專利名稱：一種用于抗艾滋病的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物，尤其是一種用于治療艾滋病的中藥組合物，屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
艾滋病(AIDQ是一種嚴(yán)重威脅人們健康的傳染性疾病，其病死率極高，目前既無有效疫苗預(yù)防，又無治愈的藥物，并且傳播廣泛，流行迅速，不但造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，還嚴(yán)重阻礙社會發(fā)展，已成為各國政府十分關(guān)注的社會問題。正如我國衛(wèi)生部、國家計(jì)委、科技部、財(cái)政部聯(lián)合制訂的《中國預(yù)防與控制艾滋病中長期規(guī)劃》(1998-2010)所說“預(yù)防與控制艾滋病是一項(xiàng)刻不容緩、復(fù)雜而長期的艱巨任務(wù)”，并且認(rèn)為目前“缺少有效的艾滋病、性病防治經(jīng)驗(yàn)和方法，大多數(shù)醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)的醫(yī)護(hù)人員尚不能提供規(guī)范的艾滋病、性病診療服務(wù)?！碧岢鲆铀侔滩≈委熕幬锏难芯?，力爭有一部分項(xiàng)目達(dá)到同期國際先進(jìn)水平，并且有一部分成果用于防治實(shí)踐。因此探索中醫(yī)藥防治療艾滋病的有效方法和藥物，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。目前AIDS的防治暫無特異性疫苗，高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療(簡稱HAART)是目前 AIDS治療的主要方法。合理的抗病毒治療對抑制HIV病毒的復(fù)制，提高患者的生活質(zhì)量和存活率有一定作用。但西醫(yī)抗病毒治療存在以下問題(1)不能從根本上消除HIVjPHHIV 被長期抑制至血漿中不可檢測的水平，HIV仍在低水平地復(fù)制；( HIV的抗藥性及藥物的不良反應(yīng)HAART臨床應(yīng)用4 5年后耐藥性可高達(dá)70%，同時(shí)由于大多數(shù)化療藥物有較大的毒副作用，導(dǎo)致患者的依從性下降，25%的患者會停止HAART ;(3)適應(yīng)癥局限對CD4+T 細(xì)胞> 400/μ 1，血漿HIVRNA < 30000的HIV感染者，不主張抗病毒治療，而未經(jīng)治療者3 年內(nèi)發(fā)展至AIDS的機(jī)率> 30% ； (4)價(jià)格昂貴用HAART的患者每年需要約8 10萬元， 目前能夠自費(fèi)接受HAART的患者，每年僅400 500人，我國絕大多數(shù)貧困的艾滋病患者處于無藥可用的狀態(tài)。由于HAART治療需終身服藥，出于縮短用藥時(shí)間考慮，治療多是感染中后期開始， 而事實(shí)上，HIV感染所形成的免疫缺陷是一個(gè)HIV病毒和免疫系統(tǒng)互相作用的慢性進(jìn)展的過程，早、中期即出現(xiàn)免疫組織的進(jìn)行性破壞。如果能及時(shí)進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)等方面的治療，保護(hù)感染者的免疫系統(tǒng)，有可能大大推遲進(jìn)行HAART治療的時(shí)間，起到良好的治療作用。因此，尋找具有安全有效的調(diào)節(jié)免疫功能，同時(shí)又有抗病毒的天然藥物已成為防治AIDS的重要研究方向。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于治療艾滋病的中藥組合物，同時(shí)提供該中藥組合物的制備方法及其有效成分的檢測方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。方案1 本發(fā)明所述的用于治療艾滋病的中藥組合物，其有效成分是由如下重量份的原料藥制成的鹿茸30 50份、淫羊藿120 160份、黃芪120 160份、蛇床子120 160份、 山茱萸120 160份、熟地黃240 330份。本發(fā)明所述的用于治療艾滋病的中藥組合物，是優(yōu)選如下重量份的原料藥制成的鹿茸40 45份、淫羊藿130 150份、黃芪130 150份、蛇床子130 150份、 山茱萸130 150份、熟地黃260 300份。本發(fā)明所述的用于治療艾滋病的中藥組合物，是更優(yōu)選如下重量份的原料藥制成的鹿茸42份、淫羊藿140份、黃芪140份、蛇床子140份、山茱萸140份、熟地黃280 份。方案2:本發(fā)明所述的用于治療艾滋病的中藥組合物，其有效成分是由如下重量份的原料藥制成的鹿茸30 50份、淫羊藿120 160份、黃芪120 160份、蛇床子120 160份、 山茱萸120 160份、熟地黃240 330份、仙茅120 160份、肉豆蔻120 160份、山藥 120 160 份。本發(fā)明所述的用于治療艾滋病的中藥組合物，是優(yōu)選如下重量份的原料藥制成的鹿茸40 45份、淫羊藿130 150份、黃芪130 150份、蛇床子130 150份、 山茱萸130 150份、熟地黃260 300份、仙茅130 150份、肉豆蔻130 150份、山藥 130 150 份。本發(fā)明所述的用于治療艾滋病的中藥組合物，是更優(yōu)選如下重量份的原料藥制成的鹿茸42份、淫羊藿140份、黃芪140份、蛇床子140份、山茱萸140份、熟地黃280 份、仙茅140份、肉豆蔻140份、山藥140份。方案3 本發(fā)明所述的用于治療艾滋病的中藥組合物，其有效成分是由如下重量份的原料藥制成的鹿茸30 50份、淫羊藿120 160份、黃芪120 160份、蛇床子120 160份、 山茱萸120 160份、熟地黃240 330份、仙茅120 160份、肉豆蔻120 160份、山藥 120 160份、枸杞子120 160份、肉蓯蓉120 160份、補(bǔ)骨脂55 85份。本發(fā)明所述的用于治療艾滋病的中藥組合物，是優(yōu)選如下重量份的原料藥制成的鹿茸40 45份、淫羊藿130 150份、黃芪130 150份、蛇床子130 150份、 山茱萸130 150份、熟地黃260 300份、仙茅130 150份、肉豆蔻130 150份、山藥 130 150份、枸杞子130 150份、肉蓯蓉130 150份、補(bǔ)骨脂65 75份。本發(fā)明所述的用于治療艾滋病的中藥組合物，是更優(yōu)選如下重量份的原料藥制成的
鹿茸42份、淫羊藿140份、黃芪140份、蛇床子140份、山茱萸140份、熟地黃280 份、仙茅140份、肉豆蔻140份、山藥140份、枸杞子140份、肉蓯蓉140份、補(bǔ)骨脂70份。上面所述的原料藥，均為中藥材或其炮制品，具體來源為鹿茸為鹿科動物梅花鹿 Cervus nippon Temminck 或馬鹿 Cervus eIaphus Linnaeus的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角。淫羊藿為小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim.、箭葉淫羊 Epimediumsagittatum(Sieb. et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊董 Epimedium pubescens
Maxim.、巫山淫羊藿Epimedium wushanense Τ· S. Ying、或卓月鮮淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥地上部分。黃苗為豆科植物蒙古黃苗 Astragalus membranaceus (Fisch. )Bge. var. mongholicus (Bge. ) Hsiao 或膜莢黃苗 Astragalus membranaceus (Fisch. ) Bge.的干燥根。蛇床子為傘形科植物蛇床Cnidium monnieri (L. )Cuss.的干燥成熟果實(shí)。山茱萸為山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb. et Zucc.的干燥成熟果肉。熟地黃為玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libosch.的新鮮或干燥塊根， 按照中藥炮制方法中的“酒燉法”或“蒸法”而制成的炮制加工品。仙茅為石蒜科植物仙茅Curculigo orchioides Gaertn.的干燥根莖。肉豆蔻為肉豆蔻科植物肉豆蔻Myristica fragrans Houtt.的干燥種仁，經(jīng)煨制
