專利名稱：一種同載鉑類化合物及其增效劑的抗癌藥物緩釋注射劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種復(fù)方抗癌藥物緩釋注射劑，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明提供一種含鉑類化合物和其增效劑的復(fù)方抗癌藥物緩釋劑，主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑。
背景技術(shù)：
目前癌癥的治療仍主要包括手術(shù)、放療及化療等方法。其中手術(shù)治療不能清除散在的瘤細胞，因此常復(fù)發(fā)或?qū)е履[瘤細胞因手術(shù)刺激而擴散轉(zhuǎn)移；放療和傳統(tǒng)的化療不具選擇性，難于腫瘤局部形成有效藥物濃度或治療劑量，效果差，毒性大，單純提高藥物或放射劑量又受到全身毒性反應(yīng)的限制。參見孔慶忠等“瘤內(nèi)放置順鉑加系統(tǒng)卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁(1998年)(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2):76-82)。
化療藥物局部放置能夠較好地克服以上缺陷，不僅能夠明顯提高腫瘤局部的藥物濃度，而且可以顯著降低全身毒性反應(yīng)。大量體內(nèi)外試驗已顯示出對實體腫瘤的治療效果，參見孔慶忠等“瘤內(nèi)放置順鉑加系統(tǒng)卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁(1998年)(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2):76-82)和孔慶忠等“瘤內(nèi)放置順鉑治愈大鼠原發(fā)腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》64期268-273頁(1997年)(Kong Q et al.，JSurg Oncol.1997 Oct；64:268-273)。還可參見中國專利(ZL00111093.4；ZL96115937.5；申請?zhí)?01111264、001111272)及美國發(fā)明專利(專利號6,376,525B1；5,651,986；5,626,862)。
然而，實體腫瘤由腫瘤細胞和腫瘤間質(zhì)組成，其中腫瘤間質(zhì)中的血管不僅為腫瘤細胞的生長提供了支架及必不可少的營養(yǎng)物質(zhì)，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內(nèi)的滲透和擴散(參見尼提等“細胞外間質(zhì)的狀況對實體腫瘤內(nèi)藥物運轉(zhuǎn)的影響”《癌癥研究》60期2497-503頁(2000年)(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9):2497-503))。不僅如此，腫瘤間質(zhì)中的血管對常規(guī)化療藥物并不敏感，常導(dǎo)致腫瘤細胞對抗癌藥物的耐受性的增強，其結(jié)果是治療失敗。
除此之外，低劑量的抗癌藥物治療不僅能夠增加癌細胞的藥物耐受性，而且還可促進其浸潤性生長”，參見梁等“抗癌藥物脈沖篩選后增加了人肺癌細胞的藥物耐受性及體外浸潤能力并伴有基因表達的改變”《國際癌癥雜志》111期484-93頁(2004年)(Liang Y，etal.，Int J Cancer.2004；111(4):484-93)。
因此，研制一種有效的抗癌藥物或治療方法便成為當(dāng)前的一項重要課題。本發(fā)明正是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新的抗癌藥物組合物，可有效地抑制腫瘤細胞生長，并能夠增強其它藥物的治療腫瘤效果，減少復(fù)發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種復(fù)方鉑類化合物緩釋劑。具體而言，本發(fā)明提供一種含鉑類化合物和其增效劑的抗癌藥物緩釋劑，主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑。
鉑類化合物作為一種新的抗癌藥物，國外主要用于治療卵巢癌、肺癌等實體腫瘤。然而在應(yīng)用過程中仍表現(xiàn)出明顯的全身毒性，因而極大地限制了該類藥物的應(yīng)用。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，有的抗癌藥物與鉑類化合物合用可使其抗癌作用相互加強，以下將能使鉑類化合物抗癌作用相互增加的藥物稱之為鉑類化合物增效劑，主要為細胞毒藥物；除此之外，將鉑類化合物或鉑類化合物增效劑制成抗癌藥物緩釋劑(主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑)不僅能夠極大地提高腫瘤局部的藥物濃度、降低藥物在循環(huán)系統(tǒng)中的藥物濃度、降低藥物對正常組織的毒性，還能夠極大方便藥物注射、減少手術(shù)操作的并發(fā)癥、降低病人的費用?？拱┧幬锍芤种颇[瘤生長外，還能增加腫瘤細胞對抗癌藥物的敏感性。以上意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要內(nèi)容。
本發(fā)明鉑類化合物緩釋劑的一種形式是緩釋注射劑，由緩釋微球和溶媒組成。具體而言，該抗癌緩釋注射劑由以下成分組成 (A)緩釋微球，包括 抗癌有效成分 0.5-60％ 緩釋輔料 40-99％ 助懸劑0.0-30％ 以上為重量百分比 和 (B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。
其中， 抗癌有效成分為鉑類化合物和其增效劑，鉑類化合物增效劑選自磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制劑、嘧啶類似物和/或DNA修復(fù)酶抑制劑；緩釋輔料粘度范圍IV(dl/g)為0.1～0.8，選自外消旋聚乳酸(D，L-PLA)、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物(D，L-PLGA)、單甲基聚乙二醇/聚乳酸(MPEG-PLA)、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物(MPEG-PLGA)、聚乙二醇/聚乳酸(PLA-PEG-PLA)、聚乙二醇/聚乳酸共聚物(PLGA-PEG-PLGA)、端羧基聚乳酸(PLA-COOH)、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA-COOH)、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)、聚對二氧環(huán)已酮(PDO)、聚三亞甲基碳酸酯(PTMC)、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、蛋白膠之一或其組合；助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
