專利名稱：用于水溶性陽離子兩親性的藥用活性物質給藥的藥物遞送系統的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及用于藥用活性物質給藥的藥物遞送系統、包括這樣的藥物遞送系統的 藥用組合物和制備這樣的藥物遞送系統的方法。而且，本發(fā)明還涉及這樣的藥物遞送系統 在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
背景技術：
治療指數窄的藥物具有劑量的小變化可能引起毒性作用的缺點。服用這樣的藥物 的患者通常需要廣泛地監(jiān)測，以便可以調節(jié)藥物水平以保證一致安全的結果。迫切需要除 去這種監(jiān)測的必要而不會危害一致安全的結果。當在聯合治療中使用這樣的藥物時，該需 要變得特別重要。聯合治療，即同時給藥兩種或多種藥物以治療單個疾病，用于治療大量病癥，比如 例如結核病、麻瘋病、癌癥、瘧疾和HIV/AIDS。在許多情況下，聯合治療具有許多優(yōu)點，比如降低治療失敗率、降低病死率、減緩 耐藥性的發(fā)展以及減少開發(fā)新藥的需要。然而，聯合治療也具有許多潛在的缺點，比如聯合 藥物之間的拮抗作用，導致其單獨的活性降低；增加了不利的藥物_藥物相互作用的危險； 與單一療法相比增加了成本；和增加了藥物相關毒性的可能。聯合化療廣泛地用于治療不同類型的癌癥，因為與單一療法相比，它提高了存活 狀況(survival profile)。通過聯合具有不同作用機制的抗腫瘤劑可以獲得較好的結果， 其在治療期間提供了協同作用或疊加作用。聯合化療的主要問題是與連續(xù)給藥單一試劑相比，增加了毒性。這不可能通過限 制劑量來抵消，因為這將引起劑量低于治療劑量。不同的試劑也具有不同的藥代動力學性 質，這使得難于在靶組織中使所有藥物的濃度都保持在最佳協同水平。多柔比星是一種通常用于聯合化療的藥物。它具有優(yōu)良的抗癌活性，但是不幸地 是，它也具有相對低的治療指數，以及限制其使用的廣譜副作用。一種這樣的副作用是心臟 毒性，其通常發(fā)展為急性或亞急性綜合征。在更大的藥物暴露下，可能出現心肌損傷，推薦 的多柔比星的累積終身劑量不超過450-550mg/m2。該心臟毒性是阻止多柔比星用于老年患 者和預先患有心臟病的患者的主要原因。已經進行了一些嘗試以使用常規(guī)制劑提供蒽環(huán)類/紫杉烷組合，例如多柔比星和 多西他賽。這些化合物證實了具有不同作用機制的單一治療的高活性多柔比星抑制整個 細胞周期期間酶拓撲異構酶II的發(fā)展，而多西他賽通過防止生理學微管解聚/分解而阻止 分裂中期和后期之間的有絲分裂細胞分裂。證實提供的聯合比相應的單一療法更有效，但 包括較高的毒性。這阻止了這種治療成為用于治療不同類型癌癥的標準方法，特別是在某 些病癥比如發(fā)熱性中性粒細胞減少癥的情況下。

發(fā)明內容
人們期望能夠創(chuàng)制一種藥物遞送系統，其能夠減少廣泛監(jiān)測服用治療指數窄的藥 物的患者的需要。本發(fā)明的一個目的是提供這樣的藥物遞送系統。本發(fā)明的另一個目的是提供一種減少或消除與聯合治療相關的藥物相關毒性的 藥物遞送系統。因此，本發(fā)明的一個實施方案涉及用于至少一種本身為陽離子兩親性分子的藥用 活性物質給藥的藥物遞送系統，所述藥用活性物質以所述藥用活性物質和N-全反式視黃 ?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合的復 合物的顆粒的形式存在于所述藥物遞送系統中，所述復合物的所述顆粒的有效平均顆粒尺 寸小于約lOOnm，其中-所述復合物的顆?；旧鲜欠蔷蔚?；_所述復合物的顆粒俘獲在由N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、 N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合形成的納米顆粒中；和-所述N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼?甲酯的鈉鹽或它們的組合與所述復合物重量的重量-重量比例為約0.5 1至約20 1。通過本發(fā)明的藥物遞送系統顯著地改善了多種藥物的治療指數。通過使用本發(fā)明 的藥物遞送系統顯著地降低了主要由于輸注后即時的藥物的高濃度引起的副作用，因為它 模擬延長了輸注。包囊的(encapsulated)物質可以防止被代謝掉，它們通過顆粒的溶解/ 侵蝕逐漸釋放，從而有助于保持藥物濃度在治療窗內。應當注意，除了毒性濃度之外，本發(fā) 明還避免了原本可能引起抗藥性的發(fā)展的亞治療濃度。將不同類型的藥物包囊到通過本發(fā)明藥物遞送系統獲得的納米顆粒中使得能夠 將這些物質同時向作用靶點轉運，使它們原本不同的藥代動力學特征(多西他賽的半衰期 比例如多柔比星的半衰期高5倍)同步，因而刺激了所述聯合組分的協同作用的發(fā)展。本發(fā)明適用于創(chuàng)制兩種或多種類型的藥用活性物質例如抗腫瘤物質的聯合制劑。在本發(fā)明的藥物遞送系統中可以使用的藥物為水溶性抗腫瘤劑，例如包含一個或 多個氨基的這樣的試劑，例如蒽環(huán)類鹽酸鹽。