專利名稱：：用于改善腸道微生物群落的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于改善腸道微生物群落的組合物，所述組合物包含作為活性成分的副干酪乳桿菌(Lactobacillusparacasei)KW3110或其變體，其使腸道微生物群落的有益菌雙歧桿菌增殖。
背景技術(shù)：
：細菌永久存在于人腸道內(nèi)，并且構(gòu)成腸道孩i生物群落。最近，認識到腸道微生物群落與人的健康有重要關(guān)聯(lián)，并且對腸道微生物群落的關(guān)注也在增加。人腸道微生物群落的構(gòu)成多數(shù)是穩(wěn)定的，只要環(huán)境和飲食內(nèi)容穩(wěn)定并且宿主健康狀況良好。然而腸道微生物群落的生態(tài)系統(tǒng)取決于多種因素而變化，這些因素包括宿主年齡、疾病、微生物感染、壓力、營養(yǎng)組分和藥物給予。有時，形成異常的腸道微生物群落，從而對宿主健康產(chǎn)生有害影響。在構(gòu)成腸道微生物群落的細菌中，雙歧桿菌是例如構(gòu)成人腸道微生物群落的主要種類，并且已知雙歧桿菌在人和動物中發(fā)揮著各種有益的生物學(xué)作用，包括腸道腐敗細菌或病原菌的生長抑制。因此，雙歧桿菌稱為腸道微生物群落中的"有益菌"。由于雙歧桿菌的數(shù)量因各種疾病或隨年齡等而降低或消失，因此進行了各種嘗試來增加腸道雙歧桿菌以改善腸道微生物群落。隨著此類嘗試，公開了各種食品或藥物或雙歧桿菌增殖因子等。公開了具有此目的的食品或藥物，例如，含有雙歧桿菌的酸乳酪(yogurt)(曰本特許爿^開專利申請No.2002-112703)、雙歧桿菌粉末(日本特許公開專利申請No.2006-280263)。此外，至于雙歧桿菌增殖因子，公開了使用可可豆的有機溶劑提取殘余物的那些(日本特許公開專利申請No.8-196268)、使用干馬鈴薯的那些(日本特許公開專利申請No.6-217733)、使用小?？Х戎参锶~片提取物的那些(日本特許公開專利申請No.6-125771)、使用雙歧桿菌增殖性寡糖的那些(日本特許公開專利申請No.3-262460)、使用自月光花果實提取的漿狀物質(zhì)的那些(日本特許公開專利申請NO.2-135088)以及使用來自五加科的溶劑提取物的那些(日本特許公開專利申請No.2-249482)。為了維持好的腸道微生物群落，已經(jīng)嘗試通過攝取含有雙歧桿菌或益生劑的食品形式的乳酸菌來改善腸道微生物群落。然而，含有雙歧桿菌或益生劑的z^品存在一個問題，即難以通過4又才聶取雙歧桿菌而在腸道內(nèi)維持有效數(shù)量的活細胞，因為雙歧桿菌不能抵抗各種環(huán)境應(yīng)激，如酸、溫度、pH、鹽濃度、水活性或膽汁酸。此外，由于仍存在關(guān)于待用菌^f朱、活細胞計數(shù)、腸道穩(wěn)定性、或腸道內(nèi)存活和固定能力的問題，因此預(yù)期的效果在產(chǎn)品如含有常規(guī)已開發(fā)的雙歧桿菌或益生劑的食品中并不總能達到。另外，為了維持良好的腸道微生物群落，還建議了一種攝取雙歧桿菌增殖因子的方法。然而，盡管在實驗室水平上認識了雙歧桿菌增殖因子的某些效果，但是在許多情況下，某些效果當施用于人時不能獲得。這是因為實驗室水平的條件和人腸道內(nèi)以及外界的微生物條件是不同的，并且還因為環(huán)境條件具有復(fù)雜的影響。另一方面，在雙歧桿菌增殖因子中，來自天然產(chǎn)物的提取物具有缺點，如生產(chǎn)方法的復(fù)雜性、或其高成本。此外，雙歧桿菌增殖因子如寡糖是小分子，并且由于水含量增加增強腸道內(nèi)容物的滲透壓，因此一些具有副作用，如腹瑪，這是個問題。因此從腸道微生物群落的實際改善來看，攝取雙歧桿菌增殖因子的方法并不令人滿意。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>(糞便樣品的處理)收集糞便并用AneropackKenki在厭氧條件下冷藏，通過在24小時內(nèi)培養(yǎng)的方法進行微生物群落分析。