專利名稱：：多發(fā)性硬化癥治療劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種新型的多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑。
背景技術(shù)：
：多發(fā)性硬化癥是一種表現(xiàn)為因腦和脊髓的脫髓引起的中樞性功能不全，引起視覺障礙、運(yùn)動障礙等的疾病，是一種被日本厚生勞動省指定為特殊疾病的原因不明的疑難疾病。在歐美，在困擾年輕成年人的神經(jīng)疾病中發(fā)病率最高，每10萬人中有50人左右。在日本的發(fā)病率估計(jì)每10萬人中有89人左右，推測大約有1萬2000個(gè)患者。多發(fā)性硬化癥發(fā)病時(shí)，多數(shù)情況下，癥狀是反復(fù)緩解和復(fù)發(fā)(復(fù)發(fā)緩解型)。多發(fā)性硬化癥尤其多發(fā)于30歲前后，隨著年齡增加復(fù)發(fā)減少，但是一部分患者的病狀急劇發(fā)展(慢性進(jìn)行型)。在患者的病變部位可以確認(rèn)T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的浸潤，這些細(xì)胞被認(rèn)為在中樞神經(jīng)內(nèi)破壞髓磷脂蛋白、破壞髓鞘，其結(jié)果引起神經(jīng)障礙(非專利文獻(xiàn)1)。脫髓斑在整個(gè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)分布廣泛，高發(fā)部位為視神經(jīng)、腦干、脊髓、小腦等。病狀基于神經(jīng)障礙引起的部位而不同，表現(xiàn)為四肢麻痹、震顫、疲勞、視神經(jīng)障礙、排尿排便障礙等各種癥狀。發(fā)病的詳細(xì)機(jī)制等有很多不明之處，但由于免疫抑制劑顯示效果，可以認(rèn)為不是自身免疫疾病的一種(非專利文獻(xiàn)2)。另外，也有報(bào)道稱，在多發(fā)性硬化癥的發(fā)病中，與伴隨病毒、細(xì)菌的感染的免疫系統(tǒng)的活化相關(guān)(非專利文獻(xiàn)3)。實(shí)際上，在多發(fā)性硬化癥的病變部位，可以發(fā)現(xiàn)特征性的T細(xì)胞、單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的浸潤，暗示這些細(xì)胞產(chǎn)生的Thl型細(xì)胞因子(干擾素Y等)與病狀相關(guān)聯(lián)(非專利文獻(xiàn)4)。由此，考慮通過抑制這些細(xì)胞向病變部位的浸潤，能夠期待取得對多發(fā)性硬化癥的治療效果。作為目前的治療方法，在發(fā)病期使用類固醇劑，在緩解期使用干擾素P(IFNP)帝lj劑、格拉默(glatiramer)制劑。IFNP制劑作用于T細(xì)胞并調(diào)節(jié)干擾素Y的產(chǎn)生量，并且通過使抗原提呈細(xì)胞的抗原提呈降低(非專利文獻(xiàn)5)而抑制免疫應(yīng)答的增強(qiáng)，與多發(fā)性硬化癥的癥狀的延緩發(fā)展以及復(fù)發(fā)頻率的減少相關(guān)。但是，即使將這些藥劑進(jìn)行給藥，平均每年也有0.8次左右的復(fù)發(fā)發(fā)生，現(xiàn)狀是至今仍沒有能夠確實(shí)防止復(fù)發(fā)的方法(非專利文獻(xiàn)6)。另外，這需要頻繁地進(jìn)行皮下給藥，存在發(fā)熱皮下潰瘍等副作用的問題，依從性方面也對患者造成極大的負(fù)擔(dān)，因此，能夠通過口服給藥的藥劑具有極大的意義。另一方面，有報(bào)告稱對于重癥進(jìn)行性的患者，免疫抑制劑環(huán)磷酰胺的脈沖療法是有效的，但是，白血球減少、脫毛等副作用強(qiáng)，要求謹(jǐn)慎給藥。根據(jù)這種狀況，強(qiáng)烈希望開發(fā)一種有效的治療方法。另一方面，作為公知物質(zhì)的2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮，如專利文獻(xiàn)l中的記載，具有優(yōu)異的抑制白介素-ip的產(chǎn)生的作用，適用于風(fēng)濕、關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥、炎癥性腸炎、免疫缺陷綜合癥、敗血癥、肝炎、腎炎、虛血性疾病、胰島素依賴型糖尿病、動脈硬化、帕金森病、阿爾茨海默氏病、白血病等的預(yù)防、治療。但是，至今沒有對多發(fā)性硬化癥的應(yīng)用進(jìn)行過報(bào)道。專利文獻(xiàn)l:國際公開號W099/25697號小冊子非專利文獻(xiàn)1:Noseworthy等；NEnglJMed.343巻13號938-52頁(2000)非專利文獻(xiàn)2:Neuhaus等；TrendsPharmacolSci.24巻3號131-8頁(2003)非專利文獻(xiàn)3:Tejada-Simon等；AnnNeurol.53巻189-97頁(2003)非專利文獻(xiàn)4:Bielekova等；NatMed.6巻1167-75頁(2000)非專利文獻(xiàn)5:Joseph等；JNeuroimmuno1.20巻1號39-44頁(1988)非專利文獻(xiàn)6:TheIFNBMultipleSclerosisStudyGroup;Neurology43巻4號655-61頁(1993)
