專利名稱：：一種骨碎補和丹參藥物組合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，具體指骨碎補和丹參的藥物組合物及其醫(yī)藥用途。
背景技術(shù)：
：骨質(zhì)疏松癥是一種以骨量減少、骨組織顯微結(jié)構(gòu)異常和骨折危險性增加為特征的一類疾病，常見于老年人特別是絕經(jīng)后婦女，其發(fā)病率高，危害大。隨著全球人口的老齡化，骨質(zhì)疏松在全世界常見病、多發(fā)病中的地位逐漸上升至第7位，患病人數(shù)超過2億，我國已達9000萬。全球用于骨質(zhì)疏松及其相關(guān)并發(fā)癥治療的費用超過250億美元。目前，對該病的治療西藥主要有雌激素、鈣劑、降鈣素、雙磷酸鹽及氟制劑等，這些藥物常常價格昂貴，長期使用療效不滿意，副作用大，且不能很好的預(yù)防骨折。因此，人們已逐漸把目光轉(zhuǎn)向中醫(yī)藥在治療骨質(zhì)疏松方面的發(fā)掘與研究上。骨質(zhì)疏松癥屬于祖國醫(yī)學(xué)"骨痹""骨痿"等范疇，系因年老體弱，臟腑虛衰，或精血不足，耗損正氣，氣血兩虛，不能濡養(yǎng)筋骨而釀成本病。故腎虛與精血不足為本病之特點。本病的中藥治療重在整體調(diào)節(jié)，主要以補腎益精藥為主，并隨癥輔以活血化瘀、益氣養(yǎng)血、強筋壯骨等藥，作用持久、副反應(yīng)小，可長期使用。傳統(tǒng)中成藥如骨松寶片、骨松康合劑、六味壯骨顆粒、腎骨散、仙靈骨葆等，依據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)整體調(diào)節(jié)的理念，具有一定的療效優(yōu)勢，但這些藥劑中有些劑型不便攜帶或不便服用，有些則藥味多服用劑量大，有些有效成分含量少，質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)低，故有時亦難以取得滿意的臨床療效?，F(xiàn)代中藥如骨碎補總黃酮等來自單一藥味的有效組分，其成分明確、藥效確切、質(zhì)量可控，但作用單一，未能體現(xiàn)中醫(yī)整體調(diào)節(jié)的理念，臨床療效優(yōu)勢不明顯。因此在傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論的基礎(chǔ)上，運用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，開發(fā)一種有效成分明確，療效確切，質(zhì)量可控的體現(xiàn)中藥作用整體觀的骨質(zhì)疏松癥用藥具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容-本發(fā)明的目的在于克服上述西藥現(xiàn)有技術(shù)及現(xiàn)有中成藥的不足，在傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論的基礎(chǔ)上，運用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，開發(fā)一種組方精簡，有效成分含量高，質(zhì)量可控，安全有效的中藥組合物，具體指骨碎補和丹參的藥物組合物。本發(fā)明的另一目的在于該藥物組合物可用于制成治療骨質(zhì)疏松癥的藥中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來達到本發(fā)明的藥物組合物由骨碎補和丹參組成。骨碎補與丹參的重量比值為1力.210，其最佳重量比值為1:0.45。同時該藥物組合物中活性成分為骨碎補黃酮類化合物，丹參二萜醌類及丹參酚酸類化合物，且這三類活性成分即骨碎補總黃酮、丹參總酮及丹參總酚酸的含量總和不低于提取物總重量的40%。本發(fā)明的組方依據(jù)是在傳統(tǒng)中醫(yī)治療骨質(zhì)疏松癥的理論，將補腎壯骨藥味骨碎補和活血藥味丹參相伍，結(jié)合現(xiàn)代研究結(jié)果，進一步提取骨碎補和丹參的活性成分，并進行有機組合，從而可開發(fā)成一種有效成分含量高，質(zhì)量可控，安全有效，且能長期服用的治療骨質(zhì)疏松癥中藥新藥。骨碎補為水龍骨科植物槲蕨Drynariafortunei(K皿ze)J.Sm.的干燥根莖。具補腎強骨，續(xù)傷止痛之功效。臨床用于腎虛腰痛，耳鳴耳聾，牙齒松動，跌撲閃挫，筋骨折傷等癥。補腎強骨是骨碎補的傳統(tǒng)功效?