專利名稱：免疫抑制相關疾病的治療的制作方法
技術領域：
本發(fā)明系有關于細胞增生疾病及免疫不全癥的治療方法。
背景技術：
免疫系統(tǒng)可使一生物體抵御病原菌感染、細胞轉(zhuǎn)型(cellular transformation) 以及物理或化學性傷害。一旦免疫系統(tǒng)較平常不活化，會發(fā)生免疫不全 (immunodeficiency)或免疫抑制(immunosuppression)而導致危急生命的感染或癌癥的發(fā)生。免疫抑制可能由疾病所造成，或由藥物，或感染所產(chǎn)生。已知系統(tǒng)性免疫抑制與不正常的骨髓形成(myelopoiesis)及繼發(fā)的腫瘤生長、骨髓抑制(myelosuppressive)療法、及生長因子的使用和隨后的骨髓衍生免疫抑制細胞的擴增/調(diào)動有關。該骨髓衍生抑制細胞 (MDSCs，myeloid-derived suppressor cells)通過多種機制以減少活化的T細胞的數(shù)量， 以及抑制T細胞的功能，因此導致免疫抑制及耐受性(tolerance)。因此，MDSCs具有原腫瘤(pro-tumor)的角色。此外，MDSCs具有多效活性(pleiotropic activities)，其包含可于腫瘤微環(huán)境中誘導突變、促進血管新生作用(angiogenesis)及轉(zhuǎn)移(metastasis)，以及直接支持腫瘤生長及發(fā)炎反應。實際上，該等細胞于多種病理情況中系會增加，包含感染、 炎癥、移植物抗宿主疾病(graft-versus-host disease)、創(chuàng)傷壓力、及腫瘤疾病(Dolcetti et al. , Cancer Lett. 2008 Aug 28 ；267 (2) :216-25 ；Talmadge, Clin Cancer Res. 2007 Sep 15 ；13(18 Pt 1) :5243-8)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明至少部份系基于非預期地自成熟或年輕動物中發(fā)現(xiàn)一干細胞群，似胚葉細胞-干細胞群(BLSCs，blastomere-like stem cells)，其可顯著地降低動物體內(nèi)的MDSCs
的數(shù)量。因此，本發(fā)明一方面的特征在于一種治療患者中細胞增生疾病的方法。該方法包含將有效量的BLSCs投予有需要的個體。細胞增生疾病系指一疾病具有不受控制的自發(fā)性細胞生長(包含惡性及非惡性生長)，以及受MDSCs調(diào)節(jié)免疫抑制作用的特征。該疾病的例子包含大腸癌、乳癌、前列腺癌、肝癌、黑色素瘤、肺癌、神經(jīng)膠母細胞瘤、腦瘤、造血性惡性腫瘤、視網(wǎng)膜胚細胞瘤 (retinoblastoma)、腎細胞癌、頭部或頸部癌、子宮頸癌、胰臟癌、食道癌、卵巢癌，及鱗狀上皮細胞瘤。在本文中「個體」一詞系指人類或非人類的動物。非人類的動物的例子包含所有具有免疫系統(tǒng)的脊椎動物，如哺乳類動物，包括非人類的靈長類(特別系指高等靈長類)、 狗、嚙齒動物(如小鼠或大鼠)、天竺鼠、貓、農(nóng)場動物(如馬、牛、羊或豬)，以及非哺乳類動物，包括鳥類、兩棲動物、爬蟲類等。在一較佳具體實施例中，該個體為人類。在另一具體實施例中，該個體為試驗動物或適用于疾病模式的動物。待治療的患有細胞增生疾病的個體，可由針對該疾病的標準診斷技術來鑒定。在本文中「治療」一詞系指將組成物(例如細胞組合物)投予罹患細胞增生疾病或有發(fā)展成細胞增生疾病的風險的個體，其目的為對于該疾病、該疾病的癥狀、衍生自該疾病的癥狀或傾向損傷/疾病的體質(zhì)加以治愈、減輕、解除、治療、延遲其發(fā)生、預防或緩解。在本文中「有效量」一詞系指能使被治療的個體產(chǎn)生預期的醫(yī)療結果的組合物的量。該治療方法可單獨進行或與其它藥物或療法并行。本發(fā)明的特征亦在于一種減少個體內(nèi)MDSCs數(shù)量的方法，其通過將有效量的 BLSCs投予有需要的個體。本發(fā)明另一方面的特征為一種克服個體內(nèi)免疫抑制作用的方法。