后使用。山藥為薯蕷科植物薯蕷Dioscorea opposita Thunb.的干燥根莖。枸杞子為茄科植物寧夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果實(shí)。肉蓯蓉為列當(dāng)科植物肉蓯蓉Cistanche deserticola Y. C.Ma或管花肉蓯蓉 Cistanchetubulosa(Schrenk)Wight 的干燥帶鱗葉的肉質(zhì)蓮。補(bǔ)骨脂為豆科植物補(bǔ)骨脂I^soralea corylifolia L.的干燥成熟果實(shí)。本發(fā)明所述各方案的中藥組合物可按傳統(tǒng)方法水煎煮后服用煎液，也可按進(jìn)行制劑加工，加入適宜的輔料制成多種臨床所需劑型，包括片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、口服液、 軟膠囊等；所述的輔料包括溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑、潤滑劑等。對于口服固體劑型，發(fā)明人提供了一種制備方法，該方法包括如下步驟A、取上述原料藥，將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；B、將肉豆蔻加水蒸餾，收集揮發(fā)油并用足量倍他環(huán)糊精包合，所得包合物備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；C、將山茱萸、仙茅、蛇床子、補(bǔ)骨脂加60% 90%乙醇回流提取2 3次，每次提取1 2小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 25 1. 35的
浸膏，浸膏和藥渣備用；D、將熟地黃、淫羊藿、黃芪、肉蓯蓉、枸杞子、山藥和步驟B、C所得藥渣合并，加水煎煮2 3次，每次1 2個(gè)小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟B所得水溶液，減壓濃縮至60°C 時(shí)相對密度為1. 25 1. 35的浸膏，備用；E、將步驟C與D的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉及步驟B的倍他環(huán)糊精包合物，制成所需劑型，包括片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、軟膠囊等。
具體地講，發(fā)明人提供了一種片劑的制備方法，該方法包括如下步驟A、取原料藥，將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；B、將肉豆蔻加6倍量水蒸餾5小時(shí)，收集揮發(fā)油，所得揮發(fā)油用6倍量的倍他環(huán)糊精包合，所得包合物備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；C、將山茱萸、仙茅、蛇床子、補(bǔ)骨脂粉碎成粗粉，加80%乙醇回流提取2次，每次加 5 6倍量，提取1. 5 2小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為 1.30的浸膏，浸膏和藥渣備用；D、將熟地黃、淫羊藿、黃芪、肉蓯蓉、枸杞子和山藥加水煎煮2次，第1次加10倍量水煎煮2小時(shí)，第二次與步驟B、C所得藥渣合并，加8倍量水煎煮1. 5小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟B所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1.05 1. 10的清膏，高速離心，分取離心液，繼續(xù)減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度約為1. 30的浸膏，備用；E、將步驟C與D的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉、步驟B的倍他環(huán)糊精包合物及制劑所需輔料，壓制成片劑。本發(fā)明中藥組合物中，含有多種有效成分，尤其是其中淫羊藿苷含量的多少將影響該產(chǎn)品的質(zhì)量。因而，為了檢測本發(fā)明中藥組合物中的各有效成分，尤其是淫羊藿苷的含量，發(fā)明人還提供了一套有效成分的檢測方法，該方法中除藥劑學(xué)的常規(guī)檢測項(xiàng)目外，還包括如下的定性鑒別和含量測定方法。其中，含量測定方法為液相色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；體積為觀72的乙腈-水混合液為流動相；檢測波長為270nm ；理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500 ；對照品溶液的制備精密稱取淫羊藿苷對照品，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得；供試品溶液的制備取中藥組合物0. 3g 0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用0. 45 μ m的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，計(jì)算數(shù)據(jù)，即得。定性鑒別方法包括如下項(xiàng)目Α、取中藥組合物少量，研細(xì)，置顯微鏡下觀察，可見茸毛多碎斷；未骨化骨組織， 近無色，具多數(shù)不規(guī)則的塊狀突起物，其間隱約可見條紋；B、取中藥組合物少量，研細(xì)，加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取5-羥甲基糠醛對照品，加乙醇制成每 Iml含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各 5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF2M薄層板上，以體積比為1 1的石油醚-乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、取中藥組合物少量，研細(xì)，加乙醚30ml，加熱回流20分鐘，放冷，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取山茱萸對照藥材0. 5g，同法制備對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為20 :5:8: 0.2的環(huán)己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸溶液，于105°C烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；D、取中藥組合物少量，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流4小時(shí)，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml攪拌使溶解，移至分液漏斗中，分別以20ml、15ml、15ml的水飽和的正丁醇萃取1 次，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次30ml，棄去氨試液；正丁醇液用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次30ml，棄去水液；正丁醇液置水浴上蒸干，殘?jiān)铀甀Oml溫?zé)崾谷芙猓爬洌?過D-101大孔吸附樹脂柱，以水50ml洗脫，棄去水液，再用30ml的40%乙醇洗脫，棄去洗脫液；繼以50ml的70%乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μ 1，對照品溶液5μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為13 7 2的二氯甲烷-甲醇-水的混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，在日光下顯相同顏色的斑點(diǎn)；E、取蛇床子對照藥材0. 5g，加乙醚30ml，加熱回流20分鐘，放冷，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取C項(xiàng)下的供試品溶液及蛇床子對照藥材溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為 30 1的甲苯-乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；F、取中藥組合物少量，研細(xì)，加水35ml，加熱煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取兩次，每次15ml，置水浴上蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0. 