專利名稱::用于防止和修復(fù)dna損傷的水溶性菠菜提取物的制作方法用于防止和修復(fù)DNA損傷的水溶性菠菜提取物本申請(qǐng)是2006年12月11日提交的序列號(hào)為11/636,889的美國(guó)專利申請(qǐng)的部分繼續(xù)申請(qǐng)并要求其優(yōu)先權(quán),該美國(guó)專利申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容通過參考納入本文,背景線粒體是細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生能量的位點(diǎn).由于氧化呼吸的副產(chǎn)物一一活性氧類(reactiveoxygenspecies)(ROS)的存在,它們也是具有大量自由基活性的位點(diǎn)。細(xì)胞和線粒體中的自由基活性均會(huì)造成細(xì)胞和/或線粒體損傷,導(dǎo)致能量產(chǎn)物喪失、DNA機(jī)能障礙或破壞性酶途徑的上調(diào),結(jié)果是衰老加速并喪失重要的細(xì)胞機(jī)能。ROS-介導(dǎo)的DNA損傷的最重要標(biāo)志物之一是8"羥基脫氧烏苷(8-OHdG)。具體而言,氧化劑可將鳥嘌呤轉(zhuǎn)化為8-OHdG,通過使鳥嘌呤可與腺噪呤而不是與胞嘧啶配對(duì),在DNA中引入突變。因此,當(dāng)DNA復(fù)制時(shí),序列中的鳥嘌呤-胞嘧啶配對(duì)被腺嘌呤-胸腺嘧啶配對(duì)代替.閎此,已知8-OHdG可引起4錯(cuò)配、隨機(jī)點(diǎn)突變和核酸刪除,由于DNA編碼重要的細(xì)胞肽,未#1檢查出來的DNA損傷可在細(xì)胞內(nèi)積累并最終導(dǎo)致細(xì)胞機(jī)能失?;蛩劳?幸運(yùn)的是,細(xì)胞和線粒體有修復(fù)機(jī)制來對(duì)付例如8-OHdG和活性氧類引起的DNA損傷。然而,這些修復(fù)機(jī)制尤其是線粒體本身中的修復(fù)機(jī)制不是完美的.已有報(bào)道稱即使有正常的修復(fù)機(jī)制,與核DNA損傷相比,線粒體DNA("mtDNA")損傷仍然約大10倍。由于認(rèn)識(shí)到個(gè)體一生中線粒體序列中差錯(cuò)的積累加劇了衰老的某些方面以及以線粒體DNA突變形式遺傳下來的某些疾病,近年來線粒體中DNA的修復(fù)機(jī)制引起了人們的廣泛關(guān)注。當(dāng)前主要有兩種方法來解決DNA對(duì)細(xì)胞造成損傷這一問題.第一種方法是在破壞性分子損傷DNA或其他亞細(xì)胞之前增加抗氧化劑水平以除掉破壞性分子.第二種方法是直接加入負(fù)責(zé)切除和修復(fù)受損DNA鏈的DNA修復(fù)酶家族或使該家族表達(dá)上調(diào).此類處理的一些例子是得自LaboratoriesSerobiologiques的LSDNage和得自AGIDermatics的修復(fù)酶。據(jù)報(bào)道,來自LaboratoriesSerobiologiques的LSDNage可上調(diào)gadd-45(生長(zhǎng)停滯和DNA損傷)的形成.Gadd-45是一種多功能蛋白,已證明能夠調(diào)節(jié)某些DNA修復(fù)酶的活性和可及性(accessibility)。AGIDermatics提供3種修復(fù)酶,第一種修復(fù)酶是負(fù)責(zé)切除胸腺嘧啶二聚體的內(nèi)切醃。笫二種是能夠直接^y^腺嘧啶二聚體的形成發(fā)生逆轉(zhuǎn)的光活性酶.第三種是分離自擬南芥(AmW^/w&溈a&Vi朋)的ogg-l(8-氧代鳥嚟呤DNA糖基化酶),該酶負(fù)責(zé)8-OHdG的剪切修復(fù)。雖然這些方法一定程度上能夠有效地修復(fù)特定類型的DNA修復(fù),但它們都是不完整的。具體說,這些解決方案或者使細(xì)胞變得氧化應(yīng)激然后對(duì)損傷進(jìn)行修復(fù),或者它們?cè)囬|防止氧化應(yīng)激,但是一旦損害發(fā)生則不能進(jìn)行修復(fù)。簡(jiǎn)述一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是包含水溶性菠菜提取物的組合物,其中所述水溶性菠菜提取物防止或減少核DNA、線粒體DNA或這兩者的氧化損傷;修復(fù)核DNA、線粒體DNA或這兩者的損傷;和/或促進(jìn)或增加ATP的產(chǎn)生或合成。另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是防止或減少核DNA、線粒體DNA或這兩者的氧化損傷的方法,包括給予包含水溶性菠茱提取物的組合物,其中所迷水溶性菠菜提取物防止或減少核DNA、線粒體DNA或這兩者的氧化損傷。另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是修復(fù)核DNA、線粒體DNA或這兩者的氧化損傷的方法,包括給予包含水溶性菠菜提取物的組合物,其中所迷水溶性菠菜提取物修復(fù)核DNA、線粒體DNA或這兩者的氧化損傷,另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是增加細(xì)胞中的ATP生產(chǎn)或合成的方法,包括給予包含水溶性菠菜提取物的組合物,其中所迷水溶性菠菜提取物增加細(xì)胞中的ATP生產(chǎn)或合成.另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是包含水溶性菠菜提取物的組合物,其中所通iixt菠菜的微量過濾(microfiltration)獲得述水溶性菠菜提取物.另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是包含水溶性菠菜提取物的組合物,其中通過以下方法獲得所述水溶性菠菜提取物將新鮮的、冷凍的、脫水的、或干燥的菠菜和水碾磨,以形成漿液(slurry),將漿液的固體成分與液體成分分離,收集漿液的液體成分,將漿液的液體成分置于蒸氣鍋中,向蒸氣鍋中加入活性炭,落》-合,將液體成分從活性炭中分離并進(jìn)行微量過濾(例如納米過濾),以獲得水溶性菠菜拔^取物,其中所述水溶性菠菜提取物防止或減少核DNA、線粒體DNA或這兩者的氧化損傷,修復(fù)核DNA、線粒體DNA或這兩者的損傷,和/或促進(jìn)或增加ATP的產(chǎn)生或合成.另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是用上一段所述的方法步驟獲得的包含水溶性菠菜提取物的組合物,其中所述方法還包括巴氏殺菌步驟和/或加入載體(例如丁二醇(1,3-丁二醇(l,3-Butanediol);1,3-丁二醇(1,3-Butyleneglycol)))和/或防腐劑的步躁.可在本發(fā)明組合物中使用的一些防腐刑的例子包括2-苯氧乙醇,例如Phenonip(ClariantCorp,Charlotte,N,C.);和氯苯甘醚,例如GermazideM(EngelhardCorp.,Iselin,N.J.),另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是包含水溶性菠菜提取物、脂質(zhì)體、心鱗脂和至少一種抗氧化劑的組合物,其中心褲脂包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中,另外其中所述至少一種抗氧化劑與心磷脂一起包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中和/或含于脂質(zhì)體的水性中心內(nèi)。一個(gè)實(shí)例中,所述心磷脂可以是四油酰心磷脂(tetraoleoyl-cardiolipin)、四棕櫚油耽'"辨月旨(tetrapalmitoleoyl-cardiolipin)、四肉豆蔻酰心磷脂(tetramyristoyl-cardiolipin)或源自種子油的心磷脂;所述脂質(zhì)體可主要由褲脂酖M構(gòu)成;所述和心轔脂一起包埋在磷脂雙層中的至少一種抗氧化劑可以是曱基龍膽酸酯(或龍膽酸甲醋或二羥基苯甲酸甲酯(methyldehydroxybenzoate));含于脂質(zhì)體的水性中心內(nèi)的至少一種抗氧化劑可以是l-肌肽。