根據本發(fā)明的一個方面，通過用N-全反式-視 黃?；腚装彼峒柞?、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞セ蛩鼈兊慕M合的陰離子代替氯 陰離子顯著地降低了這樣的蒽環(huán)類鹽的溶解度。得到的不溶性復合物能夠使這些蒽環(huán)類衍 生物裝填到本發(fā)明的藥物遞送系統的納米顆粒中，從而確保了藥物的緩慢釋放。示例性的 這樣的蒽環(huán)類為多柔比星、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星、米托蒽醌和它們天然的、合成的 和半合成的類似物。本發(fā)明提供的聯合中可以使用的其它種類的物質有_水不溶性的抗腫瘤劑，比如紫杉烷，例如紫杉醇、多西他賽和它們天然的、合成的 和半合成的類似物；-長春花生物堿，例如長春新堿、長春堿、長春瑞濱、長春地辛和它們天然的、合成 的和半合成的類似物；-拓撲異構酶抑制劑，比如例如依立替康、托泊替康、依托泊苷、替尼泊苷和它們天 然的、合成的和半合成的類似物；和
-脂環(huán)化劑(Alcylatingagents)，比如例如安吖啶、丙卡巴胼、雙氯亞硝脲及它們 的類似物。本發(fā)明的聯合制劑可以以多種水溶液提供。它們可以直接地給藥或冷凍干燥用于 之后的用途。在得到的本發(fā)明的藥物遞送系統中的顆粒尺寸為約8-lOOnm。低溫透射電子顯微技術表明包括紫杉烷和多柔比星的本發(fā)明的藥物遞送系統由 尺寸為約20nm的線形顆粒組成，所述線形顆粒有時會纏繞形成更大的團聚體。稀釋所述制 劑會引起團聚體的尺寸減小。


在下述說明書、實施例和附圖中將更詳細地描述本發(fā)明，其中圖1示出了不同稀釋度的由多柔比星、多西他賽、N-全反式-視黃?；腚装彼?甲酯的鈉鹽和N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽(w/w/w 1 1 1.65 1.65) 形成的顆粒的尺寸。溶劑:NaCl (5. 9mg/ml)、KCl (0. 3mg/ml)、CaCl2 (0. 295mg/ml)、六水合 MgCl2 (0. 2mg/ml)、乙酸鈉(4. lmg/ml)的水溶液。圖2示出了通過重建多柔比星、多西他賽、N-全反式_視黃?；腚装彼峒柞サ?鈉鹽和N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽(w/w/w 1 1 1.65 1.65)的冷凍 干燥混合物得到的制劑的按體積計的顆粒尺寸分布。溶劑=NaCl (5. 9mg/ml)、KCl (0. 3mg/ ml)、CaCl2 (0. 295mg/ml)、六水合 MgCl2 (0. 2mg/ml)、乙酸鈉(4. lmg/ml)的水溶液。多柔比 星的濃度為0. 5mg/ml。圖3示出了通過重建多柔比星、紫杉醇、N-全反式_視黃?；腚装彼峒柞サ拟c 鹽和N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽(w/w/w 1 2.5 3 3)的冷凍干燥 混合物得到的制劑的按體積計的顆粒尺寸分布。溶劑=NaCl (5. 9mg/ml)、KCl (0. 3mg/ml)、 CaCl2 (0. 295mg/ml)、六水合MgCl2 (0. 2mg/ml)、乙酸鈉(4. lmg/ml)的水溶液。紫杉醇濃度 為 lmg/mlο
具體實施例方式在公開和描述本發(fā)明之前，應當理解本發(fā)明不限于本文公開的特定的結構、制備 步驟和材料，因為這樣的結構、制備步驟和材料可以發(fā)生某種程度的變化。還應當理解，本 文所用的術語是僅僅用于描述特定實施方案的目的，而不意味著限制，因為本發(fā)明的范圍 僅僅由附加權利要求書和其同等物來限制。必須指出，如在本說明書和權利要求書中使用的單數形式“一個(種)”和“所述 的”包括復數的指示物，除非上下文另有明確地規(guī)定。在本說明書中，除非另有說明，術語“約”修飾在本發(fā)明的藥物遞送系統或組合物 中的成分的量或應用于本發(fā)明的方法中時，其指所述數量可能會有所偏差，其可能由于下 述原因而出現，例如，由于在實際工作中為了制造濃縮物的或使用溶液而進行的典型的測 量和液體處理方法；由于制備藥物遞送系統或組合物或實施所述方法使用的成分的制備方 法、來源或純度的差異；以及類似原因。術語“約”還包括因為由特定的初始混合物得到的 組合物的平衡條件不同而導致的不同的量。無論是否用術語“約”修飾，權利要求書包括所述量的當量。在本說明書中，除非另有說明，術語“藥物遞送系統”指遞送治療劑至期望的身體 部位和/或使治療劑適時釋放的制劑或給藥器。在本說明書中，除非另有說明，術語“顆粒尺寸”指通過動態(tài)光散射使用波長633nm 的紅色激光測量的Z-平均直徑。“小于約IOOnm的有效平均顆粒尺寸”指當通過上述技術 測量時，至少90%的顆粒的尺寸小于約lOOnm。在本說明書中，除非另有說明，術語“納米顆粒”指其尺寸以納米計的微觀粒子。本 發(fā)明納米顆粒的直徑典型地為約Inm至約999nm，其可以包括俘獲的、包囊的或密封的生物 活性分子。