5g，同法制備對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液、陰性樣品溶液各10μ 1，對照藥材溶液2μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為3 2 1的乙酸乙酯-二氯甲烷-甲酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，置 365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；G、取中藥組合物少量，研細(xì)，按2005年版中國藥典規(guī)定的揮發(fā)油測定法提取揮發(fā)油，自揮發(fā)油提取器刻度管上端加入沸程為30 60°C的石油醚1ml，蒸餾5小時(shí)，分取石油醚液作為供試品溶液；另取肉豆蔻對照藥材2g，同法制備對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對照藥材溶液10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為1 1的石油醚-甲苯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，在日光下顯相同顏色的斑點(diǎn)ο本發(fā)明各組中藥組合物均具有補(bǔ)腎壯陽，扶正托毒之功效，可用于治療艾滋病、改善各種并發(fā)癥狀。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明方案1的中藥組合物即可有效抑制艾滋病病毒、保護(hù)實(shí)驗(yàn)動物的免疫系統(tǒng)、對實(shí)驗(yàn)動物具有壯陽的作用；方案2的中藥組合物可進(jìn)一步改善模型動物的體質(zhì)、提高食欲、減少腹瀉等不適癥狀；方案3的中藥組合物可綜合提升治療效果、補(bǔ)益脾腎、行氣導(dǎo)滯、改善模型動物和患者的生存質(zhì)量。以下以方案3中藥組合物的動物實(shí)驗(yàn)及臨床試驗(yàn)效果為例，說明本發(fā)明各組中藥組合物(實(shí)驗(yàn)中命名為艾伏平片)的功效。實(shí)驗(yàn)例1 艾伏平片治療猴免疫缺陷病毒(SIV)感染猴模型的實(shí)驗(yàn)研究(一 )實(shí)驗(yàn)藥物熟地黃^kg、鹿茸4. 2kg、山茱萸14kg、淫羊藿14kg、黃芪14kg、 蛇床子14kg、仙茅14kg、肉蓯蓉14kg、枸杞子14kg、肉豆蔻14kg、山藥14kg、補(bǔ)骨脂7. Okg, 制成片劑。(二)實(shí)驗(yàn)方法采用SIVmac251感染猴模型，體內(nèi)試驗(yàn)評價(jià)艾伏平片抗猴免疫缺陷病毒(SIV)的效果。選取健康雄性恒河猴(重3.5 6. ^(g) 12只，通過靜注感染 SIVmac251 (5個(gè)100%猴感染劑量)Iml后71天開始治療，隨機(jī)分為SIV對照組、低劑量組和高劑量組，每組4只試驗(yàn)猴。低劑量組相當(dāng)于人的臨床治療量，即0. 338g/Kg ；高劑量組相當(dāng)于低劑量組的3倍量，即1. 014g/Kg，每日1次給藥，連續(xù)給藥8周，中間不間斷，停藥后繼續(xù)觀察8周。分別配成水溶液混懸劑100毫升，按猴實(shí)際體重給藥。SIV對照組為不治療組，連續(xù)8周以等量溫開水灌胃。(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、艾伏平片對猴免疫缺陷病毒(SIV)感染猴模型癥狀和體征等的影響實(shí)驗(yàn)過程中SIV感染后各猴的一般情況尚好，精神好，食欲一般。各組治療前和治療后淋巴結(jié)大小的變化均屬于感染SIV后的通常反應(yīng)，組間無顯著差異。SIV對照組中有1只猴在感染后80 天時(shí)死亡。尸體解剖見頌下、腋窩及腹股溝淋巴結(jié)腫大；鎖骨下氣管旁淋巴結(jié)腫大，質(zhì)地變實(shí)；左右肺葉腫大，灰紅色，質(zhì)地變實(shí)；結(jié)腸粘膜充血，水腫，灶狀糜爛。其它各動物食欲、 精神等一般，體重變化差異無顯著意義。2、艾伏平片對猴免疫缺陷病毒(SIV)感染猴模型病毒的抑制作用SIV感染后SIV 對照組病毒載量的波動均在一定的范圍內(nèi)，符合SIV感染的自然變化規(guī)律。低劑量組治療后病毒載量下降明顯，尤其是停藥后8周時(shí)與治療前比較下降了 1. 521og，與SIV對照組比較低1.341og。艾伏平高劑量組除有一只猴子意外死亡外，其他猴子的病毒載量也都有明顯下降。治療組在停藥后沒有出現(xiàn)病毒反跳現(xiàn)象。因此可以認(rèn)為，實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示了艾伏平片對SIV感染猴模型有明顯的抑制病毒作用。3、艾伏平片對猴免疫缺陷病毒(SIV)感染猴模型免疫系統(tǒng)的保護(hù)作用通過猴淋巴結(jié)活檢顯示，對照組猴隨著病程的延長，其淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)逐漸轉(zhuǎn)壞，符合SIV感染模型的自然病理變化規(guī)律；治療組的高劑量組停藥時(shí)檢查淋巴結(jié)，其結(jié)構(gòu)略轉(zhuǎn)差，但明顯好于對照組；低劑量組淋巴結(jié)組織結(jié)構(gòu)并未隨病程延長而變壞，而是朝著穩(wěn)定的方向發(fā)展。提示艾伏平對免疫系統(tǒng)有確定的保護(hù)作用，且低劑量組的效果優(yōu)于高劑量組。實(shí)驗(yàn)例2 艾伏平片補(bǔ)腎壯陽的實(shí)驗(yàn)研究(一)實(shí)驗(yàn)藥物同上。( 二 )實(shí)驗(yàn)方法采用氫化可的松造成小鼠陽虛證，給藥(0. 338g/Kg)4天后測體重、體溫、10分鐘自主活動數(shù)及低溫游泳存活時(shí)間。將雄性大鼠去勢造成腎虛動物模型，給藥(0. 338g/Kg08天后，給予局部電刺激后記錄大鼠陰莖勃起時(shí)間。第四天各組大鼠處死， 摘除包皮腺、精囊腺、前列腺及提肛肌，稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果艾伏平片可抑制陽虛小鼠體重的下降，顯著升高體溫，明顯增加自主活動數(shù)，延長低溫游泳存活時(shí)間，明顯縮短去勢大鼠陰莖勃起潛伏期。提示艾伏平片具有明顯的補(bǔ)腎壯陽作用。
實(shí)驗(yàn)例3 艾伏平片促進(jìn)免疫抑制小鼠免疫功能恢復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究(一)實(shí)驗(yàn)藥物①本發(fā)明藥物，同上，制成干粉。②陽性藥貞芪扶正顆粒(國藥準(zhǔn)字Z22022497)吉林通化神源藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。環(huán)孢酶素A 瑞士諾華大藥廠生產(chǎn)。(二)實(shí)驗(yàn)方法1.實(shí)驗(yàn)動物分組成人口服艾伏平干粉5. Sg,為0. 08319g干粉.kg—1體重。小鼠用藥的等效劑量為0. 754g干粉Ag.1體重。將小鼠用藥的等效劑量做為低劑量；等效劑量的2倍為中劑量；等效劑量的4倍為高劑量。另設(shè)正常動物，模型動物和陽性藥對照各一組。陽性藥成人用量每日30g，為OjSg·!^—1體重。小鼠用量為其等效劑量的2倍，即8g 干粉· kg—1體重。動物隨機(jī)分組，每組12只。2.建立免疫抑制動物模型將動物于腹腔注射環(huán)孢酶素A (正常對照組除外)，隔日注射一次，共注射3次。第3次注射后次日開始灌胃給藥，每次0. 5ml，每日一次。連續(xù)給藥2周。正常組與模型動物組同時(shí)灌胃蒸餾水。3.淋巴細(xì)胞亞群檢測小鼠眼眶放血，肝素抗凝。取0. Iml抗凝血與OT3、OT4、OT8 和CD19單克隆熒光抗體于4°C孵育結(jié)合30分鐘，然后在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群的檢測。(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果與模型組比較，用藥組⑶3+、⑶4+T細(xì)胞水平和⑶4+/tD8+T細(xì)胞比值有明顯提高。提示艾伏平片對免疫功能的恢復(fù)有較好的促進(jìn)作用。實(shí)驗(yàn)例4 艾伏平片的毒理學(xué)試驗(yàn)研究由于艾滋病患者需長期服藥，因而藥物本身的安全性也至關(guān)重要。發(fā)明人根據(jù)中藥研究指導(dǎo)原則的方法，進(jìn)行了動物急毒長毒試驗(yàn)。(一 )急性毒性試驗(yàn)研究資料艾伏平片最大濃度為2. 46g生藥/ml，以最大濃度最大灌胃體積(0. 8ml/20g)給予小鼠2次/24h，累計(jì)給藥劑量達(dá)197g/kg，相當(dāng)于臨床成人用量477倍(臨床成人每天用藥量24. 78g生藥/60kg)，動物未見明顯的毒副作用，提示該藥較大量劑量服用基本安全無( 二)長期毒性試驗(yàn)研究資料以艾伏平片24. 6g生藥/kg · d，12. 3g生藥/kg · d，6. 15g生藥/kg · d三個(gè)劑量連續(xù)灌胃大鼠6個(gè)月，此時(shí)，高、中、低劑量，分別相當(dāng)于60kg成人體重59. 56,29. 78、14. 89