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種對多發(fā)性硬化癥具有高的有效性、安全性優(yōu)異、能夠口服給藥的多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑。本發(fā)明的發(fā)明者們對以上現(xiàn)狀進(jìn)行深入的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)通過將2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮進(jìn)行給藥，能夠確認(rèn)優(yōu)異的對多發(fā)性硬化癥的癥狀的抑制作用，從而完成本發(fā)明。艮P，本發(fā)明提供如下的技術(shù)方案。1)一種多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑，其將2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基沐基]-2H-噠嗪-3-酮或其溶劑化物作為有效成分。2)—種多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療用醫(yī)藥組合物，其含有2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮或其溶劑化物以及藥學(xué)上可接受的載體。3)—種多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療方法，將有效量的2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-211-噠嗪-3-酮或其溶劑化物進(jìn)行給藥。4)2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮或其溶劑化物在制造多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療藥中的使用。5)2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮或其溶劑化物用于預(yù)防和/或治療多發(fā)性硬化癥。發(fā)明效果本發(fā)明的多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑能夠口服給藥，顯示優(yōu)異的多發(fā)性硬化癥的抑制作用，對多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療有效。圖1是表示對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎得分的變化的藥劑效果的圖。圖2是表示對最大發(fā)病得分的藥劑效果的圖。圖3是表示對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎小鼠脊髓中F4/80的mRNA表達(dá)量的藥劑效果的圖。圖4是表示對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髄炎小鼠脊髓中TNF-ot的mRNA表達(dá)量的藥劑效果的圖。圖5是表示對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎小鼠脊髓中IL-1(3的mRNA表達(dá)量的藥劑效果的圖。圖6是表示對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎小鼠脊髓中IL-6的mRNA表達(dá)量的藥劑效果的圖。具體實(shí)施例方式本發(fā)明的多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑中所使用的2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-211-噠嗪-3-酮是公知物質(zhì)，例如可以利用國際公開第99/25697號公報(bào)記載的方法或其類似方法進(jìn)行制造。另外，2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮能夠在以水合物為代表的溶劑化物的形態(tài)下存在，這些溶劑化物也包含于本發(fā)明中。如后述的實(shí)施例所示，通過將2-節(jié)基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮或其溶劑化物進(jìn)行給藥，在使用作為多發(fā)性硬化癥的動物模型而被廣泛認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)性自我免疫性腦脊髓炎模型小鼠的評價(jià)體系中，暗示對脊髓的巨噬細(xì)胞浸潤的抑制作用，顯示優(yōu)異的多發(fā)性硬化癥的抑制作用。因此，根據(jù)本發(fā)明，能夠進(jìn)行多發(fā)性硬化癥的發(fā)病預(yù)防、復(fù)發(fā)預(yù)防、發(fā)展抑制、治療，并且能夠改善其病況。本發(fā)明的多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑的給藥形態(tài)，沒有特別限定，可以根據(jù)治療目的進(jìn)行適當(dāng)選擇，例如可以列舉片劑、膠囊劑、顆粒劑、薄膜包衣劑、散劑、糖漿劑等口服給藥形態(tài)或注射劑、栓劑、吸入劑、經(jīng)皮吸收劑、滴眼劑、滴鼻劑等非口服給藥形態(tài)。