該方法包含將有效量的BLSCs投予有需要的個體。該免疫抑制作用為由MDSCs調(diào)節(jié)的免疫抑制作用。在又另一方面，本發(fā)明的特征在于一種調(diào)節(jié)個體內(nèi)免疫反應的方法。該方法包含將有效量的 BLSCs投予有需要的個體。于前述的每一種方法中，該個體可為具有細胞增生疾病、感染或免疫不全疾病的患者。于每個方法中，該BLSCs以每次Ix IO8至Ix IO11的量投予該患者，較佳為每次切 IO8至切101(1，或更佳為每次Ix IO9至Ix IO100為了減少或避免宿主排斥反應，該等細胞較佳者為自該個體自體衍生者。該BLSCs可為每兩周投予2至5次，或更佳者，為每兩周投予3次。該個體可視需要于投予該BLSCs前先檢測MDSCs的數(shù)量。若一來自該個體的樣本， 其MDSCs數(shù)量系統(tǒng)計上高于來自正常受試者的樣本，則該個體為前述方法的治療候選。該個體亦可于投予該BLSCs后檢測MDSCs的數(shù)量，以確認投予該BLSCs的效用。例如若經(jīng)投予后該MDSCs的數(shù)量統(tǒng)計上低于投予前者，則該BLSCs的投予治療為有效。本發(fā)明的一或多個具體實施例的細節(jié)系闡述于后文中。本發(fā)明的其它特征、目的以及優(yōu)點可通過說明書內(nèi)容及權利要求得以清晰明了。
具體實施例方式本發(fā)明系關于使用BLSCs調(diào)節(jié)免疫反應及治療相關疾病，例如細胞增生疾病及其它免疫不全癥。BLSCs為在成年或年輕動物中的一群非胚胎干細胞。此等細胞為全能性且具有與胚胎干細胞相似的分化能力。參見W02007/100845。BLSCs包含正常的整套染色體，且BLSCs 為細胞譜系未定(lineage-uncommitted)，且可形成體內(nèi)所有體(非生殖)細胞。它們可分化為各種細胞譜系，其包含衍生自外胚層(如神經(jīng)元、星狀膠細胞、寡樹突神經(jīng)膠細胞 (oligodendrocytes)及角質(zhì)細胞(keratinocytes))、中胚層(如骨骼肌、平滑肌、心肌、脂肪組織、軟骨、骨、真皮、血液細胞、韌帶組織(ligament tissue)、肌腱及內(nèi)皮細胞)及內(nèi)胚層(如GI上皮細胞、肝細胞、卵細胞、膽細胞、胰細胞(如α細胞、β細胞及γ細胞)及管道細胞(ductal cells))的細胞。此外，BLSCs可分化為精原細胞(spermatogonia)及形成生殖配子精子及/或卵子，及胚胎組織和細胞，以及胎盤的胎兒部分。該細胞易對于譜系誘導劑、增生劑及分化抑制劑產(chǎn)生反應。另一方面，該等細胞對于發(fā)展劑(progression agents)較無反應。與似外胚層干細胞(印iblast-like stem cells)相同，BLSCs于細胞培養(yǎng)至長滿時并無接觸抑制作用，但只要該細胞被維持于適當?shù)臓I養(yǎng)供給時，則會形成多層融合的細胞層。BLSCs不會表現(xiàn)代表前驅(qū)或分化細胞、胚層譜系干細胞、或似外胚層干細胞的表型表現(xiàn)標記。相反地，BLSCs表現(xiàn)一般及特定的胚胎譜系標記，例如胚胎干細胞標記⑶66e、HCEA, CEA以及CEA-CAM-I。BLSCs于成熟組織中常為靜態(tài)。然而，當上述組織受到傷害時，BLSCs便會活化及分化以修復該受損的組織。BLSCs可通過下述的實施例1或?qū)＠暾執(zhí)朩02007/100845所述的方法來制備。一般而言，該細胞可自成年或年輕動物的多種組織中分離出來，包含血液、骨髓及骨骼肌。為了確認所分離的細胞確實為BLSCs，試驗者可檢驗一些特征，包含(1)懸浮的細胞尺寸，其小于1微米；(2)細胞表面標記，如CD66e+;以及(3)臺盼藍染色呈陽性。細胞表面標記的抗體，如CD66e可被使用于鑒定BLSCs。為此目的，適當?shù)目贵w可與適當?shù)臉擞浗Y合，如螢光異硫氰酸鹽(FITC，fluorescein isothiocyanate)、藻紅蛋白(PE，phycoerythrin)、別藻藍蛋白(APC，al lophycocyanin)或量子點(quantum dots)。