倍。結(jié)果給藥期及恢復(fù)性觀察期(一個(gè)月)與空白對照組比較，大鼠一般狀況、體重增長、 主要臟器系數(shù)、肉眼觀察均無明顯差異。血液學(xué)指標(biāo)各組動物血液學(xué)大部分指標(biāo)相互比較沒有顯著性差異，少數(shù)指標(biāo)給藥不同劑量組與空白組比較雖有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但基本在正常值范圍之內(nèi)。血液生化指標(biāo)各組動物血液生化大部分指標(biāo)相互比較沒有顯著性差異，少數(shù)有差異的指標(biāo)也在恢復(fù)性觀察1個(gè)月后基本恢復(fù)正常。鏡下組織形態(tài)學(xué)觀察大鼠心、脾、腎、腎上腺、腦、垂體、氣管、甲狀腺、甲狀旁腺、 唾液腺、胸腺、食管、大腸、主動脈、胰腺、卵巢、子宮、睪丸、附睪、前列腺、膀胱、乳腺、脊髓、 骨髓(胸骨、頸椎)、坐骨神經(jīng)、腸系膜淋巴結(jié)巨檢及鏡檢均無病理性改變，而小部分動物的肝細(xì)胞水腫，肺見間質(zhì)性炎癥，胃、小腸粘膜炎細(xì)胞浸潤，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后，空白對照組和艾伏平片各組之間沒有顯著性差異，表明艾伏平片沒有明顯毒性作用。
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結(jié)論艾伏平片臨床用藥范圍內(nèi)是基本安全的。實(shí)驗(yàn)例5 艾伏平片的臨床治療情況1992 1993年，發(fā)明人先后分別使用本發(fā)明三組技術(shù)方案的中藥組合物在肯尼亞用于治療艾滋病。受治患者達(dá)239例，全部HIV陽性，合并有一種或幾種以上的機(jī)會感染， 其中12例曾經(jīng)過其他抗艾滋病藥物治療，227例(占94. 9% )未經(jīng)其他治療。癥狀與體征中以發(fā)熱、消瘦、腹瀉、瘙癢、咳嗽、食欲減退、失眠、性欲減退、淋巴結(jié)腫大等出現(xiàn)率較高。服用本藥，2 3粒/次，2 3次/日，飯后服，用白開水送服。連服22 25天，休息6 7 天后重復(fù)。83. 7 %的患者服藥天數(shù)在99天以內(nèi)，服藥200天以上者僅14例(占5. 9 % )。治療總有效率97. 5%。在服藥200天以上的患者14例中，病毒載量未檢出者3例，占21. 4%。 該結(jié)果進(jìn)一步證明了本發(fā)明中藥組合物對艾滋病的治療作用。多次實(shí)驗(yàn)證明，下面各組實(shí)施例的中藥組合物均可不同程度的實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例效果，顯示其對艾滋病及其并發(fā)癥的治療作用，且該藥物本身無毒副作用。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 將鹿茸30g、淫羊藿120g、黃芪120g、蛇床子120g、山茱萸120g、熟地黃MOg —起水煎煮兩次，每次加10倍量水。煎液口服，當(dāng)日服完，連用6個(gè)月。病毒載量被控制到抑制水平，患者自感體力明顯增強(qiáng)，生活質(zhì)量明顯提高。實(shí)施例2:將鹿茸500g、淫羊藿1600g、黃芪1600g、蛇床子1600g、山茱萸1600g、熟地黃 3300g—起水煎煮兩次，每次加水10倍量。煎液密封包裝，恒溫冷藏，分10天服完，連用5 個(gè)月。病毒載量未檢出，患者食欲正常、體重正常，精神狀態(tài)良好。實(shí)施例3:處方鹿茸50g、淫羊藿160g、黃芪120g、蛇床子160g、山茱萸120g、熟地黃330g。用法將上述原料藥一起水煎煮2-3次，每次加水8-10倍量，煎液口服，當(dāng)時(shí)服完， 連用3個(gè)月以上。效果該方被應(yīng)用于治療艾滋病患者30余例，有效率達(dá)92%。實(shí)施例4:處方鹿茸40g、淫羊藿130g、黃芪130g、蛇床子130g、山茱萸130g、熟地黃260g。用法水煎液口服。實(shí)施例5:處方鹿茸45g、淫羊藿150g、黃芪150g、蛇床子150g、山茱萸150g、熟地黃300g。用法水煎液口服。實(shí)施例6:處方鹿茸45g、淫羊藿150g、黃芪150g、蛇床子130g、山茱萸130g、熟地黃^0g。用法水煎液口服。實(shí)施例7:處方鹿茸42g、淫羊藿140g、黃芪140g、蛇床子140g、山茱萸140g、熟地黃^0g。用法水煎液口服；或者將鹿茸打粉，與其他原料藥的水提濃縮液合并，干燥，粉碎，裝成膠囊。效果該方被應(yīng)用于治療艾滋病患者70余例，有效率達(dá)96%。實(shí)施例8:處方鹿茸300g、淫羊藿1200g、黃芪1200g、蛇床子1200g、山茱萸1200g、熟地黃 2400g、仙茅 1200g、肉豆蔻 1200g、山藥 1200g。工藝(1)取上述原料藥，將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加足量的水加熱蒸餾，收集產(chǎn)生的揮發(fā)油并用70%溶解，備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子加足量的70%乙醇回流提取2次，每次提取1小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 25 1. 30的浸膏，浸膏和藥渣(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、山藥和步驟( (3)所得藥渣合并，加足量的水煎煮2 次，每次1個(gè)小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟( 所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為 1.25 1.30的浸膏，備用；(5)將步驟C3)與(4)的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉以及適量的淀粉和糊精，用步驟O)中的揮發(fā)油乙醇溶液制粒，干燥，制成顆粒劑。實(shí)施例9:處方鹿茸500g、淫羊藿1600g、黃芪1600g、蛇床子1600g、山茱萸1600g、熟地黃 3300g、仙茅 1600g、肉豆蔻 1600g、山藥 1600g。工藝(1)按比例取上述原料藥，并將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加7倍量水蒸餾，收集揮發(fā)油至沒有油滴產(chǎn)生，將揮發(fā)油加5倍量的倍他環(huán)糊精研磨包合，所得包合物干燥備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子加5倍量90%乙醇回流提取3次，每次提取2小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 35的浸膏，浸膏和藥渣(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、山藥和步驟( (3)所得藥渣合并，加水煎煮3次，每次加5倍量水，煎煮2個(gè)小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟( 所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 35的浸膏，備用；(5)將步驟C3)與的浸膏合并，減壓干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉及步驟 (2)的倍他環(huán)糊精包合物、1倍量的淀粉，制粒，再加入少量微晶纖維素，混勻后填成膠囊劑。實(shí)施例10 處方鹿茸300g、淫羊藿1200g、黃芪1200g、蛇床子1200g、山茱萸1600g、熟地黃 3300g、仙茅 1600g、肉豆蔻 1600g、山藥 1200g。工藝(1)按比例取原料藥，并將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻、山茱萸、仙茅、蛇床子粉碎成粗粉，加80%乙醇回流提取2次，第1次加6倍量提取2小時(shí)，第2次加5倍量提取1. 5小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 32的浸膏，浸膏和藥渣備用；(3)將熟地黃、淫羊藿、黃芪和山藥加水煎煮2次，第1次加10倍量水煎煮2小時(shí)，第二次與步驟( 所得藥渣合并，加8倍量水煎煮1.5小時(shí)，合并水煎煮液，減壓濃縮至 60°C時(shí)相對密度為1. 05 1. 10的清膏，高速離心，分取離心液，繼續(xù)減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度約為1. 