優(yōu)選作成口服給藥制劑。在適合這些給藥形態(tài)的醫(yī)藥制劑中，除了藥學(xué)上可接受的載體，例如淀粉類、乳糖、蔗糖、甘露醇、硅酸等賦形劑以及增量劑；瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、藻酸、復(fù)合硅酸鹽等崩解劑；羥基丙基甲基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、阿拉伯樹膠等結(jié)合劑；滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固形聚乙二醇類、十二烷基硫酸鈉或其混合物等潤滑劑；乳糖、玉米淀粉等稀釋劑；檸檬酸、磷酸、酒石酸、乳酸等有機(jī)酸、鹽酸等無機(jī)酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀等氫氧化堿、三乙醇胺、二乙醇胺、二異丙醇胺等有機(jī)胺類等緩沖劑；對羥基安息香酸酯類、苯扎氯銨等防腐劑;硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、十二垸基硫酸鈉等陰離子性表面活性劑，苯扎氯銨、芐索氯銨、西吡氯銨等陽離子性表面活性劑，單硬脂酸甘油酯、蔗糖脂肪酸酯、聚氧乙烯硬化蓖麻油、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧化乙烯烷基醚等非離子性表面活性劑等的乳化劑；亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、二丁基羥基甲苯、丁基羥基茴香醚、乙二胺四乙酸等穩(wěn)定劑以外，必要時(shí)還可以適當(dāng)?shù)亟M合使用矯味劑、分散劑、保存劑、香料等。本發(fā)明中，2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮或其溶劑化物的給藥量，可以考慮患者的體重、年齡、性別、癥狀等方面適當(dāng)選擇，通常情況下，成人每天給藥2320mg，優(yōu)選4160mg，分1次或數(shù)次進(jìn)行給藥。實(shí)施例以下通過列舉實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行更具體的說明，但是本發(fā)明的技術(shù)范圍不被這些實(shí)施例限定。實(shí)施例1對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎模型小鼠給藥2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮(以下表示為藥劑A)，評價(jià)癥狀。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎模型通過用作為髓鞘的構(gòu)成蛋白的髓磷脂蛋白免疫小鼠，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)通過T細(xì)胞引發(fā)自身免疫性炎癥。在該模型中，發(fā)生T細(xì)胞、單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞向中樞系統(tǒng)的浸潤，可知為顯示與多發(fā)性硬化癥的病狀相似的表現(xiàn)的模型。A材料和方法動物使用7周齡雌性C57BL/6(日本CharlesRiver(株))。關(guān)于使小鼠發(fā)生實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎的致敏用乳液，將MyelinOligodendrocyteGlycoprotein(MOG)35-55(AlexisBiochemical)禾口AdjuvantcompletefreundH37Ra(DIFCO)以MOG濃度為2mg/mL等量添力口，使用HandyMicroHomogenizer((株)MicrotecNition制),在冰浴下均質(zhì)化調(diào)制。將調(diào)制成的乳液O.lmL向小鼠的尾根部進(jìn)行皮內(nèi)給藥，進(jìn)行初次致敏。同日，對尾部靜脈給藥溶解于生理鹽水的Purtussistoxin500ng/0.3mL。初次致敏2天后，同樣進(jìn)行靜脈給藥Purtussistoxin500ng/0.3mL，進(jìn)行追加致敏。從初次致敏的第二天到致敏后42天后，將藥劑A以30mg/kg在早晨(9:00~11:00)和傍晚(15:30-17:30)兩次口服給藥。IFNP(日本Schering)隔天以10000國際單位/個(gè)體進(jìn)行皮下給藥。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎的癥狀根據(jù)以下項(xiàng)目進(jìn)行得分評價(jià)。0沒有癥狀1尾部乏力或者步行異常2尾部乏力并且步行異常3l只的四肢麻痹42只以上的四肢麻痹5死亡B結(jié)果圖1表示得分評價(jià)的變化，表1表示各個(gè)體的發(fā)病時(shí)間的解析，圖2表示各個(gè)體的最大得分的解析結(jié)果。結(jié)果以全部例數(shù)10只的平均值士標(biāo)準(zhǔn)誤差表示。