專利名稱：吡唑化合物及其作為raf抑制劑的用途的制作方法
本申請(qǐng)要求2007年8月1日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)No.60/953,235和2008年7月11日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)No.61/080,054的權(quán)益，所述申請(qǐng)的內(nèi)容通過(guò)引用整體并入本文。
發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明涉及化合物、其合成及其作為Raf酶的調(diào)節(jié)劑或抑制劑的用途。本發(fā)明的化合物可用于調(diào)節(jié)(例如抑制)Raf活性，以及用于治療Raf介導(dǎo)的疾病或病況，例如，與不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)的疾病狀態(tài)，例如癌癥。

背景技術(shù)：
“Erk途徑”是幾乎所有類(lèi)型的人類(lèi)細(xì)胞所使用的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，用于將細(xì)胞外信號(hào)翻譯成細(xì)胞決定(cellular decisions)，包括增殖、分化、衰老或凋亡(Wellbrock et al.，Nat.Rev.Mol.Cell Biol.11875-885(2004))。該途徑的不變組分之一是Ras GTP酶，其從膜受體接收信號(hào)，并活化Raf蛋白激酶，Raf蛋白激酶活化Mek蛋白激酶，Mek蛋白激酶進(jìn)而活化Erk蛋白激酶。經(jīng)活化的Erk激酶磷酸化大量的核和胞質(zhì)靶標(biāo)，以啟動(dòng)多種細(xì)胞決定。Raf與某些人類(lèi)惡性腫瘤相關(guān)，這昭示出Raf在Erk途徑中的生物重要性(見(jiàn)，例如，Monia et al.，Nature Medicine 2668-675(1996)；Davies et al.，Nature 417949-954(2002))。已鑒定了哺乳動(dòng)物中編碼Raf蛋白的三種不同基因，a-Raf、b-Raf和c-Raf(也被稱為Raf-1)，還已知對(duì)mRNA的差異剪接導(dǎo)致的同工(isoformic)變體(Chong et al.，EMBO J.203716-3727(2001))。Erk途徑在多種人類(lèi)癌癥中被突變活化，通常是Ras或b-Raf基因的突變導(dǎo)致的。一般而言，Ras和b-Raf基因中的突變發(fā)生于相同腫瘤類(lèi)型中，包括結(jié)腸、肺和胰腺癌以及黑素瘤，但是其經(jīng)常是相互排斥的。這暗示，Ras或Raf之任一的活化對(duì)于途徑活化和癌癥進(jìn)展來(lái)說(shuō)是足夠的。
鑒于腫瘤細(xì)胞為了其存活通常依賴于或“沉溺于”一種或兩種關(guān)鍵的信號(hào)途徑(見(jiàn)，例如，Jonkers et al.，Cancer Cell.6535-538(2004))，Erk途徑代表了藥物干涉以治療腫瘤的高度有吸引力的靶標(biāo)。蛋白激酶通常被認(rèn)為是藥物療法的期望靶標(biāo)，近來(lái)在靶向生長(zhǎng)因子受體和細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶方面的成功證實(shí)了此點(diǎn)。Mek的抑制劑在臨床試驗(yàn)中顯示出成功預(yù)期，但是有充足證據(jù)表明，不依賴Mek的Raf信號(hào)傳遞也可能有助于癌癥進(jìn)展(Wellbrock et al，Nat.Rev.Mol.Cell Biol.11875-885(2004))。因此，靶向Raf激酶被預(yù)期是治療其中Ras或Raf基因有所突變的腫瘤的替代性的、補(bǔ)充性的手段。


發(fā)明內(nèi)容
在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明是式(I)的化合物或其可藥用鹽
其中 X是N或CR7； R1是H、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中，所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代； R2是C2-C9雜環(huán)烷基或C5-C14雜芳基，其中，所述C2-C9雜環(huán)烷基和C5-C14雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代； R3是H或-NR9R10； R4、R5、R6、R7每個(gè)獨(dú)立地是H、-NR9R10、-CN、-C(O)R9、-C(O)OR9、-NO2、-SR9、-OR9、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代； 每個(gè)R8獨(dú)立地是-OH、氟、氯、溴、氰基、-NR9R10、-C(O)N(R9R10)、-C(O)R9、-C(O)OR9、-NO2、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基、C2-C9雜芳基或-(CH2)nC(O)R9，其中，所述C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R11取代； R9和R10每個(gè)獨(dú)立地是H、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中，每個(gè)所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基任選經(jīng)至少一個(gè)R11取代；或者R9和R10與它們相連的氮組合到一起，形成任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R11取代的4-7元環(huán)； 每個(gè)R11獨(dú)立地是氟、氯、溴、-OH、氰基、C1-C6烷基、C1-C11雜烷基、C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基，其中，C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)選自氟、氯、溴、-OH、氰基和C1-C6烷基的基團(tuán)取代； n是0、1、2、3或4。
在該實(shí)施方式的一個(gè)方面，X是N。在該實(shí)施方式的另一方面，X是CR7。在另一個(gè)方面，R4是H。在該實(shí)施方式的另一個(gè)方面，R5是H。在該實(shí)施方式的另一個(gè)方面，R6是H。在該實(shí)施方式的又一個(gè)方面，R4、R5和R6是H。在該實(shí)施方式的另一個(gè)方面，R1是任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的C1-C6烷基。在該實(shí)施方式的另一個(gè)方面，R1是經(jīng)至少一個(gè)R8取代的C1-C6烷基。在該實(shí)施方式的另一個(gè)方面，R1選自甲基、異丙基、(3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基、2，2-二氟乙基和乙腈。在該實(shí)施方式的另一方面，R3是-NR9R10。
在該實(shí)施方式的另一方面，R2選自

構(gòu)成的組。
在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明是具有下述結(jié)構(gòu)的式(Ia)的化合物或其可藥用鹽
其中 R1是任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的C1-C6烷基； R2是C2-C9雜環(huán)烷基或C5-C14雜芳基，其中，所述C3-C12雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代； R3是H或-NR9R10； 每個(gè)R8獨(dú)立地是-OH、氟、氯、溴、氰基、-NR9R10、-C(O)N(R9R10)、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基、C2-C9雜芳基或-(CH2)nC(O)R9，其中，所述C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R11取代； R9和R10每個(gè)獨(dú)立地是H、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C3-C9雜環(huán)烷基或C5-C9雜芳基，其中，所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基的每個(gè)任選經(jīng)至少一個(gè)R11取代；或者R9和R10與它們相連的氮組合到一起，形成任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R11取代的4-7元環(huán)； 每個(gè)R11獨(dú)立地是氟、氯、溴、-OH、氰基、C1-C6烷基、C1-C11雜烷基、C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基，其中，C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)選自氟、氯、溴、-OH、氰基和C1-C6烷基的基團(tuán)取代。
在該實(shí)施方式的一個(gè)方面，R1選自甲基、異丙基、(3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基、2，2-二氟乙基和乙腈。在該實(shí)施方式的另一方面，R3是-NR9R10。
在該實(shí)施方式的另一方面，R2選自
構(gòu)成的組。
在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明是式(II)的化合物或其可藥用鹽
其中 X是N或CR7； R1是H、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中，所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代； R2是C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中，所述C2-C9雜環(huán)烷基和C5-C14雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代；或者任選地，當(dāng)R2是C2-C9雜芳基時(shí)，任何兩個(gè)相鄰的環(huán)原子上的氫原子組合形成任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元環(huán)烷基、任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元雜環(huán)烷基或任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元雜芳基； R3是H或-NR9R10；或者當(dāng)X時(shí)CR7時(shí)，R3可與R7組合，形成任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元雜芳基、任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元雜環(huán)烷基、任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的苯基或任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元環(huán)烷基； R4、R5、R6、R7每個(gè)獨(dú)立地是H、-NR11R12、-CN、-C(O)R11、-C(O)OR11、-NO2、-SR11、-S(O)2R11、-OR11、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代； 每個(gè)R8獨(dú)立地是-OR11、氟、氯、溴、氧代、氰基、-NR13R14、-C(O)N(R13R14)、-C(O)R13、-C(O)OR13、-NO2、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基、C2-C9雜芳基或-(CH2)nC(O)R11，其中，所述C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R11取代； R9和R10每個(gè)獨(dú)立地是H、-C(O)N(R13R14)、-C(O)R13、-C(O)OR13、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中，所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)至少一個(gè)R11取代；或者R9和R10與它們相連的氮組合到一起，形成任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R11取代的4-7元環(huán)； 每個(gè)R11和R12獨(dú)立地是氟、氯、溴、-OH、-C(O)R13、-C(O)OR13、-SR13、-S(O)2R13、-OR13、-NR13R14、-C(O)N(R13R14)、氰基、C1-C6烷基、C1-C11雜烷基、C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基，其中，C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R13取代； 每個(gè)R13和R14獨(dú)立地是H、氧代、C1-C6烷基、C1-C11雜烷基、C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基，其中，C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)選自氟、氯、溴、-OH、氰基和C1-C6烷基的基團(tuán)取代； n是0、1、2、3或4。
在該實(shí)施方式的一個(gè)方面，X是N，或其可藥用鹽。在該實(shí)施方式的另一方面，X是CR7，或其可藥用鹽。在另一個(gè)方面，R4是H，或其可藥用鹽。在該實(shí)施方式的另一個(gè)方面，R5是H，或其可藥用鹽。在該實(shí)施方式的另一個(gè)方面，R6是H，或其可藥用鹽。在該實(shí)施方式的又一個(gè)方面，R4、R5和R6是H，或其可藥用鹽。在該實(shí)施方式的另一個(gè)方面，R1是任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的C1-C6烷基，或其可藥用鹽。在該實(shí)施方式的另一個(gè)方面，R1是經(jīng)至少一個(gè)R8取代的C1-C6烷基，或其可藥用鹽。
在該實(shí)施方式的一個(gè)方面，R1選自甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、2，2-二氟乙基、氰甲基、二氟環(huán)丁基、(3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基、1，1-二甲基-2-羥乙基、1-甲基-1-氰乙基、二氟甲基、叔丁基、3-羥丙-2-基、哌啶基、N-乙?；?哌啶基、H、四氫-2H-吡喃基、四氫呋喃基、4-氰苯基、順-氟環(huán)丁基、反-氟環(huán)丁基、氧雜環(huán)丁基和N-甲基-哌啶基，或其可藥用鹽。
在該實(shí)施方式的另一個(gè)方面，R1選自甲基、異丙基、(3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基、2，2-二氟乙基和乙腈，或其可藥用鹽。在該實(shí)施方式的另一方面，R3是-NR9R10，或其可藥用鹽。
在該實(shí)施方式的另一方面，R2選自


構(gòu)成的組， 或其可藥用鹽。
在該實(shí)施方式的另一方面，R3是-NR9R10。在該實(shí)施方式的另一方面，R3是NH2、H、


，或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明是具有下述結(jié)構(gòu)的式(IIa)的化合物或其可藥用鹽
其中 R1是任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的C1-C6烷基； R2是C2-C9雜環(huán)烷基或C5-C14雜芳基，其中，所述C3-C12雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代； R3是H或-NR9R10； 每個(gè)R8獨(dú)立地是-OR11、氟、氯、溴、氧代、氰基、-NR13R14、-C(O)N(R13R14)、-C(O)R13、-C(O)OR13、-NO2、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基、C2-C9雜芳基或-(CH2)nC(O)R9，其中，所述C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R11取代； R9和R10每個(gè)獨(dú)立地是H、-C(O)N(R13R14)、-C(O)R13、-C(O)OR13、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中，所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)至少一個(gè)R11取代；或者R9和R10與它們相連的氮組合到一起，形成任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R11取代的4-7元環(huán)； 每個(gè)R11和R12獨(dú)立地是氟、氯、溴、-OH、-C(O)R13、-C(O)OR13、-SR13、-S(O)2R13、-OR13、-NR13R14、-C(O)N(R13R14)、氰基、C1-C6烷基、C1-C11雜烷基、C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基，其中，C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R13取代； 每個(gè)R13和R14獨(dú)立地是H、氧代、C1-C6烷基、C1-C11雜烷基、C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基，其中，C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)選自氟、氯、溴、-OH、氰基和C1-C6烷基的基團(tuán)取代。
在該實(shí)施方式的一個(gè)方面，R1選自甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、2，2-二氟乙基、氰甲基、二氟環(huán)丁基、(3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基、1，1-二甲基-2-羥乙基、1-甲基-1-氰乙基、二氟甲基、叔丁基、3-羥丙-2-基、哌啶基、N-乙?；?哌啶基、H、四氫-2H-吡喃基、四氫呋喃基、4-氰苯基、順-氟環(huán)丁基、反-氟環(huán)丁基、氧雜環(huán)丁基和N-甲基-哌啶基，或其可藥用鹽。
在該實(shí)施方式的另一方面，R2選自


構(gòu)成的組， 或其可藥用鹽。
在該實(shí)施方式的另一方面，R3是-NR9R10。在該實(shí)施方式的另一方面，R3是NH2、H、

，或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明是選自(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-[2-(1H-吡唑-1-基)乙基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、N-(2-氟乙基)-4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、2-({4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)乙醇、4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-[2-(1H-吡唑-4-基)乙基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-(4-(3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、[4-[2-((S)-2-羥基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-吡唑-1-基]-乙腈、1-[2-({4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)乙基]吡啶-2(1H)-酮、(2R)-2-({4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-1-醇、N-[(1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲基]-4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、N-[(2，5-二甲基-1，3-惡唑-4-基)甲基]-4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(四氫呋喃-3-基甲基)嘧啶-2-胺、4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)-N-(吡啶-2-基甲基)嘧啶-2-胺、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(2-甲氧乙基)嘧啶-2-胺、1-乙基-4-[({4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)甲基]吡咯烷-2-酮、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(5-甲基-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(5-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-甲基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(2-甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶-6-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶-6-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-((3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、5-(4-(2-((S)-2-羥基丙基氨基)嘧啶-4-基)-1-異丙基-1H-吡唑-3-基)-3，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2(3H)-酮、(2S)-1-(4-(3-(3，3-二甲基-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇和(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-((3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇構(gòu)成的組的化合物或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明是選自(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇和(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇構(gòu)成的組的化合物或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇，或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇，或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇，或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇，或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，所述化合物選自4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]-N-環(huán)丙基嘧啶-2-胺、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(3，3-二氟環(huán)丁基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、3-({4-[3-(3-氟-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-氟-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(3-氟-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、N-{5-[4-{2-[(2-氰乙基)氨基]嘧啶-4-基}-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基]-4-甲基吡啶-2-基}乙酰胺、N-[1-(環(huán)丙基-磺?；?哌啶-4-基]-4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(6-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-叔丁基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、2-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-(2-{[(2S)-2-羥丙基]氨基}嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙腈、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-6-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-6-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈和3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(1-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-6-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈，或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，所述化合物選自3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(1-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-6-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、(2S)-1-[(4-{3-[6-氨基-5-(二氟甲氧基)-吡啶-3-基]-1-異丙基-1H-吡唑-4-基}嘧啶-2-基)氨基]丙-2-醇、4-[1-(二氟甲基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(2-氨基嘧啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、3-({4-[1-(二氟甲基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、2-氨基-5-[4-(2-{[(2S)-2-羥丙基]-氨基}嘧啶-4-基)-1-異丙基-1H-吡唑-3-基]吡啶-3-醇、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、2-[4-{2-[(2，2-二氟乙基)氨基]嘧啶-4-基}-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙-1-醇、3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、3-({4-[1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-乙?；?6-氨基吡啶-3-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-{[4-(1-異丙基-3-吡啶-3-基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基}-丙腈、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-叔丁基-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)嘧啶-2-胺、(2R)-2-[4-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]丙-1-醇、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-環(huán)丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、3-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-環(huán)丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、2-[4-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙-1-醇、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-環(huán)丙基-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)嘧啶-2-胺和4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺，或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，所述化合物選自(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-乙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、4-[1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、3-氯-5-(1-哌啶-4-基-4-嘧啶-4-基-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、4-[1-叔丁基-3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-({4-[1-叔丁基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、4-[1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)-嘧啶-2-胺、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)-嘧啶-2-胺、3-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)-嘧啶-2-胺、3-({4-[1-叔丁基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-叔丁基-3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-[(4-{3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1-[(3R)-四氫呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-基}嘧啶-2-基)氨基]丙腈、3-({4-[1-叔丁基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、3-[(4-{3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-[(3R)-四氫呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-基}嘧啶-2-基)氨基]丙腈、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)嘧啶-2-胺、3-(4-(3-(5-乙?；?6-氨基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-4-{2-[(2-羥乙基)-氨基]嘧啶-4-基}-1H-吡唑-1-基]-芐腈、4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)嘧啶-2-胺、3-(4-(3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈、3-(4-(3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈、(S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-((1s，3s)-3-氟環(huán)丁基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(S)-1-(4-(3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-((1r，3r)-3-氟環(huán)丁基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-((1r，3r)-3-氟環(huán)丁基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈和1-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-2-甲基丙-2-醇，或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，所述化合物選自N-(2，2-二氟乙基)-4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺、3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈、(S)-1-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-((R)-3-甲基-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈、3-(4-(1-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈、3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(2-氧代-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-2-基氨基)丙腈、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-[(4-{3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-[(3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-基}嘧啶-2-基)氨基]丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-氧雜環(huán)丁-3-基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-氟-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、5-[1-(2，2-二氟乙基)-4-(2-{[(2S)-2-羥丙基]氨基}嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-甲腈、(2S)-1-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、2-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)乙醇、2-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)乙醇、4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(3-甲氧丙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、N-(2，2-二氟乙基)-4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)嘧啶-2-胺、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(1-氰乙基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈、3-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、2-[4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙-1-醇、3-氯-5-(1-異丙基-4-嘧啶-4-基-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、3-氯-5-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-4-嘧啶-4-基-1H-吡唑-3-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、5-(1-叔丁基-4-嘧啶-4-基-1H-吡唑-3-基)-3-甲氧基吡啶-2-胺、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、3-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、N-(2，2-二氟乙基)-4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(四氫呋喃-3-基)嘧啶-2-胺、2-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-{2-[(2-羥乙基)氨基]嘧啶-4-基}-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙腈、2-[4-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙腈、3-(4-(3-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈、4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺、4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺、4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、3-氯-5-(1-異丙基-4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、(2S)-1-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(7-氯-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-2-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇，或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，所述化合物選自3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇和3-(4-(3-(5-乙?；?6-氨基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈，或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，所述化合物選自3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈和3-(4-(3-(5-乙?；?6-氨基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈，或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是3-(4-(3-(5-乙?；?6-氨基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈或其可藥用鹽。
在另一實(shí)施方式中，所述化合物選自表1中列出的10種化合物的任何組，或其可藥用鹽。
另一實(shí)施方式是上文所述的任何方面和與之不矛盾的上述任何其它方面的組合。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其包含至少一種本文所述的化合物或其可藥用鹽以及可藥用載體或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及在有需要的哺乳動(dòng)物中治療不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)或者任何Raf介導(dǎo)的疾病或病況的方法，所述方法包括下述步驟向所述哺乳動(dòng)物施用治療有效量的至少一種本文所述的化合物或其可藥用鹽。例如，在一種實(shí)施方式中，所述不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)是癌性的。在另一實(shí)施方式中，所述不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)是非癌性的。
本發(fā)明還涉及抑制Raf酶促活性的方法，所述方法包括將Raf酶與Raf抑制量的至少一種本文所述的化合物或其可藥用鹽接觸。
本發(fā)明還涉及本文所述的化合物或其鹽或溶劑化物在生產(chǎn)用于治療哺乳動(dòng)物中不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)的藥品中的用途。
本發(fā)明還涉及使用本文所述的一般合成方法A、B、C、D、E、F、G、H和I中和本文特定實(shí)施方式中所示的方法來(lái)制造本文所述的化合物的方法。
本發(fā)明還涉及用作為藥品的上文所述的任何化合物或其鹽或溶劑化物。本發(fā)明還涉及上文所述的任何化合物或其鹽或溶劑化物用于生產(chǎn)用于治療不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)的藥品的用途。
發(fā)明詳述 在本文中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“包含”和“包括”以其開(kāi)放式的、非限制性的含義使用。
術(shù)語(yǔ)“鹵代”和/或“鹵”指氟、氯、溴或碘。
術(shù)語(yǔ)“氧代”在本文中使用時(shí)表示與烷基、環(huán)烷基或雜環(huán)烷基上的碳原子通過(guò)雙鍵共價(jià)結(jié)合的氧，由此使得碳以sp2雜化形式存在，并且得到的官能團(tuán)是酮。
術(shù)語(yǔ)“C1-C6烷基”指飽和的脂肪族碳?xì)浠鶊F(tuán)，其包括1至6個(gè)碳原子的直鏈和帶支鏈的基團(tuán)。C1至C6烷基的例子包括甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基等。
術(shù)語(yǔ)“C2-C8烯基”在本文中使用時(shí)表示包含2至8個(gè)碳并且具有至少一個(gè)碳碳雙鍵的烷基基元。此類(lèi)基團(tuán)中的碳碳雙鍵可位于2至8個(gè)碳的鏈上任何能導(dǎo)致產(chǎn)生穩(wěn)定化合物的位置。此類(lèi)基團(tuán)包括所述烯基基元的E和Z異構(gòu)體。此類(lèi)基團(tuán)的例子包括但不限于乙烯基、丙烯基、丁烯基、烯丙基和戊烯基。術(shù)語(yǔ)“烯丙基”在本文中使用時(shí)表示-CH2CH＝CH2基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“C(R)＝C(R)”在本文中使用時(shí)代表其中每個(gè)碳被R基團(tuán)取代的碳碳雙鍵。
在本文中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“C2-C8炔基”表示包含2至8個(gè)碳原子并且具有至少一個(gè)碳碳三鍵的烷基基元。此類(lèi)基團(tuán)中的碳碳三鍵可位于2至8個(gè)碳的鏈上任何能導(dǎo)致產(chǎn)生穩(wěn)定化合物的位置。此類(lèi)基團(tuán)的例子包括但不限于乙炔、丙炔、1-丁炔、2-丁炔、1-戊炔、2-戊炔、1-己炔、2-己炔和3-己炔。
術(shù)語(yǔ)“C1-C6烷氧基”在本文中使用時(shí)表示O-烷基，其中，所述烷基含有1至6個(gè)碳原子，其是直鏈的、帶支鏈的或環(huán)狀的?；蛘撸癈1-C6烷氧基”在本文中可與“-O-C1-C6烷基”互換使用。此類(lèi)基團(tuán)的例子包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、環(huán)戊氧基和環(huán)己氧基。
術(shù)語(yǔ)“C1-C11雜烷基”指鏈中具有總共2至12個(gè)原子的直鏈或帶支鏈的烷基，其中包括1至11個(gè)碳原子以及選自S、O和N的一個(gè)或多個(gè)雜原子，并且所述鏈不可含有兩個(gè)相鄰的O原子或兩個(gè)相鄰的S原子。所述鏈中的S原子可任選被一個(gè)或兩個(gè)氧原子氧化，從而分別提供硫化物和砜。此外，本發(fā)明的化合物中的C1-C11雜烷基可在將能導(dǎo)致產(chǎn)生穩(wěn)定化合物的任何碳或雜原子上含有氧代基團(tuán)。示例性的C1-C11雜烷基包括但不限于醇，烷基醚，伯烷基胺、仲烷基胺和叔烷基胺，酰胺，酮，酯，硫化物和砜。
術(shù)語(yǔ)“C6-C14芳基”在本文中使用時(shí)表示含有6至14個(gè)碳原子的源于芳香烴的基團(tuán)，其可以是，例如，單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)的。此類(lèi)基團(tuán)的例子包括但不限于苯基或萘基。術(shù)語(yǔ)“Ph”和“苯基”在本文中使用時(shí)表示-C6H5基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“芐基”在本文中使用時(shí)表示-CH2C6H5基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“C6-C14芳氧基”在本文中使用時(shí)表示O-芳基，其中，所述芳基是含有6至14個(gè)碳原子的源于芳香烴的基團(tuán)，其可以是，例如，單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)的?；蛘?，“C6-C14芳氧基”在本文中與“-O-C6-C14芳基”可互換使用。此類(lèi)基團(tuán)的例子包括但不限于苯氧基(phenolyl)或萘氧基(naphtholyl)。
術(shù)語(yǔ)“-S-C6-C14芳基”在本文中使用時(shí)表示S-芳基，其中，所述芳基是含有6至14個(gè)碳原子的源于芳香烴的基團(tuán)，其可以是，例如，單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)的。
“C2-C9雜芳基”在本文中使用時(shí)表示在其環(huán)中具有總共5至10個(gè)原子的雜環(huán)基團(tuán)，其含有2至9個(gè)碳原子以及1至4個(gè)雜原子，所述雜原子每個(gè)獨(dú)立選自O(shè)、S和N，并且所述基團(tuán)的環(huán)不含兩個(gè)相鄰的O原子或兩個(gè)相鄰的S原子。雜環(huán)基包括苯并融合的環(huán)系統(tǒng)。芳香族雜環(huán)基的例子是吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異惡唑基、噻唑基、惡唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、中氮茚基、酞嗪基、噠嗪基、三嗪基、異吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、惡二唑基、噻重氮基、呋咱基(furazanyl)、苯并呋咱基、苯并硫代苯基、苯并噻唑基、苯并惡唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、1H-吡咯并[2，3-b]吡啶基、1H-吡唑并[3，4-b]吡啶基、3H-咪唑并[4，5-b]吡啶基、咪唑并[1，2-a]嘧啶基和呋吡啶基(furopyridinyl)。在可能的情況下，C4至C9雜芳基可以是C-連結(jié)的或N-連結(jié)的。例如，源于吡咯的基團(tuán)可以是吡咯-1-基(N-連結(jié)的)或吡咯-3-基(C-連結(jié)的)。此外，源于咪唑的基團(tuán)可以是咪唑-1-基(N-連結(jié)的)或咪唑-3-基(C-連結(jié)的)。
“C2-C9雜環(huán)烷基”在本文中使用時(shí)表示在其環(huán)系統(tǒng)中具有4至13個(gè)原子的非芳香族的、單環(huán)的、二環(huán)的、三環(huán)的、螺環(huán)的或四環(huán)的基團(tuán)，其含有2至9個(gè)碳原子和1至4個(gè)雜原子，所述雜原子每個(gè)獨(dú)立選自O(shè)、S和N，并且所述基團(tuán)的環(huán)不含兩個(gè)相鄰的O原子或兩個(gè)相鄰的S原子。此外，此類(lèi)C2至C9雜環(huán)烷基可在能導(dǎo)致產(chǎn)生穩(wěn)定化合物的任何可利用的原子上含有氧代取代基。例如，此類(lèi)基團(tuán)可在可利用的碳或氮原子上含有氧原子。如果化學(xué)上可行的話，此類(lèi)基團(tuán)可含有超過(guò)一個(gè)氧代取代基。此外，應(yīng)當(dāng)理解，當(dāng)此類(lèi)C2至C9雜環(huán)烷基含有硫原子時(shí)，所述硫原子可經(jīng)一個(gè)或兩個(gè)氧原子氧化，從而提供亞砜或砜。4元雜環(huán)烷基的例子是吖丁啶基(源于吖丁啶)。5元雜環(huán)烷基的例子是吡咯烷基。6元雜環(huán)烷基的例子是哌啶基。9元雜環(huán)烷基的例子是吲哚啉基。10元雜環(huán)烷基的例子是4H-喹嗪基。此類(lèi)C2至C9雜環(huán)烷基的其它例子包括但不限于四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫硫代吡喃基、哌啶代(piperidino)、嗎啉代(morpholino)、硫代嗎啉代、噻惡基、哌嗪基、吖丁啶基、氧雜環(huán)丁基、噻呾基(thietanyl)、高哌啶基、惡庚烷基(oxepanyl)、噻庚烷基(thiepanyl)、氧氮雜卓基(oxazepinyl)、二氮雜卓基、硫氮雜卓基(thiazepinyl)、1，2，3，6-四氫吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二惡烷基、1，3-二氧戊環(huán)基(dioxolanyl)、吡唑啉基(pyrazolinyl)、二噻烷基(dithianyl)、二硫戊環(huán)基(dithiolanyl)、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基(imidazolinyl)、咪唑烷基(imidazolidinyl)、3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己基、3-氮雜雙環(huán)[4.1.0]庚基、3H-吲哚基、喹嗪基、3-氧代哌嗪基、4-甲基哌嗪基、4-乙基哌嗪基、1-氧代-2，8，二氮雜螺[4.5]癸-8-基、1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2(3H)-酮、2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶基和6，7-二氫-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶基。
術(shù)語(yǔ)“C3-C8環(huán)烷基”表示具有3至8個(gè)碳環(huán)原子的飽和、單環(huán)、融合、螺環(huán)或多環(huán)結(jié)構(gòu)。此類(lèi)基團(tuán)的例子包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)庚基和金剛烷基。
術(shù)語(yǔ)“氰基”指-C≡N基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“經(jīng)取代的”表示指代的基團(tuán)或基元具有一個(gè)或多個(gè)取代基。術(shù)語(yǔ)“未經(jīng)取代的”表示指代的基團(tuán)不具有取代基。術(shù)語(yǔ)“任選經(jīng)取代的”表示指代的基團(tuán)是未經(jīng)取代的或經(jīng)一個(gè)或多個(gè)取代基取代的。應(yīng)當(dāng)理解，在本發(fā)明的化合物中，當(dāng)基團(tuán)被描述為“未經(jīng)取代的”或經(jīng)少于填滿化合物所有原子的價(jià)數(shù)的基團(tuán)“取代”時(shí)，此類(lèi)基團(tuán)上剩余的價(jià)數(shù)被氫填滿。例如，如果C6芳基(本文中也被稱為“苯基”)經(jīng)另一取代基取代時(shí)，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將理解，此類(lèi)基團(tuán)在C6芳基環(huán)的碳原子上剩有4個(gè)開(kāi)放位置(6個(gè)最初位置，減去與本發(fā)明的化合物剩余部分鍵合的1個(gè)，減去另一取代基，還剩4個(gè))。在此類(lèi)情況下，剩下的4個(gè)碳原子每個(gè)與一個(gè)氫原子結(jié)合，以填滿其價(jià)數(shù)。類(lèi)似地，如果本發(fā)明化合物中的C6芳基被描述為“經(jīng)二取代的”，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將理解，這表示C6芳基剩有3個(gè)未經(jīng)取代的碳原子。這三個(gè)未經(jīng)取代的碳原子每個(gè)與一個(gè)氫原子結(jié)合，以填滿其價(jià)數(shù)。
術(shù)語(yǔ)“溶劑化物”被用于描述本發(fā)明的化合物與溶劑分子之間的分子復(fù)合物。溶劑化物的例子包括但不限于本發(fā)明的化合物與水、異丙醇、乙醇、甲醇、二甲亞砜(DMSO)、乙酸乙酯、乙酸、乙醇胺或其混合物組合。當(dāng)溶劑是水時(shí)，可以使用術(shù)語(yǔ)“水合物”。特別地，本發(fā)明中，一個(gè)溶劑分子可與本發(fā)明的化合物的一個(gè)分子結(jié)合，例如，水合物。此外，特別地，本發(fā)明中，超過(guò)一個(gè)溶劑分子可與本發(fā)明的化合物的一個(gè)分子結(jié)合，例如，二水合物。此外，特別地，本發(fā)明中，少于一個(gè)溶劑分子可與本發(fā)明的化合物的一個(gè)分子結(jié)合，例如，半水合物。此外，本發(fā)明的溶劑化物可以是本發(fā)明化合物的保留了化合物非水合物形式的生物有效性的溶劑化物。
術(shù)語(yǔ)“可藥用鹽”在本文中使用時(shí)表示本發(fā)明的化合物的鹽，其保留有提到的衍生物的游離酸和游離堿的生物有效性，并且在生物上或其它方面并非不合需要的。
術(shù)語(yǔ)“可藥用制劑”在本文中使用時(shí)表示本發(fā)明的化合物或其鹽或溶劑化物與和本發(fā)明的化合物相容的載體、稀釋劑和/或賦形劑的組合，并且其對(duì)其接受者來(lái)說(shuō)是無(wú)害的。藥物制劑可通過(guò)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的流程來(lái)制備。例如，可將本發(fā)明的化合物與常見(jiàn)賦形劑、稀釋劑或載體一起配制，制成片劑、膠囊等。適用于此類(lèi)制劑的賦形劑、稀釋劑和載體的例子包括下述這些填料和增補(bǔ)劑，例如淀粉、糖、山梨糖醇和硅衍生物；粘合劑，例如羧甲基纖維素和其它纖維素衍生物、褐藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮；保濕劑(moisturizing agents)，例如甘油；崩解劑，例如聚維酮、乙醇酸淀粉鈉、羧甲基纖維素鈉、瓊脂、碳酸鈉和碳酸氫鈉；用于延遲分解的試劑，例如石蠟；再吸收加速劑，例如季銨化合物；表面活性劑，例如鯨蠟醇、甘油單硬脂酸酯；吸附性載體，例如，高嶺土和斑脫土以及潤(rùn)滑劑，例如，滑石、硬脂酸鎂和硬脂酸鈣以及固體聚乙二醇。最終的藥物形式可以是丸劑、片劑、粉末、錠劑、小袋(saches)、藥包或無(wú)菌包裝粉末等，這取決于使用的賦形劑的類(lèi)型。此外，特別地，本發(fā)明的可藥用制劑可含有超過(guò)一種活性成分。例如，此類(lèi)制劑可含有超過(guò)一種根據(jù)本發(fā)明的化合物?；蛘?，此類(lèi)制劑可含有本發(fā)明的一種或多種化合物以及降低不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)的一種或多種其它試劑。
術(shù)語(yǔ)“Raf-抑制量”在本文中使用時(shí)指抑制Raf體內(nèi)(例如哺乳動(dòng)物中)或體外酶活性所需的本發(fā)明化合物或其鹽或溶劑化物的量。使用本文所述的方法以及本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法，無(wú)需過(guò)多實(shí)驗(yàn)，即可確定產(chǎn)生此類(lèi)抑制所需的此類(lèi)化合物的量。
術(shù)語(yǔ)“抑制Raf酶活性”在本文中使用時(shí)表示通過(guò)將酶與本發(fā)明的化合物接觸，減少Raf酶體外或體內(nèi)(例如哺乳動(dòng)物中，例如人中)的活性或功能。
術(shù)語(yǔ)“Raf”在本文中使用時(shí)表示a-Raf、b-Raf、c-Raf或其突變體或者任何已知的Raf同工剪接變體。
術(shù)語(yǔ)“治療有效量”在本文中使用時(shí)表示當(dāng)使用給需要此類(lèi)治療的哺乳動(dòng)物時(shí)，足以有效治療的本發(fā)明化合物或其鹽或溶劑化物的量。因此，本發(fā)明的化合物或其鹽或溶劑化物的治療有效量是足以調(diào)節(jié)或抑制Raf酶活性從而使得受Raf酶活性介導(dǎo)的疾病病況降低或消失的量。
在提到哺乳動(dòng)物(特別是人)中不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)或任何Raf介導(dǎo)的疾病或病況時(shí)，術(shù)語(yǔ)“治療”及其各種詞性形式包括(i)預(yù)防受試者中出現(xiàn)可能是所述病況易感的疾病或病況，使得治療成為針對(duì)病理性病況的預(yù)防性治療；(ii)調(diào)節(jié)或抑制所述疾病或病況，即，阻止其發(fā)展；(iii)減輕疾病或病況，即，使得疾病或病況逆轉(zhuǎn)；或(iv)減輕和/或緩和疾病或病況或疾病或病況導(dǎo)致的癥狀，例如，減輕炎性應(yīng)答，而不觸及根本的疾病或病況。在不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)(例如癌癥)的方面，這些術(shù)語(yǔ)簡(jiǎn)單地表示，受不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)影響的個(gè)體的壽命預(yù)期將增加，或者疾病的一種或多種癥狀將被降低。
除非另有指明，本文中提到本發(fā)明化合物的所有地方都包括其鹽、溶劑化物和復(fù)合物，包括其無(wú)定形體、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體和經(jīng)同位素標(biāo)記的版本。例如，本發(fā)明的化合物可以是可藥用鹽和/或可藥用溶劑化物。
除非另有指明，“不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)”在本文中使用時(shí)指獨(dú)立于正常調(diào)控機(jī)制的細(xì)胞生長(zhǎng)(例如，缺乏直接抑制)，其包括正常細(xì)胞的不正常生長(zhǎng)和不正常細(xì)胞的生長(zhǎng)。這包括但不限于下述物質(zhì)的不正常生長(zhǎng)通過(guò)表達(dá)突變的酪氨酸激酶或過(guò)量表達(dá)受體酪氨酸激酶增殖的腫瘤細(xì)胞(腫瘤)；其中發(fā)生異常酪氨酸激酶活化的其它增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞；通過(guò)受體酪氨酸激酶增殖的任何腫瘤；通過(guò)異常絲氨酸/蘇氨酸激酶活化增殖的任何腫瘤；其中發(fā)生異常絲氨酸/蘇氨酸激酶活化的其它增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞；表達(dá)活化的Ras癌基因的良性和惡性腫瘤；其中Ras蛋白由于其它基因的致瘤突變而被活化的良性和惡性腫瘤細(xì)胞；其中發(fā)生異常Ras活化的其它增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞。此類(lèi)良性增殖性疾病的例子是牛皮癬、良性前列腺肥大、人乳頭瘤病毒(HPV)和再狹窄(restinosis)?！安徽５募?xì)胞生長(zhǎng)”還表示和包括法呢基(farnesyl)蛋白轉(zhuǎn)移酶的活性導(dǎo)致的良性和惡性細(xì)胞的不正常的生長(zhǎng)。
術(shù)語(yǔ)“不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)”和“過(guò)度增殖性病癥”在本申請(qǐng)中可互換使用。
術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)體”指具有相同化學(xué)組成但是其原子或基團(tuán)空間排列不同的化合物。特別地，術(shù)語(yǔ)“對(duì)映異構(gòu)體”指化合物的兩種立體異構(gòu)體，它們互為不可重疊的鏡像。術(shù)語(yǔ)“外消旋”或“外消旋混合物”在本文中使用時(shí)指特定化合物的對(duì)映異構(gòu)體的1∶1混合物。另一方面，術(shù)語(yǔ)“非對(duì)映異構(gòu)體”指立體異構(gòu)體對(duì)之間存在下述關(guān)系它們包含兩個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心，并且互相不為鏡像。
本發(fā)明的化合物可用于調(diào)節(jié)或抑制Raf活性。因此，這些化合物可單獨(dú)或與其它抗癌試劑組合，用于預(yù)防和/或治療與不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)的疾病狀態(tài)，例如，癌癥。
根據(jù)用于本領(lǐng)域的傳統(tǒng)，符號(hào)