此外，將糞便儲存在-20。C下并通過分子生物學(xué)方法如實時PCR方法進行微生物群落分析。在本實施例中，培養(yǎng)方法根據(jù)Mitsuoka等人的方法進行。具體來說，將糞便勻漿，懸浮在補充有0.09%瓊脂的鹽溶液中，逐漸稀釋并施加至平面培養(yǎng)基上，測量各個細菌計數(shù)。檢測的目標細菌包括總厭氧菌、總需氧菌、雙歧桿菌和乳桿菌。EG瓊脂培養(yǎng)基和BL瓊脂培養(yǎng)基用于總厭氧菌，TS瓊脂培養(yǎng)基用于總需氧菌，BL瓊脂培養(yǎng)基和TOS丙酸鹽瓊脂培養(yǎng)基用于雙歧桿菌，而LBS瓊脂培養(yǎng)基用于乳桿菌?？偧毦嫈?shù)設(shè)定為總厭氧菌計數(shù)和總需氧菌計數(shù)的總和。雙歧桿菌的份額設(shè)定為雙歧桿菌占培養(yǎng)方法中總細菌計數(shù)的比率。(DNA提取)在本實施例中，DNA提取如下進行用提取緩沖液(100mMTris、50mMEDTA,pH9.0)洗滌2ml懸浮的糞便樣品三次，回收上清液制備小丸狀物(pellet)。此外，收獲用于實時PCR的標準樣品以提取DNA，計數(shù)細胞，然后用顯微鏡計數(shù)在GAM培養(yǎng)基(Nissui)中培養(yǎng)的長雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)JCM1217菌抹、在M.R.S.培養(yǎng)基(Oxoid)中培養(yǎng)的格氏乳桿菌(Lactobacillusgaseri)JCM1131和副干酪乳桿菌3110菌林。使用用于土壤的FastDNASPIN試劑盒(Qbiogene)根據(jù)說明書手冊進行DNA提取。(實時PCR)實時PCR全都使用LightCycler(Roche)進行。將5jiL模板DNA溶液加入15|iLMasterMix(Takara，SYBRPremixExTaq(PerfectRealTime)lxMasterMix,每種引物0.2jiM，O.l嗎/(iLBSA)中以制備20jiLPCR反應(yīng)溶液。用于4全測樣品中各種腸道細菌的引物參考和具體DNA序列如下。此外，為繪制定量所需的標準曲線，使用如上所述的系列稀釋的標準樣品DNA溶液。雙歧桿菌的測定通過參考AppliedandEnvironmentalMicrobiology,68:5445-5451，使用g-Bifid陽F:5陽CTCCTGGAAACGGGTG陽3;g-Bifld-R;5-GGTGTTCTTCCCGATATCTACA-3進行。乳桿菌的測定通過參考JournalofMicrobiologicalMethods,51:313-321，使用LactoF:5畫TGGAAACAGRTGCTAATACCG-3;LactoR:5-CCATTGTGGAAGATTCCC-3進行。副干酪乳桿菌的測定參考LettersinAppliedMicrobiology,29:90-92,使用PARA:5畫CACCGAGATTCAACATGG-3;Y2:5-CCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGT-3進行。PCR反應(yīng)條件如下在94。C下預(yù)孵育10秒后，在根據(jù)各個引物的溶解/退火/延伸條件下進行40個循環(huán)，并且在延伸反應(yīng)之后測量SYBR綠色熒光。各循環(huán)的溫度條件為對于雙歧桿菌的測定，95。C下15秒，55°C下10秒，72。C下25秒；對于乳桿菌的測定，95。C下15秒，60。C下20秒，72。C下20秒；對于副干酪乳桿菌的測定，95。C下15秒，45。C下10秒，72'C下25秒。通過進行溶解曲線分析確定PCR產(chǎn)物的特異性。溶解曲線分析條件如下在PCR擴增反應(yīng)之后，將反應(yīng)溶液在95。C下孵育0秒，在50。C的溫度下保持10秒鐘之后，隨著以0.2。