鉑族抗癌藥物主要經(jīng)口服或靜脈注射等常規(guī)途徑給藥，本發(fā)明的給藥方式為局部緩釋給藥，在顯著增強藥物的治療效果的同時明顯降低其全身的毒性作用。已報道的經(jīng)緩釋途徑應(yīng)用的鉑類化合物有順鉑和卡鉑等，然而對現(xiàn)有的幾千個新的鉑族化合物進入篩選后發(fā)現(xiàn)，只有28個化合物進入臨床研究，有4個化合物獲得批準(zhǔn)進入市場，還有2～3個化合物將獲得生產(chǎn)批文。因此，在具有抗癌活性的鉑類化合物中，也并非所有均能在本發(fā)明所述的緩釋輔料中達到有效釋放的緩釋效果。藥用輔料有數(shù)百種以上，具有緩釋作用的藥用輔料，特別是能將本發(fā)明中所選的鉑類化合物在人體或動物體內(nèi)于一定的時間內(nèi)緩慢釋放并非顯而易見，特定的緩釋輔料與可緩釋藥物組合的選擇需要經(jīng)過大量的創(chuàng)造性勞動才能確定。相關(guān)數(shù)據(jù)，特別是動物體內(nèi)釋放特性的數(shù)據(jù)需要經(jīng)過體內(nèi)外大量創(chuàng)造性的實驗才能獲得，并非經(jīng)過有限的實驗就能確定，具有非顯而易見性。
本發(fā)明中所選的鉑類化合物主要選自舒鉑(sunpla)、雙環(huán)鉑(bicycloplatin)、依鉑(eptalatin)、甲啶鉑、西茜鉑(citricplatin)、匹克鉑(picoplatin)。
上述鉑類化合物在組合物中所占的比例因具體情況而定，可為0.1％—50％，以1％—30％為佳，5％—20％為最佳。
上述鉑類化合物在緩釋劑中所占的比例因具體情況而定，可為0.1％—50％，以1％—40％為佳，2％—30％為最佳。
磷酸肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase，簡稱PI3K)抑制劑選自下列之一或組合7-(氫氧基-星狀孢子素(7-hydroxyl-staurosporine，UCN-01)、7-O-烷基-星狀孢子素(UCN-02)、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽堿(alkylphosphocholines)、六癸基磷酸膽堿(hexadecylphosphocholine，MIL、HPC，Miltefosine)、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽(Octadecyl-(1，1-dimethyl-4-piperidylio)phosphate，perifosine，D-21266)、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽堿(AMG-PC，1-O-hexadecyl-2-Omethyl-rac-glycero-3-phosphocholine，ET-16-OCH3)、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽堿(1-O-Octadecyl-2-O-methyl-rac-glycerophosphocholine，ET-18-OCH3，edelfosine)、1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽堿(1-O-octadecyl-2-O-methyl-sn-glycero-3-phosphocholine，ilmofosine，L-ET-18-OCH(3))、肌醇聚磷酸鹽(inositol polyphosphates)、十四(烷)基磷酸膽堿(Tetradecylphosphocholine，TPC)、六葵基磷酸(N-N-N-三甲基)己醇胺(hexadecylphospho(N-N-N-trimethyl)hexanolamine，HPC6)、十八基磷酸膽堿(octadecylphosphocholine，OPC)、十八基-[2-(N-甲基哌啶)乙基]-磷酸鹽(octadecyl-[2-(N-methyl piperidinio)ethyl]-phosphate，D-20133或OMPEP)。
以上磷酸肌醇3-激酶抑制劑中，以7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽堿、六癸基磷酸膽堿、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽堿、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽堿、1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽堿、肌醇聚磷酸鹽、十四(烷)基磷酸膽堿、六葵基磷酸(N-N-N-三甲基)己醇胺、十八基磷酸膽堿或十八基-[2-(N-甲基哌啶)乙基]-磷酸鹽。其中以7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽堿、六癸基磷酸膽堿為優(yōu)選。
嘧啶類似物主要選自O(shè)4-芐基葉酸、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪、2-氨基-O4-芐基喋啶的一種或多種。
DNA修復(fù)酶抑制劑可為任何一種DNA-依賴的蛋白激酶抑制劑和/或聚(ADP-核糖)聚合酶抑制劑，但以咪唑并哌嗪、咪唑并吡啶、渥曼青霉素、苯并吡喃、6-芳香基-2-嗎啡酚-4-基-吡喃-4-基、2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮、7-乙基-10-羥基喜樹堿、3-氰基-6-亞肼基甲基-5-(4-吡啶基)吡啶-[1H]-2-1、苯基丁酸、甲氧胺、羥基胺、肌醇聚磷酸鹽、十四(烷)基磷酸膽堿、六葵基磷酸(N-N-N-三甲基)己醇胺、十八基磷酸膽堿、十八基-[2-(N-甲基哌啶)乙基]-磷酸鹽、氨基三唑(AT)和丁基硫堇硫肟為優(yōu)選。
當(dāng)藥物緩釋微球中的抗癌藥物僅為鉑類化合物或其增效劑時，抗癌緩釋注射劑的應(yīng)用及增效方式為 (1)含鉑類化合物的緩釋注射劑局部注射，鉑類化合物增效劑其他途徑應(yīng)用； (2)局部注射含鉑類化合物增效劑的緩釋注射劑，其他途徑應(yīng)用鉑類化合物； (3)局部注射含鉑類化合物的緩釋注射劑與含鉑類化合物增效劑的緩釋注射劑；或 (4)局部注射含鉑類化合物和增效劑的緩釋注射劑。
局部應(yīng)用的抗癌緩釋注射劑還用于對放療或其它療法的增效。其他途徑指，但不限于，動脈、靜脈、腹腔、皮下、腔內(nèi)給藥。
鉑類化合物增效劑在藥物緩釋微球中的重量百分比為0.5％—60％，以1％—40％為佳，以5％—30％為最佳。鉑類化合物和鉑類化合物增效劑的重量比為1-91到11-9。以1-21為優(yōu)選。
本發(fā)明抗癌緩釋注射劑微球中的抗癌有效成分優(yōu)選如下，均為重量百分比 (1)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑； (2)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽堿或六癸基磷酸膽堿的組合； (3)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的O4-芐基葉酸、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪或2-氨基-O4-芐基喋啶的組合；或 (4)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的咪唑并哌嗪、咪唑并吡啶、渥曼青霉素、苯并吡喃、6-芳香基-2-嗎啡酚-4-基-吡喃-4-基、2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮、7-乙基-10-羥基喜樹堿、3-氰基-6-亞肼基甲基-5-(4-吡啶基)吡啶[1H]-2-1、苯基丁酸、甲氧胺、羥基胺、肌醇聚磷酸鹽、十四(烷)基磷酸膽堿、六葵基磷酸(N-N-N-三甲基)己醇胺、十八基磷酸膽堿、十八基-[2-(N-甲基哌啶)乙基]-磷酸鹽、氨基三唑或丁基硫堇硫肟的組合。