在本說明書中，除非另有說明，術語物質的“溶解度”指在接近室溫下，物質溶于指 定溶劑中的能力，所述接近室溫指約15°C至約38°C。在本說明書中，除非另有說明，術語“非晶形”意味著指非晶體或由顆粒尺寸為約 IOnm或更小的非常小的晶體組成的固體結構。在本說明書里，除非另有說明，術語“細胞毒素化合物”指具有阻止細胞生長或殺 死細胞的能力的化合物。在本說明書里，除非另有說明，術語“細胞生長抑制化合物”指具有使細胞進入永 久非增殖狀態(tài)(盡管不一定裂解或殺死細胞)的能力的化合物。在本說明書中，除非另有說明，術語“衍生物”指直接通過原始結構的化學反應、或 通過部分替代原始結構的“修飾”、或通過設計和從頭合成，由原始結構形成的化合物。衍生 物可以是合成的，或者可以是細胞或體外酶促反應的代謝產物。在本發(fā)明的藥物遞送系統的一個實施方案中，藥用活性物質本身的水溶解度為至 少4mg/ml，所述復合物為水溶解度在0. lmg/ml以下的非共價復合物。在本發(fā)明藥物遞送系統的另一個實施方案中，所述復合物的有效平均顆粒尺寸小 于約50nm。較小的顆粒不易于被網狀內皮系統探測到，所述網狀內皮系統保護身體以防止 微生物如病毒和細菌侵入。在本發(fā)明藥物遞送系統的一個進一步實施方案中，N-全反式視黃?；腚装彼峒?酯的鈉鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合與所述復合物重量的 重量-重量比例為約1 1至約10 1。在本發(fā)明的另一個實施方案中，所述藥物遞送系統包括至少一種本身的水溶解度 小于約ΙΟΟμ g/ml的其它藥用活性物質，所述其它藥用活性物質為有效平均顆粒尺寸小于 約IOOnm的顆粒的形式，其中所述其它藥用活性物質的顆?；旧蠟榉蔷蔚模凰銎渌?藥用活性物質的顆粒與所述復合物的顆粒一起被俘獲在所述納米顆粒中；和所述N-全反 式視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽、N-13-順式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽或它們的組 合與所述其它藥用活性物質和所述復合物的聯合重量的重量-重量比例為約0.5 1至約 20 1。在該實施方案的一個方面，所述復合物的有效平均顆粒尺寸小于約50nm。在該實 施方案的另一個方面，所述N-全反式視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽、N-13-順式-視黃酰 基半胱氨酸甲酯的鈉鹽或它們的組合與所述復合物重量的重量_重量比例為約1 1至約 10 1。根據該實施方案的一個進一步的方面，所述其它藥用活性物質的有效平均顆粒尺 寸小于約50nm，和/或所述復合物的有效平均顆粒尺寸小于約50nm。在該實施方案的另一個進一步的方面，所述N-全反式視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽、N-13-順式-視黃酰基半 胱氨酸甲酯的鈉鹽或它們的組合與所述其它藥用活性物質和所述復合物的聯合重量的重 量-重量比例為約1 1至約10 1。在本發(fā)明的另一個實施方案中，至少一種所述藥用活性物質為細胞毒素化合物或 細胞生長抑制化合物。在本發(fā)明的一個進一步的實施方案中，所述至少一種藥用活性物質為細胞毒素化 合物或細胞生長抑制化合物。在該實施方案的一個方面，所述細胞毒素化合物或細胞生長 抑制化合物為質子化形式的多柔比星、米托蒽醌、表柔比星、柔紅霉素、伊達比星、托泊替 康、依立替康、長春堿、長春新堿、長春瑞濱、安吖啶、丙卡巴胼、氮芥或它們的組合。在該實 施方案的一個更具體的方面，所述化合物為質子化形式的多柔比星；在該實施方案的另一 個更具體的方面，所述化合物為質子化形式的米托蒽醌。在本發(fā)明實施方案的另一個方面，所述藥物遞送系統包括至少一種本身的水溶解 度小于約100μ g/ml的其它藥用活性物質，所述其它藥用活性物質為細胞毒素化合物或細 胞生長抑制化合物。在該實施方案的一個進一步的方面，所述細胞毒素化合物或細胞生長 抑制化合物為紫杉烷。在該實施方案的另一個進一步的方面，所述紫杉烷選自紫杉醇、多西 他賽及它們的衍生物。在該實施方案的另一個方面，所述至少一種藥用活性物質和所述其 它藥用活性物質為細胞毒素化合物或細胞生長抑制化合物；在該實施方案的一個方面，所 述至少一種藥用活性物質為質子化形式的多柔比星、米托蒽醌、表柔比星、柔紅霉素、伊達 比星、托泊替康、依立替康、長春堿、長春新堿、長春瑞濱、安吖啶、丙卡巴胼、氮芥或它們的 組合；在該實施方案的一個具體的方面，所述化合物為質子化形式的多柔比星；在該實施 方案的進一步具體的方面，所述化合物為質子化形式的米托蒽醌；在該實施方案的另一個 具體的方面，所述其它藥用活性物質為紫杉烷；在該實施方案的一個進一步具體的方面，所 述紫杉烷選自紫杉醇、多西他賽及它們的衍生物。本發(fā)明的另一個實施方案涉及用于治療癌癥的所述藥物遞送系統。本發(fā)明的另一個實施方案涉及一種包括可藥用載體和所述種類的藥物遞送系統 的藥用組合物。