C/秒的速率將溫度升至95°C，連續(xù)測量SYBR綠色熒光。定量分析和溶解曲線分析均用LightCycler軟件5.32版進行。觀察日期為第-1天、第0天、第1天、第3天、第5天、第13天和第18天。將在這些觀察日中糞便樣品缺失小的6個實驗受試者作為受試者。將腸道微生物群落的細菌計數(shù)設(shè)定為1g糞便濕重中的數(shù)目。(副干酪乳桿菌的檢測)通過混合培養(yǎng)方法和菌落PCR方法(RAPD-PCR方法)；險測來自糞便的副千酪乳桿菌。換言之，通過菌落形態(tài)從在培養(yǎng)法的LBS瓊脂培養(yǎng)基中生長的乳桿菌菌落回收基因，并通過用副干酪乳桿菌特異性引物的RAPD-PCR法檢測。估計引物序列為PARA:5-CACCGAGATTCAACATGG-3;Y2:5-CCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGT-S。在1.0%瓊脂糖凝膠中對擴增的產(chǎn)物進行電泳并分析。(問巻和統(tǒng)計學(xué)分析)以問巻形式每天記錄實驗受試者的糞便狀況，包括排便頻率和糞便大小，限制食品或藥物的攝入狀況、膳食時間或身體狀況。糞便大小與2cm(直徑)x5cm的模型比較。加入各階段的數(shù)據(jù)?？偧毦嫈?shù)、總厭氧菌、總需氧菌、雙歧桿菌、乳桿菌、副干酪乳桿菌、排便頻率、排便量的比較"f吏用相應(yīng)的Wilcoxon符號秩和^^全(Wilcoxonsignedranksumtest)進4亍。來自糞便的副干酪乳桿菌檢測率用x2檢驗比較。認為P<0.05具有顯著性差異。使用SPSS11.0J作為統(tǒng)計軟件。(實驗結(jié)果)根據(jù)培養(yǎng)方法和菌落PCR方法(下文稱為培養(yǎng)方法)的副干酪乳桿菌檢測結(jié)果和通過實時PCR方法的副干酪乳桿菌檢測結(jié)果顯示在表2中。[表2]來自糞便的副干酪乳桿菌的檢測<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>LoglO(平均值土S.D.)副千愁乳軒菌檢測的數(shù)目/糞便樣品的數(shù)S到干^扎軒菌檢測率與第-1天相比具有顯著差異^<0.05>與第13天相比具有顯著差異(pO.Q5)根據(jù)培養(yǎng)方法，在9個實驗受試者中有8個在第-l天未檢測到副干酪乳桿菌，而在100g-攝入階段期間檢測到10③-"、fb/g的量。在剩下的一個實驗受試者中，在第-l天，檢測到副干酪乳桿菌的量為1026Qcfo/g,并且在第1天為107G8cfij/g。在所有9個實驗受試者中，在第1天檢測到的副干酪乳桿菌的量為10165cfu/g，并且整個100g-攝入階段為10696-7-36cfu/g。在9個實驗受試者中有8個在第13天未檢測到副干酪乳桿菌，并且在整個10g-攝入階段檢測到的量為1047Q-7'Q1cfU/g。在第-1天檢測到副干酪乳桿菌的相同實驗受試者在第13天檢測到的量為103Q8cfu/g,并且在整個10g-攝入階段為io4()"625cfu/g。在所有9個實驗受試者中，在第13天檢測到的副干酪乳桿菌的量為102.12cfu/g,并且在整個10g-攝入階段的量為104'66—696CfU/g。根據(jù)實時PCR方法，在包括其中用培養(yǎng)方法在第-1天檢測到副干酪乳桿菌的1個受試者在內(nèi)的6個實驗受試者的任何一個中，在攝入前階段的第-l天，沒有檢測到副干酪乳桿菌。在所有6個實驗受試者中，在整個100g-攝入階段檢測到量為10879—""個細胞/g的副干酪乳桿菌。在3個實驗受試者中，在第13天沒有檢測到副干酪乳桿菌，并且在第18天檢測到1()8"個細胞/g的副干酪乳桿菌。在其他3個受試者中，在第13天檢測到105()7個細胞/§的副干酪乳桿菌，并且在第18天檢測到10817個細胞~的副干酪乳桿菌。在所有6個實驗受試者中，在第13天檢測到10477個細胞/g的副干酪乳桿菌，并且在第18天檢測到1()8"個細胞/g的副干酪乳桿菌。