BLSCs可進一步使用該類抗體并以流式細胞儀來富集。該富集的細胞群接著以標準技術來測試。為了確認該細胞的分化潛力，該細胞可通過習知技藝方法被誘導以形成，例如神經(jīng)元-神經(jīng)膠質(zhì)細胞、骨細胞以及脂肪細胞。例如，該細胞可被繼代及培養(yǎng)至長滿(confluence)，移轉(zhuǎn)至骨生成培養(yǎng)基或脂肪生成培養(yǎng)基， 并培養(yǎng)一段適當時間(如三周)。請參閱如美國專利第7470537號、第7374937號及第6777231號。骨生成分化能力可通過鈣累積的礦化作用來評估，該礦化作用可通過von Kossa染色法觀察。通過油紅0將細胞內(nèi)油滴染色，并于顯微鏡下觀察以檢測脂肪生成分化情形。對于神經(jīng)分化方面，該細胞可于神經(jīng)生成培養(yǎng)基中培養(yǎng)適當時間(如七天)，接著將其以無血清(serum depletion)的環(huán)境處理，并與β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol) 培養(yǎng)。請參閱美國專利第7470537號及美國專利申請案第20080274087號、第20080213228 號及第200801526 號。經(jīng)分化后，該細胞呈現(xiàn)折光細胞體型態(tài)(refractile cell body), 及具有延伸的似軸突結構并構成網(wǎng)絡。以譜系特異性標記進行免疫細胞化學染色即可進一步確認神經(jīng)的分化情形。該標記的例子包含神經(jīng)元特異性第三類β-微管蛋白(Tuj-I)、神經(jīng)絲狀結構蛋白(neurofilament)以及GFAP。另外，可通過BLSCs不具接觸抑制作用(contact inhibition)的特點，以確認該等分離細胞的身份。為此，可將該分離細胞培養(yǎng)至長滿。于此條件下，BLSCs可形成球狀細胞聚體、細胞均布的多層結構(multiple confluent layers)、或網(wǎng)孔(mesh-net)結構。相反的，CD42+細胞或血小板無法形成前述結構，如細胞聚體。經(jīng)該等確認后的BLSCs可進一步于一非分化性的培養(yǎng)基中以超過10、20、50、100 或300代以上的細胞倍增率(population doubling)來培養(yǎng)增殖，且其中無自發(fā)性分化、老化、型態(tài)改變、生長速度增加、或改變?yōu)榫吣芰Ψ只癁樯窠?jīng)元的跡象。該等細胞可于使用前以標準方法來保存。如本文所述，BLSCs可被用以降低個體內(nèi)的MDSCs的數(shù)量。此處所使用的「MDSCs」一詞系指自骨髓衍生的、異質(zhì)的細胞群，其包含骨髓單核細胞性分化的連續(xù)性階段。此等異質(zhì)性系可通過復雜的表面標記(surface marker)表現(xiàn)模式來反映。鼠類MDSCs的主要表現(xiàn)型系可由下述標記來界定⑶llb+、Gr-l+、F4/80int、 CDllclow、MHCII-/low、Ly-6C+、ER-MP58+、CD31+ 以及 IL_4Ra +。人類 MDSCs 為未成熟的表現(xiàn)型，包含譜系陰性(Lin-，lineage negative)、⑶14_、人類白血球抗原DR-陰性 (HLA-DR-, human leukocyte antigen DR—negative)、CD15+、 CD34+、CDllb+、 CD33+、 VX 及 CD13+(Dolcetti et al.，Cancer Lett. 2008 Aug 28 ；267 (2) :216-25 ；Talmadge, Clin Cancer Res. 2007 Sep 15 ；13(18Ptl) :5243-8)。
