專利名稱：含1，2，4-噁二唑雜環(huán)α，β-不飽和酮類化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及有機(jī)化合物及醫(yī)藥應(yīng)用領(lǐng)域，尤其涉及含1，2，4_噁二唑雜環(huán)a， 3-不飽和酮類化合物及其抗腫瘤活性。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤是當(dāng)今世界上威脅人類健康的主要疾病之一，隨著腫瘤生物學(xué)的發(fā)展， 為抗腫瘤藥物的研究開發(fā)提供了新的分子生物學(xué)基礎(chǔ)。大多數(shù)腫瘤細(xì)胞高表達(dá)谷胱甘肽 轉(zhuǎn)移酶(glutathione S-transferases，GSTs)，GSTs是廣泛存在于真核生物中的多功能 蛋白超家族，通常被分為細(xì)胞溶質(zhì)家族、線粒體家族和膜結(jié)合微粒體家族，參見HayeS， J. D. ；Flanagan, J. U. ；Jowsey, I. R. Glutathione transferases. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2005，45，51-88。哺乳動物細(xì)胞溶質(zhì)GSTs可分為七個亞型:Alpha( a )、Mu( y )、 Pi ()、Sigma ( o )、Omega ( )、Theta ( 9 )和Zeta (I)。在許多耐藥的腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)三 種高表達(dá)的GSTs( a、i^n)，其中，谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶Pi (GST Pl_l)是與腫瘤最密切相關(guān)的 同工酶，在人結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、子宮頸癌、乳腺癌以及淋巴瘤和黑素瘤中都發(fā)現(xiàn)了高表 達(dá)的 GST P1-1。作為II相代謝酶，GST P1-1的基本功能是保護(hù)細(xì)胞大分子免受活性親電底物的 進(jìn)攻，尤其是催化還原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)與多種內(nèi)源性和外源性親電化合 物(包括多種化療藥物)結(jié)合形成復(fù)合物，這些復(fù)合物活性小、水溶性大、易于被III相 代謝酶代謝失活，參見Shen, H. ；Kauvar, L. ；Tew, K. D. Importance of glutathione and associated enzymes in drugresponse. Oncol. Res. 1997,9, 295-302。當(dāng) GSTP1-1 表達(dá)增 加或活性增強(qiáng)時，抗腫瘤藥物的排泄也隨之增加，從而誘發(fā)耐藥性的發(fā)生，cAMP-依賴的蛋 白激酶(PKA)和蛋白激酶C(PKC)分別以GSH-依賴和不依賴的方式磷酸化GST P1-1，增強(qiáng) 其代謝活性，加劇GST P1-1誘導(dǎo)的耐藥性?；钚匝踉诩?xì)胞增值、凋亡中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。GST P1-1通過消耗細(xì)胞內(nèi)活 性氧，使細(xì)胞免于活性氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，參見a) Zhou, L. Jing, Y. ；Styblo, M. ；Chen, Z. ；ffaxman, S.Glutathione-S-transferase pi inhibits As203_induced apoptosis in lymphoma cells :involvement of hydrogen peroxide catabolism. Blood2005,105, 1198-1203。b)Yin, Z. ； Ivanov, V.N. ；Habelhah, H. ；Tew, K. ；Ronai, Z. Glutathione S-transferase p elicits protection against H202-induced cell death via coordinated regulation of stress kinases. Cancer Res. 2000,60,4053-4057。近期石if 究表明，GST Pl-1是內(nèi)源性的c-Jun氮末端激酶(JNK，c-junN-terminal kinase)抑制劑， 通過蛋白-蛋白相互作用與JNK結(jié)合，使細(xì)胞免于應(yīng)激性凋亡。JNK是有絲分裂原活化蛋 白激酶(MAPK，mitogen-activated protein kinase)家族的一員，其在細(xì)胞的存活和凋亡 通路中起著關(guān)鍵作用，參見a)Wang，T. ；Arifoglu, P. ；Ronai, Z. ；Tew, K. D. Glutathione S-transferase Pl-1(GSTP 1-1)inhibits c-Jun N-terminal kinase(JNK 1)signaling through interaction with the C terminus. J. Biol. Chem. 2001,276, 20999-21003。b)Zhao, G. ；Wang, X. Advance in antitumor agents targeting glutathione S-transferase. Curr. Med. Chem. 2006，13，1461-1471。GST Pl-I 一方面作為II相代謝酶，另一方面作為細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路的內(nèi)源性調(diào) 節(jié)因子，與凋亡通路中重要的激酶及相關(guān)因子相互作用抑制其激活，從而阻斷細(xì)胞凋亡通 路。