緩釋輔料選自外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、乙烯乙酸乙烯酯共聚物、聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠和蛋白膠之一或其組合。
本發(fā)明緩釋微球中緩釋輔料及其重量百分比最優(yōu)選如下 (1)55-90％的PLA； (2)50-90％的PLGA； (3)50-85％的聚苯丙生； (4)55-90％的雙脂肪酸與癸二酸共聚物； (5)55-90％的EVAc； (6)40-95％的木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或白蛋膠；或 (7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、癸二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、乙醇酸和羥基羧酸的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羥基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羥基羧酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是聚苯丙生[聚(1，3-二(對羧基苯氧基)丙烷癸二酸)(p(CPP-SA))、雙脂肪酸-癸二酸共聚物(PFAD-SA)]、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]和聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]等。對羧苯氧基丙烷(p-CPP)與癸二酸共聚時的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-4050-90，最好是重量比15-3065-85。
聚乳酸的分子量峰值可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以5,000-30,000為最優(yōu)選；聚乙醇酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以5，000-50,000為優(yōu)選，以10,000-30,000為最優(yōu)選；以上聚羥基酸可單選或多選。當(dāng)單選時，以聚乳酸(PLA)或羥基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)為優(yōu)選，共聚物的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以30,000-50,000為最優(yōu)選；當(dāng)多選時，以高分子多聚物或不同高分子多聚物組成的復(fù)合多聚物或共聚物為優(yōu)選，以含不同分子量聚乳酸或癸二酸的復(fù)合多聚物或共聚物為最優(yōu)選，如，但不限于，分子量為1000到30000的聚乳酸與分子量為20000到50000的聚乳酸混合、分子量為10000到30000的聚乳酸與分子量為30000到80000的PLGA混合、分子量為20000到30000的聚乳酸與癸二酸混合、分子量為30000到80000的PLGA與癸二酸混合。所用聚乳酸以左旋聚乳酸(L-PLA)為優(yōu)選。左旋聚乳酸(L-PLA)粘度范圍IV(dl/g)為0.2～0.8，玻璃化轉(zhuǎn)變溫度范圍為55～65℃，熔點175～185℃。
除上述輔料外，還可選用其他物質(zhì)見美國專利(專利號4757128；4857311；4888176；4789724)及《藥用輔料大全》(第123頁，四川科學(xué)技術(shù)出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細描述。另外，中國專利(申請?zhí)?6115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國發(fā)明專利(專利號5,651,986)也列舉了某些藥用輔料，包括充填劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等。
為調(diào)節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調(diào)節(jié)藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖或鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖、(硫酸)軟骨素及甲殼素等，其中鹽可為，但不限于，鉀鹽和鈉鹽等。
緩釋注射劑中，藥物緩釋系統(tǒng)可制成微球、亞微球、微乳、納米球、顆粒或球形小丸，然后與注射溶媒混合后制成注射劑使用。在各種緩釋注射劑中以混懸型緩釋注射劑為優(yōu)選，混懸型緩釋注射劑是將含抗癌成分的藥物緩釋系統(tǒng)懸浮于注射液中所得的制劑，所用的輔料為上述緩釋輔料中的一種或其組合，所用溶媒為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。普通溶媒為，但不限于，蒸餾水、注射用水、生理沖液、無水乙醇或各種鹽配制的緩沖液。助懸劑的目的在于有效懸浮含藥微球，從而利于注射之用。
助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
助懸劑在普通溶媒中的含量因其的特性而定，可為0.1-30％因具體情況而定。優(yōu)選助懸劑的組成為 A)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；或 B)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或。
C)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
溶媒的制備則取決于溶媒的種類，普通溶媒有市售，也可以自制，如蒸餾水、注射用水、生理沖液、無水乙醇或各種鹽配制的緩沖液，但必需嚴(yán)格按照有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。特殊溶媒需考慮到助懸劑的種類及其組成、溶媒所懸浮的藥物、緩釋微球(或微囊)的組成、性質(zhì)及其需要量及注射劑的制備方法，如將羧甲基纖維素鈉(1.5％)+甘露醇和/或山梨醇(15％)和/或土溫80(0.1％)溶于生理鹽水中得相應(yīng)的溶媒，黏度在10cp-650cp(20℃-30℃時)。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)影響藥物和/或緩釋微球懸浮和/或注射的關(guān)鍵因素是溶媒的黏度，黏度越大，懸浮效果越好，可注射性越強。這種意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成了本發(fā)明的主要指數(shù)特征之一。溶媒的黏度取決于助懸劑的黏度，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選1000cp-3000cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選1500cp-3000cp(20℃-30℃時)。按照此條件所制得的溶媒的黏度為10cp-650cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選20cp-650cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選60cp-650cp(20℃-30℃時)。