在本文的結(jié)構(gòu)式中用于表示基元或取代基與核心或主干結(jié)構(gòu)連結(jié)點(diǎn)處的鍵。根據(jù)另一傳統(tǒng)，在本文的一些結(jié)構(gòu)式中，碳原子及其結(jié)合的氫原子不明確示出，例如

代表乙基，以及

代表環(huán)戊基等。
本發(fā)明的化合物可具有不對(duì)稱碳原子。本文中可使用實(shí)線

(——)、實(shí)楔形

或虛楔形

來(lái)描述本發(fā)明的化合物的碳碳鍵。使用實(shí)線來(lái)描述與不對(duì)稱碳原子的鍵表示包括該碳原子處所有可能的立體異構(gòu)體(例如，特定的對(duì)映異構(gòu)體、外消旋混合物等)。使用實(shí)或虛的楔形來(lái)描述與不對(duì)稱碳原子的鍵表示僅包括示出的立體異構(gòu)體。本發(fā)明的化合物可能含有超過(guò)一個(gè)不對(duì)稱碳原子。在這些化合物中，使用實(shí)線來(lái)描述與不對(duì)稱碳原子的鍵表示包括所有可能的立體異構(gòu)體。例如，除非另有指明，本發(fā)明的化合物可作為對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體存在或作為外消旋體及其混合物存在。使用實(shí)線來(lái)描述本發(fā)明的化合物中與一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱碳原子的鍵，并且使用實(shí)或虛的楔形來(lái)描述與同一化合物中其它不對(duì)稱碳原子的鍵表示存在非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。
用于制備/分離各對(duì)映異構(gòu)體的傳統(tǒng)技術(shù)包括從合適的光學(xué)純的前體進(jìn)行手性合成或使用例如手性高壓液相色譜(HPLC)來(lái)拆分外消旋物。或者，可將外消旋物(或外消旋前體)與合適的光學(xué)純的化合物(例如醇)反應(yīng)，或者，當(dāng)式(I)化合物含有酸性或堿性基元時(shí)，將其與堿或酸(例如酒石酸或1-苯乙胺)反應(yīng)?？赏ㄟ^(guò)色譜和/或分級(jí)分離結(jié)晶來(lái)分離得到的非對(duì)映異構(gòu)混合物，以及通過(guò)技術(shù)人員公知的手段，將非對(duì)映異構(gòu)體中之一或兩者轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的純對(duì)映異構(gòu)體?？衫糜蔁N類(lèi)(典型地，庚烷或己烷)構(gòu)成的移動(dòng)相(含有0至50％的異丙醇，典型地，2至20％的異丙醇，以及含有0至5％的烷基胺，典型地，0.1％的二乙基胺)在不對(duì)稱樹(shù)脂上使用色譜(典型地，HPLC)來(lái)獲得本發(fā)明的對(duì)映體富集形式的手性化合物(及其手性前體)。對(duì)洗出液的濃縮提供了富集的混合物?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的傳統(tǒng)技術(shù)來(lái)分離對(duì)映異構(gòu)聚集物(conglomerate)。見(jiàn)，例如“Stereochemistry of Organic Compounds”by EL Eliel(Wiley，New York，1994)，其公開(kāi)內(nèi)容通過(guò)引用整體并入本文。
當(dāng)本發(fā)明的化合物含有烯基或亞烯基時(shí)，可能有幾何順/反(或Z/E)異構(gòu)體。當(dāng)化合物含有例如酮或肟基或芳香族基元時(shí)，可能存在互變性的異構(gòu)(“互變異構(gòu)”)?；プ儺悩?gòu)的例子包括酮和烯醇互變異構(gòu)體。單種化合物可展現(xiàn)出超過(guò)一種類(lèi)型的異構(gòu)現(xiàn)象。本發(fā)明的范圍內(nèi)包括本發(fā)明化合物的所有立體異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，其包括展示出超過(guò)一種類(lèi)型的異構(gòu)現(xiàn)象的化合物以及其一種或多種的混合物?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的傳統(tǒng)技術(shù)(例如色譜和分級(jí)分離結(jié)晶)來(lái)分離順/反異構(gòu)體。
本發(fā)明的化合物可作為前藥使用。因此，式(I)化合物的某些本身可能并不具有或僅有極少的藥理學(xué)活性的衍生物施用至哺乳動(dòng)物時(shí)，可轉(zhuǎn)化為具有想要的活性的式(I)化合物，例如通過(guò)水解切割來(lái)轉(zhuǎn)化。此類(lèi)衍生物被稱為“前藥”?？衫缤ㄟ^(guò)用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的某些基元替換式(I)化合物中存在的合適官能團(tuán)，來(lái)生產(chǎn)前藥。見(jiàn)，例如“Pro-drugs asNovel Delivery Systems”，Vol.14，ACS Symposium Series(T Higuchi and WStella)和“Bioreversible Carriers in Drug Design”，Pergamon Press，1987(ed.EB Roche，American Pharmaceutical Association)，其公開(kāi)內(nèi)容通過(guò)引用整體并入本文。此類(lèi)前藥的一些例子包括代替羧酸官能基團(tuán)的酯基元；代替醇官能基團(tuán)的醚基元或酰胺基元；以及代替伯或仲氨基官能基團(tuán)的酰胺基元。替換基團(tuán)的其它例子是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，見(jiàn)，例如HBundgaard的“Design of Prodrugs″(Elsevier，1985)，其公開(kāi)內(nèi)容通過(guò)引用整體并入本文。某些式(I)化合物本身也可能作為其它式(I)化合物的前藥發(fā)揮作用。
本發(fā)明的鹽可根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法來(lái)制備。鹽的例子包括但不限于乙酸鹽、丙烯酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽(例如氯代苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽和甲氧基苯甲酸鹽)、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、重亞硫酸鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、依地酸鈣、右旋樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、氯化鹽、己酸鹽、辛酸鹽、棒酸鹽、檸檬酸鹽、癸酸鹽、二氫氯化鹽、磷酸二氫鹽、用含有想要的藥理上可接受的陽(yáng)離子的水性溶液處理相應(yīng)的酸性化合物，然后將得到的溶液蒸發(fā)至干(優(yōu)選在減壓下)，來(lái)制備這些鹽?；蛘?，還可通過(guò)將酸性化合物的低級(jí)烷醇(alkanolic)溶液與想要的堿金屬醇鹽混合到一起，然后按照與前文所述相同的方式將得到的溶液蒸發(fā)至干，來(lái)制備它們?；蛘?，優(yōu)選使用化學(xué)計(jì)量量的試劑，以確保反應(yīng)完成并且想要的終產(chǎn)物產(chǎn)率最大。
如果本發(fā)明的化合物是堿，可通過(guò)本領(lǐng)域任何合適的方法來(lái)制備想要的鹽，例如，用無(wú)機(jī)酸(例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等)或有機(jī)酸(例如，乙酸，馬來(lái)酸，琥珀酸，扁桃酸，延胡索酸，丙二酸，丙酮酸，草酸，乙醇酸，水楊酸，吡喃糖苷酸，例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸，α-羥基酸，例如檸檬酸或酒石酸，氨基酸，例如天冬氨酸或谷氨酸，芳香族酸，例如苯甲酸或肉桂酸，磺酸，例如對(duì)甲基苯磺酸或乙烷磺酸等)處理游離堿。
如果本發(fā)明的化合物是酸，可通過(guò)任何合適的方法來(lái)制備想要的鹽，例如，用無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿(例如，胺(伯胺、仲胺或叔胺)、堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物等)處理游離酸。合適的鹽的示例性例子包括源于氨基酸(例如甘氨酸和精氨酸)，氨，伯胺、仲胺和叔胺以及環(huán)胺(例如哌啶、嗎啉和哌嗪)的有機(jī)鹽和源于鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁和鋰的無(wú)機(jī)鹽。
在固體試劑的情況下，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，試劑和鹽可以以不同的晶型或無(wú)定形存在，所有這些都落入本發(fā)明和給出的結(jié)構(gòu)式的范圍。
本發(fā)明還包括經(jīng)同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物，其中，一個(gè)或多個(gè)原子被具有相同原子序數(shù)但是原子量或質(zhì)量數(shù)不同于在自然界中通常發(fā)現(xiàn)的原子量或質(zhì)量數(shù)的原子替換。適于包括進(jìn)本發(fā)明化合物的同位素的例子包括氫的同位素，例如2H和3H，碳的同位素，例如11C、13C和14C，氯的同位素，例如36Cl，氟的同位素，例如18F，碘的同位素，例如123I和125I，氮的同位素，例如13N和15N，氧的同位素，例如15O、17O和18O，磷的同位素，例如32P和硫的同位素，例如35S。某些經(jīng)同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物，例如，摻入了放射性同位素的那些，可用于藥物和/或底物的組織分布依地酸鹽(edetate)、乙二磺酸(edislyate)、依托酸鹽(estolate)、乙磺酸鹽(esylate)、乙基琥珀酸鹽、甲酸鹽，延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽(gluceptate)、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇酸鹽、乙醇酰對(duì)氨基苯基砷酸鹽(glycollylarsanilate)、庚酸鹽(heptanoate)、己炔-1，6-二酸鹽、己基間苯二酚鹽(hexylresorcinate)、哈胺(hydrabamine)、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、碘化鹽、異丁酸鹽、異硫代硫酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽(lactobionate)、月桂酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、馬來(lái)酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、偏磷酸鹽、甲烷-磺酸鹽、甲基硫酸鹽、磷酸氫鹽、粘液酸鹽(mucate)、萘磺酸鹽(napsylate)、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、pamoate(恩波酸鹽(embonate))、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、苯乙酸鹽、苯基丁酸鹽、苯基丙酸鹽、酞酸鹽、磷酸鹽/二磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙磺酸鹽、丙酸鹽、丙炔酸鹽、焦磷酸鹽、焦硫酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式乙酸鹽、辛二酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽、亞硫酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、8-氯茶堿鹽、甲苯磺酸鹽(tosylate)、三乙基碘鹽(triethiodode)和戊酸鹽。
本身為堿性的本發(fā)明化合物能與若干無(wú)機(jī)和有機(jī)酸形成多種不同的鹽。雖然此類(lèi)鹽應(yīng)當(dāng)可藥用施用至動(dòng)物，但在實(shí)踐中通常需要首先從反應(yīng)混合物中分離作為不可藥用的鹽的本發(fā)明化合物，然后通過(guò)堿試劑處理簡(jiǎn)單地將不可藥用的鹽轉(zhuǎn)化回游離堿化合物，隨后將游離堿轉(zhuǎn)化為可藥用的酸加成鹽。可通過(guò)在水性溶劑媒介或合適的有機(jī)溶劑(例如甲醇或乙醇)中，用基本上等當(dāng)量的選定的礦物酸或有機(jī)酸處理堿化合物，來(lái)制備本發(fā)明的堿化合物的酸加成鹽。溶劑蒸發(fā)后，獲得想要的固體鹽。還可通過(guò)向溶液中加入合適的礦物酸或有機(jī)酸，從游離堿在有機(jī)溶劑中的溶液沉淀出想要的酸鹽。
本身為酸性的本發(fā)明化合物能與多種藥理上可接受的陽(yáng)離子形成堿鹽。此類(lèi)鹽的離子包括堿金屬或堿土金屬鹽，特別地，鈉鹽和鉀鹽。這些鹽全都可以通過(guò)傳統(tǒng)技術(shù)來(lái)制備。用作為試劑制備本發(fā)明的可藥用堿鹽的化學(xué)堿是與本發(fā)明的酸性化合物形成無(wú)毒堿鹽的那些。此類(lèi)無(wú)毒堿鹽包括源于藥理上可接受的陽(yáng)離子(例如，鈉、鉀、鈣和鎂等)的那些。可通過(guò)研究。放射性同位素氚(即3H)和碳-14(即14C)特別適用于該目的，因?yàn)樗鼈円子趽饺氩⑶胰菀妆粰z測(cè)。用較重的同位素(例如氘，即2H)進(jìn)行取代可提供某些治療好處(由于更好的代謝穩(wěn)定性)，例如，增加的體內(nèi)半壽期或者降低的劑量需求，因此，在某些情況下這可能是優(yōu)選的。用發(fā)射正電子的同位素(例如11C、18F、15O和13N)進(jìn)行取代可用于正電子發(fā)射拓?fù)?PET)研究，以檢查底物受體占有情況(occupancy)。
通?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的傳統(tǒng)技術(shù)或與本文所述的類(lèi)似工藝，使用合適的經(jīng)同位素標(biāo)記的試劑代替之前所用的未經(jīng)標(biāo)記的試劑，來(lái)制備經(jīng)同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物。
可按照下文所述將本發(fā)明的化合物配制為本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)可為合適的任何藥物形式的藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物包括治療有效量的至少一種本發(fā)明的化合物和惰性的可藥用載體或稀釋劑。
為治療或預(yù)防Raf介導(dǎo)的疾病或病況，施用本發(fā)明的藥物組合物的合適制劑，所述制劑是通過(guò)將治療有效量(即，能有效實(shí)現(xiàn)治療效果的Raf調(diào)節(jié)、調(diào)控或抑制量)的至少一種本發(fā)明化合物(作為活性成分)與一種或多種藥物上合適的載體組合來(lái)制備的，所述載體可選自，例如，稀釋劑、賦形劑和助劑，它們能協(xié)助將活性化合物加工成最終的藥物制備物。
使用的藥物載體可以是固體或液體的。示例性的固體載體是乳糖、蔗糖、云母、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂、硬脂酸等。示例性的液體載體是糖漿、花生油、橄欖油、水等。類(lèi)似地，本發(fā)明的組合物可包括本領(lǐng)域已知的延遲釋放(time-delay)或緩釋(time-release)材料，例如，單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯(單獨(dú)或與蠟一起)、乙基纖維素、羥丙甲基纖維素、甲基丙烯酸甲酯等?？杉尤肫渌砑觿┗蛸x形劑，以獲得想要的制劑性質(zhì)。例如，可加入生物利用性增強(qiáng)劑，例如，Labrasol、Gelucire等，或者配制劑(formulator)，例如CMC(羧甲基纖維素)、PG(丙二醇)或PEG(聚乙二醇)?？杉尤?

其是半固體介體(vehicle)，能保護(hù)活性成分，抵擋光、水分和氧化，其例如可在制備膠囊制劑時(shí)加入。
如果使用固體載體，制劑可以是片劑、以粉末或沉淀物形式置于硬明膠膠囊中或配制為藥錠(troche)或錠劑。固體載體的量可有所變化，但通常為大約25mg至大約1g。如果使用液體載體，制劑可以是糖漿、乳液、軟明膠膠囊、安瓿或小管(vial)中的無(wú)菌注射液或懸浮液，或非水性液體懸浮液的形式。如果使用半固體載體，制劑可以是硬明膠膠囊和軟明膠膠囊制劑的形式。本發(fā)明的組合物可以被制備為適于施用模式(例如非腸道或口服施用)的單位劑型。
為獲得穩(wěn)定的水可溶性劑型，可將本發(fā)明的化合物的鹽溶解于有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸的水性溶液中，例如，0.3M琥珀酸或檸檬酸溶液中。如果不可獲得可溶的鹽形式，可將試劑溶解于合適的共溶劑或共溶劑組合中。合適的共溶劑的例子包括乙醇、丙二醇、聚乙二醇300、聚山梨醇酯80、甘油等，其濃度在總體積的0至60％范圍內(nèi)。在一種示例性的實(shí)施方式中，將本發(fā)明的化合物溶于DMSO并用水稀釋。組合物還可以是活性成分的鹽形式處于合適的水性介體(例如水或等滲鹽水或右旋葡萄糖溶液)中的溶液的形式。
適合的制劑取決于所選擇的施用途徑。對(duì)注射而言，本發(fā)明的化合物的試劑可被配制進(jìn)水性溶液，優(yōu)選配制進(jìn)生理相容緩沖液，例如Hanks溶液、Ringer’s溶液或生理鹽水緩沖液。對(duì)于透粘膜施用而言，適于穿透屏障的滲透劑(penetrants)用于制劑中。此類(lèi)滲透劑是本領(lǐng)域通常已知的。
對(duì)于口服施用而言，可通過(guò)將活性化合物與本領(lǐng)域已知的可藥用載體組合，來(lái)配制化合物。此類(lèi)載體能使本發(fā)明的化合物被配制為用于待治療的受試者口服攝入的片劑、丸劑、糖衣丸、膠囊、液體、凝膠、糖漿、漿體、懸浮液等?？稍谂c活性成分(試劑)的預(yù)混合物中使用固體賦形劑，任選地磨碎得到的混合物，如果需要的話，在加入合適的助劑之后對(duì)顆粒混合物進(jìn)行加工，獲得片劑或糖衣丸的核心，這樣來(lái)獲得用于口服使用的藥物制劑。合適的賦形劑包括填料，例如，糖，包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇；以及纖維素制備物，例如，玉米淀粉、小麥淀粉、水稻淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、樹(shù)膠、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要的話，可加入崩解劑，例如經(jīng)交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或褐藻酸或其鹽(例如褐藻酸鈉)。
向糖衣丸核心提供合適的包衣。就此目的而言，可使用經(jīng)濃縮的糖溶液，其可任選含有阿拉伯膠、聚乙烯吡咯烷酮、Carbopol膠、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液和合適的有機(jī)溶劑或溶劑混合物。可向片劑或糖衣丸包衣加入染料或色素，用于辨認(rèn)或用于標(biāo)示活性試劑的不同組合。
可口服使用的藥物制備物包括由明膠制成的推填式(push-fit)膠囊以及由明膠和增塑劑(例如甘油或山梨糖醇)制成的軟密封膠囊。推填式膠囊可含有與填料(例如乳糖)、粘合劑(例如淀粉)和/或潤(rùn)滑劑(例如云母或硬脂酸鎂)以及任選的穩(wěn)定劑預(yù)混合的活性成分。在軟膠囊中，活性成分可溶解或懸浮于合適的液體(例如脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇)中。此外，可加入穩(wěn)定劑。用于口服施用的所有制劑都應(yīng)當(dāng)是適于此類(lèi)施用的劑量。對(duì)于經(jīng)頰施用而言，組合物可采取以傳統(tǒng)方式配制的片劑或錠劑的形式。
對(duì)于鼻內(nèi)施用或吸入施用而言，根據(jù)本發(fā)明使用的化合物可方便地以氣溶膠噴霧的形式從加壓包裝或霧化器遞送，其中使用合適的推進(jìn)劑，例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳和其它合適的氣體。加壓氣溶膠的情況下，可通過(guò)提供閥遞送經(jīng)計(jì)量的量，來(lái)確定劑量單位。用于吸入器或吹藥器(insufflator)的膠囊或藥筒(cartridges)可被配制為含有化合物和合適的粉末基底(例如，乳糖或淀粉)的粉末混合物。
化合物可被配制，用于通過(guò)注射進(jìn)行非腸道施用，例如通過(guò)推注(bolus injection)或連續(xù)輸注。用于注射的制劑可以以單位劑型存在，例如安瓿，或以多劑量容器形式存在(含有加入的防腐劑)。組合物可采取處于油性或水性介體中的懸浮液、溶液或乳液的形式，并且可含有配制性試劑，例如懸浮、穩(wěn)定和/或分散試劑。
用于非腸道施用的藥物制劑包括水溶形式的活性化合物的水性溶液。此外，活性試劑的懸浮液可被制備為合適的油性注射懸浮液。合適的親脂性溶劑或介體包括脂肪油，例如芝麻油，或合成脂肪酸酯，例如油酸乙酯或甘油三酸酯或脂質(zhì)體。水性注射懸浮液可含有增加懸浮液粘性的物質(zhì)，例如，羧甲基纖維素、山梨糖醇或葡聚糖(dextran)。任選地，懸浮液還可含有合適的穩(wěn)定劑或增加化合物溶解度的試劑，以允許制備出經(jīng)高度濃縮的溶液。
或者，活性成分可以是粉末形式的，以在使用前用合適的介體(例如無(wú)菌無(wú)熱原的水)來(lái)構(gòu)造。
除了上文所述的制劑之外，本發(fā)明的化合物還可被配制為貯存型(depot)制備物。此類(lèi)長(zhǎng)效制劑可通過(guò)植入(例如皮下或肌內(nèi))或通過(guò)肌內(nèi)注射施用。因此，例如，化合物可與合適的聚合物或疏水材料(例如，作為可接受的油中的乳液)或離子交換樹(shù)脂一起配制，或者作為微溶的衍生物，例如，作為微溶的鹽配制。用于疏水化合物的藥物載體是包含芐基醇、非極性表面活性劑、水可混溶的有機(jī)聚合物和水相的共溶劑體系。共溶劑體系可以是VPD共溶劑體系。VPD是3％w/v芐基醇、8％w/v非極性表面活性劑聚山梨醇酯80和65％w/v聚乙二醇300在純乙醇中定容的溶液。VPD共溶劑體系(VPD5W)含有用5％右旋葡萄糖水溶液1∶1稀釋的VPD。該共溶劑體系能較好地溶解疏水化合物，并且其自身在全身性施用時(shí)產(chǎn)生毒性較低。共溶劑體系的比例可適當(dāng)改變，而不會(huì)影響其溶解性和毒性特征。此外，共溶劑組分本身可有所變化，例如，可使用其它低毒性非極性表面活性劑來(lái)代替聚山梨醇酯80；聚乙二醇的級(jí)分大小可有所變化；其它生物相容的聚合物可代替聚乙二醇，例如，聚乙烯吡咯烷酮；以及其它糖或多糖可被右旋葡萄糖取代。
或者，可利用其它遞送系統(tǒng)用于疏水藥物化合物。脂質(zhì)體和乳液是用于疏水藥物的遞送介體或載體的已知例子。某些有機(jī)溶劑，例如二甲亞砜，也可使用，雖然通常由于DMSO的毒性本質(zhì)而有更大的毒性。此外，可使用持續(xù)釋放系統(tǒng)來(lái)遞送化合物，例如，含有治療劑的固體疏水聚合物的半透性基質(zhì)。已建立了多種持續(xù)釋放材料，它們是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。取決于其化學(xué)本質(zhì)，持續(xù)釋放膠囊可在數(shù)周至超過(guò)100天內(nèi)釋放化合物。取決于治療試劑的化學(xué)本質(zhì)和生物穩(wěn)定性，可利用額外的策略來(lái)穩(wěn)定蛋白。
藥物組合物還可包含合適的固體或凝膠相的載體或賦形劑。這些載體或賦形劑可在溶解性較差的藥物的生物可利用性方面提供顯著的改進(jìn)。此類(lèi)載體或賦形劑的例子包括碳酸鈣、磷酸鈣、糖、淀粉、纖維素衍生物、明膠和聚合物(例如聚乙二醇)。此外，可使用添加劑和賦形劑例如