依他尼酸(Ethacrynic acid，簡寫EA，式I)是被發(fā)現(xiàn)的第一個GSTs抑制劑，用EA 處理細(xì)胞能夠引起細(xì)胞溶質(zhì)及線粒體內(nèi)的GSH完全耗竭、誘導(dǎo)活性氧自由基 產(chǎn)生和線粒體的融合、促進(jìn)與MAPK通路激活相關(guān)的腫瘤細(xì)胞凋亡(參見BoWes，T.J.； Gupta, R. S. Induction of mitochondrial fusion by cysteine-alkylators ethacrynic acid and N-ethylmaleimide. J. Cell Physiol. 2005，202，796-804。但 EA 的利尿、耳 毒性等毒副作用，限制了其臨床應(yīng)用。以依他尼酸為先導(dǎo)化合物，保留化合物中α， β-不飽和酮基團(tuán)，對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，以生物電子等排體1，2，4_噁二唑環(huán)替代化合物 結(jié)構(gòu)中的羧酸基，所得化合物對GST Pl-I抑制活性以及對人急性早幼粒白血病細(xì)胞株 (HL-60)生長抑制作用均有不同程度的提高，參見:a)Yang, X. ；Liu, G. ；Li, H. ；Zhang, Y. ；Song, D. ；Li, C. ；Wang, R. ；Liu, B. ；Liang, W. ；Jing, Y. ；Zhao, G. ；Novel oxadiazole analogues derived from ethacrynic acid :design,synthesis,and structure-activity relationships in inhibiting the activity of glutathione S-transferase Pl-Iand cancer cell proliferation. J. Med. Chem. 2010，53，1015-1022 ；b) CN101108832 中國專利 200710015199.5 “五元雜環(huán)化合物、制備方法及應(yīng)用”。通過進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)改造，可獲得新 的抗腫瘤候選藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的任務(wù)在于提供一種含1，2，4_噁二唑雜環(huán)的α，β -不飽和酮類化合物； 本發(fā)明的另一任務(wù)在于提供該化合物的制備及應(yīng)用。發(fā)明綜述依他尼酸(EA)為α，β -不飽和酮類化合物，是有效的GST Pl_l抑制劑，在高濃度 具有抑制腫瘤細(xì)胞生長活性，參見Aizawa，S. ；0okawa,K. ；Kudo, Τ. ；Asano, J. ；Hayakari, Μ. ；Tsuchida, S.Characterization of cell death induced by ethacrynic acid in a human colon cancer cell line DLD-Iand suppression by N-acetyl-L-cysteine. Cancer Sci. 2003，94，886-893.。以EA為先導(dǎo)物，對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，保留結(jié)構(gòu)中α，β -不飽和酮 基團(tuán)，設(shè)計(jì)合成的五元雜環(huán)類化合物，對HL-60細(xì)胞的生長抑制作用有所提高(參見本申請 人在先中國專利CN101108832“五元雜環(huán)化合物、制備方法及應(yīng)用”)。為進(jìn)一步提高化合物 的抗腫瘤活性，本發(fā)明設(shè)計(jì)合成了結(jié)構(gòu)不同于現(xiàn)有技術(shù)的含1，2，4_噁二唑雜環(huán)α，β-不 飽和酮類化合物(式5)，其創(chuàng)新點(diǎn)是在噁二唑雜環(huán)上引入不同取代基，活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明， 本發(fā)明的大部分化合物對HL-60細(xì)胞的生長抑制作用又提高了 10倍以上。
發(fā)明詳述一、含1，2，4_噁二唑α，β -不飽和酮類化合物本發(fā)明的含1，2，4_噁二唑α，β -不飽和酮類化合物，具有通式5的結(jié)構(gòu) 其中，R1為氫、甲基或氯；R2為甲基、氯或溴；R3為甲基或乙基；R4為對-三氟甲基、 對-硝基或鄰-甲基；R5為氫或甲基。其中，優(yōu)選的化合物是下列之一5-[2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3_(4_三氟甲基苯 基)-1，2，4_ 噁二唑(5a)、5-[3_氯-4_(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3-(4_三氟甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5b)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]_3-(2_甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5d)、 5- [2，3- 二甲基-4- (2-亞甲基氧-丁基)苯氧亞甲基]_3_ (2_甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5e)、5-[2，3_ 二氯-4_(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3_(2-甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5f)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]-3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5g)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5i)或5-[2，3-二氯-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑(5j)。