由于在攝取了含有大量KW311菌抹的KW酸乳酪的100g-攝入階段后檢測到了極高的副干酪乳桿菌細胞計數(shù)，因此認為在100g-攝入階段、10g-攝入階段和休眠期用實時PCR方法;險測到的副干酪乳桿菌為副干酪乳桿菌KW3110。從這點考慮，在100g-攝入階段、10g-攝入階段和休眠期用實時PCR檢測到的副干酪乳桿菌被稱為副干酪乳桿菌KW3110。同時，通過培養(yǎng)方法和通過實時PCR方法測量^r測到的副干酪乳桿菌KW3110細胞計數(shù)有約102個細胞&的差異，并且檢測率也不同。估計其原因可能主要是三個可能性。第一個，培養(yǎng)方法中所選的培養(yǎng)基的所選壓力；第二個，培養(yǎng)方法中，顯性菌和隱性菌(recessivebacteria)檢測靈敏性不同；第三個是實時PCR方法中檢測到有死細菌。腸道微生物群落每天的變化結(jié)果顯示在表3中。腸道群落的改變<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>aLoglO(平均值士S.D.))'與第-l天相比具有顯著差異(p0.05)"與第13天相比具有顯著差異0<0.05>在培養(yǎng)方法中，在100g-攝入階段第0天、第3天、第4天和第5天與第-1天相比乳桿菌顯著增加。類似地，第3天和第5天與第-1天相比雙歧桿菌增加。在10g-攝入階段，第17天和第18天與第13天相比乳一干菌顯著增加，并且雙歧桿菌的平均水平以與100g々聶入階段相同的方式增加。在實時PCR方法中，乳桿菌在第0天至第5天與第-1天相比顯示了增加的趨勢，盡管并沒有顯著差異。這與第13天和第18天類似。對于雙歧桿菌，在第0天、第1天、第3天、第5天與第-l天相比沒有顯著差異，然而平均水平增加了。這與第13天和第18天類似。問巻結(jié)果顯示在圖2中。在100g-攝入階段，排便頻率(圖2-a)和糞便量(圖2-b)的平均水平與攝入前階段、休眠期和10g-攝入階段相比較高，然而并沒有顯著差異。本發(fā)明的實施方式2(實驗設(shè)計)實驗受試者為10位健康的日本成年女性，她們有便秘的趨勢。實驗受試者的背景如下年齡22.90±3.57(平均值土標準差)，BMI20.55±2.75(平均值±標準差)。實驗受試者在實驗開始和結(jié)束時與醫(yī)生有會見。本實驗的進度示于圖3中。實驗期為21天，將第-7天至第-l天設(shè)為"攝入前階段"，在此階段期間，不攝取KW酸乳酪；第0天至第13天設(shè)為"攝入階段"，在此階段期間每天攝取的KW酸乳酪量為100g。在這個階段中，第0天至第6天設(shè)定為"第一周，，，并且第7天至第13天設(shè)定為"第二周"。在實驗階段，影響腸道微生物群落的食品包括除KW酸乳酪之外的酸乳酪、乳酸菌飲料、寡糖、膳食纖維、發(fā)酵大豆(納豆)和影響腸道的藥物等的攝入受到限制。收集三次糞便樣品，一次在攝入前階段的第-3天至第-l天，一次為攝入階段第一周的第4天至第6天之間，一次在攝入階段第二周的第ll天至第13天之間。(糞便樣品的處理)收集糞便并用AneropackKenki在厭氧條件下冷藏，通過在24小時內(nèi)培養(yǎng)的方法進行微生物群落分析。此外，將糞便儲存在-2(TC下并通過分子生物學(xué)方法如實時PCR方法進行微生物群落分析。在本實施例中，培養(yǎng)方法根據(jù)Mitsuoka等人的方法與實施例1類似地進行。檢測的目標細菌包括總厭氧菌、總需氧菌、雙歧桿菌和乳桿菌。EG瓊脂培養(yǎng)基和BL瓊脂培養(yǎng)基用于總厭氧菌，TS瓊脂培養(yǎng)基用于總需氧菌，BL瓊脂培養(yǎng)基和TOS丙酸鹽瓊脂培養(yǎng)基用于雙歧桿菌，而LBS瓊脂培養(yǎng)基用于乳桿菌?？偧毦嫈?shù)設(shè)定為總厭氧菌計數(shù)和總需氧菌計數(shù)的總和。在本實施例中，實時PCR按照實施例1的實時PCR相同的條件進行。將所有收集到的糞便樣品作為目標。