等。
此外，藥物組合物可被包括進(jìn)皮膚貼片，用于將藥物直接遞送到皮膚上。
應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的試劑的劑量可根據(jù)使用的特定試劑、配制的特定組合物、施用模式和特定位點(diǎn)、宿主和治療的疾病而有所變化。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員使用傳統(tǒng)的劑量決定法測(cè)試，根據(jù)針對(duì)給定化合物的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，可確定針對(duì)給定條件組的最優(yōu)劑量。對(duì)于口服施用而言，使用的示例性每日劑量將在大約0.001至大約1000mg/kg體重之間，療程以合適的間隔重復(fù)。
此外，本發(fā)明的可藥用制劑可含有大約10mg至大約2000mg，或者大約10mg至大約1500mg，或者大約10mg至大約1000mg，或者大約10mg至大約750mg，或者大約10mg至大約500mg，或者大約25mg至大約500mg，或者大約50至大約500mg，或者大約100mg至大約500mg的量的本發(fā)明化合物或其鹽或溶劑化物。
此外，本發(fā)明的可藥用制劑可含有大約0.5w/w％至大約95w/w％，或者大約1w/w％至大約95w/w％，或者大約1w/w％至大約75w/w％，或者大約5w/w％至大約75w/w％，或者大約10w/w％至大約75w/w％，或者大約10w/w％至大約50w/w％的量的本發(fā)明化合物或其鹽或溶劑化物。
本發(fā)明的化合物或其鹽或溶劑化物可單獨(dú)地或作為可藥用制劑的一部分，每日一次、每日兩次、每日三次或每日四次或更為頻繁地使用給遭受不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)的哺乳動(dòng)物，例如人。
本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將理解，就本發(fā)明化合物而言，對(duì)特定的藥物制劑、劑量和向需要此類(lèi)治療的哺乳動(dòng)物提供的每日劑量次數(shù)的選擇都是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員知識(shí)范圍內(nèi)的，無(wú)需過(guò)多實(shí)驗(yàn)即可對(duì)它們加以確定。
本發(fā)明還涉及在哺乳動(dòng)物(包括人)中治療不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)的方法，所述方法包括向所述哺乳動(dòng)物施用能有效治療不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)的量的上文定義的式(I)化合物或其鹽或溶劑化物。
在該方法的一種實(shí)施方式中，不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)是癌，其包括但不限于，間皮瘤、肝膽性的(肝和膽管)、原發(fā)或繼發(fā)性CNS瘤、原發(fā)或繼發(fā)性腦瘤、肺癌(NSCLC和SCLC)、骨癌、胰腺癌、皮膚癌、頭頸癌、皮或眼內(nèi)黑素瘤、卵巢癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肛門(mén)區(qū)域的癌癥、胃癌、胃腸道(胃、結(jié)直腸和十二指腸)、乳腺癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金氏癥、食道癌、小腸癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)的癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、睪丸癌、慢性或急性白血病、慢性髓系白血病、淋巴細(xì)胞性淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管的癌、腎細(xì)胞癌、腎盂癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)瘤、原發(fā)性CNS淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、脊軸腫瘤(spinalaxis tumors)、腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腦垂體腺瘤、腎上腺皮質(zhì)癌、膽囊癌、多發(fā)性骨髓瘤、膽管癌、纖維肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤或前述癌癥中一種或多種的組合。
在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，癌癥選自肺癌(NSCLC和SCLC)、頭頸癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肛門(mén)區(qū)域的癌癥、胃癌、乳腺癌、腎或輸尿管的癌、腎細(xì)胞癌、腎盂癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)瘤、原發(fā)性CNS淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、脊軸腫瘤或前述癌癥中一種或多種的組合。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，癌癥選自肺癌(NSCLC和SCLC)、卵巢癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肛門(mén)區(qū)域的癌癥或前述癌癥中一種或多種的組合。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，癌癥選自肺癌(NSCLC和SCLC)、卵巢癌、結(jié)腸癌、直腸癌或前述癌癥中一種或多種的組合。
在所述方法的另一實(shí)施方式中，所述不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)是良性增殖性疾病，其包括但不限于牛皮癬、良性前列腺肥大或再狹窄。
本發(fā)明還涉及在哺乳動(dòng)物中治療不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)的方法，所述方法包括，向所述哺乳動(dòng)物施用能有效治療不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)的量的本發(fā)明化合物或其鹽或溶劑化物，并組合選自有絲分裂抑制劑、烷基化試劑、抗代謝物(anti-metabolites)、插入型抗生素(intercalating antibiotics)、生長(zhǎng)因子抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑、酶、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、生物應(yīng)答改良劑、抗體、細(xì)胞毒素、抗激素(anti-hormones)和抗雄激素(anti-androgens)構(gòu)成的組的抗腫瘤劑。
在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，用于與本文所述的本發(fā)明化合物和藥物組合物聯(lián)合使用的抗腫瘤劑是抗血管形成劑、激酶抑制劑、pan激酶抑制劑或生長(zhǎng)因子抑制劑。優(yōu)選的pan激酶抑制劑包括美國(guó)專利No.6,573,293(Pfizer，Inc，NY，USA)中描述的SutentTM(舒尼替尼(sunitinib))?？寡苄纬蓜┌ǖ幌抻谙率鲈噭?，例如，EGF抑制劑、EGFR抑制劑、VEGF抑制劑、VEGFR抑制劑、TIE2抑制劑、IGF1R抑制劑、COS-II(環(huán)加氧酶II)抑制劑、MMP-2(基質(zhì)金屬蛋白酶2)抑制劑和MMP-9(基質(zhì)金屬蛋白酶9)抑制劑。
優(yōu)選的VEFG抑制劑包括，例如，Avastin(貝伐單抗(bevacizumab))，這是South San Francisco，California的Genentech，Inc.的抗VEGF單克隆抗體。其它VEGF抑制劑包括CP-547,632(Pfizer Inc.，NY，USA)、AG13736(Pfizer Inc.)、ZD-6474(AstraZeneca)、AEE788(Novartis)、AZD-2171、VEGF Trap(Regeneron/Aventis)、Vatalanib(也被稱為PTK-787，ZK-222584Novartis&Schering AG)、Macugen(哌加他尼鈉(pegaptanib octasodium)、NX-1838、EYE-001、PfizerInc./Gilead/Eyetech)、IM862(Kirkland，Washington，USA的Cytran Inc.)和血管酶(angiozyme)(來(lái)自Ribozyme(Boulder，Colorado)和Chiron(Emeryville，California)的合成核酶)及其組合。
可用于本發(fā)明實(shí)踐中的VEGF抑制劑被描述于美國(guó)專利No.6,534,524和6,235,764中，這兩篇文獻(xiàn)都為了一切目的通過(guò)引用整體并入本文。其它VEGF抑制劑被描述于例如WO 99/24440、WO 95/21613、WO99/61422、美國(guó)專利5,834,504、WO 98/50356、美國(guó)專利5,883,113、美國(guó)專利5,886,020、美國(guó)專利5,792,783、美國(guó)專利6,653,308、WO 99/10349、WO 97/32856、WO 97/22596、WO 98/54093、WO 98/02438、WO 99/16755和WO 98/02437中，這些文獻(xiàn)都通過(guò)引用整體并入本文。
其它抗血管形成化合物包括阿曲汀(acitretin)、酚維A胺(fenretinide)、沙利度胺(thalidomide)、唑來(lái)膦酸(zoledronic acid)、血管抑素(ngiostatin)、阿普里定(aplidine)、Cilengtide、康普瑞汀(combretastatin)A-4、內(nèi)皮抑素(endostatin)、常山酮(halofuginone)、瑞馬司他(rebimastat)、Removab、來(lái)那度胺(Revlimid)、鯊胺、Ukrain、Vitaxin及其組合。
可與本發(fā)明的化合物組合使用的其它抗增殖劑包括法呢基蛋白酶轉(zhuǎn)移酶的抑制劑和受體酪氨酸激酶PDGFr的抑制劑，這包括下述文獻(xiàn)中公開(kāi)和要求保護(hù)的化合物美國(guó)專利6,080,769、美國(guó)專利6,194,438、美國(guó)專利6,258,824、美國(guó)專利6,586447、美國(guó)專利6,071,935、美國(guó)專利6,495,564和美國(guó)專利6,150,377、美國(guó)專利6,596,735、美國(guó)專利6,479,513、WO01/40217、U.S.2003-0166675。前述專利和專利申請(qǐng)都通過(guò)引用正體并入本文。
PDGRr抑制劑包括但不限于國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)WO01/40217和WO2004/020431中公開(kāi)的那些，所述公開(kāi)文本的內(nèi)容為了一切目的整體并入本文。優(yōu)選的PDGFr抑制劑包括Pfizer的CP-673,451和CP-868,596及其鹽。
優(yōu)選的GARF抑制劑包括Pfizer的AG-2037(Pelitrexol及其鹽)?？捎糜诒景l(fā)明的實(shí)踐中的GARF抑制劑公開(kāi)于美國(guó)專利No.5,608,082中，其整體為了一切目的并入本文。
可用于與本文公開(kāi)的式(I)化合物及藥物組合物聯(lián)合使用的有用COX-II抑制劑的例子包括CELEBREXTM(塞來(lái)昔布(celecoxib))、帕瑞考昔(parecoxib)、德拉昔布(deracoxib)、ABT-963、MK-663(etoricoxib)、COX-189(Lumiracoxib)、BMS 347070、RS 57067、NS-398、Bextra(伐地考昔(valdecoxib))、Paracoxib、Vioxx(羅非昔布(rofecoxib))、SD-8381、4-甲基-2-(3，4-二甲基苯基)-1-(4-氨磺酰-苯基)-1H-吡咯、2-(4-乙氧基苯基)-4-甲基-1-(4-氨磺酰苯基)-1H-吡咯、T-614、JTE-522、S-2474、SVT-2016、CT-3、SC-58125和Arcoxia(etoricoxib)。此外，COX-II抑制劑還被公開(kāi)于U.S.專利申請(qǐng)US 2005-0148627和US 2005-0148777中，這兩篇申請(qǐng)的內(nèi)容為了一切目的整體并入本文。
在一種特別的實(shí)施方式中，抗腫瘤劑是塞來(lái)昔布(美國(guó)專利No.5,466,823)、伐地考昔(美國(guó)專利No.5,633,272)、帕瑞考昔(美國(guó)專利No.5,932,598)、德拉昔布(美國(guó)專利No.5,521,207)、SD-8381(美國(guó)專利No.6,034,256，實(shí)施例175)、ABT-963(WO 2002/24719)、羅非昔布(CAS No.162011-90-7)、WO 1998/03484中公開(kāi)的MK-663(或etoricoxib)、WO 1999/11605中公開(kāi)的COX-189(Lumiracoxib)、BMS-347070(美國(guó)專利6,180,651)、NS-398(CAS 123653-11-2)、RS 57067(CAS 17932-91-3)、4-甲基-2-(3，4-二甲基苯基)-1-(4-氨磺酰-苯基)-1H-吡咯、2-(4-乙氧基苯基)-4-甲基-1-(4-氨磺酰苯基)-1H-吡咯或Meloxicam。
用于與本文公開(kāi)的本發(fā)明化合物和藥物組合物組合使用的其它作為抗腫瘤劑的有用抑制劑包括阿司匹林和非固醇抗炎性藥(NSAIDs)，其抑制產(chǎn)生前列腺素的酶，導(dǎo)致更低的前列腺素水平，其包括但不限于下述這些Salsalate(Amigesic)、Diflunisal(Dolobid)、Ibuprofen(Motrin)、Ketoprofen(Orudis)、Nabumetone(Relafen)、Piroxicam(Feldene)、Naproxen(Aleve，Naprosyn)、Diclofenac(Voltaren)、Indomethacin(Indocin)、Sulindac(Clinoril)、Tolmetin(Tolectin)、Etodolac(Lodine)、Ketorolac(Toradol)、Oxaprozin(Daypro)及其組合。
優(yōu)選的COX-I抑制劑包括布洛芬(Motrin)、努普林、萘普生(Aleve)、吲哚美辛(Indocin)、萘丁美酮(Relafen)及其組合。
與本文公開(kāi)的本發(fā)明化合物和藥物組合物組合使用的靶向試劑包括EGFr抑制劑例如易瑞沙(吉非替尼，AstraZeneca)、Tarceva(erlotinib或OSI-774，OSI Pharmaceuticals Inc.)、Erbitux(cetuximab，ImclonePharmaceuticals，Inc.)、EMD-7200(Merck AG)、ABX-EGF(Amgen Inc.and Abgenix Inc.)、HR3(Cuban Government)、IgA抗體(University ofErlangen-Nuremberg)、TP-38(IVAX)、EGFR融合蛋白、EGF-疫苗、抗EGFr免疫脂質(zhì)體(Hermes Biosciences Inc.)及其組合。優(yōu)選的EGFr抑制劑包括易瑞沙、Erbitux、Tarceva及其組合。
其它抗腫瘤劑包括選自pan erb受體抑制劑或ErbB2受體抑制劑的那些，例如，CP-724,714(Pfizer，Inc.)、CI-1033(canertinib，Pfizer，Inc.)、Herceptin(trastuzumab，Genentech Inc.)、Omitarg (2C4，pertuzumab，Genentech Inc.)、TAK-165(Takeda)、GW-572016(lonafarnib，GlaxoSmithKline)、GW-282974(GlaxoSmithKline)、EKB-569(Wyeth)、PKI-166(Novartis)、dHER2(HER2Vaccine、Corixa和GlaxoSmithKline)、APC8024(HER2 Vaccine，Dendreon)、anti-HER2/neu雙特異性抗體(Decof Cancer Center)、B7.her2.IgG3(Agensys)、AS HER2(Research Institute for Rad Biology &Medicine)、三功能雙特異性抗體(University of Munich)和mAB AR-209(Aronex Pharmaceuticals Inc)和mAB 2B-1(Chiron)及其組合。
優(yōu)選的erb選擇性抗腫瘤劑包括Herceptin、TAK-165、CP-724,714、ABX-EGF、HER3及其組合。優(yōu)選的pan erbb受體抑制劑包括GW572016、CI-1033、EKB-569和Omitarg及其組合。
其它erbB2抑制劑包括WO 98/02434、WO 99/35146、WO 99/35132、WO 98/02437、WO 97/13760、WO 95/19970、美國(guó)專利5,587,458和美國(guó)專利5,877,305中公開(kāi)的那些，它們每篇都整體通過(guò)引用并入?？捎糜诒景l(fā)明中的ErbB2受體抑制劑還公開(kāi)于美國(guó)專利6,465,449和6,284,764以及WO 2001/98277中，它們每篇都整體通過(guò)引用并入。
此外，其它抗腫瘤劑可選自下述試劑BAY-43-9006(OnyxPharmaceuticals Inc.)、Genasense(augmerosen，Genta)、Panitumumab(Abgenix/Amgen)、Zevalin(Schering)、Bexxar(Corixa/GlaxoSmithKline)、Abarelix、Alimta、EPO 906(Novartis)、discodermolide(XAA-296)、ABT-510(Abbott)、Neovastat(Aeterna)、恩扎妥林(Eli Lilly)、Combrestatin A4P(Oxigene)、ZD-6126(AstraZeneca)、夫拉平度(Aventis)、CYC-202(Cyclacel)、AVE-8062(Aventis)、DMXAA(Roche/Antisoma)、Thymitaq(Eximias)、Temodar(蒂清，Schering Plough)和Revilimd(Celegene)及其組合。
其它抗腫瘤可選自下述試劑CyPat(醋酸環(huán)丙孕酮)、Histerelin(組胺瑞林醋酸)、Plenaixis(abarelix depot)、Atrasentan(ABT-627)、Satraplatin(JM-216)、沙利度胺(thalomid，Thalidomide)、Theratope、Temilifene(DPPE)、ABI-007(紫杉醇)、Evista(雷洛昔芬)、Atamestane(Biomed-777)、Xyotax(聚谷氨酸紫杉醇)、Targetin(bexarotine)及其組合。
此外，其它抗腫瘤劑可選自下述試劑Trizaone(替拉扎明)、Aposyn(exisulind)、Nevastat(AE-941)、Ceplene(組胺二氫氯化物)、Orathecin(魯比替康)、Virulizin、Gastrimmune(G17DT)、DX-8951f(依喜替康甲磺酸鹽)、Onconase(豹蛙酶)、BEC2(mitumoab)、Xcytrin(莫特沙芬釓)及其組合。
其它抗腫瘤劑可選自下述試劑CeaVac(CEA)、NeuTrexin(trimetresate glucuronate)及其組合。其它抗腫瘤劑可選自下述試劑OvaRex(oregovomab)、Osidem(IDM-1)及其組合。其它抗腫瘤劑可選自下述試劑Advexin(ING 201)、Tirazone(替拉扎明)及其組合。其它抗腫瘤劑可選自下述試劑RSR13(乙丙昔羅)、Cotara(131I chTNT1/b)、NBI-3001(IL-4)及其組合。其它抗腫瘤劑可選自下述試劑Canvaxin、GMK疫苗、PEG Interon A、Taxoprexin(DHA/紫杉醇)及其組合。
其它抗腫瘤劑包括Pfizer的MEK1/2抑制劑PD325901、ArrayBiopharm的MEK抑制劑ARRY-142886、Bristol Myers的CDK2抑制劑BMS-387,032、Pfizer的CDK抑制劑PD0332991和AstraZeneca的AXD-5438及其組合。
此外，mTOR抑制劑也可使用，例如CCI-779(Wyeth)和雷帕霉素衍生物RAD001(Novartis)和AP-23573(Ariad)、HDAC抑制劑、SAHA(Merck Inc./Aton Pharmaceuticals)及其組合。其它抗腫瘤劑包括aurora 2抑制劑VX-680(Vertex)和Chk1/2抑制劑XL844(Exilixis)。
下述細(xì)胞毒性試劑，例如，選自表阿霉素(Ellence)、多西紫杉醇(Taxotere)、紫杉醇、Zinecard(右雷佐生)、美羅華(Rituxan)、伊馬替尼甲磺酸鹽(Gleevec)及其組合構(gòu)成的組中的一種或多種可與本文公開(kāi)的本發(fā)明化合物和藥物組合物組合使用。
本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物與激素治療劑一起使用，所述激素治療劑包括但不限于依西美坦(Aromasin，Pfizer Inc.)、亮丙瑞林(Lupron或Leuplin，TAP/Abbott/Takeda)、阿那曲唑(Arimidex，Astrazeneca)、Gosrelin(Zoladex，AstraZeneca)、度骨化醇、法倔唑、福美司坦、枸櫞酸他莫昔芬(三苯氧胺，Nolvadex，AstraZeneca)、Casodex(AstraZeneca)、Abarelix(Praecis)、Trelstar及其組合。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物與激素治療劑，例如抗雌激素(包括但不限于氟維司群、托瑞米芬、雷洛昔芬、拉索昔芬、來(lái)曲唑(Femara，Novartis)，抗雄激素(例如比卡魯胺、氟他胺、米非司酮、尼魯米特、CasodexTM(4′-氰基-3-(4-氟苯基磺酰)-2-羥基-2-甲基-3′-(三氟甲基)丙酰苯胺、比卡魯胺)及其組合一起使用。
此外，本發(fā)明提供了本發(fā)明的化合物單獨(dú)或與一種或多種支持性護(hù)理產(chǎn)品一起使用，例如，選自Filgrastim(Neupogen)、昂丹司瓊(Zofran)、Fragmin、Procrit、Aloxi、Emend或其組合構(gòu)成的產(chǎn)品。
特別優(yōu)選的細(xì)胞毒性試劑包括Camptosar、Erbitux、易瑞沙、Gleevec、Taxotere及其組合。
下述拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑可用作為抗腫瘤劑喜樹(shù)堿、伊立替康鹽酸(Camptosar)、Edotecarin、Orathecin(Supergen)、依喜替康(Daiichi)、BN-80915(Roche)及其組合。特別優(yōu)選的拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑包括表阿霉素(Ellence)。
烷基化試劑包括但不限于氮芥N-氧化物、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、馬法蘭(melphalan)、馬利蘭(busulfan)、二溴甘露醇、卡波昆、噻替哌(thiotepa)、雷莫司汀、尼莫司汀(nimustine)、替莫唑胺(temozolomide)、AMD-473、六甲蜜胺、AP-5280、Apaziquone、brostallicin、達(dá)莫司汀(bendamustine)、卡莫司汀(carmustine)、雌莫司汀(estramustine)、福莫(fotemustine)、葡磷酰胺、異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)、KW-2170、馬磷酰胺(mafosfamide)和二溴衛(wèi)矛醇(mitolactol)；鉑協(xié)作的烷基化化合物包括但不限于順鉑、Paraplatin(carboplatin)、依鉑、洛鉑(lobaplatin)、奈達(dá)鉑(nedaplatin)、Eloxatin(奧沙利鉑，Sanofi)或Atrplatin及其組合。特別優(yōu)選的烷基化試劑包括Eloxatin(奧沙利鉑)。
抗代謝物包括但不限于甲氨蝶呤、6-巰基嘌呤核苷、巰基嘌呤、5-氟脲嘧啶(5-FU)單獨(dú)或組合醛氫葉酸、替加氟(tegafur)、UFT、去氧氟尿苷(doxifluridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、阿糖胞苷十八烷磷酯、依諾他濱、S-1、Alimta(培美曲唑二鈉，LY231514，MTA)、Gemzar(吉西他濱，Eli Lilly)、氟達(dá)拉濱、5-阿扎胞苷、卡培他濱、克拉屈濱、克羅拉濱、地西他濱、依氟鳥(niǎo)(eflornithine)、乙炔基胞嘧啶核苷(ethynylcytidine)、半胱氨酸阿糖胞苷、羥基脲、TS-1、美法侖(melphalan)、奈拉濱(nelarabine)、洛拉曲克(nolatrexed)、十八烷磷酯、培美曲塞二鈉(disodium premetrexed)、噴司他丁(pentostatin)、培利曲索、雷替曲塞(raltitrexed)、Triapine、三甲曲(trimetrexate)、阿糖腺苷(vidarabine)、長(zhǎng)春新堿(vincristine)、長(zhǎng)春瑞賓(vinorelbine)；或者，例如，歐洲專利申請(qǐng)No.239362中公開(kāi)的優(yōu)選抗代謝物之一，例如N-(5-[N-(3，4-二氫-2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-基甲基)-N-甲基氨基]-2-噻吩甲酰)-L-谷氨酸及其組合。
抗生素包括插入型抗生物，其包括但不限于阿克拉霉素、放線菌素D、氨柔比星(amrubicin)、脂質(zhì)體蒽環(huán)霉素(annamycin)、阿霉素、博萊霉素、柔紅霉素、多柔比星(doxorubicin)、依沙蘆星(elsamitrucin)、表阿霉素、加盧比星(galarubicin)、去甲氧柔紅霉素、絲裂霉素C、奈莫柔比星(nemorubicin)、新制癌菌素(neocarzinostatin)、培洛霉素(peplomycin)、吡柔比星(pirarubicin)、蝴蝶霉素(rebeccamycin)、斯酯(stimalamer)、鏈脲(streptozocin)、戊柔比星(valrubicin)、凈司他丁(zinostatin)及其組合。
源于植物的抗腫瘤物質(zhì)包括，例如，選自有絲分裂抑制劑的那些，例如長(zhǎng)春堿(inblastine)、多西紫杉醇(Taxotere)、紫杉醇及其組合。
細(xì)胞毒性拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑包括選自Aclarubicn、氨萘非特(amonafide)、倍羅替康(belotecan)、喜樹(shù)堿、10-羥基喜樹(shù)堿、9-氨基喜樹(shù)堿、氟替康(diflomotecan)、鹽酸伊立替康(Camptosar)、Edotecarin、表阿霉素(Ellence)、依托泊苷(etoposide)、依喜替康、吉馬替康、勒托替康(lurtotecan)、蒽醌(mitoxantrone)、吡柔比星、魯比替康、魯比特康、索布佐生、SN-38、Tafluposide、拓?fù)涮婵导捌浣M合構(gòu)成的組的一種或多種試劑。
優(yōu)選的細(xì)胞毒性拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑包括選自喜樹(shù)堿、10-羥基喜樹(shù)堿、9-氨基喜樹(shù)堿、伊立替康鹽酸(Camptosar)、Edotecarin、表阿霉素(Ellence)、足葉乙甙(etoposide)、SN-38、拓?fù)涮婵导捌浣M合構(gòu)成的組的一種或多種試劑。
免疫試劑包括干擾素和多種其它免疫增強(qiáng)劑。干擾素包括干擾素α、干擾素α-2a、干擾素α-2b、干擾素β、干擾素γ-1a、干擾素γ-1b(Actimmune)或干擾素γ-n1及其組合。其它試劑包括惠爾血(filgrastim)、香菇多糖(lentinan)、裂皺菌素(sizofilan)、TheraCys、烏苯美司(ubenimex)、WF-10、阿地白介素、阿來(lái)組單抗(alemtuzumab)、BAM-002、達(dá)卡巴嗪(dacarbazine)、daclizumab、地尼白介素(denileukin)、吉姆單抗奧唑米星(gemtuzumab ozogamicin)、替伊莫單抗(ibritumomab)、咪喹莫特(imiquimod)、雷諾格拉斯蒂姆(lenograstim)、香菇多糖、黑素瘤疫苗(Corixa)、莫拉司丁(molgramostim)、OncoVAX-CL、沙格司亭(sargramostim)、他索納明(tasonermin)、Tecleukin、Thymalasin、托西莫單抗(tositumomab)、Virulizin、Z-100、依帕珠單抗(epratuzumab)、米妥莫單抗(mitumomab)、奧戈伏單抗(oregovomab)、Pemtumomab(Y-muHMFG1)、Provenge(Dendreon)及其組合。
生物應(yīng)答改良劑是這樣的試劑，其改良活的生物體的防御機(jī)制或生物應(yīng)答(例如存活、生長(zhǎng)或組織細(xì)胞的分化)，以指導(dǎo)它們具有抗腫瘤活性。此類(lèi)試劑包括云芝多糖(krestin)、香菇多糖、裂皺菌素、必醫(yī)你舒(picibanil)、烏苯美司及其組合。
可用于與本發(fā)明的化合物組合使用的其它抗癌試劑包括阿維A酸(alitretinoin)、聚肌胞、阿曲生坦貝沙羅汀(atrasentan bexarotene)、硼替佐米(bortezomib)、Bosentan、骨化三醇(calcitriol)、Exisulind、非那雄胺(finasteride)、福莫司汀、伊班膦酸(ibandronic acid)、米替福新(miltefosine)、米托蒽醌、1-天冬酰胺酶、丙卡巴肼(procarbazine)、達(dá)卡巴嗪、羥基脲、Pegaspargase、噴司他丁、Tazarotne、Telcyta(TLK-286，Telik Inc.)、Velcade(bortemazib，Millenium)、維甲酸(tretinoin)及其組合。
鉑配位的化合物包括但不限于順鉑、卡鉑、奈達(dá)鉑、奧沙利鉑及其組合。
喜樹(shù)堿衍生物包括但不限于喜樹(shù)堿、10-羥基喜樹(shù)堿、9-氨基喜樹(shù)堿、依立替康、SN-38、Edotecarin、拓?fù)涮婵导捌浣M合。
其它抗腫瘤劑包括米托蒽醌、1-天冬酰胺酶、丙卡巴肼、達(dá)卡巴嗪、羥基脲、噴司他丁、維甲酸及其組合。
還可使用能增強(qiáng)抗腫瘤免疫應(yīng)答的抗腫瘤劑，例如CTLA4(細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞4)抗體，以及能阻斷CTLA4的其它試劑，例如MDX-010(Medarex)和美國(guó)專利6,682,736中公開(kāi)的CTLA4化合物；以及抗增殖劑，例如，其它法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，例如法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑。此外，可與本發(fā)明的化合物組合使用的特異性CTLA4抗體包括美國(guó)專利6,682,736和6,682,736中公開(kāi)的那些，這兩篇文獻(xiàn)都整體通過(guò)引用并入本文。
可用于本發(fā)明的組合方法的特異性IGF1R抗體包括WO 2002/053596中公開(kāi)的那些，該文獻(xiàn)通過(guò)引用整體并入本文。
可用于本發(fā)明的特異性CD40抗體包括WO 2003/040170中公開(kāi)的那些，該文獻(xiàn)通過(guò)引用整體并入本文。
基因治療劑也可用作為抗腫瘤劑，例如TNFerade(GeneVec)，其應(yīng)答于放療表達(dá)TNFα。
在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，他汀可與本發(fā)明的化合物及其藥物組合物組合使用。他汀(HMG-CoA還原酶抑制劑)可選自Atorvastatin(LipitorTM，Pfizer Inc.)、Provastatin(PravacholTM，Bristol-MyersSquibb)、Lovastatin(MevacorTM，Merck Inc.)、Simvastatin(ZocorTM，Merck Inc.)、Fluvastatin(LescolTM，Novartis)、Cerivastatin(BaycolTM，Bayer)、Rosuvastatin(CrestorTM，AstraZeneca)、Lovostatin和Niacin(AdvicorTM，Kos Pharmaceuticals)其衍生物和組合構(gòu)成的組。
在一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，他汀選自Atovorstatin和Lovastatin、其衍生物和組合構(gòu)成的組?？捎米鳛榭鼓[瘤劑的其它試劑包括Caduet。
制備方法 可使用下文所述的反應(yīng)途徑和合成流程，利用本領(lǐng)域可獲得的技術(shù)，使用易于獲得的起始材料，來(lái)制備本發(fā)明的化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，可使用多種不同的試劑和保護(hù)基團(tuán)，根據(jù)下述一般性流程，來(lái)生產(chǎn)本發(fā)明的化合物。因此，當(dāng)在下文的一般性流程中使用“合適的堿”、“合適的催化劑”、“合適的氧化劑”等術(shù)語(yǔ)時(shí)，本領(lǐng)域技術(shù)人員將能知道可使用的多種備選物。
本發(fā)明的某些實(shí)施方式的制備在本文所示的一般性流程之后的實(shí)施例中詳細(xì)描述。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，可容易地對(duì)描述的制備加以改動(dòng)，以適應(yīng)制備本發(fā)明的其它實(shí)施方式。例如，可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的改變，來(lái)合成根據(jù)本發(fā)明的未例示的化合物，例如，通過(guò)合適地保護(hù)干擾基團(tuán)，通過(guò)改用本領(lǐng)域已知的其它合適試劑，或者通過(guò)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行常規(guī)改變?；蛘?，本文提到或本領(lǐng)域已知的其它反應(yīng)將被認(rèn)為能被改變以用于制備本發(fā)明的其它化合物。
在一種一般性的合成工藝中，根據(jù)方法A來(lái)制備A和B代表的一般性結(jié)構(gòu)的反應(yīng)性中間產(chǎn)物化合物。
方法A
硫醇(1)與甲基化試劑在存在合適的堿時(shí)的反應(yīng)提供了式2的硫代甲醚。用草酰氯處理2導(dǎo)致形成式3代表的醛。通過(guò)用羥基胺處理，醛3可被進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為式4代表的異惡唑。通過(guò)用合適的堿處理，異惡唑4可被切割為醛5。通過(guò)與肼反映，異惡唑5可被進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為式6型的吡唑啉。通過(guò)2步順序反應(yīng)，包括與NaNO2的反應(yīng)接著與碘的反應(yīng)，吡唑6可轉(zhuǎn)化為A。最后，通過(guò)胺與二氫吡喃的反應(yīng)，A轉(zhuǎn)化為B。
在另一種一般性的合成工藝中，根據(jù)方法B來(lái)制備11代表的一般性結(jié)構(gòu)的化合物。
方法B
可使用方法A來(lái)制備反應(yīng)性中間產(chǎn)物A?？赏ㄟ^(guò)在適于將反應(yīng)性試劑(例如R1-I、R1-Br、R1-Cl、R1-OMs、R1-OTs等)與其偶聯(lián)的條件下，通過(guò)對(duì)A的烷基化，來(lái)向7中引入R1?？赏ㄟ^(guò)合適的氧化劑，例如過(guò)硫酸氫鉀(Oxone)，將7中的硫氧化為砜8。可通過(guò)用胺置換硫，在嘧啶環(huán)上引入胺，產(chǎn)生9。在存在合適的催化劑(例如鈀催化劑)時(shí)，用合適的硼酸(或硼酸酯)與9進(jìn)行Suzuki偶聯(lián)，產(chǎn)生中間產(chǎn)物10。最后，如果化合物10需要對(duì)任何剩余的保護(hù)基團(tuán)去保護(hù)，可通過(guò)多種方法來(lái)進(jìn)行此類(lèi)去保護(hù)，產(chǎn)生化合物11。這些方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的(例如，見(jiàn)T.Greene and P.Wuts，“Protective Groups in Organic Synthesis”，3rd Edition 1999，John Wiley&Sons)。
在另一種一般性的合成工藝中，根據(jù)方法C來(lái)制備10和11代表的一般性結(jié)構(gòu)的化合物。
方法C
可使用方法A來(lái)制備反應(yīng)性中間產(chǎn)物B。在存在合適催化劑(例如鈀催化劑)的情況下，將B與合適的硼酸(或硼酸酯)進(jìn)行Suzuki偶聯(lián)，產(chǎn)生中間產(chǎn)物12?？墒褂枚喾N方法，通過(guò)去保護(hù)，剝離出THP保護(hù)的胺，產(chǎn)生胺13。用于從胺上除去THP的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的(例如，見(jiàn)T.Greene and P.Wuts，“Protective Groups in Organic Synthesis”，3rdEdition 1999，John Wiley&Sons)?？赏ㄟ^(guò)在適于將反應(yīng)性試劑(例如R1-I、R1-Br、R1-Cl、R1-OMs、R1-OTs等)與其偶聯(lián)的條件下，通過(guò)對(duì)13的烷基化，來(lái)向14中引入R1?？赏ㄟ^(guò)用合適的氧化試劑(例如臭氧)處理，將14中的硫氧化為15a和/或15b。可通過(guò)用胺置換硫，在嘧啶環(huán)上引入胺，產(chǎn)生10。最后，如果化合物10需要對(duì)任何剩余的保護(hù)基團(tuán)去保護(hù)，可通過(guò)多種方法來(lái)進(jìn)行此類(lèi)去保護(hù)，產(chǎn)生化合物11。
在另一種一般性的合成工藝中，根據(jù)方法D來(lái)制備20和22代表的一般性結(jié)構(gòu)的化合物。
方法D
可使用方法A來(lái)制備反應(yīng)性中間產(chǎn)物A。可通過(guò)在適于將反應(yīng)性試劑(例如R1-I、R1-Br、R1-Cl、R1-OMs、R1-OTs等)與其偶聯(lián)的條件下，通過(guò)對(duì)A的烷基化，來(lái)向7中引入R1。在存在合適催化劑(例如鈀催化劑)的情況下，將7與合適的硼酸(或硼酸酯)進(jìn)行Suzuki偶聯(lián)，產(chǎn)生中間產(chǎn)物16?？赏ㄟ^(guò)用合適的氧化試劑(例如臭氧)處理，將16中的硫氧化為17a和/或17b。可通過(guò)用胺置換硫，在嘧啶環(huán)上引入胺，產(chǎn)生10。最后，如果化合物10需要對(duì)任何剩余的保護(hù)基團(tuán)去保護(hù)，可通過(guò)多種方法來(lái)進(jìn)行此類(lèi)去保護(hù)，產(chǎn)生化合物11。
在另一種一般性的合成工藝中，根據(jù)方法E來(lái)制備20代表的化合物。
方法E
可使用方法A來(lái)制備反應(yīng)性中間產(chǎn)物A?？赏ㄟ^(guò)在適于將反應(yīng)性試劑(例如R1-I、R1-Br、R1-Cl、R1-OMs、R1-OTs等)與其偶聯(lián)的條件下，通過(guò)對(duì)A的烷基化，來(lái)向7中引入R1。可通過(guò)用合適的氧化試劑(例如過(guò)硫酸氫鉀)處理，將7中的硫氧化為砜8?？赏ㄟ^(guò)用胺置換硫，在嘧啶環(huán)上引入胺，產(chǎn)生9。在存在合適催化劑(例如鈀催化劑)的情況下，將9與合適的硼酸或硼酸酯(其中，R是氫或合適的氮保護(hù)基團(tuán))進(jìn)行Suzuki偶聯(lián)，產(chǎn)生中間產(chǎn)物18。如果化合物18需要對(duì)任何剩余的保護(hù)基團(tuán)去保護(hù)，可通過(guò)多種方法來(lái)進(jìn)行此類(lèi)去保護(hù)，產(chǎn)生化合物19。最后，可在合適的氯化條件下對(duì)化合物19進(jìn)行氯化，提供化合物20。
在另一種一般性的合成工藝中，根據(jù)方法F來(lái)制備29代表的化合物。
方法F
通過(guò)在4-甲基嘧啶或皮考啉上進(jìn)行Vilsmeier反應(yīng)，接著與羥基胺縮合，完成對(duì)異惡唑22的制備。用合適的堿(例如氫氧化鈉水溶液)對(duì)異惡唑開(kāi)環(huán)，接著與肼縮合，提供氨基吡唑24。Sandmeyer反應(yīng)將氨基轉(zhuǎn)化為碘吡唑(25)，并且在Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)之前，用優(yōu)選的R3基團(tuán)對(duì)吡唑NH進(jìn)行烷基化或者用合適的保護(hù)基團(tuán)對(duì)其加以保護(hù)，提供26。26與合適的硼酸或硼酸酯進(jìn)行的Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)完成了對(duì)27所代表的化合物的合成。如果需要的話，按照前文所述進(jìn)行去保護(hù)和/或氯化，分別提供28或29。
在另一種一般性的合成工藝中，根據(jù)方法G來(lái)制備40代表的化合物。
方法G
可通過(guò)在合適的催化劑存在時(shí)，通過(guò)與一氧化碳反應(yīng)，接著(如果需要的話)對(duì)吡咯氮加以保護(hù)，從5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶30制備化合物31。可通過(guò)在存在合適的堿(例如LIHMDS)時(shí)進(jìn)行反應(yīng)，將化合物31與2-甲基-6-(甲基硫代)吡啶縮合，提供32。可通過(guò)32與DMF-DMA的反應(yīng)，提供化合物33中的亞胺，產(chǎn)生33?？赏ㄟ^(guò)與肼反應(yīng)，對(duì)化合物33進(jìn)行環(huán)化，形成吡唑34。用優(yōu)選的R1基團(tuán)對(duì)吡唑NH進(jìn)行烷基化或者用合適的保護(hù)基團(tuán)對(duì)其加以保護(hù)，提供35。如果1H-吡咯并[2，3-b]吡啶基上的1-位是H，通過(guò)已知的手段，用合適的保護(hù)基團(tuán)(例如苯磺酸酯)進(jìn)行保護(hù)，提供36。對(duì)甲基硫代基用過(guò)硫酸氫鉀來(lái)氧化，提供了37。可通過(guò)與合適的胺一起加熱置換SO2Me基團(tuán)，提供38。如果需要的話，按照前文所述進(jìn)行去保護(hù)和/或氯化，分別提供39或40。
在另一種一般性的合成工藝中，根據(jù)方法H來(lái)制備51代表的化合物。
方法H
如果需要的話，可在吡咯氮上對(duì)化合物41加以保護(hù)，提供化合物42。存在合適的錫試劑和合適的催化劑時(shí)進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)，可提供43型的化合物。然后可通過(guò)與合適的酸一起加熱，將化合物43轉(zhuǎn)化為酮44，接著與DMF-DMA縮合，形成烯酮45。可通過(guò)與肼反應(yīng)，對(duì)化合物45進(jìn)行環(huán)化，形成吡唑46。用優(yōu)選的R1基團(tuán)對(duì)吡唑NH進(jìn)行烷基化或者用合適的保護(hù)基團(tuán)對(duì)其加以保護(hù)，提供47。49與合適的硼酸或硼酸酯進(jìn)行的Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)完成了對(duì)50所代表的化合物的合成。如果需要的話，按照前文所述進(jìn)行去保護(hù)和/或氯化，提供51型的化合物。
在另一種一般性的合成工藝中，根據(jù)方法I來(lái)制備56代表的化合物。
方法I
52型的鹵化物可與酸酐53反應(yīng)，形成化合物54?？赏ㄟ^(guò)Stille偶聯(lián)，將化合物54與合適的中間產(chǎn)物55偶聯(lián)，產(chǎn)生56型的產(chǎn)物?？赏ㄟ^(guò)將9型的化合物與合適的錫試劑反應(yīng)，制備中間產(chǎn)物55。
實(shí)施例 下文提供的實(shí)施例和制備進(jìn)一步闡述和例示了本發(fā)明的化合物以及制備此類(lèi)化合物的方法。實(shí)施例B-1至I-1提供了制備數(shù)種特定的本發(fā)明化合物的詳細(xì)合成步驟。表1顯示了使用本文所述的方法制備的化合物的分析數(shù)據(jù)。表2和表3顯示了實(shí)施例B-1至I-2的化合物的生物化學(xué)和細(xì)胞數(shù)據(jù)。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的范圍不以任何方式受限于下述實(shí)施例和制備的范圍。在下述實(shí)施例中，除非結(jié)構(gòu)式或化學(xué)名稱另有注釋或指明，具有單個(gè)手性中心的分子作為外消旋化合物存在。除非結(jié)構(gòu)式或化學(xué)名稱另有注釋或指明，具有兩個(gè)或多個(gè)手性中心的那些分子作為非對(duì)映異構(gòu)體的外消旋化合物存在?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法獲得單種對(duì)映異構(gòu)體/非對(duì)映異構(gòu)體。
