專利名稱：白屈菜紅堿在制備殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲藥物中的應(yīng)用及防治劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化學(xué)產(chǎn)品用途技術(shù)領(lǐng)域，具體為白屈菜紅堿在制備殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體 外寄生蟲藥物中的應(yīng)用及防治劑。
背景技術(shù)：
白屈菜紅堿是從罌粟科植物白屈菜(Chelidonium majusL.)的帶根全草提取分 離的一種化合物，其結(jié)構(gòu)式為
ο>σ
'O量百分含量為10%-20%，優(yōu)選15%-18%。所述的一種殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲防治劑，其特征在于所述表面活性劑的重 量百分含量為6% -8%。所述的一種殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲防治劑，其特征在于所述溶解劑的重量百 分含量為15%-18%。所述的一種殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲防治劑的制備方法，其特征在于包括以下 步驟
1)按照上述物質(zhì)比例，稱取白屈菜紅堿、表面活性劑、溶解劑、溶劑，備用；
2)將白屈菜紅堿和溶解劑混合攪拌至完全溶解；
3)將表面活性劑、溶劑加入步驟2)所得的混合溶液中攪拌均勻，即得殺滅水產(chǎn)動(dòng) 物體外寄生蟲防治劑。上述白屈菜紅堿在制備殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲藥物中的應(yīng)用，滅殺效果好， 且還具有低毒、低殘留、對(duì)非靶標(biāo)生物毒害較低，對(duì)環(huán)境無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，使用安全可 靠。該防治劑以天然植物提取的白屈菜紅堿為有效成分，制備方法簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低， 使用方法簡(jiǎn)單，直接按l-2mL/m3的劑量潑灑于池塘中即可有效防治或殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體 外寄生蟲，防治或殺滅效果好。本專利申請(qǐng)中涉及的百分含量，除另有說(shuō)明外，其余均為重量百分含量。
具體實(shí)施例方式現(xiàn)結(jié)合本發(fā)明的實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，以使本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)更明顯， 并通過(guò)試驗(yàn)說(shuō)明本發(fā)明的有益效果。實(shí)施例1
稱取白屈菜紅堿5g，在IOg 二甲基亞砜中攪拌溶解，稱取5g表面活性劑吐溫-20， 溶劑乙醇80g，混合攪拌均勻即得防治劑。實(shí)施例2
稱取白屈菜紅堿10g，在20g 二甲基亞砜中攪拌溶解，稱取IOg表面活性劑吐 溫-20，溶劑乙醇60g，混合攪拌均勻即得防治劑。實(shí)施例3
稱取白屈菜紅堿15g，在15g 二甲基亞砜中攪拌溶解，稱取6g表面活性劑吐溫-20， 溶劑乙醇64g，混合攪拌均勻即得防治劑。實(shí)施例4
稱取白屈菜紅堿20g，在12g 二甲基亞砜中攪拌溶解，稱取7g表面活性劑吐溫-20， 溶劑乙醇61g，混合攪拌均勻即得防治劑。實(shí)施例5
稱取白屈菜紅堿25g，在18g 二甲基亞砜中攪拌溶解，稱取8g表面活性劑吐溫-20， 溶劑乙醇49g，混合攪拌均勻即得防治劑。上述實(shí)施例可以列舉很多，再此不一一列舉，只要是按照本發(fā)明的技術(shù)方案的 參數(shù)范圍選擇，即可制備出達(dá)到本發(fā)明所述有益效果的水產(chǎn)動(dòng)物寄生蟲防治劑。上述防 治劑可直接潑灑于池塘中，使用劑量為1 2mL/m3。
以下通過(guò)試驗(yàn)說(shuō)明白屈菜紅堿和上述防治劑對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲的防治和殺 滅效果。試驗(yàn)1:白屈菜紅堿殺滅寄生魚類小瓜蟲的藥效試驗(yàn) 1.材料與方法
1.1試驗(yàn)魚