注射劑的制備有多種方法，一種是將助懸劑為“0”的緩釋微粒(A)直接混于特殊溶媒中，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑；另一種是將助懸劑不為“0”的緩釋微粒(A)混于特殊溶媒或普通溶媒中，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑；再一種是將緩釋微粒(A)混于普通溶媒中，然后加入助懸劑混勻，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑。除外，還可先將緩釋微粒(A)混于特殊溶媒中制得相應(yīng)的混懸液，然后用真空干燥等辦法去除混懸液中的水分，之后再用特殊溶媒或普通溶媒混懸，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑。以上方法只是用于說明而非限制本發(fā)明。值得注意的是，懸浮藥物或緩釋微球(或微囊)在注射劑中的濃度因具體需要而定，可為，但不限于，10-400mg/ml，但以30-300mg/ml為優(yōu)選，以50-200mg/ml最優(yōu)選。注射劑的黏度為50cp-1000cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選100cp-1000cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選200cp-650cp(20℃30℃時)。如此黏度適用于18-22號注射針頭和特制的內(nèi)徑更大的(至3毫米)注射針頭。
緩釋注射劑的制備方法是任意的，可用若干種方法制備如，但不限于，混合法、熔融法、溶解法、噴霧干燥法制備微球、溶解法結(jié)合冷凍(干燥)粉碎法制成微粉、脂質(zhì)體包藥法及乳化法等。其中以溶解法(即溶劑揮發(fā)法)、干燥法、噴霧干燥法和乳化法為優(yōu)選。微球則可用于制備上述各種緩釋注射劑，其方法是任意的。所用微球的粒徑范圍可在5-400um之間，以10-300um之間為優(yōu)選，以20-200um之間為最優(yōu)選。
微球還可用于制備其他緩釋注射劑，如凝膠注射劑、嵌段共聚物膠束注射劑。其中，嵌段共聚物膠束由疏水-親水嵌段共聚物在水溶液中形成，具有球形內(nèi)核-外殼結(jié)構(gòu)，疏水嵌段形成內(nèi)核，親水嵌段形成外殼。載藥膠束注射進入體內(nèi)達到控制藥物釋放或靶向治療的目的。所用藥物載體為上述任意一種或其組合。其中優(yōu)選分子量為1000-15000的聚乙二醇(PEG)作為膠束共聚物的親水嵌段，優(yōu)選生物降解聚合物(如PLA、聚丙交酯、聚己內(nèi)酯及其共聚物(分子量1500-25000))作為膠束共聚物的疏水嵌段。嵌段共聚物膠束的粒徑范圍可在10-300um之間，以20-200um之間的為優(yōu)選。凝膠注射劑系將生物降解聚合物(如PLA、PLGA或DL-LA和ε-己內(nèi)酯共聚物)溶于某些兩親性溶媒，再加入藥物與之混溶(或混懸)后形成流動性較好的凝膠，可經(jīng)瘤周或瘤內(nèi)注射。一旦注入，兩親性溶媒很快擴散至體液，而體液中的水分則滲入凝膠，使聚合物固化，緩慢釋放藥物。
緩釋微球還可用于制備緩釋植入劑，所用的藥用輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，但以水溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、PLA與PLGA的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。聚乳酸(PLA)與聚乙醇酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和乳酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是對羧苯基丙烷(p-CPP)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸共聚時的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-4050-90，最好是重量比15-3065-85。
本發(fā)明抗癌藥物緩釋劑的又一種形式是抗癌藥物緩釋劑為緩釋植入劑。抗癌植入劑的有效成分可均勻地包裝于整個藥用輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過直接擴散和/或經(jīng)多聚物降解的方式將有效成分釋放。
緩釋植入劑的特點在于所用的緩釋輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它輔料。添加的藥用輔料統(tǒng)稱為添加劑。添加劑可根據(jù)其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻滯劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑等。
緩釋植入劑的主要成份可制成多種劑型。如，但不限于，膠囊、緩釋劑、植入劑、緩釋劑植入劑等；呈多種形狀，如，但不限于，顆粒劑、丸劑、片劑、散劑、球形、塊狀、針狀、棒狀、柱狀及膜狀。在各種劑型中，以體內(nèi)緩慢釋放植入劑為優(yōu)選。體積大小取決于病灶的部位、大小等因素。可為0.1-5mm(粗)×1-10mm(長)的棒狀，也可為片狀等其它形狀。
緩釋植入劑的最佳劑型為生物相容性、可降解吸收的緩釋劑植入，可因不同臨床需要而制成各種形狀及各種劑型。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳細描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法如，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，干燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍干燥法等。
緩釋植入劑中的抗癌有效成分及重量百分比優(yōu)選如下 (1)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑； (2)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽堿或六癸基磷酸膽堿的組合； (3)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的O4-芐基葉酸、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪或2-氨基-O4-芐基喋啶的組合；或 (4)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的咪唑并哌嗪、咪唑并吡啶、渥曼青霉素、苯并吡喃、6-芳香基-2-嗎啡酚-4-基-吡喃-4-基、2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮、7-乙基-10-羥基喜樹堿、3-氰基-6-亞肼基甲基-5-(4-吡啶基)吡啶-[1H]-2-1、苯基丁酸、甲氧胺、羥基胺、肌醇聚磷酸鹽、十四(烷)基磷酸膽堿、六葵基磷酸(N-N-N-三甲基)己醇胺、十八基磷酸膽堿、十八基-[2-(N-甲基哌啶)乙基]-磷酸鹽、氨基三唑或丁基硫堇硫肟的組合。
