專利名稱：含有透明質(zhì)酸和l-精氨酸的抗粘連劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有透明質(zhì)酸和L-精氨酸的抗粘連劑，它具有延長(zhǎng)的體內(nèi)滯留時(shí)間和優(yōu)異的抗粘連性能。根據(jù)本發(fā)明，能夠防止由外科手術(shù)、感染和創(chuàng)傷引起的粘連發(fā)生。
背景技術(shù)：
粘連通常在肉芽組織或傷疤的形成期間會(huì)出現(xiàn)在炎癥愈合過程中并由大量堆積的纖維素的卷繞而引起。一般情況下，粘連的發(fā)生頻率為約67 93%，甚至傷口愈合后，粘連也會(huì)通常存在而導(dǎo)致各種后遺癥，即便粘連的一部分自發(fā)退化。在腹腔鏡手術(shù)的情況下，由這種粘連引起的后遺癥包括腸功能紊亂、腸梗阻、慢性疼痛或諸如此類。特別是，已知婦科手術(shù)后的粘連會(huì)引起不育(Eur.J.Surg.1997，Suppl577，32-39)。為了防止這種粘連，在世界范圍內(nèi)進(jìn)行了覆蓋傷口部位或通過藥理作用等來(lái)物理抑制和化學(xué)抑制周圍組織的粘連發(fā)生的抗粘連劑的開發(fā)。特別是，在傷口部位上所敷用并附著的物理抗粘連屏障具有優(yōu)異的效果，因?yàn)樗苯幼璧K粘連的發(fā)生。因此，它目前主要用于臨床應(yīng)用。近年來(lái)，一直在積極進(jìn)行對(duì)含有生物可吸收聚合物的物理抗粘連屏障的研究。生物可吸收的聚合物在體內(nèi)水合，以在傷口愈合期使傷口與周圍組織隔離，從而防止粘連的發(fā)生。在傷口愈合完成后，生物可吸收的聚合物自然地被吸收并被除去，使得它們不影響正常組織。已經(jīng)進(jìn)行了使用生物可吸收聚合物的這種優(yōu)點(diǎn)的各種嘗試。在使用生物可吸收聚合物的方法的實(shí)例中，已經(jīng)研究了透明質(zhì)酸本身作為手術(shù)后的抗粘連劑的應(yīng)用，美國(guó)專利4141973提出使用透明質(zhì)酸。然而，由于透明質(zhì)酸在體內(nèi)的滯留時(shí)間相對(duì)短，透明質(zhì)酸的單獨(dú)使用顯示效果不足。此外，因?yàn)橥该髻|(zhì)酸的高水溶性，所以它在很短的時(shí)間之內(nèi)從傷口表面向下流動(dòng)。由于這些問題，透明質(zhì)酸的實(shí)際應(yīng)用是有問題的(Journal of Gynecologic Surgery, Vol.7，N0.2，97-101(1991))。為了解決上述問題，即抗粘連材料由于其快速降解和移除幾乎不顯示出抗粘連效果，提出了用于交聯(lián)生物可吸收聚合物的方法。作為具體的實(shí)例，EP507604公開了一種方法，其中，具有羧基端基的多糖與多價(jià)金屬離子離子鍵合以降低其溶解度，使得可將它用作抗粘連劑。這種方法有效地延長(zhǎng)在腹腔內(nèi)的滯留時(shí)間，但在僅延長(zhǎng)在腹腔內(nèi)的滯留時(shí)間時(shí)，不能防止粘連。換句話說，用于形成金屬離子鹽所過量使用的金屬離子可引起在腹腔內(nèi)的粘連(Eur.J.Surg.1997, Suppl577, 32-39)。此外，多糖通過金屬離子形成硬的水凝膠或膜，但所制備的膜具有易碎的缺點(diǎn)。同時(shí)，美國(guó)專利5017229、5527893、5760200等提出了通過使用透明質(zhì)酸(一種多