多種起始材料和其它試劑購(gòu)自商業(yè)供應(yīng)商，例如Aldrich ChemicalCompany，除非另有指明，其均不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。在于300MHz或400MHz運(yùn)行的Bruker儀器上記錄1H-NMR譜，在以75MHz運(yùn)行時(shí)記錄13C-NMR譜。NMR譜由CDCl3溶液獲得(以ppm報(bào)告)，其中使用氯仿作為參照標(biāo)準(zhǔn)(7.25ppm和77.00ppm)，或者根據(jù)適合的情況，使用DMSO-D6(2.50ppm和39.51ppm)或CD3OD(3.4ppm和4.8ppm和49.3ppm)或內(nèi)標(biāo)四甲基硅烷(0.00ppm)。根據(jù)需要使用其它NMR溶劑。當(dāng)報(bào)道峰多重性的時(shí)候，使用下述縮寫(xiě)s(單峰)、d(雙峰)、t(三重峰)、m(多重峰)、br(寬峰)、dd(雙二重峰)、dt(雙三重峰)。給出的偶聯(lián)常數(shù)以赫茲(Hz)表示。本文中可使用下述縮寫(xiě)Et2O(二乙醚)；DMF(N，N-二甲基甲酰胺)；THF(四氫呋喃)；DHP(二氫吡喃)、DCM(二氯-甲烷)；DMA(二甲基縮醛)；DBU(1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯)；LiHMDS或LHMDS(六甲基二硅烷重氮鋰)；TBME(叔丁基甲基醚)；LDA(二異丙基酰胺鋰)；DMSO(二甲亞砜)；MeOH(甲醇)；EtOH(乙醇)；EtOAc(乙酸乙酯)；THF(四氫呋喃)；Ac(乙?；?；Me(甲基)；Et(乙基)和Ph(苯基)。
硼酸和硼酸酯中間產(chǎn)物 所有硼酸和酯可通過(guò)商業(yè)獲得、于文獻(xiàn)內(nèi)已知，或者可按照下述方法來(lái)制備。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易知道，下述僅是作為示例性的硼酸和硼酸酯中間產(chǎn)物，可根據(jù)已知方法對(duì)這些示例性的中間產(chǎn)物加以修飾，以提供多種多樣的、可用于制備權(quán)利要求保護(hù)范圍內(nèi)的化合物的可能的硼酸和硼酸酯。
制備1-(叔丁氧羰基)-3-甲基-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基硼酸(64)
步驟1
于20℃，向化合物57(74g，0.80mol)在CCl4(2L)中的經(jīng)攪拌的懸浮液中逐份加入NBS(296g，1.68mol)。加入后，在室溫下對(duì)混合物攪拌24小時(shí)。TLC(EtOAc/己烷1∶4)顯示材料消耗完全。過(guò)濾反應(yīng)混合物，真空下濃縮濾液，產(chǎn)生了作為褐色固體的化合物58(170g，83.7％)。
步驟2
在攪拌下，將化合物58(172g，0.688mol)和苯磺酰氯(182.2g，1.032mol)在吡啶(1000mL)中的混合物加熱至85℃，持續(xù)72小時(shí)。TLC(EtOAc/己烷1∶4)顯示材料大部分消耗。真空下除去吡啶。將殘余物懸浮于EtOAc中并加以過(guò)濾。真空下濃縮濾液，通過(guò)柱色譜純化殘余物(EtOAc/石油醚，從1∶40至1∶4)，產(chǎn)生了作為黃色固體的化合物59(65g，24.2％)。
步驟3
攪拌下，N2氣下，將化合物3(45g，0.115mol)、3-溴丙烷(45.7g，0.38mol)和K2CO3(63.5g，0.46mol)在干DMF(900mL)中的混合物加熱至110℃，持續(xù)16小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，傾倒進(jìn)水(1.5L)中，并用EtOAc(1L)萃取三次。用水(1L)對(duì)合并的有機(jī)相洗3次，鹽水(1L)洗，在Na2SO4上干燥，并真空下濃縮。用石油醚洗殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物60(39g，78.9％)。
步驟4
N2氣下，將化合物60(47.4g，0.11mol)、三(三甲基硅基)硅烷(54.7g，0.22mol)和偶氮二異丁腈(AIBN，18g，0.11mol)在干甲苯(1000mL)中的混合物加熱至80-83℃，持續(xù)3小時(shí)。TLC(EtOAc/己烷1∶4)顯示材料消耗完全。在真空下濃縮混合物。通過(guò)柱色譜(EtOAc/石油醚，從1∶100至1∶30)純化殘余物，產(chǎn)生作為白色固體的產(chǎn)物(10g，25.8％)。
步驟5
向化合物61(800mg，2.26mmol)在10mL沸乙醇中的攪拌溶液中逐滴加入2.0mL氫氧化鈉(127mg，2.26mmol)水溶液。密封反應(yīng)體系，然后在100度油浴中加熱，用LCMS加以監(jiān)測(cè)。反應(yīng)保持均勻，5小時(shí)后，LCMS顯示反應(yīng)完全。在高真空下將反應(yīng)濃縮至干。得到的殘余物在100mL DCM中攪拌過(guò)夜，然后過(guò)濾。LCMS顯示，固體不含想要的材料，而濾液濃縮產(chǎn)生作為米白色固體的化合物62(458mg，94.9％)。
步驟6
化合物62(458mg，2.15mmol)、Boc-酸酐(563mg，2.58mmol)和1，1-二異丙基乙胺(305mg，2.37mmol)在50mL無(wú)水THF中的混合物在氮?dú)庀禄亓?小時(shí)。TLC顯示反應(yīng)完全。在減壓下將反應(yīng)濃縮至干。在EtOAc(100mL)和鹽水(50mL)之間分配殘余物。用鹽水洗有機(jī)層，在硫酸鈉上干燥，過(guò)濾并濃縮，然后裝載到150g硅膠柱上。用DCM中的0～5％EtOAc進(jìn)行洗脫，產(chǎn)生作為米白色固體的化合物63(460mg，68.4％)。
步驟7
于-78℃，氮?dú)庀?，向化合?3(460mg，1.47mmol)和硼酸三異丙酯(691mg，3.67mmol)在25mL干THF中的攪拌溶液中逐滴加入丁基鋰溶液(2.5M，己烷中，1.47mL，3.67mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)，用LCMS進(jìn)行監(jiān)測(cè)。2小時(shí)后，LCMS顯示反應(yīng)完全。用25mL水淬滅反應(yīng)，并在減壓下濃縮至大約15mL的總體積。用醚(2×10mL)洗殘余物，水層被放在冰水浴中。攪拌下，小心地逐滴加入10N HCl水溶液，直到pH＝7。過(guò)濾并用冰水(3×5mL)洗，產(chǎn)生了作為白色固體的化合物64(208mg，51％)。
制備3-氟-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基硼酸(67)
向化合物65(4g，20mmol)在MeCN(500mL)和AcOH(100mL)的溶液中加入Select-Fluor(10g，30mmol)，在80℃對(duì)得到的混合物加熱過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 5∶1)顯示化合物1完全消耗。在真空下濃縮反應(yīng)混合物，通過(guò)在硅膠上進(jìn)行快速色譜(石油醚/EtOAc 10∶1)來(lái)純化殘余物，產(chǎn)生了作為米白色固體的66(0.64g，13％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.434(brs，1H)，8.311-8.280(m，1H)，8.056-8.023(m，1H)，7.191(s，1H)，7.086-7.053(m，1H)。
-78℃下，氮?dú)庀拢蚧衔?6(250mg，1.16mmol)和硼酸三異丙酯(547mg，2.91mmol)在3mL干THF的攪拌溶液中逐滴加入丁基鋰溶液(2.5M，己烷中，1.16mL，2.91mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)，用LCMS進(jìn)行監(jiān)測(cè)。2小時(shí)后，LCMS顯示1∶1∶1的SM∶脫溴-SM∶想要的產(chǎn)物。加入另外1.16mL正丁基鋰。在-78℃對(duì)反應(yīng)進(jìn)行再1個(gè)小時(shí)的攪拌，用3mL水淬滅，在減壓下濃縮至總體積大約3mL。用醚(2×10mL)洗殘余物，水層被放在冰水浴中。攪拌下，小心地逐滴加入10N HCl水溶液，直到pH＝7。形成乳狀懸浮液，過(guò)濾沒(méi)有產(chǎn)生顯著量的固體。在高真空下濃縮混合物，產(chǎn)生作為米白色固體的化合物67(200mg，95％)。
制備2-氧代-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基硼酸(69)
在100度的微波反應(yīng)器中，對(duì)化合物68(1.0g，4.7mmol)、聯(lián)硼酸頻那醇酯(1.79g，7.04mmol)、乙酸鉀(1.38g，14.1mmol)和催化劑PdCl2(dppf)(68.7mg，0.094mmol)在20ml DMF中的混合物加熱60分鐘。LCMS顯示反應(yīng)20％完全。在100度油浴中對(duì)反應(yīng)加熱過(guò)夜，LCMS顯示反應(yīng)完全。在真空下將反應(yīng)濃縮至干。然后在EtOAc(50mL)和鹽水(30mL)之間分配殘余物。用EtOAc(3×25mL)萃取水層。在硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)層，然后濃縮至殘余物。使用DCM中的2～5％MeOH，在硅膠上進(jìn)行快速色譜，產(chǎn)生作為目標(biāo)產(chǎn)物的米白色粉末(803mg，66％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.35(s，12H)3.56(s，2H)7.85(s，1H)8.54(s，1H)。
制備71
向化合物70(40g，99.2mmol)和(iPrO)3B(59.2mL，258mmol)在2-甲基-四氫-呋喃(496mL)(496mL)中的溶液(冷卻至-60℃)中加入n-BuLi(108mL，267mmol)。對(duì)反應(yīng)混合物在-60℃攪拌2小時(shí)。TLC(石油醚∶EtOAc＝2∶1)顯示反應(yīng)完全。通過(guò)加入水(500mL)淬滅反應(yīng)，在減壓下濃縮。用濃HCl對(duì)水溶液進(jìn)行酸化，至pH＝5。對(duì)沉淀加以過(guò)濾，用冰水洗濾渣，得到作為白色固體的產(chǎn)物(60g，產(chǎn)率82.19％)。
制備6-乙酰氨基-4-甲基吡啶-3-基硼酸(73)
向2-乙酰基氨基-5-溴-4-甲基吡啶(1.858g，8.11mmol)和硼酸三異丙酯(7.5ml，32.4mmol)在THF的經(jīng)攪拌溶液(冷卻至-78℃)中加入正丁基鋰(4.1ml，41mmol 10M溶液，己烷中)。-78℃下1小時(shí)后，用水淬滅反應(yīng)，溫?zé)嶂潦覝?。減壓下除去THF。加入2N HCl，直到發(fā)展出沉淀。過(guò)濾并用最少量的水洗，在真空下干燥。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)dppm 2.07(s，3H)2.39(s，3H)7.84(s，1H)8.09(s，2H)8.33(s，1H)10.36(s，1H)。
制備3-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(79)
步驟1
-78℃下，N2氣下，向二異丙基-胺(50g，0.5mol)在干THF(1000mL)中的經(jīng)攪拌溶液中逐滴加入n-BuLi(200mL，0.5mol)。加入后，令得到的混合物溫?zé)嶂?℃，保持10分鐘，并再冷卻至-78℃。-78℃下，N2氣下，將化合物74(80g，0.455mol)在THF(1000mL)中的溶液逐滴加入至LDA溶液。加入后，在-78℃對(duì)反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。在-78℃，將甲酸乙酯(50g，0.68mol)逐份加入進(jìn)混合物。2分鐘后，-78℃下，用10％檸檬酸在THF(400mL)中的溶液淬滅得到的混合物。令混合物溫?zé)嶂潦覝?，傾倒進(jìn)H2O(500mL)，用EtOAc(500mL×3)萃取。用鹽水(500mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物75(92g，99％)。
步驟2
-78℃下，N2氣下，向化合物75(92g，0.455mol)在THF(2L)的溶液中逐份加入MeMgBr(230mL，0.69mol)。加入后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫下攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 10∶1)顯示化合物2完全消耗。用飽和NH4Cl(300mL)淬滅反應(yīng)混合物，用EtOAc(1L×3)萃取。用鹽水(1L)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生粗化合物76，通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 10∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色油的純化合物76(85g，85％)。
步驟3
0℃下，向PDC(365g，0.97mol)和CH2Cl2(2000mL)的混合物中加入化合物76(85g，0.39mol)。加入后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 10∶1)顯示反應(yīng)完全。過(guò)濾得到的混合物，真空下濃縮濾液，產(chǎn)生粗化合物77，通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 50∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色固體的純化合物77(56g，63％)。
步驟4
室溫下向化合物77(40g，0.184mol)在乙醇(300mL)中的溶液中加入NH2NH2(27.6g，0.553mol)。加入后，反應(yīng)混合物回流過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 3∶1)顯示化合物77完全消耗。令反應(yīng)混合物冷卻至室溫，真空下濃縮，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc，從10∶1至3∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為白色固體的78(30g，76％)。
步驟5
通過(guò)針頭，用鼓泡氮?dú)?，?duì)5-溴-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(1.04g，40.987mmol)、聯(lián)硼酸頻那醇酯(1.93g，7.45mmol，1.5Eq)、乙酸鉀(1.66g，16.9mmol，3.04Eq)和[1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷復(fù)合物(1∶1)(0.109g，0.149mmol，0.03Eq)在10mL無(wú)水DMSO中的懸浮液脫氣20分鐘。反應(yīng)在微波反應(yīng)器中于150℃加熱2小時(shí)(高吸收)。該時(shí)間后，將反應(yīng)冷卻至室溫，并傾倒進(jìn)H2O(200ML)和EtOAc(200mL)中。將雙層混合物濾經(jīng)壓緊的硅藻土，在Na2SO4上干燥濾液，真空下濃縮至黑色的油，通過(guò)biotage柱(Si 40+M)對(duì)黑色的油進(jìn)行純化，其裝有己烷，并用EtOAc/己烷(0-30％900mL，30-30％900mL，30-50％900mL，27mL級(jí)分)進(jìn)行洗脫，產(chǎn)生作為白色固體的產(chǎn)物(1.19g，93.6％)。1H NMR(300MHz，氯仿-d)δppm 8.88(d，J＝1.51Hz，1H)8.51(d，J＝1.51Hz，1H)2.60(s，3H)1.30(s，6H)1.25(s，6H)；NH在NMR中未發(fā)現(xiàn)。
制備化合物85
步驟1
70℃下，通過(guò)CF2HCl氣，向化合物80(28g，0.2mol)和NaOH(40g，1mol)在二惡烷(450mL)和H2O(150mL)中的溶液中鼓泡20分鐘，并在同樣的溫度下攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 2∶1)顯示反應(yīng)完成。用Et2O(3×300mL)萃取反應(yīng)混合物，真空下濃縮合并的有機(jī)層，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，通過(guò)柱色譜(石油醚/EtOAc 30∶1～3∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色油的化合物81(20g，52.6％)。
步驟2
向化合物81(10g，0.0526mol)在EtOH/H2O(2∶1，450mL)中的溶液中加入鐵粉(15g，0.268mol)，接著一次性加入NH4Cl(7.5g，0.14mol)。加入后，混合物回流過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 2∶1)顯示反應(yīng)完全。減壓下除去EtOH，將殘余物在飽和NaHCO3水溶液(500mL)和EtOAc(400mL)之間分配。用EtOAc(2×300mL)萃取水層，用鹽水(2×300mL)洗合并的有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物82(8.0g，95％)。
步驟3
室溫下，向化合物82(8.0g，0.05mol)在AcOH(100mL)中溶液中逐滴加入溴(8.0g，0.05mol)。在環(huán)境溫度下對(duì)混合物攪拌2小時(shí)。TLC(石油醚/EtOAc 2∶1)顯示反應(yīng)完全。減壓下除去AcOH，將殘余物在飽和NaHCO3水溶液(200mL)和EtOAc(200mL)之間分配。用EtOAc(200mL)萃取水層，用鹽水(2×300mL)洗合并的有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，通過(guò)柱色譜(石油醚/EtOAc8∶1～4∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物83(10.9g，91.2％)。
步驟4
向化合物83(5.61g，23.5mmol)在乙腈(250mL)中的溶液中加入二碳酸二叔丁酯(15.65g，71.71mmol)、4-(二甲基氨基)吡啶(571mg，4.67mmol)和三乙基胺(16.5mL，118mmol)。在室溫下對(duì)混合物攪拌1.5小時(shí)，然后濃縮至干，通過(guò)硅膠色譜(用己烷中的10-25％乙酸乙酯梯度)純化，產(chǎn)生作為白色固體的化合物84(9.53g，92.4％)。
步驟5
在干冰/異丙醇浴中，將溴化物84(3.30g，7.51mmol)和硼酸三異丙酯(4.4mL，19mmol)在2-甲基-四氫呋喃(38mL)中的溶液冷卻至-65℃(浴溫)。3分鐘內(nèi)逐滴加入2.5M正丁基鋰在己烷(7.5mL，19mmol)中的溶液。-65℃攪拌3小時(shí)后，加入去離子水(10mL)，除去低溫浴，令溶液溫?zé)嶂潦覝?。真空下除去揮發(fā)物，用二乙醚(2×20mL)萃取水性殘余物。棄去萃取物。水相冷卻至0℃，用6N HCl酸化至pH3，用二乙醚(20mL)接著用乙酸乙酯(20mL)萃取。在硫酸鎂上干燥合并的有機(jī)層，過(guò)濾，濃縮，產(chǎn)生座位黃色泡沫的粗硼酸85(2.27g，～60％純度，75％未校正產(chǎn)率)。該粗硼酸不經(jīng)進(jìn)一步純化即用于Suzuki反應(yīng)。
實(shí)施例A-1按照方法A制備反應(yīng)性中間產(chǎn)物A和B 制備4-甲基-2-(甲基硫代)嘧啶(2)
室溫下，對(duì)化合物4-甲基嘧啶-2-硫醇(500g，3.05mol)、碘甲烷(611g，4.27mol)和K2CO3(915g，6.71mol)在THF(4L)中的混合物攪拌18小時(shí)。過(guò)濾懸浮液，用醚(500mL×2)洗固體。濃縮濾出液，真空下干燥，產(chǎn)生作為黃色油的化合物2(380g，89.2％)。
制備(E)-3-羥基-2-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)丙烯醛(3)
0℃下，向DMF(114.9g，1.57mol)在CHCl3(800mL)中的溶液中逐滴加入草酰氯(190.3g，1.50mol)。加入后，于30℃對(duì)得到的混合物加以溫?zé)岷蛿嚢?小時(shí)。令混合物冷卻至0℃，向混合物中加入4-甲基-2-(甲基硫代)嘧啶(2)(100g，0.714mol)。將得到的混合物溫?zé)嶂?0℃，攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并過(guò)濾。用CHCl3(150mL×3)洗濾渣，真空下干燥，產(chǎn)生作為黃色固體的(E)-3-羥基-2-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)丙烯醛(3)(342.0g，100％)。
制備4-(異惡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶(4)
向鹽酸羥基胺(60.0g，0.86mol)在水(2L)中的溶液中分份加入(E)-3-羥基-2-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)丙烯醛(3)(342g，0.714mol)。加入后，于60℃對(duì)混合物加熱并攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，通過(guò)加入10％NaHCO3水溶液將溶液調(diào)節(jié)至pH大約4。過(guò)濾得到的沉淀物，用水(200mL×2)洗，真空下干燥，產(chǎn)生作為黃色固體的4-(異惡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶(4)(112g，81.2％)。
制備2-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-3-氧代丙腈(5)
70℃下，對(duì)4-(異惡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶(4)(112.0g，0.58mol)和NaOH(23.2g)在水/MeOH(350mL/350mL)中的混合物攪拌6小時(shí)。令反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用檸檬酸調(diào)節(jié)至pH 3.5。過(guò)濾得到的沉淀，用水(500mL×3)和乙醚(500mL×3)洗。然后在真空下干燥沉淀，產(chǎn)生作為黃色固體的2-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-3-氧代丙腈(5)(100g，89.3％)。
制備4-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-5-胺(6)
對(duì)2-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-3-氧代丙腈(5)(100g，0.52mol)、NH2NH2·H2O(85％，31.2g，0.62mol)和濃HCl(60mL)在乙醇(1L)中的懸浮液在回流下攪拌5小時(shí)。冷卻至室溫后，對(duì)混合物進(jìn)行真空下濃縮，用醚(200mL×3)洗殘余物，并懸浮于H2O(200mL)中。用飽和Na2CO3水溶液將混合物堿化至pH 9，收集沉淀。用H2O(100mL×3)和醚(200mL×3)洗固體，然后真空下干燥，產(chǎn)生作為黃色固體的4-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-5-胺(6)(56.8g，51.8％)。1H NMR(400MHz，CD3CN)δ8.295(d，1H)，7.826(s，1H)，7.101(d，2H)，5.800(d，1H)，2.586(s，3H)。
制備4-(5-碘-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶(A)
-3℃下，將NaNO2(20.0g，0.29mol)在水(150mL)中的溶液傾倒進(jìn)4-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-5-胺6(50.0g，0.24mol)在冰醋酸(400mL)和水(100mL)的混合物中的溶液中。溫度升高至-1℃。向獲得的溶液中加入濃H2SO4(10mL)，逐滴加入碘化鉀(120.0g，1.2mol.)和I2(123.0g，10.48mol)在水(200mL)中的溶液。將獲得的溶液加熱至50℃，持續(xù)2小時(shí)，用氨水中和混合物。用Na2S2O3處理過(guò)量的碘。過(guò)濾沉淀，用乙酸乙酯洗濾出液。蒸發(fā)有機(jī)相，通過(guò)色譜(THF∶EtOAc＝4∶1)純化殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的4-(5-碘-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶(A)(42.2g，54.6％)。1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.55(d，1H)，8.35(s，1H)，7.55(d，1H)，2.55(s，3H)。
實(shí)施例A-2制備4-(5-碘-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶(B)的流程
60℃下，對(duì)化合物A(75.0g，0.235mmol)、DHP(39.6g，0.471mmol)和TsOH·H2O(7.5g)的混合物攪拌6小時(shí)。將混合物冷卻至室溫并濃縮，通過(guò)色譜(EtOAc∶石油醚＝1∶15)純化殘余物，產(chǎn)生4-(5-碘-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶(B)(57.6g，60.8％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.495(d，1H)，8.400(s，1H)，7.638(d，1H)，5.398(m，1H)，4.070(m，1H)，3.732(m，1H)，2.796(s，3H)，2.110(m，3H)，1.900(m，3H)。
實(shí)施例B-1制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-1)
制備4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-2-甲基硫代)嘧啶(B-1-1)
在40～50℃，對(duì)4-(5-碘-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶(A)(31.8g，0.1mol)、2-碘-丙烷(85g，50mL，0.5mol)和K2CO3(16.5g，0.12mol)在DMF(500mL)中的混合物加熱過(guò)夜。當(dāng)TLC(己烷∶EtOAc＝15∶1)顯示反應(yīng)完全后，減壓下蒸發(fā)DMF。將殘余物加入到EtOAc(400mL)中。用飽和NaCl水溶液洗混合物，在Na2SO4上干燥，并濃縮產(chǎn)生粗產(chǎn)物，通過(guò)制備性HPLC對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色油的純4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶B-1-1(17g，47.2％)。
制備4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶(B-1-2)
0-5℃下，向4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶B-1-1(15.5g，43mmol)在THF(350mL)和水(350mL)的溶液中加入過(guò)硫酸氫鉀(39.6g，64.6mmol)。加入后，在室溫下對(duì)混合物攪拌過(guò)夜。TLC(己烷∶EtOAc＝5∶1)顯示反應(yīng)完全，加入EtOAc(500mL)。分離有機(jī)層，用飽和NaCl水溶液洗，在Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基磺?；?嘧啶B-1-2(16g，94.9％)。
制備(2S)-1-(4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-1-3)
對(duì)4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基磺?；?嘧啶B-1-2(16g，40mmol)和(s)-1-氨基-丙-2-醇(9g，122mmol)在THF(160mL)中的混合物加熱至回流，過(guò)夜。TLC(己烷∶EtOAc＝2∶1)顯示反應(yīng)完全，向混合物中加入EtOAc(80mL)和飽和NaCl水溶液(80mL)，對(duì)各層加以分離。分離有機(jī)層，用飽和NaCl水溶液(30mL)洗，在Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生作為褐色油的(2S)-1-(4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-1-3)(15g，96.9％)。
制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-1)
向(2S)-1-(4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇B-1-3(0.312g，0.8mmol)在甲苯(15mL)和EtOH(5mL)中的溶液中加入1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基硼酸(0.40g，1.6mmol)和2N Na2CO3水溶液(1.24mL)，N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)4(0.23g，0.2mmol)，再次對(duì)混合物脫氣。將得到的混合物加熱至回流并攪拌過(guò)夜。分離有機(jī)層并濃縮，通過(guò)制備性HPLC純化殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-1)(0.260g，66.19％)。
實(shí)施例B-2制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-2)
制備N(xiāo)-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺B-2-3
向5-溴-N-甲基吡啶-2-胺B-2-2(1g，5.37mmol)在DMF(30mL)中溶液中加入KOAc(1.58g，16.1mmol)和聯(lián)硼酸頻那醇酯(2g，8.06mmol)。在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。加入Pd(PPh3)2Cl2(0.5g，0.53mmol)，并再次脫氣。將反應(yīng)加熱至80～90℃，攪拌過(guò)夜。減壓下除去DMF。殘余物被溶于EtOAc(40mL)，用飽和NaCl水溶液洗，在Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生粗N-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺B-2-3(2.3g)，其在下個(gè)步驟中直接使用。
制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-2)
向(2S)-1-(4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(9)(0.65g，1.68mmol)在甲苯(20mL)和EtOH(7mL)中的溶液中加入N-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺12(1.44g，理論上3.36mmol)和2N Na2CO3水溶液(2.5mL)。在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)4(0.2g，0.168mmol)，并再次脫氣。將反應(yīng)加熱至80～90℃，攪拌過(guò)夜。冷卻反應(yīng)物。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)制備性HPLC純化殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-2)(0.020g，3.2％)。
實(shí)施例B-3制備(2S)-1-(4-(3-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-3)
制備3-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺(B-3-2)
向5-溴-3-甲基吡啶-2-胺B-3-1(2g，11mmol)在DMF(70mL)中的溶液中加入KOAc(3.2g，33mmol)和聯(lián)硼酸頻那醇酯(4.1g，16mmol)。在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)2Cl2(1g，1.1mmol)，并再次脫氣。將反應(yīng)加熱至80～90℃，攪拌過(guò)夜。將混合物傾倒進(jìn)水(100mL)中。用EtOAc(50mL×3)萃取混合物，用飽和NaCl水溶液洗有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，濃縮產(chǎn)生粗3-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺(B-3-2)(3.5g)，其直接用于下個(gè)步驟。
制備(2S)-1-(4-(3-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-3)
向(2S)-1-(4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-1-3)(0.52g，1.34mmol)在甲苯(21mL)和EtOH(7mL)中的溶液中加入3-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺(B-3-2)(1g，理論上2.68mmol)和2N Na2CO3水溶液(2mL)。在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)4(0.15g，0.134mmol)，并再次脫氣。將反應(yīng)加熱至80～90℃，攪拌過(guò)夜。冷卻反應(yīng)物。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)制備性HPLC純化殘余物，產(chǎn)生作為淡黃色固體的(2S)-1-(4-(3-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-3)(0.057g，11.6％)。
實(shí)施例B-4制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(5-甲基-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-4)
制備5-溴-N，3-二甲基吡啶-2-胺(B-4-2)
0℃下，向5-溴-3-甲基吡啶-2-胺(B-4-1)(3.7g，0.02mol)在THF(50mL)中的溶液中逐份加入NaH(0.8g，0.02mol)。加入后，在室溫下對(duì)混合物攪拌0.5小時(shí)，再次冷卻至0℃。緩慢加入碘甲烷(2.8g，0.02mol)。令得到的混合物升至室溫，并攪拌1小時(shí)。TLC(EtOAc∶石油醚＝1∶4)顯示反應(yīng)完全。加入飽和NaCl水溶液(10mL)和EtOAc(10mL)。濃縮有機(jī)層，通過(guò)硅膠柱純化殘余物，其中用EtOAc/石油醚(1∶8)洗脫，產(chǎn)生作為白色固體的5-溴-N，3-二甲基吡啶-2-胺(B-4-2)(2.3g，57.8％)。
制備N(xiāo)，3-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺(B-4-3)
向5-溴-N，3-二甲基吡啶-2-胺(B-4-2)(2.3g，11.4mmol)在DMF(70mL)中的溶液中加入KOAc(3.35g，34.2mmol)和聯(lián)硼酸頻那醇酯(4.34g，17.1mmol)。在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)2Cl2(1g，1.1mmol)，并再次脫氣。將反應(yīng)加熱至80～90℃，攪拌過(guò)夜。將混合物傾倒進(jìn)飽和NaCl水溶液(80mL)中。用EtOAc(50mL×3)萃取混合物。用飽和NaCl水溶液洗有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，濃縮產(chǎn)生粗N，3-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺(B-4-3)(3.5g)，其不經(jīng)純化直接用于下個(gè)步驟。
制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(5-甲基-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-4)
向(2S)-1-(4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-1-3)(1g，2.58mmol)在甲苯(30mL)和EtOH(10mL)中的溶液中加入N，3-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺(B-4-3)(2g，理論上6.3mmol)和2N Na2CO3水溶液(4mL)。在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)4(0.3g，0.26mmol)，并再次脫氣。將反應(yīng)加熱至80～90℃，攪拌過(guò)夜。MS顯示反應(yīng)完全，冷卻混合物。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)制備性HPLC純化殘余物，產(chǎn)生作為淡黃色固體的(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(5-甲基-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-4)(0.167g，16.98％)。
實(shí)施例B-5制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-5)
制備5-溴-3-碘吡啶-2-胺(B-5-2)
80-90℃下，對(duì)5-溴吡啶-2-胺(B-5-1)(50g，0.29mol)、I2(59g，0.233mol)和NaIO4(24.8g，0.116mol)在DMF(600mL)中的混合物攪拌過(guò)夜。TLC(EtOAc∶石油醚＝1∶5)顯示反應(yīng)完全。減壓下濃縮混合物，以除去溶劑。將殘余物溶解于EtOAc(500mL)中，用水(100mL)和飽和NaCl水溶液(100mL)洗，在Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生粗化合物B-5-2，通過(guò)硅膠柱對(duì)其加以純化，用EtOAc/石油醚(12∶1)洗脫，產(chǎn)生作為橙色固體的純5-溴-3-碘吡啶-2-胺(B-5-2)(35g，40.5％)。
制備5-溴-3-甲基-2-(三甲基硅基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-5-3)
向5-溴-3-碘吡啶-2-胺(B-5-2)(30g，0.1mol)在DMF(600mL)中的溶液中加入KOAc(29.4g，0.3mol)和LiCl(4.25g，0.1mol)。在N2下對(duì)混合物脫氣3次后，加入Pd(OAc)2(2.24g，0.01mol)，并對(duì)混合物再次進(jìn)行脫氣。然后加入三甲基-丙-1-炔基-硅烷(56g，0.5mol)。將得到的混合物加熱至80-100℃，持續(xù)2天。TLC(EtOAc∶石油醚＝1∶5)顯示反應(yīng)完全。減壓下除去過(guò)量DMF。將殘余物溶于EtOAc(500mL)，用飽和NaCl水溶液洗，在Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，通過(guò)硅膠柱色譜(100-200)(石油醚，然后是EtOAc∶石油醚＝1∶10)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為褐色油的5-溴-3-甲基-2-(三甲基硅基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-5-3)(不純，5g，17.7％)。
制備5-溴-3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-5-4)
向5-溴-3-甲基-2-(三甲基硅基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-5-3)(5g，17.8mmol)在THF(50mL)中的溶液中加入2N HCl(20mL)。對(duì)混合物在回流下攪拌過(guò)夜。HPLC顯示反應(yīng)完全。在減壓下濃縮混合物后，將殘余物溶于NaHCO3水溶液(20mL)中，用EtOAc(10mL×3)萃取。用飽和NaCl水溶液洗有機(jī)相，在Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，通過(guò)制備性HPLC對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為灰白色固體的5-溴-3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-5-4)(2g，53.2％)。
制備3-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-5-5)
向5-溴-3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-5-4)(0.5g，2.37mmol)在DMF(150mL)中的溶液中加入KOAc(0.7g，7.11mmol)和聯(lián)硼酸頻那醇酯(0.72g，2.84mmol)。在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)2Cl2(0.2g，0.237mmol)，并再次脫氣。將反應(yīng)加熱至80～90℃，攪拌過(guò)夜。將混合物傾倒進(jìn)水(30mL)中，用EtOAc(15mL×3)萃取。用飽和NaCl水溶液洗有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，濃縮產(chǎn)生粗3-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-5-5)(0.7g)，其直接用于下個(gè)步驟。
制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-5)
向(2S)-1-(4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(9)(0.65g，1.7mmol)在甲苯(21mL)和EtOH(7mL)中的溶液中加入3-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶21(0.7g，理論上2.37mmol)和2N Na2CO3水溶液(2.5mL)。在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)4(0.19g，0.17mmol)，并再次脫氣。將反應(yīng)加熱至80～90℃，攪拌過(guò)夜。冷卻混合物。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)制備性HPLC純化殘余物，產(chǎn)生作為白色固體的(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-5)(0.150mg，16.2％)。
實(shí)施例B-6制備(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-6)
制備5-溴-3-甲基-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-2)
N2氣下于0℃向5-溴-3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-1)(1.2g，5.68mmol)在THF(30mL)中的溶液中加入NaH(0.34g，8.5mmol)，30分鐘后加入4-溴苯磺酰氯(1.2g，6.8mmol)。在室溫下對(duì)混合物攪拌1.5小時(shí)。TLC(石油醚∶EtOAc＝5∶1)顯示反應(yīng)完全。加入飽和NaCl水溶液(10mL)，過(guò)濾混合物，產(chǎn)生作為白色固體的5-溴-3-甲基-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-2)(0.8g)。從濾液分離有機(jī)層，濃縮至8mL，再次過(guò)濾產(chǎn)生5-溴-1-(4-溴苯基磺酰基)-3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.5g)。將兩批合并，產(chǎn)生作為白色固體的5-溴-3-甲基-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-2)(1.3g，65.2％)。
制備5-溴-2，3-二甲基-1-(苯基磺酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-3)
-40℃下，向5-溴-1-(4-溴苯基磺?；?-3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-2)(0.9g，2.56mmol)在THF(20mL)中的懸浮液中逐滴加入LDA(15mL，0.2M，在THF中)。在-10～-20℃對(duì)混合物攪拌0.5小時(shí)。-40～-30℃下逐滴加入甲基碘(0.55g 3.84mmol)。在室溫下對(duì)反應(yīng)攪拌過(guò)夜。LC-MS顯示反應(yīng)完全。向混合物中加入飽和NaCl水溶液(10mL)和EtOAc(10mL)。分離有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生作為淡黃色固體的5-溴-2，3-二甲基-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-3)(0.9g，96.3％，含有一些起始材料(B-6-2))。
制備5-溴-2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-4)
