專利名稱：六肽或其衍生物及其醫(yī)藥用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及具有緩解或抑制HIV感染的六肽及其衍生物，其制備方法，含它們的 藥物組合物及它們在治療或預防獲得性免疫缺陷綜合征(艾滋病AIDS)及由于HIV感染所 導致的相關疾病方面的用途。
背景技術：
HIV感染靶細胞的過程，首先是病毒包被膜與靶細胞膜的融合，然后病毒的遺傳物 質(zhì)RNA進入靶細胞內(nèi)，復制并釋放新的病毒。HIV進入靶細胞過程是由病毒包膜糖蛋白復合 物(gpl20/gp41)及靶細胞上的受體(⑶4受體和趨化因子受體CCR-5或CXCR-4)介導的。 首先HIV包膜糖蛋白表面亞基gpl20與靶細胞上的CD4受體結(jié)合，附著在細胞上；隨后再與 靶細胞的輔助受體(趨化因子受體CCR5或CXCR4等)結(jié)合；導致跨膜亞基gp41的構象發(fā) 生改變，其N端的融合肽插入到宿主細胞膜內(nèi)，啟動病毒包膜與靶細胞膜的融合，完成病毒 進入宿主細胞的感染過程(N Engl J Med 2003,348 :2228_33)。對上述任何一個環(huán)節(jié)的抑 制，均可以抑制HIV進入靶細胞，從而預防和治療HIV的感染。近年來，隨著HIV膜融合過程機制研究的不斷深入，對抑制HIV進入靶細胞的藥物 研究進展非常迅速。這類藥物稱為HIV進入抑制劑。由于gp41在膜融合過程所起的關鍵 作用，因而成為抗HIV藥物研發(fā)的新靶點。這類以gp41為作用靶標的藥物稱為HIV融合抑 制劑。2007年，F(xiàn)rank Kirchhoff報道了一類具有新作用靶點的抗HIV融合抑制劑， VIRIP及其衍生物(Cell, 2007, Vol. 129，293-275)，其中VIRIP是具有20個氨基酸的肽。 這類化合物可特異性地與Gp41的融合肽區(qū)(FP)結(jié)合，從而阻斷HIV與宿主細胞的融合過 程，抑制病毒的復制。本發(fā)明目的是尋找具有較低分子量，較高生物活性，較好代謝特性的抗HIV的物 質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人經(jīng)研究已發(fā)現(xiàn)式(I)六肽或其衍生物，其立體異構體或其藥用鹽，具有 良好的抑制HIV感染靶細胞活性。因此，式⑴多肽或其衍生物，其立體異構體或其無生理 毒性的鹽可作為藥物用于治療或預防HIV的感染。本發(fā)明第一方面涉及式I的六肽或其衍生物，其立體異構體或其藥用鹽R1-AA1-AA2-Val-AA4-Leu-AA6-R2 式(I)其中AA1可為D型或L型的天然或非天然的疏水性氨基酸或缺失；AA2可為D型或L型的天然或非天然芳香性氨基酸或缺失；AA4可為D型或L型的天然或非天然芳香性氨基酸；AA6可為D型或L型的天然或非天然氨基酸或缺失；
R1是H、Ac-、脲基-或1-10個氨基酸殘基；R2是-OH、-NH2或1_10個氨基酸殘基；R1或R2可進一步被酰胺化、烷基化、?；?、脲基化、PEG化。進一步講，在本發(fā)明中， AAl優(yōu)選L或D型的脯氨酸、羥脯氨酸或焦谷氨酸；AA2和/或AA4各自獨立地優(yōu)選為L或D型的苯丙氨酸、4_氨基苯丙氨酸、4_氯苯 丙氨酸、萘丙氨酸、β “胡椒基丙氨酸、嗎啉甲基苯丙氨酸或?qū)﹄寤奖彼?；Α?優(yōu)選為甲硫氨酸、絲氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、賴氨酸或精氨酸。Rl和R2中氨基酸殘基優(yōu)選1，2，3或4個，舉例講，其包括但不限于天冬氨酸、天 冬酰胺、異亮氨酸、谷氨酸或谷氨酰胺。R1是H、Ac-、Ureido-或1-10個氨基酸殘基的序列；R2是-0Η、-ΝΗ2或1_10個氨基酸殘基的序列；根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，本發(fā)明六肽或其衍生物選自下面的肽或其立體異構 體或其藥用鹽(1) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-NH2(2) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-NH2(3) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-NH2(4) Ac-Pro1-Phe2-Val3-NH2(5) Ac-Phe1-Val2-Phe3-Leu4-Met5-NH2(6) Ac-Phe1-Val2-Phe3-Leu4-NH2(7) Ac-Phe1-Val2-Phe3-NH2(8) Ac-Val1-Phe2-Leu3-Met4-NH2(9) Ac-Val1-Phe2-Leu3-NH2(10) Ac-Phe1-Leu2-Met3-NH2(11) Ac-D-Pro1-D-Phe2-D-Val3-D-Phe4-D-Leu5-D-Met6-NH2(12) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Ser6-NH2(13) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Gln6-NH2(14) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Asp6-NH2(15) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Lys6-NH2(16) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Asn6-NH2