糖)和羧甲基纖維素來(lái)防止粘連的方法。 當(dāng)使1-乙基-3(3-二甲基氨基丙)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)與作為主要組分的透明質(zhì)酸和羧甲基纖維素反應(yīng)時(shí)，EDC的一部分與羧基端基反應(yīng)，以便帶正電荷，而帶正電荷的材料與帶負(fù)電荷的羧基端基反應(yīng)，以便自發(fā)形成聚電解質(zhì)配合物。聚電解質(zhì)配合物是具有正電荷和負(fù)電荷的聚合物化合物，這種化合物因?yàn)榫酆衔镏械碾x子鍵而具有不易降解或溶解的水凝膠結(jié)構(gòu)。當(dāng)干燥水凝膠時(shí)，形成具有高的吸收能力不易在體內(nèi)降解的屏障。然而，因?yàn)樵谏厦娴姆椒ㄖ兴褂玫腅DC具有生物毒性，所以透析在制備期間應(yīng)進(jìn)行很長(zhǎng)一段時(shí)間。另外，因?yàn)樽鳛樵纤褂玫耐该髻|(zhì)酸非常昂貴，所以它提高了所制備的膜的成本。此外，通過上述的專利文件中描述的方法所制備的薄膜由于干燥后它們的低柔韌性和強(qiáng)度而易碎，并在它們水合時(shí)快速凝膠。由于這些原因，這些膜難以處理和操作，因?yàn)樵谒鼈儜?yīng)用到含有水的生物組織后，不能將它們?cè)俅畏蛛x和操作(Surg.Clin.Nor.Am.，1997,77:3,671-688)。此外，一直努力降低在使用L-精氨酸、己酮可可堿、亞甲基藍(lán)、維生素E或諸如此類的手術(shù)后的粘連，但是這些努力還沒有表現(xiàn)出足夠的效果(Kaleli B et al., ActaObstet Gynecol Scand.77:377-380,1998 ；Kluger Y et al., Eur J Surg.166:568-571,2000)。于是，本發(fā)明人已進(jìn)行研究以解決上述的問題，即透明質(zhì)酸由于其快速降解和移除而幾乎沒有顯示出抗粘連效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)使用透明質(zhì)酸和L-精氨酸的混合物時(shí)，它具有延長(zhǎng)的體內(nèi)滯留時(shí)間和優(yōu)異的抗粘連性能，從而完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供含有透明質(zhì)酸和L-精氨酸的抗粘連劑，所述抗粘連劑具有延長(zhǎng)的體內(nèi)滯留時(shí)間和優(yōu)異的抗粘連性能。本發(fā)明提供了含有透明質(zhì)酸和L-精氨酸的抗粘連劑。透明質(zhì)酸 是直鏈多糖，其中，^ -D-N-乙酰氨基葡萄糖和P -D-葡糖醛酸交替地相互鍵合。它沒有種屬特異性和器官特異性，并顯示出優(yōu)異的生物相容性和非常高的粘彈性，即使將它移植或注入到活體內(nèi)。由于這種特性，透明質(zhì)酸可于各種應(yīng)用中，包括:用于治療關(guān)節(jié)炎的插入物、抗粘連的凝膠/膜、藥物釋放系統(tǒng)、抗皺劑和塑性植入物。L-精氨酸是存在于所有的生物體中的必需或非必需氨基酸。當(dāng)體內(nèi)的L-精氨酸水平比正常水平低時(shí)，在體內(nèi)合成L-精氨酸以滿足生理需要，但必須將它提供給具有降低L-精氨酸的遺傳性疾病的人。在創(chuàng)傷、敗血癥或灼傷的情況下，應(yīng)以飲食的形式攝入適量的L-精氨酸，以滿足體內(nèi)L-精氨酸的需要。此外，它還可用作免疫增強(qiáng)的免疫營(yíng)養(yǎng)。此外，它起到中和在用于生命維持的蛋白質(zhì)合成過程中和尿液形成過程中所產(chǎn)生的氨的作用，而且它也與一氧化氮、肌酸、多胺、L-谷氨酸、L-脯氨酸、精胺、四肽促吞噬肽和諸如此類的一起充當(dāng)免疫調(diào)節(jié)劑。另外，當(dāng)將它用作生成葡萄糖的氨基酸時(shí)，可將它轉(zhuǎn)換成D-葡萄糖或糖原；或?qū)⑺到庥糜谏锬墚a(chǎn)生。因?yàn)橥该髻|(zhì)酸的高生物相容性和生物降解性導(dǎo)致其在體內(nèi)的滯留時(shí)間相對(duì)短，透明質(zhì)酸單獨(dú)用作抗粘連劑顯示出不足的效果。此外，由于其高水溶性，透明質(zhì)酸在很短的時(shí)間之內(nèi)從傷口表面向下流動(dòng)。由于這些問題，透明質(zhì)酸的實(shí)際應(yīng)用是有問題的。本發(fā)明含有透明質(zhì)酸和L-精氨酸的抗粘連劑克服了上述問題并顯示出優(yōu)異的抗粘連性能。本發(fā)明還提供了含有透明質(zhì)酸和L-精氨酸的重量比為1: 0.05 5的抗粘連劑。如果透明質(zhì)酸與L-精氨酸的比例小于0.05或超過5，那么將難以滿足用于抗粘連劑的合適的粘度性能、粘附性能和應(yīng)用性能。