在該實施方案的一個方面，所述藥用組合物可以為水溶液、凝膠、乳膏、軟 膏、片劑、膠囊或軟膠囊(softgel)的形式。本發(fā)明的另一個實施方案涉及N-全反式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽、 N-13-順式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽或它們的組合在制備根據本發(fā)明的藥物遞送系 統中的用途。本發(fā)明的另一個實施方案涉及用于制備本發(fā)明種類的藥物遞送系統的方法，其中 通過調節(jié)N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞?的鈉鹽或它們的組合與所述復合物重量的重量-重量比例為約0.5 1至約20 1來控 制所述復合物的尺寸使其有效平均顆粒尺寸小于約lOOnm。本發(fā)明的另一個進一步的實施方案涉及一種用于制備本發(fā)明種類的、包含至少一 種其它藥用活性物質的藥物遞送系統的方法，其中通過調節(jié)N-全反式-視黃酰基半胱氨酸 甲酯的鈉鹽、N-13-順式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽或它們的組合與所述其它藥用活 性物質和所述復合物的聯合重量的重量-重量比例為約0.5 1至約20 1來控制所述 其它藥用活性物質和所述復合物顆粒的尺寸使其有效平均顆粒尺寸小于約lOOnm。
本發(fā)明的另一個實施方案涉及一種制備本發(fā)明種類的藥物遞送系統的方法，其中 用N-全反式視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或 它們的組合的第一種水溶液處理所述至少一種藥用活性物質，以形成所述復合物的顆粒； 和在N-全反式視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c 鹽或它們的組合的第二種水溶液中進一步處理所述復合物形成的顆粒，直到所述復合物的 所述顆粒溶于所述第二種水溶液中。在該實施方案的一個方面，所述第一種水溶液和所述 第二種水溶液為同一種水溶液，在該水溶液中，N-全反式視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、 N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合的總量足夠形成所述復合物的顆 粒以及溶解所述復合物。本發(fā)明的另一個實施方案涉及一種制備本發(fā)明種類的包括至少一種其它藥用活 性物質的藥物遞送系統的方法，其中用N-全反式視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順 式_視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合的第一種水溶液處理所述其它藥用活性物 質，直到所述其它藥用活性物質溶于所述第一種水溶液中；用N-全反式視黃酰基半胱氨酸甲 酯的鈉鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或他們的組合的第二種水溶液處理所 述至少一種藥用活性物質，以形成所述復合物顆粒；和在第二種水溶液中，用N-全反式視黃 ?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合處理所 述復合物形成的顆粒，直到所述復合物的所述顆粒溶于所述第二種水溶液中。在該實施方案 的一個方面，所述第一種水溶液和所述第二種水溶液為同一種水溶液，在該水溶液中，N-全 反式視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組 合的總量足夠溶解所述其它藥用活性物質、形成所述復合物的顆粒以及溶解所述復合物。本發(fā)明的另一個實施方案涉及通過任一種所述本發(fā)明的方法可獲得的藥物遞送 系統。本發(fā)明的一個進一步的實施方案涉及一種包括可藥用載體和這樣的藥物遞送系統的 藥用組合物；在該實施方案的一個方面，所述藥用組合物為水溶液、凝膠、乳膏、軟膏、片劑、 膠囊或軟膠囊的形式。本發(fā)明的另一個實施方案涉及本發(fā)明種類的藥物遞送系統在制備用于治療癌癥 的藥物中的用途。本發(fā)明的一個進一步的實施方案涉及一種用于治療癌癥的方法，其中向需要這樣 的治療的患者以治療有效量給藥本發(fā)明的藥用組合物。本發(fā)明的一個進一步的實施方案涉及本發(fā)明的藥用組合物在制備用于治療癌癥 的藥物中的用途。本發(fā)明的一個進一步的實施方案涉及一種用于治療癌癥的方法，其中向需要這樣 的治療的患者以治療有效量給藥本發(fā)明藥物遞送系統。在下述非限制性實施例中將更詳細地闡述本發(fā)明。實施例材料和方法使用的制劑為新制備的或通過用特定的重建溶液重建冷凍干燥的藥用活性物質 與N-全反式視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或 它們的組合物得到的。多柔比星購自日本Mercian公司。