腸道微生物群落的細菌計數(shù)設(shè)定為1g糞便濕重中的數(shù)目。(副干酪乳桿菌的檢測)通過與實施例1類似地將培養(yǎng)方法和菌落PCR方法(RAPD-PCR方法)相組合來檢測來自糞便的副干酪乳桿菌。在1%瓊脂糖凝膠中對擴增的產(chǎn)物進行電泳并分析。(問巻和統(tǒng)計學(xué)分析)以問巻形式每天記錄實驗受試者的糞便狀況，包括排便頻率、糞便大小、排便感覺、糞便顏色、糞便形狀；限制食品或藥物的攝入狀況；膳食時間或身體狀況。糞便大小與2cm(直徑)x5cm的模型比較。排便感以4個水平進行評分。糞便顏色和糞便形狀與樣品片比較。糞便顏色根據(jù)JIS顏色標準-相片版本(JISColorsStandard-GlossyEdition)以下面6個級別評分5Y8/12(黃色)、2.5Y7/12(淺褐色)、10YR5/8(褐色)、7.5YR4/6(棕色)、5Y4/4(深棕色)、和2.5GY4/3(深棕色與黑色的過渡色)。糞便形狀以下面6個水平評分極堅硬；堅硬；香蕉狀；不成形糞便；泥狀糞便；水狀糞便。對于排便頻率和糞便大小，計算攝入前階段和攝入階段每周的總和。對于排便感覺、糞便顏色和糞便形狀，分別對攝入前階段和攝入階段各周的評分進行平均。各階段總細菌計數(shù)、總厭氧菌、總需氧菌、雙歧桿菌、乳桿菌、梭狀芽孢桿菌(Clostridium)、副干酪乳桿菌、排便頻率、糞便大小、排便感覺、糞便顏色和糞便形狀的比較使用相應(yīng)的Wilcoxon符號秩和檢驗進行。來自糞便的副干酪乳桿菌檢測率用x"檢驗比較。認為P<0.05具有顯著差異。使用SPSS11.0J作為統(tǒng)計軟件。(實驗結(jié)果)通過培養(yǎng)方法和菌落PCR方法(下文稱為培養(yǎng)方法)的副干酪乳桿菌檢測結(jié)果和通過實時PCR方法的副干酪乳桿菌4企測結(jié)果顯示在表4中。[表4]來自糞便的副干酪乳桿菌(菌株KW3110)的檢測攝入前階段攝入階段第一周攝入階段第二周培養(yǎng)方法細胞計數(shù)(cfu/g)n.d.a7.96±0.40"7.92±0.40'檢測率0/10c(0%)d5/10(50%)*10/10(100%)'實時PCR方法細胞計數(shù)(細胞/g)檢測率5.57±0.253/10(30%)9.39±0.26410/10(100%)*9.36±9.36'10/10(100%)*未4企測到LoglO(平均值土S.D.)副干酪乳桿菌菌抹KW31IO檢測的數(shù)目/糞便樣品的數(shù)目副干酪乳桿菌菌抹KW3110檢測率與攝入前階段相比具有顯著差異(p0.05)根據(jù)培養(yǎng)方法，在攝入前階段期間沒有檢測到副干酪乳桿菌，而在攝入階段第一周檢測到的量為10796cfu/g,攝入階段第二周為10792cfb/g。攝入階段第一周和攝入階段第二周與攝入前階段相比有顯著差異。根據(jù)實時PCR方法，在攝入前階段期間檢測到量為10557個細胞&的副干酪乳桿菌細胞計數(shù)，攝入階段第一周為10939個細胞&,而在攝入階段第二周為10936個細胞/g。攝入階段第一周和攝入階段第二周與攝入前階段相比有顯著差異。同時，攝入前階段期間在3個實驗受試者中檢測到副干酪乳桿菌。這三個實驗受試者的平均副干酪乳桿菌細胞計數(shù)在攝入前階段為105'57個細胞/g,在攝入階段第一周為10948個細胞/&而在攝入階段第二周為10948個細胞/g。剩余7個實驗受試者的平均副干酪乳桿菌細胞計數(shù)在攝入階段第一周為10934個細胞~，而在攝入階段第二周為10"G個細胞/g。作為所有實驗受試者的平均值，攝入階段第一周和攝入階段第二周期間的副干酪乳桿菌計數(shù)是攝入前階段的6000倍或更高。因此，根據(jù)培養(yǎng)方法和實時PCR方法，在攝入階段第一周和攝入階段第二周期間檢測到了比攝入前階段顯著高數(shù)量的副干酪乳桿菌。因此，估計檢測到了被口服攝取了的大量包含在KW酸乳酪中的副干酪乳桿菌KW3110。