本發(fā)明緩釋植入劑中緩釋輔料及其重量百分比最優(yōu)選如下 (1)55-90％的PLA； (2)50-90％的PLGA； (3)50-85％的聚苯丙生； (4)55-90％的雙脂肪酸與癸二酸共聚物； (5)55-90％的EVAc； (6)40-95％的木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或白蛋白膠；或 (7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
當(dāng)藥物緩釋微球中的抗癌藥物僅為鉑類化合物或其增效劑時，抗癌緩釋植入劑的應(yīng)用及增效方式同緩釋注射劑。
給藥途徑取決于多種因素，為于原發(fā)或轉(zhuǎn)移腫瘤所在部位獲得有效濃度，藥物可經(jīng)多種途徑給予，如皮下、腔內(nèi)(如腹腔、胸腔及椎管內(nèi))、瘤內(nèi)、瘤周注射或放置、選擇性動脈注射、淋巴結(jié)內(nèi)及骨髓內(nèi)注射。以選擇性動脈注射、腔內(nèi)、瘤內(nèi)、瘤周注射或放置為優(yōu)選。
本發(fā)明可以用于制備治療人及動物的各種腫瘤的藥物制劑，主要為緩釋注射劑或緩釋植入劑，所指腫瘤包括起源于大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內(nèi)膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結(jié)腸、直腸的原發(fā)或轉(zhuǎn)移的癌或肉瘤或癌肉瘤。
本發(fā)明所制的緩釋注射劑或緩釋植入劑中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。
通過如下試驗和實施例對本發(fā)明的技術(shù)方法作進一步的描述 試驗1、不同方式應(yīng)用鉑類化合物(依鉑)后的局部藥物濃度比較 以大白鼠為試驗對象，將2×105個前列腺腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長至1厘米直徑后將其分組。每組劑量均為5mg/kg依鉑。測定不同時間腫瘤內(nèi)藥物含量(％)，結(jié)果表明，依鉑經(jīng)不同方式應(yīng)用后的局部藥物濃度差異顯著，局部給藥能夠明顯提高并有效維持腫瘤所在部位的有效藥物濃度，其中以瘤內(nèi)放置緩釋植入劑和瘤內(nèi)注射緩釋注射劑的效果最好。然而，瘤內(nèi)注射緩釋注射劑操作最方便、容易。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的重要特征。以下的相關(guān)抑瘤試驗進一步證實了這一點。
試驗2、不同方式應(yīng)用鉑類化合物(雙環(huán)鉑)后的體內(nèi)抑瘤作用比較 以大白鼠為試驗對象，將2×105個前列腺腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長至0.5厘米直徑后將其分組。每組劑量均為5mg/kg雙環(huán)鉑。治療后第10天測量腫瘤體積大小，比較治療效果。結(jié)果表明，雙環(huán)鉑經(jīng)不同方式應(yīng)用后的抑瘤作用差異顯著，局部給藥能夠明顯提高并有效維持腫瘤所在部位的有效藥物濃度，其中以瘤內(nèi)放置緩釋植入劑和瘤內(nèi)注射緩釋注射劑的效果最好。然而，瘤內(nèi)注射緩釋注射劑操作最方便、容易。不僅療效好，毒副作用也小。
試驗3、含鉑類化合物和鉑類化合物增效劑(緩釋注射劑)的體內(nèi)抑瘤作用 以大白鼠為試驗對象，將2×105個胰腺腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表1)。第一組為對照，第2到10組為治療組，藥物均經(jīng)瘤內(nèi)注射。劑量均為5mg/kg。治療后第10天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表1)。
表1 以上結(jié)果表明，鉑類化合物(舒鉑)及所用鉑類化合物增效劑-磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制劑(其中UCN-017-氫氧基-星狀孢子素；UCN-027-O-烷基-星狀孢子素；MILMiltefosine；D-21266十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽或perifosine)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗4、鉑類化合物和鉑類化合物增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用 所用的腫瘤細胞包括CNS-1、C6、9L、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)、肝癌等。將鉑類化合物和鉑類化合物增效劑按10ug/ml濃度加到體外培養(yǎng)24小時的各種腫瘤細胞中，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后計數(shù)細胞總數(shù)。其腫瘤細胞生長抑制效果見表2所示。
表2 以上結(jié)果表明，所用鉑類化合物(西茜鉑)及鉑類化合物增效劑(O4-BAO4-芐基尿酸；UCN-017-氫氧基-星狀孢子素；UCN-027-O-烷基-星狀孢子素)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗5、鉑類化合物及鉑類化合物增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用 以大白鼠為試驗對象，將2×105個肝腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表3)。第一組為對照，第2到10組為治療組，緩釋植入劑經(jīng)瘤內(nèi)放置。劑量均為5mg/kg。治療后第10天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表3)。
表3 以上結(jié)果表明，所用鉑類化合物(匹克鉑)及鉑類化合物增效劑-PI3K抑制劑(其中，AMG-PC1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽堿；edelfosine1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽堿；ilmofosine1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽堿；IDOU5-碘-2’-脫氧鳥苷)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗6、鉑類化合物和鉑類化合物增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用 以大白鼠為試驗對象，將2×105個前列腺腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組(鉑類化合物或鉑類化合物增效劑)和聯(lián)合治療組(鉑類化合物和鉑類化合物增效劑)。鉑類化合物經(jīng)瘤內(nèi)注射，鉑類化合物增效劑經(jīng)腹腔注射。劑量均為5mg/kg。治療后第10天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表4)。