室溫下向5-溴-2，3-二甲基-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-3)(0.9g，2.5mmol)在THF(30mL)和MeOH(30mL)的懸浮液中加入NaOH水溶液(20％，19mL)。對(duì)混合物加熱至回流，過(guò)夜。TLC(石油醚∶EtOAc＝5∶1)顯示反應(yīng)完全。減壓下除去溶劑后，向混合物中加入水(20mL)和CH2Cl2(20mL)。分離有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥。濃縮混合物，產(chǎn)生粗混合物，通過(guò)制備性HPLC對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為白色固體的5-溴-2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-4)(0.4g，72.4％)。
制備2，3-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-5)
向5-溴-2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-4)(0.4g，1.77mmol)在DMF(30mL)中的溶液中加入KOAc(0.52g，5.3mmol)和聯(lián)硼酸頻那醇酯(0.68g，2.65mmol)，在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(dppf)2Cl2(40mg，0.049mmol)，并再次脫氣。將反應(yīng)加熱至80～90℃，攪拌過(guò)夜。將混合物傾倒進(jìn)水(100mL)中，用EtOAc(40mL×3)萃取。用飽和NaCl水溶液洗有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生粗2，3-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-5)(0.7g)，其不經(jīng)純化，直接用于下個(gè)步驟。
制備(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-6)
向(2S)-1-(4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-1-3)(0.34g，0.885mmol)在甲苯(30mL)和EtOH(10mL)中的溶液中加入2，3-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-6-5)(0.7g，理論上1.77mmol)和2N Na2CO3水溶液(1.3mL)。在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)4(68mg，0.058mmol)，并再次脫氣。將反應(yīng)加熱至80～90℃，攪拌過(guò)夜。冷卻混合物。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)制備性HPLC純化殘余物，產(chǎn)生作為淡黃色固體的(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-6)(0.170mg，23.6％)。
實(shí)施例B-7制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-7)
制備5-溴-3-(2-(三甲基硅基)乙炔基)吡啶-2-胺(B-7-2)
向5-溴-3-碘吡啶-2-胺(B-7-1)(20g，66.9mmol)在Et3N(200mL)的溶液中加入CuI(1.27g，6.69mmol)，在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)2Cl2(1.4g，20.1mmol)，對(duì)混合物再次進(jìn)行脫氣。然后0℃下將乙炔基-三甲基-硅烷(7.2g，73.6mmol)逐滴加入進(jìn)混合物。在室溫下對(duì)混合物攪拌4小時(shí)。TLC(石油醚∶EtOAc＝5∶1)顯示反應(yīng)完全。在減壓下蒸發(fā)混合物，產(chǎn)生粗混合物，通過(guò)硅膠柱對(duì)其加以純化，其中用石油醚/EtOAc(20∶1)洗脫，產(chǎn)生作為白色固體的5-溴-3-(2-(三甲基硅基)乙炔基)吡啶-2-胺(B-7-2)(10g，55.6％)。
制備5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-3)
向5-溴-3-(2-(三甲基硅基)乙炔基)吡啶-2-胺(B-7-2)(9.5g，35.3mmol)在t-BuOH(100mL)中的溶液中加入t-BuOK(10.5g，141.3mmol)。80℃下對(duì)混合物攪拌20小時(shí)。TLC(石油醚∶EtOAc＝5∶1)顯示反應(yīng)完全。然后將混合物冷卻至室溫。向混合物中加入濃鹽酸(50mL)。然后將混合物加熱至回流，持續(xù)8小時(shí)。TLC(石油醚∶EtOAc＝5∶1)顯示反應(yīng)完全。將混合物冷卻至室溫并傾倒進(jìn)水(100mL)中。將混合物濾經(jīng)硅藻土的床。用水(100mL)稀釋濾液，通過(guò)加入50％氫氧化鈉使其成為堿性的。用EtOAc(150mL×3)萃取混合物。用水(100mL)和飽和氯化鈉(100mL)洗有機(jī)層，在硫酸鈉上干燥，減壓下濃縮，產(chǎn)生作為淡黃色固體的5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-3)(6.2g，88.6％)。
制備5-溴-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-4)
N2氣下，向5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-3)(6.2g，0.031mol)在THF(100mL)中的懸浮液中加入NaH(1.51g，0.037mol)。30分鐘后加入BsCl(3.58g，0.035mol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^(guò)夜。TLC(石油醚∶EtOAc＝5∶1)顯示反應(yīng)完全。向混合物中加入水(200mL)和EtOAc(50mL×3)。分離有機(jī)層，濃縮，產(chǎn)生作為淡黃色固體的5-溴-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-4)(10g，94.3％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.465(s，1H)，8.141-8.114(d，2H)，7.905(s，1H)，7.679-7.669(d，1H)，7.586-7.529(m，1H)，7.430-7.351(2，1H)，6.458-6.475(d，1H)。
制備5-溴-1-(4-溴苯基磺?；?-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-5)
-78℃下，向5-溴-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-4)(10g，0.03mol)在THF(50mL)中的懸浮液中逐滴加入LDA(200mL，0.21M，THF中)。-78℃下對(duì)混合物攪拌1小時(shí)。然后在-78℃逐滴加入MeI(5.2g 0.038mol)。在-70℃對(duì)反應(yīng)攪拌3小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。LC-MS顯示反應(yīng)完全。向混合物中加入水(200mL)和EtOAc(100mL×3)。分離有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生作為淡黃色固體的5-溴-1-(4-溴苯基磺?；?-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-5)(6g，57.7％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.390-8.385(d，1H)，8.176-8.145(d，2H)，7.828-7.823(d，1H)，7.613-7.576(t，1H)，7.517-7.479(t，2H)，6.254(s，1H)，2.748(s，3H)。
制備5-溴-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-6)
室溫下向5-溴-1-(4-溴苯基磺?；?-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-5)(4g，11.4mmol)在THF(20mL)中懸浮液中加入NaOH水溶液(20mL)。將混合物加熱至回流，持續(xù)過(guò)夜。LC-MS顯示反應(yīng)完全。向混合物中加入水(100mL)和EtOAc(50mL×3)。分離有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生粗混合物，通過(guò)制備性HPLC對(duì)其進(jìn)行純化，產(chǎn)生作為白色固體的5-溴-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-6)(1.2g，50.2％)。
制備2-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-7)
向5-溴-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-6)(0.5g，2.4mmol)、聯(lián)硼酸頻那醇酯(1.2g，4.7mmol)和KOAc(0.7g，7.1mmol)在DMF(50mL)中的混合物中加入Pd(dppf)2Cl2(0.05g，0.06mmol)。N2下對(duì)混合物脫氣2分鐘。然后在80℃對(duì)混合物攪拌過(guò)夜。TLC(CH2Cl2∶MeOH＝20∶1)顯示反應(yīng)完全。向混合物中加入水(50mL)和EtOAc(50mL×3)。分離有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生作為褐色固體的粗2-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-7)(1.8g)。
制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-7)
向2-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(B-7-7)(1.8g，理論上2.3mmol)和(2S)-1-(4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-1-3)(0.45g，1.2mmol)在甲苯/EtOH(3∶1，50mL)中的懸浮液中加入Na2CO3水溶液(1.7mL，2M)。N2下對(duì)混合物脫氣2分鐘，向混合物中加入Pd(PPh3)4(0.05g，0.042mmol)，并再次脫氣。在80℃下對(duì)混合物攪拌30小時(shí)。TLC(CH2Cl2∶MeOH＝20∶1)顯示反應(yīng)完全。向混合物中加入水(50mL)和EtOAc(50mL×3)。分離有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，通過(guò)制備性HPLC對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為白色固體的(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-7)(0.169g，18.6％)。
實(shí)施例B-8制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(2-甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶-6-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-8)
制備6-溴-2-甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶(B-8-2)
向5-溴嘧啶-2-胺(170.0g，0.98mol)在i-PrOH(2L)和DMF(500mL)中的溶液中加入1-氯丙-2-酮(606g，6.53mol)，然后在100℃對(duì)混合物攪拌16小時(shí)。TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶2)顯示反應(yīng)完全。通過(guò)Na2CO3淬滅反應(yīng)混合物，并進(jìn)行過(guò)濾。真空下濃縮濾液，通過(guò)柱色譜(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)純化殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物B-8-2(10.0g，4.8％)。
制備2-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)咪唑并[1，2-a]嘧啶(B-8-3)
向化合物B-8-3(3.0g，14.1mmol)在DMF(60mL)中的溶液中加入聯(lián)硼酸頻那醇酯(3.95g，15.5mmol)和KOAc(4.58g，42.4mmol)。N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)2Cl2(0.20g，0.23mmol)，并對(duì)混合物再次進(jìn)行脫氣。然后將得到的混合物加熱至90℃，并攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶2)顯示反應(yīng)完全。然后冷卻混合物，并過(guò)濾。濃縮濾液，產(chǎn)生作為褐色固體的粗化合物B-8-3(2.5g)，其不經(jīng)純化即用于下個(gè)步驟。
制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(2-甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶-6-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-8)
向化合物B-1-3(2.0g，5.16mmol)在甲苯(48mL)和EtOH(16mL)中的溶液中加入粗化合物B-8-3(2.5g，9.26mmol)和2N Na2CO3水溶液(7.5mL)。N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)4(0.41g，0.36mmol)，并對(duì)混合物再次進(jìn)行脫氣。然后將得到的混合物加熱至80℃，并攪拌過(guò)夜。TLC(CH2CL2∶MeOH＝20∶1)顯示反應(yīng)完全，冷卻混合物。分離有機(jī)層并濃縮，通過(guò)制備性HPLC純化殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物(B-8)(60mg，1.6％)。
實(shí)施例B-9制備(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶-6-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇PF-04597926.(B-9) 制備3-溴丁-2-酮(B-9-2)
70℃下，向丁-2-酮(600g，8.3mol)在AcOH(500mL)和H2O(2L)中的溶液中逐滴加入溴(360g，8.5mol)，進(jìn)行3小時(shí)，然后在室溫下對(duì)得到的混合物攪拌14小時(shí)。TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)顯示反應(yīng)完全。加入水(1L)，分離有機(jī)層。用EtOAc(400mL×3)萃取水層。在Na2SO4上干燥合并的有機(jī)層并進(jìn)行濃縮。蒸餾殘余物，產(chǎn)生作為黃色油的化合物B-9-2(400g，70％)。
制備6-溴-2，3-二甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶(B-9-4)
向5-溴嘧啶-2-胺(400g，2.2mol)在i-PrOH(2L)和DMF(500mL)的溶液中加入化合物B-9-2(400g，2.6mol)，在100℃對(duì)得到的混合物攪拌20小時(shí)。TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)顯示反應(yīng)完全，通過(guò)加入Na2CO3水溶液淬滅反應(yīng)混合物，進(jìn)行過(guò)濾。真空下濃縮濾液，通過(guò)柱色譜(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)純化殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物B-9-4(12.0g，2.4％)＞ 制備2，3-二甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)咪唑并[1，2-a]嘧啶(B-9-5)
向化合物B-9-4(2.0g，8.92mmol)在DMF(60mL)中的溶液中加入聯(lián)硼酸頻那醇酯(2.79g，11mmol)和KOAc(2.74g，30mmol)，N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)2Cl2(0.20g，0.23mmol)，并對(duì)混合物再次進(jìn)行脫氣。然后將得到的混合物加熱至90℃，并攪拌過(guò)夜。冷卻反應(yīng)物，過(guò)濾，濃縮濾液，產(chǎn)生作為褐色固體的粗化合物B-9-5(2.4g)。其不經(jīng)純化即用于下個(gè)步驟。
制備(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶-6-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-9)
向化合物B-1-3(2.0g，5.16mmol)在甲苯(48mL)和EtOH(16mL)中的溶液中加入化合物B-9-5(2.4g)和2N Na2CO3水溶液(7.5mL)，N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘。然后加入Pd(PPh3)4(0.41g，0.36mmol)，并對(duì)混合物再次進(jìn)行脫氣。然后將得到的混合物加熱至80℃，并攪拌過(guò)夜。當(dāng)混合物冷卻后，分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)制備性HPLC純化殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物B-9(220mg，1.6％)。
實(shí)施例B-10制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(5-甲基-5H-吡咯并[3，2-b]吡嗪-2-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-10)
制備6-氯吡嗪-2-胺(B-10-2)
在140℃，于密封系統(tǒng)中對(duì)2，6-二氯吡嗪(300g，2mol)和28％NH3水(8L)攪拌14小時(shí)。TLC(石油醚/EtOAc 3∶1)顯示起始材料完全消耗。用EtOAc(3L×3)萃取反應(yīng)混合物。用飽和NaCl水溶液(3L)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生粗化合物B-10-2，通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 2∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為白色固體的純化合物B-10-2(410g，產(chǎn)率59.7％)。
制備3-溴-6-氯吡嗪-2-胺(B-10-3)
0℃下，N2氣下，向化合物B-10-2(110g，0.85mol)在CHCl3(1.5L)中的溶液中逐份加入N-溴-琥珀酰亞胺(151.3g，0.85mol)。加入后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 3∶1)顯示大部分化合物B-10-2被消耗。用飽和Na2CO3(1L×3)、H2O(1L×3)和飽和NaCl水溶液(1L)順序洗反應(yīng)混合物，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮。通過(guò)柱色譜(硅膠，EtOAc/己烷1∶20)純化殘余物，產(chǎn)生純B-10-3b(35g)和純化合物B-10-3(45g，28％)(作為黃色固體)。
制備6-氯-3-(2-(三甲基硅基)乙炔基)吡嗪-2-胺(B-10-4)
0℃下，N2氣下，向化合物B-10-3(70g，0.336mol)、CuI(6.3g，0.0336mol)和Pd(PPh3)2Cl2(7g)在Et3N(1L)中的混合物中逐滴加入乙炔基-三甲基-硅烷(35.6g，0.352mol)。加入后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?.5小時(shí)。TLC(石油醚/EtOAc 5∶1)顯示起始材料完全消耗。真空下濃縮混合物，產(chǎn)生粗化合物B-10-4，通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 20∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色固體的純化合物B-10-4(36.5g，產(chǎn)率42％)。
制備3-氯-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪(B-10-5)
80℃下對(duì)化合物B-10-4(32g，0.14mol)和t-BuOK(63.5g，0.57mol)在t-BuOH(1L)中的溶液攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 5∶1)顯示起始材料完全消耗。令反應(yīng)混合物冷卻至室溫。然后向混合物中加入濃HCl(200mL)。將得到的混合物加熱至80℃并回流過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 5∶1)顯示反應(yīng)完全。令反應(yīng)混合物冷卻至室溫，倒進(jìn)水(1L)中，用EtOAc(1L×3)萃取。用50％Na2CO3(300mL)、H2O(500mL)和飽和NaCl水溶液(1L)順序洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生粗B-10-5，通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc10∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色固體的純B-10-5(15g，產(chǎn)率63％)。
制備3-氯-5-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪(B-10-6)
用310mg(1.95mmol)化合物B-10-5在3ml無(wú)水DMF中制造溶液。將混合物加入到125mg(3.05mmol)的60％NaH礦物油分散液在3ml無(wú)水DMF中的溶液中。用另外6mL DMF漂洗容器。在室溫下對(duì)反應(yīng)混合物攪拌15分鐘。再加另外150μl(2.40mmol)MeI。攪拌2小時(shí)。LCMS顯示一個(gè)峰M+H＝168(采用Cl同位素模式)。將反應(yīng)混合物緩慢傾倒進(jìn)飽和NH4Cl溶液(100ml)，用EtOAc(3×50ml)萃取。合并有機(jī)部分，在MgSO4上干燥冰過(guò)濾。使用EtOAc/己烷進(jìn)行硅膠色譜，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物B-10-6。
制備5-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-3-基硼酸(B-10-7)
在燒瓶中，將36mg(0.128mmol)三環(huán)己基膦和48mg(0.052mmol)Pd2(dba)3溶解于5ml無(wú)水二惡烷中。鼓氬氣10分鐘，室溫下攪拌20分鐘。向其中加入429mg(1.69mmol)聯(lián)硼酸頻那醇酯。最后加入257mg(1.53mmol)化合物B-10-6和226mg(2.30mmol)KOAc在5ml二惡烷中的懸浮液。給反應(yīng)燒瓶裝上空氣冷凝器，加熱至80℃過(guò)夜。24小時(shí)后，將反應(yīng)混合物倒進(jìn)飽和NaCl水溶液中，用EtOAc(3×75ml)萃取，并用水洗。合并有機(jī)部分，在MgSO4上干燥，過(guò)濾，真空下除去溶劑。用CHCl3至CHCl3中的15％(5％NH4OH，EtOH中)，在Biotage上運(yùn)行梯度柱，分離作為棕色固體的化合物B-10-7(73mg，27％產(chǎn)率)。
制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(5-甲基-5H-吡咯并[3，2-b]吡嗪-2-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-10)
在燒瓶中，將155mg(0.40mmol)化合物B-1-3和73mg(0.41mmol)硼酸B-10-7溶于無(wú)水DMF中。向該混合物中加入600μl的2.0MNa2CO3溶液。向反應(yīng)混合物中鼓氬氣10分鐘。最后，加入17mg(0.052mmol)Pd(dppf)2CH2Cl2催化劑，將反應(yīng)加熱至80℃過(guò)夜。20小時(shí)后，將反應(yīng)混合物傾倒進(jìn)40ml飽和NaCl水溶液，用EtOAc(3×50ml)萃取。合并有機(jī)萃取物，在硫酸鎂上干燥，過(guò)濾，真空下除去溶劑。通過(guò)HPLC分離出作為玻璃狀固體的化合物(B-10)，產(chǎn)率為20％(34mg)。
實(shí)施例B-12制備(2S)-1-(4-(3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-12)
制備5-溴-2，3-二氫吡咯并[2，3-b]吡啶-1-羧酸叔丁基酯(B-12-2)
向5-溴-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(500mg，2.51mMoles)和Boc-酸酐(658mg，3.01mMoles)在10mL DMF中的經(jīng)攪拌溶液中加入二異丙基乙胺(357mg，2.76mMoles)。混合物在氮?dú)庀禄亓?小時(shí)。TLC顯示反應(yīng)完全。將反應(yīng)濃縮至干(高真空下)。在EtOAc和飽和NaCl水溶液之間分配殘余物。用飽和NaCl水溶液洗有機(jī)層，在硫酸鈉上干燥，過(guò)濾，減壓下濃縮。在經(jīng)預(yù)裝的15g硅膠柱上對(duì)殘余物進(jìn)行色譜。用DCM中的0～5％EtOAc洗脫，產(chǎn)生作為米白色固體的5-溴-2，3-二氫吡咯并[2，3-b]吡啶-1-羧酸叔丁基酯(B-12-2)(725mg)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)ppm 1.56(s，9H)3.05(t，J＝8.59Hz，2H)4.03(t，2H)7.50(d，J＝2.02Hz，1H)8.26(d，J＝2.02Hz，1H)。
制備1-(叔丁氧羰基)-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基硼酸(B-12-3)
向叔丁基5-溴-2，3-二氫吡咯并[2，3-b]吡啶-1-羧酸酯(B-12-2)(725mg，2.42mMoles)和聯(lián)硼酸頻那醇酯(894mg，3.52mMoles)在20mlDMF中的混合物中加入乙酸鉀(691mg，7.04mMoles)和[1，1-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷(1∶1)復(fù)合物(34.3mg，0.0469mMoles)。在100℃的微波反應(yīng)器中對(duì)混合物加熱60分鐘。LCMS顯示反應(yīng)完全。過(guò)濾RXN，在高真空下濃縮濾液至干。在EtOAc和飽和NaCl水溶液之間分配殘余物。用EtOAc(3×40mL)萃取水層。在硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)層，過(guò)濾并在減壓下濃縮。在經(jīng)預(yù)裝的25g硅膠柱上對(duì)殘余物進(jìn)行色譜，其中用DCM中的1～4％MeOH作為溶劑。粗產(chǎn)物原樣用于下個(gè)步驟。
制備(2S)-1-(4-(3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-12)
向1-(叔丁氧基羰基)-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基硼酸(B-12-3)(546mg，2.07mMoles)和(2S)-1-(4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(400mg，1.03mMoles)在10mL DMF中的溶液中加入[1，1-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷(1∶1)復(fù)合物(22.7mg，0.031mMoles)和2N碳酸鈉水溶液(1.55mL，3.10mMoles)。向混合物充氮5分鐘，然后在微波爐中于100℃加熱1小時(shí)。LCMS顯示反應(yīng)完全。過(guò)濾RXN，高真空下濃縮濾液至干。在EtOAc和水之間分配殘余物。用飽和NaCl水溶液對(duì)有機(jī)層洗一次，在硫酸鈉上干燥，過(guò)濾并濃縮，得到殘余物。然后將殘余物裝載到25g硅膠柱上。先用DCM中的50％EtOAc洗脫，然后用1∶3MTBE∶DCM中的2-5％MeOH洗脫，產(chǎn)生作為白色固體的經(jīng)Boc保護(hù)的產(chǎn)物。用DCM中的二惡烷中的4N HCl處理，接著除去溶劑，產(chǎn)生褐色殘余物。將殘余物溶解于DCM，用飽和碳酸氫鈉洗，在硫酸鈉上干燥，濃縮，然后裝載到15g硅膠柱上。用DCM中的2～5％MeOH洗脫產(chǎn)生作為白色泡沫的(2S)-1-(4-(3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(B-12)(125mg)。
實(shí)施例B-33制備3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈 制備4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-碘-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基硫代)嘧啶(B-33-1)
向中間產(chǎn)物A(83g，0.26mol)在DMF(600mL)中的溶液中加入K2CO3(58g，0.417mol)和1，1-二氟-2-碘-乙烷(60g，0.313mol)。然后在室溫下對(duì)混合物攪拌過(guò)夜。TLC(CH2Cl2∶MeOH＝20∶1)顯示反應(yīng)完全。濃縮混合物，用CH2Cl2(500mL)稀釋固體。過(guò)濾漿體，濃縮濾液，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，通過(guò)制備性SFC對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為白色固體的化合物B-33-1(41.1g，41.3％)。
制備4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-碘-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基磺?；?嘧啶和/或4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-碘-1H-吡唑-4-基)-2-(甲基亞磺酰基)嘧啶
向化合物B-33-1(41.1g，0.107mol)在THF(360mL)中的溶液中加入H2O(200mL)中的過(guò)硫酸氫鉀(81.2g，0.132mol)。然后在室溫下對(duì)混合物攪拌過(guò)夜。TLC(CH2Cl2∶MeOH＝10∶1)顯示反應(yīng)完全。濃縮混合物至大約二分之一。用CH2Cl2(600mL)萃取混合物。用水(100mL×2)萃取有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生砜和亞砜的混合物(通過(guò)HPLC測(cè)定為7∶3)(38.6g，88.2％)，其是黃色固體。
制備3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-碘-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈(B-33-3)
向砜和亞砜(16g，0.039mol)在THF(250mL)中的混合物中加入3-氨基-丙腈(16g，0.23mol)。然后在80℃對(duì)混合物攪拌2天。TLC(CH2Cl2∶MeOH＝10∶1)顯示反應(yīng)未完全。在該溫度下再攪拌混合物1天。濃縮混合物至干。通過(guò)硅膠色譜(CH2Cl2∶MeOH＝80∶1)純化殘余物，產(chǎn)生作為白色固體的B-33-3(9.8g，61.5％)。
制備3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈(B-33)
用氮鼓泡機(jī)，對(duì)按照已知的文獻(xiàn)方法從5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶制備的5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶B-33-4(145mg，0.594mmol)、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-碘-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈(200mg，0.495mmol)和氟化銫(1.48mL 1M水溶液)在3mL DME中的混合物進(jìn)行5分鐘脫氧，然后加入[1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(II)與二氯甲烷(41mg，0.05mmol)的1∶1復(fù)合物。然后在微波中于80℃對(duì)混合物加熱2.5小時(shí)。對(duì)反應(yīng)加以脫氣，并加入新鮮的催化劑(20mg)。再在微波中于80℃對(duì)混合物加熱4小時(shí)。在乙酸乙酯和鹽水之間分配得到的黑色混合物。用乙酸乙酯對(duì)水層萃取2次。用鹽水洗合并的有機(jī)部分，在硫酸鎂上干燥，將體積降低至最小。使用叔丁基甲基醚和二氯甲烷(1∶1)混合物中的0-8％甲醇梯度(含有10％氫氧化銨)，在硅膠上對(duì)殘余物加以純化，產(chǎn)生作為淺橙色固體的目標(biāo)產(chǎn)物。用叔丁基甲基醚對(duì)該材料研磨兩次，產(chǎn)生82mg(42％)分析純的3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈，其是米白色固體。1H NMR(400MHz，乙腈-d3)ppm 9.73(br.s.，1H)，8.37(d，J＝2.02Hz，1H)，8.22(s，1H)，8.10(d，J＝5.31Hz，1H)，8.08(d，J＝1.52Hz，1H)，7.35-7.46(m，1H)，6.54(d，J＝3.79Hz，1H)，6.51(dd，J＝3.54，2.02Hz，1H)，6.30(tt，J＝55.04，3.82Hz，1H)，5.91(br.t，J＝6.82Hz，1H)，4.62(td，J＝14.65，3.79Hz，2H)，3.39(br.s.，2H)，2.40(br.s.，2H)。
實(shí)施例B-49制備3-(4-(1-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈
制備2-(3-碘-4-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙酸甲酯(B-49-1)
向化合物A(60g，0.19mol)和2-溴-2-甲基丙酸甲酯(102g，0.57mol)在DMF(400mL)中的混合物中一次性加入新鮮磨碎的碳酸鉀(65g，0.47mol)。在80℃對(duì)反應(yīng)混合物攪拌18小時(shí)。LC-MS顯示反應(yīng)完全。過(guò)濾反應(yīng)混合物，在乙酸乙酯(1200mL)和鹽水(300mL)之間分配濾液。用EtOAc(2×500mL)萃取水層。用鹽水洗合并的有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥，并濃縮。通過(guò)硅膠色譜純化殘余物，其中使用石油醚中的5-30％EtOAc作為洗脫劑，產(chǎn)生了作為漿體的化合物B-49-1(62g，78％)，其放置固化。
制備2-(3-碘-4-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇(B-49-2)
-78℃下，通過(guò)注射器，向化合物B-49-1(48g，0.11mol)在干CH2Cl2(1800mL)中的溶液中逐滴加入DIBAL溶液(256mL，1M)。在-78℃至0℃對(duì)混合物攪拌1小時(shí)。通過(guò)加入MeOH(80mL)淬滅反應(yīng)混合物，然后用飽和水性Rochelle鹽和CH2Cl2稀釋混合物。劇烈攪拌得到的懸浮液，直到各層分離。用二氯甲烷(2×500mL)萃取水層。在硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)層，濃縮至70g黃色的油。通過(guò)在硅膠上進(jìn)行色譜來(lái)純化該油，其中使用DCM中0-40％的醚作為洗脫液，產(chǎn)生作為白色固體的化合物B-49-2(20g，45％)。
制備2-(3-碘-4-(2-(甲基磺?；?嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇(B-49-3)
室溫下對(duì)化合物B-49-3(20g，51mmol)和過(guò)硫酸氫鉀(61.5g，0.10mol)在THF(300mL)和水(300mL)中的混合物攪拌過(guò)夜。在EtOAc(2L)和鹽水(600mL)之間分配反應(yīng)混合物。用EtOAc(1L×2)萃取水層。用鹽水洗合并的有機(jī)層，在硫酸鈉上干燥并濃縮。通過(guò)短柱色譜純化殘余物，其中使用0-50％醚/DCM作為洗脫劑，產(chǎn)生作為白色固體的產(chǎn)物B-49-3(15g，74％)。
制備3-(4-(1-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-3-碘-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈(B-49-4)
向微波反應(yīng)器中裝入DMSO(60mL)中的砜B-49-3(6g，14.3mmol，分5批)、3-氨基丙腈(3.0g，42.9mmol)和CsF(2.39g，15.7mmol)。120℃下對(duì)得到的溶液進(jìn)行30分鐘的微波照射。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。在EtOAc(600mL)和鹽水(100mL×3)之間分配混合物。對(duì)各層加以分離，用EtOAc(2×200mL)萃取水層。在無(wú)水Na2SO4上干燥合并的有機(jī)相，過(guò)濾并在真空下濃縮。通過(guò)短柱色譜對(duì)殘余物加以純化，其中使用石油醚中的EtOAc作為洗脫劑，再通過(guò)制備性HPLC進(jìn)行進(jìn)一步純化，產(chǎn)生作為褐色泡沫狀固體的產(chǎn)物B-49-4(3.055g，55％)。
制備3-(4-(1-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈(B-49)
通過(guò)抽氣(evacuation)，對(duì)溶解于DME(3.7mL)中的碘化物B-49-4(156.2mg，0.374mmol)和5-甲氧基吡啶-3-硼酸(122.1mg，0.798mmol)進(jìn)行脫氣，直到溶劑剛開(kāi)始沸騰，接著進(jìn)行氬氣吹掃，3個(gè)循環(huán)。加入1.5mL 2.0M碳酸鈉水溶液和25.5mg[1，1’-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(II)/二氯甲烷復(fù)合物(0.035mmol)，再脫氣3個(gè)循環(huán)。在80℃油浴中加熱3.5小時(shí)，然后冷卻至室溫過(guò)夜。在25mL乙酸乙酯和10mL去離子水之間分配反應(yīng)混合物。用15mL乙酸乙酯對(duì)水層進(jìn)行反萃取。在硫酸鎂上干燥合并的有機(jī)提取物，過(guò)濾，濃縮并通過(guò)硅膠色譜純化，其中使用乙酸乙酯中的0-20％[乙醇+5％濃氫氧化銨]進(jìn)行洗脫。凍干產(chǎn)物，得到作為淺粉色固體的B-49(128.4mg，84％)。
制備3-(4-(3-(5-乙酰基-6-氨基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈(B-78)
制備5-溴-3-(丙-1-烯-2-基)吡啶-2-胺(B-78-2)
用24mL 2.0M碳酸鈉水溶液處理2-氨基-5-溴-3-碘吡啶B-78-1(4.75g，15.9mmol)，異丙烯基硼酸頻哪醇酯(3.28mL，2.94g，17.5mmol)和[1，1’-雙(二苯基膦)二茂鐵]-二氯化鈀(II)二氯甲烷復(fù)合物(1∶1)(295mg，0.403mmol)在二甲基甲酰胺(48mL)中的溶液。在氬氣下于65℃油浴中對(duì)得到的雙相混合物進(jìn)行6小時(shí)攪拌。冷卻至室溫后，用200mL乙酸乙酯和75mL去離子水對(duì)混合物加以稀釋，然后吸濾，除去一些不溶的黑色沉淀。分離后，用100mL乙酸乙酯對(duì)水層進(jìn)行反萃取。在硫酸上干燥合并的有機(jī)萃取物，過(guò)濾并濃縮產(chǎn)生5.87g褐色油。通過(guò)硅膠色譜純化粗產(chǎn)物(用己烷中的10-50％乙酸乙酯梯度進(jìn)行洗脫)，產(chǎn)生作為茶色固體的B-78-2(2.5501g，75.3％)。
制備B-78-3
室溫下對(duì)化合物B-78-2(2.50g，11.7mmol)、二碳酸二叔丁酯(7.75g，35.5mmol)、三乙基胺(8.3mL，60mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(391mg，3.1mmol)在乙腈(59mL)中的溶液攪拌1小時(shí)。在減壓下除去溶劑，然后在100mL乙酸乙酯和25mL飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配殘余物。用30mL乙酸乙酯反萃取水層，在硫酸鎂上干燥合并的有機(jī)萃取物，過(guò)濾并濃縮產(chǎn)生5.38g橙色凝膠。通過(guò)硅膠色譜純化粗產(chǎn)物(用己烷中的0-40％乙酸乙酯梯度進(jìn)行洗脫)，產(chǎn)生了作為無(wú)色油的化合物B-78-3(4.22g，87％)。
制備B-78-4
將B-78-3(4.15g，10.0mmol)和硼酸三異丙酯(5.8mL，4.8g，25mmol)在2-甲基四氫呋喃(67mL)中的溶液冷卻至-70℃(內(nèi)部溫度)。4分鐘內(nèi)，向其中逐滴加入16mL(25.6mmol)1.6M己烷中的正丁基鋰溶液。-70℃攪拌30分鐘后，加入25mL去離子水，令混合物溫?zé)嶂潦覝亍Ｕ婵障鲁]發(fā)物，用二乙醚(2×30mL)萃取水性殘余物。棄去萃取物。用6N HCl酸化水性層至pH 2，室溫下攪拌過(guò)夜，導(dǎo)致顆粒狀白色沉淀形成。通過(guò)吸濾收集沉淀，在50℃真空爐中干燥6小時(shí)，產(chǎn)生作為白色粉末的硼酸B-78-4(2.9348g，62.2％)。
制備3-(4-(3-(6-氨基-5-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈(B-78-5)
用2.0M碳酸鈉水溶液(2.4mL)處理硼酸B-78-4(721.4mg，1.88mmol)、碘化物B-33-3(576.0mg，1.425mmol)和[1，1’-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(II)-二氯甲烷復(fù)合物(66.5mg，0.091mmol)在DME(14.2mL)中的溶液，在80℃油浴對(duì)得到的雙相混合物加熱15小時(shí)。冷卻至室溫后，在乙酸乙酯(50mL)和去離子水(25mL)之間分配混合物。用25mL乙酸乙酯反萃取水層。在硫酸鎂上干燥合并的有機(jī)萃取物，過(guò)濾并濃縮至干。將殘余物溶于二氯甲烷(27mL)，加入三氟乙酸(3mL)，在室溫下對(duì)混合物攪拌6.5小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑，在乙酸乙酯(50mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(25mL)之間分配殘余物。在硫酸鎂上干燥有機(jī)層，過(guò)濾并濃縮，產(chǎn)生褐色焦油。通過(guò)硅膠色譜純化粗產(chǎn)物，其中用乙酸乙酯中的0-20％[乙醇+5％濃氫氧化銨]洗脫，產(chǎn)生作為淡褐色泡沫的B-78-5(325.7mg，56％)。
制備3-(4-(3-(5-乙?；?6-氨基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈(B-78)
將烯6(227.8mg，0.555mmol)在二氯甲烷(28mL)中的溶液冷卻至-70℃，用臭氧處理30秒，這足夠長(zhǎng)到使溶液顏色從褐色變?yōu)槟埸S。對(duì)溶液通氮2分鐘，然后用二甲基硫(0.50ml，6.8mmol)淬滅。除去冷卻浴，室溫下攪拌混合物3小時(shí)。令溶液濃縮至干，通過(guò)硅膠色譜純化，其中用乙酸乙酯中的0-20％[EtOH+5％NH4OH]洗脫。獲得作為黃色固體的酮B-78(63.4mg，28％)。1H NMR 1H NMR(400MHz，氯仿-d)ppm2.57(s，3H)2.60-2.71(m，2H)3.56-3.74(m，2H)4.55(td，J＝13.45，4.17Hz，2H)5.54(t，J＝5.05Hz，1H)6.21(tt，J＝55.29，4.20Hz，1H)6.61(d，J＝5.31Hz，1H)8.03(s，1H)8.21(d，J＝5.05Hz，1H)8.23(d，J＝2.02Hz，1H)8.45(d，J＝2.27Hz，1H)。
實(shí)施例B-79制備3-{4-[3-(5-氨基-6-甲氧基-吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟-乙基)-1H-吡唑-4-基]-嘧啶-2-基氨基}-丙腈
制備B-79-2