另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是改善、維持或恢復(fù)線粒體功能以及修復(fù)DNA氧化損傷的方法,包括給予包含水溶性菠菜提取物、脂質(zhì)體、心磷脂和至少一種抗氧化劑的組合物,其中心磷脂包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中,所述至少一種抗氧化劑包埋在脂質(zhì)體的鱗脂雙層中和/或含于脂質(zhì)體的水性中心內(nèi),另一個(gè)實(shí)例中,所述心磷脂可以是四油酰心磷脂、四棕櫚油酰心磷脂、四肉豆蔻酰心磷脂或源自種子油的心磷脂;所述脂質(zhì)體可主要由磷脂耽膽喊構(gòu)成;所述和心磷脂一起包埋在磷脂雙層中的至少一種抗氧化劑可以是甲基龍膽酸酯(或龍膽酸甲酯或二羥基苯甲酸甲酯);所迷含于脂質(zhì)體的水性中心內(nèi)的至少一種抗氧化劑可以是l-肌肽。另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是包含水溶性菠菜提取物、擬南芥提取物(例如8-氧代烏嘌呤DNA糖基化酶(一種DNA修復(fù)酶,靶向于8-OHdG的切除修復(fù)))、脂質(zhì)體、心磷脂和至少一種抗氧化劑的組合物,其中心磷脂包埋在脂質(zhì)體的躊脂雙層中,另外其中所述至少一種抗氧化劑或與心磷脂一起包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中和/或含于脂質(zhì)體的水性中心內(nèi).一個(gè)實(shí)例中,所述心磷脂可以是四油酰心磷脂、四棕櫚油酰心磷脂、四肉豆蔻跣心磷脂或源自種子油的心磷月旨;所述脂質(zhì)體可主要由磷月旨耽膽堿構(gòu)成;所迷與心磷脂一起包埋在磷脂雙層中的至少一種抗氧化劑可以是甲基龍膽酸醋(或龍膽酸甲醋或二羥基苯甲酸甲酯);含于脂質(zhì)體水性中心內(nèi)的至少一種抗氧化劑可以是l-肌肽,本發(fā)明另一個(gè)實(shí)例是使用本度所迷的組合物,例如來改善、維持或恢復(fù)線粒體功能和/或修復(fù)細(xì)胞和/或線粒體DNA的氣化損傷的方法。另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是包含水溶性菠菜提取物、芥菜(蕓莒屬)植物提取物、脂質(zhì)體、心砩脂和至少一種抗氧化劑的組合物,其中心磷脂包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中,另外其中所述至少一種抗氧化劑與心磷脂一起包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中和/或含于脂質(zhì)體的水性中心內(nèi).一個(gè)實(shí)例中,所迷心磷脂可以是四油酰心磷脂、四棕櫚油酰心磷脂、四肉豆蔻酰心辨脂或源自種子油的心磷脂;所述脂質(zhì)體可主要由磷脂跣JJa^成;所述與心磷脂一起包埋在磷脂雙層中的至少一種抗氧化劑可以是甲基龍膽酸酯(或龍膽酸甲酯或二羥基苯甲酸甲酯);含于脂質(zhì)體水性中心內(nèi)的至少一種抗氧化劑可以是l-肌肽,本發(fā)明另一個(gè)實(shí)例是使用本艮所述的組合物,例如來改善、維持或恢復(fù)線粒體功能和/或修復(fù)細(xì)胞和/或線粒體DNA的氧化損傷的方法.附圖簡(jiǎn)述圖1示出可用于獲得本發(fā)明組合物中所用的水溶性提取物的方法的流程圖。圖2是示出可用于獲得水溶性提取物的方法的變化形式(以冷凍的菠菜為原料)的誠(chéng)艱固,困3是示出可用于獲得水溶性提取物的方法的另一種變化形式(以脫水菠菜為原料)的流程圖。圖4是示出使用脫水菠菜的水溶性提取物所獲得的ATP產(chǎn)生的圖,其中水溶性提取物包含約50。/。菠菜提取物、約49%丁二醇和約1%防腐劑(例如1^01^*或GennazideM),結(jié)果顯示,相比于未處理的對(duì)照細(xì)胞,脫水菠菜的水溶性提取物誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ATP水平發(fā)生劑量依賴性增加,圖4中,數(shù)據(jù)表示為與未處理對(duì)照細(xì)胞中的ATP水平比較得到的。/。對(duì)照ATP*因此,認(rèn)為ATP的增加代表測(cè)試樣本的積極效杲(positiveeffect)'囝5是示出使用各種水溶性菠菜提取物獲得的ATP產(chǎn)生的柱形困.結(jié)果顯示,相比于未處理的對(duì)照細(xì)胞,水溶性菠菜提取物誘導(dǎo)細(xì)胞ATP水平發(fā)生劑量依賴性增加'閨5中,數(shù)據(jù)表示為與未處理對(duì)照細(xì)胞中的ATP水平比較而得到的n/。對(duì)照ATP.因此,認(rèn)為ATP的增加代表測(cè)試樣本的積極效果,詳述應(yīng)理解,本發(fā)明不限于本文描迷的具體組合物、方法學(xué)或方案規(guī)程,此外,除非另有定義,本文使用的所有科技術(shù)語與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員常規(guī)理解的含義相同,還應(yīng)理解,本文所用術(shù)語只是出于描述具體實(shí)例的目的,并非用于限制本發(fā)明范圍,本發(fā)明范圍僅由權(quán)利要求限定.通過保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激以及修復(fù)氣化損傷的DNA(例如被8-OHdG損傷的DNA),本發(fā)明提供更全面的方法來保護(hù)細(xì)胞功能,從而克服了現(xiàn)有技術(shù)在解決核和/或線粒體DNA修復(fù)方面了缺點(diǎn)。具體而言,本發(fā)明尋求通過增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的抗性以及修復(fù)DNA的氧化損傷,防止核DNA和線粒體DNA受損傷,因此改善細(xì)胞功能,尤其是線粒體功能。更具體說,本發(fā)明是包含獨(dú)特的水溶性菠菜提取物的組合物,其中所述水溶性菠菜提取物有助于修復(fù)氧化性DNA損傷,尤其是8-OHdG造成的損傷.一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明是復(fù)合體(complex),其把向線粒體(線粒體復(fù)合物)和/或設(shè)計(jì)用于強(qiáng)化細(xì)胞膜和細(xì)胞結(jié)構(gòu)(即,細(xì)胞強(qiáng)化).這種復(fù)合體可包含水溶性菠菜提取物、芥菜(蕓苔屬)種子提取物或擬南芥提取物,例如Roxisome(AGIDermatics,Inc.,Freeport,NY)或8-氧代烏嘌呤DNA糖基化酶(一種DNA修復(fù)酶,靶向于8-OHdG的切除修復(fù)),以及主要由磷脂酰膽喊構(gòu)成的脂質(zhì)體,脂質(zhì)體的磷脂雙層中包埋有心磷脂和二氫苯甲酸甲酯(龍膽酸甲醋),脂質(zhì)體的水性中心內(nèi)包埋有l(wèi)-肌肽,"水溶性提取物"是可溶于或能夠溶解于水中的任何菠菜提取物,不管與獲得該提取物的所用的方法無關(guān),因此,可通過蒸汽蒸餾法、納米過濾法、冷水提取法、熱水提取法、用有機(jī)溶劑提取等方法來獲得菠菜的水溶性提取物.本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)理解,還有很多其他方法或提取工藝可用來獲得水溶性提取物,這些方法或工藝都在本發(fā)明范圍內(nèi)。一般認(rèn)為菠菜(S/H'micwoteracea)是最重要的抗氧化蔬菜之一。據(jù)估計(jì),每1千克新鮮切割的菠菜葉含有約1000mg總類黃酮,菠菜中還存在很多不同的類黃酮,包括例如藤菊黃素(3,5,7,3',4,-五羥基-6-甲H基黃酮)、菠葉素、黃酮醇糖苷、葡糖苷酸、6^氧化黃酮醇的甲基化衍生物和亞甲基二氧化物衍生物的酰4匕二糖苷和三糖脊(acylateddi-andtriglycosidesofmethylatedandmethylenedioxidederivativesof6-oxygenatedflavonols),除這些類黃酮之外,菱菜中還發(fā)現(xiàn)了一種強(qiáng)效的、水溶性、天然抗氧化混合物,稱為"NAO"。NAO特異性地抑制脂肪氧合酶,已將NAO的抗氧化活性與其他已知抗氧化劑進(jìn)行了比較,發(fā)現(xiàn)其在體外和體內(nèi)均優(yōu)于綠茶、N-乙酰半胱氨酸、丁羥甲苯和維生素E。Lomn"ski等,"Composition,E粗cacy,andSafetyofSpinachExtracts."NutritionandCancer,2003;46(2):222^231,菠菜的抗氧化特性非常重要,因?yàn)榧?xì)胞和DNA的氧化損傷隨年齡而增加,素,DNA的氧化損傷可由^JL的氧類物質(zhì)造成的,這種氧類物質(zhì)由輻射產(chǎn)生或者是有氧代謝的副產(chǎn)物。