表4 以上結(jié)果表明，所用鉑類化合物(舒鉑)及鉑類化合物增效劑-DNA-依賴的蛋白激酶抑制劑(其中，咪唑并哌嗪、咪唑并吡啶、渥曼青霉素、苯并吡喃)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗7、鉑類化合物及鉑類化合物增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用 以大白鼠為試驗對象，將2×105個乳腺腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組、聯(lián)合治療組。鉑類化合物經(jīng)腹腔注射，鉑類化合物增效劑經(jīng)瘤周注射。劑量均為5mg/kg。治療后第10天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表5)。
表5 以上結(jié)果表明，所用鉑類化合物(雙環(huán)鉑)及鉑類化合物增效劑-DNA-依賴的蛋白激酶抑制劑(其中，LY2940022-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮；SU11752激酶抑制劑；SN-387-乙基-10-羥基喜樹堿；OK-10353-氰基-6-亞肼基甲基-5-(4-吡啶基)吡啶-[1H]-2-1)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗8、鉑類化合物和鉑類化合物增效劑(緩釋植入劑)的抑瘤作用 以大白鼠為試驗對象，將2×105個乳腺腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組、聯(lián)合治療組。緩釋植入劑均經(jīng)瘤內(nèi)放置。劑量均為5mg/kg。治療后第10天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表6)。
表6 以上結(jié)果表明，所用鉑類化合物(甲啶鉑)及鉑類化合物增效劑-DNA-依賴的蛋白激酶抑制劑在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗9、鉑類化合物和鉑類化合物增效劑(緩釋植入劑)的抑瘤作用 按試驗8所述方法測定鉑類化合物及鉑類化合物增效劑(緩釋植入劑)的抑瘤作用，其腫瘤生長抑制率見表7。
表7 以上結(jié)果表明，所用鉑類化合物(舒鉑)及鉑類化合物增效劑-聚(ADP-核糖)聚合酶抑制劑(其中，3-AB3-氨基苯甲酰胺；苯甲酰胺；PD 1287633，4-二氫甲氧異喹啉-1(2H)-苯甲酰胺；AG14361聚合酶抑制劑)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗10、鉑類化合物及鉑類化合物增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用 按試驗8所述方法測定鉑類化合物及鉑類化合物增效劑(緩釋植入劑)的抑瘤作用，其腫瘤生長抑制率見表8。
表8 以上結(jié)果表明，所用鉑類化合物(依鉑)及鉑類化合物增效劑-聚(ADP-核糖)聚合酶抑制劑(其中，BZ1-6苯并咪唑-4-羧酰胺；TI1-5三環(huán)內(nèi)酰胺硫化氫；TBC三環(huán)苯并咪唑羧酰胺、苯并咪唑)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗11、鉑類化合物和/或鉑類化合物增效劑(緩釋植入劑)的抑瘤作用 按試驗8所述方法測定鉑類化合物和/或鉑類化合物增效劑(緩釋植入劑)的抑瘤作用，其腫瘤生長抑制率見表9。
表9 以上結(jié)果表明，所用鉑類化合物(匹克鉑)及鉑類化合物增效劑-聚(ADP-核糖)聚合酶抑制劑(其中，PBC2-苯基-1H-苯并咪唑-4-羧酰胺；MPBC2-(3-甲氧苯基)-1H-苯并咪唑-4-羧酰胺(2-(3-methoxyphenyl)-1H-benzimidazole-4-carboxamide)；NU10258-羥基-2-甲基喹唑啉酮；NU10852-(4-羥苯基)苯并咪唑-4-羧酰胺)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗12、鉑類化合物和/或鉑類化合物增效劑(緩釋植入劑)的抑瘤作用 按試驗6所述方法測定鉑類化合物和/或鉑類化合物增效劑(緩釋植入劑)的抑瘤作用，其腫瘤生長抑制率見表10。
表10 以上結(jié)果表明，所用鉑類化合物(舒鉑)及鉑類化合物增效劑-聚(ADP-核糖)聚合酶抑制劑(其中，BSO為丁基硫堇硫肟)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗13、不同分子量聚乳酸制成的依鉑緩釋植入劑的體內(nèi)釋放比較 以大白鼠為試驗對象，分組(3只/組)并于皮下給予含不同分子量(MW)的聚乳酸(PLA)承載的等量依鉑緩釋植入劑。然后分別于1、3、7、14、21、28和35天測藥物于植入劑內(nèi)的剩余量，進而得出其體內(nèi)釋放速度(％)。結(jié)果表明，分子量為20000的釋放為1天(8％)、3(28％)、7(56％)、14(82％)、21(90)、28(94)和35(98％)。比較不同分子量聚乳酸制成的依鉑緩釋植入劑的體內(nèi)釋放發(fā)現(xiàn)，隨分子量增加而變慢，以第7天為例，與全身給藥組相比，細菌抑制率隨聚乳酸分子量增加而提高，依次為68％(MW5000)、66％(MW15000)、54％(MW25000)、50％(MW40000)和48(MW60000)。
同樣的結(jié)果還見于用聚乳酸為輔料制成的西茜鉑、匹克鉑、舒鉑、雙環(huán)鉑緩釋劑。
特別注意的是，本發(fā)明的緩釋劑，特別是緩釋注射劑操作簡單方便、重復(fù)性好。不僅療效好，毒副作用小。
不同的藥物包裝與不同的生物降解高分子的是要特性不同。進一步的研究發(fā)現(xiàn)，最適宜于本發(fā)明藥物緩釋的緩釋輔料為外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、乙烯乙酸乙烯酯共聚物、聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、白蛋白膠之一或其組合；最適宜的助懸劑為甲基纖維素、羥甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40、土溫80之一或其組合。
總之，所用鉑類化合物及各種鉑類化合物增效劑單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。因此，本發(fā)明所述的有效成分為任意一種(或一種以上)鉑類化合物和/或任意一種(或一種以上)鉑類化合物增效劑。含有以上有效成分的藥物可制成緩釋微球，進而制成緩釋注射劑和植入劑，其中以與含助懸劑的特殊溶媒組合形成的混懸注射劑為優(yōu)選。
緩釋注射劑或緩釋植入劑還可通過以下實施方式得以進一步說明。上述實施例及以下實施例只是對本發(fā)明作進一步說明，并非對其內(nèi)容和使用作任何限制。