嚴(yán)重感染小瓜蟲的草魚(8.7 士 0.3cm)來(lái)自浙江省淡水水產(chǎn)研究所苗種基地。試驗(yàn) 魚在水泥池中暫養(yǎng)7 d后，隨機(jī)選取10尾魚，取全鰓鏡檢觀察統(tǒng)計(jì)鰓上小瓜蟲數(shù)量，試驗(yàn) 魚小瓜蟲感染率為100%，每尾魚平均感染小瓜蟲約70個(gè)。白屈菜紅堿用溶解劑二甲基 亞砜溶解。1.2.體外殺蟲試驗(yàn)
體外試驗(yàn)在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板上進(jìn)行，將嚴(yán)重感染小瓜蟲的草魚全鰓放入盛有蒸餾水 的平皿中，待小瓜蟲自鰓中游出后，用吸管將成熟小瓜蟲收集放入另一平皿中備用。于 每個(gè)細(xì)胞孔中加入約2ml不同濃度的藥液(0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8和0.9 mL/ m3)和20個(gè)小瓜蟲成蟲，每小時(shí)鏡檢觀察一次，4h后統(tǒng)計(jì)各孔的小瓜蟲死亡率。試驗(yàn) 設(shè)置DMSO對(duì)照組和充分暴氣自然水對(duì)照組，每組試驗(yàn)重復(fù)三次。小瓜蟲死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)蟲體纖毛不運(yùn)動(dòng)，胞質(zhì)不流動(dòng)，胞膜破裂，細(xì)胞核破 碎。1.3體內(nèi)殺蟲試驗(yàn)
根據(jù)體外殺蟲試驗(yàn)設(shè)置白屈菜紅堿的殺蟲試驗(yàn)濃度為0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7， 0.8和0.9mL/m3。于體積為80cmX60cmX40cm的玻璃缸內(nèi)盛入充分曝氣的自然水，pH 7.0 7.5，水溫25士 1°C。按照設(shè)定好的濃度向水體中加入不同濃度的白屈菜紅堿，并 攪拌均勻。每個(gè)玻璃缸投放感染有小瓜蟲的草魚10尾，用藥48h后取草魚全鰓制片、鏡 檢，統(tǒng)計(jì)每尾草魚在鰓部小瓜蟲存活數(shù)量，計(jì)算平均殺蟲率，試驗(yàn)重復(fù)2次，并同時(shí)進(jìn) 行DMSO對(duì)照試驗(yàn)。殺蟲率(％)=(對(duì)照組的小瓜蟲平均存活數(shù)量一試驗(yàn)組的小瓜蟲平均存活數(shù)量)/ 對(duì)照組的小瓜蟲平均存活數(shù)量X100 %
魚平均死亡率(％)=(投放的魚數(shù)量-鏡檢時(shí)的魚存活數(shù)量)/投放的魚數(shù)量X100% 小瓜蟲死亡的判斷標(biāo)準(zhǔn)為蟲體纖毛不運(yùn)動(dòng)，胞質(zhì)不流動(dòng)，胞膜破裂，細(xì)胞核破碎。1.4數(shù)據(jù)處理
試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理,所有參數(shù)均用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(Z 士SD)表不。2.試驗(yàn)結(jié)果
2.1白屈菜紅堿的體外殺小瓜蟲試驗(yàn)
試驗(yàn)結(jié)果表明白屈菜紅堿對(duì)小瓜蟲具有較強(qiáng)的殺滅作用，隨著濃度的增加其殺滅 作用逐漸增強(qiáng)，其濃度為0.9mL/m3時(shí)，對(duì)小瓜蟲的殺滅率為100%，其4h的LC5tl和LC9tl 分別為 0.437，0.853 mL/m3。體外殺蟲試驗(yàn)結(jié)果還顯示白屈菜紅堿對(duì)小瓜蟲的結(jié)構(gòu)具有極大的破壞作用。 經(jīng)4h作用后，小瓜蟲的細(xì)胞膜完全破壞，胞質(zhì)外流，細(xì)胞核不可見(jiàn)，纖毛停止運(yùn)動(dòng)。而
5對(duì)照組小瓜蟲結(jié)構(gòu)完好，纖毛運(yùn)動(dòng)自由，大核清晰可見(jiàn)，這可能是白屈菜紅堿殺蟲的主 要作用機(jī)理。2.2白屈菜紅堿的體內(nèi)殺蟲試驗(yàn)
試驗(yàn)結(jié)果表明白屈菜紅堿對(duì)小瓜蟲具有較強(qiáng)的殺滅作用，其濃度為0.2，0.3， 0.4，0.5，0.6，0.7，0.8禾Π 0.9 mL/m3時(shí)，對(duì)寄生草魚上的小瓜蟲的殺蟲率分別為 16.1%, 17.3%, 32.9%, 53.9%, 75.3%, 82.3%, 89.4% 禾Π 96.8%。0.2，0.3，0.4 mL/m3 濃度組的草魚死亡率為20%，0.6 mL/m3濃度組的草魚死亡率為10%，而對(duì)照組的草魚死 亡率為40%，其余試驗(yàn)組死亡率為0，結(jié)果表明白屈菜紅堿對(duì)感染有小瓜蟲的試驗(yàn)魚具有 較強(qiáng)的保護(hù)作用。試驗(yàn)2:白屈菜紅堿殺滅寄生魚類指環(huán)蟲的藥效試驗(yàn) 1.1試驗(yàn)魚