因此，在攝入階段第一周和攝入階段第二周期間檢測到的副干酪乳桿菌被稱為副干酪乳桿菌KW3110。根據(jù)培養(yǎng)方法，在攝入階段第一周期間的副干酪乳桿菌KW3110的檢測率為50%，而在攝入階段第二周期間的為100%。另一方面，認為在攝入前階段檢測率為0%。攝入階段第一周和攝入階段第二周與攝入前階段相比有顯著差異。根據(jù)實時PCR方法，在攝入階段第一周期間的副干酪乳桿菌KW3110檢測率為100%,并且在攝入階段第二周期間的為100%。腸道微生物群落每天變化的結(jié)果顯示在表5中。<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>卞攝入前階段排便頻率小于4次的受試者*與攝入前階段相比具有顯著差異(p0.05)工業(yè)適用性本發(fā)明提供用于改善腸道微生物群落的組合物，該組合物顯示優(yōu)異的腸道調(diào)節(jié)作用、腸道環(huán)境改善作用、以及腸道微生物群落改善作用。通過攝取本發(fā)明的用于改善腸道微生物群落的組合物，腸道微生物群落的有益菌乳酸菌如雙歧桿菌增殖，這使得能夠以實際方式改善腸道微生物群落并維持好的微生物群落。特別地，其能夠使乳酸菌在其中有益腸道微生物群落如雙歧桿菌減少或消失的人腸道內(nèi)增殖，以改善為健康的腸道微生物群落。權(quán)利要求1.一種用于改善腸道微生物群落的組合物，所述組合物包含作為活性成分的副干酪乳桿菌(Lactobacillusparacasei)KW3110或其變體。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于改善腸道微生物群落的組合物，其中腸道微生物群落的改善是有益菌的增殖。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于改善腸道微生物群落的組合物，其中所述有益菌的增殖是雙歧桿菌(Bifidobacterium)的增殖。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于改善腸道微生物群落的組合物，其中所述腸道微生物群落的改善是基于腸道微生物群落總細胞計數(shù)的雙歧桿菌4分額的增加。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于改善腸道微生物群落的組合物，其包含作為活性成分與益生菌和/或益生元共存的副干酪乳桿菌KW3110或其變體。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于改善腸道微生物群落的組合物，其中與副干酪乳桿菌KW3110或其變體共存的益生菌是一種或多種選自乳桿菌屬、乳球菌屬、鏈球菌屬、足球菌屬和嗜檸檬酸明串球菌屬的乳酸菌。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于改善腸道微生物群落的組合物，其中與副干酪乳桿菌KW3110或其變體共存的益生元是一種或多種選自寡糖、膳食纖維和酵母壁細胞的益生元。8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的用于改善腸道微生物群落的組合物，其中所述用于改善腸道微生物群落的組合物以食品或飲料的形式制備。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用于改善腸道微生物群落的組合物，其中所述食品或飲料為酸乳酪。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用于改善腸道微生物群落的組合物，其中所述食品或飲料以片劑、顆粒劑、粉劑、膠嚢劑或可飲用制劑的形式制備。11.根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項所述的用于改善腸道微生物群落的組合物，其中在用于改善腸道微生物群落的包含作為活性成分的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的組合物中，乳酸菌的含量調(diào)節(jié)為每天所要攝取的用于改善腸道微生物群落的組合物的量中含4xl(f或更多。