具體實施例方式 實施例1. 將80mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)葵二酸(SA)為2080)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg依鉑和7-氫氧基-星狀孢子素，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含10％依鉑和10％ 7-氫氧基-星狀孢子素的注射用微球。然后將微球懸浮于含15％甘露醇的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時間為20-30天左右。
實施例2. 加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例1相同，但所不同的是所含抗癌有效成分及其重量百分比為 (1)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑； (2)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽堿或六癸基磷酸膽堿的組合； (3)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的O4-芐基葉酸、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪或-2-氨基-O4-芐基喋啶的組合；或 (4)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的咪唑并哌嗪、咪唑并吡啶、渥曼青霉素、苯并吡喃、6-芳香基-2-嗎啡酚-4-基-吡喃-4-基、2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮、7-乙基-10-羥基喜樹堿、3-氰基-6-亞肼基甲基-5-(4-吡啶基)吡啶[1H]-2-1、苯基丁酸、甲氧胺、羥基胺、肌醇聚磷酸鹽、十四(烷)基磷酸膽堿、六葵基磷酸(N-N-N-三甲基)己醇胺、十八基磷酸膽堿、十八基-[2-(N-甲基哌啶)乙基]-磷酸鹽、氨基三唑或丁基硫堇硫肟的組合。
所用的輔料為外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
實施例3. 將70mg分子量峰值為65000的聚乳酸(PLGA，7525)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入15mg西茜鉑和15mg 7-乙基-10-羥基喜樹堿，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含15％西茜鉑和15％ 7-乙基-10-羥基喜樹堿的微粉，然后懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為20-35天，在小鼠皮下的釋藥時間為35-50天左右。
實施例4 加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例3相同，但所不同的是所含抗癌有效成分及其重量百分比為1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的咪唑并哌嗪、咪唑并吡啶、渥曼青霉素、苯并吡喃、6-芳香基-2-嗎啡酚-4-基-吡喃-4-基、2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮、7-乙基-10-羥基喜樹堿、3-氰基-6-亞肼基甲基-5-(4-吡啶基)吡啶-[1H]-2-1、苯基丁酸、甲氧胺、羥基胺、肌醇聚磷酸鹽、十四(烷)基磷酸膽堿、六葵基磷酸(N-N-N-三甲基)己醇胺、十八基磷酸膽堿、十八基-[2-(N-甲基哌啶)乙基]-磷酸鹽、氨基三唑或丁基硫堇硫肟的組合。
實施例5. 將70mg乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入20毫克匹克鉑和10毫克苯并咪唑，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含20％匹克鉑和10％苯并咪唑的注射用微球。然后將微球懸浮于含5-15％山梨醇的注射液中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時間為20-30天左右。
實施例6. 加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例5相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽堿或六癸基磷酸膽堿的組合。
實施例7. 將70mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)葵二酸(SA)為2080)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入20mg舒鉑和10mg丁基硫堇硫肟，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含20％舒鉑與10％丁基硫堇硫肟的注射用微球。然后將微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉和0.5％吐溫80的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時間為20-30天左右。
實施例8. 加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例7相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為1-40％的依鉑、西茜鉑、匹克鉑、舒鉑或雙環(huán)鉑與2-40％的谷胱甘肽二硫化物、二硫化四甲基秋蘭姆、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、馬勃菌酸、S—己基谷胱甘肽、新鬼臼霉素、六環(huán)核喜樹堿或四并苯羧酰胺的組合。
實施例9 將70mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)葵二酸(SA)為2080)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入20mg雙環(huán)鉑和10mgO4-芐基葉酸，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含20％雙環(huán)鉑和10％O4-芐基葉酸的注射用微球。然后將微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉和15％山梨醇和0.2％吐溫80的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時間為20-30天左右。
實施例10 加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例9相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為 10-30％的依鉑、西茜鉑、匹克鉑、舒鉑或雙環(huán)鉑與10-40％的O4-芐基葉酸、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪或-2-氨基-O4-芐基喋啶的組合。
實施例11 將70mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)葵二酸(SA)為2080)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg 7-氫氧基-星狀孢子素和20mg舒鉑，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含10％ 7-氫氧基-星狀孢子素和20％舒鉑的注射用微球。然后將微球經(jīng)壓片法制得相應(yīng)的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時間為30-40天左右。