(17) Ac-Pro1-Nal2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-NH2(18) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Nal4-Leu5-Met6-NH2(19) Ac-Pro1-Nal2-Val3-Nal4-Leu5-Met6-NH2(20) Ac-Pro1-Mop2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-NH2(21) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Mop4-Leu5-Met6-NH2(22) Ac-Prol-Mop2-Val3-Mop4-Leu5-Met6-NH2(23) Pgl1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-NH2(24) Ureido-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-NH2(25) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-Cys7-OH
(26) Ac-Asp1-Pro2-Phe3-Val4-Phe5-Leu6-Met7-NH2 (27) Ac-Asn1-Pro2-Phe3-Val4-Phe5-Leu6-Met7-NH2(28) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-I In7-NH2(29) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-I In7-Glu8-NH2(30) Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-I In7-Glu8-Gln9-NH2(Sl)Ac-Prol-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-Iln7-Glu8-Gln9-Asn10-NH2(32) Ac-D-Met1-D-Leu2-D-Phe3-D-Val4-D-Phe5-D-Pro6-NH2(33) Ac-Pro1-D-Phe2-Val3-D-Phe4-Leu5-Met6-NH2本發(fā)明更優(yōu)選的多肽為編號(1)，(8)，(9)和(32)六肽或其衍生物。本發(fā)明再一方面涉及含至少一種式(I)六肽或其衍生物或它們的立體異構體或 它們藥用鹽和可藥用載體或賦形劑的藥物組合物。本發(fā)明還涉及式I六肽或其衍生物或它們的立體異構體或其藥用鹽在制備治療 或預防HIV感染相關疾病(如艾滋病)或癥狀的藥物中的用途。本發(fā)明還涉及式I六肽或其衍生物或其立體異構體或其藥用鹽的制備方法，該方 法包括采用固相合成方法，以Rink Amid樹脂為載體，F(xiàn)moc-保護策略，DCC/H0BT或HBTU/ HOBT為縮合試劑，哌啶/DMF為脫保護試劑，根據(jù)所制備目標物(化合物)的氨基酸序列，從 C端到N端，按標準的Fmoc固相多肽合成方法肽樹脂。將上述肽樹脂放入250ml茄形玻璃 反應瓶中，冰浴下加入裂解液I 10ml，裂解液I配方TFA 苯甲醚間甲酚乙二硫醇 水=7.5 1 0.5 0.5 0.5，冰浴攪拌30分鐘，升到室溫繼續(xù)攪拌90分鐘，加入冷無 水乙醚IOOml，抽濾得白色固體，加水適量溶解，抽濾，濾液冷凍干燥。本發(fā)明術語“衍生物”包括式(I)六肽缺失1，2，或3個氨基酸，或在六肽的兩端或 任一端添加1，2，3或4個氨基酸。本發(fā)明所用術語“式(I)六肽或其衍生物的立體異構體”是指其相應的D-或L-立 體構型。本發(fā)明中多肽一般為六肽，但該六肽中可有氨基酸缺失，變?yōu)槿幕蛭咫模换蛄?肽兩端的任一端或兩端添加1-10個，優(yōu)選1-4個氨基酸，變?yōu)槠撸?，九或十肽。根?jù)本發(fā)明，本發(fā)明的藥物組合物可按本領域常規(guī)方法制備，例如將式I六肽或 其衍生物與藥用載體或賦形劑混合。本發(fā)明中所用藥用載體或賦形劑通常為制藥領域常用 的藥用載體或賦形劑。本發(fā)明的式I多肽可單獨使用或以藥物組合物形式使用。使用方法 可為口服或非腸道途徑?？诜緩浇o藥制劑可為片劑，膠囊或顆粒劑等。非腸道給藥制劑 可為注射劑，噴霧劑，貼劑等。本發(fā)明組合物也可制成緩釋制劑，如微球等。