紫杉醇購自Sigma-Aldrich瑞典AB。多西他賽購自臺灣神隆股份有限公司。米托蒽醌和托泊替康購自瑞典Chemtronica KB。Adriamycin 和Doxil購自藥房，根據制造商的處方信息重建。通過動態(tài)光散射方法使用紅光激光(633nm，Nano-ZS，英國馬爾文儀器有限公司) 測量制劑的顆粒尺寸。計算三次獨立測量值的平均值用于繪制顆粒尺寸曲線圖。Y-誤差線 由測量值的+/_標準差組成。為了評價體外細胞毒性，從美國模式培養(yǎng)物保藏所(American Type Culture Collection)(美國馬里蘭州洛克維爾市)購買不同的人類腫瘤細胞系的細胞人 類乳腺癌細胞系MDA-MB-231 (ATCC-HTB-26，Lot 3576799)、人類卵巢腺癌細胞系 SK0V-3 (ATCC-HTB-77, Lot 3038337)和人類肺非小癌細胞系 A549 (ATCC-CCL-185，Lot 3244171)。MDA-MB-231細胞是在含有2mM L-谷氨酰胺、10%胎牛血清(FBS)和抗生素的 MEM培養(yǎng)基中增殖的。SK0V-3細胞是在補充有1. 5mM L-谷氨酰胺、10% FBS和抗生素的 McCoy' s 5A培養(yǎng)基中培養(yǎng)的。所有的培養(yǎng)基和補充劑都購自Sigma-Aldrich Co.(美國 密蘇里州圣路易斯市)。所有系的細胞增殖都在BD Falcon 25或75cm2培養(yǎng)瓶(Becton Dickinson Labware)中進行。A549細胞是在在含有ImM L-谷氨酰胺、10% FBS和抗生素 的Ham' s F-12培養(yǎng)基中培養(yǎng)的。所有系的細胞增殖都在BD Falcon 25或75cm2培養(yǎng)燒 瓶中進行。使用用于粘附細胞的BD Falcon 96孔培養(yǎng)板(Becton Dickinson Labware)進 行藥物細胞毒性試驗。用細胞接種這些板，接種體積200 μ 1/孔，對于MDA-MB-231為8 X IO3 細胞/孔，對于SK0V-3為10 X IO3細胞/孔，或對于A549為6 X IO3細胞/孔。將燒瓶和培 養(yǎng)板都置于37°C下95%空氣和5% CO2的濕潤氣氛中溫育，以使細胞生長。使培養(yǎng)板中的細胞培養(yǎng)物在24小時的溫育中進行粘附。在細胞接種后的第1天， 將在合適溶劑中濃度不同的待測制劑的溶液4μ 1加入到含有培養(yǎng)物的孔中(劑量_反應 試驗)。在對照培養(yǎng)物中，加入4μ1的溶劑作為溶劑對照。連續(xù)溫育所述細胞2-4天。在 溫育期結束時，通過胰蛋白酶消化分離粘附的細胞，并使用臺盼藍不相容試驗和血細胞計 數器計數活細胞數量。所有的試驗進行至少三次，數據來源于三次測量(每次四個復制樣 本)的平均值。將結果表示為平均細胞數士SE，利用Student's t檢驗評價對照組和試驗 組之間的差異。基于細胞生長抑制的程度評價藥物細胞毒性。如下計算測試藥物的細胞生 長抑制性
細胞生長抑制性% =對照組-測試組乂·
對照組在對照組中，將用于藥物試驗的不同的溶劑4μ1加入到培養(yǎng)物中作為陰性溶劑 對照。這些對照組之間的差異沒有顯著性；因此，使用陰性對照的平均值進行計算。使用ADRIAMYCIN (多柔比星鹽酸鹽)的水溶液和多西他賽的甲醇溶液作為陽性 對照。這些藥物在不同溶劑中的生長抑制性沒有顯著性差異；因此，使用陽性對照的平均抑 制進行計算?；谥辽偃齻€獨立的試驗計算平均IC5tl 士 SE。通過對照的比較藥物的IC5tl除以本發(fā)明制劑的IC5tl來計算增強因子(EF)。實施例1
紹腿禾口 N- Φ財-視遍_胱_申隱縣浦腿艦通過在IOml試管中混合來制備N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽(2ml， 5mg/ml)和多柔比星鹽酸鹽(6ml，2mg/ml)的水溶液。在混合期間，出現細小的沉淀。通過 以3000rpm離心試管10分鐘分離沉淀。除去上清液，用IOml的水振蕩沉淀，接著再次離心。 在三次另外的如上所述洗滌步驟之后，用0. 2μπι過濾器過濾上清液，以除去可能的大的產 物團聚體。通過UV方法在350nm的波長下測量多柔比星復合物的溶解度，其為0. 0002mg/ ml ο實施例2例為1 2.5 7的多柔比星、紫杉醇和N-13-順式-視昔酰某半胱氨酸 甲酯的鈉鹽的制劑通過在IOOOml圓底燒瓶中混合來制備紫杉醇(200ml，1. 2mg/ml)和N-13-順 式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽(134.4ml，5mg/ml)的甲醇溶液，并真空蒸發(fā)得到的溶 液。將殘余物溶于水(120ml)中，在攪拌下向得到的溶液中滴加多柔比星鹽酸鹽的水溶液 (48ml,2mg/ml)。再攪拌該聯合合溶液30分鐘，用0. 2 μ m過濾器過濾穿過，并冷凍干燥。