，進(jìn)行第二次靜置， 分別收集上清和沉淀；將所述上清蒸干后即得到人參三醇型皂苷，將所述沉淀干燥后即得 到人參二醇型皂苷；(3)分別向步驟( 得到的人參三醇型皂苷和人參二醇型皂苷中加入有機(jī)溶劑iii進(jìn) 行熱解反應(yīng)，分別得到反應(yīng)產(chǎn)物I和反應(yīng)產(chǎn)物II ；用水分別將反應(yīng)產(chǎn)物I和反應(yīng)產(chǎn)物II制 成懸濁液I和懸濁液II，進(jìn)行萃取i，分別得到20，M位雙鍵型三醇型人參皂苷和20，對(duì)位 雙鍵型二醇型人參皂苷；(4)將步驟C3)得到的20，M位雙鍵型三醇型人參皂苷和20，M位雙鍵型二醇型人參 皂苷分別進(jìn)行氫化反應(yīng)，分別得到氫化后的產(chǎn)物I和氫化后的產(chǎn)物II ；(5)分別將步驟(4)得到的氫化后的產(chǎn)物I和氫化后的產(chǎn)物II與酶溶于酸水溶液中， 進(jìn)行水解反應(yīng)，分別得到反應(yīng)液I和反應(yīng)液II，分別離心反應(yīng)液I和反應(yīng)液II，分別收集沉 淀I和沉淀II，用水分別將所述沉淀I和沉淀II制成懸濁液I和懸濁液II，進(jìn)行萃取ii， 均取有機(jī)相，由懸濁液I萃取得到的有機(jī)相即為權(quán)利要求1所述化合物，其中R表示羥基； 由懸濁液II萃取得到的有機(jī)相即為權(quán)利要求1所述的化合物，其中R表示氫；所述酶為葡 聚糖苷酶和/或葡萄糖苷酶和/或蝸牛酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述破碎為破碎成過40目篩的小塊；所述人參與所述有機(jī)溶劑i的 質(zhì)量比為1 10 ；所述回流提取的次數(shù)為3次，每次所述回流提取的時(shí)間為1小時(shí)，每次所 述回流提取的溫度為80°C ；所述步驟O)中，所述皂苷溶液的質(zhì)量百分比濃度為10% ；所述皂苷溶液與所述有機(jī) 溶劑ii的堿溶液的體積比為1 1 ；所述第一次靜置的時(shí)間為Mh，所述第一次靜置的溫度 為25°C ；所述第二次靜置的時(shí)間為12h，所述第二次靜置的溫度為25°C ；所述步驟(3)中，所述人參三醇型皂苷與所述有機(jī)溶劑iii的質(zhì)量比為5 1;所述人 參二醇型皂苷與所述有機(jī)溶劑iii的質(zhì)量比為5 1 ；所述熱解反應(yīng)的溫度為120°C ；所述熱解反應(yīng)的時(shí)間為5小時(shí)；所述步驟(4)中，所述氫化反應(yīng)包括如下a)或b)或c)所述的步驟a)將步驟C3)得到的20，M位雙鍵型三醇型人參皂苷和20J4位雙鍵型二醇型人參 皂苷分別用有機(jī)溶劑ii溶解，分別得到溶解液I和溶解液II，分別向溶解液I和溶解液II 加入催化劑i，通入氫氣，進(jìn)行第一步氫化反應(yīng)，去除催化劑i，分別得到氫化反應(yīng)液I和氫 化反應(yīng)液II，蒸干后分別得到干燥物I和干燥物II ；分別向干燥物I和干燥物II中加入有 機(jī)溶劑ii溶解，加入催化劑ii，通入氫氣，進(jìn)行第二步氫化反應(yīng)，去除有機(jī)溶劑ii和催化劑 ii，分別得到氫化后的提取物I和氫化后的提取物II ；b)將步驟C3)得到的20，M位雙鍵型三醇型人參皂苷和20J4位雙鍵型二醇型人參 皂苷分別用有機(jī)溶劑ii溶解，分別得到溶解液I和溶解液II，分別向溶解液I和溶解液II 加入催化劑i，通入氫氣，進(jìn)行氫化反應(yīng)A，去除有機(jī)溶劑ii和催化劑i，分別得到氫化后的 提取物I和氫化后的提取物II ；c)將步驟C3)得到的20，M位雙鍵型三醇型人參皂苷和20J4位雙鍵型二醇型人參 皂苷分別用有機(jī)溶劑ii溶解，分別得到溶解液I和溶解液II，分別向溶解液I和溶解液II 加入催化劑ii，通入氫氣，進(jìn)行氫化反應(yīng)B，去除有機(jī)溶劑ii和催化劑ii，分別得到氫化后 的提取物I和氫化后的提取物II ；所述步驟(5)中，所述酸水溶液為乙酸水溶液；所述水解反應(yīng)的溫度為15°C -100°C或 15°C或40°C或100°C，時(shí)間為2小時(shí)- 小時(shí)或2小時(shí)或12小時(shí)或M小時(shí)；所述水解反應(yīng) 體系的PH值為2-6或2或4. 