具體實施例方式在本發(fā)明中使用的縮寫具有下面的含義Ac (Acetyl)乙?；鵄I DS (Acquired Immure Deficiency Syndrome)艾滋病，獲得性免疫缺陷綜合 征
Ala (Alanine, Α)丙氨酸Arg(Arginine, R)精氨酸 Asn (Asparagine, N)天冬醜氨Asp(Aspartic acid, D)Boc (t-Butoxycarbonyl)叔丁氧羰基CDI(N，N，-Carbonyldiimidazole)羰基二咪唑CHR(C-terminal heptad repeat)C 末端重復序列Cpa4-氯苯丙氨酸DCC(N, Ν-Dicyclohexylcarbodiimide)二環(huán)己基碳二亞胺DCM (Dichloromethane)二氯甲燒DIEA(N, N-Diisopropylethylamine)N，N-二異丙基乙胺DMF(N, N-Dimethyl malonate)二甲基甲酰胺Env (envelope glycoprotein)包膜糖蛋白Fmoc (Fluorenylmethoxycarbonyl)莉甲氧羰基Gln (Glutamine，Q)谷酰氨Glu (Glutamic acid, Ε)谷氨酸HBTU2-(lH-l_ 羥基苯并三 唑)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸His(Histidine, H)組氨酸HoBt (1-Hydroxylbenzotriazole anhydrous)1_ 輕基苯并三氮唑HIV(Human Immunodeficiency Virus))人免疫缺陷病毒HIV-I人免疫缺陷病毒I型HIV-2人免疫缺陷病毒II型HPLC(High performance liquid chromatography) 冑雙 1 才目fei普Iledsoleucine, I)異亮氨酸Leu(Leucine, L)亮氨酸Lys (Lysine, K)賴氨酸MBHA苯基氨甲基樹脂MS質(zhì)譜Mobβ “胡椒基丙氨酸Mop嗎啉甲基苯丙氨酸Nal萘丙氨酸NHR (N-terminal heptad repeat)N 末端重復序列Phe (Phenylalanine, F)苯丙氨酸Ser (Serine, S)絲氨酸TFA (trifluoroacetic acid)HMZiSlTLC (Thin-layer chromatography)iiMfeifThr (Threonie, Τ)蘇氨酸Trp (Tryptophan, W)色氨酸
Tyr (Tyrosine, Y)酪氨酸Uph (4-Ureido-phenylalanine)4- IISSMMSI
實施例下面的實例及生物活性實驗用來進一步說明本發(fā)明，但這并不意味著對本發(fā)明的任何限制。實施例所用固相合成載體MBHA樹脂為天津南開合成責任有限公司產(chǎn)品；DCC、 H0BT、HBTU、DIEA以及Fmoc保護的天然氨基酸或D型的非天然氨基酸為上海吉爾生化公司 以及成都誠諾新技術有限責任公司產(chǎn)品。實施例1 化合物(1)的合成以 0. 3g MBHA 樹脂(0. 48mmol)為固相載體，DCC/HOBt 或 HBTU/DIEA 為縮合劑，根 據(jù)所要得到的式I多肽的氨基酸序列，從C端到N端，按標準的Fmoc固相多肽合成方法(參 考文獻黃惟德，陳常慶著，多肽合成，科學出版社，1985)操作合成Ac-PFVFLM-MBHA樹脂。將甲硫氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸依次縮合后，用乙二酸 酐和DIEA封端，將上述肽樹脂放入HF切割儀的反應器中，加入1. OmL苯甲醚，裝好后將HF 切割儀的體系抽成真空，用液氮冷卻反應器，轉(zhuǎn)入約IOmL液態(tài)HF，于0°C反應40分鐘。用 油泵抽走HF，取下反應器，加入冷凍無水乙醚沉淀出固體，再將混懸液轉(zhuǎn)移至砂芯漏斗中。 用少量冷卻的無水乙醚洗滌三次，用水溶液沖洗至樹脂不再相互粘附，收集洗滌液，冷凍干 燥后得白色干粉。經(jīng)RP-HPLC純化得化合物(1)純品。MS 795. 1 (理論值794)。實施例2 :化合物(9)的合成以 0. 25g Rink Amid 樹脂(0. 50mmol)為固相載體，DCC/HOBt 或 HBTU/DIEA 為縮合 齊U，根據(jù)所制備化合物的氨基酸序列，從C端到N端，按標準的Fmoc固相多肽合成方法(參 考文獻黃惟德，陳常慶著，多肽合成，科學出版社，1985)操作合成VFL-Rink Amid樹脂。將亮氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸依次縮合后，用乙二酸酐和DIEA封端，將上述肽樹脂 放入250ml茄形玻璃反應瓶中，冰浴下加入裂解液I 10ml，裂解液I配方TFA 苯甲醚 間甲酚乙二硫醇水=7. 5 1 0.5 0.5 0.5，冰浴攪拌30min，升到室溫繼續(xù)攪 拌90min，加入冷無水乙醚100ml，抽濾得白色固體，加水適量溶解，抽濾，濾液冷凍干燥，得 白色干粉0. 27g，經(jīng)RP-HPLC純化得化合物(9)純品。MS 419. 0 (理論值418. 5)。實施例3按照實施例9的相同方法，使用對應化合物編號中的氨基酸合成了下列多肽 實施例4 化合物(24)的合成1.叔丁基氨甲酰脯氨酸的合成