氧化的堿基8-OHdG是大約20種已知輻射損傷產(chǎn)物之一,雖然在線粒體DNA和核DNA這兩種類型的DNA中均發(fā)現(xiàn)了8-OHdG,但線粒體DNA中比核DNA中的8"OHdG更多,Richter等,"NormaloxidativedamagetomitochondrialandnuclearDNAisextensive,"Proc.Natl.Acad.Sci.USA.1988;85:6465-6467。線粒體DNA中高水平的8-OHdG可能是由線粒體中發(fā)生的大量氧代謝和相對(duì)低效率的線粒體DNA修復(fù)造成的,而這種高水平的8-OHdG可能導(dǎo)致了線粒體DNA中較高的突變率,因此,需要一種能夠防止^OHdG引起的突變的組合物和/或修復(fù)DNA(例如&OHdG損傷的線粒體DNA)的組合物。如上所述,氧化劑(例如ROS)可將DNA中的鳥嘌呤戎基轉(zhuǎn)化為8OHdG'DNA中新的8-OHdG殘基通過引^J^配對(duì)(具體說是與腺噪呤而非胞嘧啶配對(duì)(正常情況下胞嘧啶與烏噤呤配對(duì)))修飾而在DNA中引入突變,因此,當(dāng)DNA復(fù)制時(shí),序列中的烏嘌呤-胞嘧啶配對(duì)祐腺苷-胸腺嘧啶配對(duì)代替。非常重要的是,本發(fā)明水溶性菠菜提取物非常獨(dú)特地能夠在發(fā)生烏嘌呤修飾的位點(diǎn)發(fā)揮作用.具體說,本發(fā)明的水溶性菠菜提取物能夠防止鳥嗓呤轉(zhuǎn)化為8-OHdG、減少鳥嘌呤轉(zhuǎn)化為8-OHdG的次數(shù)、和/或修復(fù)已經(jīng)轉(zhuǎn)化為8-OHdG的鳥嘌呤殘基。這一點(diǎn)非常重要,因?yàn)殡m然已知菠菜具有抗氧化特性,以前也已顯示菠菜能夠修復(fù)一些類型的DNA損傷,但不知道水溶性菠菜提取物能夠用于防止或修復(fù)鳥嘌呤殘基的損傷和/或8-OHdG引起的損傷。例如,Doetsch等1988年報(bào)道從菠菜中分離出一種新的DNA修復(fù)酶。該酶命名為核酸酶SP,其優(yōu)先在腺噪呤突變位點(diǎn)發(fā)揮作用,Doetsch等,"NucleaseSP:anovelenzymefromspinachthatincisesdamagedduplexDNApreferentiallyatsitesofadenine."NucleicAcidsRes.1988;16(14):6935-6952。此外,Oleykowski等已證明,1988年首先由Doetsch描述的核酸酶SP在除鳥嘌呤殘基之外的所有DNA錯(cuò)配位點(diǎn)酶切,Oleykowski等,"Incisionatnucleotideinsertions/deletionsandbasepairmismatchesbytheSPnucleaseofspinach."扱ochem.1999;38(7):2200-5,相反,如實(shí)施例4(討論了對(duì)8>OHdG引起的DNA損傷的修復(fù))所示,本發(fā)明的水溶性菠菜提取物在發(fā)生鳥噪^H^飾的位點(diǎn)發(fā)揮作用。DNA的完整性對(duì)正常的細(xì)^it作非常重要。人線粒體含有5-10個(gè)相同的環(huán)形DNA分子。每個(gè)DNA分子由16,569個(gè)#對(duì)組成,攜帶37個(gè)編碼基因,這些基因編碼2種不同的核糖體RNA(rRNA)分子;22種不同的轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(tRNA)分子(每種氨基酸至少1個(gè)tRNA分子);和13種多肽.這13種多肽是線粒體內(nèi)膜中蛋白復(fù)合體的亞基,包括NADH脫氬酶、細(xì)胞色素c氧化酶和ATP合酶的亞基。衰老過程中發(fā)生的負(fù)責(zé)這些關(guān)鍵的輔因子和酶的線粒體DNA的損傷和不完全修復(fù)可導(dǎo)致嚴(yán)重的能量產(chǎn)生(energyproduction)損失、削弱細(xì)胞產(chǎn)生正常的細(xì)胞功能所需的重要蛋白質(zhì)、脂類和碳水化合物的能力.因此,本領(lǐng)域需要一種可防止DNA(例如線粒體DNA)損傷和/或修復(fù)DNA損傷的組合物,本發(fā)明基于這樣的驚人發(fā)現(xiàn)菠菜的水溶性級(jí)分,也就是水溶性菠菜提取物,既能夠保護(hù)細(xì)胞,尤其是細(xì)胞中的DNA(包括核DNA和線粒體DNA)不受氧化壓力應(yīng)激,又能夠修復(fù)ROS(例如過氧化物自由基)引起的損傷。具體說,如實(shí)施例3所述,用流式細(xì)胞木險(xiǎn)測(cè)超氧化物的氧化,證明水溶性菠菜提取物保護(hù)DNA(核DNA、線粒體DNA或兩者)不受氧化應(yīng)激.如實(shí)施例4所示,證明相同的提取物有助于DNA修復(fù)。此外,如實(shí)施例2所討論的,本發(fā)明基于這樣的驚人發(fā)現(xiàn)水溶性菠菜提取物有效增加ATP產(chǎn)量,這是保護(hù)細(xì)胞不受正常的電子過程中產(chǎn)生的氣化損傷的直接結(jié)果.菜提取物。微量過濾步驟可使用各種不同的過濾技術(shù),例如納米過濾或超濾。也可通過蒸汽蒸餾來獲得本發(fā)明的水溶性菠萊提取物,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)理解,可用多種其他方法來獲得水溶性菠菜提取物,這些方法都包括在本發(fā)明范圍內(nèi),可用于獲得水溶性菠菜提取物的一種示例性提取方法描述于實(shí)施例1,并圖示于圖1中.一般地,該方法包括獲得新鮮的、干燥的、脫水的或冷凍的菠菜,將菠菜和水碾磨成漿液,然后將漿液中的液體與固體分離,收集漿液的液體部分,將漿液的液體部分和活性炭一起加入蒸氣鍋中,打開蒸汽或加入熱水,將漿液的液體部分和活性炭與蒸汽(或熱水)混合,以使?jié){液的綠色液體部分脫色,獲得無色的液體菠菜提取物,然后分離液體菠菜提取物和活性炭.通過用于進(jìn)一步提取的微量過濾(例如納米過濾或超濾("UF")),使液體菠菜提取物中的任何滲出物與洗'滌水混合。然后,將澄清的液體菠菜提取物在蒸氣鍋中巴氏滅菌。在澄清的液體、茨菜提取物中可加入防腐劑,例如2-苯氧乙醇如Phenonip(ClariantCorp.Charlotte,N.C.)或氯苯甘醚如GermazideM(EngelhardCorp.Iselin,N.J.);栽體,例如丁二醇(1,3-丁二醇;1,3-丁二醇)和/或其他化妝品佐劑、添加劑、賦形劑等,應(yīng)理解,上述提取過程的某些方面可變化,但這些變化仍然在本發(fā)明范圍內(nèi),例如,蒸氣鍋的類型可變化,蒸氣鍋中的蒸汽溫度可變化和/或熱水可代替蒸汽使用,使用的防腐劑可變化,用于過濾的篩(screen)或膜可變化,用于制備漿液的水的量可變化,菠菜的來源可變化,菠菜可以是干燥的、脫水的、新鮮的或冷凍的,等等。本發(fā)明包含水溶性菠菜提取物的組合物可以和可接受的栽體、添加劑、防腐劑、賦形劑和/或化妝品佐劑一起施用,此外,本發(fā)明包含水溶性菠菜提取物的組合物可以和可接受的栽體一起外部施用,施用形式是凝膠、洗劑、霜?jiǎng)?、?qiáng)壯劑(tonic)、乳液、糊劑等.作為另一個(gè)實(shí)例,本發(fā)明包含水溶性菠菜提取物的組合物可以和可接受的栽體一起內(nèi)部施用,施用形式是丸劑、片劑、散劑、條形物(bar)、飲料等。因此,本文所迷組合物用于多種最終產(chǎn)品中,包括化妝品、藥品、食品和飲料組合物,使用本發(fā)明組合物的最終產(chǎn)品可用于修復(fù)核DNA、線粒體DNA或這兩者的損傷,和/或用于防止核DNA、線粒體DNA或這兩者的損傷,例如ROS或8-OHdG造成的損傷,因此,本發(fā)明一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明組合物以下列形式局部施用溶液、凝膠、洗劑、霜?jiǎng)?、軟貪、水包油乳液、油包水乳液、棒形?stick)、噴劑、糊劑、摩絲(mousse)、強(qiáng)壯劑或其他化妝品領(lǐng)域或局部施用合適的形式.例如,本發(fā)明組合物可以以局部制劑形式施用,并可包含如上所討論的水溶性菠菜^取物以及脂質(zhì)體,用于改善、恢復(fù)和/或維持線粒體功能。已知脂質(zhì)體是局部施用化妝品和皮膚病學(xué)產(chǎn)品時(shí)有效的藥物遞送系統(tǒng),具體說,脂質(zhì)體是一種球形小泡(sphericalvesicle),具有由磷脂雙層構(gòu)成的膜。脂質(zhì)體的脂質(zhì)雙層可與其他雙層(例如細(xì)胞膜和/或線粒體膜)融合,因此可遞送脂質(zhì)體的內(nèi)容物,脂質(zhì)體可包含多種磷脂,所述確脂包括具有混合脂質(zhì)鏈的天然來源的磷脂(例如卵磷脂酰乙醇胺),或由純成分構(gòu)成,例如DOPE(二油酖辨脂酰乙醇胺),脂質(zhì)體通常尺寸小,在約25"1000nm范圍內(nèi),脂質(zhì)體是一種由磷脂雙層構(gòu)成的封閉結(jié)構(gòu),能夠在磷脂雙層的水性核中包泉水溶性、親水分子,在疏水性區(qū)域中包裹油溶性、疏水分子.