，F(xiàn)代研究表明，骨碎補總黃酮是主要活性成分，骨碎補總黃酮可提高成骨細胞的活性；能明顯提高去卵巢大鼠的骨密度，對血清TNFa、IL-6水平有抑制作用，對IL-4分泌有促進作用；給去卵巢大鼠灌服骨碎補總黃酮6個月后，脛骨骨小梁體積百分比(TBV%)明顯增高，脛骨骨小梁吸收表面百分比(TRS%)，脛骨骨小梁形成表面百分比(TFS%)，活性生成表面百分比(AFS%)，骨小梁礦化率(MAR)和骨小梁骨生成率(BFR),脛骨類骨質(zhì)平均寬度(OSW)和骨皮質(zhì)礦化率(mAR)均明顯降低，表明骨碎補總黃酮對卵巢切除所致的骨質(zhì)疏松癥具有明顯的防治作用。丹參為唇形科植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根。具祛瘀止痛，活血通經(jīng)，清心除煩之功效。古有"一味丹參，功同四物"之說，丹參可用于月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、瘕積聚、胸腹刺痛、熱痹疼痛、瘡瘍腫痛、心煩不眠、肝脾腫大、心絞痛等?，F(xiàn)代大量研究表明丹參對心腦血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等均有保護作用，此外，丹參尚具促進骨折愈合，抑制骨丟失的作用。丹參二萜醌類及丹參酚酸類成分是丹參中主要活性成分，具有止痛抗炎、抗氧化、改善微循環(huán)、抗血小板聚集、血栓形成、抑菌和抑制骨丟失等藥理作用。綜上，骨碎補長于補腎壯骨；丹參長于活血祛瘀止痛，又兼具促骨愈合，抑骨丟失之功效。將骨碎補與丹參進行組方，丹參既能協(xié)同骨碎補發(fā)揮強筋骨之功效，又能補充其活血化瘀之不足，通過活血作用，進一步改善骨的營養(yǎng)供給，促進骨生長。這與傳統(tǒng)中醫(yī)用藥理念相一致?，F(xiàn)代研究表明，骨碎補、丹參長期使用安全有效，二者有效成分的組合，優(yōu)勢互補，有望成為骨質(zhì)疏松癥長期治療所需的理想藥物。本發(fā)明藥物具有補腎壯骨，活血祛瘀之功效，可用于制成治療骨質(zhì)疏松癥的藥物。具體實施例方式在本發(fā)明中所使用的術(shù)語，除非有另外說明，一般具有本領(lǐng)蜂普通技術(shù)人員通常理解的含義。本發(fā)明中的骨碎補和丹^取物可用常規(guī)方法制備，例如分剪法，下面結(jié)合具體的制備實施例，并參照數(shù)據(jù)進一步詳細地描述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例只是為了舉例說明本發(fā)明，而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。在以下的實施例中，未詳細描述的各種過程和方法是本領(lǐng)域中公知的常規(guī)方法。所用試劑的來源、商品名以及有必要列出其組成成分者，均在首次出現(xiàn)時標(biāo)明，其后所用相同試劑如無特殊-說明，均以首次標(biāo)明的內(nèi)容相同。實施例1:分煎法制備骨碎補和丹參的提取物骨碎補提取物的制備取骨碎補10kg，加入25倍藥材重量的70%乙醇，回流提取3次，分別提取2、2、l小時，濾過，合并提取液，回收乙醇至無醇，并濃縮成lg生藥/ml的水溶液，石油醚萃取，水層經(jīng)乙酸乙酯萃取3次，減壓回收乙酸乙酯至近干，干燥，粉碎，過55目篩，即得棕黃色骨碎補提取物成品，重量為192.5g，骨碎補總黃酮含量為46.5%。丹參提取物的制備:取丹參藥材粉碎成粗粉10kg，加入6倍藥材重量的95%乙醇，回流提取2次，每次提取1.5小時，濾過，合并提取液，減壓乙醇至盡干后干燥；醇提后藥渣，加入10倍藥材重量的水煎煮2次，每次煎煮1.5小時，濾過，合并提取液，水溶液濃縮至lg生藥/ml的濃縮液，用INHC1調(diào)pH2，經(jīng)乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯層，回收乙酸乙酯，干燥。與乙醇提取物混合，粉碎，過55目篩，即得棕紅色至棕褐色丹參提取物212,5g，含丹參總酮及丹參總酚酸之和為80.7%。藥效學(xué)研究如下實驗l.對維甲酸(RetinoicAcid，RA)致大鼠骨質(zhì)疏松的防治作用雄性3月齡大鼠85只，隨機分為空白對照組(IO只)，其它陰性對照組、陽性對照組、骨碎補提取物、丹參提取物及二藥提取物的組合物組各15只。各藥均用0.8%CMC-Na混懸液配制成相應(yīng)濃度，給予大鼠灌胃。除空白組外，其余各組動物每日給予維甲酸混懸液80mg/kg造模型，同時空白對照組灌胃相應(yīng)體積0.8y。