實施例3例為1 1 4的多柔比星、多西他賽和N-全反式-視昔酰某半胱氡酸 甲酯的鈉鹽的制劑通過在IOOOml圓底燒瓶中混合來制備多西他賽(100ml，lmg/ml)和N-全反式-視 黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽(80ml，5mg/ml)的甲醇溶液，并真空蒸發(fā)得到的溶液。將殘余 物溶于水(IOOml)中，在攪拌下向得到的溶液中滴加多柔比星鹽酸鹽的水溶液(50ml，2mg/ ml)。再攪拌該聯合溶液30分鐘，用0. 2 μ m過濾器過濾，并冷凍干燥。實施例4w/V/V比例為2 1 20 40的米托蒽醌、托泊替康、紫杉醇和N-全反式-視黃通過在IOOOml圓底燒瓶中混合來制備紫杉醇(200ml，1. 2mg/ml)和N-全反式-視 黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽(96ml，5mg/ml)的甲醇溶液，并真空蒸發(fā)得到的溶液。將殘余 物溶于水(120ml)中，在攪拌下向得到的溶液中滴加米托蒽醌二鹽酸鹽的水溶液(12ml， 2mg/ml)和托泊替康鹽酸鹽的水溶液(6ml，2mg/ml)。再攪拌該聯合溶液30分鐘，用0. 2 μ m 過濾器過濾，并冷凍干燥。實施例5IBf立尺寸X寸由多柔比星.、多西他,賽、N-Φ反式-視胱氨Jl甲酉旨的鈉鹽禾口 Ν-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽(W/V/V 1 1 1.65 1.65)形成的制劑中
m^mmmiimm^mm通過在包含NaCl (5. 9mg/ml)、KCl (0. 3mg/ml)、CaCl2 (0. 295mg/ml)、六水合 MgCl2(0.2mg/ml)、乙酸鈉(4. lmg/ml)的水溶液中重建多柔比星、多西他賽、N-全反式 視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽和N-13-順式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽(w/w/w 1 1 1.65 1. 65)的混合物的冷凍干燥樣品來制備溶液。表 權利要求
用于至少一種本身為陽離子兩親性分子的藥用活性物質給藥的藥物遞送系統，所述藥用活性物質以所述藥用活性物質和N 全反式 視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N 13 順式 視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合的復合物的顆粒的形式存在于所述藥物遞送系統中，所述復合物的所述顆粒的有效平均顆粒尺寸小于約100nm，其中 所述復合物的顆粒基本上是非晶形的； 所述復合物的顆粒被俘獲在由N 全反式 視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽、N 13 順式 視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合形成的納米顆粒中；和 所述N 全反式 視黃酰基半胱氨酸甲酯或鈉鹽、N 13 順式 視黃?；腚装彼峒柞セ蜮c鹽或它們的組合與所述復合物重量的重量 重量比例為約0.5∶1至約20∶1。
2.根據權利要求1所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述藥用活性物質本身的水溶 解度為至少4mg/ml，所述復合物為水溶解度在0. lmg/ml以下的非共價復合物。
3.根據權利要求1或2所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述復合物的有效平均顆粒 尺寸小于約50nm。
4.根據前述權利要求中任一項所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述N-全反式-視 黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合與 所述復合物重量的重量-重量比例為約1 1至約10 1。
5.根據權利要求1或2所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述藥物遞送系統包含至少 一種本身的水溶解度小于約100μ g/ml的其它藥用活性物質，所述其它藥用活性物質為有 效平均顆粒尺寸小于約IOOnm的顆粒的形式，其中_所述其它藥用活性物質的顆粒基本上是非晶形的；-所述其它藥用活性物質的顆粒與所述復合物的顆粒一起被俘獲在所述納米顆粒中；和-所述N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞セ蜮c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒?酯或鈉鹽或它們的組合與所述其它藥用活性物質和所述復合物的聯合重量的重量_重量 比例為約0.5 1至約20 1。
6.根據權利要求5所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述復合物的有效平均顆粒尺 寸小于約50nm。