通常,脂質(zhì)體可以是中性(neutral)脂質(zhì)體、陰離子(negative)脂質(zhì)體或陽離子(positive)脂質(zhì)體,例如,陽離子脂質(zhì)體可形成自含有磷脂酰膽喊、膽固醇、心磷脂和磷脂酰絲氨酸的溶液.脂質(zhì)體可以是多層小泡和單層小泡的混合物.如上所述,脂質(zhì)體由磷脂構(gòu)成.磷脂分子具有親水性"頭部基團(tuán)(headgroup)"和由兩個(gè)跣基鏈構(gòu)成的疏水性"尾部"。磷脂的水溶性取決于疏水性尾部的長(zhǎng)度和頭部基團(tuán)與水的親和性兩者,例如,各酖基鏈含有14個(gè)或更多個(gè)直鏈(未分支)飽和C-C形式碳原子的純脂質(zhì)不溶于水,通常,隨著脂質(zhì)的?;滈L(zhǎng)度增加,臨界膠束濃度迅速降低。用于本發(fā)明組合物中的脂質(zhì)體可主要由存在于細(xì)胞膜中的脂質(zhì)構(gòu)成,包括磷脂、神經(jīng)酖胺、鞘脂、膽固醇、甘油三酯或其他脂質(zhì),例如來自植物的植物甾醇.一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明組合物中使用的脂質(zhì)體可主要由磷脂酰膽堿構(gòu)成。砩脂酰膽堿是一種磷脂,它是細(xì)胞膜的主要組成成分。磷脂酰膽堿也稱為1,2-二棕櫚酰-sn-甘油基-3-膽堿磷酸(1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine)、PtdCho和卵褲脂,不飽和磷脂酰M含有膽堿、Q-6不炮和脂肪酸(例如亞油酸)、ft-3脂肪酸(例如y-亞麻酸),甘油酯殘基含量低(或沒有),脂質(zhì)體研究的進(jìn)展已使得脂質(zhì)體能夠避免被身體免疫系統(tǒng)(具體而言是網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的細(xì)胞)探測(cè)到,此類脂質(zhì)體稱為"秘密(stealth)脂質(zhì)體",構(gòu)建有PEG(聚乙二醇)作為涂層。在體內(nèi)呈惰性的PEG涂層使藥物遞送系統(tǒng)的循環(huán)時(shí)間更長(zhǎng)。因此,本發(fā)明的組合物可包含水溶性菠菜提取物和脂質(zhì)體,所述脂質(zhì)體主要由磷脂酰fla^構(gòu)成并包埋有心磷脂(例如四油酖-心磷脂)和至少一種抗氧化劑(例如龍膽酸甲酯和/或l-肌肽),并可另外包含PEG"秘密"涂層,除PEG涂層之外,本發(fā)明組合物中使用的秘密脂質(zhì)體還可連接有配體,使脂質(zhì)體能夠結(jié)合到遞送的把位點(diǎn).在皮膚護(hù)理產(chǎn)品或化妝品中,可將脂質(zhì)體配制在合適的基質(zhì)(例如可接受的栽體)例如漿液(serum)、洗液、凝膠或霜?jiǎng)┲?,更具體地說,用于局部施用的本發(fā)明組合物可以是霜刑、洗劑、皿、糊刑或其他對(duì)于化妝品和局部施用而言合適的形式,并可包含水溶性菠菜提取物、包埋有心磷脂和抗氧化劑的脂質(zhì)體,一個(gè)實(shí)例中,用于局部施用的本發(fā)明組合物包含水溶性菠菜提取物、主要由鱗脂酰膽堿構(gòu)成并包埋有心砩脂(例如四油酰心磷脂)和至少一種抗氧化劑的脂質(zhì)體.所述至少一種抗氧化劑可以是l-肌肽、龍膽酸甲酯或二者.包埋在脂質(zhì)體中的心磷脂也可以是四棕櫚油酰心磷脂和四肉豆蔻酰心磷脂中的一種或多種。心磷脂包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中,所迷至少一種抗氧化劑可包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中、脂質(zhì)體的水性中心內(nèi)、或包埋在前述二者內(nèi).一個(gè)實(shí)例中,至少一種抗氧化劑可以是水溶性抗氧化劑,另一個(gè)實(shí)例中,至少一種抗氧化劑可以;O旨溶性抗氧化劑,另一個(gè)實(shí)例中,至少一種抗氧化劑可以是單線態(tài)氧清除劑(singlet-oxygenscavenger),另一個(gè)實(shí)例中,包含在本發(fā)明組合物中的抗氧化劑可以是水溶性單線態(tài)氧清除劑或脂溶性單線態(tài)氧清除劑.所述的至少一種抗氧化劑據(jù)信使心磷脂穩(wěn)定,直到心褲脂被遞送到細(xì)胞中,例如通過局部施用含有脂質(zhì)體的組合物,所述脂質(zhì)體含有心磷脂和至少一種抗氧化劑。一個(gè)實(shí)例中,所迷穩(wěn)定心磷脂的至少一種抗氧化劑是龍膽酸甲醋,它是一種保護(hù)心磷脂不被氧化的強(qiáng)抗氣化劑,此外,由于脂質(zhì)體遞送技術(shù)的性質(zhì),脂質(zhì)體含有水性內(nèi)部(waterinterior),為防止心磷脂在脂質(zhì)體中被氧化,可在脂質(zhì)體中包含第二抗氧化劑,例如l-肌肽,它是一種基于肽的水溶性強(qiáng)抗氧化劑.通過包含水溶性菠菜提取物和脂質(zhì)體例如褲脂酰膽喊脂質(zhì)體(所述脂質(zhì)體包含心磷脂如四油酰心磷脂和至少一種抗氧化劑)的本發(fā)明組合物來實(shí)現(xiàn)改善細(xì)胞功能,因?yàn)榇祟惤M合物包含用于修復(fù)和恢復(fù)核DNA和線粒體DNA的菠菜提取物、用于保護(hù)細(xì)胞不受氧化損傷的抗氣化劑(例如l-肌肽)以及用于改善、維持或恢復(fù)線粒體功能和/或修復(fù)線粒體膜的心褲脂(例如四油酰心砩脂).因此,此類本發(fā)明組合物用于改善、維持或恢復(fù)線粒體功能和用于修復(fù)DNA的氧化損傷。心磷脂是一種具有不尋常結(jié)構(gòu),尤其富含不飽和脂肪酸的磷脂,通常,亞油酸占心磷脂中存在的不飽和脂肪酸的至少85%.因此,在一個(gè)實(shí)例中,將包含約85。/。亞油酸的心磷脂包埋在脂質(zhì)體中,例如包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中。在另一個(gè)實(shí)例中,將四油酸-心磷脂包埋在脂質(zhì)體中,四油耽-心磷脂由四個(gè)油酸組分構(gòu)成(C18:l,四油酰-心磷脂),其與亞油酸心褲脂相比更不易受到氧化損傷和破壞,其它實(shí)例中,心磷脂可以來自種子油的心磷脂??墒褂玫男牧字钠渌涌少?gòu)自例如AvantiPolarLipids,Inc.(Alabaster,AL)??少?gòu)自AvantiPolarLipids,Inc.的心磷脂的例子包括如下1,,1,,2,,2,-四肉豆蔻酰心鱗脂(銨鹽)(產(chǎn)品號(hào)770332);1,,1,,2,,2,-四肉豆蔻酰心磷脂(鈉鹽)(產(chǎn)品號(hào)750332或710335);1,,1,-油酰-2,,2,-(12-生物素基(氨基十二烷酰))心磷脂(銨鹽)(產(chǎn)品號(hào)860564);心磷脂(大腸桿菌,二鈉鹽)(產(chǎn)品號(hào)M1199);心磷脂(心,牛-二鈉鹽)(產(chǎn)品號(hào)77001";心砩脂(心,牛-二鈉鹽)(產(chǎn)品號(hào)MOOl2);氬化心磷脂(心,牛-二鈉鹽)(產(chǎn)品號(hào)830057);雙溶性心褲脂(Dilysocardiolipin)(心,牛-二鈉鹽)(產(chǎn)品號(hào)850082);雙溶性心磷脂(心,鈉鹽);氫化心砩脂(心);可溶性心磷脂(lysocardiolipin);單可溶性心磷脂(Monolysocardiolipin)(心,牛-二鈉鹽)(產(chǎn)品號(hào)850081);以及單可溶性心磷脂(心,鈉鹽)。另一個(gè)實(shí)例中,包埋在脂質(zhì)體中的心褲脂可以是雙磷脂耽甘油或更確切地講是1,3-雙(sn-3'-磷月旨醜)-sn-甘油(l,3-bis(sn-3'-phosphatidyl)-sn-glycerol),有很多抗氧化劑可并入本發(fā)明組合物中。例如,包埋在本發(fā)明脂質(zhì)體中的抗氧化劑可以是水溶性的,從而包埋在脂質(zhì)體的水性中心中.另一個(gè)實(shí)例中,包埋在脂質(zhì)體中的抗氧化劑可以是脂溶性的,因此包埋在脂質(zhì)體的脂質(zhì)雙層中。另一個(gè)實(shí)例中,包埋在本發(fā)明脂質(zhì)體中的抗氧化劑是單線態(tài)氧清除劑.另一個(gè)實(shí)例中,抗氧化劑可以是水溶性的并且是單線態(tài)氧清除劑,或者;O旨溶性的并且是單線態(tài)氧清除劑,另一個(gè)實(shí)例中,可將超過一種抗氧化劑包埋在本發(fā)明脂質(zhì)體中。