另外，本發(fā)明提供了含有透明質(zhì)酸和L-精氨酸且具有絕對(duì)粘度為500 lOOOOcps的抗粘連劑。如果抗粘連劑具有小于500cps的絕對(duì)粘度，那么由于其低粘度將不能提供足夠的抗粘連性能和附著性能；如果它具有大于lOOOOcps的絕對(duì)粘度，將難以攪拌和聚合并將不適當(dāng)?shù)胤植荚诮M織中的應(yīng)用位點(diǎn)。由于這些原因，抗粘連劑的絕對(duì)粘度優(yōu)選為500 lOOOOcps,且更優(yōu)選為500 2000cps。鑒于抗粘連性能、附著性能和流動(dòng)性，抗粘連劑的絕對(duì)粘度甚至更優(yōu)選為1000 2000cps，且最優(yōu)選1000 1500cps。同時(shí)，抗粘連劑的制劑實(shí)例包括溶液制劑、凝膠制劑和膜制劑。當(dāng)皮膚或組織嚴(yán)重?fù)p傷時(shí)，可能發(fā)生組織之間的粘連。由于這個(gè)原因，最近的外科技術(shù)已經(jīng)變成縮小皮膚和組織傷口并使組織的損傷最小化的技術(shù)。由于外科技術(shù)中這種變化，也可獲得防止粘連的附加效果(Hepato-Gastroenterol, 1991, 38, 283)。根據(jù)外科技術(shù)中的這種變化，抗粘連劑的最近發(fā)展趨勢(shì)向著溶液型制劑或凝膠型制劑發(fā)展(TheAdhesion Prevention Opportunity, Report from MDI, 1998)。溶液型制劑是指在腹腔或骨盆腔手術(shù)后服用大量的溶液制劑的方法，并且是一種自從知道了腹腔中的粘連而已經(jīng)以各種方式嘗試的防止粘連的方法。雖然體內(nèi)的溶液制劑在2 3天內(nèi)完全排出，但因?yàn)榕c過量的外來(lái)物質(zhì)的體內(nèi)給藥相關(guān)的心理負(fù)擔(dān)而不頻繁使用(Eur.J.Surg.1997, Suppl577,32-39)。與此相反，凝膠制劑最近已引起關(guān)注，因?yàn)樗梢酝ㄟ^敷用少量的凝膠到傷口部位來(lái)有效地防止粘連。到現(xiàn)在為止，已經(jīng)開發(fā)了可用于包括脊椎手術(shù)的有限應(yīng)用中的凝膠型制劑(美國(guó)專利5605938)。由除了蛋白質(zhì)粘合劑還包含作為活性成分的葡聚糖硫酸鹽的組合物所表征的這種技術(shù)基于葡聚糖硫酸鹽是防止神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞參與纖維組織產(chǎn)生的化合物的事實(shí)而開發(fā)。然而，上述技術(shù)具有缺點(diǎn)，即它不能用于手術(shù)面積相對(duì)較大的或出血嚴(yán)重的外科手術(shù)中，因?yàn)槠暇厶橇蛩猁}具有抑制血液凝固的性質(zhì)。因此，凝膠制劑僅能用于諸如脊椎手術(shù)的微外科手術(shù)，但具有許多優(yōu)點(diǎn)，即它使用起來(lái)非常方便并能防止粘連到非預(yù)定部位。另外，在膜 型抗粘連劑的情況下，在手術(shù)后立即分離抗粘連劑后再次粘附抗粘連劑的需要會(huì)經(jīng)常發(fā)生。因此，膜型抗粘連劑優(yōu)選不僅具有優(yōu)異的初期粘附性能，還具有優(yōu)異的再粘附性能。本發(fā)明提供了基于具有合適粘度的透明質(zhì)酸的抗粘連劑，并能使抗粘連劑的效果最大化。然而，應(yīng)理解，本發(fā)明的范圍并不限于凝膠型抗粘連劑，抗粘連劑可制成各種形式。本發(fā)明含有高生物相容性的透明質(zhì)酸和L-精氨酸的抗粘連劑在粘連程度及粘連強(qiáng)度的測(cè)量值上顯示出明顯降低，具有由增加的體內(nèi)滯留時(shí)間引起的優(yōu)異的抗粘連性能，并維持在合適的粘度以在組織中表現(xiàn)出非常優(yōu)異的流動(dòng)性、應(yīng)用性能和附著性能。