7.根據權利要求5或6所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述N-全反式視黃?；?胱氨酸甲酯的鈉鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合與所述復合 物重量的重量-重量比例為約1 1至約10 1。
8.根據權利要求5-7中任一項所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述其它藥用活 性物質的有效平均顆粒尺寸小于約50nm，和/或所述復合物的有效平均顆粒尺寸小于約 50nmo
9.根據權利要求5-8中任一項所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述N-全反式-視 黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合與 所述其它藥用活性物質和所述復合物的聯合重量的重量_重量比例為約1 1至約10 1。
10.根據前述權利要求中任一項所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述藥用活性物質 中至少一種為細胞毒素化合物或細胞生長抑制化合物。
11.根據前述權利要求中任一項所述的藥物遞送系統，其特征在于，至少一種藥用活性物質為細胞毒素化合物或細胞生長抑制化合物。
12.根據權利要求11所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述細胞毒素化合物或細胞 生長抑制化合物為質子化形式的多柔比星、米托蒽醌、表柔比星、柔紅霉素、伊達比星、托泊 替康、依立替康、長春堿、長春新堿、長春瑞濱、安吖啶、丙卡巴胼、氮芥或它們的組合。
13.根據權利要求12所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述化合物為質子化形式的 多比星ο
14.根據權利要求12所述的藥物遞送系統，特征在于所述化合物為質子化形式的米托蒽醌。
15.根據權利要求5-14中任一項所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述其它藥用活 性物質為細胞毒素化合物或細胞生長抑制化合物。
16.根據權利要求15所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述細胞毒素化合物或細胞 生長抑制化合物為紫杉烷。
17.根據權利要求16所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述紫杉烷選自紫杉醇、多西 他賽及它們的衍生物。
18.根據權利要求5所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述至少一種藥用活性物質和 所述其它藥用活性物質為細胞毒素化合物或細胞生長抑制化合物。
19.根據權利要求18所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述至少一種藥用活性物質 為質子化形式的多柔比星、米托蒽醌、表柔比星、柔紅霉素、伊達比星、托泊替康、依立替康、 長春堿、長春新堿、長春瑞濱、安吖啶、丙卡巴胼、氮芥或它們的組合。
20.根據權利要求19所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述化合物為質子化形式的 多比星ο
21.根據權利要求19所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述化合物為質子化形式的 米托蒽醌。
22.根據權利要求18所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述其它藥用活性物質為紫 杉烷。
23.根據權利要求22所述的藥物遞送系統，其特征在于，所述紫杉烷選自紫杉醇、多西 他賽及它們的衍生物。
24.根據權利要求1-23中任一項所述的藥物遞送系統，用于治療癌癥。
25.一種藥用組合物，包括可藥用載體和根據權利要求1-24中任一項所述的藥物遞送 系統。
26.根據權利要求25所述的藥用組合物，為水溶液、凝膠、乳膏、軟膏、片劑、膠囊或軟 膠囊的形式。
27.N-全反式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的鈉鹽、Ν-13-順式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的 鈉鹽或它們的組合在制備根據權利要求1-24中任一項所述的藥物遞送系統中的用途。
28.一種用于制備根據權利要求1或2所述的藥物遞送系統的方法，其中通過調節(jié) N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、Ν-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或 它們的組合與所述復合物重量的重量-重量比例為約0.5 1至約20 1來控制所述復 合物的尺寸使其有效平均顆粒尺寸小于約lOOnm。