例如,可將一種或多種以下抗氧化劑包埋在本發(fā)明脂質(zhì)體中龍膽酸甲醋、l-肌肽、丁幾甲苯(BHT)、叔丁基氫載(TBHQ)、或它們的一些組合,一個(gè)實(shí)施例中,龍膽酸甲酯用作抗氧化劑,因?yàn)辇埬懰峒柞JI旨溶性的并且能夠穩(wěn)定心磷脂。龍膽酸甲酯具有高的氧自由基吸收能力("ORAC")(25,605fimolTeq/g),表明它是一種很強(qiáng)的抗氧化劑,所以,有可能基于其ORAC值來選擇用于本發(fā)明的抗氧化劑,例如通過選擇ORAC值高的抗氧化劑,另一個(gè)實(shí)例中,l-肌肽用作本發(fā)明的抗氧化劑,因?yàn)樗撬苄缘牟⑶夷軌虮Wo(hù)心磷脂不受脂質(zhì)體水性中心引起的氧化損傷,因此,在一個(gè)實(shí)例中,脂質(zhì)體的水性中心含有l(wèi)-肌肽,另一個(gè)實(shí)例中,脂質(zhì)體的磷脂雙層包埋有心磷脂和龍膽酸甲酯,脂質(zhì)體的水性中心含有l(wèi)-肌肽。另一個(gè)實(shí)例中,包埋在本發(fā)明脂質(zhì)體中的抗氧化刑可以是在線粒體中發(fā)現(xiàn)的抗氧化劑,例如谷胱甘肽,已顯示,當(dāng)人工耗竭細(xì)胞中的谷胱甘肽時(shí),氧化損傷增加,線粒體中的谷胱甘肽水平可能甚至比鈿胞其他部位中的谷胱甘肽水平更重要,相比于細(xì)胞其他部位中的谷胱甘肽水平,線粒體谷胱甘肽水平隨年齡降低得更多,這種降低似乎使線粒體更易受到氧化損傷??箟难?即維生素C)和維生素E(即生育酚)是可包埋在脂質(zhì)體中的其他抗氧化劑例子,所述脂質(zhì)體在既含有脂質(zhì)體又含有水溶性菠菜提取物的本發(fā)明組合物中施用,應(yīng)理解,很多其他抗氧化劑可包埋于在本發(fā)明組合物中施用的脂質(zhì)體中.還應(yīng)理解,用于本發(fā)明的脂質(zhì)體,即包含心磷脂和至少一種抗氧化劑(例如龍膽酸甲酯、i-肌肽或二者)的脂質(zhì)體,在約iox:-約6ox:,理想為約加x:-約55x:,理想為約3ox:-約sor的溫度下存貯時(shí)具有穩(wěn)定和不易受到實(shí)質(zhì)性的氧化損傷的優(yōu)點(diǎn)。適于局部施用的本發(fā)明組合物可與可接受的栽體混合??山邮艿妮d體可起各種作用,例如作為本發(fā)明組合物的組分的溶劑、栽體、稀釋劑或^劑,允許各組分以合適的濃度均勾施用到皮膚表面.可接受的栽體也可有助于本發(fā)明組合物滲透到皮膚中。在一種包含本發(fā)明水溶性菠菜提取物的示例性局部施用制劑中,可接受的栽體可占總組合物重量的約80%-約100%,另一個(gè)實(shí)例中,可接受的栽體可以占總組合物重量的約85%-約95%。因此,一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明組合物可包含約0.01%-約5%的水溶性菠菜提取物,約0.01%-約5%的含有心磷脂和至少一種抗氧化劑的脂質(zhì)體,和約卯%-約99.99%的栽體,另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明組合物可包含占總組合物重量的約0.01°/0-約5%的水溶性菠菜提取物,和占總組合物重量的約卯°/。-約99.99°/的可接受的栽體,另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明組合物可包含占總組合物重量的約卯%-約99.99%的可接受的栽體,例如丁二醇,包括任何添加劑和/或賦形劑,例如防腐劑,如2-苯氧乙醇或PheIlonip、或氯苯甘醚或GermazideM,所述防腐劑形成總組合物的約0.01重量%-5重量%;和占總組合物重量的約0.01%-約5%的水溶性菠菜提取物。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)理解,當(dāng)本發(fā)明組合物包含防腐劑時(shí),所包含的防腐劑類型將決定防腐劑的濃度,例如,?1161101^@是可商購(gòu)的防腐劑,當(dāng)其摻入的濃度為總組合物的約0.25重量%-約1重量%時(shí),將對(duì)化妝品和梳妝用品(toiletries)起防腐作用,另一種可使用的市售防腐劑是GermazideM,美國(guó)專利No,6,447,793對(duì)其有更克分的描述,GermazideM通常以總組合物的約0.5重量%-約2重量%使用。在其他實(shí)例中,對(duì)于用于局部施用本發(fā)明組合物的制劑(所述制劑至少包含水溶性菠茱提取物,還可包含包埋有心磷脂和至少一種抗氧化劑的脂質(zhì)體),所迷可接受的栽體占總組合物的約90重量%-約99.99重量%;占總組合物的約97重量%-約99重量%;占總組合物的約91重量%-約98重量%;占總組合物的約92重量%-約97重量%;占總組合物的約93重量%-約96重量%;或占總組合物的約94重量%-約95重量%.不存在其他化妝品佐劑或添加劑時(shí),所述可接受的栽體可形成本發(fā)明組合物的余量,用于實(shí)施本發(fā)明的水溶性菠菜提取物和其他成分可溶于或不溶于所述可接受的栽體中。如果組合物的所有成分均可溶于所述可接受的栽體中,則該栽體充當(dāng)溶刑,但是,如果組合物中所有或某些成分不溶于可接受的栽體,則這些成分通過例如懸浮液、乳液、凝膠、霜?jiǎng)┗蚝齽┑刃问絕t在栽體中,因此,本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到,可接受的栽體的可能的范閨非常寬。例如,可接受的栽體可以是乳液、洗劑、霜?jiǎng)┗驈?qiáng)壯劑,可接受的栽體可包括水、乙醇、丁二醇或有助于滲透到皮膚中的其他各種溶劑,一些合適栽體的例子描述于美國(guó)專利No.6,184,247和美國(guó)專利No.6,579,516中,這些專利的^內(nèi)容通過參考納入本文,一般而言,根據(jù)本發(fā)明的可接受栽體可包括但不限于下述任何例子水、丁二醇、蓖麻油、乙二醇單丁瞇、二甘醇單乙就、玉米油、二甲基亞砜、乙二醇、異丙醇、大豆油、丙三醇、可溶性膠原、氧化鋅、氧化鈥或高嶺土.一方面中,用于實(shí)施本發(fā)明的可接受栽體包括水和乙醇.任選地,可接受載體還包含丁二醇和/或frescolateMGA,例如,可接受的栽體可包含占組合物重量的40-60%的水、45-55%的乙醇和5-10%的丁二醇。實(shí)施本發(fā)明時(shí),可接受的載體與水溶性菠菜提取物混合,所述水溶性菠菜提取物占總組合物重量的約0.01%-約5%;更具體地說,占總組合物重量的約1%-約5%;更具體地說,占總組合物重量的約2%-約4%;更具體地說,占總組^#重量的約3%.此外,用于本發(fā)明的可接受的栽體可任選包含一種或多種濕潤(rùn)劑,包括但不限于鄰苯二甲酸二丁酯、可溶性膠原、山梨糖醇或2-吡咯烷酮-5-羧酸鈉,可用于實(shí)施本發(fā)明的濕潤(rùn)劑的其他例子可見于CTFA(化妝品和香料協(xié)會(huì)(CosmeticToiletryandFragranceAssociation))《化妝品成分手冊(cè)》(CosmeticIngredientHandbook)中,該手冊(cè)的相關(guān)部分通過參考納入本文,此外,本發(fā)明中的可接受栽體可任選包含一種或多種潤(rùn)膚劑,包括但不限于丁烷-l,3-二醇;棕桐酸十六烷酯;二甲基聚硅氧烷;單蓖麻酸甘油酯;單硬脂酸甘油酯;棕櫚酸異丁酯;硬脂酸異十六烷酯;棕櫚酸異丙酯;硬脂酸異丙醋;硬脂酸丁醋;月桂酸異丙酯;月桂酸己酯;油酸癸酯;肉豆蔻酸異丙酯;乳酸十二烷酯;十八烷基-2-醇(octadecan-2-ol);三辛酸甘油酯(caprylictriglyceride);三癸酸甘油酯(caprictriglyceride);聚乙二醇;丙烷-1,2二醇;三甘醇;芝麻油;椰子油;紅花油;月桂酸異戊酯;壬基酚聚氧乙烯(9)瞇;泛醇;氫化植物油;乙酸生育酚酯;亞油酸生育酚酯;丙二醇;花生油;蓖麻油;異硬脂酸;棕櫚酸;亞油酸異丙醋;乳酸十二烷酯;乳酸十四烷酯;油酸癸醋;肉豆蔻酸十四烷酯.可用于實(shí)施本發(fā)明的潤(rùn)膚劑的其他例子可見于《CTFA化妝品成分手冊(cè)》(CTFACosmeticIngredientHandbook)中,該手冊(cè)相關(guān)部分通過參考納入本文。此外,本發(fā)明中使用的可接受栽體可任選包含一種或多種滲透增強(qiáng)劑,包括但不限于吡咯烷嗣,例如2-吡咯烷酮;醇,例如乙醇;烷醇如癸醇;二醇如丙二醇、二丙二醇、丁二醇;表面活性劑或辟類。可用于實(shí)施本發(fā)明的其他可接受栽體對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的,它們包括在本發(fā)明范圍內(nèi),另一個(gè)實(shí)例中,本發(fā)明組合物以液體或固體形式口服給予。