將IOOml甲醇加入茄型瓶中，冰浴攪拌滴加7. 4ml乙酰氯反應30min，撤去冰浴 加入4g L-脯氨酸(L-脯氨酸乙酰氯(摩爾比)=1 3)，60°C油浴下回餾6h，減壓 蒸餾蒸干溶劑，加DCM稀釋后旋干，后加入乙醚反復旋蒸三遍，得到淡黃色油狀物L-脯氨 酸甲酯鹽酸鹽。再加入7ml N, N-二異丙基乙胺(DIEA)和200ml DCM攪拌lOmin，得到脯 氨酸甲酯。在茄型瓶中將2. 82g羰基二咪唑(CDI)溶于DCM中至澄清，冰浴下滴加叔丁 胺2ml (叔丁胺⑶I L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽=1.1 1 2)，滴加完畢室溫下攪拌反 應30min，得到叔丁基氨羰基咪唑。叔丁基氨羰基咪唑和脯氨酸甲酯50°C油浴中回餾8h。 得到反應液用IN鹽酸萃取兩遍，取DCM層用水和飽和食鹽水各萃取一遍，無水硫酸鎂干燥 后旋干溶劑，得到白色固體叔丁基氨甲酰脯氨酸甲酯(M = 214)1. 93g(產(chǎn)率52% )Rf = 0. 61(DCM MeOH HAc-20 1 0. 5)。1H-NMR (DMSO-D6, 400ΜΗζ, δ ppm) 1· 24 (S，9H)，1· 84 (m，3H)，2· 05 (m，H)，3· 35 (m， 2H)，4. 17 (d, H，J = 7. 2)，5，38 (s，H)，12. 32 (s, H)2.化合物(24)的合成以 0. 25g Rink Amid 樹脂(0. 50mmol)為固相載體，DCC/HOBt 或 HBTU/DIEA 為縮合 齊U，根據(jù)所制備化合物的氨基酸序列，從C端到N端，按標準的Fmoc固相多肽合成方法(參 考文獻黃惟德，陳常慶著，多肽合成，科學出版社，1985)操作合成Rink Amid樹脂。將甲硫氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、叔丁基氨甲酰脯氨酸依 次縮合后，用乙二酸酐和DIEA封端，將上述肽樹脂放入250ml茄形玻璃反應瓶中，冰 浴下加入裂解液I 10ml，裂解液I配方TFA 苯甲醚間甲酚乙二硫醇水= 7. 5 1 0. 5 0. 5 0. 5，冰浴攪拌30min，升到室溫繼續(xù)攪拌90min，加入冷無水乙醚 IOOml，抽濾得白色固體，加水適量溶解，抽濾，濾液冷凍干燥，得白色干粉，經(jīng)RP-HPLC純化 得純品。MS:(理論值)。實施例4 抑制HIV-I生物活性檢測。HIV-I復制檢測在MT-2細胞檢測作用于HIV-1IIIB復合物的本發(fā)明多肽的抑制活性。在含10%胎 牛血清的200 μ L的1640培養(yǎng)液中，1 X IO4個ΜΤ-2細胞轉(zhuǎn)染一個HIV-I菌種(100TCID50)， 根據(jù)設定的濃度梯度添加測試化合物(空白組不添加)，過夜。之后，去除培養(yǎng)上清，更換 沒有添加測試化合物的培養(yǎng)液。轉(zhuǎn)染后的第4天，每孔收集ΙΟΟμΙ的培養(yǎng)上清，加入相同 體積的5% Triton X-100，通過定量Elisa方法檢測p24抗原的產(chǎn)量并計算IC50值。重組 p24 蛋白試劑盒購自 USBiological (Swampscott, MA)。按照上述方法，活性測定結(jié)果見表1p24抑制 p24抑制 化合物編號 化合物編號 __IC50 (Mg/ml)___IC50 (pg/ml)_
權利要求
式(I)六肽或其衍生物，其立體異構體或其藥用鹽R1-AA1-AA2-Val-AA4-Leu-AA6-R2式(I)其中AA1可為D型或L型的天然或非天然的疏水性氨基酸；AA2和/或AA4可為D型或L型的天然或非天然芳香性氨基酸；AA4為D型或L型的天然或非天然芳香性氨基酸；AA6可為D型或L型的天然或非天然氨基酸；R1是H、Ac-、脲基-或1-10個氨基酸殘基；R2是-OH、-NH2或1-10個氨基酸殘基；R1和R2可進一步選擇性地被酰胺化、烷基化、?；㈦寤?、PEG化。
2.如權利要求1所述，式(I)六肽衍生物或其立體異構體或其藥用鹽，其中， AA1為L或D型的脯氨酸、羥脯氨酸或焦谷氨酸；AA2和/或AA4各自獨立地為L或D型的苯丙氨酸、4-氨基苯丙氨酸、4-氯苯丙氨酸、 萘丙氨酸、β “胡椒基丙氨酸、嗎啉甲基苯丙氨酸或?qū)﹄寤奖彼?；AA6為甲硫氨酸、絲氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、賴氨酸或精氨酸； Rl和R2中氨基酸殘基為1，2，3或4個，且選自天冬氨酸、天冬酰胺、異亮氨酸、谷氨 酸或谷氨酰胺。