檢定使用非參數(shù)Dunnett試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中，對照組在致敏后16天后發(fā)生死亡例，IFNp給藥組在致敏后12天、37天、40天后發(fā)生死亡例。另一方面，藥劑A給藥組沒有出現(xiàn)死亡例。通過藥劑A的口服給藥，表現(xiàn)與IFNP大約同等的實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎得分的改善(圖1)，另外，出現(xiàn)得分2以上的發(fā)病延遲的傾向(表l)，并且，各個(gè)體的最大實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎得分出現(xiàn)降低的傾向(圖2)。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎發(fā)病開始天數(shù)的解析結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*p<0.05使用Dunnett與對照組相比(VersusControlusingDunnett)實(shí)施例2A材料和方法將實(shí)驗(yàn)例1中使用的小鼠在第42天取出脊髓，使用ISOGEN(NipponGene)精制RNA。作為比較，同樣從沒有致敏的正常小鼠中取出脊髓以供測定。由獲得的RNA使用逆轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA，根據(jù)AppliedBiosystems社的實(shí)驗(yàn)方案，通過使用TaqMan探針的real-timePCR方法對各種基因(F4/80、TNF-a、IL-ip、IL-6)的mRNA量進(jìn)行定量(ABIPRISM7900HT系統(tǒng)；AppliedBiosystems社)。同時(shí)測定核糖體RNA量，用于校正。B結(jié)果實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎模型中，顯示各種基因的mRNA量都比正常小鼠高。相對于此，藥劑A給藥小鼠中，在單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞系細(xì)胞特異性表達(dá)的F4/80的mRNA表達(dá)量降低，暗示脊髓中單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞系細(xì)胞的浸潤受到抑制。另外，也能夠確認(rèn)主要通過這些細(xì)胞產(chǎn)生、顯示與多發(fā)性硬化癥的病狀緊密相關(guān)性的TNF-ot、IL-ip、IL-6等細(xì)胞因子量的表達(dá)受到抑制。另一方面，IFNp給藥小鼠中，IL-ip、IL-6表達(dá)受到抑制，但TNFa的表達(dá)沒有受到抑制。并且，F(xiàn)4/80的mRNA的表達(dá)抑制與藥劑A相比較弱。根據(jù)以上結(jié)果，本發(fā)明的藥劑A或其溶劑化物，對多發(fā)性硬化癥的發(fā)病預(yù)防、復(fù)發(fā)預(yù)防、發(fā)展抑制、治療、病狀改善等有效，作為多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑有效。權(quán)利要求1.一種多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑，其特征在于將2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮或其溶劑化物作為有效成分。2.如權(quán)利要求1所述的多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑，其特征在于其是口服給藥制劑。3.2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮或其溶劑化物在制造多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療藥中的使用。4.如權(quán)利要求3所述的使用，其特征在于-所述預(yù)防和/或治療藥是口服給藥用醫(yī)藥。5.—種多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療方法，其特征在于將有效量的2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基傳基]-2H-噠嗪-3-酮或其溶劑化物進(jìn)行給藥。6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于給藥方式是口服給藥。全文摘要本發(fā)明提供一種對多發(fā)性硬化癥具有高的有效性、安全性優(yōu)異、能夠口服給藥的多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑。該多發(fā)性硬化癥的預(yù)防和/或治療劑將2-芐基-5-(4-氯苯基)-6-[4-(甲硫基)苯基]-2H-噠嗪-3-酮或其溶劑化物作為有效成分。文檔編號A61K31/50GK101600435SQ20088000329公開日2009年12月9日申請日期2008年1月28日優(yōu)先權(quán)日2007年1月29日發(fā)明者天竺桂裕一朗,山火正毅,枝野敏行申請人:興和株式會社