嚴(yán)重感染指環(huán)蟲的金魚(5.7 士 0.2cm)購(gòu)自常州寨橋。并按照1: 5左右的比例與 未感染寄生蟲的金魚混養(yǎng)感染，感染15-20天后，隨機(jī)選取10尾魚，取全鰓鏡檢觀察統(tǒng) 計(jì)鰓上指環(huán)蟲數(shù)量，試驗(yàn)魚指環(huán)蟲感染率為100%，每尾魚平均感染指環(huán)蟲約50個(gè)。白 屈菜紅堿用溶解劑二甲基亞砜溶解。1.2藥物殺蟲活性測(cè)定
殺蟲活性測(cè)定方法，按照王高學(xué)等和Miguel Rubio-Godoy等方法進(jìn)行藥效試驗(yàn) 時(shí)，向一定體積的玻璃缸內(nèi)盛入充分曝氣的地下水，pH 7.0 7.5，水溫25士 1°C。按照 設(shè)定好的濃度向水體中加入前述制備的各樣品，并攪拌均勻。每個(gè)玻璃缸投放感染有指 環(huán)蟲的金魚20尾，于48 h時(shí)取金魚全鰓制片、鏡檢，統(tǒng)計(jì)每尾金魚在鰓部指環(huán)蟲存活數(shù) 量，計(jì)算平均殺蟲率，并同時(shí)進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)。殺蟲率(％)=(對(duì)照組的指環(huán)蟲平均存活數(shù)量一試驗(yàn)組的指環(huán)蟲平均存活數(shù)量)/ 對(duì)照組的指環(huán)蟲平均存活數(shù)量X100 %
魚平均死亡率(％)=(投放的魚數(shù)量-鏡檢時(shí)的魚存活數(shù)量)/投放的魚數(shù)量X100% 樣品最高有效濃度，即最高殺蟲率所對(duì)應(yīng)的溶劑提取物濃度。2.試驗(yàn)結(jié)果表明白屈菜紅堿對(duì)指環(huán)蟲具有較強(qiáng)的殺滅作用，其濃度為0.2， 0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8禾Π 0.9 mL/m3時(shí)，對(duì)寄生草魚上的指環(huán)蟲的殺蟲率分別為 15.3%, 16.7%, 35.4%, 57.9%, 77.5%, 86.2%, 90.6% 禾Π 100%。 0.2，0.3，0.4 mL/m3 濃度組的草魚死亡率為20%，0.5 mL/m3濃度組的草魚死亡率為10%，而對(duì)照組的草魚死 亡率為30%，其余試驗(yàn)組死亡率為0，結(jié)果表明白屈菜紅堿對(duì)感染有指環(huán)蟲的試驗(yàn)魚具有 較強(qiáng)的保護(hù)作用。試驗(yàn)3:白屈菜紅堿殺滅寄生魚類車輪蟲的藥效試驗(yàn) 1.材料與方法
1.1試驗(yàn)魚
嚴(yán)重感染車輪蟲的金魚(8.7 士 0.3cm)來(lái)自浙江省淡水水產(chǎn)研究所苗種基地。試驗(yàn) 魚在水泥池中暫養(yǎng)7 d后，隨機(jī)選取10尾魚，取全鰓鏡檢觀察統(tǒng)計(jì)鰓上車輪蟲數(shù)量，試驗(yàn) 魚車輪蟲感染率為100%，每尾魚平均感染車輪蟲約70個(gè)。白屈菜紅堿用溶解劑二甲基 亞砜溶解。1.2殺蟲藥效試驗(yàn)
6根據(jù)預(yù)試驗(yàn)設(shè)置白屈菜紅堿的殺蟲試驗(yàn)濃度為0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8禾口 0.9mL/m3。于體積為80cmX60cmX40cm的玻璃缸內(nèi)盛入充分曝氣的自然水，pH 7.0
7.5，水溫25士 1°C。按照設(shè)定好的濃度向水體中加入不同濃度的白屈菜紅堿，并攪拌均 勻。每個(gè)玻璃缸投放感染有車輪蟲的金魚10尾，用藥48 h后取金魚全鰓制片、鏡檢， 統(tǒng)計(jì)每尾金魚在鰓部車輪蟲存活數(shù)量，計(jì)算平均殺蟲率，試驗(yàn)重復(fù)2次，并同時(shí)進(jìn)行 DMSO對(duì)照試驗(yàn)。殺蟲率(％)=(對(duì)照組的車輪蟲平均存活數(shù)量一試驗(yàn)組的車輪蟲平均存活數(shù)量)/ 對(duì)照組的車輪蟲平均存活數(shù)量X100 %