帶有腫瘤的動物及癌癥患者的骨髓形成(myelopoiesis)存在缺陷，此將導致 MDSCs的累積。腫瘤成長的期間，于主要發(fā)炎類型中，MDSCs不論在局部性或系統(tǒng)性皆會被吸引且?guī)椭[瘤的成長。該等細胞會維持腫瘤成長并提供有利于轉(zhuǎn)型細胞(transformed cells)增生、產(chǎn)生新突變、擴增及規(guī)避宿主的免疫監(jiān)督(immunosurveillance)的微環(huán)境； 此外，MDSCs會參與腫瘤血管新生(neoangiogenesis)。因此，BLSCs所調(diào)節(jié)的MDSCs抑制作用，系可用于治療癌癥及其它細胞增生疾病。 尤其是，其可被用于治療具有不正常高量MSDC的疾病。此處所使用的「癌癥」一詞系指特征為無法控制細胞生長、侵入和具有轉(zhuǎn)移的可能性的疾病。癌細胞具自發(fā)性生長的能力，例如不正常地快速細胞生長。該詞意欲包含所有類型的癌化生長或致癌過程、轉(zhuǎn)移組織或惡性轉(zhuǎn)型細胞、組織或器官，不論組織病理類型或侵入階段。癌癥的范例包含，但不限于，癌及肉瘤，如白血病、肉瘤、骨肉瘤、淋巴瘤、黑色素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、嗜鉻性細胞瘤、肝癌、卵巢癌、皮膚癌、睪丸癌、胃癌、胰臟癌、腎癌、乳癌、前列腺癌、大腸癌、頭部或頸部癌、腦癌、食道癌、膀胱癌、腎臟皮質(zhì)癌、肺癌、支氣管癌、子宮內(nèi)膜癌、鼻咽癌、子宮頸癌或肝癌、及其它原發(fā)部位不明的癌癥。MDSCs已于病理學中被揭示，但未被揭示在腫瘤中，其參與了發(fā)炎免疫反應，如超級抗原刺激(super-antigen stimulation)及感染，如睡眠蟲(trypanosomiasis)、沙門氏桿菌(salmonellosis)及念珠菌(candidiasis) 0例如MDSCs數(shù)量的增加被發(fā)現(xiàn)與發(fā)炎、感染及移植體對抗宿主疾病有關，且會抑制活躍或新的T細胞反應(Talmadge，Clin Cancer Res. 2007 Sep 15 ；13(18Pt 1) :5243-8)。MDSCs 已顯示可誘導免疫抑制狀態(tài)，其系通過降低活化的T細胞數(shù)量及通過多種機制抑制T細胞功能，該等機制包含通過精胺酸酶-1 (arginase-l,ARGl)以耗盡左旋精胺酸(L-arginine)，以及通過誘導性一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase)產(chǎn)生一氧化氮、活性氧化物，和活化的氮氧化物。 因此，BLSCs所調(diào)節(jié)的MDSCs抑制作用亦可能用于讓MDSCs消除的開發(fā)中的策略，以治療移植體對抗宿主疾病、發(fā)炎及自體免疫疾病，而不僅是用于治療腫瘤。本發(fā)明的范疇為一種用以治療個體中MDSCs導致的免疫不全癥，舒緩該疾病的癥狀，或延遲該疾病的發(fā)生。該疾病的一示例為細胞增生性疾病?？赏ㄟ^標準技術來診斷其狀況或疾病以鑒定出需被治療的個體。尤其是，若該個體體內(nèi)的MDSCs數(shù)量系統(tǒng)計上高于同一個體先前的MDSC數(shù)量時，或高于一正常個體時，可認定為需治療的個體。該治療方法需將有效量的前述BLSCs投予至一需治療的個體。因此，本發(fā)明提供含有BLSCs的醫(yī)藥組合物。該等醫(yī)藥組合物可通過混合一治療有效量的BLSCs，及視需要的其它活性物質(zhì)，及一醫(yī)藥可接受的載劑來制備。該載劑可依據(jù)投予路徑具有不同形式。其它活性物質(zhì)的例子包含可抑制MDSCs的免疫抑制活性、干擾 MDSCs的聚集，或改善身體免疫功能的化合物。前述醫(yī)藥組合物可通過常規(guī)的醫(yī)藥賦形劑及制備方法以制備。所有賦形劑皆可與崩解劑、溶劑、?；瘎?、保濕劑及黏合劑進行混合。本文所述的「有效量」或「治療有效量」 一詞系指可使得特定疾病的至少一癥狀或參數(shù)得以顯著地改善的數(shù)量。BLSCs的治療有效量可由習知方法所決定。用以治療疾病的有效量系可通過該領域具有通常技藝者以習知試驗方法輕易地決定。而用以投予至個體的確切數(shù)量將依照該疾病的情況及嚴重度，以及該個體的生理情況而有所不同。任何癥狀或參數(shù)的顯著地改善系可由熟諳該技藝者或病患對醫(yī)師的報告來決定。將被明了的是，前述疾病的任何癥狀或參數(shù)具任何臨床上或統(tǒng)計上顯著減弱或改善者皆隸屬本發(fā)明的范疇內(nèi)。