CMC-Na混懸液，陽性對照組給予龍牡壯骨沖劑4g/kg，給藥組給予骨碎補提取物(骨碎補總黃酮)250mg/kg、丹參提取物(丹參總酚酸+丹參總酮)250mg/kg及二藥提取物的組合物(骨碎補總黃酮+丹參總酚酸+丹參總酮)250mg/kg(含骨碎補與丹參的提取物各125mg/kg)。14天后停止給予維甲酸，陰性對照組改為每日給予相應(yīng)體積0.8%CMC-Na混懸液，其余操作不變，至28天末次給藥后各組動物禁食，16小時后(29天)處死大鼠，取股骨，供骨密度(BMD)測定用。用藥組與空白對照組的骨密度值統(tǒng)計比較，采用組間t檢驗。結(jié)果見表l。表l.藥物對骨質(zhì)疏松大鼠股骨骨密度(BMD)的影響(i士s，n-10)分組劑量股骨密度(mg/kg)Cg/cm3)正常對照組一0.256±0細**維甲酸模型組—0.208±0.010骨碎補提取物組2500.231±0.011**丹參提取物組2500.213±0.016二藥提取組合物2500.238±0細**陽性藥組4g/kg0.235士0.013"*P<0.05，**P<0.01，與陰性對照組比較維甲酸(RA)具有肝損傷作用，長期使用可引起骨鈣丟失，表現(xiàn)為骨密度降低。骨密度是評價骨質(zhì)疏松和藥物療效的重要指標(biāo)，由表1可見，丹參提取物對維甲酸模型大鼠股骨的骨密度增加較弱，但骨碎補提取物及二藥提取組合物則均能顯著增加骨質(zhì)疏松大鼠的骨密度，且復(fù)方提取組合物比單味骨碎補提取物增加更為明顯。實驗2.對小鼠皮下血腫吸收的促進作用本實驗采用給小鼠頸部皮下注射定量自身血液，造成皮下血腫模型，通過稱量血腫塊的重量來判斷血腫的消除吸收情況，從而反映藥物的活血化瘀作用。取昆明種小鼠50只，雌雄各半，體重20±2g。按性別體重隨機分5組，每組10只，分別為空白對照組(0.8。/。CMC-Na混懸液)、陽性藥對照組(復(fù)方丹參滴丸3粒/kg)、給藥組[骨碎補提取物300mg/kg、丹參提取物300mg/kg及二藥提取物的組合物組300mg/kg(含骨碎補與丹參提取物各150mg/kg)]。實驗前先造成自身血腫模型，即分別自眼眶取血，滴入事先加有0.1mlCaCl2溶液(每ml含青霉素10萬單位的0.1MCaCl2溶液)的小試管中至0.5ml刻度，振搖均勻，迅速用注射器抽取后自皮下給予小鼠注射，形成皮下血腫。造成模型后第二天開始給藥，各藥均用0.8%CMC-Na混懸液配制成相應(yīng)濃度，給予小鼠灌胃。給藥7天，于末次給藥1小時后將小鼠頸椎脫位處死，將小鼠頸背處皮下的殘留血腫塊分離出來，用電子稱稱重，根據(jù)殘留血腫塊重量來反映藥物活血化瘀作用，用藥組與空白對照組統(tǒng)計比較，采用組間t檢驗。結(jié)果見表2。表2.對小鼠皮下血腫吸收情況的影響(i士s,n-10)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*P<0.05，**P<0.01，與空白對照組比較骨質(zhì)疏松癥的骨與關(guān)節(jié)疼痛癥狀與血瘀有著密切的關(guān)系。由表2可見，骨碎補提取物的祛瘀作用較弱，丹參提取物及二藥提取組合物則均可顯著降低小鼠實驗性皮下血腫重量，特別是二藥提取組合物的效果與復(fù)方丹參滴丸相當(dāng)，優(yōu)于丹參單味藥獨用。實驗1和2結(jié)果表明，骨碎補和丹參提取物的組合物能有效防止維甲酸所致大鼠股骨骨密度降低，同時具有顯著的活血化瘀作用，骨碎補提取物與丹參提取物的組合具有互補優(yōu)勢，其壯骨作用及活血祛瘀作用均優(yōu)于單味藥提取物，說明本品具有顯著防治骨質(zhì)疏松作用及改善骨質(zhì)疏松癥的血瘀癥狀，可用于制成防治骨質(zhì)疏松癥的藥物。實施例2:取骨碎補4000g，丹參4000g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉60g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例3:取骨碎補4000g，丹參800g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉77.58，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例4:取骨碎補4000g，丹參1200g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉74g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