魚平均死亡率(％)=(投放的魚數(shù)量-鏡檢時(shí)的魚存活數(shù)量)/投放的魚數(shù)量X100% 車輪蟲死亡的判斷標(biāo)準(zhǔn)為蟲體纖毛不運(yùn)動(dòng)，胞質(zhì)不流動(dòng)，胞膜破裂，細(xì)胞核破碎。2.試驗(yàn)結(jié)果表明白屈菜紅堿對(duì)車輪蟲具有較強(qiáng)的殺滅作用，其濃度為0.2， 0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，禾Π 0.8 mL/m3時(shí)，對(duì)寄生草魚上的車輪蟲的殺蟲率分別為 24.8%, 37.7%, 52.9%, 66.4%, 85.6%, 95.4%, 97.4% 禾口 100%。 0.2，0.3，0.4 mL/m3 濃度組的草魚死亡率為20%，而對(duì)照組的草魚死亡率為40%，其余試驗(yàn)組死亡率為0，結(jié) 果表明白屈菜紅堿對(duì)感染有車輪蟲的試驗(yàn)魚具有較強(qiáng)的保護(hù)作用。上述試驗(yàn)1-3表明白屈菜紅堿對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲的防治和殺滅效果明 顯。以白屈菜紅堿作為有效成分，加入助劑后即制成上述所述的防治劑。試驗(yàn)4:上述防治劑對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲的防治和殺滅效果試驗(yàn)，見(jiàn)表1-3。
表1 實(shí)施例1-5對(duì)小瓜蟲的防治效果表
權(quán)利要求
1.白屈菜紅堿在制備殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲藥物中的應(yīng)用。
2.如權(quán)利要求1所述的白屈菜紅堿在制備殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外小瓜蟲、指環(huán)蟲、車輪蟲 藥物中的應(yīng)用。
3.如權(quán)利要求1所述白屈菜紅堿制備的一種殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲防治劑，其特征 在于由重量百分含量的以下物質(zhì)組成白屈菜紅堿5%-25%，表面活性劑5%-10%，溶 解劑10%-20%，余量為溶劑；所述的表面活性劑為吐溫-20，所述的溶解劑為二甲基亞 砜，所述的溶劑為無(wú)水乙醇。
4.如權(quán)利要去3所述的一種殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲防治劑，其特征在于所述白屈菜 紅堿的重量百分含量為10% -20%,優(yōu)選15% -18%。
5.如權(quán)利要去3所述的一種殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲防治劑，其特征在于所述表面活 性劑的重量百分含量為6% -8%。
6.如權(quán)利要去3所述的一種殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲防治劑，其特征在于所述溶解劑 的重量百分含量為15%-18%。
7.如權(quán)利要去3所述的一種殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲防治劑的制備方法，其特征在于 包括以下步驟1)按照上述物質(zhì)比例，稱取白屈菜紅堿、表面活性劑、溶解劑、溶劑，備用；2)將白屈菜紅堿和溶解劑混合攪拌至完全溶解；3)將表面活性劑、溶劑加入步驟2)所得的混合溶液中攪拌均勻，即得殺滅水產(chǎn)動(dòng) 物體外寄生蟲防治劑。
全文摘要
白屈菜紅堿在制備殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲藥物中的應(yīng)用及防治劑屬于化學(xué)產(chǎn)品用途技術(shù)領(lǐng)域。其特征在于由重量百分含量的以下物質(zhì)組成白屈菜紅堿5％-25％，表面活性劑5％-10％，溶解劑10%-20％，余量為溶劑；所述的表面活性劑為吐溫-20，所述的溶解劑為二甲基亞砜，所述的溶劑為無(wú)水乙醇。白屈菜紅堿對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲的滅殺效果好，且還具有低毒、低殘留、對(duì)非靶標(biāo)生物毒害較低，對(duì)環(huán)境無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，使用安全可靠。該防治劑以天然植物提取的白屈菜紅堿為有效成分，制備方法簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，使用方法簡(jiǎn)單，直接按1-2mL/m3 的劑量潑灑于池塘中即可有效防治或殺滅水產(chǎn)動(dòng)物體外寄生蟲，防治或殺滅效果好。
文檔編號(hào)A61P33/14GK102018711SQ20101056514
公開日2011年4月20日 申請(qǐng)日期2010年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月30日
發(fā)明者姚嘉赟, 尹文林, 徐洋, 沈錦玉, 潘曉藝, 郝貴杰 申請(qǐng)人:浙江省淡水水產(chǎn)研究所