臨床顯著地減弱或改善意指對于該病患及/或醫(yī)師為顯而易見的。在本文中「醫(yī)藥可接受的」一詞系指當投予至一人類時，該等組成物中的分子個體及其它成分為生理上可接受的，且一般不會產(chǎn)生不良反應。較佳地，「醫(yī)藥可接受的」一詞意指系受聯(lián)邦監(jiān)管機關或州政府核準，或列于美國藥典或于其它一般藥典所認可用于哺乳類動物，特別指人類。醫(yī)藥可接受鹽類、酯類、酰胺，以及前驅(qū)藥系指該些鹽類(如羧酸鹽、 胺基酸添加鹽)、酯類、酰胺，以及前驅(qū)藥，于可靠的醫(yī)療判斷范疇內(nèi)，適合使用于與病患組織接觸而無過渡毒性、刺激性、過敏反應等；且需考量該等用途的合理的利益/風險比及有效性。可應用于前述醫(yī)藥組合物的載劑包含稀釋劑、賦形劑或載體，其可與化合物一起被投予。該等醫(yī)藥載劑可為無菌的液體，例如水及油。較佳的載劑為水或水溶液、鹽液及液態(tài)葡萄糖和甘油溶液，特別可作為注射溶液。適用的醫(yī)藥載劑如由E. W. Martin所撰的"Remington' s Pharmaceutical Sciences"第 18 版中所描述。該等BLSCs可透過注入或注射(例如靜脈注射、鞘內(nèi)注射、肌肉注射、腔內(nèi)注射、 氣管內(nèi)注射、腹腔注射或皮下注射)、口服、皮膚穿透或以其它業(yè)內(nèi)已知方法投予一個體。于一示例中，該等細胞可被直接注射于一位置或于一組織中(如肝臟或胰臟)，該處系具有腫瘤或免疫抑制反應發(fā)生。投予可為每兩周一次、一周一次或更頻繁，但當該疾病或失調(diào)于一穩(wěn)定階段時，其投予頻率則可以減少。異源的及自體的BLSCs皆可被使用。于前者情況，HLA的吻合將可避免或降低宿主的反應。于后者情況，自體的BLSCs系從一個體中被純化及增生后進行保存以備用。宿主的BLSCs可于活體外培養(yǎng)在含有宿主細胞或移植T細胞的環(huán)境中，并重新被送回該宿主。 上述步驟可使BLSCs于該宿主內(nèi)被視為自體細胞，并較佳地降低T細胞活性。劑量和投予頻率將取決于臨床癥狀，其確認緩解階段的維持，或于急性期的至少一個或多個，較佳為多于一個的本領域技術人員所知的臨床癥狀被減少或消失。一般而言， 劑量和用藥頻率將部分取決于疾病狀況或失調(diào)的病理癥狀及臨床和亞臨床癥狀經(jīng)前述組成物治療后的削弱情形。如本領域熟諳技藝者所知悉，劑量和投予途徑可依據(jù)被治療的病患或哺乳類個體的年齡、性別、身體狀況，以及共軛利益和副作用來調(diào)整。據(jù)報告指出，MDSCs于一腫瘤處進行聚集，系可能由多種不同的腫瘤衍生可溶性因子(tumor-derived soluble factors)所觸發(fā)，其影響骨髓形成、骨髓細胞調(diào)動及其活化甚巨(Dolcetti et al.，Cancer Lett. 2008 Aug 28 ；267 (2) :216-25)。全能性或多能性干細胞(如BLSCs)可能干擾MDSCs的活化或遷移或促進MDSCs的分化，以克服MDSCs所調(diào)節(jié)的免疫抑制作用。因此，全能性或多能性干細胞，除了 BLSCs外，亦可被用于治療前述具有MDSCs累積的特征的免疫。該等全能性或多能性干細胞的示例包含由上述BLSCs所衍生的細胞，例如SBR細胞及SBT細胞，該等細胞系通過將該BLSCs分別與維生素A酸(RA，retinoic acid) 及轉(zhuǎn)形生長因子β (TGF-β，transforming growth factor beta)共同培養(yǎng)所衍生。該等全能性或多能性干細胞的示例亦包含胚胎干細胞(ES細胞，embryonic stem cells)、附著的BLSCs (aBLSCs，adherent BLSCs)、過渡的BLSCs (trBLSCs，transitional BLSCs)，以及似上胚葉干細胞(ELSCs，epiblast-like stem cells)，如 W02007/100845 所述。因此，本發(fā)明的范疇為使用該全能性或多能性干細胞以治療前述的免疫不全癥的方法。