液體可以基于水、奶、茶、果汁或它們的某些組合。根據(jù)本發(fā)明,用于內(nèi)部給藥的固體和液體組合物還可包含增稠劑,包括黃原膠(xanthumgum)、羧甲基纖維素、羧乙基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、微晶纖維素、淀粉、糊精、發(fā)酵乳清、豆腐、麥芽糖糊精、多元醇(包括糖醇(例如山梨糖醇和甘露醇))、碳水化合物(例如乳糖)、海藻酸丙二醇酯、結(jié)冷膠、瓜爾豆膠、果膠、黃者膠、阿拉伯膠(g咖acacia)、槐豆膠、阿拉伯樹膠(gumarabic)、明膠,以及這些增稠劑的混合物,包含在本發(fā)明組合物中的這些增稠劑通常最多為約0.1%,這取決于所包含的具體增稠劑以及所需的粘度效果。本發(fā)明的固體和液體(食品、飲料、補(bǔ)充劑和藥物)組合物可包含并通常會(huì)包含有效量的一種或多種甜味劑,包括破水化合物甜味劑和天然的和/或人工的低/無熱量甜味劑.用于本發(fā)明組合物中的甜味劑的量可變化,但通常取決于所用甜味劑的類型和所需的甜度,與給藥方式無關(guān),本發(fā)明組合物還可含有各種已知的常規(guī)化妝品佐劑,只要它們不不利影響對(duì)核DNA、線粒體DNA或二者的所需修復(fù)和/或?qū)Υ祟怐NA的損傷(例如活性氧類或8-OHdG造成的損傷)的所需防止。例如,本發(fā)明組合物還可包含本領(lǐng)域熟知的一種或多種添加劑或其他任選成分,可包括但不限于填充劑(例如,固體、半固體或液體等);栽體;稀釋劑;增稠劑;膠凝劑;維生素,視黃素(retinoids)和視黃醇(例如,維生素B3、維生素A等);色素;香料;遮光劑(sunscreens)和防曬劑(sunblocks);抗氧化劑和自由基清除劑;有機(jī)幾酸;去角質(zhì)劑(exfoliants);皮膚調(diào)理劑;保濕劑;神經(jīng)酰胺、類神經(jīng)酰胺(pseudoceramides)、磷脂、鞘脂、膽閨醇、葡糖胺、藥學(xué)上可接受的滲透刑(例如,正癸基甲基亞硯(n-decyhnethylsutfoxide),卵磷脂有機(jī)凝膠、酪氨酸、賴氨酸,等);殺菌劑,'氨基酸(例如脯4^酸)、吡咯烷酮羧酸、其衍生物及鹽,異構(gòu)糖(saccharideisomerate)、泛醇、援沖液連同基質(zhì)(base)例如三乙醇胺或氫氧化鈉;蠟,例如蜂蠟、地蠟、石蠟;植物提取物,包括但不限于例如庫(kù)拉索,薈(AloeVera)、矢車菊、金縷梅(witchhazel)、接骨木的花(dderflower)、黃瓜;不透明劑;懸浮劑;粘合劑;防腐劑;和它們的組合,可包含的一種示例性防腐劑是Phenonip⑧(Clariant,Oiaiiotte,N.C.),它是一種包含2-苯氧乙醇和乙二醇瞇的抗菌性植物提取物混合物.其他合適的添加劑和/或佐劑描述于美國(guó)專利6,184,247中,其全部?jī)?nèi)容通過參考納入本文.本發(fā)明組合物可包含其他非活性成分,包括但不限于表面活性劑、共溶劑和賦形刑,表面活性劑(例如親水性表面活性劑和疏水性表面活性劑)可包舍在組合物中??苫诳傮w組合物和希望的組合物遞送來使用具體的表面活性劑有用的表面活性刑包括聚氣乙烯(polyethoxylated)(PEG)月旨肪酸、PEG-脂肪酸二酯、PEG^旨肪酸單酯和FEG-脂肪酸二酯混合物、聚乙二醇脂肪酸甘油酯(polyethyleneglycolglycerolfattyacidester)、醇-油酯交換(alcohol-oiltransesterification)產(chǎn)物、聚甘油脂肪酸、脂肪酸丙二醇酯、丙二醇酯-甘油酯混合物、單甘油酯和二甘油酯、甾醇和甾醇衍生物、聚乙二醇失水山梨醇脂肪酸酯(polyethyleneglycolsorbitanfattyacidesters)、聚乙二醇烷基酯、聚糖酯、聚乙二醇^餘、聚氣乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、失水山梨醇脂肪酸酯、低級(jí)醇脂肪酸醋、離子型表面活性劑和它們的混合物*可包含在本發(fā)明組合物中的其他添加劑對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言U而易見的,它們包括在本發(fā)明范圍內(nèi),與給藥模式無關(guān),本發(fā)明組合物一般可至少以每天為基礎(chǔ)給藥,本發(fā)明組合物的給藥可持續(xù)任何合適的時(shí)間,應(yīng)理解,對(duì)核DNA、線粒體DNA或這兩者的修復(fù)程度和/或防止例如活性氧類或8-OhdG對(duì)此類DNA損傷的程度,將直接取決于所用本發(fā)明組合物的總量和頻率,一個(gè)實(shí)例中,至少每天給予本發(fā)明組合物一次。另一個(gè)實(shí)例中,可每天給予本發(fā)明組合物兩次。另一個(gè)實(shí)例中,可每天給予本發(fā)明組合物3-5次.另一個(gè)實(shí)例中,對(duì)每天給予的本發(fā)明組合物數(shù)量無限制。為獲得最佳效果,本發(fā)明組合物至少以每天為基礎(chǔ)給藥,持續(xù)至少一周至幾周,本發(fā)明組合物也可至少以每天為基礎(chǔ)給藥,持續(xù)幾周至一個(gè)月,至幾個(gè)月,至一年,至幾年。應(yīng)理解,對(duì)本發(fā)明組合物的給藥頻率和持續(xù)時(shí)間沒有限制.上文詳細(xì)描述意在闡釋本發(fā)明而非限制本發(fā)明,通過下文實(shí)驗(yàn)研究和實(shí)施例進(jìn)一步闡釋本發(fā)明,這些也不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制.本申請(qǐng)中引用的所用參考文獻(xiàn)、專利和公開的專利申請(qǐng)的內(nèi)容均通過參考納入本文,實(shí)施例實(shí)施例1:提取菠菜以獲得水溶性菠菜提取物的方法收獲菠菜(例如生長(zhǎng)在有機(jī)條件下的菠茱),溫和條件下清洗菠菜葉.然后風(fēng)干洗過的葉子.干燥之后,用V2開口(opening)的Rietz粉碎機(jī)(Hosokawa)將菠菜和水碾磨成漿液,其中水和新鮮菠菜的比例是4:1。然后用合適的設(shè)備例如分離器(bagpressLiquatex裝置(具有USSS325目篩,約44微米的開口)將液體和閨體分離.將菠菜提取物液體和7.5%的活性炭加入到蒸氣鍋中*以熱水或約140°F蒸汽的形式使用熱量,以將菠菜提取物液體和7.5。/。的活性炭混合約30分鐘'也可使用攪拌器進(jìn)行攪拌,該加熱步驟應(yīng)使綠色的菠菜提取物液體脫色,這在將水溶性提取物加入到局部用化妝品中時(shí)可能是有用的.采用合適的i更備例如Liquatex裝置(具有USSS325目篩,約44微米的開口)將提取物液體和活性炭分離,可用合適的UF過濾設(shè)備例如^FP200膜將另外的液體從活性炭中分離并澄清,通過UF過濾使?jié)B出物(permeates)與洗滌的水混舍.得到的液體濃縮物中的總固體的量在0.^1.0%范圍內(nèi)。澄清的菠菜液體濃縮物在蒸氣鍋中于18O0F攪拌下進(jìn)行巴氏滅菌.將防腐劑例如2-苯氧乙酵(例如Phenonip(ClariantCorp.Charlotte,N.C.))或氯苯甘醚(例如GermazideM(EngelhardCorp"Iselin,N.J.))加入到澄清的菠菜液體濃縮物中,最終的配方是(。/。wt/wt/):約50%澄清菠菜液體濃縮物;約49。/。栽體(丁二醇)和約1%防腐劑(例如Phenonip(2-苯氧乙醉)或GermazideM(氯苯甘醚))。困2示出了上迷方法的一種變化形式,其^t用冷凍的菠菜作為原料可用于獲得水溶性菠菜提取物,圖2還顯示在提取過程中何時(shí)收集如下表H提到的水溶性提取物1-4。圖3也示出了上迷方法的一種變化形式,其使用脫水的菠菜作為原料可用于獲得水溶性菠菜提取物,閨3也顯示了提取過程中何時(shí)收集如下表II提到的水溶性提取物5>9,實(shí)施例2:ATP水平的測(cè)定細(xì)胞中ATP水平是細(xì)胞和線粒體健康的一個(gè)標(biāo)志.如本實(shí)施例所闡釋的,可用在ATP存在下發(fā)光的ATP依賴性熒光酶來監(jiān)測(cè)ATP水平。產(chǎn)生的光的量與ATP存在量直接成比例.CHO-K1(中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢)細(xì)胞購(gòu)自ATCC(Manassas,VA)(細(xì)胞登錄號(hào)ATCCCCL61).在不透明96孔板中以lx104個(gè)細(xì)胞/孔接種細(xì)胞培養(yǎng)物,貼壁后,將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到低葡萄糖培養(yǎng)基(lg/1)中,孵育過夜.