實施例12 加工成緩釋植入劑的方法步驟與實施例11相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為20％的依鉑、西茜鉑、匹克鉑、舒鉑或雙環(huán)鉑與10％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽堿或六癸基磷酸膽堿的組合。
實施例13 將70mg分子量峰值為80000的聚乳酸(PLGA，5050)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg依鉑和20mg新鬼臼霉素，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含10％依鉑和20％新鬼臼霉素的注射用微球。然后將微球經(jīng)壓片法制得相應(yīng)的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為25-30天，在小鼠皮下的釋藥時間為35-50天左右。
實施例14 加工成緩釋植入劑的方法步驟與實施例11、13相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為10％的依鉑、西茜鉑、匹克鉑、舒鉑或雙環(huán)鉑與20％的氨基三唑、丁基硫堇硫肟、馬勃菌酸、S—己基谷胱甘肽、新鬼臼霉素、六環(huán)核喜樹堿或四并苯羧酰胺的組合。
實施例15 加工成緩釋劑的方法步驟與實施例1-14相同，但所不同的是所用的緩釋輔料為下列之一或其組合 a)分子量峰值為5000-10000、10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乳酸(PLA)； b)分子量峰值為5000-10000、10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)，其中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-9550-50； c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)； d)10:90、20:80、30:70、40:60、50:50或60:40的對羧苯基丙烷(p-CPP)葵二酸(SA)共聚物(聚苯丙生)； e)雙脂肪酸與癸二酸共聚物； f)聚(芥酸二聚體-癸二酸)共聚物； g)聚(富馬酸-癸二酸)共聚物； h)木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或白蛋白膠； i)外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
實施例16 加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例1-15相同，但所不同的是所用的助懸劑分別為下列之一或其組合 a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)； b)5-15％甘露醇； c)5-15％山梨醇； d)0.1-1.5％表面活性物質(zhì)； e)0.10.5％吐溫20。
實施例17 加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例11-15相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為 (1)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑； (2)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽堿或六癸基磷酸膽堿的組合； (3)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的O4-芐基葉酸、2，4，5-三氨基-6-芐氧基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-亞硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-5-溴基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-5-硝基嘧啶、2-氨基-4-芐氧基-6-甲基-5-硝基嘧啶、2，4-二氨基-6-芐氧基-s-三嗪或-2-氨基-O4-芐基喋啶的組合；或 (4)1-40％的舒鉑、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑與1-40％的咪唑并哌嗪、咪唑并吡啶、渥曼青霉素、苯并吡喃、6-芳香基-2-嗎啡酚-4-基-吡喃-4-基、2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮、7-乙基-10-羥基喜樹堿、3-氰基-6-亞肼基甲基-5-(4-吡啶基)吡啶[1H]-2-1、苯基丁酸、甲氧胺、羥基胺、肌醇聚磷酸鹽、十四(烷)基磷酸膽堿、六葵基磷酸(N-N-N-三甲基)己醇胺、十八基磷酸膽堿、十八基-[2-(N-甲基哌啶)乙基]-磷酸鹽、氨基三唑或丁基硫堇硫肟的組合。
以上實施例僅用于說明，而并非局限本發(fā)明的應(yīng)用。
本發(fā)明所公開和保護的內(nèi)容見權(quán)利要求。
權(quán)利要求
權(quán)利要求1一種同載鉑類化合物及其增效劑的抗癌藥物緩釋注射劑，由以下成分組成
(A)緩釋微球，包括
抗癌有效成分
緩釋輔料
和
(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒；
其中，
抗癌有效成分為鉑類化合物和其增效劑，鉑類化合物增效劑選自磷酸肌醇3-激酶抑制劑；
所述緩釋注射劑的組分為下列組合
抗癌有效成分10mg依鉑和7-氫氧基-星狀孢子素，緩釋輔料為對羧苯基丙烷癸二酸為2080的聚苯丙生，溶媒為含15％甘露醇的生理鹽水；
以上均為重量百分比。
全文摘要
一種同載鉑類化合物及其增效劑的抗癌藥物緩釋注射劑由緩釋微球和溶媒組成。其中緩釋微球包括抗癌有效成分和緩釋輔料，溶媒為含助懸劑的特殊溶媒?？拱┯行С煞譃槭驺K、雙環(huán)鉑、依鉑、甲啶鉑、西茜鉑或匹克鉑等鉑類化合物和選自磷酸肌醇3-激酶抑制劑、嘧啶類似物和/或DNA修復(fù)酶抑制劑的細胞毒藥物；緩釋輔料為聚乳酸及其共聚物、聚乙二醇、端羧基聚乳酸共聚物、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、聚苯丙生、聚乳酸、EVAc等生物相容性高分子；助懸劑黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時)選自羧甲基纖維素鈉等。緩釋微球還可制成緩釋植入劑，腫瘤內(nèi)或瘤周注射或放置該緩釋劑可增強放化療等非手術(shù)療法的療效。
文檔編號A61K31/555GK101380303SQ200810300848
公開日2009年3月11日 申請日期2006年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月21日
發(fā)明者孔慶忠, 張紅軍, 俞建江 申請人:山東藍金生物工程有限公司, 孔慶忠