向5-溴-3-甲氧基吡嗪-2-胺(4.50g，19.8mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(1.24g，10.1mmol)在70ml THF中的溶液中加入二碳酸二叔丁酯(10.4g，47.6mmol)，室溫下對(duì)反應(yīng)混合物攪拌5.5小時(shí)。減壓下除去溶劑，在硅膠上對(duì)殘余物進(jìn)行快速色譜，其中用3∶1己烷/EtOAc洗脫，產(chǎn)生作為白色固體的B-79-2(5.403g，67％)。
制備二叔丁基[3-甲氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡嗪-2-基]酰亞胺二碳酸酯(B-79-3)
用氮鼓泡機(jī)，對(duì)聯(lián)硼酸頻那醇酯(1.12g，4.4mmol)、二叔丁基(5-溴-3-甲氧基吡嗪-2-基)酰亞胺二碳酸酯B-79-2(1.62g，4mmol)和乙酸鉀(1.2g，12mmol)在甲苯(40mL)中的混合物進(jìn)行數(shù)分鐘脫氧，之后加入1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷復(fù)合物(78mg，0.096mmol)。然后在50度油浴中對(duì)混合物加熱4分鐘。LCMS顯示反應(yīng)完全。過(guò)濾混合物，將濾液減少至最小體積。殘余物B-79-3不經(jīng)純化直接用于下個(gè)步驟，假設(shè)為定量產(chǎn)率。
制備3-{4-[3-(5-氨基-6-甲氧基-吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟-乙基)-1H-吡唑-4-基]-嘧啶-2-基氨基}-丙腈(B-79)
向粗二叔丁基[3-甲氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡嗪-2-基]酰亞胺二碳酸酯B-79-3(0.6mmol)在二甲氧基乙烷(2.5mL)中的溶液中加入3-{4-[1-(2，2-二氟-乙基)-3-碘-1H-吡唑-4-基]-嘧啶-2-基氨基}-丙腈B-33-3(150mg，0.37mmol)和氟化銫(1.1mL of a 1M水溶液，1.1mmol)。用氮鼓泡機(jī)對(duì)得到的混合物脫氧5分鐘，然后加入1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷復(fù)合物(15mg，0.019mmol)。在80℃油浴對(duì)混合物加熱20小時(shí)。LCMS顯示碘化物完全消耗。在乙酸乙酯和水之間分配混合物。用乙酸乙酯萃取水層。在硫酸鎂上干燥合并的有機(jī)部分，減少至最小體積。將殘余物加入進(jìn)二甲氧基乙烷(3mL)，然后在微波中于170℃加熱25分鐘，以熱解叔丁氧羰基。將得到的黑色混合物濾經(jīng)0.45μ過(guò)濾器，將濾液減少至最小體積。通過(guò)HPLC純化殘余物，對(duì)想要的級(jí)分凍干之后，產(chǎn)生了59mg(37％)作為松軟白色固體的B-79。1H NMR(400MHz，乙腈-d3)δppm 8.17(s，1H)，8.15(d，J＝5.05Hz，1H)，7.83(s，1H)，6.72(d，J＝5.31Hz，1H)，6.27(tt，J＝54.98，3.76Hz，1H)，5.91(br.t，J＝5.18Hz，1H)，5.34(br.s.，2H)，4.59(td，J＝14.65，3.79Hz，2H)，3.76(s，3H)，3.55(q，J＝6.23Hz，2H)，2.64(t，J＝6.44Hz，2H)。
實(shí)施例C-1制備[4-[2-((S)-2-羥基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-吡唑-1-基]-乙腈 制備5-[4-(2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-1-(四氫-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(C-1-1)
向4-[3-碘-1-(四氫-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基]-2-甲基硫烷基-嘧啶B(1.33g，3.3mmol)和5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(1g，4.1mmo)l在DMF(30mL)中的溶液中加入2M碳酸鈉溶液(2mL)。加入過(guò)程中，碳酸鈉從溶液中出來(lái)。用氮鼓泡機(jī)對(duì)混合物脫氧數(shù)分鐘。加入鈀催化劑，持續(xù)氮鼓泡數(shù)分鐘，之后移走鼓泡機(jī)。在85℃對(duì)混合物加熱18小時(shí)。LCMS顯示完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。將混合物滴進(jìn)飽和NaCl水溶液，通過(guò)過(guò)濾收集得到的固體，用水漂洗。將固體溶解于甲醇/二氯甲烷(1∶9)中，在MgSO4上干燥，減少至最小體積。在短硅膠柱上純化殘余物，其中使用二氯甲烷中的0-50％乙酸乙酯作為洗脫劑，產(chǎn)生作為黃色固體的5-[4-(2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-1-(四氫-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(C-1-1)(0.89g，69％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)ppm 11.73(br.s.，1H)，8.69(s，1H)，8.43(d，J＝5.31Hz，1H)，8.29(d，J＝2.02Hz，1H)，8.07(d，J＝2.02Hz，1H)，7.51(t，J＝3.03Hz，1H)，7.11(d，J＝5.31Hz，1H)，6.48(dd，J＝3.28，1.77Hz，1H)，5.53(dd，J＝9.85，2.27Hz，1H)，4.00(br.d，J＝13.39Hz，1H)，3.61-3.76(br.m，1H)，2.10-2.24(br.m，4H)，1.91-2.06(br.m，2H)，1.65-1.80(br.m，1H)，1.50-1.63(br.m，2H)。
制備1-苯磺酰基-5-[4-(2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-1-(四氫-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(C-1-2)
25℃下，向5-[4-(2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-1-(四氫-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(C-1-1)(870mg，2.22mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入氫化鈉(60％分散于油中，133mg，3.32mmol)。在環(huán)境溫度下對(duì)得到的懸浮液攪拌數(shù)分鐘，直到氣體的產(chǎn)生停止。加入苯磺酰氯(0.4mL，3.13mmol)，混合物變渾濁。環(huán)境溫度下攪拌15分鐘后，LCMS顯示完全轉(zhuǎn)化為想要的產(chǎn)物。將混合物緩慢加入到150ml飽和NaCl水溶液中。過(guò)濾得到的沉淀，用水洗，進(jìn)行空氣干燥。將固體溶于二氯甲烷中，在MgSO4上干燥，減少至最小體積。在短硅膠柱上純化殘余物，其中使用二氯甲烷中的乙酸乙酯作為洗脫劑，產(chǎn)生作為黃色泡沫的1-苯磺?；?5-[4-(2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-1-(四氫-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(C-1-2)(0.83g，70％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)ppm 8.77(s，1H)，8.47(d，J＝5.31Hz，1H)，8.43(d，J＝2.02Hz，1H)，8.16(d，J＝2.02Hz，1H)，8.09-8.15(m，2H)，7.95(d，J＝4.04Hz，1H)，7.68-7.77(m，1H)，7.57-7.67(m，2H)，7.29(d，J＝5.05Hz，1H)，6.86(d，J＝4.04Hz，1H)，5.52(dd，J＝9.85，2.27Hz，1H)，3.98(br.d，J＝11.87Hz，1H)，3.62-3.74(m，1H)，2.07-2.23(br.m，1H)，1.90-2.05(br.m，2H)，1.66-1.77(br.m，1H)，1.65(s，3H)，1.50-1.61(br.m，2H)。
制備5-{4-[2-(甲基硫代)嘧啶-4-基]-1H-吡唑-3-基}-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(C-1-3)
向1-苯磺?；?5-[4-(2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-1-(四氫-吡喃-2-基)-1H-吡唑-3-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(C-1-2)(750mg，1.41mmol)在MeOH(1ML)中的溶液中加入HCl在二惡烷(～4N，0.1mL)中的溶液。環(huán)境溫度下攪拌45分鐘后，將溶液滴進(jìn)磷酸鹽緩沖液(pH 7,15mL)。通過(guò)過(guò)濾收集得到的沉淀，用水漂洗，空氣干燥，產(chǎn)生5-{4-[2-(甲基硫代)嘧啶-4-基]-1H-吡唑-3-基}-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(C-1-3)(622mg，98％)，其不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。1H NMR(400MHz，乙腈-d3)ppm 11.51(br.s.，1H)，8.47(d，J＝2.02Hz，1H)，8.34(d，J＝5.05Hz，1H)，8.23(br.s.，1H)，8.14(d，J＝7.58Hz，2H)，8.10(d，J＝1.77Hz，1H)，7.84(d，J＝2.78Hz，1H)，7.68(t，J＝7.45Hz，1H)，7.57(t，J＝7.71Hz，2H)，7.07(d，J＝4.80Hz，1H)，6.75(d，J＝3.79Hz，1H)，1.81(s，3H)。
制備[3-(1-苯磺?；?1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-(2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-吡唑-1-基]-乙腈(C-1-4)
向5-{4-[2-(甲基硫代)嘧啶-4-基]-1H-吡唑-3-基}-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(C-1-3)(638mg，1.42mmol)和溴乙腈(0.5mL，7mmol)在DMF中的溶液中加入新鮮磨碎的碳酸鉀(254mg，1.84mmol)。在75℃對(duì)得到的懸浮液攪拌18小時(shí)。LCMS顯示起始材料完全消耗。在乙酸乙酯和飽和NaCl水溶液之間分配混合物。用乙酸乙酯對(duì)水層萃取兩次。用水洗合并的有機(jī)部分兩次，用飽和NaCl水溶液洗，在MgSO4上干燥，減少至最少體積。在硅膠上純化殘余物，其中使用己烷中的25至100％甲基叔丁基醚梯度作為洗脫劑，產(chǎn)生作為脆泡沫的[3-(1-苯磺酰基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-(2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-吡唑-1-基]-乙腈(C-1-4)(440mg，63％)。1H NMR(400MHz，乙腈-d3)ppm 8.46(d，J＝2.02Hz，1H)，8.36(d，J＝5.31Hz，1H)，8.31(s，1H)，8.11-8.16(m，2H)，8.09(d，J＝2.02Hz，1H)，7.83(d，J＝4.04Hz，1H)，7.64-7.71(m，1H)，7.57(t，J＝7.71Hz，2H)，7.01(d，J＝5.31Hz，1H)，6.75(d，J＝4.04Hz，1H)，5.26(s，2H)，1.88(s，3H)。
制備[3-(1-苯磺?；?1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-(2-甲烷磺?；?嘧啶-4-基)-吡唑-1-基]-乙腈(C-1-5)
將[3-(1-苯磺酰基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-(2甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-吡唑-1-基]-乙腈(C-1-4)(175mg，0.36mmo1)在THF(2mL)和H2O(2mL)中的溶液冷卻至0℃，一次性加入過(guò)硫酸氫鉀(330mg，0.54mmol，1.5eq)。在0℃對(duì)得到的黃色漿體攪拌10分鐘，然后在環(huán)境溫度下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾得到的混合物，用乙酸乙酯和水漂洗固體。在乙酸乙酯和水之間分配濾液。用乙酸乙酯萃取水層，在MgSO4上干燥合并的有機(jī)部分，減少至最小體積。用甲基叔丁基醚研磨殘余物，通過(guò)過(guò)濾收集固體，產(chǎn)生[3-(1-苯磺酰基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-(2-甲烷磺酰基-嘧啶-4-基)-吡唑-1-基]-乙腈(C-1-5)(158mg，85％)，其不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。1H NMR(400MHz，乙腈-d3)ppm 8.74(d，J＝5.56Hz，1H)，8.53(d，J＝2.02Hz，1H)，8.45(s，1H)，8.18(d，J＝2.27Hz，1H)，8.12-8.17(m，2H)，7.84(d，J＝4.04Hz，1H)，7.63-7.73(m，1H)，7.55-7.62(m，2H)，7.53(d，J＝5.31Hz，1H)，6.75(d，J＝4.04Hz，1H)，5.29(s，2H)，2.78(s，3H)。
制備{3-(1-苯磺?；?1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-[2-((S)-2-羥基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-吡唑-1-基}-乙腈(C-1-6)
在80℃，對(duì)[3-(1-苯磺?；?1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-(2-甲烷磺?；?嘧啶-4-基)-吡唑-1-基]-乙腈(C-1-5)(310mg，0.6mmol)和(S)-(+)-1-氨基-2-丙醇(134mg，1.8mmol)在THF(5mL)中的混合物加熱18小時(shí)。將混合物濃縮到硅膠上，然后在硅膠上純化，其中使用二氯甲烷和乙酸乙酯(1∶1)混合物中的0-6％甲醇梯度作為洗脫劑，從甲基叔丁基醚產(chǎn)生作為泡沫的220mg(72％){3-(1-苯磺?；?1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-[2-((S)-2-羥基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-吡唑-1-基}-乙腈(C-1-6)。1HNMR(400MHz，乙腈-d3)ppm 8.52(d，J＝2.02Hz，1H)，8.20(s，1H)，8.07-8.17(m，4H)，7.81(d，J＝4.04Hz，1H)，7.63-7.73(m，1H)，7.52-7.60(m，2H)，6.75(d，J＝4.04Hz，1H)，6.53(br.s.，1H)，5.67(br.t，J＝4.93Hz，1H)，5.24(s，2H)，3.56(br.s.，1H)，2.64-3.28(br.m，3H)，0.74(br.s.，3H)。
制備[4-[2-((S)-2-羥基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-吡唑-1-基]-乙腈(C-1)
-40℃下，向{3-(1-苯磺?；?1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-[2-((S)-2-羥基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-吡唑-1-基}-乙腈(C-1-6)(145mg，0.28mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入氫氧化鈉(1.1mL 10mg/mL MeOH中的溶液，0.28mmol)。令混合物溫?zé)嶂?℃。2小時(shí)后，用10mL THF稀釋混合物，在0℃持續(xù)攪拌2小時(shí)。在pH 7磷酸鹽緩沖液和乙酸乙酯之間分配混合物。用乙酸乙酯對(duì)水層萃取兩次。用飽和NaCl水溶液洗合并的有機(jī)部分，在MgSO4上干燥并減少至最小體積。通過(guò)HPLC純化殘余物，以23％的產(chǎn)率產(chǎn)生[4-[2-((S)-2-羥基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-吡唑-1-基]-乙腈(C-1)。1H NMR(400MHz，乙腈-d3)ppm9.78(br.s.，1H)，8.42(d，J＝2.02Hz，1H)，8.22(s，1H)，8.05-8.14(m，2H)，7.38-7.45(m，1H)，6.42-6.56(m，2H)，5.74(br.s.，1H)，5.25(s，2H)，3.72(br.s.，1H)，3.19(br.s.，1H)，3.04(br.s.，1H)，0.95(br.s.，3H)。
實(shí)施例D-1制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇
制備5-溴-2-氟煙醛(D-1-2)
0℃下，N2氣下，向二異丙基胺(17mL，0.17mol)在干THF(200mL)中的溶液中逐滴加入己烷中的2.5M n-BuLi(68mL，0.17mol)。加入后，將得到的混合物冷卻至-65℃。然后逐滴加入5-溴-2-氟吡啶(25g，0.14mol)在干THF(100mL)中的溶液。在-65℃對(duì)得到的混合物攪拌90分鐘。然后向混合物中逐滴加入甲酸乙酯(15.6g，0.21mol)。攪拌10分鐘后，于-65℃用10％檸檬酸在THF(100mL)中的溶液淬滅反應(yīng)混合物。將得到的混合物溫?zé)嶂潦覝兀惯M(jìn)水(100mL)中，用EtOAc(200mL)萃取。分離有機(jī)層，用飽和NaCl水溶液(100mL×2)洗，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物D-1-2(25g，85％)。
制備5-溴-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(D-1-3)
將化合物D-1-2(20g，0.1mol)和無(wú)水肼(18g，0.56mol)在乙醇中的溶液加熱至回流過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 2∶1)顯示起始材料完全消耗。真空下濃縮反應(yīng)混合物至大約50mL的體積，倒進(jìn)水(500mL)中，過(guò)濾得到的混合物。用水(50mL×3)和醚(20mL×3)洗濾渣，然后真空下干燥，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物D-1-3(9.0g，46％)。
制備1-(4-甲氧基芐基)-5-溴-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(D-1-4)
0℃下，向化合物D-1-3(3.47g，17.5mmol)在干DMF(50mL)中的溶液中逐份加入NaH(77mg，19.25mmol)。加入后，在0℃對(duì)得到的混合物攪拌30分鐘。然后在0℃逐滴加入PMBCl(3.29g，21mmol)。在室溫下對(duì)得到的混合物攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 1∶1)顯示起始材料完全消耗。將反應(yīng)混合物倒進(jìn)H2O(100mL)中，用EtOAc(100mL×3)萃取。用H2O(100mL×2)和飽和NaCl水溶液(100mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮。通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc from 50∶1to 4∶1)純化粗產(chǎn)物，產(chǎn)生作為黃色固體的純化合物D-1-4(4.3g，產(chǎn)率77.2％)。
制備1-(4-甲氧基芐基)-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(D-1-5)
N2氣下，向化合物D-1-4(4.3g，13.5mmol)在干DMF(80mL)中的溶液中加入4，4，5，5，4′，4′，5′，5′-八甲基-[2，2′]二[[1，3，2]二氧雜硼雜戊環(huán)基](6.9g，27mmol)、KOAc(3.9g，40.5mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(0.43g，0.5mmol)。在80～90℃對(duì)得到的混合物加熱過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc4∶1)顯示化合物39完全消耗。將反應(yīng)混合物倒進(jìn)H2O(300mL)中，用EtOAc(300mL×3)萃取。用H2O(300mL×2)和飽和NaCl水溶液(300mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生作為黑色油的粗D-1-5(8g，產(chǎn)率100％)，其不經(jīng)純化直接用于下個(gè)步驟。
制備1-(4-甲氧基芐基)-5-(1-異丙基-4-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(D-1-6)
N2氣下，向化合物B-1-1(1.8g，5mmol)在甲苯(60mL)和EtOH(20mL)中的經(jīng)攪拌溶液中加入化合物D-1-5(8g，13.5mmol)、2NNa2CO3(7.5mL)水溶液和Pd(PPh3)4(0.18g，0.11mmol)的粗混合物。在回流下對(duì)得到的混合物加熱過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 2∶1)顯示化合物7完全消耗。用H2O(50mL)和飽和NaCl水溶液(100mL)洗反應(yīng)混合物，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮。通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc2∶1)純化殘余物，產(chǎn)生粗化合物D-1-6，通過(guò)制備性HPLC對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色油的純化合物D-1-6(560mg，產(chǎn)率23.8％)。
制備1-(4-甲氧基芐基)-5-(1-異丙基-4-(2-(甲基磺?；?嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(D-1-7)
在室溫下對(duì)化合物D-1-6(560mg，1.19mmol)和過(guò)硫酸氫鉀(1.1g，1.79mmol)在THF(10mL)和H2O(10mL)中的混合物攪拌2小時(shí)。TLC(石油醚/EtOAc 2∶1)顯示起始材料完全消耗。真空下濃縮反應(yīng)混合物。向殘余物中加入H2O(30mL)，用EtOAc(50mL×3)萃取混合物。用飽和NaCl水溶液(50mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生作為紅色油的化合物D-1-7(600mg，產(chǎn)率100％)。
制備(2S)-1-(4-(3-(1-(4-甲氧基芐基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(D-1-8)
在回流下對(duì)化合物D-1-7(600mg，1.2mmol)和(S)-1-氨基丙-2-醇(528mg，7.15mmol)在THF(30mL)中的混合物加熱兩天。TLC(CH2Cl2/MeOH 15∶1)顯示起始材料完全消耗。真空下濃縮混合物，通過(guò)柱色譜(硅膠，EtOAc)純化殘余物，產(chǎn)生作為微黃色的化合物D-1-8(460mg，產(chǎn)率77.4％)。
制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(D-1)
在室溫下對(duì)化合物D-1-8(460mg，0.92mmol)在TFA(20mL)中的溶液攪拌3天。TLC(CH2Cl2/MeOH 15∶1)顯示化合物D-1-8消耗了大約一半。真空下濃縮反應(yīng)混合物。通過(guò)飽和NaHCO3(10mL)將殘余物堿化至pH約8，用EtOAc(50mL×3)萃取。用飽和NaCl水溶液(100mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮。通過(guò)制備性HPLC純化殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的D-1(130mg，產(chǎn)率21.5％)。
實(shí)施例D-2制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇
制備5-溴-2-氯-N-甲氧基-N-甲基煙酰胺(D-2-2)
室溫下，N2氣下，向化合物D-2-1(23.5g，0.1mol)在干CH2Cl2(400mL)中的溶液中逐份加入CDI(19.5g，0.12mol)。加入后，對(duì)混合物攪拌1小時(shí)。然后室溫下逐份加入O，N-二甲基-羥基胺(11.5g，0.12mol)。加入后，室溫下對(duì)得到的混合物攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc8∶1)顯示起始材料完全消耗。加入H2O(200mL)并分離有機(jī)層，用1NHCl(100mL)、1N Na2CO3(100mL)和飽和NaCl水溶液(200mL)順序洗滌，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物D-2-2(25g，90％)。
制備5-溴-2-氯煙醛(D-2-3).
-10℃下，N2氣下，向化合物D-2-2(25g，89.4mmol)在干THF(200mL)中的經(jīng)攪拌溶液中加入LiAlH4(1.7g，27mmol)。加入后，令反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 5∶1)顯示起始材料完全消耗。向反應(yīng)混合物中加入1N KHSO4(200mL)中，用EtOAc(300mL×3)萃取。用飽和NaCl水溶液(200mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生粗化合物D-2-3，通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 30∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為白色固體的純化合物D-2-3(8.0g，45％)。
制備1-(5-溴-2-氯吡啶-3-基)乙醇(D-2-4)
-78℃下，N2氣下，向化合物D-2-3(8.0g，36.3mmol)在干THF(100mL)中的經(jīng)攪拌溶液中逐滴加入3M CH3MgBr在THF(18.14mL，54.4mmol)中的溶液。加入后，令得到的混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 8∶1)顯示化合物D-2-3消耗了大部分。向反應(yīng)混合物中加入H2O(200mL)，用EtOAc(100mL×3)萃取混合物。用飽和NaCl水溶液(200mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生粗化合物D-2-4，通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 50∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色油的純化合物D-2-4(6.3g，73.6％)。
制備1-(5-溴-2-氯吡啶-3-基)乙酮(D-2-5)
0℃下，向吡啶(13g，0.165mol)在CH2Cl2(200mL)中的經(jīng)攪拌溶液中逐份加入CrO3(8.25g，0.083mol)和硅膠(20mL)。加入后，對(duì)反應(yīng)混合物攪拌10分鐘。然后加入化合物D-2-4(6.5g，27.5mmol)，在室溫下對(duì)得到的混合物攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 8∶1)顯示化合物D-2-4消耗了大部分。過(guò)濾反應(yīng)混合物，真空下濃縮濾液，產(chǎn)生粗化合物D-2-5，通過(guò)柱色譜(硅膠石油醚/EtOAc 20∶1)對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色油的純化合物D-2-5(5g，產(chǎn)率77％)。
制備5-溴-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(D-2-6)
室溫下，對(duì)化合物D-2-5(4g，16mmol)和肼(30mL)在乙醇(300mL)中的混合物攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 5∶1)顯示起始材料完全消耗。真空下濃縮反應(yīng)混合物，通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 15∶1)純化殘余物，產(chǎn)生粗化合物D-2-6，通過(guò)制備性HPLC對(duì)其進(jìn)一步純化，作為白色固體的產(chǎn)生純化合物D-2-6(800mg，產(chǎn)率20％)。
制備1-(4-甲氧基芐基)-5-溴-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(D-2-7)
0℃下，N2氣下，向化合物D-2-6(0.6g，3mmol)在干DMF(50mL)中的經(jīng)攪拌溶液中逐份加入NaH(0.24g，6mmol)。在室溫下對(duì)得到的混合物攪拌1小時(shí)。然后0℃下逐滴加入PMBCl(0.52g，3.3mmol)。在室溫下對(duì)得到的混合物攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 3∶1)顯示起始材料完全消耗。用H2O(50mL)淬滅反應(yīng)混合物，用EtOAc(50mL×3)萃取。用飽和NaCl水溶液(100mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮。通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc，從8∶1至5∶1)純化殘余物，產(chǎn)生作為白色固體的化合物D-2-7(0.7g，產(chǎn)率71％)。
制備1-(4-甲氧基芐基)-3-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(D-2-8)
80～90℃下，N2氣下，對(duì)化合物D-2-7(0.7g，2.1mmol)，4，4，5，5，4′，4′，5′，5′-八甲基-[2，2′]二[[1，3，2]二氧雜硼雜戊環(huán)基](1.05g，4.2mmol)、KOAc(0.63g，6.3mmol)和催化量的Pd(PPh3)2Cl2在干DMF(80mL)中的溶液攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 3∶1)顯示起始材料完全消耗。加入H2O(100mL)，用EtOAc(100mL×3)萃取反應(yīng)混合物。用飽和NaCl水溶液(100mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生作為褐色油的粗D-2-8(0.8g，產(chǎn)率100％)，其不經(jīng)進(jìn)一步純化即直接使用。
制備1-(4-甲氧基芐基)-5-(1-異丙基-4-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(D-2-9)
N2氣下，向化合物B-1-1(0.38g，1.05mmol)在甲苯(60mL)和EtOH(20mL)中的經(jīng)攪拌溶液中加入化合物D-2-8的粗材料(0.8g，2.1mmol)和2N Na2CO3水溶液(1.6mL)。10分鐘后，加入催化量的Pd(PPh3)4。對(duì)得到的混合物回流過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 2∶1)顯示D-2-8完全消耗。向反應(yīng)混合物中加入水(30mL)，用EtOAc(100mL×3)萃取混合物。用飽和NaCl水溶液(100mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮。通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 5∶1)純化殘余物，產(chǎn)生作為白色固體的化合物D-2-9(0.9g，30.1％)。
制備1-(4-甲氧基芐基)-5-(1-異丙基-4-(2-(甲基磺?；?嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(D-2-10)
在室溫下，對(duì)化合物D-2-9(0.4g，0.82mmol)和過(guò)硫酸氫鉀(0.76g，1.2mmol)在THF(10mL)和H2O(10mL)中的溶液攪拌2小時(shí)。TLC(EtOAc)顯示起始材料完全消耗。真空下濃縮反應(yīng)混合物。向殘余物中加入H2O(30mL)，用EtOAc(50mL×3)萃取混合物。用飽和NaCl水溶液(50mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物D-2-10(0.42g，產(chǎn)率100％)。
制備(2S)-1-(4-(3-(1-(4-甲氧基芐基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(D-2-11)
對(duì)化合物D-2-10(0.42g，0.82mmol)和(S)-1-氨基丙-2-醇(0.6g，8.2mmol)在甲苯(25mL)中的混合物回流過(guò)夜。TLC(EtOAc)顯示起始材料完全消耗。真空下濃縮混合物，通過(guò)柱色譜(硅膠，EtOAc)純化殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物D-2-11(0.4g，產(chǎn)率100％)。
制備(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(D-2)
在室溫下對(duì)化合物D-2-11(400mg，0.82mmol)在TFA(5mL)中的溶液攪拌48小時(shí)。TLC(石油醚/EtOAc 1∶2)顯示化合物D-2-11消耗了大約一半。向混合物中加入Et3N(10mL)，真空下濃縮得到的混合物。通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 1∶1)純化殘余物，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，通過(guò)制備性HPLC對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步純化，產(chǎn)生作為白色固體的純D-2(141.1mg，產(chǎn)率47％)。
實(shí)施例F-1制備3-氯-5-(1-異丙基-4-(嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
制備4-異惡唑-4-基嘧啶(F-1-2)
-10℃下將結(jié)晶三光氣(44.3g，0.447mol，2.1eq.)加入到4-甲基嘧啶(20.3g，0.213mol)和二甲基甲酰胺(32.7g，0.447mol，2.1eq.)的溶液中。這伴隨急劇變熱和反應(yīng)物質(zhì)的稠化。必須要將混合物的冷卻改變數(shù)次，并且向反應(yīng)混合物中加入氯仿(總共60mL)。3小時(shí)后，當(dāng)三光氣的加入完成，除去冷卻混合物，令反應(yīng)混合物加熱至35℃。當(dāng)反應(yīng)混合物開(kāi)始冷卻，蒸發(fā)掉氯仿，用乙酸乙酯研磨紅色油狀殘余物，產(chǎn)生粗化合物F-1-1a(產(chǎn)率78g)。
10℃下，攪拌下，將化合物F-1-1a小心灑到鹽酸羥基胺(17.8g，0.258mol，1.2eq)和NaHCO3(17，9g，0.213mol)在水(300mL)中的溶液中。向獲得的混合物中額外加入NaHCO3(36g，2eq.)(小心，產(chǎn)生泡沫)，這伴隨淺色結(jié)晶沉淀的形成。用乙酸乙酯萃取沉淀。第二天，重復(fù)萃取。蒸發(fā)合并的萃取物，產(chǎn)生作為結(jié)晶產(chǎn)物的化合物F-1-2。(針對(duì)4甲基嘧啶計(jì)算的產(chǎn)率為94％，29.6g)。
制備3-氧代-2-嘧啶-4-基丙腈(F-1-3)
攪拌下，將化合物F-1-2灑到NaOH(8.06g，0.201mol)在水/乙醇(30mL/30mL)混合物中的溶液中。混合物自發(fā)變熱至70℃，形成棕紅色溶液，形成淺色結(jié)晶。稠化后加水。自發(fā)變熱終止后，室溫下對(duì)混合物攪拌1小時(shí)。加入乙醇，對(duì)溶液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)。重復(fù)該操作兩次，在過(guò)濾器上用乙酸乙酯和醚洗殘余物，產(chǎn)生作為淡棕色的晶體(產(chǎn)率100％，34g)。
制備4-嘧啶-4-基-1H-吡唑-3-胺(F-1-4)
將化合物F-1-3(30g，0.178mol)灑到肼水合物(20mL)在冰醋酸(300mL)中的溶液中，這伴隨濃稠橙色沉淀的形成。在70-80℃對(duì)獲得的混合物保持1小時(shí)的攪拌。沉淀消失，溶液顏色變淺。蒸發(fā)反應(yīng)物質(zhì)至一半體積，用過(guò)量氨水中和，產(chǎn)生作為淺色沉淀的化合物F-1-4(產(chǎn)率66％，18.9g)。
制備3-[5-(甲氧基羰基)-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-3-基]苯甲酸(F-1-5)
-3℃下，將NaNO2(4.7g，0.068mol)在水(20mL)中的溶液以稀薄噴霧注入化合物F-1-4(10.9g，0.068mol)在冰醋酸(200mL)和水(50mL)混合物中的溶液中。溫度升至-1℃，溶液變?yōu)槌壬该?。將濃H2SO4(1.85mL，0.0338mol)倒進(jìn)獲得的溶液，加入KI(33.7g，0.2mol，3eq.)和I2(35g，138mmol，2eq.)的溶液。將獲得的溶液加熱至55℃1小時(shí)，用大量過(guò)量的氨中和乙酸。用過(guò)量Na2S2O3中和碘，形成淺色沉淀(16.5g)。通過(guò)過(guò)濾分離沉淀，用乙酸乙酯萃取母液。蒸發(fā)乙酸乙酯，將殘余物溶于THF。使用乙酸乙酯將溶液通過(guò)硅膠洗出，并蒸發(fā)產(chǎn)生化合物F-1-5(總產(chǎn)率93％，17.1g)。
制備4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶(F-1-6)
向吡唑F-1-5(3.0g，11mmol)和K2CO3(1.98g，14.3mmol)在DMF中的溶液中加入異丙基碘(5.51ml，55.1mmol)。在55C加熱反應(yīng)混合物。25小時(shí)后，加入更多異丙基碘(1ml 10mmol)和K2CO3(457mg，3.3mmol)。再攪拌2小時(shí)。冷卻。倒進(jìn)300ml飽和NaCl溶液，用TBME(2x)萃取。用飽和NaCl水溶液洗合并的有機(jī)層，在MgSO4上干燥，減壓下濃縮至黃色/橙色固體。從TBME重結(jié)晶。TLC分析顯示，結(jié)晶產(chǎn)物富集為異丙基產(chǎn)物F-1-6的一種單一異構(gòu)體。用TBME(3x)研磨固體，產(chǎn)生680mg其黃色粉末，其顯示出純的異構(gòu)體F-1-6。
制備3-氯-5-(1-異丙基-4-(嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶
用氮對(duì)4-(3-碘-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶(0.05g，0.2mmol)、3-氯-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(0.089g，0.318mmol)和2M Na2CO3水溶液(0.067g，0.636mmol，0.318mL 3.0Eq)在DMF(4mL)中的溶液鼓泡15分鐘，加入DPPF PdCl2(0.0140g，0.019mmol，0.06Eq)，然后在biotage微波發(fā)生器中于100℃和高吸收下加熱2.0小時(shí)。將得到的黑色反應(yīng)物冷卻至室溫。將反應(yīng)物倒進(jìn)H2O(100mL)中并進(jìn)行萃取(3×50mL EtOAC)。在Na2SO4上干燥合并的有機(jī)部分，真空下濃縮成黑色的油，通過(guò)裝有己烷的Biotage柱(Si25+M)純化，用(5％MeOH/EtOAc)/己烷(0-50％700mL，50-100％700mL，100％；700mL，27mL的級(jí)分)洗脫，產(chǎn)生作為米白色固體的產(chǎn)物F-1(0.025，50％)。
實(shí)施例G-1制備(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇 制備1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-羧酸甲酯(G-1-1a)
向5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(90g，0.4mol)和dppp(3g，0.072mol)在DMSO(300mL)和MeOH(300mL)中的混合物中加入Pd(OAc)2(16.5g，0.072mol)。在N2下對(duì)得到的混合物脫氣2分鐘，并在2MPa CO氣下加熱至100℃，持續(xù)兩天。TLC(石油醚∶EtOAc＝4∶1)顯示反應(yīng)完全。冷卻混合物，過(guò)濾然后濃縮。將獲得的殘余物倒進(jìn)冰水中。收集形成的固體，真空下干燥，產(chǎn)生粗化合物5(86.1g，粗制的)，其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下個(gè)反應(yīng)。
制備1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-羧酸甲酯(G-1-2)
0-10℃下，向G-1-1a(58g，0.33mol)在干THF(800mL)中的溶液中以小份加入NaH(20g，0.495mol)。在10℃對(duì)得到的混合物攪拌1小時(shí)。逐滴加入BsCl(70.1g，0.397mol)。令得到的混合物溫?zé)嶂潦覝?，并攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚∶EtOAc＝2∶1)顯示反應(yīng)完全。冷卻反應(yīng)混合物，用水淬滅。用EtOAc(400mL×3)萃取混合物。用飽和NaCl水溶液洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，過(guò)濾，濃縮，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，用石油醚∶EtOAc＝3∶1對(duì)其進(jìn)行重結(jié)晶，產(chǎn)生作為灰黃色固體的化合物G-1-2(60g，57.6％)。
制備2-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1-(1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)乙酮(G-1-3)
-78℃下，向i-Pr2NH(32.5mL，0.233mol)在干THF(420mL)中的溶液中逐滴加入n-BuLi(2.5M，93mL，0.233mol)，在-78℃對(duì)得到的溶液攪拌30分鐘。然后，逐滴加入4-甲基-2-(甲基硫代)嘧啶(22.33g，0.16mol)在干THF(110mL)中的溶液，在-78℃對(duì)得到的混合物再攪拌30分鐘。然后在-110℃逐滴加入化合物G-1-2(50.0g，0.145mol)在干THF(250mL)中的溶液。加入后，在-110℃對(duì)得到的混合物攪拌10分鐘。TLC(己烷∶EtOAc 1∶1)顯示反應(yīng)完全。向反應(yīng)混合物中加入EtOAc(300mL)和H2O(300mL)，以淬滅反應(yīng)。分離有機(jī)層，用EtOAc(300mL×3)萃取水層。用飽和NaCl水溶液(500mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮。通過(guò)柱色譜(CH2Cl2)純化殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物7(36.0g，58.5％)。
制備(Z)-3-(二甲基氨基)-2-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1-(1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙-2-烯-1-酮(G-1-4)
將化合物G-1-3(30g，70.7mmol)在DMF-DMA(300mL)中的溶液加熱至80℃，持續(xù)3.5小時(shí)。TLC(CH2Cl2∶MeOH＝20∶1)顯示反應(yīng)完全。減壓下濃縮溶劑，產(chǎn)生作為黑紅色油的粗化合物G-1-4(36g)，其不經(jīng)純化直接用于下個(gè)反應(yīng)。
制備5-(4-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1H-吡唑-5-基)-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(G-1-5)
向化合物G-1-4(36g，粗制)在EtOH(360mL)中的溶液中加入NH2NH2.H2O(30mL)。室溫下攪拌混合物5小時(shí)。從反應(yīng)混合物沉積出產(chǎn)物。過(guò)濾混合物，用EtOH(50mL×3)洗固體，產(chǎn)生作為橙色固體的產(chǎn)物(19.6g，62.1％，兩個(gè)步驟中)。
制備5-(4-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(G-1-6)
將化合物G-1-5(1.9g，4.24mmol)，