5或6。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述有機(jī)溶劑i為體積百分比為70%的乙醇水溶液；所述步驟O)中，所述有機(jī)溶劑ii為體積百分比為95%的乙醇水溶液；所述有機(jī)溶劑 ii的堿溶液為含有NaOH的乙醇溶液；所述含有NaOH的乙醇溶液是由NaOH水溶液和乙醇 水溶液混合制成；所述NaOH水溶液與所述乙醇水溶液的體積比為3 200;所述NaOH水溶 液的濃度為llmol/L ；所述乙醇水溶液為體積百分比為95%的乙醇水溶液；所述步驟C3)中，所述有機(jī)溶劑iii為體積百分比為45%的丙二酸水溶液；所述萃取i 是使用二氯甲烷進(jìn)行的；所述步驟(4)中，所述溶解的溫度為35°C ；所述催化劑i為雷尼鎳；所述催化劑ii為 鈀/碳；所述第一步氫化反應(yīng)或所述氫化反應(yīng)A的溫度為25°C，時(shí)間為3小時(shí)；所述第二步 氫化反應(yīng)或所述氫化反應(yīng)B的溫度為25°C，時(shí)間為3小時(shí)；所述步驟(5)中，所述酶的用量為10U/g氫化后的產(chǎn)物I或10U/g氫化后的產(chǎn)物II ； 所述乙酸水溶液的濃度為0. lmol/L ；所述萃取ii是使用乙酸乙酯進(jìn)行的。
5.用于抗腫瘤或增強(qiáng)機(jī)體免疫力的藥物，其活性成分為如下1)>2)或幻所示1)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R為氫；2)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R為羥基；3)1)所示化合物和2、所示化合物的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物，其特征在于所述藥物包括藥學(xué)上可接受的載體。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的藥物，其特征在于所述抗腫瘤為抑制腫瘤細(xì)胞的生長。
8.權(quán)利要求1所述的化合物在制備抗腫瘤或增強(qiáng)機(jī)體免疫力的藥物中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于所述抗腫瘤為抑制腫瘤細(xì)胞的生長。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述抑制腫瘤細(xì)胞的生長為抑制腫瘤的瘤重和/或抑制腫瘤細(xì)胞的數(shù)目； 所述增強(qiáng)機(jī)體免疫力為增強(qiáng)機(jī)體內(nèi)吞噬細(xì)胞的吞噬能力。
全文摘要
本發(fā)明公開了氫化型人參皂苷苷元及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明所提供的氫化型人參皂苷苷元，其結(jié)構(gòu)式如式I所示，其中R表示氫或羥基。本發(fā)明所提供的氫化型人參皂苷苷元DDA和DTA均具有抑制腫瘤生長和增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用，極具開發(fā)潛力。式文檔編號(hào)A61K31/575GK102093452SQ20111002820
公開日2011年6月15日 申請(qǐng)日期2011年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月26日
發(fā)明者孫妙囡, 孫德軍 申請(qǐng)人:孫妙囡