上述優(yōu)選的8個化合物名稱后的括號中為其對應(yīng)的代號，為了敘述方便，所述括 號中的代號在本說明書以下內(nèi)容中將被直接使用。上述優(yōu)選化合物中，5f、5j是R1及R2均為氯，R3為乙基，R4為2_甲基或4_硝基， R5為氫的化合物。上述優(yōu)選化合物中，5a、5d、5e、5g、5i是R1及R2均為甲基，R3為甲基或乙基，R4為 4-三氟甲基，2-甲基或4-硝基，R5為氫的化合物。上述優(yōu)選化合物中，5b是R1為氫，R2為氯，R3為乙基，R4為4_三氟甲基，R5為氫的 化合物。二、合成路線上述通式5的含1，2，4-噁二唑α，β -不飽和酮類化合物，合成路線如下 上式中，試劑與反應(yīng)條件i.鹽酸羥胺，無水碳酸鉀，甲醇；ii. SOCl2,甲苯， 50-60°C, 5. 5h ；iii.吡啶，-2 0°C ；rt, Ih ；90°C，2. 5h。三、制備方法本發(fā)明通式5的含1，2，4-噁二唑α，β -不飽和酮類化合物的制備方法，步驟如 下1)取代胺肟(2)的制備將鹽酸羥胺加入到無水甲醇中，每一毫摩爾的鹽酸羥胺加0. SmL的無水甲醇，再 加入無水碳酸鉀，室溫反應(yīng)至無氣泡生成時，加入取代苯甲腈(1)。鹽酸羥胺、無水碳酸鉀、 取代苯甲腈的摩爾比為5 5 1?；亓鞣磻?yīng)4-7h，趁熱過濾，濾餅用無水甲醇洗滌，合并 洗液和濾液，減壓蒸除溶劑，柱層析分離得取代胺肟(2)，洗脫體系為石油醚/丙酮3 1體 積比。2)2-[2，3_ 二取代-4-(2_亞甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的制備將2-[2，3_ 二取代-4-(2_亞甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)加入到無水 甲苯中，每一毫摩爾的2-[2，3_二取代-4-(2-亞甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)用 5mL無水甲苯溶解，向反應(yīng)器中加入二氯亞砜，2-[2，3- 二取代-4- (2-亞甲基-1-氧代-烷 基)苯氧基]羧酸(3)與氯化亞砜的摩爾比為1 5，室溫?cái)嚢鐸h后升溫至50-60°C，反應(yīng) 5. 5h，除去過量的二氯亞砜，冷卻，得中間體化合物2-[2，3_ 二取代-4-(2-亞甲基-1-氧 代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的甲苯溶液，直接用于下一步反應(yīng)。3)通式5的化合物5-[2，3_ 二取代-4-(2_亞甲基-1-氧-烷基)苯氧亞烷 基]-3-取代-1，2，4-噁二唑的制備將步驟1)制得的取代胺肟溶于吡啶中，將反應(yīng)器置于冰浴中，在此條件下，將步 驟2)制得的2-[2，3_ 二取代-4-(2-亞甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯⑷的甲苯溶 液緩慢滴于胺肟的吡啶溶液中，2-[2，3- 二取代-4-(2-亞甲基-1-氧代-烷基)苯氧基] 酰氯(4)與取代胺肟的摩爾比為1 2，滴畢室溫?cái)嚢鐸h后，緩慢升溫至90°C，反應(yīng)2. 5h， 冷卻，減壓蒸除溶劑，柱層析純化，洗脫體系為石油醚/丙酮10 1體積比。優(yōu)選的，步驟1)中所述的取代苯甲腈為4-三氟甲基苯甲腈、2-甲基苯甲腈或 4-硝基苯甲腈。優(yōu)選的，步驟2)中2-[2，3_ 二取代-4-(2_亞甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧 酸(3)為2-[2，3_ 二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧基]丙酸，結(jié)構(gòu)式如下 優(yōu)選的，步驟3)中所述的向反應(yīng)器中滴加2-[2，3_ 二取代-4-(2_亞甲基-1-氧 代-烷基)苯氧基]酰氯⑷的甲苯溶液時的溫度為_2 0°C。四、應(yīng)用本發(fā)明的含1，2，4_噁二唑α，β -不飽和酮類化合物對人急性早幼粒白血病細(xì)胞 株(HL-60)生長抑制活性顯著提高，用于制備抗白血病藥物。與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明的優(yōu)良效果本發(fā)明設(shè)計(jì)合成了結(jié)構(gòu)不同的含1，2，4_噁二唑雜環(huán)α，β-不飽和酮類化合 物，其創(chuàng)新點(diǎn)是在噁二唑雜環(huán)上引入不同取代基，活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的含1，2，
4-噁二唑α，β-不飽和酮類化合物對HL-60細(xì)胞的生長抑制活性顯著增強(qiáng)，本發(fā)明 的大部分化合物對HL-60細(xì)胞的生長抑制作用又提高了 10倍以上，對HL-60細(xì)胞的半 數(shù)生長抑制濃度IC5tl彡2.0μΜ(化合物5c，5h，5k除外)。其中，化合物5_[2，3_ 二甲 基-4- (2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3- (4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5a)、