(1.02g，5.088mmol)、Cs2CO3(4.13g，12.72mol)在DMSO(20mL)中的混合物加熱至80℃并攪拌過(guò)夜。令混合物冷卻至室溫，用水(100mL)和CH2Cl2(100mL)稀釋。分離有機(jī)層，用CH2Cl2對(duì)水層洗三次。用飽和NaCl水溶液(300mL×3)洗合并的有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥，蒸發(fā)，產(chǎn)生粗化合物，通過(guò)柱色譜然后通過(guò)制備性HPLC對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物G-1-6(700mg，43.75％)。
制備5-(4-(2-(甲基硫代)嘧啶-4-基)-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑-3-基)-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(G-1-7)
向化合物G-1-6(370mg，0.98mmol)在THF(30mL)中的經(jīng)冷卻混合物中緩慢加入NaH(47.0mg，1.176mmol，60％，油中)。加入后，對(duì)混合物攪拌1小時(shí)，接著加入BsCl(207.56mg，1.176mmol)，室溫下攪拌2小時(shí)，直到TLC分析(MeOH/CH2Cl2＝1/10)顯示起始材料被消耗。然后用飽和NH4Cl水溶液淬滅得到的混合物，并對(duì)其加以濃縮。用EtOAc(50m×3)萃取殘余物。用飽和NaCl水溶液(300mL×3)洗合并的有機(jī)層，在無(wú)水Na2SO4上干燥，蒸發(fā)，產(chǎn)生粗化合物G-1-7(600mg，100％)，其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下個(gè)步驟。
制備5-(4-(2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑-3-基)-1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(G-1-8)
將粗化合物G-1-7(600mg，0.98mmol)與過(guò)硫酸氫鉀(0.90g，1.47mmol)在THF/H2O(1/1，15mL)中組合，室溫下攪拌5小時(shí)，直到TLC(EtOAc/石油＝1/2)顯示起始材料被消耗。用(100mL)和水(50mL)稀釋得到的混合物。分離有機(jī)層，用EtOAc對(duì)水層萃取3次。然后分別用水(100mL×1)、飽和NaHCO3水溶液(100mL×2)、飽和NaCl水溶液(100mL)洗合并的有機(jī)層。在無(wú)水Na2SO4上干燥得到的有機(jī)層，蒸發(fā)產(chǎn)生化合物G-1-8(600mg，100％)，其不經(jīng)進(jìn)一步純化即直接用于下個(gè)步驟。
制備(2S)-1-(4-(3-(1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(G-1-9)
將化合物G-1-8(600mg，0.98mmol)、S-1-氨基丙-2-醇(367.5mg，4.9mmol)在THF(25mL)中的混合物加熱至回流，攪拌24小時(shí)，直到TLC分析(MeOH/CH2Cl2＝1/10)顯示起始材料被消耗。然后濃縮得到的混合物至干，將殘余物溶于CH2Cl2(200mL)中，用水(100mL×2)和飽和NaCl水溶液(100mL×1)洗，在無(wú)水Na2SO4上干燥，接著進(jìn)行蒸發(fā)，產(chǎn)生作為黃色油的化合物G-1-9(500mg，100％)。
制備(2S)-1-(4-(3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(G-1-10)
向粗化合物G-1-9(500mg，0.98mmol)在MeOH(15mL)中的溶液中加入NaOH(78.4mg，1.96mmol)在H2O(3mL)中的溶液。然后對(duì)混合物溫和加熱和攪拌過(guò)夜。TLC分析(MeOH/CH2Cl2＝1/10)顯示起始材料完全消耗，新產(chǎn)物形成。因此，用EtOAc(250mL)稀釋得到的混合物，分離有機(jī)層，用飽和NaCl水溶液(100mL×2)洗，在無(wú)水Na2SO4上干燥，蒸發(fā)產(chǎn)生粗產(chǎn)物G-1-10(400mg，100％)，其直接用于下個(gè)步驟。
制備(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(G-1)
N2氣下，將DMF中的粗氮雜吲哚G-1-10(400mg，0.98mmol)，N-氯琥珀酰亞胺(NCS，130.83mg，0.98mmol)加熱至40℃并攪拌過(guò)夜。LC-MS顯示起始材料完全消耗。然后用EtOAc(500mL)稀釋得到的混合物。分離有機(jī)層，用水和飽和NaCl水溶液洗數(shù)次，在無(wú)水Na2SO4上干燥，蒸發(fā)產(chǎn)生粗產(chǎn)物(380mg)。通過(guò)制備性HPLC純化粗產(chǎn)物，產(chǎn)生作為綠色固體的產(chǎn)物G-1(170mg，39.53％)。1H NMR(400MHz，CDCl3).11.281(s，1H)，9.809(s，1H)，8.508(s，1H)，8.284(s，1H)，8.2166(m，1H)，7.811(s，1H)，7.353(s，1H)，7.194(s，1H)，6.604(s，1H)，5.044(s，1H)，4.190-4.122(m，2H)，4.061-4.022(m，1H)，3.966-3.908(m，1H)，2.940(s，2H)，2.583-2.510(m，1H)，2.490-2.364(m，1H)，0.917(s，3H)。
實(shí)施例H-14-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺 制備5-溴-1-(苯基磺酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(H-1-2)
0℃下，向NaH(87g，2.18mol，60％，在油中)在干THF(1L)中的懸浮液中逐滴加入5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶H-1-1(120g，0.62mol)在干THF(1L)中的溶液。加入后，在0℃下N2下攪拌混合物0.5小時(shí)。5℃下向混合物中逐滴加入BsCl(219.5g，1.24mol)。加入后，室溫下對(duì)混合物攪拌過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 5∶1)顯示反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物緩慢倒進(jìn)冰冷的飽和NH4Cl(500mL)中，用EtOAc(600mL×2)萃取混合物。用飽和NaCl水溶液(700mL)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮。用石油醚/EtOAc(15∶1，1.5L)洗殘余物，產(chǎn)生作為米白色固體的化合物H-1-2(198g，94.8％)。
制備5-(1-乙氧乙烯基)-1-(苯基磺酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(H-1-3)
N2氣下，向化合物H-1-2(110g，0.33mol)和2-乙氧基丙-1-烯(141.3g，0.39mol)在甲苯(2L)中的溶液中加入Pd(PPh3)2Cl2(11.4g，16.3mmol)。對(duì)混合物回流過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 5∶1)顯示反應(yīng)完全。反應(yīng)混合物直接用于下個(gè)步驟。
制備1-(1-(苯基磺酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)乙酮(H-1-4)
向化合物H-1-3(216g，0.66mol)在甲苯(2L)中的混合物中加入HCl(3N，440mL，1.32mol)。在室溫下對(duì)混合物攪拌2小時(shí)。TLC(石油醚/EtOAc 3∶1)顯示反應(yīng)完全。真空下濃縮混合物。通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 5∶1～3∶1)純化殘余物，產(chǎn)生作為米白色固體的化合物H-1-4(188g，95.0％)。
制備(E)-3-(二甲基氨基)-1-(1-(苯基磺?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙-2-烯-1-酮(H-1-5)
N2氣下，對(duì)化合物H-1-4(97.5g，0.325mol)在DMF-DMA(500mL)中的混合物回流過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 1∶1)顯示反應(yīng)完全。真空下濃縮反應(yīng)混合物。用EtOAc洗殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的化合物H-1-5(35g，30.3％)和作為褐色油的粗化合物H-1-5(90g)。
制備1-(苯基磺?；?-5-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(H-1-6)
N2氣下，向化合物H-1-5(50g，0.14mol)在EtOH(200mL)中的混合物中加入化合物5B(6.8g，0.21mol)。加入后，對(duì)混合物回流過(guò)夜。TLC(石油醚/EtOAc 1∶1)顯示反應(yīng)完全。真空下除去EtOH溶劑的大約一半，過(guò)濾得到的混合物。真空下干燥濾渣，產(chǎn)生作為灰色固體的化合物H-1-6(34g，75％)。
制備5-(1-異丙基-1H-吡唑-3-基)-1-(苯基磺酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(H-1-7)
0℃下，N2氣下，向NaH(2.96g，74.1mmol，60％，在油中)在DMF(200mL)中的混合物中逐份加入化合物H-1-6(20g，61.7mmol)。0℃下攪拌0.5小時(shí)后，0℃下向混合物中逐滴加入異丙基碘(31.5g，185.2mmol)。在0℃對(duì)得到的混合物攪拌0.5小時(shí)。TLC(石油醚/EtOAc1∶1)顯示大部分化合物H-1-6被消耗。將反應(yīng)混合物倒進(jìn)冰冷的飽和NH4Cl(1000mL)中。用EtOAc(400mL)萃取混合物。用K2CO3堿化水層至pH約8，用NaCl飽和，用EtOAc(400mL)萃取。用飽和NaCl水溶液(400mL×5)洗合并的有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，真空下濃縮。通過(guò)柱色譜(硅膠，石油醚/EtOAc 10∶1)純化殘余物，產(chǎn)生作為白色固體的化合物H-1-7(9g，38.1％)和作為褐色油的粗化合物H-1-7(3g)。
制備5-(4-溴-1-異丙基-1H-吡唑-3-基)-1-(苯基磺酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(H-1-8)
N2氣下，向化合物H-1-7(5g，14mmol)在CHCl3(100mL)中的溶液中加入NBS(2.8g，16mmol)。加入后，室溫下對(duì)混合物攪拌3小時(shí)。TLC(石油醚/EtOAc 3∶1)顯示反應(yīng)完全。真空下濃縮反應(yīng)混合物。向參與物中加入EtOAc(200mL)。用水(200mL)和飽和NaCl水溶液(200mL)洗混合物，在Na2SO4上干燥并真空下濃縮。用石油醚/EtOAc(3∶1，15mL)洗殘余物，產(chǎn)生作為黃色固體的粗化合物H-1-8(4.5g，72％)。從CH2Cl2/石油醚(1∶20，50mL)重結(jié)晶粗固體，產(chǎn)生作為米白色固體的純化合物H-1-8(4.35g，70％)。
制備5-(4-溴-1-異丙基-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(H-1-9)
將KOH在8ml水中的溶液加入到經(jīng)Bs保護(hù)的氮雜吲哚(H-1-8)在50ml EtOH中的懸浮液中。在室溫下攪拌過(guò)夜。通過(guò)旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)濃縮反應(yīng)。用EtOAc和飽和NaCl水溶液稀釋經(jīng)濃縮的反應(yīng)混合物，對(duì)各層加以分離。用EtOAc再次萃取水層。用飽和NaCl水溶液洗合并的有機(jī)相，在MgSO4上干燥。過(guò)濾溶液，在減壓下濃縮，產(chǎn)生黃色固體。用TBME(2x)研磨，產(chǎn)生3.37g作為黃色固體的H-1-9。產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化即用于下個(gè)步驟。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.47(d，J＝6.82Hz，6H)4.36-4.66(m，1H)6.53(d，J＝2.53Hz，1H)7.40-7.60(m，1H)8.15(s，1H)8.30(d，J＝2.02Hz，1H)8.61(d，J＝2.02Hz，1H)11.76(br.s.，1H)。
制備4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(H-1-10)
對(duì)吡唑H-1-9(400mg，1.31mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺(375mg，1.70mmol)和1N碳酸鈉(4ml，4mmol)在5mL DME中的混合物充氮5分鐘，然后加入1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵氯化鈀(II)(96mg，0.131mmol)，在油浴中加熱混合物。反應(yīng)在5分鐘內(nèi)變黑。持續(xù)在80℃加熱再18個(gè)小時(shí)，此時(shí)再加入150mg 4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊環(huán)-2-基)吡啶-2-胺和25mg 1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵氯化鈀(II)。脫氣后，對(duì)反應(yīng)加以密封，在微波中于80℃處理60分鐘。過(guò)濾混合物，用水和MeOH漂洗固體。在乙酸乙酯和飽和NaCl水溶液之間分配濾液。用乙酸乙酯(2x)萃取水層。用水、飽和NaCl水溶液洗合并的有機(jī)部分，在MgSO4上干燥，真空下濃縮，產(chǎn)生粗制褐色油(570mg)，通過(guò)反相HPLC對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為白色固體的51mg(12％產(chǎn)率)H-1-10。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.50(d，J＝6.57Hz，6H)4.45-4.65(s，1H)5.79(s，2H)6.25-6.38(m，2H)6.45(dd，J＝3.41，1.89Hz，1H)7.40-7.55(m，1H)7.71-7.86(m，1H)7.95(d，J＝2.02Hz，1H)8.09(s，1H)8.22(d，J＝1.77Hz，1H)11.68(br.s.，1H)。
制備4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(H-1)
在室溫下對(duì)4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(H-1-10)(40mg，0.13mmol)和N-氯琥珀酰亞胺(19.3mg，0.14mmol)在CH2Cl2(2ml)中的混合物攪拌18小時(shí)。加入另一部分N-氯琥珀酰亞胺(5mg，0.04mmol)，在室溫下繼續(xù)攪拌再4個(gè)小時(shí)。在減壓下濃縮反應(yīng)，通過(guò)反向HPLC純化殘余物，產(chǎn)生作為白色固體的14mg(31％產(chǎn)率)4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(H-1)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.51(d，J＝6.82Hz，6H)4.43-4.69(m，1H)6.22-6.63(m，4H)7.72(d，J＝2.78Hz，1H)7.82(d，J＝5.81Hz，1H)7.92(d，J＝1.77Hz，1H)8.23(s，1H)8.30(d，J＝2.02Hz，1H)12.08(d，J＝1.77Hz，1H)。
實(shí)施例I-1制備(2S)-1-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇 制備I-1-1
室溫下，向5-溴-3-甲氧基吡嗪-2-胺(4.05g，19.8mmol)在70mL干THF中的溶液中加入DMAP(1.24g，10,1mmol)接著一次性加入boc酸酐(10.4g，47.6mmol)。在室溫下攪拌得到的混合物。通過(guò)TLC發(fā)現(xiàn)起始材料用掉后，減壓下濃縮反應(yīng)混合物，產(chǎn)生琥珀色的油。當(dāng)在3∶1己烷/EtOAc中對(duì)油殘余物進(jìn)行漿體化時(shí)，出現(xiàn)沉淀，對(duì)其加以收集。將沉淀溶于EtOAc，用飽和NaCl水溶液和0.5N HCl洗，使得pH為約5。在MgSO4上干燥有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠色譜(用3∶1的己烷/EtOAc洗脫)純化粗產(chǎn)物，產(chǎn)生作為白色固體的5.40g化合物I-1-1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)ppm 1.36(s，18H)3.99(s，3H)8.37(s，1H)。
制備(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(三甲基錫基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇(I-1-2)
用氮鼓泡機(jī)，對(duì)(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-碘-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇(2.0g，4.9mmol)和六甲基二錫(1.9g，5.9mmol)在甲苯(15mL)中的溶液加以脫氣，之后加入四(三苯基膦)鈀(0)(566mg，0.489mmol)。在20mL微波反應(yīng)管中密封得到的混合物，于90℃油浴中加熱18小時(shí)，然后在110℃加熱2小時(shí)。從油浴中移出混合物，令其冷卻至室溫。將混合物裝載到硅膠上，使用二氯甲烷中的0-35％乙酸乙酯梯度作為洗脫劑，產(chǎn)生作為油的1.26g(58％)I-1-3。1H NMR(400MHz，氯仿-d)ppm 8.17(d，J＝5.31Hz，1H)，7.99(s，1H)，6.68(d，J＝5.31Hz，1H)，6.15(tt，J＝55.52，4.55，4.42Hz，1H)，5.23(br.t，J＝5.31Hz，1H)，4.56(td，J＝13.52，4.29Hz，2H)，3.91-4.17(m，1H)，3.51-3.75(m，1H)，3.28-3.48(m，1H)，1.25(d，J＝6.32Hz，3H)，0.36(t，J＝28.55Hz，9H)。
制備(2S)-1-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇(I-1)
使用N2鼓泡機(jī)對(duì)二叔丁基(5-溴-3-甲氧基吡嗪-2-基)酰亞胺二碳酸酯(517mg，1.28mmol)、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(三甲基甲錫烷基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇(570mg，1.28mmol)，碘化亞銅(5mg，0.026mmol)在DMF(13mL)中的混合物進(jìn)行數(shù)分鐘脫氧，之后加入四(三苯基膦)鈀(0)(74mg，0.064mmol)。在微波反應(yīng)管中密封混合物，于100C油浴中加熱18小時(shí)。然后在微波中于170℃對(duì)混合物加熱20分鐘，以熱解叔丁氧羰基。在乙酸乙酯和飽和NaCl水溶液之間分配混合物。一些黑色不可溶固體沒(méi)有進(jìn)入任何一相，通過(guò)過(guò)濾除去它們。對(duì)各層加以分離，用乙酸乙酯對(duì)水相洗兩次，用水和飽和NaCl水溶液每種洗合并的有機(jī)層至少一次，在硫酸鎂上干燥，并減少至最小體積。然后在硅膠上純化殘余物，其中使用叔丁基甲基醚和二氯甲烷(1∶1)混合物中的0-8％甲醇梯度(含有10％氫氧化銨)作為洗脫劑。從柱回收少量仍含有叔丁氧羰基的產(chǎn)物。用甲醇中的10％鹽酸在70℃對(duì)該材料處理2小時(shí)，以完成去保護(hù)。在碳酸氫鈉和乙酸乙酯之間分配混合物。用乙酸乙酯對(duì)水層萃取兩次。用水(1x)、飽和NaCl水溶液(1x)洗合并的有機(jī)部分，在MgSO4上干燥，并減少至最小體積。然后在硅膠上以相似方式純化殘余物，以獲得第二批產(chǎn)物。合并所有批次，溶解于甲醇和水的混合物中，凍干產(chǎn)生180mg(33％)作為松軟白色固體的(2S)-1-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇(I-1)。1H NMR(400MHz，乙腈-d3)ppm 8.05-8.15(m，2H)，7.83(s，1H)，6.65(d，J＝5.31Hz，1H)，6.27(tt，J＝54.95，3.79Hz，1H)，5.73(br.t，J＝4.93Hz，1H)，5.34(br.s.，2H)，4.58(td，J＝14.72，3.66Hz，2H)，3.81(br.s.，1H)，3.76(s，3H)，3.54(br.s.，1H)，3.27-3.41(br.m，1H)，3.06-3.23(br.m，1H)，1.08(d，J＝6.32Hz，3H)。
制備(2S)-1-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-碘-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇(I-1-2) 步驟1
在30℃下，對(duì)化合物I-1-2a(22g，69.2mmol)、1，1-二氟-2-碘乙烷(16g，83.3mmol)和K2CO3(19.2g，0.138mol)在DMF(80mL)中的混合物攪拌過(guò)夜。當(dāng)TLC(EtOAc/石油醚＝1∶4)顯示反應(yīng)完全，減壓下蒸發(fā)DMF。將殘余物加入進(jìn)EtOAc(500mL)。用鹽水洗混合物，在Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，通過(guò)SFC對(duì)其加以純化，產(chǎn)生作為黃色固體的產(chǎn)物(12.1g，45.8％)。
步驟2
0～5℃下向I-1-2b(10g，26.2mmol)在THF(100mL)和水(100mL)中的溶液中加入過(guò)硫酸氫鉀(24g，39.1mmol)。加入后，室溫下對(duì)混合物攪拌過(guò)夜。TLC(EtOAc/石油醚＝1∶2)顯示反應(yīng)完全，將混合物濃縮至1/2體積，然后加入EtOAc(200mL)，分離有機(jī)層，用鹽水洗，在Na2SO4上干燥，濃縮，產(chǎn)生作為黃色固體的I-1-2c(10.9g，100％)。
步驟3
將I-1-2c(10.9g，26.3mmol)和(S)-1-氨基丙-2-醇(7.9g，0.105mol)在THF(100mL)中的混合物加熱至回流過(guò)夜。當(dāng)TLC(CH2Cl2∶MeOH＝10∶1)顯示反應(yīng)完全，向混合物中加入EtOAc(300mL)和鹽水(100mL)，對(duì)各層加以分離。用鹽水(80mL×5)洗有機(jī)層，在Na2SO4上干燥，過(guò)濾，濃縮，產(chǎn)生作為灰白色固體的產(chǎn)物I-1-2(10.1g，93.9％)。
表1






























