在低葡萄糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞具有降低的ATP含量.過夜培養(yǎng)后,使細(xì)胞接觸叔丁基過氧化物(lraM)2小時(shí)以誘導(dǎo)細(xì)胞應(yīng)激。過氧化物比單獨(dú)的葡萄糖使ATP水平降得更低,模擬了受損傷的細(xì)胞狀態(tài),接觸過氧化物后,將新鮮的低葡萄糖培養(yǎng)基加回到細(xì)胞中,用過氧化物攻擊后立即將細(xì)胞暴露于測(cè)試樣本,終濃度通常是l、10、和100mg/m1,細(xì)胞和測(cè)試樣本一起于37"C孵育4小時(shí)。該實(shí)施例中所用的測(cè)試樣本包括獲得自新鮮冷凍的菠菜漿液和脫水菠菜的樣本.將上述兩種菠菜原料提取獲得的樣本均包括粗濾菠菜提取物、納米過濾提取物、脫色提取物、巴氏滅菌提取物和最終產(chǎn)品.圖4和圖5報(bào)告了結(jié)果,圖4和圖5中,數(shù)據(jù)表示為與未處理對(duì)照細(xì)胞中的ATP水平相比得到的%對(duì)照ATP,因此,認(rèn)為ATP的增加代表樣本的積極作用.圖5的數(shù)據(jù)顯示,獲得自脫水菠菜的樣本趨于比獲得自新鮮冷凍菠菜的樣本具有更大的活性,本試驗(yàn)篩選在模擬受損細(xì)胞狀態(tài)的應(yīng)激條件(stressedomditkms)之后能夠恢復(fù)ATP水平的化合物,因此,受攻擊的細(xì)胞與測(cè)試樣本孵育之后,用購(gòu)自Promega(Madison,Wl)的Cell-TiterGio試劑按照生產(chǎn)商提供的說明書測(cè)定相對(duì)細(xì)胞ATP水平。簡(jiǎn)而言之,將細(xì)胞平衡到室溫,此時(shí)去除孔中的培養(yǎng)基,將稀釋的試劑加入到孔中,室溫孵育板15分鐘,在Wallach板讀數(shù)儀上讀取熒光(luminescence)計(jì)算各處理組的平均焚光,通過用每一個(gè)測(cè)試組的平均值除以未處理對(duì)照組的平均值來確定%未處理對(duì)照,未處理對(duì)照認(rèn)為是100%,因此任何大于100%的結(jié)果都認(rèn)為是細(xì)胞ATP水平凈增加的陽性結(jié)果,該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果報(bào)告于圖4和圖5中.實(shí)施例3:測(cè)定對(duì)氧化應(yīng)激的保護(hù)本實(shí)施例中描述的試驗(yàn)測(cè)定發(fā)生在線粒體中的氧化應(yīng)激。如上所討論的,線粒體用于產(chǎn)生能量(ATP分子)的生化反應(yīng)也會(huì)產(chǎn)生副產(chǎn)物即具有高度氧化性的超氧自由基,利用流式細(xì)胞術(shù),下文實(shí)施例通過監(jiān)測(cè)用各測(cè)試物質(zhì)處理后MitoSOX紅(MitoSOXRed)線粒體超氧化物指示劑(Invitrogenca快M36008)是一種被線粒體選擇性吸收的熒光染料.一旦進(jìn)入線粒體中,MitoSOX與超氧化物自由基反應(yīng)形成結(jié)合于線粒體核酸的熒光產(chǎn)物(激發(fā)/發(fā)射最大值-510/580nm)。較高的熒光讀數(shù)對(duì)應(yīng)于線粒體內(nèi)存在較高水平的超氧化物自由基。細(xì)胞培養(yǎng)每個(gè)樣本使用一個(gè)6《USU可同時(shí)準(zhǔn)備多個(gè)板,見表I中對(duì)板的描述。以1.5x106個(gè)細(xì)胞/孔的密度將THP-1單核細(xì)胞(ATCCca快T1B-202)接種于6孑U^L(含有2毫升/孔的RMPI1640培養(yǎng)基,補(bǔ)充有10%FBS)中,孵育1小時(shí)后處理。表I:板描述<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>處理谷胱甘肽單乙酯(Gluta他ione邁onoettiylester)(GMEE,100jiM終濃度)用作陽性對(duì)照,更具體地說,如下制備陽性對(duì)照將4mg谷胱甘肽單乙酯溶解在10ral培養(yǎng)基(補(bǔ)充有10%FBS的RMPI1640培養(yǎng)基〉中制備1.2mM儲(chǔ)液,然后將2.5ml儲(chǔ)液加入到7.5ml培養(yǎng)基中制備陽性對(duì)照工作溶液(300HM)。在板的每孔中加入lml陽性對(duì)照工作溶液,得到終處理濃度為100nM谷胱甘肽單乙酯。將lml培養(yǎng)基(補(bǔ)充有10%FBS的RMPI1640培養(yǎng)基)加入到板上的指定的孔中(每個(gè)對(duì)照1孔)制備陰性對(duì)照和正常對(duì)照。可如下制備測(cè)試樣本稱取lOOmg測(cè)試樣本放入15毫升一次性(disposable)離心管中,加入10ml去離子水,從而制備濃度為10mg/ml的樣本儲(chǔ)液。本實(shí)施例中,測(cè)試樣本是包含約50V。的菠茱提取物、約49%丁二醇和約1%防腐刑(例如Phenonip⑧或GermazideM)的脫水菠菜水溶性提取物。然后系列稀釋樣本儲(chǔ)液,得到濃度為300fig/ml的樣本工作溶液。然后在板剩余3個(gè)孔的每一個(gè)(三復(fù)孔)中加入lml樣本工作溶液,這樣各樣本孔中的測(cè)試樣本終濃度為100嗎/ml,然后,將既含有測(cè)試樣本孔又含有對(duì)照孔的板在37flC、5%C02中孵育3小時(shí)。攻擊孵育3小時(shí)后,通過引入攻擊溶液使分別含有測(cè)試樣本、陽性對(duì)照和陰性對(duì)照的孔中的細(xì)胞經(jīng)受氣化應(yīng)激,如下制備攻擊溶液852jil8.8MH202+4.15ml培養(yǎng)基(-1.5MH202)1ml1.5MH202+9ml培養(yǎng)基(=150mMH202)1ml150mM+30ml培養(yǎng)基(=5mMH202)將1ml5mM11202加入到板的所有孔中,但正常對(duì)照除外,正常對(duì)照孔中加入1ml培養(yǎng)基(補(bǔ)充有10%FBS的RMPI1640培養(yǎng)基)。然后,板在37°C、5%0)2中孵育3小時(shí),染色與攻擊液一起孵育以后,將所有孔中的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到流式細(xì)胞管中,100xg離心5分鐘,去除細(xì)胞上的培養(yǎng)基,通過各管中加入1mlMitoSOX(5pM)將細(xì)胞染色,通過使用13jiLDMSO/瓶溶解兩小瓶MitoSOX(50jig/瓶,Invitrogencat#M36008)得到5mM/瓶的溶液(mw=760克/摩爾),由此獲得MitoSOX染料。將兩小瓶中的內(nèi)容物均轉(zhuǎn)移到26ml(5nM)培養(yǎng)基中'將細(xì)胞與染料室溫黑暗孵育15分鐘。流式細(xì)胞術(shù)染色后,用流式細(xì)胞儀(例如Becton-DickinsonFACSCaliber)分析樣本,使用488imi激發(fā)激光和FL2588nm發(fā)射濾器。將數(shù)據(jù)線性化為曲線,該曲線由陰性對(duì)照和正常對(duì)照的響應(yīng)來限定(0%保護(hù)=未處理的/攻擊的陰性對(duì)照,100%保護(hù)-未處理的/未攻擊的正常對(duì)照)。在這些條件下,陽性對(duì)照(100nM谷胱甘肽甲酯(glutathionemethylester))提供針對(duì)氧化應(yīng)激的35%的保護(hù)。結(jié)果該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果證明,脫水菠菜的水溶性提取物提供了對(duì)氧化應(yīng)激的明顯保護(hù),即平均保護(hù)為91.3士0.9%。實(shí)施例4:8-OhdG修復(fù)的測(cè)定本實(shí)施例中,用過氧化物和紫外線攻擊細(xì)胞以增加8-OhdG(DNA氧化損傷的標(biāo)志物)水平。對(duì)測(cè)試樣本幫助細(xì)胞從攻擊中恢復(fù)的能力、恢復(fù)的時(shí)間長(zhǎng)度以及對(duì)DNA損傷的修復(fù)進(jìn)行測(cè)定。具體說,源自人真皮的HS27成纖維細(xì)胞和HEK001角化細(xì)胞購(gòu)自美國(guó)模式培養(yǎng)物保藏所(ATCC)(Manassas,VA),以4x104和8x104個(gè)細(xì)胞/孔的密度在12孔板中建立HS27和HEK001的共培養(yǎng)物。