5-[3-氯-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3- (4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二 唑(5b)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]-3-(2-甲基苯基)-1， 2，4_噁二唑(5d)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3-(2_甲 基苯基)-1，2，4_噁二唑(5e)、5-[2，3-二氯-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲 基]-3-(2-甲基苯基)-l，2，4-噁二唑(5f)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙 基)苯氧亞甲基]-3_(4-硝基苯基)-1，2，4_噁二唑(5g)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亞 甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4_噁二唑(5i)、5-[2，3-二 氯-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5j)對 HL-60細(xì)胞的半數(shù)生長抑制濃度(IC5tl)分別為1. 5μΜ、2. 0μΜ、2. 0μΜ、2. 0μΜ、1. 6μΜ、 1.5 μ Μ、1.7 μ M和1. 3 μ Μ，半數(shù)抑制濃度≤2.0 μ Μ，對HL-60細(xì)胞生長抑制活性提高了 10 倍以上。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，以利更深入理解本發(fā)明及其優(yōu)點(diǎn)和效果，但 所述實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不是限制本發(fā)明。實(shí)施例1.1)取代苯甲酰胺肟化合物(2)的制備將鹽酸羥胺3. 48g (50mmol)，無水碳酸鉀6. 90g (50mmol)置于IOOmL圓底燒瓶中， 加入無水甲醇40mL，室溫反應(yīng)至無氣泡生成時，加入對取代苯甲腈(5c) 1.71g (IOmmol)。緩 慢升溫至65°C，反應(yīng)4-7h，趁熱過濾，濾餅用無水甲醇洗滌，合并洗液和濾液，旋蒸除去溶 劑，干燥，柱層析分離即得中間體取代苯甲酰胺肟，洗脫系統(tǒng)為石油醚/丙酮3 1體積比。取代苯甲腈分別選用4-三氟甲基苯甲腈、2-甲基苯甲腈或4-硝基苯甲腈，分別得 到以下取代苯甲酰胺肟化合物(2)
2a :4_三氟甲基苯甲酰胺肟，白色固體，收率86. 0 %，mp 94. 7 95. 3 °C。 1H-WR(DMSO-Cl6) δ :9. 92(s，lH，= NOH)，7. 89 (d，2H，J = 7. 80Hz, Ar_H)，7. 74 (d，2H，J =
8.40Hz, Ar-H)，5. 98 (s, 2H, NH2).2b :2-甲基苯甲酰胺肟，白色固體，收率 86%，mp :127 130°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ 9. 30 (s, 1Η, = NOH) ,7. 27 (m, 2Η, Ar-H)，7· 19 (m，2Η，Ar-H)，5· 71 (s，2Η，NH2)，2· 35 (s，3Η， CH3)。2c 4-硝基苯甲酰胺肟，黃色固體，收率52. 3 %, mp 116 118 °C。 1H-WR(DMSO-Cl6) δ :10· 13(s, 1H, = NOH), 8. 23(d，2H，J = 9. OOHz, Ar-H), 7. 94(d，2H，J =
9.OOHz，Ar-H)，6· 07 (s，2H，NH2)。2)2-[2，3_ 二取代-4_(2-亞甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的制備將2_[2，3-二取代-4-(2-亞甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)2mmol置 于IOOmL的圓底燒瓶中，加入無水甲苯10mL，氯化亞砜0. 74mL (IOmmol)，室溫?cái)嚢鐸h后升 溫至50-60°C，反應(yīng)5. 5h，用吸收裝置除去過量的二氯亞砜，冷卻，得中間體2-[2，3-二取 代-4-(2-亞甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的甲苯溶液，直接用于下一步反應(yīng)。2-[2，3_ 二取代-4-(2_亞甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)分別選用 [2，3_ 二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧基]乙酸；[2，3_ 二甲基-4-(2-亞甲 基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酸；2-[2，3_ 二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧基] 丙酸；[3-氯-4- (2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧基]乙酸；[3-氯-4- (2-亞甲基-1-氧-丁 基)苯氧基]乙酸；[2，3-二氯-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酸，分別得到以 下化合物4 4a [2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧基]乙酰氯；4b [2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酰氯；4c :2-[2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧基]丙酰氯；4d [3-氯-4- (2-亞甲基氧-丙基)苯氧基]乙酰氯；4e [3-氯_4_ (2-亞甲基氧-丁基)苯氧基]乙酰氯；4f [2，3-二氯-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酰氯。3)目標(biāo)化合物5-[2，3-二取代-4-(2-亞甲基-1-氧-烷基)苯氧亞烷基]-3-取 代-1，2，4-噁二唑(5)的制備將步驟1)的產(chǎn)物取代苯甲酰胺肟⑵(4mmol)置于50mL圓底燒瓶中，加入吡啶 4mL溶解，將反應(yīng)器置于冰浴中，此溫度下將步驟2)的產(chǎn)物2-[2，3_ 二取代-4-(2-亞甲 基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(2mmol)的甲苯溶液緩慢滴入反應(yīng)器中，滴畢，室溫?cái)嚢?Ih后，緩慢升溫至90°C，反應(yīng)2. 