實(shí)施例JRaf生化檢驗(yàn) 使用體外激酶檢驗(yàn)，針對(duì)對(duì)b-Raf的效能，對(duì)本發(fā)明的化合物加以評(píng)估。通過(guò)測(cè)定經(jīng)同位素標(biāo)記的32-P磷酸酯從ATP向特異性Raf底物Mek1的轉(zhuǎn)移，體外測(cè)量Raf激酶活性。全長(zhǎng)野生型b-Raf以重組形式表達(dá)，從細(xì)菌或昆蟲(chóng)細(xì)胞對(duì)其加以純化。從E.coli細(xì)菌細(xì)胞純化重組Mek1。在一種檢驗(yàn)形式(被稱為G1)中，全長(zhǎng)野生型Mek1用作為b-Raf底物。在第二種檢驗(yàn)形式(被稱為G2)中，全長(zhǎng)K97R Mek1突變體用作為b-Raf底物。
在含有下述物質(zhì)的溶液中進(jìn)行體外激酶檢驗(yàn)50mM Hepes(pH7.4)、5nM b-Raf、0.8μM Mek1、10mM MgCl2、25μM ATP、0.002％(v/v)Tween-20、5μg/mL亮抑酶肽(leupeptin)、1.2mM DTT、2％(v/v)DMSO、0.2-1.0μCi[γ-32P]ATP(每孔)。
在聚丙烯圓底96孔板的孔中進(jìn)行檢驗(yàn)，每個(gè)孔含有43.5μL檢驗(yàn)混合物和1.5μL抑制劑化合物或DMSO介體。加入15μL b-Raf混合物，在平板振蕩器上對(duì)平板加以振蕩，并在環(huán)境溫度下預(yù)孵育10分鐘。通過(guò)加入15μL ATP混合物開(kāi)始反應(yīng)，并加以振蕩。40分鐘后，通過(guò)加入25μL 0.5M EDTA(pH 7.4)終止反應(yīng)。
將60μL終止的反應(yīng)體系轉(zhuǎn)移到96孔尼龍66Biodyne A膜SilentScreen過(guò)濾板(Nalge/Nunc256081)的孔中。對(duì)孔加以過(guò)濾，用0.85％磷酸洗五次。將過(guò)濾板放到具有50mL 0.85％磷酸的槽中，在軌道式振蕩器上輕柔旋轉(zhuǎn)10分鐘。用新鮮的0.85％磷酸重復(fù)該流程一次。還將5份0.5μL ATP混合物樣品點(diǎn)樣到濾紙上，用于計(jì)算比活性。對(duì)過(guò)濾板進(jìn)行1小時(shí)的空氣干燥，在Amersham Biosciences Storage Phosphor Screen上夾在玻璃紙膜之間，并至少放置過(guò)夜。使用Molecular Dynamics Storm 840磷光影像分析儀(phosphoimager)讀取影像。使用ImageQuant 5.1計(jì)算點(diǎn)的體積。
從[32-P]ATP的比活性、摻入Mek1的32-P和b-Raf的濃度來(lái)計(jì)算Raf激酶活性。
實(shí)施例KRaf細(xì)胞檢驗(yàn) 按照下文所述，使用細(xì)胞檢驗(yàn)，針對(duì)對(duì)b-Raf的效能，對(duì)本發(fā)明的化合物加以評(píng)估。通過(guò)測(cè)量Mek1/2在絲氨酸217/221處(Raf激酶體內(nèi)磷酸化位點(diǎn))磷酸化的水平，測(cè)定Raf激酶在細(xì)胞中的活性。使用抗磷-Mek1/2抗體(Cell Signaling#9121)，以ELISA形式，測(cè)量Mek1/2Ser磷酸化。
用健康生長(zhǎng)的人黑素瘤A2058細(xì)胞(具有b-Raf突變)進(jìn)行檢驗(yàn)。在10％FBS DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)A2058細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞接近85％+匯合，用PBS洗一次細(xì)胞，用胰蛋白酶/EDTA對(duì)其進(jìn)行3分鐘的胰蛋白酶處理。將細(xì)胞重新懸浮于10％FBS DMEM中，以1000rpm離心5分鐘。將細(xì)胞重新懸浮于10％FBS DMEM中，在細(xì)胞計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)。以50,000細(xì)胞/孔，將細(xì)胞以100μL體積/孔接種于96孔平底板中10％FBS DMEM中。陰性對(duì)照孔獲得僅100μL 10％FBS DMEM培養(yǎng)基，而沒(méi)有細(xì)胞。將板放在具有5％CO2的細(xì)胞培養(yǎng)基孵育器中，于37℃孵育過(guò)夜。
第2天，在10％FBS DMEM培養(yǎng)基中稀釋測(cè)試化合物，并以1∶3順次稀釋獲得11種測(cè)試濃度。對(duì)化合物的每種濃度重復(fù)測(cè)試兩次。以25μL/孔將化合物加入到細(xì)胞板中對(duì)應(yīng)的孔中，將25μL/孔介體(10％FBSDMEM中0.5％DMSO)中加入到陰性對(duì)照孔(沒(méi)有細(xì)胞)和陽(yáng)性對(duì)照孔(沒(méi)有化合物的細(xì)胞)中。在37℃，5％CO2下，在細(xì)胞孵育器中對(duì)板進(jìn)行1小時(shí)孵育。1小時(shí)孵育后，除去培養(yǎng)基，向細(xì)胞板中加入100μL/孔的細(xì)胞裂解緩沖液。在室溫下對(duì)板振蕩15分鐘。15分鐘后，將細(xì)胞裂解物轉(zhuǎn)移至ELISA板(預(yù)先用抗Mek1抗體(Cell Signaling#2352)涂布過(guò))，在室溫下輕柔振蕩下對(duì)板加以孵育。2小時(shí)后，吸出孔中的內(nèi)含物，用洗滌緩沖液對(duì)孔洗4次。向每個(gè)孔中加入100μL磷-Mek1/2檢測(cè)抗體(Cell Signaling#9121)，在室溫下輕柔振蕩下對(duì)板加以1小時(shí)孵育。1小時(shí)后，吸走孔中內(nèi)容物，用洗滌緩沖液洗4次。向每個(gè)孔中加入100μL連有抗兔IgG HRP的抗體(Cell Signaling#7074)，于室溫下輕柔振蕩下對(duì)板進(jìn)行1小時(shí)孵育。1小時(shí)后，吸走孔中內(nèi)容物，用洗滌緩沖液洗4次。向每個(gè)孔中加入100μL TMB底物(Sigma#T0440)，室溫下輕柔振蕩下對(duì)板進(jìn)行10至20分鐘孵育。顏色發(fā)展之后，向每個(gè)孔中加入100μL終止溶液(1N鹽酸)，以終止顏色發(fā)展。在ELISA平板讀數(shù)器上于450nm對(duì)平板加以讀數(shù)。
表2B-Raf生物化學(xué)和細(xì)胞活性數(shù)據(jù) 表3
權(quán)利要求
1.在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明是式(II)的化合物或其可藥用鹽
其中
X是N或CR7；
R1是H、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中，所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代；
R2是C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中，所述C2-C9雜環(huán)烷基和C5-C14雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代；或者任選地，當(dāng)R2是C2-C9雜芳基時(shí)，任何兩個(gè)相鄰環(huán)原子上的氫原子可組合形成任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元環(huán)烷基、任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元雜環(huán)烷基或任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元雜芳基；
R3是H或-NR9R10；或者當(dāng)X是CR7時(shí)，R3可與R7組合，形成任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元雜芳基、任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元雜環(huán)烷基、任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的苯基或任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的5-7元環(huán)烷基；
R4、R5、R6、R7每個(gè)獨(dú)立地是H、-NR11R12、-CN、-C(O)R11、-C(O)OR11、-NO2、-SR11、-S(O)2R11、-OR11、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中，所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代；
每個(gè)R8獨(dú)立地是-OR11、氟、氯、溴、氧代、氰基、-NR13R14、-C(O)N(R13R14)、-C(O)R13、-C(O)OR13、-NO2、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基、C2-C9雜芳基或-(CH2)nC(O)R11，其中，所述C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R11取代；
R9和R10每個(gè)獨(dú)立地是H、-C(O)N(R13R14)、-C(O)R13、-C(O)OR13、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基或C2-C9雜芳基，其中，所述C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8環(huán)烷基、C6-C14芳基、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)至少一個(gè)R11取代；或者，R9和R10與它們相連的氮組合到一起，形成任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R11取代的4-7元雜環(huán)烷基環(huán)；
每個(gè)R11和R12獨(dú)立地是氟、氯、溴、-OH、-C(O)R13、-C(O)OR13、-SR13、-S(O)2R13、-OR13、-NR13R14、-C(O)N(R13R14)、氰基、C1-C6烷基、C1-C11雜烷基、C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基，其中，C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R13取代；
每個(gè)R13和R14獨(dú)立地是H、氧代、C1-C6烷基、C1-C11雜烷基、C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基，其中，C3-C8環(huán)烷基、-O-(C3-C8環(huán)烷基)、-S-(C3-C8環(huán)烷基)、C6-C14芳基、-O-(C6-C14芳基)、-S-(C6-C14芳基)、C2-C9雜環(huán)烷基和C2-C9雜芳基中的每個(gè)任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)選自氟、氯、溴、-OH、氰基和C1-C6烷基的基團(tuán)取代；
n是0、1、2、3或4。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，X是N。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，X是CR7。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，R4是H。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，R5是H。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，R6是H。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，R4、R5和R6是H。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，R1是任選經(jīng)一個(gè)或多個(gè)R8取代的C1-C6烷基。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，R1選自甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、2，2-二氟乙基、氰甲基、二氟環(huán)丁基、(3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基、1，1-二甲基-2-羥乙基、1-甲基-1-氰乙基、二氟甲基、叔丁基、3-羥丙-2-基、哌啶基、N-乙酰基-哌啶基、H、四氫-2H-吡喃基、四氫呋喃基、4-氰苯基、順-氟環(huán)丁基、反-氟環(huán)丁基、氧雜環(huán)丁基和N-甲基-哌啶基。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的化合物或其可藥用鹽，其中，R1選自甲基、異丙基、(3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基、2，2-二氟乙基和氰甲基。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，R2選自
構(gòu)成的組。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中，R3是-NR9R10。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物或其可藥用鹽，其中，R3是NH2、H、
14.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，所述化合物選自(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-[2-(1H-吡唑-1-基)乙基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、N-(2-氟乙基)-4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、2-({4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)乙醇、4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-[2-(1H-吡唑-4-基)乙基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-(4-(3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、[4-[2-((S)-2-羥基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-吡唑-1-基]-乙腈、1-[2-({4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)乙基]吡啶-2(1H)-酮、(2R)-2-({4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-1-醇、N-[(1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲基]-4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、N-[(2，5-二甲基-1，3-惡唑-4-基)甲基]-4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(四氫呋喃-3-基甲基)嘧啶-2-胺、4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)-N-(吡啶-2-基甲基)嘧啶-2-胺、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(2-甲氧乙基)嘧啶-2-胺、1-乙基-4-[({4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)甲基]吡咯烷-2-酮、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(5-甲基-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(5-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-甲基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(2-甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶-6-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶-6-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-((3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、5-(4-(2-((S)-2-羥基丙基氨基)嘧啶-4-基)-1-異丙基-1H-吡唑-3-基)-3，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2(3H)-酮、(2S)-1-(4-(3-(3，3-二甲基-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇和(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-((3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇構(gòu)成的組。
15.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，所述化合物選自(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇和(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇構(gòu)成的組。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇，或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇，或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(3-(2，3-二甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇，或其可藥用鹽。在另一實(shí)施方式中，所述化合物是(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇，或其可藥用鹽。
16.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，所述化合物選自4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]-N-環(huán)丙基嘧啶-2-胺、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(3，3-二氟環(huán)丁基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、3-({4-[3-(3-氟-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-氟-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(3-氟-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、N-{5-[4-{2-[(2-氰乙基)氨基]嘧啶-4-基}-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基]-4-甲基吡啶-2-基}乙酰胺、N-[1-(環(huán)丙基-磺酰基)哌啶-4-基]-4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(6-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-叔丁基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、2-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-(2-{[(2S)-2-羥丙基]氨基}嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙腈、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-6-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-6-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈和3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(1-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-6-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈構(gòu)成的組。
17.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，所述化合物選自3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(1-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-6-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、(2S)-1-[(4-{3-[6-氨基-5-(二氟甲氧基)-吡啶-3-基]-1-異丙基-1H-吡唑-4-基}嘧啶-2-基)氨基]丙-2-醇、4-[1-(二氟甲基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(2-氨基嘧啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、3-({4-[1-(二氟甲基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、2-氨基-5-[4-(2-{[(2S)-2-羥丙基]-氨基}嘧啶-4-基)-1-異丙基-1H-吡唑-3-基]吡啶-3-醇、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、2-[4-{2-[(2，2-二氟乙基)氨基]嘧啶-4-基}-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙-1-醇、3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、3-({4-[1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-乙酰基-6-氨基吡啶-3-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-{[4-(1-異丙基-3-吡啶-3-基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基}-丙腈、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-叔丁基-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)嘧啶-2-胺、(2R)-2-[4-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]丙-1-醇、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-環(huán)丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、3-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-環(huán)丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、2-[4-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙-1-醇、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-環(huán)丙基-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)嘧啶-2-胺和4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺構(gòu)成的組。
18.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，所述化合物選自(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-乙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、4-[1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、3-氯-5-(1-哌啶-4-基-4-嘧啶-4-基-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、4-[1-叔丁基-3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-({4-[1-叔丁基-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、4-[1-(1-乙?；哙?4-基)-3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)-嘧啶-2-胺、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)-嘧啶-2-胺、3-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)-嘧啶-2-胺、3-({4-[1-叔丁基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-叔丁基-3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-[(4-{3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1-[(3R)-四氫呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-基}嘧啶-2-基)氨基]丙腈、3-({4-[1-叔丁基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、3-[(4-{3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-[(3R)-四氫呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-基}嘧啶-2-基)氨基]丙腈、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)嘧啶-2-胺、3-(4-(3-(5-乙?；?6-氨基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-4-{2-[(2-羥乙基)-氨基]嘧啶-4-基}-1H-吡唑-1-基]-芐腈、4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)嘧啶-2-胺、3-(4-(3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈、3-(4-(3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈、(S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-((1s，3s)-3-氟環(huán)丁基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(S)-1-(4-(3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-((1r，3r)-3-氟環(huán)丁基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-((1r，3r)-3-氟環(huán)丁基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、(2S)-1-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈和1-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-2-甲基丙-2-醇構(gòu)成的組。
19.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，所述化合物選自N-(2，2-二氟乙基)-4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-胺、3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈、(S)-1-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-((R)-3-甲基-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈、3-(4-(1-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈、3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(2-氧代-2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-2-基氨基)丙腈、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-[(4-{3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-[(3-甲基氧雜環(huán)丁-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-基}嘧啶-2-基)氨基]丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-氧雜環(huán)丁-3-基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-氟-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(2，3-二氫-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、5-[1-(2，2-二氟乙基)-4-(2-{[(2S)-2-羥丙基]氨基}嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-甲腈、(2S)-1-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、2-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)乙醇、2-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)乙醇、4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(3-甲氧丙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、N-(2，2-二氟乙基)-4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-3-(3-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(2，2-二氟乙基)嘧啶-2-胺、4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、3-(4-(1-(2，2-二氟乙基)-3-(1-氰乙基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙腈、3-({4-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)-丙腈、2-[4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙-1-醇、3-氯-5-(1-異丙基-4-嘧啶-4-基-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、3-氯-5-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-4-嘧啶-4-基-1H-吡唑-3-基]-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、5-(1-叔丁基-4-嘧啶-4-基-1H-吡唑-3-基)-3-甲氧基吡啶-2-胺、(2S)-1-(4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-(四氫呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇、3-({4-[3-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、N-(2，2-二氟乙基)-4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-胺、4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]-N-(四氫呋喃-3-基)嘧啶-2-胺、2-[3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-4-{2-[(2-羥乙基)氨基]嘧啶-4-基}-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙腈、2-[4-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]-2-甲基丙腈、3-(4-(3-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈、4-(3-(3-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺、4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺、4-(1-異丙基-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、3-氯-5-(1-異丙基-4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、(2S)-1-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇、(2S)-1-({4-[3-(7-氯-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-2-基)-1-異丙基-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙-2-醇構(gòu)成的組。
20.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，所述化合物選自3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、(2S)-1-(4-(1-異丙基-3-(3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-醇和3-(4-(3-(5-乙酰基-6-氨基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈構(gòu)成的組。
21.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中，所述化合物選自3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈、3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈和3-(4-(3-(5-乙?；?6-氨基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈構(gòu)成的組。
22.包含3-({4-[1-(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈的化合物或其可藥用鹽。
23.包含3-({4-[1-(2，2-二氟乙基)-3-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈的化合物或其可藥用鹽。
24.包含3-({4-[3-(5-氨基-6-甲氧基吡嗪-2-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-2-基}氨基)丙腈的化合物或其可藥用鹽。
25.包含3-(4-(3-(5-乙?；?6-氨基吡啶-3-基)-1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)-丙腈的化合物或其可藥用鹽。
26.藥物組合物，其包含至少一種根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物或其可藥用鹽，以及可藥用載體或稀釋劑。
27.在有需要的哺乳動(dòng)物中治療不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)或者任何Raf介導(dǎo)的疾病或病況的方法，所述方法包括下述步驟向所述哺乳動(dòng)物施用治療有效量的至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-25中任意一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用鹽。
28.權(quán)利要求27的方法，其中，所述不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)是癌性的。
29.權(quán)利要求27的方法，其中，所述不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)是非癌性的。
30.抑制Raf酶促活性的方法，所述方法包括將Raf酶與Raf抑制量的至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-25中任意一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用鹽接觸。
31.根據(jù)權(quán)利要求1-25中任意一項(xiàng)所述的化合物或其鹽或溶劑化物在生產(chǎn)用于治療哺乳動(dòng)物中不正常的細(xì)胞生長(zhǎng)的藥品中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的化合物，及其可藥用鹽，其合成及其作為Raf抑制劑的用途。
文檔編號(hào)A61K31/4439GK101815712SQ200880109854
公開(kāi)日2010年8月25日 申請(qǐng)日期2008年7月21日 優(yōu)先權(quán)日2007年8月1日
發(fā)明者景榮·吉恩·崔, 朱迪思·蓋爾·迪爾, 古丹麟, 創(chuàng)興·郭, 瑪麗·凱瑟琳·約翰遜, 羅伯特·史蒂文·卡那, 蘇珊·伊麗莎白·克帕特, 瑪利亞·安宅里卡·林頓, 因卓萬(wàn)·詹姆斯·姆卡屏, 麥森·艾倫·派瑞什, 思恩娜·路易絲·帕默 申請(qǐng)人:輝瑞有限公司