治療策略系基于來自于成熟或年輕動物的干細胞，例如BLSCs，其擁有許多超越胚胎干細胞(EQ的優(yōu)點。首先，通過提供良好的標記，BLSCs易于從成熟或年輕動物的組織中取得。第二點，可從血液中取得大量的BLSCs(超過h IO8/毫升)。第三點，BLSCs易于被維持及擴增，且可被誘導分化為特定譜系的細胞。第四點，BLSCs —旦注入于一個體體內(nèi)不會發(fā)展為畸胎瘤(teratoma)，因此，亦較ES細胞更為安全。最后同樣重要的是，取得及使用BLSCs不會涉及操作或殺害胚胎，及相關的道德議題。以下具體的實施例僅供示例說明，非用以限制未于本發(fā)明揭示者。無需進一步詳細闡述，相信本領域熟諳技藝者可基于本文的說明，將本發(fā)明發(fā)揮至極限。實施例一 BLSCs的分離用于活化、純化及擴增BLSCs的方法系已揭示于專利申請案，申請?zhí)枮?WCV2007/100845。于本實施例中，BLSCs系自人類血液中以兩種方法純化而得，血漿分段法 (plasma fraction method)及溶血法(hemolysis method)。簡言之，血漿分段法系使用標準方法于第一人類個體取得全血樣本(1毫升)。該樣本接著被儲存于4°C約7-9天，再以專利申請案W0/2007/100845所述的方式從該樣本中使BLSCs增生。該溶血法系以專利申請案W0/2007/100845所述的方式以取得一溶血片段 (hemolysis fraction) 0簡言之，從第二人類個體中取得約1毫升的全血并儲存于約 4°C、含EDTA或其它鈣離子復合劑(Ca2+ complexing agents)的運輸培養(yǎng)基(transport medium)(如=Moraga培養(yǎng)基，其目錄編號MBC-HUB-MED_100- A004，加州洛杉肌Moraga生技公司)中約9天。9天后，以約50毫升的滅菌后溶血溶液(如MBC-ASB-REBG-900A-001) 將全血樣本中的紅血球進行溶解。經(jīng)離心后(如于1800xg，10分鐘)，細胞碎片及溶解后細胞被移除，將細胞沈淀物重新懸浮于Moraga滅菌重組(reconstitution)溶液中 (MBC-ASB-REBG-900A-002)。前述兩種細胞群系使用FITC標記的抗⑶10抗體、PE標記的抗⑶66e抗體、APC標記的抗⑶90抗體，以流式細胞儀進行分析。結果整理于表1中。表 權利要求
1.一種用于治療在一個體中細胞增生異常的方法，其特征在于，該方法包含投予有需要的個體有效量的似胚葉細胞-干細胞。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次IxIO8 至Ix IO11的量。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次切IO8 至5x IOltl的量。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次IxIO9 至Ix IO10的量。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞每兩周投予2至5次。
6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞每兩周投予3次。
7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系自體移殖自該個體。
8.如權利要求1所述的方法，其特征在于，該方法進一步包含于似胚葉細胞-干細胞投予之前或之后，測定該個體內(nèi)的骨髓衍生抑制細胞的數(shù)量。
9.一種用于減少一個體中骨髓衍生抑制細胞數(shù)量的方法，其特征在于，該方法包含將有效量的似胚葉細胞-干細胞投予至有需要的個體。
10.如權利要求9所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次IxIO8 至Ix IO11的量。
11.如權利要求10所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系每次切108至切 IO10的量。