5h，冷卻，減壓蒸除溶劑，用柱層析純化(石油醚丙酮= 10 1體積比)，得目標(biāo)產(chǎn)物(5)。取代苯甲酰胺肟2a、2b、2c與2-[2，3_ 二取代-4-(2_亞甲基-1-氧代-烷基)苯 氧基]酰氯4a、4b、4C、4d、4e、4f的不同組合，分別得到以下化合物5 5a :5_[2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3_ (4_三氟甲基 苯基)-1，2，4-噁二唑，白色固體，收率 67. 4%，mp:88 91°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 8. 25 (d, J = 8. 40Hz,2H, Ar-H)，7. 97 (d, J = 8. 40Hz,2H, Ar-H)，7. 08 (d, J = 9. OOHz，1H, Ar-H)，7. 03 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H)，5. 95 (s, 1H, = CH)，5. 48 (s, 1H, = CH)，5. 68 (s,2H, OCH2)，3. 38 (q, 2H, J = 7. 20Hz, CH3CH2) ,2. 21 (s,3H, Ar-CH3)，2. 13 (s,3H, Ar-CH3)，
1.06 (t, J = 7. 20Hz，3H，CH3). IR(KBr, cnT1) υ CH :2974· 20,2925. 48 ； uc = 0 1643. 46 ； υ c =c :1623. 87，1591. 52，1579. 01 ； δ CH :1329. 78，u c_。 1268. 26，y = CH2 :1115. 14，1068. 24， 852. 26,759. 60. HRMS (ESI)m/z fOrC23H22F3N2O3[M+H]+ :calculated 431. 1577found 431. 1592.5b :5-[3_氯-4_(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3_(4_三氟甲基苯基)_1， 2，4_ 噁二唑，白色固體，收率 36. 6%，mp :56 58°C。1H-WR(CDCl3-Cl3) δ (ppm) 8. 24(d, J = 8. 40Hz,2H, Ar-H)，7. 77 (d, J = 8. 40Hz,2H, Ar-H)，7. 28 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H)， 7. 10 (d, J = 2. 40Hz, lH，Ar_H)，6· 97(dd, J1 = 8. 40Hz, J2 = 2. 40Hz, lH，Ar_H)，5· 93 (s, 1Η, =CH), 5. 60 (s，1Η, = CH), 5. 40 (s，2Η，OCH2)，2· 47(q，2H，J = 7. 20Hz, CH3CH2)，1. 14 (t，J = 7. 20Ηζ，3Η，CH3). IR(KBr, cnT1) υ = CH :3090· 22 ； υ CH :2975· 40,2940. 18,2878. 45 ; u c = 0 : 1650. 76 ； uc = c :1599. 99 ； δ CH :1323. 28，υ c_0 :1228. 39，γ =CH2 :1136. 84，1064. 43,850. 85， 716. 77. HRMS (ESI)m/z forC21H17ClF3N203[M+H]+:calculated 437.0874 found 437. 0892.5c:5-[2，3-二甲基-4_(2_亞甲基氧-丙基)苯氧亞乙基]_3_(4_三 氟甲基苯基)-1，2，4_噁二唑，收率15.3%，低溫下為白色固體，室溫下無色油狀液體。 1H-WR(CDCl3-Cl3) δ (ppm) 8. 21 (d, J = 7. 80Hz,2H, Ar-H)，7. 75 (d, J = 7. 80Hz,2H, Ar-H)， 7. 01 (d，J = 8. 40Hz, lH，Ar_H)，6· 75 (d, J = 8. 40Hz, lH，Ar_H)，5· 91 (s, 1Η, = CH), 5. 66 (q, J = 6. 60Hz, 1H，CH)，5· 54 (s，1Η, = CH), 2. 25 (s, 3Η, Ar-CH3), 2. 18 (d, J = 7. 20Hz，3H，CH3)，
2.02(s,3H, Ar-CH3), 1. 9 l(s,3H, CH3). HRMS (ESI) m/z for C23H22F3N2O3 [M+H]+: calculated 431. 1593 found431. 1577.5d :5-[2，3_ 二甲基-4_(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]_3_(2-甲基苯 基)-l，2，4-噁二唑，白色固體，收率 48. 7%，mp :75 76°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 7. 93 (d, J = 7. 80Hz, 1H, Ar-H)，7. 49 (t, J1 = 7. 20Hz, J2 = 7. 80Hz, 1H, Ar-H)，7. 40 (m, 2H, Ar-H), 7. 11 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H), 7. 04 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H), 6. 03 (s, 1H, = CH)， 5. 47 (s，1H, = CH)，5. 66 (s, 2H, OCH2)，2. 55 (s, 3H, Ar-CH3)，2. 20 (s, 3H, Ar-CH3)，2. 12 (s, 3H, Ar-CH3), 1. 95(s,3H, CH3). IR (KBr, cnT1) υ CH 2976. 18, 2958. 90, 2924. 36, 2866. 66 ； uc = O ； 1645. 79 ； Uc = c :1627. 