30 1. 32的浸膏，備用；(4)將步驟( 與(3)的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉及糖漿、 蜂蜜等，加熱混勻，制成膏劑。實(shí)施例11 處方鹿茸400g、淫羊藿1300g、黃芪1300g、蛇床子1300g、山茱萸1300g、熟地黃 2600g、仙茅 1300g、肉豆蔻 1300g、山藥 1300g。工藝(1)按比例取原料藥，并將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加8倍量水蒸餾6小時(shí)，收集揮發(fā)油，并用4倍量倍他環(huán)糊精包合2 個(gè)小時(shí)，所得包合物干燥后備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子加6倍量80%乙醇回流提取3次，第1次加8倍量提取2小時(shí)，第2、3次加5倍量提取1小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 26 1. 28的浸膏，浸膏和藥渣備用；(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、山藥和步驟(2) (3)所得藥渣合并，加水煎煮3次，第 1次加12倍量水煎煮1. 5小時(shí)，第2、3次加8倍量水煎煮1個(gè)小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟 (2)所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 26 1. 28的浸膏，備用；(5)將步驟C3)與的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉及步驟 (2)的倍他環(huán)糊精包合物、適量糊精和微晶纖維素，混均，壓制成片。實(shí)施例12 處方鹿茸450g、淫羊藿1500g、黃芪1500g、蛇床子1500g、山茱萸1500g、熟地黃 3000g、仙茅 1500g、肉豆蔻 1500g、山藥 1500g。工藝(1)按比例取原料藥，并將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加5倍量水蒸餾4小時(shí)，收集揮發(fā)油，用6倍量倍他環(huán)糊精包合4小時(shí)，所得包合物備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子加8倍量70%乙醇回流提取2次，每次提取1. 5小時(shí)， 合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 32的浸膏，浸膏和藥渣備用；(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、山藥加水煎煮2次，第一次加10倍量水煎煮1. 5小時(shí)，第二次將藥渣與步驟( (3)的藥渣合并后再加6倍量水煎煮1小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟( 所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 32的浸膏，備用；(5)將步驟C3)與的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉及步驟 (2)的倍他環(huán)糊精包合物、2倍量的淀粉，加水制軟材，制成丸劑。實(shí)施例13
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處方鹿茸450g、淫羊藿1500g、黃芪1500g、蛇床子1500g、山茱萸1300g、熟地黃 2600g、仙茅 1300g、肉豆蔻 1300g、山藥 1300g。工藝(1)按比例取上述原料藥，并將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加4倍量水蒸餾，收集揮發(fā)油至沒有油滴產(chǎn)生，收集揮發(fā)油，備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子加5倍量90%乙醇回流提取3次，每次提取2小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 35的浸膏，浸膏和藥渣(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、山藥和步驟( (3)所得藥渣合并，加水煎煮3次，每次加5倍量水，煎煮2個(gè)小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟( 所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 35的浸膏，備用；(5)將步驟(3)與(4)的浸膏合并，減壓干燥，粉碎成干膏粉，加入2. 2倍植物油和 0. 1倍蜂蠟，加熱混勻，再加入鹿茸粉及揮發(fā)油，混勻后壓成軟膠囊。實(shí)施例14:處方鹿茸420g、淫羊藿1400g、黃芪1400g、蛇床子1400g、山茱萸1400g、熟地黃 2800g、仙茅 1400g、肉豆蔻 1400g、山藥 1400g。用法將上述原料藥水煎煮2次，每次加水8-10倍量。煎液密封包裝，恒溫冷藏， 分10天服完，連用5個(gè)月。實(shí)施例15 處方鹿茸3kg、淫羊藿12kg、黃芪12kg、蛇床子12kg、山茱萸12kg、熟地黃Mkg、 仙茅Ukg、肉豆蔻Ukg、山藥Ukg、枸杞子Ukg、肉蓯蓉Ukg、補(bǔ)骨脂5. 5kgo用法將上述原料藥水煎煮2-3次，每次加水8-10倍量。煎液密封包裝，恒溫冷藏，分10天服完，連用3個(gè)月。實(shí)施例16 處方鹿茸5kg、淫羊藿16kg、黃芪16kg、蛇床子16kg、山茱萸16kg、熟地黃33kg、 仙茅Wkg、肉豆蔻lWig、山藥lWig、枸杞子lWig、肉蓯蓉Wkg、補(bǔ)骨脂8. 5kgo工藝(1)取上述原料藥，將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加足量的水加熱蒸餾，收集產(chǎn)生的揮發(fā)油并用足量倍他環(huán)糊精包合， 所得包合物干燥后備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子、補(bǔ)骨脂加足量的60%乙醇回流提取2次，每次提取1 小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 25 1. 30的浸膏，浸膏和藥渣備用；(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、肉蓯蓉、枸杞子、山藥和步驟( (3)所得藥渣合并， 加足量的水煎煮2次，每次1個(gè)小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟( 所得水溶液，減壓濃縮至 60°C時(shí)相對密度為1. 25 1. 30的浸膏，備用；(5)將步驟C3)與的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉及步驟 (2)的倍他環(huán)糊精包合物，以及適量的淀粉和糊精，60%乙醇干壓制粒，干燥，制成顆粒劑。
實(shí)施例17 處方鹿茸3kg、淫羊藿12kg、黃芪12kg、蛇床子12kg、山茱萸16kg、熟地黃33kg、 仙茅Wkg、肉豆蔻lWig、山藥lWig、枸杞子Ukg、肉蓯蓉Ukg、補(bǔ)骨脂5. 5kgo工藝(1)按比例取上述原料藥，并將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加4倍量水蒸餾，收集揮發(fā)油至沒有油滴產(chǎn)生，將揮發(fā)油加5倍量的倍他環(huán)糊精研磨包合，所得包合物干燥備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子、補(bǔ)骨脂加5倍量90%乙醇回流提取3次，每次提取2 小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 35的浸膏，浸膏和藥渣備用；(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、肉蓯蓉、枸杞子、山藥和步驟(2) (3)所得藥渣合并， 加水煎煮3次，每次加5倍量水，煎煮2個(gè)小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟( 所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 35的浸膏，備用；(5)將步驟C3)與的浸膏合并，減壓干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉及步驟 (2)的倍他環(huán)糊精包合物、1倍量的淀粉，制粒，再加入少量微晶纖維素，混勻后填成膠囊劑。