3.如權利要求1所述，式(I)六肽或其衍生物或其立體異構體或其藥用鹽選自(1)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-NH2(2)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-NH2(3)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-NH2(4)Ac-Pro1-Phe2-Val3-NH2(5)Ac-Phe1-Val2-Phe3-Leu4-Met5-NH2(6)Ac-Phe1-Val2-Phe3-Leu4-NH2(7)Ac-Phe1-Val2-Phe3-NH2(8)Ac-Val1-Phe2-Leu3-Met4-NH2(9)Ac-Val1-Phe2-Leu3-NH2(10)Ac-Phe1-Leu2-Met3-NH2(11)Ac-D-Pro1-D-Phe2-D-Val3-D-Phe4-D-Leu5-D-Met6-NH2(12)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Ser6-NH2 (Is)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Gln6-NH2 (H)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Asp6-NH2 (Is)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Lys6-NH2 (Ie)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Asn6-NH2 (H)Ac-Pro1-Nal2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-NH2 (Is)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Nal4-Leu5-Met6-NH2 (Ig)Ac-Pro1-Nal2-Val3-Nal4-Leu5-Met6-NH2(20)Ac-Pro1-Mop2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-NH2(21)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Mop4-Leu5-Met6-NH2(22)Ac-Prol-Mop2-Val3-Mop4-Leu5-Met6-NH2(23)Pgl1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-NH2(24)Ureido-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-NH2(25)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-Cys7-OH(26)Ac-Asp1-Pro2-Phe3-Val4-Phe5-Leu6-Met7-NH2 (27)Ac-Asn1-Pro2-Phe3-Val4-Phe5-Leu6-Met7-NH2(28)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-I In7-NH2(29)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-I In7-Glu8-NH2 (30)Ac-Pro1-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-I In7-Glu8-Gln9-NH2 (Sl)Ac-Prol-Phe2-Val3-Phe4-Leu5-Met6-Iln7-Glu8-Gln9-Asn10-NH2 (32) Ac-D-Met1-D-Leu2-D-Phe3-D-Val4-D-Phe5-D-Pro6-NH2 (SS)Ac-Pro1-D-Phe2-Val3-D-Phe4-Leu5-Met6-NH2
4.藥物組合物，其含有至少一種權利要求1-3任一項的六肽或其衍生物或其立體異構 體或其藥用鹽和可藥用載體或賦形劑。
5.權利要求1-3任一項的式(I)六肽或其衍生物或其立體異構體或鹽藥用，在用于制 備治療或預防HIV感染相關疾病(如艾滋病)的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有抑制HIV感染活性的新型六肽及其衍生物，其制備方法，含它們的藥物組合物及它們在治療及預防HIV感染導致的相關疾病(如AIDS)方面的用途。
文檔編號A61K38/16GK101845079SQ20091013194
公開日2010年9月29日 申請日期2009年3月27日 優(yōu)先權日2009年3月27日
發(fā)明者馮思良, 劉克良, 史衛(wèi)國, 康曉宇, 張沙, 楊琛, 白玉, 賈啟燕, 鄭保華 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院毒物藥物研究所