29.一種用于制備根據權利要求5所述的藥物遞送系統的方法，其中通過調節(jié)N-全反式_視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的 組合與所述其它藥用活性物質和所述復合物的聯合重量的重量_重量比例為約0.5 1至 約20 1來控制所述其它藥用活性物質和所述復合物的顆粒的尺寸使其有效平均顆粒尺 寸小于約lOOnm。
30.一種用于制備根據權利要求1或2所述的藥物遞送系統的方法，其中-用N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞?的鈉鹽或它們的組合的第一種水溶液處理所述至少一種藥用活性物質，以形成所述復合物 的顆粒；和-在N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞?的鈉鹽或它們的組合的第二種水溶液進一步處理所述復合物形成的顆粒，直到所述復合物 的所述顆粒溶于所述第二種水溶液中。
31.根據權利要求30所述的方法，其特征在于，所述第一種水溶液和所述第二種水溶 液為同一種水溶液，在這種水溶液中N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順 式_視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合的總量足夠-形成所述復合物的顆粒；和-溶解所述復合物。
32.一種用于制備根據權利要求5所述的藥物遞送系統的方法，其中-用N-全反式視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的 鈉鹽或它們的組合的第一種水溶液處理所述其它藥用活性物質，直到所述其它藥用活性物 質溶于所述第一種水溶液中；-用N-全反式視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ?鈉鹽或它們的組合的第二種水溶液處理所述至少一種藥用活性物質，以形成所述復合物的 顆粒；和-在所述第二種水溶液中，用N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順 式_視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合處理所述復合物形成的顆粒，直到所述復 合物的所述顆粒溶于所述第二種水溶液中。
33.根據權利要求32所述的方法，其特征在于，所述第一種水溶液和所述第二種水溶 液為同一種水溶液，在這種水溶液中N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽、N-13-順 式_視黃?；腚装彼峒柞サ拟c鹽或它們的組合的總量足夠-溶解所述其它藥用活性物質；-形成所述復合物的顆粒；和-溶解所述復合物。
34.通過根據權利要求28-33中任一項所述的方法可獲得的藥物遞送系統。
35.一種藥用組合物，包含可藥用載體和根據權利要求28-33中任一項所述的藥物遞 送系統。
36.根據權利要求35所述的藥用組合物，為水溶液、凝膠、乳膏、軟膏、片劑、膠囊或軟 膠囊的形式。
37.根據權利要求1-24或34中任一項所述的藥物遞送系統在制備用于治療癌癥的藥 物中的用途。
38.一種用于治療癌癥的方法，其特征在于，向需要這樣的治療的患者以治療有效量給 藥根據權利要求25-26或35-36中任一項所述的藥用組合物。
39.根據權利要求25-26或35-36中任一項所述的藥用組合物在制備用于治療癌癥的 藥物中的用途。
40.一種用于治療癌癥的方法，其特征在于，向需要這樣的治療的患者以治療有效量給 藥根據權利要求1-24或34中任一項所述的藥物遞送系統。
全文摘要
一種用于水溶性陽離子兩親性的藥用活性物質(API)給藥的藥物遞送系統(DDS)，該DDS包括由所述API和N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ腘a鹽和/或N-13-順式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的Na鹽形成的水溶性差的復合物的＜100nm的非晶形顆粒，所述顆粒俘獲在由N-全反式-視黃酰基半胱氨酸甲酯的Na鹽和/或N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ腘a鹽形成的納米顆粒中，N-全反式-視黃?；腚装彼峒柞サ腘a鹽和/或N-13-順式-視黃?；腚装彼峒柞サ腘a鹽與所述復合物的w/w比例為約0.5∶1至約20∶1。一種包括這樣的DDS的藥用組合物。用于制備這樣的DDS和這樣的藥用組合物的方法。這樣的DDS和藥用組合物用于治療癌癥的用途。
文檔編號A61K9/14GK101945671SQ200880127094
公開日2011年1月12日 申請日期2008年12月18日 優(yōu)先權日2007年12月19日
發(fā)明者伊戈爾·洛科特, 朱莉安·阿列克索夫 申請人:阿登尼亞投資有限公司