圖1是表示透明質(zhì)酸酶與對(duì)比例I和實(shí)施例1 3的每種混合之前和之后的絕對(duì)粘度值變化的圖表。
具體實(shí)施例方式在下文中，為了更好地理解本發(fā)明，將描述優(yōu)選的實(shí)施例。但應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明目的，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1:含有透明質(zhì)酸和L-精氨酸的抗粘連劑的制備將透明質(zhì)酸鈉與L-精氨酸以75: 25的重量比彼此混合，并用蒸餾水以5.0mg/ml的濃度與上述混合物混合，在25°C下攪拌I小時(shí)，從而制備抗粘連劑。實(shí)施例2和實(shí)施例3除了透明質(zhì)酸和L-精氨酸之間的混合比如下面的表I所示進(jìn)行改變，以相同的方式制備抗粘連劑。對(duì)比例I和對(duì)比例2單獨(dú)使用透明質(zhì)酸(對(duì)比例I)和單獨(dú)使用L-精氨酸(對(duì)比例2)來(lái)制備抗粘連劑。將透明質(zhì)酸或L-精氨酸以濃度為5.0mg/ml添加到水中，在25°C下攪拌每種水溶液I小時(shí)。表I
權(quán)利要求
1.一種抗粘連劑，含有透明質(zhì)酸和L-精氨酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗粘連劑，其中，所述透明質(zhì)酸與所述L-精氨酸的重量比為I: 0.05 5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗粘連劑，其中，所述透明質(zhì)酸與所述L-精氨酸的重量比為75: 25。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗粘連劑，其中，所述透明質(zhì)酸的粘度為500cps lOOOOcps。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗粘連劑，其中，所述透明質(zhì)酸的粘度為500cps 2000cps。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的 抗粘連劑，其中，所述透明質(zhì)酸的粘度為lOOOcps 2000cps。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗粘連劑，其中，所述透明質(zhì)酸的粘度為lOOOcps 1500cpso
全文摘要
本發(fā)明涉及含有透明質(zhì)酸和L-精氨酸的抗粘連劑，它具有延長(zhǎng)的體內(nèi)滯留時(shí)間和優(yōu)異的抗粘連性能。根據(jù)本發(fā)明，能夠防止由外科手術(shù)、感染和創(chuàng)傷引起的粘連發(fā)生。
文檔編號(hào)A61L31/00GK103189078SQ201080069936
公開日2013年7月3日 申請(qǐng)日期2010年10月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月29日
發(fā)明者李基浩, 李東成, 金京南, 金在永 申請(qǐng)人:匯美迪斯有限公司