培養(yǎng)細(xì)胞過夜.過夜培養(yǎng)后,用含有0,S。/。胎牛血清的磷酸鹽緩沖鹽水替換培養(yǎng)基。然后,使細(xì)胞培養(yǎng)物同時(shí)暴露于太陽模擬器產(chǎn)生的全光諉紫外光(據(jù)UVB測(cè)量?jī)x檢測(cè)為25mJ/cm2)和H2<32(5mM)以產(chǎn)生8-OHdG損傷.暴露于紫外光和11202后,輕柔地清洗細(xì)胞,加入新鮮的完全培養(yǎng)基。然后用測(cè)試樣本處理細(xì)胞,所述測(cè)試樣本包括9個(gè)液體形式的菠菜水溶性提取物(用固1所示方法獲得)、VegebiosofSpinach(—種用蒸汽蒸儲(chǔ)的特殊方法獲得的菠菜葉水提取物,可購(gòu)自CEPSolabiaGroup(France)和例如AstonChemicals,Aylesbury,UK等供應(yīng)商)、從50mg/ml的儲(chǔ)液中制得的終濃度為l、10和100jig/ml的陽性對(duì)照.處理后,將細(xì)胞放回37"C培養(yǎng)箱中,孵育1-2小時(shí),孵育期后,清洗細(xì)胞并通過用胰蛋白酶消化(使用TryplE細(xì)胞解離試劑)并離心來收集,用Sigma公司的GenElute哺乳動(dòng)物基因組DNA微量提取試劑盒從細(xì)胞中分離并收集DNA。分離并收集DNA后,可用MolecularProbes(Invitrogen公司)的PicoGreendsDNA試刑盒測(cè)定各樣本中的DNA量,根據(jù)曰本衰老控制研究院的推薦,用核酸酶PI和堿性磷酸酶消化等量的DNA.用ELISA試劑盒檢測(cè)已消化的樣本。具體說,將各樣本的2ragDNA加入到獲自日本衰老控制研究院的8"OHdGELISA試劑盒(NikkenSEILCorp.,Haruoka,F(xiàn)ukuroi,靜岡,日本)中,絲測(cè)DNA樣本中的孓OhdG.本實(shí)施例的結(jié)果報(bào)告于下表II中.結(jié)果報(bào)告為與對(duì)照細(xì)胞中存在的8"OHdG百分比進(jìn)行比較得到的暴露于測(cè)試樣本的細(xì)胞中存在的8-OhdG百分比。因此,任何低于100%的值認(rèn)為是積極的結(jié)果,代表DNA損傷的修復(fù),VegebiosofSpinach(—種用蒸汽蒸飧的特殊方法獲得的菠菜葉^Ml取物,可購(gòu)自CEPSolabiaGroup(France),或Solabia的^"銷商,例如AstonChemicals(Aylesbury,UK))顯示能夠明顯修復(fù)DNA損傷,%對(duì)照值為63.9%.水溶性菠菜提取物1、6、7和8也顯示可明顯修復(fù)DNA損傷,%對(duì)照值分別為85.7%、82.1%、82.0%和80.9%。表II:8-OHdGDNA修復(fù)<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>上文描述了本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方式。可進(jìn)行很多改變和變化而不脫離如所附權(quán)利要求中定義的本發(fā)明的精神和本發(fā)明更廣的方面,應(yīng)根據(jù)專利法的原則包括等同原則來解釋本發(fā)明的精神和更廣的方面*權(quán)利要求中提到的任何單數(shù)形式的元素,例如"一"、"該"或"所迷"不應(yīng)理解為將該元素限定為單數(shù).權(quán)利要求1.修復(fù)DNA氧化損傷的方法,包括給予包含水溶性菠菜提取物和可接受的載體的組合物。2.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述氧化損傷將DNA中的至少一個(gè)烏噪呤^轉(zhuǎn)化為8-羥基脫氧鳥苷。3.如權(quán)利要求2所述的方法,其中所述8-羥基脫氧烏苷在至少一個(gè)DNA堿基對(duì)中造成4SJ^配對(duì)修飾,4.如權(quán)利要求3所述的方法,其中所述DNA是核DNA、線粒體DNA或兩者。5.如權(quán)利要求l所述的方法,其中通過包括以下步驟的方法獲得所述水溶性菠菜提取物形成菠菜的水性漿液,將漿液的液體成分與漿液的固體成分分離,使用熱水或蒸汽將漿液的液體成分與活性炭混合,將液體成分與活性炭分離,和微量過濾所述漿液的液體成分以收泉基本無色的水溶性菠菜提取物。6.如權(quán)利要求6所述的方法,還包括對(duì)所述基本無色的水溶性菠菜提取物進(jìn)行巴氏滅菌。7.如權(quán)利要求6所述的方法,其中所述方法還包括向所述基本無色的水溶性菠菜提取物中加入至少一種防腐劑,8.如權(quán)利要求1所述的方法,其中局部給予或口服給予所迷包含水溶性菠菜提取物的組合物。9.防止或減少DNA氧化損傷的方法,包括給予包含水溶性菠菜提取物的組合物。10.如權(quán)利要求11所述的方法,其中所迷DNA是核DNA、線粒體DNA或兩者.11.如權(quán)利要求9所述的方法,其中通過包括以下步猓的方法獲得所述水溶性菠菜提取物形成菠菜的水性漿液,將漿液的液體成分與漿液的固體成分分離,使用熱水或蒸汽將漿液的液體成分與活性炭混合,將液體成分與活性炭分離,和微量過濾所迷漿液的液體成分以收集基本無色的水溶性菱菜提取物.12.如權(quán)利要求11所述的方法,還包括對(duì)所述基本無色的水溶性菠菜提取物進(jìn)行巴氏滅菌。13.如權(quán)利要求12所述的方法,其中所述方法還包括向所述基本無色的水溶性菠菜提取物中加入至少一種防腐劑,14.如權(quán)利要求11所述的方法,其中局部給予或口服給予所述包含水溶性菠菜提取物的組合物.15.增加細(xì)胞中ATP產(chǎn)生或合成的方法,包括給予包含水溶性菠菜提取物的組合物。16.如權(quán)利要求15所述的方法,其中通過包括以下步驟的方法獲得所述水溶性菠菜提取物形成菠菜的水性漿液,將漿液的液體成分與漿液的固體成分分離,使用熱7]C或蒸汽將漿液的液體成分與活性炭混合,將液體成分與活性炭分離,和微量過濾所述漿液的液體成分以收集基本無色的水溶性菠菜提取物。17.如權(quán)利要求20所迷的方法,還包括對(duì)所迷基本無色的水溶性菠菜提取物進(jìn)行巴氏滅菌,18.如權(quán)利要求17所述的方法,其中給予所述包含水溶性菠菜提取物的組合物的方法選自局部給藥、口服給藥和胃腸外給藥。19.用于改善、維持或恢復(fù)線粒體功能以及修復(fù)DNA氧化損傷的組合物,其包含水溶性菠菜提取物、脂質(zhì)體、心磷脂和至少一種抗氧化劑,其中所述心磷脂包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中,所述至少一種抗氧化劑與心磷脂一起包4脂質(zhì)體的磷脂雙層中J7或含于脂質(zhì)體的水性中心內(nèi).20.如權(quán)利要求19所述的組合物,其中所迷脂質(zhì)體主要由磷脂酰M構(gòu)成.21.如權(quán)利要求20所述的組合物,其中所述心磷脂是四油酰心磷脂'22.如權(quán)利要求21所述的組合物,其中所述至少一種抗氧化劑是龍膽酸甲酯,其中龍膽酸甲酯與心磷脂一起包埋在脂質(zhì)體的磷脂雙層中.23.如權(quán)利要求22所述的組合物,其還包含第二抗氧化劑,其中所述第二抗氧化劑是l-肌肽,其中1-肌肽含于脂質(zhì)體的水性中心內(nèi)。24.如權(quán)利要求23所述的組合物,其還包含芥菜(蕓苜屬)種子提取物。25.如權(quán)利要求23所述的組合物,其還包含擬南芥提取物。26.如權(quán)利要求25所述的組合物,其中所述擬南芥提取物是8-氧代鳥嘌呤DNA糖基化酶,全文摘要公開了包含水溶性菠菜提取物的組合物,包含水溶性菠菜提取物、脂質(zhì)體、心磷脂和至少一種抗氧化劑的組合物,包含水溶性菠菜提取物、擬南芥提取物或芥菜(蕓苔屬)植物提取物、脂質(zhì)體、心磷脂和至少一種抗氧化劑的組合物,用于獲得此類組合物的方法,利用此類組合物來修復(fù)核DNA、線粒體DNA或這兩者的方法,防止或減少例如活性氧類或8-羥基脫氧鳥苷對(duì)DNA的損傷的方法,和/或修復(fù)或防止線粒體損傷和膜流動(dòng)性喪失的方法??删植拷o予、口服給予或胃腸外給予,例如注射給予本發(fā)明組合物。局部給藥時(shí),本發(fā)明組合物可包含添加劑,例如滲透增強(qiáng)劑、香料、防腐劑、保濕劑和化妝品佐劑。文檔編號(hào)A61K36/185GK101563095SQ200780045845公開日2009年10月21日申請(qǐng)日期2007年11月5日優(yōu)先權(quán)日2006年12月11日發(fā)明者D·J·法斯特,J·C·萊弗里特,J·V·西梅卡,R·M·約翰遜,S·R·米斯勒,T·拉申請(qǐng)人:捷通國(guó)際有限公司