例5:取骨碎補4000g，丹參1600g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉71.5g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例6-取骨碎補4000g，丹參2000g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉70g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例7:取骨碎補4000g，丹參3000g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉65g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例8:取骨碎補400g，丹參4000g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉78g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例9:取骨碎補800g，丹參4000g,按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉76g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例10:取骨碎補1200g,丹參4000g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉74g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例11:取骨碎補1600g，丹參4000g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉72g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例12:取骨碎補2000g，丹參4000g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉70g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑。實施例13:取骨碎補3000g，丹參4000g，按實施例1的方法分別制備骨碎補和丹參的提取物，加淀粉65g，混合均勻，制粒后填充膠囊或制成片劑—。權(quán)利要求1、一種骨碎補和丹參的藥物組合物，其特征是，該藥物組合物骨碎補和丹參的的活性成分為骨碎補提取物中的骨碎補黃酮類化合物，以及丹參提取物中的丹參二萜醌類和丹參酚酸類化合物，上述三類活性成分含量總和大于或等于提取物總重量的40％。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的骨碎補和丹參的藥物組合物，其特征是，骨碎補與丹參的重量比值為1:0.210。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的骨碎補和丹參的藥物組合物，其特征是，骨碎補與丹參的重量比值為1:0.45。4、權(quán)利要求13任何一項所說的的骨碎補和丹參的藥物組合物在制備治療骨質(zhì)疏松癥的藥中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及一種治療骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，具體指骨碎補和丹參的藥物組合物及其醫(yī)藥用途。該藥物組合物中骨碎補與丹參的重量比值為1∶0.2～10。該組合物的提取物中主要活性成分為骨碎補黃酮類化合物，丹參二萜醌類及丹參酚酸類化合物，且這三類活性成分即骨碎補總黃酮、丹參總酮及丹參總酚酸的含量總和不得低于提取物總重量的40％。該組合物的提取物能有效防止維甲酸所致大鼠骨密度降低，同時具有顯著的活血化瘀作用，可用于制成防治骨質(zhì)疏松癥的藥物。本發(fā)明中藥組合物具有組方精簡，有效成分含量高，質(zhì)量可控，安全有效的優(yōu)點。文檔編號A61K36/537GK101485722SQ20091002503公開日2009年7月22日申請日期2009年2月13日優(yōu)先權(quán)日2009年2月13日發(fā)明者張愛蓮,霞王,范光斌,許舒雯,龔祝南申請人:南京師范大學(xué)