效果該方被應(yīng)用于治療艾滋病患者80余例，有效率達(dá)96. 2%。實(shí)施例18 處方鹿茸4kg、淫羊藿13kg、黃芪13kg、蛇床子13kg、山茱萸13kg、熟地黃洸kg、 仙茅13kg、肉豆蔻13kg、山藥13kg、枸杞子13kg、肉蓯蓉13kg、補(bǔ)骨脂6. 5kgo工藝(1)按比例取原料藥，并將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加8倍量水蒸餾6小時(shí)，收集揮發(fā)油，并用4倍量倍他環(huán)糊精包合2 個(gè)小時(shí)，所得包合物干燥后備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子、補(bǔ)骨脂加6倍量80%乙醇回流提取3次，第1次加8 倍量提取2小時(shí)，第2、3次加5倍量提取1小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至 60°C時(shí)相對密度為1. 26 1. 28的浸膏，浸膏和藥渣備用；(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、肉蓯蓉、枸杞子、山藥和步驟(2) (3)所得藥渣合并， 加水煎煮3次，第1次加12倍量水煎煮1. 5小時(shí)，第2、3次加8倍量水煎煮1個(gè)小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟( 所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 1. 的浸膏，備用；(5)將步驟C3)與的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉及步驟 (2)的倍他環(huán)糊精包合物、適量糊精和微晶纖維素，混均，壓制成片。實(shí)施例19 處方鹿茸4. 5kg、淫羊藿15kg、黃芪15kg、蛇床子15kg、山茱萸15kg、熟地黃 30kg、仙茅Mkg、肉豆蔻Mkg、山藥Mkg、枸杞子Mkg、肉蓯蓉Mkg、補(bǔ)骨脂7. 5g。工藝(1)按比例取原料藥，并將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加5倍量水蒸餾4小時(shí)，收集揮發(fā)油，用6倍量倍他環(huán)糊精包合4小時(shí)，所得包合物備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子、補(bǔ)骨脂加8倍量70%乙醇回流提取2次，每次提取 1. 5小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 32的浸膏， 浸膏和藥渣備用；(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、肉蓯蓉、枸杞子、山藥加水煎煮2次，第一次加10倍量水煎煮1. 5小時(shí)，第二次將藥渣與步驟(2) (3)的藥渣合并后再加6倍量水煎煮1小時(shí)， 合并水煎煮液以及步驟( 所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 32的浸
膏，備用；(5)將步驟(3)與(4)的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉及步驟 (2)的倍他環(huán)糊精包合物、2倍量的淀粉，加水制軟材，制成丸劑。實(shí)施例20 處方鹿茸4. 5kg、淫羊藿15kg、黃芪13kg、蛇床子13kg、山茱萸15kg、熟地黃 30kg、仙茅Mkg、肉豆蔻Mkg、山藥Ukg、枸杞子Ukg、肉蓯蓉llg、補(bǔ)骨脂6. 5kgo工藝(1)按比例取原料藥，并將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加6倍量水蒸餾5小時(shí)，收集揮發(fā)油，所得揮發(fā)油用6倍量的倍他環(huán)糊精包合，所得包合物備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子、補(bǔ)骨脂粉碎成粗粉，加80%乙醇回流提取2次，第1 次加6倍量提取2小時(shí)，第2次加5倍量提取1. 5小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 1. 32的浸膏，浸膏和藥渣備用；(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、肉蓯蓉、枸杞子和山藥加水煎煮2次，第1次加10倍量水煎煮2小時(shí)，第二次與步驟( (3)所得藥渣合并，加8倍量水煎煮1. 5小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟( 所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 05 1. 10的清膏，高速離心，分取離心液，繼續(xù)減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度約為1. 30 1. 32的浸膏，備用；(5)將步驟(3)與(4)的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉、步驟 (2)的倍他環(huán)糊精包合物及糖漿、蜂蜜等，加熱混勻，制成膏劑。實(shí)施例21:處方鹿茸4. 2g、淫羊藿14kg、黃芪14kg、蛇床子14kg、山茱萸14kg、熟地黃^kg、 仙茅14kg、肉豆蔻14kg、山藥14kg、枸杞子14kg、肉蓯蓉14kg、補(bǔ)骨脂Ag。工藝(1)按比例取原料藥，并將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；(2)將肉豆蔻加6倍量水蒸餾5小時(shí)，收集揮發(fā)油，所得揮發(fā)油用4倍量的倍他環(huán)糊精在40°C條件下研磨3小時(shí)包合，所得包合物備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；(3)將山茱萸、仙茅、蛇床子、補(bǔ)骨脂粉碎成粗粉，加80%乙醇回流提取2次，每次加6倍量，提取1.5小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為 1. 28 1. 30的浸膏，浸膏和藥渣備用；(4)將熟地黃、淫羊藿、黃芪、肉蓯蓉、枸杞子和山藥加水煎煮2次，第1次加12倍量水煎煮1. 5小時(shí)，第二次與步驟( (3)所得藥渣合并，加8倍量水煎煮1小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟( 所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1.05 1. 10的清膏，高速離心，分取離心液，繼續(xù)減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度約為1. 28 1. 30的浸膏，備用；(5)將步驟(3)與(4)的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉、微晶纖維素和乳糖適量，混勻，制粒，干燥，整粒，遞增加入步驟O)的倍他環(huán)糊精包合物和少量硬脂酸鎂，混勻，壓制成片。效果該方被應(yīng)用于治療艾滋病患者200余例，總有效率達(dá)97%。實(shí)施例22 對實(shí)施例21所得片劑進(jìn)行質(zhì)量檢測定性鑒別(1)取本品研細(xì)，置顯微鏡下觀察茸毛多碎斷；未骨化骨組織，近無色，具多數(shù)不規(guī)則的塊狀突起物，其間隱約可見條紋。(2)取本品8片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液。另取5-羥甲基糠醛對照品，加乙醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF2M薄層板上，以石油醚 (60 90°C)_乙酸乙酯(1 1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈OMnm)下檢視。 供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(3)取本品8片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醚30ml，加熱回流20分鐘，放冷，濾過， 濾液揮干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液。另取山茱萸對照藥材0. 