10，1603. 54，1590. 13，1577. 87 ； δ CH :1484· 66，1451. 87，1353. 40 ； υ c_。:1274. 73，1263. 90 ； γ = CH2 :1119. 65，1097. 87,937. 07,794. 75,784. 05,743. 95. HRMS (ESI)m/z for C22H23N2O3[M+H] + calculated 363.1703 found 363. 1719.5e :5-[2，3_ 二甲基-4_(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3_(2_甲基苯 基)-1，2，4-噁二唑，白色固體，收率 74. 2%，mp :54 57°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 7. 93 (d, J = 7. 20Hz, 1H, Ar-H)，7. 49 (t, J1 = 7. 20Hz, J2 = 7. 80Hz, 1H, Ar-H)，7. 41 (m, 2H, Ar-H), 7. 09 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H), 7. 04 (d, J = 7. 80Hz, 1H, Ar-H), 5. 95 (s, 1H, = CH)， 5. 48 (s，1H, = CH)，5. 66 (s, 2H, OCH2)，2. 55 (s, 3H, Ar-CH3)，2. 38 (q, J = 7. 20Hz,2H, CH2)， 2. 20 (s，3H, Ar-CH3)，2. 13 (s, 3H, Ar-CH3)，1. 06 (t, J = 7. 20Hz,3H, CH3) · IR(KBr, cnT1) υ =CH :3100. 96 ； uCH ；2960. 08，2932. 81，2876. 82 ； uc = 0 :1647. 89 ； uc = c :1623. 28，1603. 13， 1578. 07 ； δ CH :1484. 62，1452. 39，1353. 38 ； υ c_0 :1274. 65，1264. 32 ； y = CH2 :1118. 71， 1095. 89,937. 77,892. 62,795. 46,783. 54,743. 83. HRMS (ESI)m/z for C23H25N2O3 [M+H] + calculated 377.1860 found 377.1876.
5f 5- [2，3- 二氯-4- (2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3- (2_甲基苯基)_1， 2，4_ 噁二唑，白色固體，收率 62. 5%，mp :68 70°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 7. 92 (d, J = 6. 60Hz，1H，Ar-H)，7. 50 (m，1H，Ar-H)，7. 42 (m，4H，Ar-H)，6. 09 (s，1H，= CH)，5. 59 (s， 1H, = CH)，5. 85(s，2H，OCH2)，2. 54(s，3H，Ar-CH3), 2. 38 (q, J = 7. 80Hz，2H，CH2)，1. 08 (t, J = 7. 80Hz，3H，CH3). IR(KBr, cnT1) υ =CH :3079· 69 ； υ CH :2971· 50,2935. 01,2876. 77 ； υ c =ο :1667. 21 ； uc = c;1618. 99,1583. 24，1559. 11 ； δ CH : 1467. 06，1383. 55,1346. 61 ； υ c_0 1286. 88，1263. 39 ； y = CH2 1045. 23，1028. 22,909. 59,809. 55,796. 41,743. 99. HRMS(ESI) m/z for C21H19Cl2N2O3 [M+H]+calculated 417. 0767found 417. 0789.5g :5-[2，3_ 二甲基_4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]-3_(4_硝基苯 基)-l，2，4-噁二唑，白色固體，收率 14.8%，mp 162 164°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 8. 30 (d, 4H, Ar-H)，7. 06 (d, 2H, Ar-H)，6. 03 (s, 1H, = CH)，5. 47 (s, 1H, = CH)，5. 69 (s, 2H, OCH2)，2. 25(s，3H，Ar-CH3), 2. 21 (s，3H，Ar-CH3), 2. 14(s，3H，CH3). IR (KBr, cnT1) υ = CH 3100.68 ； υ CH 2924. 33，2853. 38 ； uc = o:1640. 56 ； υ c = c 1612. 80,1592. 40,1580. 81, 1531. 39，1522. 66 ； δ CH :1477· 38，1451. 41,1419. 13 ； υ Ν02 :1350· 86 ； υ c_0 :1265· 01 ； γ =CH2 :1125. 03，1097. 64，1013. 51,863. 32,853. 49,798. 93,721. 88. HRMS (ESI) m/z for C21H2tlN3O5[Μ+Η]+calculated 394.1397 found 394. 1412.5h :5-[3-氯-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]_3_ (4_硝基苯基)_1，2， 4-噁二唑，黃色固體，收率 31.7%，mp 101 1020C0 1H-WR(CDCl3-Cl3) δ (ppm) 8. 37 (d, J = 9. OOHz，2H，Ar-H), 8. 31 (d, J = 9. OOHz，2H，Ar-H), 7. 29 (d, J = 8. 40Hz，lH，Ar-H),