12.副干酪乳桿菌KW3110或其變體用于制備用于改善腸道微生物群落的組合物的用途。13.副干酪乳桿菌KW3110或其變體用于制備用于有益菌增殖的組合物的用途。14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的用途，其中所述有益菌的增殖為雙歧桿菌的增殖。15.根據(jù)權(quán)利要求13所述的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的用途，其中所述有益菌的增殖是基于腸道微生物群落總細胞計數(shù)的雙歧桿菌份額的增加。16.根據(jù)權(quán)利要求13所述的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的用途，包含作為活性成分的與益生菌和/或益生元共存的副干酪乳桿菌KW3110或其變體。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的用途，其中所述與副干酪乳桿菌KW3110或其變體共存的益生菌是一種或多種選自乳桿菌屬、乳球菌屬、鏈球菌屬、足球菌屬和嗜檸檬酸明串球菌屬的乳酸菌。18.根據(jù)權(quán)利要求16所述的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的用途，其中所述與副干酪乳桿菌KW3110或其變體共存的益生元為一種或多種選自寡糖、膳食纖維和酵母壁細胞的益生元。19.根據(jù)權(quán)利要求13至18中任一項所述的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的用途，其中所述用于益生菌增殖的組合物以食品或飲料的形式制備。20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的用途，其中所述食品或飲料為酸乳酪。21.才艮據(jù)權(quán)利要求19所述的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的用途，其中所述食品或飲料以片劑、顆粒劑、粉劑、膠嚢劑或可飲用制劑的形式制備。22.才艮據(jù)權(quán)利要求13至21中任一項所述的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的用途，其中在用于益生菌增殖的包含作為活性成分的副干酪乳桿菌KW3110或其變體的組合物中，乳酸菌的含量調(diào)節(jié)為每天所要攝取的用于有益菌增殖的組合物的量中含4x109或更多。全文摘要本發(fā)明提供用于改善腸道微生物群落的組合物以用于維持良好的腸道微生物群落。本發(fā)明包括用于改善腸道微生物群落的組合物，其特征在于所述組合物包含作為活性成分的副干酪乳桿菌(L.paracasei)KW3110或其變體。所述組合物顯示優(yōu)異的腸道調(diào)節(jié)作用、腸道環(huán)境改善作用和腸道微生物群落改善作用，使得被攝取時能夠在人腸道內(nèi)形成健康的微生物群落。特別地，本發(fā)明的用于改善腸道微生物群落的組合物激活腸道微生物群落中的有益菌乳酸菌，如雙歧桿菌(Bifidobacterium)，并且能夠?qū)嵸|(zhì)上改善腸道微生物群落并維持良好的腸道微生物群落。在本發(fā)明中，尤其優(yōu)選的是所述組合物是其中副干酪乳桿菌KW3110或其突變體與益生菌和/或益生元組合的組合物。文檔編號A61K35/74GK101626774SQ20088000756公開日2010年1月13日申請日期2008年3月14日優(yōu)先權(quán)日2007年3月16日發(fā)明者藤井敏雄,西田聰申請人:麒麟控股株式會社