5g，同法制備對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸 (20 5 8 0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸溶液，于105°C烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(4)取本品14片，除去薄膜衣，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流4小時(shí)，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml攪拌使溶解，移至分液漏斗中，以水飽和的正丁醇萃取3次QOml，15ml, 15ml)，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次30ml，棄去氨試液。正丁醇液用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次30ml，棄去水液。正丁醇液置水浴上蒸干，殘?jiān)铀甀Oml溫?zé)崾谷芙?，放冷，過D-101大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑為1.5cm，長12cm)，以水50ml洗脫，棄去水液， 再用30ml40%乙醇洗脫，棄去洗脫液。繼以50ml70%乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1，對照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-甲醇-水 (13 7 2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，在日光下顯相同顏色的斑點(diǎn)ο(5)取蛇床子對照藥材0. 5g，加乙醚30ml，加熱回流20分鐘，放冷，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取鑒別(3)項(xiàng)下的供試品溶液及蛇床子對照藥材溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯(30 1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈 (365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(6)取本品8片，除去薄膜衣，研細(xì)，加水35ml，加熱煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取兩次，每次15ml，置水浴上蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.5g，同法制備對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液、陰性樣品溶液各10μ 1，對照藥材溶液 2^1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-二氯甲烷-甲酸(3 2 1)為展開劑， 展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。(7)取本品20片，除去薄膜衣，研細(xì)，按揮發(fā)油測定法(中國藥典2005年版一部附錄IX D)提取揮發(fā)油，自揮發(fā)油提取器刻度管上端加入石油醚(30 60°C ) 1ml，蒸餾5小時(shí)，分取石油醚液作為供試品溶液。另取肉豆蔻對照藥材2g，同法制備對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對照藥材溶液 ΙΟμΙ，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)_甲苯(1 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，在日光下顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水 (28 72)為流動相；檢測波長為270nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。對照品溶液的制備精密稱取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品20片，除去薄膜衣，研細(xì)，取約0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，稱定重量，超聲處理(功率；240W，頻率45kHz) 30分鐘， 再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45μπι)濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。結(jié)果本品每片含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H4tlO15)計(jì)不少于0. 50mg。
權(quán)利要求
1.一種用于治療艾滋病的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物的有效成分是由如下重量份的原料藥制成的鹿茸30 50份、淫羊藿120 160份、黃芪120 160份、蛇床子120 160份、山茱萸120 160份、熟地黃240 330份。
2.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于各原料藥的組成為鹿茸40 45份、淫羊藿130 150份、黃芪130 150份、蛇床子130 150份、山茱萸130 150份、熟地黃260 300份。
3.如權(quán)利要求2所述的中藥組合物，其特征在于各原料藥的組成為鹿茸42份、淫羊藿140份、黃芪140份、蛇床子140份、山茱萸140份、熟地黃280份。
4.一種用于治療艾滋病的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物的有效成分是由如下重量份的原料藥制成的鹿茸30 50份、淫羊藿120 160份、黃芪120 160份、蛇床子120 160份、山茱萸120 160份、熟地黃240 330份、仙茅120 160份、肉豆蔻120 160份、山藥 120 160 份。
5.如權(quán)利要求4所述的中藥組合物，其特征在于各原料藥的組成為鹿茸40 45份、淫羊藿130 150份、黃芪130 150份、蛇床子130 150份、山茱萸130 150份、熟地黃沈0 300份、仙茅130 150份、肉豆蔻130 150份、山藥 130 150 份。
6.如權(quán)利要求5所述的中藥組合物，其特征在于各原料藥的組成為鹿茸42份、淫羊藿140份、黃芪140份、蛇床子140份、山茱萸140份、熟地黃280份、 仙茅140份、肉豆蔻140份、山藥140份。
7.一種用于治療艾滋病的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物的有效成分是由如下重量份的原料藥制成的鹿茸30 50份、淫羊藿120 160份、黃芪120 160份、蛇床子120 160份、山茱萸120 160份、熟地黃240 330份、仙茅120 160份、肉豆蔻120 160份、山藥 120 160份、枸杞子120 160份、肉蓯蓉120 160份、補(bǔ)骨脂55 85份。
8.如權(quán)利要求7所述的中藥組合物，其特征在于各原料藥的組成為鹿茸40 45份、淫羊藿130 150份、黃芪130 150份、蛇床子130 150份、山茱萸130 150份、熟地黃沈0 300份、仙茅130 150份、肉豆蔻130 150份、山藥 130 150份、枸杞子130 150份、肉蓯蓉130 150份、補(bǔ)骨脂65 75份。
9.如權(quán)利要求8所述的中藥組合物，其特征在于各原料藥的配比為鹿茸42份、淫羊藿140份、黃芪140份、蛇床子140份、山茱萸140份、熟地黃280份、 仙茅140份、肉豆蔻140份、山藥140份、枸杞子140份、肉蓯蓉140份、補(bǔ)骨脂70份。
10.權(quán)利要求7至9中任一項(xiàng)所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于該方法包括如下工藝步驟A、取原料藥，將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；B、將肉豆蔻加水蒸餾，收集揮發(fā)油并用足量倍他環(huán)糊精包合，所得包合物備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；C、將山茱萸、仙茅、蛇床子、補(bǔ)骨脂加60% 90%乙醇回流提取2 3次，每次提取1 2小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 25 1. 35的浸膏，浸膏和藥渣備用；D、將熟地黃、淫羊藿、黃芪、肉蓯蓉、枸杞子、山藥和步驟B、C所得藥渣合并，加水煎煮 2 3次，每次1 2個(gè)小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟B所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 25 1. 35的浸膏，備用；E、將步驟C與D的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉及步驟B的倍他環(huán)糊精包合物，制成所需劑型。