7.10 (d, J = 2. 40Hz, 1H, Ar-H), 6. 98 (dd, J1 = 8. 40Hz, J2 = 2. 40Hz, 1H, Ar-H), 5. 99 (s, 1H, = CH) ,5. 59 (s, 1H, = CH)，5. 41 (s，2H，OCH2)，2. 04 (s，3H，CH3). IR (KBr, cnT1) υ = CH 3102. 53 ； υ CH :2981. 86,2917. 80,2863. 77 ; u c = 0 :1664. 95 ； υ c = c :1597. 69，1532. 74， 1562. 58, 1520. 77, 1522. 66 ； δ CH :1489. 25, 1447. 60, 1419. 81 ； υ N02 :1336. 60 ； υ c_0 1290. 49 ； y = CH2 :1106. 91，1071. 79，1056. 98,866. 31,854. 08,801. 45,724. 17. HRMS(ESI) m/z for C19H15ClN3O5[M+H] + :calculated400. 0695 found 400. 0713.5i :5-[2，3_ 二甲基_4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3_(4_硝基苯 基)-l，2，4-噁二唑，白色固體，收率 39. 6%，mp :117 118°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm)
8.43(d, J = 8. 40Hz，2H, Ar-H)，8. 30 (d，J = 8. 40Hz，2H, Ar-H)，7. 10 (d，J = 8. 40Hz，1H, Ar-H)，7. 03 (d, J = 8. 40Hz, 1H, Ar-H)，5. 95 (s, 1H, = CH)，5. 48 (s, 1H, = CH)，5. 70 (s, 2H, OCH2)，2. 38 (q, J = 7. 80Hz,2H, CH2)，2. 22 (s, 3H, Ar-CH3)，2. 13 (s, 3H, Ar-CH3)，1. 06 (t, J =7. 80Hz，3H，CH3). IR (KBr, cnT1) υ =CH :3103· 43 ； υ CH :2967· 47,2926. 60,2875. 14 ； uc = ο :1657. 67 ； Uc = c :1611. 34，1584. 88，1534. 11，1520. 87 ； δ CH :1483. 43，1446. 98，1415. 69 ； υΝ02 :1348. 84,1336. 62 ； υ c_0 1261. 58 ； γ = CH2 1126. 20, 1110. 62, 1090. 73,869. 06, 853. 46,798. 54,721. 88. HRMS (ESI)m/z fOrC22H22N3O5[M+H]+ :calculated 408.0554 found 408. 1571.5j :5-[2，3_二氯-4_(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑，白色固體，收率 16. 9%，mp 151 152°C。1H-WR(DMSO-Cl6) δ (ppm) 8. 43 (d, J =8. 40Hz，2H，Ar-H)，8. 29(d, J = 8. 40Hz, 2H, Ar-H), 7. 42 (m, 2H, Ar-H), 6. 09 (s, 1H, = CH)， 5. 59 (s，1H, = CH)，5. 88 (s, 2H, OCH2)，2. 38 (q, J = 7. 20Hz,2H, CH2)，1. 08 (t, J = 7. 20Hz,3H, CH3). IR(KBr, cnT1) υ = CH 3100. 52 ； υ CH :2967· 86,2937. 94 ； υ c = 0 :1660· 22 ； υ c = c :1610. 70，1587. 06，1534. 70，1520. 01 ； δ CH 1471. 45，1445. 27，1415. 36 ； υ N02 :1343. 94 ； uc_0 :1302. 62，1290. 06 ； y = CH2 :1077. 44，1008. 46,853. 41,722. 86. HRMS (ESI)m/z for C20H16Cl2N3O5[M+H]+ :calculated448. 0462found 448. 0483.5k:5-[3-甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]_3_(4_硝基苯基)_1， 2,4-噁二唑，淡黃色固體，收率 21. 1%，mp :110 112°C。1H-WR(CDCl3-Cl3) δ 8. 36 (d, J = 9. OOHz，2H, Ar-H)，8. 30 (d，J = 9. OOHz，2H, Ar-H)，7. 29 (d，J = 9. OOHz，1H, Ar-H)， 6. 90 (d, J = 2. 40Hz, 1H, Ar-H), 6. 83 (m, J1 = 9. OOHz，J2 = 2. 40Hz, 1H, Ar-H), 5. 93 (s, 1H, = CH)，5. 55 (s，1H, = CH)，5. 41 (s, 2H, OCH2)，2. 34 (s, 3H, Ar-CH3)，2. 04 (s, 3H, CH3C). IR (KBr, cnT1) υ = CH 3104. 79 ； υ CH :2929· 38,2856. 64 ； uc = 0 1631. 97 ； uc = c 1608. 22， 1596. 00，1568. 80，1529. 34，1521. 64，1516. 31 ； δ CH :1445. 92，1414. 32 ； υ N02 :1336. 16 ； uc_0 :1245. 79 ； y = CH2 :1130. 89，1070. 15,864. 78,853. 13,724. 55. HRMS (ESI) m/ζ for C20H18N3O5[M+H]+calculated 380.1241 found 380. 1258.實(shí)施例2.化合物GST Pl-I抑制活性測試及對HL-60細(xì)胞的生長抑制測定GST Pl-I抑制活性測定方法參見CN1706789 “ α，β -不飽和酮類化合物及其制 備方法及其抑制GST π活性” 200510043573. 3，說明書第11頁實(shí)施例5。