12.如權利要求11所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次IxIO9 至Ix IO10的量。
13.如權利要求12所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞每兩周投予2至5次。
14.如權利要求13所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞每兩周投予3次。
15.如權利要求9所述的方法，其特征在于，似該胚葉細胞-干細胞系自體移殖自該個體。
16.如權利要求9所述的方法，其特征在于，該方法進一步包含于似胚葉細胞-干細胞投予之前或之后，測定該個體內(nèi)的骨髓衍生抑制細胞的數(shù)量。
17.一種用于克服一個體內(nèi)免疫抑制作用的方法，其特征在于，該方法包含投予至有需要的個體有效量的似胚葉細胞-干細胞。
18.如權利要求17所述的方法，其特征在于，該免疫抑制作用系由骨髓衍生抑制細胞所造成的免疫抑制作用。
19.如權利要求17所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次IxIO8 至Ix IO11的量。
20.如權利要求19所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次切IO8 至5x IOltl的量。
21.如權利要求20所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次IxIO9至Ix IO10的量。
22.如權利要求17所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞每兩周投與2至5次。
23.如權利要求22所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞每兩周投與3次。
24.如權利要求17所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞為自體移殖自該個體。
25.如權利要求17所述的方法，其特征在于，該方法進一步包含于似胚葉細胞-干細胞投予之前或之后，測定該個體內(nèi)的骨髓衍生抑制細胞的數(shù)量。
26.一種用于調(diào)節(jié)一個體內(nèi)免疫反應的方法，其特征在于，該方法包含投予至有需要的個體有效量的似胚葉細胞-干細胞。
27.如權利要求沈所述的方法，其特征在于，該個體具有感染或發(fā)炎疾病。
28.如權利要求沈所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次IxIO8 至Ix IO11的量。
29.如權利要求觀所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次切IO8 至5x IOltl的量。
30.如權利要求四所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞系投予每次IxIO9 至Ix IO10的量。
31.如權利要求沈所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞每兩周投予2至5次。
32.如權利要求31所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞每兩周投予3次。
33.如權利要求沈所述的方法，其特征在于，該似胚葉細胞-干細胞為自體移殖自該個體。
34.如權利要求沈所述的方法，其特征在于，該方法進一步包含于似胚葉細胞-干細胞投予之前或之后，測定該個體內(nèi)的骨髓衍生抑制細胞的數(shù)量。
全文摘要
本發(fā)明揭示以似胚葉細胞-干細胞用于治療多種免疫不全癥的方法。
文檔編號A61K35/00GK102325537SQ201080008875
公開日2012年1月18日 申請日期2010年2月19日 優(yōu)先權日2009年2月24日
發(fā)明者張如芬, 王俊麟, 閻云 申請人:干細胞生物科技公司