11.如權(quán)利要求10所述的中藥組合物制備方法，其特征在于該方法包括如下工藝步驟A、取原料藥，將鹿茸粉碎成細(xì)粉，備用；B、將肉豆蔻加6倍量水蒸餾5小時(shí)，收集揮發(fā)油，所得揮發(fā)油用6倍量的倍他環(huán)糊精包合，所得包合物備用；蒸餾后的水溶液及藥渣另置備用；C、將山茱萸、仙茅、蛇床子、補(bǔ)骨脂粉碎成粗粉，加80%乙醇回流提取2次，每次加5 6倍量，提取1. 5 2小時(shí)，合并乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1. 30 的浸膏，浸膏和藥渣備用；D、將熟地黃、淫羊藿、黃芪、肉蓯蓉、枸杞子和山藥加水煎煮2次，第1次加10倍量水煎煮2小時(shí)，第二次與步驟B、C所得藥渣合并，加8倍量水煎煮1. 5小時(shí)，合并水煎煮液以及步驟B所得水溶液，減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度為1.05 1. 10的清膏，高速離心，分取離心液，繼續(xù)減壓濃縮至60°C時(shí)相對密度約為1. 30的浸膏，備用；E、將步驟C與D的浸膏合并，真空干燥，粉碎成干膏粉，加入鹿茸粉、步驟B的倍他環(huán)糊精包合物及制劑所需輔料，壓制成片劑。
12.權(quán)利要求7至9中任一項(xiàng)所述中藥組合物的有效成分檢測方法，該方法含有定性鑒別和含量測定內(nèi)容，其特征在于其中的含量測定方法為液相色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；體積比為觀72的乙腈-水混合液為流動相；檢測波長為270nm ；理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500 ；對照品溶液的制備精密稱取淫羊藿苷對照品，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得；供試品溶液的制備取中藥組合物0. 3g 0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用 0. 45 μ m的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，計(jì)算數(shù)據(jù)，即得。
13.如權(quán)利要求12所述的中藥組合物的有效成分檢測方法，其特征在于其中的定性鑒別方法包括如下內(nèi)容Α、取中藥組合物少量，研細(xì)，置顯微鏡下觀察，可見茸毛多碎斷；未骨化骨組織，近無色，具多數(shù)不規(guī)則的塊狀突起物，其間隱約可見條紋；B、取中藥組合物少量，研細(xì)，加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干， 殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取5-羥甲基糠醛對照品，加乙醇制成每Iml含 0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF2M薄層板上，以體積比為1 1的石油醚-乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、取中藥組合物少量，研細(xì)，加乙醚30ml，加熱回流20分鐘，放冷，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取山茱萸對照藥材0. 5g，同法制備對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為20 :5:8: 0.2的環(huán)己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸溶液，于105°C烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；D、取中藥組合物少量，研細(xì)，加甲醇50ml，加熱回流4小時(shí)，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀?20ml攪拌使溶解，移至分液漏斗中，分別以20ml、15ml、15ml的水飽和的正丁醇萃取1次， 合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次30ml，棄去氨試液；正丁醇液用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次30ml，棄去水液；正丁醇液置水浴上蒸干，殘?jiān)铀甀Oml溫?zé)崾谷芙?，放冷，過 D-101大孔吸附樹脂柱，以水50ml洗脫，棄去水液，再用30ml的40%乙醇洗脫，棄去洗脫液；繼以50ml的70%乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1，對照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上， 以體積比為13 7 2的二氯甲烷-甲醇-水的混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，在日光下顯相同顏色的斑點(diǎn)；E、取蛇床子對照藥材0.5g，加乙醚30ml，加熱回流20分鐘，放冷，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取C項(xiàng)下的供試品溶液及蛇床子對照藥材溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為30 1的甲苯-乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；F、取中藥組合物少量，研細(xì)，加水35ml，加熱煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取兩次，每次15ml，置水浴上蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0. 5g，同法制備對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液、陰性樣品溶液各10 μ 1，對照藥材溶液2 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為3 2 1的乙酸乙酯-二氯甲烷-甲酸混合液為展開齊U，展開，取出，晾干，置365nm 紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；G、取中藥組合物少量，研細(xì)，按2005年版中國藥典規(guī)定的揮發(fā)油測定法提取揮發(fā)油， 自揮發(fā)油提取器刻度管上端加入沸程為30 60°C的石油醚1ml，蒸餾5小時(shí)，分取石油醚液作為供試品溶液；另取肉豆蔻對照藥材2g，同法制備對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及對照藥材溶液10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為1 1的石油醚-甲苯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，在日光下顯相同顏色的斑點(diǎn)ο
14.權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)所述中藥組合物在制備用于治療艾滋病的藥物中的應(yīng)用。
15.權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)所述中藥組合物在制備用于溫補(bǔ)腎陽的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于治療艾滋病的中藥組合物，屬于中藥領(lǐng)域。該藥物組合物的有效成分是由熟地黃、鹿茸、山茱萸、淫羊藿、黃芪、蛇床子、仙茅、肉蓯蓉、枸杞子、肉豆蔻、山藥、補(bǔ)骨脂等中藥材制成。該藥物組合物對艾滋病具有明確的治療效果。本發(fā)明同時(shí)還公開了該藥物組合物的制備方法和有效成分檢測方法。
文檔編號A61P1/14GK102188537SQ20101012589
公開日2011年9月21日 申請日期2010年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月17日
發(fā)明者段榮書 申請人:段穎哲