HL-60細(xì)胞生長抑制活性測定方法參見CN101108832 “五元雜環(huán)化合物、制備方 法及應(yīng)用”，200710015199. 5，說明書第3頁。人急性早幼粒白血病細(xì)胞株(HL-60)表1.化合物抑制GST Pl-I活性及抑制HL-60細(xì)胞生長活性測定數(shù)據(jù) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，本發(fā)明的1，2，4_噁二唑α，β -不飽和酮類化合物大部分對HL_60 細(xì)胞的半數(shù)生長抑制濃度< 2. 0 μ M，活性進(jìn)一步提高。其中，EA 5k依次代表化合物如 下EA [2, 3- 二氯_4_ (2-亞甲基氧-丁基)苯氧基]乙酸；5a :5_[2，3-二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3_ (4_三氟甲基 苯基)-1，2，4_噁二唑；5b :5-[3-氯-4_(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3_(4_三氟甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑；5c :5-[2，3-二甲基-4_(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞乙基]_3_(4_三氟甲基 苯基)-1，2，4_噁二唑；5d :5-[2，3-二甲基-4_(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]-3_(2_甲基苯 基)-1，2，4_ 噁二唑；5e :5-[2，3-二甲基-4_(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3-(2_甲基苯 基)-1，2，4_ 噁二唑；5f :5-[2，3-二氯-4_(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3-(2_甲基苯基)_1， 2，4-噁二唑；5g :5-[2，3_ 二甲基_4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]-3_(4_硝基苯 基)-1，2，4_ 噁二唑；5h :5-[3-氯-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]_3_ (4_硝基苯基)_1，2， 4-噁二唑；5i :5-[2，3-二甲基_4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3-(4_硝基苯 基)-1，2，4_ 噁二唑；5j :5-[2，3-二氯-4_(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]_3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑；5k 5-[3-甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]_3_(4_硝基苯基)_1， 2，4-噁二唑。
權(quán)利要求
具有通式5結(jié)構(gòu)的化合物，其中，R1為氫、甲基或氯；R2為甲基、氯或溴；R3為甲基或乙基；R4為4 三氟甲基、4 硝基或2 甲基；R5為氫或甲基。FSA00000191714200011.tif
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，是下列之一5-[2，3_二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1， 2，4-噁二唑(5a)、5-[3-氯-4- (2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3- (4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁 二唑(5b)、5-[2，3- 二甲基-4- (2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]-3- (2-甲基苯基)_1，2， 4-噁二唑(5d)、5-[2，3_ 二甲基-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2， 4-噁二唑(5e)、5-[2，3-二氯-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁 二唑(5f)、5-[2，3- 二甲基-4- (2-亞甲基-1-氧-丙基)苯氧亞甲基]-3- (4-硝基苯基)-1，2， 4-噁二唑(5g)、5-[2，3- 二甲基-4- (2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3- (4-硝基苯基)-1，2， 4-噁二唑(5i)或5-[2，3-二氯-4-(2-亞甲基-1-氧-丁基)苯氧亞甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁 二唑(5j)。
3.權(quán)利要求1或2所述的化合物在制備抗白血病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及含1，2，4-噁二唑雜環(huán)α，β-不飽和酮類化合物，結(jié)構(gòu)如通式5，其中，R1為氫、甲基或氯；R2為甲基、氯或溴；R3為甲基或乙基；R4為對-三氟甲基，鄰-甲基或?qū)?硝基；R5為氫或甲基。本發(fā)明還提供該化合物的制備方法及應(yīng)用。本發(fā)明化合物對HL-60細(xì)胞的半數(shù)生長抑制濃度≤2.0μM，活性顯著提高，可用于制備抗白血病藥物。
文檔編號A61K31/4245GK101891697SQ20101021538
公開日2010年11月24日 申請日期2010年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月2日
發(fā)明者劉古月, 張林娜, 李婷, 李紅彩, 楊新美, 趙桂森 申請人:山東大學(xué)